JP3131749B2 - 光学活性（＋）−４，４，４−トリフルオロ−３−（インド−ル−３−）酪酸およびその製造方法 - Google Patents
光学活性（＋）−４，４，４−トリフルオロ−３−（インド−ル−３−）酪酸およびその製造方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は光学活性（＋）−４，
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸
およびその製造方法に関する。更に詳細には、新規な光
学活性（＋）−４，４，４−トリフルオロ−３−（イン
ドール−３−）酪酸および該物質を、ラセミ体の４，
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸
から酵素を用いた立体選択的加水分解によって製造する
方法に関する。
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸
およびその製造方法に関する。更に詳細には、新規な光
学活性（＋）−４，４，４−トリフルオロ−３−（イン
ドール−３−）酪酸および該物質を、ラセミ体の４，
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸
から酵素を用いた立体選択的加水分解によって製造する
方法に関する。
【０００２】光学活性（＋）−４，４，４−トリフルオ
ロ−３−（インドール−３−）酪酸（以下光学活性
（＋）−ＴＦＩＢＡという）は、含フッ素β−インドー
ル酪酸類の化合物の一つであり、植物の発根作用および
根の伸長促進作用を有している。
ロ−３−（インドール−３−）酪酸（以下光学活性
（＋）−ＴＦＩＢＡという）は、含フッ素β−インドー
ル酪酸類の化合物の一つであり、植物の発根作用および
根の伸長促進作用を有している。
【０００３】このように、光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡ
は、植物ホルモンとしての作用を有する重要な物質であ
り、作物の増収、果樹栽培等の農業および園芸への幅広
い応用が可能である。
は、植物ホルモンとしての作用を有する重要な物質であ
り、作物の増収、果樹栽培等の農業および園芸への幅広
い応用が可能である。
【０００４】
【従来の技術】植物の生育を促進する作用物質、いわゆ
るオーキシンとしては、インドール−３−酢酸（ＩＡ
Ａ）およびその誘導体（インドール−３−酢酸メチル、
インドール−３−アセトアミド等）が古くから知られて
いる。
るオーキシンとしては、インドール−３−酢酸（ＩＡ
Ａ）およびその誘導体（インドール−３−酢酸メチル、
インドール−３−アセトアミド等）が古くから知られて
いる。
【０００５】又最近になって、含フッ素β−インドール
酪酸類の化合物が開発され、それらの化合物、即ち４，
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸
（以下「ＴＦＩＢＡ」という）、４，４，４−トリフル
オロ−２−ヒドロキシ−３−（インドール−３−）酪酸
（以下「ＴＦＩＨＢＡ」という）および４，４，４−ト
リフルオロ−３−（インドール−３−）ブチロニトリル
（以下「ＴＦＩＢＮ」という）にも強い植物の根の伸長
促進作用があることが知られている〔植物化学調節学
会、平成２年度大会、研究発表記録集第３１頁、農林水
産省発行〕。
酪酸類の化合物が開発され、それらの化合物、即ち４，
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸
（以下「ＴＦＩＢＡ」という）、４，４，４−トリフル
オロ−２−ヒドロキシ−３−（インドール−３−）酪酸
（以下「ＴＦＩＨＢＡ」という）および４，４，４−ト
リフルオロ−３−（インドール−３−）ブチロニトリル
（以下「ＴＦＩＢＮ」という）にも強い植物の根の伸長
促進作用があることが知られている〔植物化学調節学
会、平成２年度大会、研究発表記録集第３１頁、農林水
産省発行〕。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】従来のオーキシン活性
を有する植物調節剤のＩＡＡおよびその誘導体は、植物
の根の伸長作用が不十分であり、作物の増収等の農業分
野に応用することが出来なかった。一方、最近になって
開発された含フッ素β−インドール酪酸類の化合物、即
ちＴＦＩＢＡ、ＴＦＩＨＢＡおよびＴＦＩＢＮ等は、Ｉ
ＡＡおよびその誘導体に比較すれば、かなり強い植物の
根の伸長作用を有している。しかしながら、作物の増収
等の実用的な用途に利用するためには、より強い植物の
根の伸長作用を有する物質が望まれていた。
を有する植物調節剤のＩＡＡおよびその誘導体は、植物
の根の伸長作用が不十分であり、作物の増収等の農業分
野に応用することが出来なかった。一方、最近になって
開発された含フッ素β−インドール酪酸類の化合物、即
ちＴＦＩＢＡ、ＴＦＩＨＢＡおよびＴＦＩＢＮ等は、Ｉ
