JP3278629B2 - コンドロイチン硫酸の分離精製方法 - Google Patents
コンドロイチン硫酸の分離精製方法Info
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、コンドロイチン硫
酸を含む動物の結合組織、具体的には魚類（例えば、サ
ケ（鮭））頭部の鼻軟骨より抽出したコンドロイチン硫
酸含有水溶液を限外ろ過処理して連続的にコンドロイチ
ン硫酸の濃縮と精製を行ない、濃縮液からコンドロイチ
ン硫酸粉末を得るコンドロイチン硫酸の分離精製方法に
関する。本発明により分離精製されるコンドロイチン硫
酸は、医薬品原料、化粧品原料、食品添加物等の工業製
品に広く利用することができる。
酸を含む動物の結合組織、具体的には魚類（例えば、サ
ケ（鮭））頭部の鼻軟骨より抽出したコンドロイチン硫
酸含有水溶液を限外ろ過処理して連続的にコンドロイチ
ン硫酸の濃縮と精製を行ない、濃縮液からコンドロイチ
ン硫酸粉末を得るコンドロイチン硫酸の分離精製方法に
関する。本発明により分離精製されるコンドロイチン硫
酸は、医薬品原料、化粧品原料、食品添加物等の工業製
品に広く利用することができる。
【０００２】
【発明の背景】孵化、稚魚養殖、放流技術により、近年
大量に生産されるサケは、冷凍、加工技術の進歩と相俟
って、有用な蛋白源として広く食されている。サケは北
海道において約１５万トン／年と大量に漁獲され、その
加工残骸である頭部や内臓も大量に排出されているが、
その一部がフィッシュミールの原料として利用されてい
る以外殆ど利用されておらず、その有効利用が水産加工
業者から強く望まれている。
大量に生産されるサケは、冷凍、加工技術の進歩と相俟
って、有用な蛋白源として広く食されている。サケは北
海道において約１５万トン／年と大量に漁獲され、その
加工残骸である頭部や内臓も大量に排出されているが、
その一部がフィッシュミールの原料として利用されてい
る以外殆ど利用されておらず、その有効利用が水産加工
業者から強く望まれている。
【０００３】サケ頭部の鼻軟骨にはコンドロイチン硫酸
が含まれており、従来のコンドロイチン硫酸と比べ、硫
酸基分布が比較的ランダムな構造を持つ新規なコンドロ
イチン硫酸であることが、報告されているが（佐々木綾
子等，日本化学会北海道支部1998年夏期研究発表会講演
要旨集，２３頁）、これまで、工業的規模での分離精製
は全く行なわれていない。
が含まれており、従来のコンドロイチン硫酸と比べ、硫
酸基分布が比較的ランダムな構造を持つ新規なコンドロ
イチン硫酸であることが、報告されているが（佐々木綾
子等，日本化学会北海道支部1998年夏期研究発表会講演
要旨集，２３頁）、これまで、工業的規模での分離精製
は全く行なわれていない。
【０００４】コンドロイチン硫酸は、グルクロン酸とＮ
−アセチルガラクトサミンの二糖繰返し構造を基本と
し、そのＮ−アセチルガラクトサミンに硫酸基が結合し
た構造を有している。その分子量は原料及び調製法によ
り異なるが、数万〜３０万程度で、無味無臭の酸性多糖
類であり、現在使用されている主な原料であるサメのヒ
レや子牛の鼻中隔軟骨などから生産されたものが、その
生理活性、保水性、増粘性を生かして食品添加物や化粧
品等に利用されている。その生産量は年間約２００トン
程度であるが、サメのヒレは資源量が少ないこと、子牛
の鼻中隔軟骨は感染症（狂牛病）の危険性など原料の安
全性に問題があり、いずれも安価な原料を安定化して確
保することが困難な状況にある。
−アセチルガラクトサミンの二糖繰返し構造を基本と
し、そのＮ−アセチルガラクトサミンに硫酸基が結合し
た構造を有している。その分子量は原料及び調製法によ
り異なるが、数万〜３０万程度で、無味無臭の酸性多糖
類であり、現在使用されている主な原料であるサメのヒ
レや子牛の鼻中隔軟骨などから生産されたものが、その
