JP3072353B2 - 胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品 - Google Patents
胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ヘリコバクター ピロ
リで免疫した鶏の卵から調製した該抗原に特異的な抗体
を有効成分とする胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品
に関する。
リで免疫した鶏の卵から調製した該抗原に特異的な抗体
を有効成分とする胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品
に関する。
【０００２】
【従来の技術】１９８３年ＭｅｒｓｈａｌｌとＷａｒｒ
ｅｎが胃炎，胃潰瘍患者の胃生検材料からカンピロバク
ター ピロリが高率に検出されること（Ｗａｒｒｅｎ
ＪＲ，Ｍａｒｓｈａｌｌ ＢＪ：Ｌａｎｃｅｔ， １２
７３〜１２７５，１９８３）を報告して以来、胃炎，胃
または十二指腸潰瘍の発症にカンピロバクター ピロリ
が関わっていることが次第に明らかとなってきた。尚、
カンピロバクターピロリは１９８９年Ｇｏｏｄｗｉｎら
により食中毒菌であるカンピロバクタージェジュニやカ
ンピロバクター コリとは、別属であることが証明さ
れ、新しい属名を設けヘリコバクター ピロリ（Ｈｅｌ
ｉｏｃｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）と分類された。以
下、カンピロバクター ピロリは全てヘリコバクター
ピロリと読みかえる。胃潰瘍，十二指腸潰瘍の治療剤と
しては胃酸分泌を抑制するＨ２ブロッカーが主流であり
治癒効果は高いが、一旦治癒しても再発することの多い
ことが本疾患の特徴とされている。再発率の高い理由と
しては、Ｈ２ブロッカーを投与しても、ヘリコバクター
ピロリが除去されないことによると考えられている（Ｍ
ｃＬｅａｎ ＡＪ， ｅｔ ａｌ：Ｌａｎｃｅｔ，ｉ
ｉ：５２５〜５２６， １９８４）。また、胃または十
二指腸へのヘリコバクター ピロリの感染に対し、抗生
物質を用いる治療も試みられているが、評価は一定でな
い。ー方、食中毒菌，例えばサルモネラ菌やカンピロバ
クター菌の少ない食鳥肉を製造するための、食鳥の食中
毒菌保菌抑制材料及び食鳥肉の食中毒菌抑制方法（特開
平１−９３５３９）が提唱されている。しかし、該特許
には、カンピロバクター ジェジュニが食中毒菌として
例示され、食鳥の食中毒抑制材料として該菌体に対する
抗体を用いることが記載されているのみで、胃炎，胃ま
たは十二指腸潰瘍との関連、あるいはその予防方法等を
示唆する記載は全くない。
ｅｎが胃炎，胃潰瘍患者の胃生検材料からカンピロバク
ター ピロリが高率に検出されること（Ｗａｒｒｅｎ
ＪＲ，Ｍａｒｓｈａｌｌ ＢＪ：Ｌａｎｃｅｔ， １２
７３〜１２７５，１９８３）を報告して以来、胃炎，胃
または十二指腸潰瘍の発症にカンピロバクター ピロリ
が関わっていることが次第に明らかとなってきた。尚、
カンピロバクターピロリは１９８９年Ｇｏｏｄｗｉｎら
により食中毒菌であるカンピロバクタージェジュニやカ
ンピロバクター コリとは、別属であることが証明さ
れ、新しい属名を設けヘリコバクター ピロリ（Ｈｅｌ
ｉｏｃｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）と分類された。以
下、カンピロバクター ピロリは全てヘリコバクター
ピロリと読みかえる。胃潰瘍，十二指腸潰瘍の治療剤と
しては胃酸分泌を抑制するＨ２ブロッカーが主流であり
治癒効果は高いが、一旦治癒しても再発することの多い
ことが本疾患の特徴とされている。再発率の高い理由と
しては、Ｈ２ブロッカーを投与しても、ヘリコバクター
ピロリが除去されないことによると考えられている（Ｍ
ｃＬｅａｎ ＡＪ， ｅｔ ａｌ：Ｌａｎｃｅｔ，ｉ
ｉ：５２５〜５２６， １９８４）。また、胃または十
二指腸へのヘリコバクター ピロリの感染に対し、抗生
物質を用いる治療も試みられているが、評価は一定でな
い。ー方、食中毒菌，例えばサルモネラ菌やカンピロバ
クター菌の少ない食鳥肉を製造するための、食鳥の食中
毒菌保菌抑制材料及び食鳥肉の食中毒菌抑制方法（特開
平１−９３５３９）が提唱されている。しかし、該特許
には、カンピロバクター ジェジュニが食中毒菌として
例示され、食鳥の食中毒抑制材料として該菌体に対する
抗体を用いることが記載されているのみで、胃炎，胃ま
たは十二指腸潰瘍との関連、あるいはその予防方法等を
示唆する記載は全くない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、飲食