ＡＡおよびその誘導体に比較すれば、かなり強い植物の
根の伸長作用を有している。しかしながら、作物の増収
等の実用的な用途に利用するためには、より強い植物の
根の伸長作用を有する物質が望まれていた。
【０００７】
【課題を解決するための手段】そこで本発明者らは、よ
り強力な植物の発根促進ならびに根の伸長促進作用物質
を求めて鋭意検討した結果、光学活性体に着目するに至
り、数多くの各種の既知化合物の中からＴＦＩＢＡに着
目した。そしてＴＦＩＢＡについて、光学活性体の選択
的且つ高収率分離取得方法の新規開発及びその作用の確
認を試みた。その結果、光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡを
選択的にかつ高収率に分離取得することにはじめて成功
した。
り強力な植物の発根促進ならびに根の伸長促進作用物質
を求めて鋭意検討した結果、光学活性体に着目するに至
り、数多くの各種の既知化合物の中からＴＦＩＢＡに着
目した。そしてＴＦＩＢＡについて、光学活性体の選択
的且つ高収率分離取得方法の新規開発及びその作用の確
認を試みた。その結果、光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡを
選択的にかつ高収率に分離取得することにはじめて成功
した。
【０００８】すなわち、先ずラセミ体のＴＦＩＢＡとエ
チルアルコールを作用させ、ラセミ体ＴＦＩＢＡのエチ
ルエステルを合成し、次いでそのものにエステラーゼ活
性を有する酵素を作用させ、該エステルを不斉加水分解
させたところ、光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡを選択的に
得ることが出来、かつ得られた光学活性体は、強力な発
根促進作用及び根の伸長促進作用を有していることを知
り本発明を完成した。
チルアルコールを作用させ、ラセミ体ＴＦＩＢＡのエチ
ルエステルを合成し、次いでそのものにエステラーゼ活
性を有する酵素を作用させ、該エステルを不斉加水分解
させたところ、光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡを選択的に
得ることが出来、かつ得られた光学活性体は、強力な発
根促進作用及び根の伸長促進作用を有していることを知
り本発明を完成した。
【０００９】本発明の光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡを酵
素により不斉加水分解して取得するにあたり、初発原料
のラセミ体ＴＦＩＢＡは、次のようにして合成される。
素により不斉加水分解して取得するにあたり、初発原料
のラセミ体ＴＦＩＢＡは、次のようにして合成される。
【００１０】先ず、トリフルオロアセトアルデヒドエチ
ルヘミアセタール（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｌｄ
ｅｈｙｄｅ ｅｔｈｙｌ ｈｅｍｉａｃｅｔａｌ、以下
ＴＦＡＥという）とインドールとをカップリング反応を
させてインドール−トリフルオロエタノール（ｉｎｄｏ
ｌｅｔｒｉｆｌｕｏｒｏｅｔｈａｎｏｌ）を製造し
（Ｙ．Ｍａｋｅ， Ｈ．Ｋｉｍｏｔｏ， Ｓ．Ｆｕｊｉ
ｉ， Ｍ．Ｓｅｎｇａ ａｎｄ Ｌ．Ａ．Ｃｏｈｅｎ，
Ｊ． Ｆｌｕｏｒｉｎｅ Ｃｈｅｍ．，３（９）４７
−５９（１９８８））、次いでインドールトリフルオロ
エタノールをマロン酸ジエチルのナトリウム塩と有機溶
媒中でカップリングし、さらにアルカリ加水分解してラ
セミ体ＴＦＩＢＡを得る〔植物化学調節学会、平成２年
度大会、研究発表記録集第３１頁、農林水産省発行〕。
ルヘミアセタール（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｌｄ
ｅｈｙｄｅ ｅｔｈｙｌ ｈｅｍｉａｃｅｔａｌ、以下
ＴＦＡＥという）とインドールとをカップリング反応を
させてインドール−トリフルオロエタノール（ｉｎｄｏ
ｌｅｔｒｉｆｌｕｏｒｏｅｔｈａｎｏｌ）を製造し
（Ｙ．Ｍａｋｅ， Ｈ．Ｋｉｍｏｔｏ， Ｓ．Ｆｕｊｉ
ｉ， Ｍ．Ｓｅｎｇａ ａｎｄ Ｌ．Ａ．Ｃｏｈｅｎ，
Ｊ． Ｆｌｕｏｒｉｎｅ Ｃｈｅｍ．，３（９）４７
−５９（１９８８））、次いでインドールトリフルオロ
エタノールをマロン酸ジエチルのナトリウム塩と有機溶
媒中でカップリングし、さらにアルカリ加水分解してラ
セミ体ＴＦＩＢＡを得る〔植物化学調節学会、平成２年
度大会、研究発表記録集第３１頁、農林水産省発行〕。
【００１１】そして、ラセミ体ＴＦＩＢＡから光学活性
（＋）−ＴＦＩＢＡを得るには、次のように酵素による
不斉加水分解により行う。即ち、ラセミ体ＴＦＩＢＡと
エチルアルコール等のアルコールとを反応させてラセミ
体ＴＦＩＢＡのエチルエステル（ＴＦＥＥ）等のエステ
ルを合成した後、エステラーゼ活性を有する酵素を作用
させ、該エステルを選択的に加水分解させることによっ