生理活性、保水性、増粘性を生かして食品添加物や化粧
品等に利用されている。その生産量は年間約２００トン
程度であるが、サメのヒレは資源量が少ないこと、子牛
の鼻中隔軟骨は感染症（狂牛病）の危険性など原料の安
全性に問題があり、いずれも安価な原料を安定化して確
保することが困難な状況にある。
【０００５】従来、工業的に実施されている水溶液中の
コンドロイチン硫酸の分離精製法としては、アルコール
等の有機溶媒をコンドロイチン硫酸含有水溶液に添加す
ることによってコンドロイチン硫酸を沈析させる方法
（K. Meyer，E. Davidson et,al, Biochem. Biophys．A
cta., 21，506，1956）、第４級アンモニウムを添加し
て水難溶性の複合体として沈殿させ分離する方法（Meth
ods in Carbohydrate Chemistry, R．L．Whistler Acad
imic Press, New York 5, 38, 1965）及びその改良法
（特開平1-210401号）が開示されている。
コンドロイチン硫酸の分離精製法としては、アルコール
等の有機溶媒をコンドロイチン硫酸含有水溶液に添加す
ることによってコンドロイチン硫酸を沈析させる方法
（K. Meyer，E. Davidson et,al, Biochem. Biophys．A
cta., 21，506，1956）、第４級アンモニウムを添加し
て水難溶性の複合体として沈殿させ分離する方法（Meth
ods in Carbohydrate Chemistry, R．L．Whistler Acad
imic Press, New York 5, 38, 1965）及びその改良法
（特開平1-210401号）が開示されている。
【０００６】しかしながら、上記方法で高純度のコンド
ロイチン硫酸を大量に得るためには、沈殿の生成及び洗
浄に多量の有機溶媒（アルコール等）が必要であり、タ
ンパク質等の爽雑物が同時に沈殿するためイオン交換樹
脂などを使用する必要がある。また、第４級アンモニウ
ム塩を用いる方法では、アンモニウム塩の製品への混入
を防ぐための分離工程が必要となる。
ロイチン硫酸を大量に得るためには、沈殿の生成及び洗
浄に多量の有機溶媒（アルコール等）が必要であり、タ
ンパク質等の爽雑物が同時に沈殿するためイオン交換樹
脂などを使用する必要がある。また、第４級アンモニウ
ム塩を用いる方法では、アンモニウム塩の製品への混入
を防ぐための分離工程が必要となる。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】したがって、本発明の
目的は、従来廃棄物として処理されている魚類頭部の鼻
軟骨、特に加工場で残骸として大量に生じるサケ頭部
（鼻軟骨部分）を原料としてコンドロイチン硫酸を大量
に安価に供給し得る技術を確立することにある。さら
に、本発明の目的は、魚類頭部の鼻軟骨、特にサケの鼻
軟骨から抽出されるコンドロイチン硫酸含有水溶液か
ら、高純度の製品を効率よく得るコンドロイチン硫酸の
分離精製法を提供することにある。
目的は、従来廃棄物として処理されている魚類頭部の鼻
軟骨、特に加工場で残骸として大量に生じるサケ頭部
（鼻軟骨部分）を原料としてコンドロイチン硫酸を大量
に安価に供給し得る技術を確立することにある。さら
に、本発明の目的は、魚類頭部の鼻軟骨、特にサケの鼻
軟骨から抽出されるコンドロイチン硫酸含有水溶液か
ら、高純度の製品を効率よく得るコンドロイチン硫酸の
分離精製法を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、魚類（例
えば、サケ）の頭部から採取した鼻軟骨中に含まれるコ
ンドロイチン硫酸以外の成分（蛋白質など）を予め分解
処理して低分子化した、夾雑物とコンドロイチン硫酸を
含有する水溶液の濃縮精製について検討した。濃縮精製