等により摂取されるヘリコバクター ピロリの感染を抑
制することにより胃炎，胃潰瘍，十二指腸潰瘍発症のリ
スクファクターを除くことにある。
等により摂取されるヘリコバクター ピロリの感染を抑
制することにより胃炎，胃潰瘍，十二指腸潰瘍発症のリ
スクファクターを除くことにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは前記課題を
解決するため鋭意検討した結果、ヘリコバクター ピロ
リで免疫した鶏に当該菌体に対する特異な抗体すなわち
抗ヘリコバクター ピロリ抗体（特異的抗体）が効率的
に産生されること、さらに抗ヘリコバクターピロリ抗体
を経口的に投与することにより、胃粘膜，十二指腸粘膜
へのヘリコバクター ピロリの付着及び感染が抑制され
ることをはじめて見い出し、本発明を完成するに至っ
た。即ち、本発明の要旨は、ヘリコバクター ピロリ菌
体を抗原とし免疫した鶏の卵から調製した該抗原に特異
的な抗体を有効成分とする胃炎，胃または十二指腸潰瘍
予防食品に関する。
解決するため鋭意検討した結果、ヘリコバクター ピロ
リで免疫した鶏に当該菌体に対する特異な抗体すなわち
抗ヘリコバクター ピロリ抗体（特異的抗体）が効率的
に産生されること、さらに抗ヘリコバクターピロリ抗体
を経口的に投与することにより、胃粘膜，十二指腸粘膜
へのヘリコバクター ピロリの付着及び感染が抑制され
ることをはじめて見い出し、本発明を完成するに至っ
た。即ち、本発明の要旨は、ヘリコバクター ピロリ菌
体を抗原とし免疫した鶏の卵から調製した該抗原に特異
的な抗体を有効成分とする胃炎，胃または十二指腸潰瘍
予防食品に関する。
【０００５】本発明に用いる抗ヘリコバクター ピロリ
抗体は、予めヘリコバクター ピロリ菌体を抗原とし免
疫した鶏が産生した卵から調製される。免疫に用いる鶏
は産卵鶏を用いるが、特に産卵率の高い、白色レグホン
系、ロードアイランドレッド系、横斑ブロマスロック
系、ニューハンブシャー系等の卵用種を用いるのが好ま
しい。免疫方法としては、皮下注射、筋肉注射、腹腔内
注射等、一般的な免疫方法が用いられる。
抗体は、予めヘリコバクター ピロリ菌体を抗原とし免
疫した鶏が産生した卵から調製される。免疫に用いる鶏
は産卵鶏を用いるが、特に産卵率の高い、白色レグホン
系、ロードアイランドレッド系、横斑ブロマスロック
系、ニューハンブシャー系等の卵用種を用いるのが好ま
しい。免疫方法としては、皮下注射、筋肉注射、腹腔内
注射等、一般的な免疫方法が用いられる。
【０００６】抗原に用いるヘリコバクター ピロリ菌体
はＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕ
ｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｃｎ）４３５０４，４３５２
６，４３５７９，４３６２９株等の登録株の他、臨床分
離株が使用できる。菌の培養は例えば、トリプトソイブ
イヨン培地やハートインフュージョンブイヨン培地に馬
血液または馬血清を３〜１０％の濃度で混和した培地
等、へリコバクター ピロリの培養に適した培地が使用
され、５％Ｏ２，１０％ＣＯ２，８５％Ｎ２下，３７℃
３日間等の条件で培養できる。特に、寒天培地を用い
る場合は、９８％以上の高湿度で培養することが望まし
い。
はＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕ
ｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｃｎ）４３５０４，４３５２
６，４３５７９，４３６２９株等の登録株の他、臨床分
離株が使用できる。菌の培養は例えば、トリプトソイブ
イヨン培地やハートインフュージョンブイヨン培地に馬
血液または馬血清を３〜１０％の濃度で混和した培地
等、へリコバクター ピロリの培養に適した培地が使用
され、５％Ｏ２，１０％ＣＯ２，８５％Ｎ２下，３７℃
３日間等の条件で培養できる。特に、寒天培地を用い
る場合は、９８％以上の高湿度で培養することが望まし
い。
【０００７】このようにして培養されたヘリコバクター
ピロリ菌体は薬剤，加熱等により不活化した後、遠心
して集菌され、生理的リン酸緩衝液等で洗浄した後、そ
のままもしくは粉砕した後、生理食塩に溶解するか、フ
ロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）、フロイント不完
全アジュバント（ＦＩＡ）等のアジュバントと共に乳化
懸濁して鶏免疫用の抗原とする。抗原の投与量は所望の
抗体価が得られ、かつ鶏に対して悪影響を与えない程度