て光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡを得る。
（＋）−ＴＦＩＢＡを得るには、次のように酵素による
不斉加水分解により行う。即ち、ラセミ体ＴＦＩＢＡと
エチルアルコール等のアルコールとを反応させてラセミ
体ＴＦＩＢＡのエチルエステル（ＴＦＥＥ）等のエステ
ルを合成した後、エステラーゼ活性を有する酵素を作用
させ、該エステルを選択的に加水分解させることによっ
て光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡを得る。
【００１２】上記したＴＦＥＥから光学活性（＋）−Ｔ
ＦＩＢＡを得るまでの化学反応を、下記する化４に示
す。
ＦＩＢＡを得るまでの化学反応を、下記する化４に示
す。
【００１３】
【化４】
【００１４】（なお、＊は不斉炭素を示す。）
【００１５】本発明に使用するエステラーゼ活性を有す
る酵素としてはリパーゼ及び／又はプロテアーゼが好ま
しく用いられ、リパーゼとしては、特にシュードモナス
（Pseudomonus）属の生産するリパーゼ、例えばリパー
ゼＰＳ（商品名：天野製薬製）、リパーゼＡＫ（商品
名：天野製薬製）やキャンディダ（Candida）属の生産
するリパーゼ、例えばリパーゼＡＹ（商品名：天野製薬
製）がより好ましく用いられ、プロテアーゼとしては、
アスペルギルス（Aspergillus）属の生産するプロテア
ーゼ、例えばプロテアーゼＭ（商品名：天野製薬製）が
より好ましく用いられる。用いる酵素は粗製品であって
も、精製されたものであってもよい。又、これらの酵素
を生産する菌体も利用できる。
る酵素としてはリパーゼ及び／又はプロテアーゼが好ま
しく用いられ、リパーゼとしては、特にシュードモナス
（Pseudomonus）属の生産するリパーゼ、例えばリパー
ゼＰＳ（商品名：天野製薬製）、リパーゼＡＫ（商品
名：天野製薬製）やキャンディダ（Candida）属の生産
するリパーゼ、例えばリパーゼＡＹ（商品名：天野製薬
製）がより好ましく用いられ、プロテアーゼとしては、
アスペルギルス（Aspergillus）属の生産するプロテア
ーゼ、例えばプロテアーゼＭ（商品名：天野製薬製）が
より好ましく用いられる。用いる酵素は粗製品であって
も、精製されたものであってもよい。又、これらの酵素
を生産する菌体も利用できる。
【００１６】エステラーゼ活性を有する酵素を用いる不
斉加水分解反応は、適当な緩衝液及び／又は有機溶媒の
存在下で行うと有利である。この場合の緩衝液として
は、使用する酵素の作用ｐＨに適した緩衝液が用いら
れ、例えば、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、グリシン緩衝
液等が用いられる。
斉加水分解反応は、適当な緩衝液及び／又は有機溶媒の
存在下で行うと有利である。この場合の緩衝液として
は、使用する酵素の作用ｐＨに適した緩衝液が用いら
れ、例えば、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、グリシン緩衝
液等が用いられる。
【００１７】又有機溶媒としては、酵素作用を阻害しな
ければ通常使用される有機溶媒を用いることが可能であ
り、特にｎ−ヘキサン、ｔ−ブチルアルコール、アセト
ン、ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）、ＤＭＦ（ジメ
チルホルムアミド）等を好適に用いることが出来る。
尚、酵素反応において緩衝液と共存下で使用する有機溶
媒の濃度は、緩衝液に対して０．５〜５０％であり、好
ましくは、５〜３０％である。
ければ通常使用される有機溶媒を用いることが可能であ
り、特にｎ−ヘキサン、ｔ−ブチルアルコール、アセト
ン、ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）、ＤＭＦ（ジメ
チルホルムアミド）等を好適に用いることが出来る。
尚、酵素反応において緩衝液と共存下で使用する有機溶
媒の濃度は、緩衝液に対して０．５〜５０％であり、好
ましくは、５〜３０％である。
【００１８】酵素反応の条件としては、反応温度は０〜
７０℃であり、好ましくは、４〜６０℃である。反応の
時間は１〜５００時間、好ましくは、２０〜２５０時間
である。
７０℃であり、好ましくは、４〜６０℃である。反応の
時間は１〜５００時間、好ましくは、２０〜２５０時間
である。
【００１９】こうして得られた光学活性（＋）−ＴＦＩ
ＢＡは、強力な根の伸長作用を有しており、このものを
植物生育調節剤として使用する場合、使用目的に応じて
そのまま使用するか、又はその効果を助長もしくは安定
化するために農薬で通常用いられる補助剤と混合して、
液剤、粉剤、粒剤、水和剤、フロアブル剤又は乳剤のよ
うな製剤形態にして使用する。
ＢＡは、強力な根の伸長作用を有しており、このものを
植物生育調節剤として使用する場合、使用目的に応じて
そのまま使用するか、又はその効果を助長もしくは安定
化するために農薬で通常用いられる補助剤と混合して、