法としては、径の規定された限外ろ過膜面の細孔により
高分子化合物から低分子化合物までの膜の細孔の大小に
より、種々の大きさの分子をこし分けることができ、食
品産業分野で乳製品、醤油、調味料等の製造工程におい
て実用化されている限外ろ過膜を用いる方法について鋭
意検討した。その結果、特定の分画分子量の限外ろ過膜
を用い、多段連続処理することにより、用途に対応した
種々の純度のコンドロイチン硫酸が効率よく得られるこ
とを確認し、本発明を完成するに至った。なお、本発明
の方法はサケの鼻軟骨を原料として確認されたものであ
るが、サケの鼻軟骨に限られず、コンドロイチン硫酸を
含む他の魚類の鼻軟骨中のコンドロイチン硫酸の分離精
製にも広く適用できるものである。
えば、サケ）の頭部から採取した鼻軟骨中に含まれるコ
ンドロイチン硫酸以外の成分（蛋白質など）を予め分解
処理して低分子化した、夾雑物とコンドロイチン硫酸を
含有する水溶液の濃縮精製について検討した。濃縮精製
法としては、径の規定された限外ろ過膜面の細孔により
高分子化合物から低分子化合物までの膜の細孔の大小に
より、種々の大きさの分子をこし分けることができ、食
品産業分野で乳製品、醤油、調味料等の製造工程におい
て実用化されている限外ろ過膜を用いる方法について鋭
意検討した。その結果、特定の分画分子量の限外ろ過膜
を用い、多段連続処理することにより、用途に対応した
種々の純度のコンドロイチン硫酸が効率よく得られるこ
とを確認し、本発明を完成するに至った。なお、本発明
の方法はサケの鼻軟骨を原料として確認されたものであ
るが、サケの鼻軟骨に限られず、コンドロイチン硫酸を
含む他の魚類の鼻軟骨中のコンドロイチン硫酸の分離精
製にも広く適用できるものである。
【０００９】 （１）サケの鼻軟骨をアルカリ処理した後、タンパク分
解酵素で処理してコンドロイチン硫酸を含有する水溶液
を得、これに水を添加して希釈し限外ろ過により濃縮す
る工程を複数回繰り返すことによりコンドロイチン硫酸
の精製を行なうことを特徴とするコンドロイチン硫酸の
分離精製方法。 （２）限外ろ過処理により得られたコンドロイチン硫酸
の濃縮液を乾燥することによりコンドロイチン硫酸粉末
を得る前記１に記載のコンドロイチン硫酸の分離精製方
法。 （３）限外ろ過処理により得られたコンドロイチン硫酸
の濃縮液にエタノールを添加して生じたコンドロイチン
硫酸の沈殿を取得する前記１または２に記載のコンドロ
イチン硫酸の分離精製方法。 （４）分画分子量２万の限外ろ過膜を用いて限外ろ過処
理を行なう前記１〜３のいずれかに記載のコンドロイチ
ン硫酸の分離精製方法。 （５）コンドロイチン硫酸を含有する水溶液をタンク内
にて水で希釈し、得られた希釈液を高圧ポンプを用いて
限外ろ過装置に送出し、得られた濃縮液を前記タンクに
循環することによりコンドロイチン硫酸の多段分離精製
操作を連続的に行なう前記１〜４のいずれかに記載のコ
ンドロイチン硫酸の分離精製方法。
解酵素で処理してコンドロイチン硫酸を含有する水溶液
を得、これに水を添加して希釈し限外ろ過により濃縮す
る工程を複数回繰り返すことによりコンドロイチン硫酸
の精製を行なうことを特徴とするコンドロイチン硫酸の
分離精製方法。 （２）限外ろ過処理により得られたコンドロイチン硫酸
の濃縮液を乾燥することによりコンドロイチン硫酸粉末
を得る前記１に記載のコンドロイチン硫酸の分離精製方
法。 （３）限外ろ過処理により得られたコンドロイチン硫酸
の濃縮液にエタノールを添加して生じたコンドロイチン
硫酸の沈殿を取得する前記１または２に記載のコンドロ
イチン硫酸の分離精製方法。 （４）分画分子量２万の限外ろ過膜を用いて限外ろ過処
理を行なう前記１〜３のいずれかに記載のコンドロイチ
ン硫酸の分離精製方法。 （５）コンドロイチン硫酸を含有する水溶液をタンク内
にて水で希釈し、得られた希釈液を高圧ポンプを用いて
限外ろ過装置に送出し、得られた濃縮液を前記タンクに