の量を適宜選択すればよい。初回免疫後の追加免疫は、
目的とする抗体の抗体価により、適宜決定できる。
ピロリ菌体は薬剤，加熱等により不活化した後、遠心
して集菌され、生理的リン酸緩衝液等で洗浄した後、そ
のままもしくは粉砕した後、生理食塩に溶解するか、フ
ロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）、フロイント不完
全アジュバント（ＦＩＡ）等のアジュバントと共に乳化
懸濁して鶏免疫用の抗原とする。抗原の投与量は所望の
抗体価が得られ、かつ鶏に対して悪影響を与えない程度
の量を適宜選択すればよい。初回免疫後の追加免疫は、
目的とする抗体の抗体価により、適宜決定できる。
【０００８】鶏卵中等の特異的抗体価は、酵素免疫吸着
法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ，マイクロタ
イター法等を用いて測定することができ、これらの方法
に従って免疫後の抗体価の推移を追跡することができ
る。後述の実施例においては、マイクロタイター法によ
り凝集抗体価の推移を追跡し、抗体価が十分に上昇した
段階（例えば３２０以上）の卵を採取して、全卵粉末，
卵黄粉末，卵黄水溶性蛋白粉末及び精製鶏卵抗体をそれ
ぞれ調製した。
法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ，マイクロタ
イター法等を用いて測定することができ、これらの方法
に従って免疫後の抗体価の推移を追跡することができ
る。後述の実施例においては、マイクロタイター法によ
り凝集抗体価の推移を追跡し、抗体価が十分に上昇した
段階（例えば３２０以上）の卵を採取して、全卵粉末，
卵黄粉末，卵黄水溶性蛋白粉末及び精製鶏卵抗体をそれ
ぞれ調製した。
【０００９】抗体の抽出、分離方法としては、例えば、
デキストラン硫酸やポリエチレングリコール（ＰＥ
Ｇ），寒天，カラギナン，ファーセレラン，ペクチン，
キサンタンガム，アルギン酸塩，アルギン酸誘導体等を
用いてリポ蛋白を沈殿させ、その上清から分離，精製す
る方法（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
Ｍｅｔｈｏｄｓ，４６，６３〜６８，１９８１／Ｉｍｍ
ｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，９
（５），４７５〜９３，１９８０／特開昭６３−２１５
６９９号／特開昭６４−３８０９８号）や、プロパノー
ル，クロロホルム等を用いた抽出法など公知の方法が用
いられるが、本発明の抗体の利用分野を考慮して、例え
ば食品等での利用の場合は、カラギナン，キサンタンガ
ム，ペクチン等の食品天然添加物として認められている
ものを用いるのが人体への安全性の見地から好ましい。
デキストラン硫酸やポリエチレングリコール（ＰＥ
Ｇ），寒天，カラギナン，ファーセレラン，ペクチン，
キサンタンガム，アルギン酸塩，アルギン酸誘導体等を
用いてリポ蛋白を沈殿させ、その上清から分離，精製す
る方法（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
Ｍｅｔｈｏｄｓ，４６，６３〜６８，１９８１／Ｉｍｍ
ｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，９
（５），４７５〜９３，１９８０／特開昭６３−２１５
６９９号／特開昭６４−３８０９８号）や、プロパノー
ル，クロロホルム等を用いた抽出法など公知の方法が用
いられるが、本発明の抗体の利用分野を考慮して、例え
ば食品等での利用の場合は、カラギナン，キサンタンガ
ム，ペクチン等の食品天然添加物として認められている
ものを用いるのが人体への安全性の見地から好ましい。
【００１０】本発明に用いる抗体は、ヘリコバククー
ピロリの不活化菌体を抗原とし免疫した鶏の卵から得た
全卵または卵黄液をそのまま、または噴霧乾燥等通常の
方法により乾燥粉末化した粉末、卵黄液をカラギナン等
を用いて卵黄リポ蛋白を除去した卵黄水溶性蛋白を粉末
化した卵黄水溶性蛋白粉末として、あるいは卵黄水溶性
蛋白をイオン交換クロマトグラフィー，疎水性クロマト
グラフィー，アフィニティークロマトグラフィー，ゲル
ろ過，硫酸ナトリウム塩析，硫酸アンモニウム塩析等の
公知の蛋白精製方法により精製された精製鶏卵抗体とし
て等、各種の形態，純度のものが使用できる。このよう
にして得られた各種調製サンプルの鶏卵抗体の純度は、
粉末重量に対する鶏卵抗体重量で換算すると、卵黄粉末
の形態では、鶏卵抗体が１〜２％，卵黄水溶性蛋白粉末
の形態では、通常８〜３０％，精製鶏卵抗体の形態では
９５％以上である。