液剤、粉剤、粒剤、水和剤、フロアブル剤又は乳剤のよ
うな製剤形態にして使用する。
【００２０】これらの製剤は実際の使用においては直接
そのまま使用するか、又は水で所定の濃度に希釈して使
用することもできる。
そのまま使用するか、又は水で所定の濃度に希釈して使
用することもできる。
【００２１】式（Ｉ）で示される化合物は通常１×１／
１０8〜１×１／１０2Ｍの濃度範囲で使用することが出
来るが、この範囲に限定されるものではない。
１０8〜１×１／１０2Ｍの濃度範囲で使用することが出
来るが、この範囲に限定されるものではない。
【００２２】以下、試験例、実施例により本発明をより
具体的に詳述するが、本発明はこれらに限定されるもの
ではない。
具体的に詳述するが、本発明はこれらに限定されるもの
ではない。
【００２３】
【００２４】〔試験例１〕後記する実施例１の（２）で
調製されたラセミ体ＴＦＩＢＡエチルエステルを酢酸緩
衝液（ｐＨ４．５）とｔ−ブチルアルコール（緩衝液に
対して１０％濃度）の共存下、３０℃、４０又は１０８
時間の条件で各種酵素剤、即ち、リパーゼＰＳ、リパー
ゼＡＫ、リパーゼＡＹ、パンクレアチンＦ（商品名、天
野製薬製、豚膵臓由来）、ホスホリパーゼＡ（商品名、
天野製薬製）、プロテアーゼＭ、セルラーゼＡ（商品
名、天野製薬製、アスペルギルス由来）およびセルラー
ゼＴ（商品名、天野製薬製、トリコデルマ由来）の８種
類を作用させ、光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡの生成を調
べた。その結果は、下記の表１に示される。
調製されたラセミ体ＴＦＩＢＡエチルエステルを酢酸緩
衝液（ｐＨ４．５）とｔ−ブチルアルコール（緩衝液に
対して１０％濃度）の共存下、３０℃、４０又は１０８
時間の条件で各種酵素剤、即ち、リパーゼＰＳ、リパー
ゼＡＫ、リパーゼＡＹ、パンクレアチンＦ（商品名、天
野製薬製、豚膵臓由来）、ホスホリパーゼＡ（商品名、
天野製薬製）、プロテアーゼＭ、セルラーゼＡ（商品
名、天野製薬製、アスペルギルス由来）およびセルラー
ゼＴ（商品名、天野製薬製、トリコデルマ由来）の８種
類を作用させ、光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡの生成を調
べた。その結果は、下記の表１に示される。
【００２５】
【表１】
【００２６】上記結果から明らかなように、８種類の加
水分解酵素のうちでリパーゼＰＳ、リパーゼＡＫ、リパ
ーゼＡＹおよびプロテアーゼＭの４種類が光学活性
（＋）−ＴＦＩＢＡを生成せしめることが判り、そして
４種類の酵素のうちでは、リパーゼＡＫを用いた場合、
光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡの収率が最も高いことが判
った。
水分解酵素のうちでリパーゼＰＳ、リパーゼＡＫ、リパ
ーゼＡＹおよびプロテアーゼＭの４種類が光学活性
（＋）−ＴＦＩＢＡを生成せしめることが判り、そして
４種類の酵素のうちでは、リパーゼＡＫを用いた場合、
光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡの収率が最も高いことが判
った。
【００２７】〔試験例２〕後記する実施例１の（２）で
調製されたラセミ体ＴＦＩＢＡエチルエステルにリパー
ゼＡＫをリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）と各種溶媒（緩衝
液に対し１０％濃度使用）、即ちｎ−ヘキサン、ｔ−ブ
チルアルコール、アセトン、ＤＭＳＯおよびＤＭＦの５
種類のそれぞれの存在下、３０℃、４０〜１３２時間、
作用させて光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡの生成を調べ
た。その結果は、下記の表２に示される。
調製されたラセミ体ＴＦＩＢＡエチルエステルにリパー
ゼＡＫをリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）と各種溶媒（緩衝
液に対し１０％濃度使用）、即ちｎ−ヘキサン、ｔ−ブ
チルアルコール、アセトン、ＤＭＳＯおよびＤＭＦの５
種類のそれぞれの存在下、３０℃、４０〜１３２時間、
作用させて光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡの生成を調べ
た。その結果は、下記の表２に示される。
【００２８】
【表２】
【００２９】上記結果から明らかなように、いずれの溶
媒を用いてもリパーゼＡＫは、光学活性（＋）−ＴＦＩ
ＢＡを収率良く生成するがｔ−ブチルアルコールを溶媒
として用いる場合、短時間で反応を終えることが出来る
ので有利である。
媒を用いてもリパーゼＡＫは、光学活性（＋）−ＴＦＩ
ＢＡを収率良く生成するがｔ−ブチルアルコールを溶媒
として用いる場合、短時間で反応を終えることが出来る
ので有利である。
【００３０】〔試験例３〕後記する実施例１の（２）で