循環することによりコンドロイチン硫酸の多段分離精製
操作を連続的に行なう前記１〜４のいずれかに記載のコ
ンドロイチン硫酸の分離精製方法。
【００１０】
【発明の実施の態様】以下、本発明を詳細に説明する。 ［コンドロイチン硫酸抽出原料］ 本発明で使用する動物組織原料としては、コンドロイチ
ン硫酸を比較的豊富に含有する組織のうち、従来、加工
場などで大量に生じ、利用価値のないものとして処理さ
れている魚類、特にサケの頭部中の鼻軟骨が好ましく用
いられる。以下、サケの頭部（鼻軟骨）を例に挙げて説
明する。
ン硫酸を比較的豊富に含有する組織のうち、従来、加工
場などで大量に生じ、利用価値のないものとして処理さ
れている魚類、特にサケの頭部中の鼻軟骨が好ましく用
いられる。以下、サケの頭部（鼻軟骨）を例に挙げて説
明する。
【００１１】［前処理工程］サケ頭部より鼻軟骨を採取
し、これを細切（１〜５ｍｍ角程度）する。次いで、鼻
軟骨に含まれるタンパク質を分解するため、アルカリ処
理および、必要に応じて蛋白分解酵素処理する。すなわ
ち、まず、アルカリ水溶液（例えば、0.2〜0.4Ｎの苛性
ソーダ水溶液）中で３７℃乃至５０℃の温度で３０分〜
３時間処理した後、酢酸や塩酸等で中和し、不溶物をろ
過により除去する。次いで、ろ液のｐＨを中性付近に調
整して、蛋白分解酵素を添加して４０℃前後にて１時間
〜２時間処理した後、加熱により酵素を失活させる。冷
却後、遠心分離して、分解処理で生じた低分子化夾雑物
とコンドロイチン硫酸を含む上清を得る。この上清を次
工程の連続多段限外ろ過処理してコンドロイチン硫酸の
濃縮と精製を同時に行なう。
し、これを細切（１〜５ｍｍ角程度）する。次いで、鼻
軟骨に含まれるタンパク質を分解するため、アルカリ処
理および、必要に応じて蛋白分解酵素処理する。すなわ
ち、まず、アルカリ水溶液（例えば、0.2〜0.4Ｎの苛性
ソーダ水溶液）中で３７℃乃至５０℃の温度で３０分〜
３時間処理した後、酢酸や塩酸等で中和し、不溶物をろ
過により除去する。次いで、ろ液のｐＨを中性付近に調
整して、蛋白分解酵素を添加して４０℃前後にて１時間
〜２時間処理した後、加熱により酵素を失活させる。冷
却後、遠心分離して、分解処理で生じた低分子化夾雑物
とコンドロイチン硫酸を含む上清を得る。この上清を次
工程の連続多段限外ろ過処理してコンドロイチン硫酸の
濃縮と精製を同時に行なう。
【００１２】一実施例としてサケ頭部より鼻軟骨を採取
し、細切した鼻軟骨13.2ｋｇに最終濃度が0.2Ｎになる
ように0.4Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、３７℃で
２時間処理した後、酢酸で中和し、粗ろ過により不溶物
を除去した。ろ液のｐＨを7.0に調製し、プロテアーゼ
（天野製薬(株）製、商品名アマノＡ）を13.2ｇ(鼻軟骨
重量の0.1％）添加、３７℃で１時間処理し、８５℃で
５分間加熱失活させて、遠心分離後の上清２４リットル
（Ｌ）を得た。
し、細切した鼻軟骨13.2ｋｇに最終濃度が0.2Ｎになる
ように0.4Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、３７℃で
２時間処理した後、酢酸で中和し、粗ろ過により不溶物
を除去した。ろ液のｐＨを7.0に調製し、プロテアーゼ
（天野製薬(株）製、商品名アマノＡ）を13.2ｇ(鼻軟骨
重量の0.1％）添加、３７℃で１時間処理し、８５℃で
５分間加熱失活させて、遠心分離後の上清２４リットル
（Ｌ）を得た。
【００１３】［連続多段限外ろ過処理］図１に、連続多
段限外ろ過処理に使用した限外ろ過装置の概要を示す。
図中、１は限外ろ過膜であり、抽出液２をタンク４に収
納し高圧ポンプ５により限外ろ過膜１に圧送供給する。
この場合、上記で得られた上清の抽出液をそのまま限外
ろ過膜に供給すると、濃縮を目的とするコンドロイチン