ピロリの不活化菌体を抗原とし免疫した鶏の卵から得た
全卵または卵黄液をそのまま、または噴霧乾燥等通常の
方法により乾燥粉末化した粉末、卵黄液をカラギナン等
を用いて卵黄リポ蛋白を除去した卵黄水溶性蛋白を粉末
化した卵黄水溶性蛋白粉末として、あるいは卵黄水溶性
蛋白をイオン交換クロマトグラフィー，疎水性クロマト
グラフィー，アフィニティークロマトグラフィー，ゲル
ろ過，硫酸ナトリウム塩析，硫酸アンモニウム塩析等の
公知の蛋白精製方法により精製された精製鶏卵抗体とし
て等、各種の形態，純度のものが使用できる。このよう
にして得られた各種調製サンプルの鶏卵抗体の純度は、
粉末重量に対する鶏卵抗体重量で換算すると、卵黄粉末
の形態では、鶏卵抗体が１〜２％，卵黄水溶性蛋白粉末
の形態では、通常８〜３０％，精製鶏卵抗体の形態では
９５％以上である。
【００１１】本発明の胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防
食品は投与形態に応じて種々の形に調製される。例え
ば、アイスクリーム，ヨーグルト，ショートケーキ，ガ
ム等の冷菓，菓子類、調製粉乳，ココア，コーヒー等の
粉末飲料、マーガリン，バター，チーズ，ベビーフード
等の各種食品が適用される。また、胃，十二指腸の手術
を受けた患者等の病院食，経口輸液等としても適用され
る。本発明の胃炎，胃潰瘍または十二指腸潰瘍予防食品
中の鶏卵抗体の含有量は、その投与形態に応じた投与量
に従って適宜選択すれば良く、鶏卵抗体として０．０２
５〜０．２５重量％，好ましくは０．０５重量％以上と
するのが良い。
食品は投与形態に応じて種々の形に調製される。例え
ば、アイスクリーム，ヨーグルト，ショートケーキ，ガ
ム等の冷菓，菓子類、調製粉乳，ココア，コーヒー等の
粉末飲料、マーガリン，バター，チーズ，ベビーフード
等の各種食品が適用される。また、胃，十二指腸の手術
を受けた患者等の病院食，経口輸液等としても適用され
る。本発明の胃炎，胃潰瘍または十二指腸潰瘍予防食品
中の鶏卵抗体の含有量は、その投与形態に応じた投与量
に従って適宜選択すれば良く、鶏卵抗体として０．０２
５〜０．２５重量％，好ましくは０．０５重量％以上と
するのが良い。
【００１２】
【作用】胃炎，胃潰瘍または十二指腸潰瘍の患者の胃，
十二指腸のびらん部の粘膜からヘリコバクター ピロリ
が検出されること、潰瘍病変部の菌数が有意に高いこと
からこれらの疾患の発症にヘリコバクター ピロリが深
くかかわっていることが明らかにされてきた。ヘリコバ
クター ピロリの胃，十二指腸への感染は、食物等と共
に経口的に侵入した菌が、まず胃，十二指腸粘膜に付着
することから始まる。一方、本発明に用いる抗体は、ヘ
リコバクター ピロリの胃，十二指腸粘膜への付着を抑
制することができる。例えば、豚胃粘膜ムチンを被覆し
たポリスチレンプレートにヘリコバクターピロリ菌体の
懸濁液またはヘリコバクターピロリ菌体と当該精製鶏卵
抗体の混液を添加してインキュベートし、洗浄後、プレ
ート上に残存する菌数を測定したところ、精製鶏卵抗体
を含む溶液を添加したプレート上の菌数は抗体を含まな
い溶液の場合の菌数の１７％にまで減少した。従って、
本発明の食品を食すれば、経口的にヘリコバクター ピ
ロリが侵入しても口腔内，食道，胃，十二指腸で抗体が
吸着し、胃，十二指腸粘膜への菌の付着を抑制すること
ができる。
十二指腸のびらん部の粘膜からヘリコバクター ピロリ
が検出されること、潰瘍病変部の菌数が有意に高いこと
からこれらの疾患の発症にヘリコバクター ピロリが深
くかかわっていることが明らかにされてきた。ヘリコバ
クター ピロリの胃，十二指腸への感染は、食物等と共
に経口的に侵入した菌が、まず胃，十二指腸粘膜に付着
することから始まる。一方、本発明に用いる抗体は、ヘ
リコバクター ピロリの胃，十二指腸粘膜への付着を抑
制することができる。例えば、豚胃粘膜ムチンを被覆し
たポリスチレンプレートにヘリコバクターピロリ菌体の
懸濁液またはヘリコバクターピロリ菌体と当該精製鶏卵
抗体の混液を添加してインキュベートし、洗浄後、プレ
ート上に残存する菌数を測定したところ、精製鶏卵抗体
を含む溶液を添加したプレート上の菌数は抗体を含まな
い溶液の場合の菌数の１７％にまで減少した。従って、
本発明の食品を食すれば、経口的にヘリコバクター ピ
ロリが侵入しても口腔内，食道，胃，十二指腸で抗体が
吸着し、胃，十二指腸粘膜への菌の付着を抑制すること
ができる。
【００１３】
【実施例】以下、実施例、試験例により本発明を更に具
体的に説明するが、本発明はもとよりこれに限定される
ものではない。 実施例１．＜抗原の調製＞ヘリコバクター ピロリ臨床
分離株を７％馬脱繊維血液を含むＳｋｉｒｒｏｗの寒天