調製されたラセミ体ＴＦＩＢＡエチルエステルにリパー
ゼＡＫを各種緩衝液、即ち、酢酸緩衝液（ｐＨ４．
５）、リン酸緩衝液（ｐＨ７．０）およびグリシン緩衝
液（ｐＨ８．０）と溶媒のｔ−ブチルアルコール（緩衝
液に対し１０％濃度使用）との組み合わせの存在下で、
４〜５５℃、３６〜２３０時間作用させて光学活性
（＋）−ＴＦＩＢＡの生成を調べた。その結果は、下記
の表３に示される。
調製されたラセミ体ＴＦＩＢＡエチルエステルにリパー
ゼＡＫを各種緩衝液、即ち、酢酸緩衝液（ｐＨ４．
５）、リン酸緩衝液（ｐＨ７．０）およびグリシン緩衝
液（ｐＨ８．０）と溶媒のｔ−ブチルアルコール（緩衝
液に対し１０％濃度使用）との組み合わせの存在下で、
４〜５５℃、３６〜２３０時間作用させて光学活性
（＋）−ＴＦＩＢＡの生成を調べた。その結果は、下記
の表３に示される。
【００３１】
【表３】
【００３２】上記結果から明らかなように、リパーゼＡ
Ｋによる不斉分解の場合、溶媒のｔ−ブチルアルコール
といずれの緩衝液を組み合わせても光学活性（＋）−Ｔ
ＦＩＢＡを収率良く生成することができる。しかし、酢
酸緩衝液と組み合わせた場合に比較的低温下でも反応時
間が短時間ですみ、しかも、ほぼ１００％のｅｅで光学
活性（＋）−ＴＦＩＢＡを得ることができるので有利で
あることが判る。
Ｋによる不斉分解の場合、溶媒のｔ−ブチルアルコール
といずれの緩衝液を組み合わせても光学活性（＋）−Ｔ
ＦＩＢＡを収率良く生成することができる。しかし、酢
酸緩衝液と組み合わせた場合に比較的低温下でも反応時
間が短時間ですみ、しかも、ほぼ１００％のｅｅで光学
活性（＋）−ＴＦＩＢＡを得ることができるので有利で
あることが判る。
【００３３】〔試験例４〕ブラックマッペを用いた生物
試験
試験
【００３４】ブラックマッペを水道水で充分洗った後蒸
留水ですすぎ、シャーレ中の蒸留水を充分湿らせた脱脂
綿上に播き、２５℃で約２４時間置く。少し根が出た状
態の種子１０個を直径６ｃｍのシャーレに、光学活性
（＋）−、光学活性（−）−およびラセミ体のそれぞれ
のＴＦＩＢＡの１／１０4（Ｍ）の濃度の薬液４ｍｌを
染め込ませたろ紙（直径５．５ｃｍ）上に置床し、暗黒
下３日間インキュベートした後、根長を測定した。その
結果は、下記の表４に示される。
留水ですすぎ、シャーレ中の蒸留水を充分湿らせた脱脂
綿上に播き、２５℃で約２４時間置く。少し根が出た状
態の種子１０個を直径６ｃｍのシャーレに、光学活性
（＋）−、光学活性（−）−およびラセミ体のそれぞれ
のＴＦＩＢＡの１／１０4（Ｍ）の濃度の薬液４ｍｌを
染め込ませたろ紙（直径５．５ｃｍ）上に置床し、暗黒
下３日間インキュベートした後、根長を測定した。その
結果は、下記の表４に示される。
【００３５】
【表４】
【００３６】上記結果から明らかなように、光学活性
（＋）−ＴＦＩＢＡは、ラセミ体ＴＦＩＢＡに比べ約
２．４倍の根の伸長作用があることが判る。そしてこの
ことは、光学活性体を植物調節剤として使用する場合、
ラセミ体の半分以下の使用で同等の効果を有することを
示すものである。それ故に、光学活性体は、環境汚染の
より少ない植物調節剤として期待でき得る。
（＋）−ＴＦＩＢＡは、ラセミ体ＴＦＩＢＡに比べ約
２．４倍の根の伸長作用があることが判る。そしてこの
ことは、光学活性体を植物調節剤として使用する場合、
ラセミ体の半分以下の使用で同等の効果を有することを
示すものである。それ故に、光学活性体は、環境汚染の
より少ない植物調節剤として期待でき得る。
【００３７】
【００３８】〔実施例１〕
【００３９】（１）ラセミ体ＴＦＩＢＡ（４，４，４−
トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸）の製造
トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸）の製造
【００４０】マロン酸ジエチル（１６．０ｇ，１００ｍ
ｍｏｌ）のトルエン５０ｍｌ溶液に金属ナトリウム
（２．３ｇ）を加え、１．５時間加熱還流した後、２，
２，２−トリフルオロ−１−インドール−３−）エタノ
ール（４．３ｇ，２０ｍｍｏｌ）を加える。再び４時間
加熱還流した後注意深く水を加え、酢酸エチルで３回抽
出する。酢酸エチル層を水および飽和食塩水で洗い、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した後減圧濃縮し、粗ジカルボ
ン酸ジエステルのトルエン溶液を得る。この溶液をヘキ
サン−アセトニトリルで分配した後、アセトニトリル層
を減圧濃縮する。得られた粗ジエステルをメタノール１
００ｍｌに溶解した後炭酸カリウム（２５．７ｇ）の水
溶液（８０ｍｌ）を加え、９０時間加熱還流する。
ｍｏｌ）のトルエン５０ｍｌ溶液に金属ナトリウム
（２．３ｇ）を加え、１．５時間加熱還流した後、２，
２，２−トリフルオロ−１−インドール−３−）エタノ
ール（４．３ｇ，２０ｍｍｏｌ）を加える。再び４時間
加熱還流した後注意深く水を加え、酢酸エチルで３回抽