硫酸が透過液側に抜けて歩留まりが悪くなることが判明
した。そこで、上清に対して水（水道水）３を添加した
ものを限外ろ過膜に供給する。水の添加量はコンドロイ
チン硫酸が透過液側に抜けなくなる量であるが、上清に
対して大旨同量添加すればよい。
段限外ろ過処理に使用した限外ろ過装置の概要を示す。
図中、１は限外ろ過膜であり、抽出液２をタンク４に収
納し高圧ポンプ５により限外ろ過膜１に圧送供給する。
この場合、上記で得られた上清の抽出液をそのまま限外
ろ過膜に供給すると、濃縮を目的とするコンドロイチン
硫酸が透過液側に抜けて歩留まりが悪くなることが判明
した。そこで、上清に対して水（水道水）３を添加した
ものを限外ろ過膜に供給する。水の添加量はコンドロイ
チン硫酸が透過液側に抜けなくなる量であるが、上清に
対して大旨同量添加すればよい。
【００１４】使用する限外ろ過膜は、原料液に含まれる
コンドロイチン硫酸の分子量を考慮して選定すればよい
が、サケ鼻軟骨に含まれるコンドロイチン硫酸の場合は
その分子量が２万以上（およそ３万〜３０万）であるこ
とから、分画分子量２万の限外ろ過膜を使用すればよ
い。供給液の平均操作圧は、使用する限外ろ過膜の耐圧
性と限外ろ過膜を通過する分画分子量以上の成分を含む
濃縮液（６）の排出量および分画分子量以下の分子およ
び水からなる透過液（７）の透過量のバランスをみて決
められるが、大旨２〜３ｋｇ／ｃｍ2である。
コンドロイチン硫酸の分子量を考慮して選定すればよい
が、サケ鼻軟骨に含まれるコンドロイチン硫酸の場合は
その分子量が２万以上（およそ３万〜３０万）であるこ
とから、分画分子量２万の限外ろ過膜を使用すればよ
い。供給液の平均操作圧は、使用する限外ろ過膜の耐圧
性と限外ろ過膜を通過する分画分子量以上の成分を含む
濃縮液（６）の排出量および分画分子量以下の分子およ
び水からなる透過液（７）の透過量のバランスをみて決
められるが、大旨２〜３ｋｇ／ｃｍ2である。
【００１５】上記抽出液２４リットル（Ｌ）（コンドロ
イチン硫酸濃度約１７ｇ／Ｌ，コンドロイチン酸純度約
３０％。なお、コンドロイチン硫酸の分析は液の一部を
採取し、ガランボス法（Galambos JT 1967 The reactio
n of carbazole with carbohydrates 1. Effect of bor
ate and sulfamate on the carbazole color of sugar
s. Anal. Biochem. 19:119-132）にてグルクロン酸の量
を測定してコンドロイチン硫酸濃度を定量した。純度は
固形物に対するコンドロイチン硫酸の割合，以下同様）
に対して、水２４Ｌを添加した処理液を、５０℃，平均
圧力２ｋｇ／ｃｍ2，１０Ｌ／分の条件で処理し、透過
液約37.0Ｌ（濃縮率4.4倍）を得た（第１ステージの濃
縮）。
イチン硫酸濃度約１７ｇ／Ｌ，コンドロイチン酸純度約
３０％。なお、コンドロイチン硫酸の分析は液の一部を
採取し、ガランボス法（Galambos JT 1967 The reactio
n of carbazole with carbohydrates 1. Effect of bor
ate and sulfamate on the carbazole color of sugar
s. Anal. Biochem. 19:119-132）にてグルクロン酸の量
を測定してコンドロイチン硫酸濃度を定量した。純度は
固形物に対するコンドロイチン硫酸の割合，以下同様）
に対して、水２４Ｌを添加した処理液を、５０℃，平均
圧力２ｋｇ／ｃｍ2，１０Ｌ／分の条件で処理し、透過
液約37.0Ｌ（濃縮率4.4倍）を得た（第１ステージの濃
縮）。
【００１６】濃縮液中のコンドロイチン硫酸濃度は31.8
ｇ／Ｌ（純度は63.5％）、透過液中のコンドロイチン硫
酸濃度は0.2ｇ／Ｌ（純度は1.2％）であった。次いで、