培地で３７℃，４日間培養した（１０％ＣＯ２，９０％
空気，加湿）。次いで生成したコロニーをかきとり生理
食塩水に懸濁し、懸濁液に０．５％（ｖ／ｖ）となるよ
うにホルマリンを加え、室温１８時間放置し菌体の不活
化処理を行った。次いで菌体を３，０００×ｇ，１０分
間の遠心分離で集め、生理食塩水で３回洗浄した。菌体
を生理食塩水に分散させた後、ヒスコトロンで均質化
し、波長６６０ｎｍにおける吸光度を８．０に調製し抗
原液とした。
体的に説明するが、本発明はもとよりこれに限定される
ものではない。 実施例１．＜抗原の調製＞ヘリコバクター ピロリ臨床
分離株を７％馬脱繊維血液を含むＳｋｉｒｒｏｗの寒天
培地で３７℃，４日間培養した（１０％ＣＯ２，９０％
空気，加湿）。次いで生成したコロニーをかきとり生理
食塩水に懸濁し、懸濁液に０．５％（ｖ／ｖ）となるよ
うにホルマリンを加え、室温１８時間放置し菌体の不活
化処理を行った。次いで菌体を３，０００×ｇ，１０分
間の遠心分離で集め、生理食塩水で３回洗浄した。菌体
を生理食塩水に分散させた後、ヒスコトロンで均質化
し、波長６６０ｎｍにおける吸光度を８．０に調製し抗
原液とした。
【００１４】＜産卵鶏への免疫＞産卵鶏（白色レグホン
系）に抗原液を１羽あたり１ｍｌ筋肉注射した。免疫は
毎週１回、合計４回繰り返した後、抗体価の維持を目的
として、１ケ月毎に１回の免疫を行った。
系）に抗原液を１羽あたり１ｍｌ筋肉注射した。免疫は
毎週１回、合計４回繰り返した後、抗体価の維持を目的
として、１ケ月毎に１回の免疫を行った。
【００１５】＜鶏卵卵黄中の特異的抗体価の測定＞鶏卵
卵黄中の特異的抗体価は、マイクロタイター法により凝
集抗体価を測定した。２週毎に集めた鶏卵から卵黄を分
離し、該卵黄１ｇとλ−カラギナン水溶液（１．５％Ｗ
／Ｖ）９ｍｌを混和し、室温で３０分間放置後、１，０
００×ｇ，１０分間の遠心分離を行い、特異的抗体を含
有する卵黄水溶性蛋白画分を得、試料液とした。試料液
を生理的リン酸緩衝液ｐＨ ７．４（以下ＰＢＳとい
う）で２ｎ倍希釈し検液とした。各検液５０μ１と抗原
液５０μ１をマイクロプレート中に混合し、３７℃，２
４時間後静置し、凝集の有無を調べた。抗原液は免疫に
用いた抗原を、ＰＢＳで１０倍希釈し（波長６６０ｎｍ
における吸光度０．８）したものを用いた。凝集抗体価
は、凝集の見られるサンプルの最大希釈倍率の逆数で示
した。表１に鶏卵卵黄中特異的抗体価の推移を示す。
卵黄中の特異的抗体価は、マイクロタイター法により凝
集抗体価を測定した。２週毎に集めた鶏卵から卵黄を分
離し、該卵黄１ｇとλ−カラギナン水溶液（１．５％Ｗ
／Ｖ）９ｍｌを混和し、室温で３０分間放置後、１，０
００×ｇ，１０分間の遠心分離を行い、特異的抗体を含
有する卵黄水溶性蛋白画分を得、試料液とした。試料液
を生理的リン酸緩衝液ｐＨ ７．４（以下ＰＢＳとい
う）で２ｎ倍希釈し検液とした。各検液５０μ１と抗原
液５０μ１をマイクロプレート中に混合し、３７℃，２
４時間後静置し、凝集の有無を調べた。抗原液は免疫に
用いた抗原を、ＰＢＳで１０倍希釈し（波長６６０ｎｍ
における吸光度０．８）したものを用いた。凝集抗体価
は、凝集の見られるサンプルの最大希釈倍率の逆数で示
した。表１に鶏卵卵黄中特異的抗体価の推移を示す。
【００１６】
【表１】
【００１７】＜鶏卵抗体の調製＞ （ａ）ヘリコバクター ピロリに対する特異抗体を含有
する全卵または卵黄粉末の調製 凝集抗体価が３２０以上の鶏卵を割卵して得た全卵、お
よび卵黄各１ｋｇをホモミキサーで均質化した。それぞ
れの溶液を６３℃，３分間の条件で殺菌を行った後、噴
霧乾燥により、それぞれの粉末を調製し、ヘリコバクタ
ー ピロリに対する特異抗体を含有する全卵粉末（以下
抗ＨＰ全卵粉末という）２３２ｇ，および卵黄粉末（以
下抗ＨＰ卵黄粉末という）４７０ｇを得た。噴霧乾燥の
条件は、送風温度１４５℃排風温度８５℃で行った。
する全卵または卵黄粉末の調製 凝集抗体価が３２０以上の鶏卵を割卵して得た全卵、お
よび卵黄各１ｋｇをホモミキサーで均質化した。それぞ
れの溶液を６３℃，３分間の条件で殺菌を行った後、噴
霧乾燥により、それぞれの粉末を調製し、ヘリコバクタ
ー ピロリに対する特異抗体を含有する全卵粉末（以下
抗ＨＰ全卵粉末という）２３２ｇ，および卵黄粉末（以
下抗ＨＰ卵黄粉末という）４７０ｇを得た。噴霧乾燥の
条件は、送風温度１４５℃排風温度８５℃で行った。
【００１８】（ｂ）ヘリコバクター ピロリに対する特
異抗体を含有する卵黄水溶性蛋白粉末の調製 凝集抗体価で３２０以上の鶏卵１ｋｇより分離した卵黄
を４４０ｇ、ホモミキサーで均質化した。この卵黄液に
４倍量のλ−カラギナン水溶液（１．５ｍｇ／ｍｌ）を