出する。酢酸エチル層を水および飽和食塩水で洗い、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した後減圧濃縮し、粗ジカルボ
ン酸ジエステルのトルエン溶液を得る。この溶液をヘキ
サン−アセトニトリルで分配した後、アセトニトリル層
を減圧濃縮する。得られた粗ジエステルをメタノール１
００ｍｌに溶解した後炭酸カリウム（２５．７ｇ）の水
溶液（８０ｍｌ）を加え、９０時間加熱還流する。
【００４１】塩酸で中和した後減圧濃縮してメタノール
を除去し、４Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液でアルカリ性
にした後酢酸エチルで抽出する。水層を塩酸で酸性にし
た後酢酸エチル抽出し、酢酸エチル層を水、飽和食塩水
で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥する。減圧濃縮後
得られた粗カルボン酸をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーにより精製してラセミ体ＴＦＩＢＡ（４，４，４
−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸）
（４．２ｇ，８２．０％）を得た。その理化学的性質を
下記の表５に示す。
を除去し、４Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液でアルカリ性
にした後酢酸エチルで抽出する。水層を塩酸で酸性にし
た後酢酸エチル抽出し、酢酸エチル層を水、飽和食塩水
で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥する。減圧濃縮後
得られた粗カルボン酸をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーにより精製してラセミ体ＴＦＩＢＡ（４，４，４
−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸）
（４．２ｇ，８２．０％）を得た。その理化学的性質を
下記の表５に示す。
【００４２】
【表５】
【００４３】（２）ラセミ体ＴＦＩＢＡエチルエステル
（４，４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３
−）酪酸エチルエステル）の製造
（４，４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３
−）酪酸エチルエステル）の製造
【００４４】４，４，４−トリフルオロ−３−（インド
ール−３−）酪酸（５．１４ｇ，２０ｍｍｏｌ）のエタ
ノール（９９．８％，３００ｍｌ）溶液に、乾燥塩化水
素を飽和するまで、吹き込み吸収させた。１２時間加熱
還流させたのち、溶媒等を減圧下に留去することによ
り、全体量が３０ｍｌになるまで濃縮した。この液を氷
水（２００ｍｌ）中にそそぎ、冷時に５Ｎ 水酸化ナト
リウム水溶液で中和した。酢酸エチル（２００ｍｌ）で
２回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧
下に除いた。残留物をｎ−ヘキサンから再結晶して、無
色柱状晶（ｍｐ．５７℃）のラセミ体ＴＦＩＢＡエチル
エステル（５．４７ｇ，収率９５．９％）を得た。その
理化学的性質を下記の表６に示す。
ール−３−）酪酸（５．１４ｇ，２０ｍｍｏｌ）のエタ
ノール（９９．８％，３００ｍｌ）溶液に、乾燥塩化水
素を飽和するまで、吹き込み吸収させた。１２時間加熱
還流させたのち、溶媒等を減圧下に留去することによ
り、全体量が３０ｍｌになるまで濃縮した。この液を氷
水（２００ｍｌ）中にそそぎ、冷時に５Ｎ 水酸化ナト
リウム水溶液で中和した。酢酸エチル（２００ｍｌ）で
２回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧
下に除いた。残留物をｎ−ヘキサンから再結晶して、無
色柱状晶（ｍｐ．５７℃）のラセミ体ＴＦＩＢＡエチル
エステル（５．４７ｇ，収率９５．９％）を得た。その
理化学的性質を下記の表６に示す。
【００４５】
【表６】
【００４６】（３）光学活性（＋）−ＴＦＩＢＡ（４，
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪
酸）の製造
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪
酸）の製造
【００４７】ジャーファーメンター（ＭＢＦ，東京理化
器械製）に、酢酸緩衝液（４５０ｍｌ）（０．２Ｎ Ｃ
Ｈ3ＣＯＯＨ 水溶液（２０５ｍｌ），０．２Ｎ ＣＨ3
ＣＯＯＮａ水溶液（４５ｍｌ）；ｐＨ４．０：使用時に
２倍希釈）、補助溶媒（ｔ−ＢｕＯＨ：５０ｍｌ）、リ
パーゼＡＫ（１５ｇ）を入れ、３０℃で２０分間攪拌し
た。この懸濁液に、ラセミ体ＴＦＩＢＡエチルエステル