透過液量と同量の水道水を添加混合し、図１のタンク４
から処理液を供給して同様に第２ステージの限外ろ過処
理を行なった。透過液量は36.4Ｌで、濃縮液中のコンド
ロイチン硫酸濃度は32.5ｇ／Ｌ（純度は88.4％）、透過
液中にはコンドロイチン硫酸濃度は認められなかった。
ｇ／Ｌ（純度は63.5％）、透過液中のコンドロイチン硫
酸濃度は0.2ｇ／Ｌ（純度は1.2％）であった。次いで、
透過液量と同量の水道水を添加混合し、図１のタンク４
から処理液を供給して同様に第２ステージの限外ろ過処
理を行なった。透過液量は36.4Ｌで、濃縮液中のコンド
ロイチン硫酸濃度は32.5ｇ／Ｌ（純度は88.4％）、透過
液中にはコンドロイチン硫酸濃度は認められなかった。
【００１７】さらに、透過液量と同量の水道水を添加し
て、同様に第３ステージ目の限外ろ過処理を行なった。
透過液量は35.6Ｌで、濃縮液12.0Ｌを得た。濃縮液中の
コンドロイチン硫酸（ＣＳ）濃度は31.6ｇ／Ｌ（純度は
98.6％）、透過液中にはコンドロイチン硫酸は認められ
なかった。
て、同様に第３ステージ目の限外ろ過処理を行なった。
透過液量は35.6Ｌで、濃縮液12.0Ｌを得た。濃縮液中の
コンドロイチン硫酸（ＣＳ）濃度は31.6ｇ／Ｌ（純度は
98.6％）、透過液中にはコンドロイチン硫酸は認められ
なかった。
【００１８】以上の結果の流れを図２に示し、各ステー
ジの前後の抽出液と濃縮液の分析結果を表１に示す。
ジの前後の抽出液と濃縮液の分析結果を表１に示す。
【００１９】
【表１】 処理段階 ＣＳ濃度 ＣＳ純度 ｇ／ｌ ％ 処理前 抽出液 16.8 30.4 第１ステージ 濃縮液 31.8 63.5 透過液 0.2 1.2 第２ステージ 濃縮液 32.5 88.4 透過液 0 − 第３ステージ 濃縮液 31.6 98.6 透過液 0 −
【００２０】表１の膜処理前後の各処理液のコンドロイ
チン硫酸濃度と純度の分析結果から明らかなように、各
ステージで透過液へのコンドロイチン硫酸の流出が極め
て小さく、コンドロイチン硫酸の純度は、処理前の抽出
液で30.4％であったが、各ステージごとに上昇し、ステ
ージ３では９８％以上まで精製され、これによって得ら
れた濃縮液をそのまま乾燥するか、あるいは有機溶剤、
好ましくはエタノールを添加して生じたコンドロイチン
硫酸の沈殿を取得するかして高純度のコンドロイチン硫
酸を得ることができる。
チン硫酸濃度と純度の分析結果から明らかなように、各
ステージで透過液へのコンドロイチン硫酸の流出が極め
て小さく、コンドロイチン硫酸の純度は、処理前の抽出
液で30.4％であったが、各ステージごとに上昇し、ステ
ージ３では９８％以上まで精製され、これによって得ら
れた濃縮液をそのまま乾燥するか、あるいは有機溶剤、
好ましくはエタノールを添加して生じたコンドロイチン
硫酸の沈殿を取得するかして高純度のコンドロイチン硫
酸を得ることができる。
【００２１】
【発明の効果】本発明は、サケ頭部の鼻軟骨よりコンド
ロイチン硫酸をアルカリで抽出し、必要に応じてタンパ
ク分解酵素により抽出液中に共存するタンパク質を低分
子化して得られたコンドロイチン硫酸を含有する水溶液
から、限外ろ過処理を繰り返すことにより、共存するペ
プチド等の低分子爽雑物を水と共に除去し、水溶液の濃
縮と同時にコンドロイチン硫酸の精製を、大量かつ効率
的に行なう方法を提供したものである。水溶液を濃縮、
精製することにより、濃縮液をそのまま乾燥するか、あ
るいは従来に比べてはるかに少ないエタノール等の有機
溶媒を用いてコンドロイチン硫酸を沈殿させることによ
りコンドロイチン硫酸を得ることができる。さらにイオ
ン交換樹脂等を使用せずとも高純度のコンドロイチン硫
酸を得ることができ、コストの低減が図られる。
ロイチン硫酸をアルカリで抽出し、必要に応じてタンパ
ク分解酵素により抽出液中に共存するタンパク質を低分
子化して得られたコンドロイチン硫酸を含有する水溶液
から、限外ろ過処理を繰り返すことにより、共存するペ
プチド等の低分子爽雑物を水と共に除去し、水溶液の濃
縮と同時にコンドロイチン硫酸の精製を、大量かつ効率
的に行なう方法を提供したものである。水溶液を濃縮、
精製することにより、濃縮液をそのまま乾燥するか、あ
るいは従来に比べてはるかに少ないエタノール等の有機
溶媒を用いてコンドロイチン硫酸を沈殿させることによ
りコンドロイチン硫酸を得ることができる。さらにイオ
ン交換樹脂等を使用せずとも高純度のコンドロイチン硫
酸を得ることができ、コストの低減が図られる。
【００２２】サケは北海道において約１５万トン／年と
大量に漁獲され、その加工残骸である頭部（鼻軟骨約１
０％を含む）は約１万５千トン排出され、コンドロイチ
ン硫酸を大量に製造する上で、安価で非常に安定した原
料である。さらに、サケ頭部の鼻軟骨には他の動物組織
由来のものに見られるコンドロイチン硫酸以外の酸性多
糖体（ヒアルロン酸、デルマタン酸、ヘパラン硫酸な
ど）が殆ど共存していないことが確認されている。
大量に漁獲され、その加工残骸である頭部（鼻軟骨約１
０％を含む）は約１万５千トン排出され、コンドロイチ
ン硫酸を大量に製造する上で、安価で非常に安定した原
料である。さらに、サケ頭部の鼻軟骨には他の動物組織
由来のものに見られるコンドロイチン硫酸以外の酸性多
糖体（ヒアルロン酸、デルマタン酸、ヘパラン硫酸な
ど）が殆ど共存していないことが確認されている。
【００２３】本発明では、膜処理のステージを選択する
ことで、低純度（例えば、食品添加物用）から高純度
（医薬用）のコンドロイチン硫酸を任意に製造すること
が可能である。また、精製濃縮液にエタノールなどの有
機溶剤を添加する操作を行なわずに濃縮液をそのまま乾
燥することによって、コンドロイチン硫酸の粉末を得る
ことができる。
ことで、低純度（例えば、食品添加物用）から高純度
（医薬用）のコンドロイチン硫酸を任意に製造すること
が可能である。また、精製濃縮液にエタノールなどの有
機溶剤を添加する操作を行なわずに濃縮液をそのまま乾
燥することによって、コンドロイチン硫酸の粉末を得る
ことができる。
【図１】 限外ろ過装置の概要を示す。
【図２】 本発明の実施例のフロー図である。
１ 限外ろ過膜 ２ 抽出液 ３ 水 ４ タンク ５ 高圧ポンプ ６ 濃縮液 ７ 透過液 ８ 圧力計 ９ 熱交換器 １０ 流量計 １１ バルブ
Claims (5)
- 【請求項１】 サケの鼻軟骨をアルカリ処理した後、タ
ンパク分解酵素で処理してコンドロイチン硫酸を含有す
る水溶液を得、これに水を添加して希釈し限外ろ過によ
り濃縮する工程を複数回繰り返すことによりコンドロイ
チン硫酸の精製を行なうことを特徴とするコンドロイチ
ン硫酸の分離精製方法。 - 【請求項２】 限外ろ過処理により得られたコンドロイ
チン硫酸の濃縮液を乾燥することによりコンドロイチン
硫酸粉末を得る請求項１に記載のコンドロイチン硫酸の
分離精製方法。 - 【請求項３】 限外ろ過処理により得られたコンドロイ
チン硫酸の濃縮液にエタノールを添加して生じたコンド
ロイチン硫酸の沈殿を取得する請求項１または２に記載
のコンドロイチン硫酸の分離精製方法。 - 【請求項４】 分画分子量２万の限外ろ過膜を用いて限
外ろ過処理を行なう請求項１乃至３のいずれかに記載の
コンドロイチン硫酸の分離精製方法。 - 【請求項５】 コンドロイチン硫酸を含有する水溶液を
タンク内にて水で希釈し、得られた希釈液を高圧ポンプ
を用いて限外ろ過装置に送出し、得られた濃縮液を前記
タンクに循環することによりコンドロイチン硫酸の多段
分離精製操作を連続的に行なう請求項１乃至４のいずれ
かに記載のコンドロイチン硫酸の分離精製方法。
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