混和した。この液を室温で３０分間放置した遠心分離
（１０，０００×ｇ，１０分間）で卵黄リポ蛋白を、沈
殿として分離した。上清をろ紙（アドベンテック東洋．
Ｎｏ．２ペーパーフィルター）でろ過した。ろ液を分画
分子量３０，０００の限外ろ過膜を用い、１０倍に濃縮
した後、凍結乾燥しヘリコバクターピロリに対する特異
抗体を含有する卵黄水溶性蛋白粉末（以下抗ＨＰ卵黄水
溶性蛋白粉末という）２２ｇを得た。
異抗体を含有する卵黄水溶性蛋白粉末の調製 凝集抗体価で３２０以上の鶏卵１ｋｇより分離した卵黄
を４４０ｇ、ホモミキサーで均質化した。この卵黄液に
４倍量のλ−カラギナン水溶液（１．５ｍｇ／ｍｌ）を
混和した。この液を室温で３０分間放置した遠心分離
（１０，０００×ｇ，１０分間）で卵黄リポ蛋白を、沈
殿として分離した。上清をろ紙（アドベンテック東洋．
Ｎｏ．２ペーパーフィルター）でろ過した。ろ液を分画
分子量３０，０００の限外ろ過膜を用い、１０倍に濃縮
した後、凍結乾燥しヘリコバクターピロリに対する特異
抗体を含有する卵黄水溶性蛋白粉末（以下抗ＨＰ卵黄水
溶性蛋白粉末という）２２ｇを得た。
【００１９】（ｃ）ヘリコバクター ピロリに対する特
異抗体を含有する精製鶏卵抗体の調製 卵黄水溶性蛋白粉末の調製工程で得られた、卵黄水溶性
蛋白画分（２１）に終濃度１０ｍＭとなるようにリン酸
２ナトリウムを溶解し、３Ｎ塩酸を滴下しｐＨ８．０と
した。あらかじめ１０ｍＭのリン酸緩衝液（以下ＰＢと
いう）ｐＨ８．０で平衡化した陰イオン交換樹脂（ＤＥ
ＡＥ−セファセル：ファルマシア社製）カラム（３００
ｍｌ）へ、ｐＨ８．０に調製した卵黄水溶性蛋白溶液を
アプライし、非吸着成分を、平衡化緩衝液で洗浄した。
次に１００ｍＭ ＰＢ ｐＨ８．０で吸着成分を溶出し
た。溶出液に対し、終濃度１５％（ｗ／ｖ）となるよう
硫酸ナトリウムを加え、室温で３０分間撹拌した後、１
０，０００×ｇ，１０分間の遠心分離で塩析物を集め
た。塩析物を１０ｍＭ ＰＢ ｐＨ８．０に溶解し、同
様の塩析操作をさらに２回繰り返した。最終的に得られ
た塩析物を１０ｍＭＰＢｐＨ８．０に溶解し、１０ｍＭ
ＰＢ８．０に対し透析後、凍結乾燥し、ヘリコバクタ
ー ピロリに対する特異抗体を含有する精製鶏卵抗体
（以下抗ＨＰ精製鶏卵抗体という）１．２ｇを得た。得
られた抗ＨＰ精製鶏卵抗体は、ＳＤＳ−電気泳動による
純度検定において、鶏卵抗体のＨ鎖、Ｌ鎖の２本のバン
ドのみが検出された。
異抗体を含有する精製鶏卵抗体の調製 卵黄水溶性蛋白粉末の調製工程で得られた、卵黄水溶性
蛋白画分（２１）に終濃度１０ｍＭとなるようにリン酸
２ナトリウムを溶解し、３Ｎ塩酸を滴下しｐＨ８．０と
した。あらかじめ１０ｍＭのリン酸緩衝液（以下ＰＢと
いう）ｐＨ８．０で平衡化した陰イオン交換樹脂（ＤＥ
ＡＥ−セファセル：ファルマシア社製）カラム（３００
ｍｌ）へ、ｐＨ８．０に調製した卵黄水溶性蛋白溶液を
アプライし、非吸着成分を、平衡化緩衝液で洗浄した。
次に１００ｍＭ ＰＢ ｐＨ８．０で吸着成分を溶出し
た。溶出液に対し、終濃度１５％（ｗ／ｖ）となるよう
硫酸ナトリウムを加え、室温で３０分間撹拌した後、１
０，０００×ｇ，１０分間の遠心分離で塩析物を集め
た。塩析物を１０ｍＭ ＰＢ ｐＨ８．０に溶解し、同
様の塩析操作をさらに２回繰り返した。最終的に得られ
た塩析物を１０ｍＭＰＢｐＨ８．０に溶解し、１０ｍＭ
ＰＢ８．０に対し透析後、凍結乾燥し、ヘリコバクタ
ー ピロリに対する特異抗体を含有する精製鶏卵抗体
（以下抗ＨＰ精製鶏卵抗体という）１．２ｇを得た。得
られた抗ＨＰ精製鶏卵抗体は、ＳＤＳ−電気泳動による
純度検定において、鶏卵抗体のＨ鎖、Ｌ鎖の２本のバン
ドのみが検出された。
【００２０】＜各種調製サンプルの凝集抗体価＞抗ＨＰ
全卵粉末、抗ＨＰ卵黄粉末、抗ＨＰ卵黄水溶性蛋白粉末
を、それぞれ５０ｍｇ／ｍｌとなるように、抗ＨＰ精製
鶏卵抗体は５ｍｇ／ｍｌとなるように、ＰＢＳ（ｐＨ
７．４）に溶解し、ろ紙（Ｎｏ．２ ペーパーフィルタ
ー）でろ過した。ろ液についてマイクロタイター法に従
い、ヘリコバクター ピロリに対する凝集抗体価を求め
た。各サンプルの抗体純度及び凝集抗体価を表２に示
す。抗体純度は、粉末重量に対する鶏卵抗体重量（％）
で示した。
全卵粉末、抗ＨＰ卵黄粉末、抗ＨＰ卵黄水溶性蛋白粉末
を、それぞれ５０ｍｇ／ｍｌとなるように、抗ＨＰ精製
鶏卵抗体は５ｍｇ／ｍｌとなるように、ＰＢＳ（ｐＨ
７．４）に溶解し、ろ紙（Ｎｏ．２ ペーパーフィルタ
ー）でろ過した。ろ液についてマイクロタイター法に従
い、ヘリコバクター ピロリに対する凝集抗体価を求め
た。各サンプルの抗体純度及び凝集抗体価を表２に示
す。抗体純度は、粉末重量に対する鶏卵抗体重量（％）
で示した。
【００２１】
【表２】
【００２２】＜胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品の
調製＞下記の組成よりなる胃炎，胃または十二指腸潰瘍
予防食品を、７０℃以上の過度の加熱あるいは酵素分解
による抗体の失活がおこらぬよう、抗ＨＰ全卵粉末，抗
ＨＰ卵黄粉末または抗ＨＰ卵黄水溶性蛋白粉末等の添加
時間を考慮し、通常の製造方法により調製した。 （１）胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防アイスクリーム
の処方例 （２）胃炎，胃潰瘍または十二指腸潰瘍予防ヨーグルト
の処方例
調製＞下記の組成よりなる胃炎，胃または十二指腸潰瘍
予防食品を、７０℃以上の過度の加熱あるいは酵素分解
による抗体の失活がおこらぬよう、抗ＨＰ全卵粉末，抗
ＨＰ卵黄粉末または抗ＨＰ卵黄水溶性蛋白粉末等の添加
時間を考慮し、通常の製造方法により調製した。 （１）胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防アイスクリーム
の処方例 （２）胃炎，胃潰瘍または十二指腸潰瘍予防ヨーグルト
の処方例
【００２３】試験例１．ムチンへの接着阻害試験 ヘリコバクター ピロリの調製は実施例１と同様の方法
で行った。ヘリコバクター ピロリのコロニーを集め、
１０ｍＭ ＰＢ ｐＨ７．４で洗浄した。遠心（３００
０×ｇ，１０分間）して集めた菌を再び１０ｍＭ ＰＢ
ｐＨ７．４に懸濁し、１ｍｌ当り２×１０２ＣＦＵに
した。０．２％豚胃粘膜ムシン（Ｓｉｇｍａ社製）溶液
でコーティングされた２４穴ポリスチレンプレートに、
菌液と実施例１の抗ＨＰ精製鶏卵抗体（１ｍｇ／ｍｌ）
または、菌液と市販の鶏卵から精製したコントロール鶏
卵抗体（抗体純度９８％）（１ｍｇ／ｍｌ）の混液各１
ｍｌを加えて１時間インキユベートし、生理的食塩水で
洗浄後、プレートに残存するヘリコバクター ピロリの
菌数を、同菌が産生するウレアーゼを測定することによ
り算定した。ウレアーゼの活性は単位時間に生成するア
ンモニア量をインドフェノール法により波長５５７ｎｍ
の吸光度（５５７ｎｍ）として求めた。コントロールと
して抗ＨＰ精製鶏卵抗体の代わりに、牛血清アルブミン
（ＢＳＡ：１ｍｇ／ｍｌ）を菌液に加えた。コントロー
ルを１００としたときの測定結果を表３に示す。
で行った。ヘリコバクター ピロリのコロニーを集め、
１０ｍＭ ＰＢ ｐＨ７．４で洗浄した。遠心（３００
０×ｇ，１０分間）して集めた菌を再び１０ｍＭ ＰＢ
ｐＨ７．４に懸濁し、１ｍｌ当り２×１０２ＣＦＵに
した。０．２％豚胃粘膜ムシン（Ｓｉｇｍａ社製）溶液
でコーティングされた２４穴ポリスチレンプレートに、
菌液と実施例１の抗ＨＰ精製鶏卵抗体（１ｍｇ／ｍｌ）
または、菌液と市販の鶏卵から精製したコントロール鶏
卵抗体（抗体純度９８％）（１ｍｇ／ｍｌ）の混液各１
ｍｌを加えて１時間インキユベートし、生理的食塩水で
洗浄後、プレートに残存するヘリコバクター ピロリの
菌数を、同菌が産生するウレアーゼを測定することによ
り算定した。ウレアーゼの活性は単位時間に生成するア
ンモニア量をインドフェノール法により波長５５７ｎｍ
の吸光度（５５７ｎｍ）として求めた。コントロールと
して抗ＨＰ精製鶏卵抗体の代わりに、牛血清アルブミン
（ＢＳＡ：１ｍｇ／ｍｌ）を菌液に加えた。コントロー
ルを１００としたときの測定結果を表３に示す。
【００２４】
【表３】
【００２５】
【発明の効果】本発明の胃炎，胃または十二指腸潰瘍予
防食品は人体にとって安全であり、これを食することに
より、ヘリコバクター ピロリの感染による胃炎，胃潰
瘍，十二指腸潰瘍の発症を予防することができ、このこ
とにより健康の維持を図ることがてきる。
防食品は人体にとって安全であり、これを食することに
より、ヘリコバクター ピロリの感染による胃炎，胃潰
瘍，十二指腸潰瘍の発症を予防することができ、このこ
とにより健康の維持を図ることがてきる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｐ 1/04 Ａ６１Ｐ 1/04 31/04 31/04 (72)発明者 金 武▲祚▼ 三重県四日市市赤堀新町９番５号 太陽 化学株式会社内 (72)発明者 山本 武彦 三重県四日市市赤堀新町９番５号 太陽 化学株式会社内 (72)発明者 中嶋 睦安 東京都町田市南大谷912−51 審査官 森井 隆信 (56)参考文献 特開 昭60−248628（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) A61K 39/40 A23C 9/152 A23G 3/00 A23G 9/02 A23L 1/30 A61P 1/04 A61P 31/04 ＣＡ（ＳＴＮ) ＥＭＢＡＳＥ（ＳＴＮ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ)
Claims (1)
- 【請求項１】 ヘリコバクター ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏ
ｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）菌体を抗原とし免疫した
鶏の卵から調製した該抗原に特異的な抗体を有効成分と
する胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3120693A JP3072353B2 (ja) | 1991-03-01 | 1991-03-01 | 胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3120693A JP3072353B2 (ja) | 1991-03-01 | 1991-03-01 | 胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04275232A JPH04275232A (ja) | 1992-09-30 |
| JP3072353B2 true JP3072353B2 (ja) | 2000-07-31 |
Family
ID=14792633
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3120693A Expired - Lifetime JP3072353B2 (ja) | 1991-03-01 | 1991-03-01 | 胃炎，胃または十二指腸潰瘍予防食品 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3072353B2 (ja) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5772999A (en) * | 1996-07-30 | 1998-06-30 | Dcv Biologics, L.P. | Method of preventing, countering, or reducing NSAID-induced gastrointestinal damage by administering milk or egg products from hyperimmunized animals |
| JP3430853B2 (ja) | 1997-04-11 | 2003-07-28 | 株式会社ゲン・コーポレーション | 胃炎、胃潰瘍および十二指腸潰瘍の予防剤並びに治療剤 |
| KR100324441B1 (ko) * | 1999-02-08 | 2002-02-27 | 이은선 | 위염, 위궤양, 십이지장궤양 예방을 위한 식품 |
| KR100364198B1 (ko) * | 2000-06-09 | 2002-12-12 | 영농조합법인다한 | 헬리코박터 파이로리에 대한 개선된 ｌｇＹ 생성의유도방법 및 이에 의해 제조된 계란 |
| JP2002029999A (ja) | 2000-07-14 | 2002-01-29 | Gen Corp:Kk | 消化性潰瘍の予防剤および治療剤 |
| KR20020021545A (ko) * | 2000-09-15 | 2002-03-21 | 이은선 | 면역단백질이 강화된 난황액을 이용한 발효유, 우유,아이스크림 및 그 제조방법 |
| KR100403282B1 (ko) * | 2001-06-29 | 2003-10-30 | 주식회사 에그 바이오택 | 항-대장균 및 항-헬리코박터 피로리 혼합특수면역단백질함유 난황과 알로에분말, 녹차추출물분말및 들깨잎분말을 함유한 헬리코박터 피로리 성장억제식품조성물 및 상기 조성물을 함유한 요구르트 |
| KR100785666B1 (ko) * | 2001-08-01 | 2007-12-14 | 농업회사법인 오보바이오 주식회사 | 기능성 푸딩 및 그 제조방법 |
-
1991
- 1991-03-01 JP JP3120693A patent/JP3072353B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH04275232A (ja) | 1992-09-30 |
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