（０．５ｇ）を加え３０℃で更に攪拌した。６０時間後
反応を停止し、１Ｎ 塩酸水溶液でｐＨ２．０に調製の
ち、酢酸エチル（５００ｍｌ）で３回抽出した。抽出液
を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去した。残
留物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、光学活
性（＋）−ＴＦＩＢＡを収率９２％で得た。光学純度９
９％ｅｅ。又、同時に光学活性（−）−ＴＦＩＢＡエチ
ルエステル（４，４，４−トリフルオロ−３−（インド
ール−３−）酪酸エチルエステル）をも収率９３（％）
で得た。光学純度９９％ｅｅ。これらの理化学的性質を
下記の表７に示す。
器械製）に、酢酸緩衝液（４５０ｍｌ）（０．２Ｎ Ｃ
Ｈ3ＣＯＯＨ 水溶液（２０５ｍｌ），０．２Ｎ ＣＨ3
ＣＯＯＮａ水溶液（４５ｍｌ）；ｐＨ４．０：使用時に
２倍希釈）、補助溶媒（ｔ−ＢｕＯＨ：５０ｍｌ）、リ
パーゼＡＫ（１５ｇ）を入れ、３０℃で２０分間攪拌し
た。この懸濁液に、ラセミ体ＴＦＩＢＡエチルエステル
（０．５ｇ）を加え３０℃で更に攪拌した。６０時間後
反応を停止し、１Ｎ 塩酸水溶液でｐＨ２．０に調製の
ち、酢酸エチル（５００ｍｌ）で３回抽出した。抽出液
を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去した。残
留物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、光学活
性（＋）−ＴＦＩＢＡを収率９２％で得た。光学純度９
９％ｅｅ。又、同時に光学活性（−）−ＴＦＩＢＡエチ
ルエステル（４，４，４−トリフルオロ−３−（インド
ール−３−）酪酸エチルエステル）をも収率９３（％）
で得た。光学純度９９％ｅｅ。これらの理化学的性質を
下記の表７に示す。
【００４８】
【表７】
【００４９】（４）光学活性（−）−ＴＦＩＢＡ（４，
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪
酸）の製造：
４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪
酸）の製造：
【００５０】光学活性（−）−ＴＦＩＢＡエチルエステ
ル（２８．５ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）のメタノール（８
９．８％，３ｍｌ）溶液に炭酸カリウム（６８．９ｍ
ｇ，０．５ｍｍｏｌ）水溶液３ｍｌを加えた。７０℃で
３時間加熱還流した後、メタノ−ルを減圧下に除き、酢
酸エチルで３回抽出した。水層を、４Ｎ 塩酸で酸性に
した後、酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル層を水、飽和
食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧
濃縮後。粗カルボン酸をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーにより精製して光学活性（−）−ＴＦＩＢＡ（２
０．５ｍｇ，８０％）を得た。光学純度９７％ｅｅ。そ
の理化学的性質を下記の表８に示す。
ル（２８．５ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）のメタノール（８
９．８％，３ｍｌ）溶液に炭酸カリウム（６８．９ｍ
ｇ，０．５ｍｍｏｌ）水溶液３ｍｌを加えた。７０℃で
３時間加熱還流した後、メタノ−ルを減圧下に除き、酢
酸エチルで３回抽出した。水層を、４Ｎ 塩酸で酸性に
した後、酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル層を水、飽和
食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧
濃縮後。粗カルボン酸をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーにより精製して光学活性（−）−ＴＦＩＢＡ（２
０．５ｍｇ，８０％）を得た。光学純度９７％ｅｅ。そ
の理化学的性質を下記の表８に示す。
【００５１】
【表８】
【００５２】
【発明の効果】本発明にしたがって酵素を用いて不斉加
水分解を行うことによってはじめて光学活性（＋）−Ｔ
ＦＩＢＡを製造するのに成功したものである。この光学
活性体は、非常に強力な発根促進作用及び根の伸長促進
作用を有しており、植物生長調節剤等農薬の技術分野で
有用であるのみならず、カルス栽培等植物バイオテクノ
ロジーの技術分野でもその有用性が大いに期待される。
水分解を行うことによってはじめて光学活性（＋）−Ｔ
ＦＩＢＡを製造するのに成功したものである。この光学
活性体は、非常に強力な発根促進作用及び根の伸長促進
作用を有しており、植物生長調節剤等農薬の技術分野で
有用であるのみならず、カルス栽培等植物バイオテクノ
ロジーの技術分野でもその有用性が大いに期待される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 広 瀬 芳 彦 愛知県西春日井郡西春町大字九之坪 西 城屋敷51 天野製薬株式会社 中央研究 所内 (72)発明者 佐 々 木 征 治 愛知県西春日井郡西春町大字九之坪 西 城屋敷51 天野製薬株式会社 中央研究 所内 (72)発明者 間 瀬 民 生 愛知県西春日井郡西春町大字九之坪 西 城屋敷51 天野製薬株式会社 中央研究 所内 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12P 41/00 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (4)
- 【請求項１】 下記の化１で示される 【化１】 （式中、＊は不斉炭素原子を示す） 式（Ｉ）の化合物、光学活性（＋）−４，４，４−トリ
フルオロ−３−（インドール−３−）酪酸。 - 【請求項２】 下記の化２に示される 【化２】 式（II）の化合物にエチルアルコールを作用させてエス
テルを合成した後、該エステルにエステラーゼ活性を有
する酵素を作用させて下記の化３で示される 【化３】 （式中、＊は不斉炭素原子を示す） 式（Ｉ）の光学活性体を生成せしめ、これを採取するこ
とを特徴とする光学活性（＋）−４，４，４−トリフル
オロ−３−（インドール−３−）酪酸の製造方法。 - 【請求項３】 酵素による不斉加水分解を有機溶媒及び
／又は緩衝液の存在下で行うことを特徴とする請求項２
に記載の製造方法。 - 【請求項４】 エステラーゼ活性を有する酵素としてリ
パーゼ及び／又はプロテアーゼを使用することを特徴と
する請求項２又は請求項３に記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04231500A JP3131749B2 (ja) | 1992-08-07 | 1992-08-07 | 光学活性（＋）−４，４，４−トリフルオロ−３−（インド−ル−３−）酪酸およびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04231500A JP3131749B2 (ja) | 1992-08-07 | 1992-08-07 | 光学活性（＋）−４，４，４−トリフルオロ−３−（インド−ル−３−）酪酸およびその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0656774A JPH0656774A (ja) | 1994-03-01 |
| JP3131749B2 true JP3131749B2 (ja) | 2001-02-05 |
Family
ID=16924471
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP04231500A Expired - Lifetime JP3131749B2 (ja) | 1992-08-07 | 1992-08-07 | 光学活性（＋）−４，４，４−トリフルオロ−３−（インド−ル−３−）酪酸およびその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3131749B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7707869B2 (en) | 2004-04-22 | 2010-05-04 | Micronas Gmbh | FET-based gas sensor |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2666890B2 (ja) * | 1995-06-07 | 1997-10-22 | 工業技術院長 | 光学活性（＋）−４，４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸の製造方法 |
| CN1058960C (zh) * | 1996-09-12 | 2000-11-29 | 汪国炽 | 新型植物生长调节剂三氟吲哚丁酸或其衍生物的合成 |
-
1992
- 1992-08-07 JP JP04231500A patent/JP3131749B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7707869B2 (en) | 2004-04-22 | 2010-05-04 | Micronas Gmbh | FET-based gas sensor |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0656774A (ja) | 1994-03-01 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |