JP3068910B2 - 新規スフィンゴ糖脂質、その製造法および使用 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】〔発明の背景〕

【産業上の利用分野】本発明は、有効な抗腫瘍活性およ
び免疫賦活活性を有する新規なスフィンゴ糖脂質、その
製造方法ならびにその用途に関するものである。

【０００２】

〔発明の概要〕

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】化学物質の生理活性
は、その化学構造に依存するところが大きく、抗腫瘍活
性あるいは免疫賦活活性を有する新規な化合物に対して
不断の希求があると言えよう。本発明は上記の希求に応
えることを目的とするものである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、海綿動物
アゲラス・マウリティアヌスから特定のスフィンゴ糖脂
質を取り出してこれが抗腫瘍活性および免疫賦活活性を
有することを見出し、更にその合成方法を作出し、この
知見をもとに本発明を完成させるに至った。すなわち、
本発明による新規スフィンゴ糖脂質は、次式（Ｉ）で示
されるものである。

【化２】 ここで、Ｒ₁ がα‐Ｄ‐ガラクトピラノシルであってか
つＲ₂ が下記の基（ａ）である場合、Ｒ₃ は下記の基
（ｂ）または（ｃ）であり、Ｒ₁ がβ‐Ｄ‐グルコピラ
ノシルであってかつＲ₃ が下記の基（ｄ）である場合、
Ｒ₂ は下記の基（ａ）または（ｅ）である。 （ａ）−（ＣＨ₂ ）₂₁−ＣＨ₃ （ｂ）−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ₂ ）₁₁−ＣＨ（ＣＨ₃ ）
₂ （ｃ）−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ₂ ）₁₁−ＣＨ（ＣＨ₃ ）
−ＣＨ₂ −ＣＨ₃ （ｄ）−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂ ）₂ −ＣＨ＝Ｃ（Ｃ
Ｈ₃ ）−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂ ）₆ −ＣＨ₃ （ｅ）−（ＣＨ₂ ）₂₂−ＣＨ₃ 本発明は、また、式（Ｉ）で示される化合物の製造法に
関するものである。すなわち、本発明による上記式
（Ｉ）で示されるスフィンゴ糖脂質の製造法は、海綿動
物アゲラス・マウリティアヌスを採集してこれを有機溶
媒による抽出操作に付し、その抽出物から上記式（Ｉ）
で示されるスフィンゴ糖脂質を採取すること、を特徴と
するものである。また、式（Ｉ）で示される本発明化合
物は、後述する工程式もしくは反応経路式に従って化学
的に合成することができる。本発明は、さらにまた、式
（Ｉ）で示される化合物の使用に関するものである。す
なわち、本発明による抗腫瘍剤および免疫賦活剤は、上
記式（Ｉ）で示されるスフィンゴ糖脂質の１種または２
種以上を有効成分として含有するものである。

【０００５】〔発明の具体的説明〕 ＜スフィンゴ糖脂質＞本発明によるスフィンゴ糖脂質は
式（Ｉ）で示されるものであることは前記した通りであ
り、これらの具体的な化合物の構造式は次式（１）〜
（４）のように示すことができる。

【化３】

【化４】

【化５】

【化６】

【０００６】＜本発明化合物の製造法＞本発明による化
合物、すなわち前記式（Ｉ）で示されるスフィンゴ糖脂
質は、海綿動物からの抽出によって得ることができる
が、類縁化合物の化学修飾によって誘導することも、あ
るいはスフィンゴ糖脂質を合成するのに必要な種々の一
般的化学反応を組み合わせた化学合成手段によって全合
成することも可能である。式（Ｉ）で示される化合物
は、スフィンゴ糖脂質に関する一般的な化学的合成手段
を用いて、たとえば、アグリカルチュラル・アンド・バ
イオロジカル・ケミストリー(Agricultural and Biolog
ical Chemistry),５４巻，３号，６６３−６６７頁，１
９９０年に記載の方法を準用して合成することができ
る。このような合成の一例として、たとえば、前記式
（Ｉ）で示される化合物は下記のような工程を経て合成
することも可能である。

【化７】

【化８】 上記工程式において、下記のような省略記号が使用され
ている。 Ｂｎ：ベンジル Ｂｚ：ベンゾイル Ｔｒ：トリチル Ｍｓ：メタンスルホニル ＴｓＯＨ：パラトルエンスルホン酸 ＤＭＡＰ：４‐ジメチルアミノピリジン ＭＳ−４Ａ：モレキュラシーブス‐４Ａ（脱水剤） Ｒ₄ ：アルキルまたはアルケニル −ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ₂ ）₂ −Ｒ₅ ：式（Ｉ）中のＲ
₃ に相当する Ｒ₆ ：式（Ｉ）中のＲ₂ に相当する 本発明化合物の更に具体的な合成方法は、下記のような
反応経路式によって示すことができる。この反応経路式
は、具体的には前記化合物（１）について示しているが
（後記実験例の合成例にこれに関する詳細な記載があ
る）本発明による化合物（３）もこの方法に準じて合成
することができる。

【化９】

【化１０】 この式中に用いられている省略記号は、上記工程式の場
合と同じものである。

【０００７】海綿動物から得る方法は、基本的にはＡ）
海綿動物の採集工程、Ｂ）本発明化合物を含有する粗抽
出物を得るために、少なくとも１種の適当な有機溶媒と
海綿動物を接触させる抽出工程、Ｃ）工程Ｂ）より得ら
れた有機溶媒粗抽出物から本発明化合物を採取する工
程、から成るものである。 （工程Ａ））この工程は、海綿動物を採集する工程であ
る。海綿動物の好ましい例としてはアゲラス・マウリテ
ィアヌス（Agelas mauritianus ）があげられ、これは
たとえば沖繩県久米島の海中より採集することができ
る。 （工程Ｂ））この工程は、海綿動物から、少なくとも１
種の適当な有機溶媒または水を用いて本発明化合物を粗
抽出物として抽出する工程である。抽出溶媒としては有
機溶媒が好ましい。抽出のための適当な有機溶媒は、海
綿動物から本発明化合物を抽出することができるもので
あればよく、そのようなものとしては、酢酸エチル、酢
酸ブチルなどのエステル、メタノール、エタノール、イ
ソプロピルアルコールなどのアルコール、ヘプタン、ヘ
キサン、イソオクタンなどの脂肪族炭化水素、アセト
ン、メチルエチルケトンなどのケトン、ベンゼン、トル
エンなどの芳香族化合物、ジエチルエーテル、ｔ‐ブチ
ルメチルエーテルなどのエーテル、塩化メチレン、クロ
ロホルム、１，２‐ジクロロエタンなどの低級脂肪族炭
化水素の置換化合物などが好ましい例としてあげられ
る。本発明においては、これらを単独で用いるかあるい
はこれらのうちの複数種を組み合わせた混合物で用いる
ことができる。上記したような有機溶媒のうち、より好
ましいものにはエタノール、アセトン、酢酸エチルなど
が、また、複数種の組み合わせの好ましい例としては、
メタノールとクロロホルム、メタノールと塩化メチレ
ン、アセトンとトルエンなどがあげられる。抽出法とし
ては、動植物材料、微生物材料などの生物材料からの生
理活性物質、特にスフィンゴ糖脂質、の抽出に関する公
知の方法、たとえばリービッヒ・アナーレン・デア・ヘ
ミー（Liebigs Annalen der Chemie) 、１巻、５１頁、
１９９０年に記載の方法、テトラヘドロン（Tetrahedro
n)、４５巻、１２号、３８９７頁、１９８９年に記載の
方法、あるいはツァイシュリフト・フィア・ナトゥアフ
ォーシュング・タイル・ベー（Zeitschrift fuer Natur
forschung Teil B）４２巻、１１号、１４７６頁、１９
８７年に記載の方法など、を準用することができ、これ
らの抽出方法を単独で、あるいは複数種組み合わせて使
用することができる。具体的には、例えば、海綿動物を
そのまま用いるか、もしくはホモジナイズして凍結乾燥
を行うなどの前処理を施し、これを抽出温度が０〜８０
℃、好ましくは室温付近で、抽出時間が１〜７２時間、
好ましくは１２〜３６時間の抽出条件で、好ましくは攪
拌しながら抽出操作を行う。必要があれば、上記の抽出
操作を所望回数繰り返して行なうこともできる。 （工程Ｃ））この工程は、工程Ｂ）より得られた、本発
明化合物を含有する粗抽出物から本発明化合物を採取す
る工程である。この採取法としては、前記したような種
々の生物材料からの生理活性物質、特にスフィンゴ糖脂
質、の分画および単離に関する公知の方法、を使用する
ことができる。このような方法に関する一般的な記載に
ついては例えばリービッヒ・アナーレン・デア・ヘミー
（Liebigs Annalen der Chemie) １巻、５１頁、１９９
０年などを参照することができる。具体的には、分画法
としては、例えば溶解度の差を利用した分別法（たとえ
ば含水メタノールとメタノールの組合せによる）、分配
率の差を利用した分配法（向流分配法も含まれる）（た
とえば酢酸エチルと水の組合せによる）、などがあげら
れ、上述の粗抽出物をこれらの分画法によって処理し、
目的の画分を回収することにより式（Ｉ）で示される本
発明化合物を粗精製品として得ることができる。このよ
うにして得られる本発明化合物の粗精製品をさらに精製
するためには、上記の分画法に後述するような単離法を
組合せて必要回数行えばよい。また、必要があれば、工
程Ｂ）から得られた粗抽出物を適当な単離法の操作に必
要回数付すことにより、本発明化合物の精製品を得るこ
とができる。このような単離法としては、例えば、吸着
クロマトグラフィー、分配クロマトグラフィー、薄層ク
ロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、ゲル
槇過等のクロマトグラフィーによって溶出する方法があ
げられる。クロマトグラフィーの具体例としては、例え
ば、固定相としてシリカゲル、ＯＤＳ、トヨパールＨＷ
−４０（東ソー）、セファデックスＬＨ−２０（ファル
マシア）等を用い、移動相として工程Ｂ）の項で前述し
たような有機溶媒、水などを単独であるいはこれらのう
ちの複数種を組み合わせた混合物で用いるカラムクロマ
トグラフィーがあげられる。溶出液の好ましい具体例と
しては、単一物ではメタノール、クロロホルムなど、混
合物ではメタノールとクロロホルム、メタノールと水、
などがあげられる。

【０００８】＜本発明化合物の用途＞式（Ｉ）で示され
る本発明化合物は、次の生理活性、すなわち抗腫瘍活性
および免疫賦活活性、を有するという点で有用である。 １）抗腫瘍活性 本発明化合物は、後記実験例２に示すように、Ｂ１６マ
ウスメラノーマ細胞に対して、マウスの腹腔内および皮
下において抗腫瘍活性を示した。 ２）免疫賦活活性 本発明化合物は、後記実験例２に示すように、マウスリ
ンパ球混合培養反応、マウスナチュラルキラー（ＮＫ）
細胞活性増強反応およびマクロファージ活性化反応の試
験において活性作用を示した。 ３）抗腫瘍剤および免疫賦活剤 このように、本発明化合物は、抗腫瘍活性および免疫賦
活活性を示すことが明らかにされた。したがって、本発
明化合物は抗腫瘍剤もしくは免疫賦活剤として使用する
ことができる。抗腫瘍剤もしくは免疫賦活剤としての本
発明化合物は合目的的な任意の投与経路で、また採用投
与経路によって決まる剤型で投与することができる。薬
剤としては製薬上許容される担体ないし希釈剤で希釈さ
れた形態がふつうである。本発明化合物を抗腫瘍剤、も
しくは免疫賦活剤として使用する場合は、ヒトまたは哺
乳動物に経口的にまたは非経口的に投与することができ
る。例えば本発明化合物を適当な注射用溶剤（たとえば
注射用蒸留水など）に溶解、または懸濁して静注、筋
注、もしくは皮下注射などによって投与し得る。また適
当な希釈剤（例えばデンプン、ショ糖、乳糖、炭酸カル
シウム、など通常この種の目的に用いられる任意の化合
物）あるいは滑沢剤（例えばステアリン酸、安息香酸ナ
トリウム、ホウ酸、シリカ、ポリエチレングリコールな
ど通常この種の目的に用いられる任意の化合物）などの
製薬成分を添加して、粉末、錠剤、顆粒剤、カプセル、
トローチ、ドライシロップなどの形態に成形して経口投
与することができる。本発明化合物の投与量は、動物試
験の結果および個々の状況を勘案して、連続的または間
けつ的に投与したときに総投与量が一定量を超えないよ
うに定められる。具体的な投与量は、投与方法、患者ま
たは被処理動物の状況、たとえば年令、体重、性別、感
受性、食餌、投与時間、併用する薬剤、患者またはその
病気の程度に応じて変化することはいうまでもなく、ま
た一定の条件のもとにおける適量と投与回数は、上記の
指針を基として専門医の適量決定試験によって決定され
なければならない。なお、本発明化合物の活性の発現に
必要な最少投与量は、一般に宿主の体重１kgあたり０．
０１mg程度である。

【０００９】＜実験例＞

【実施例】以下は、本発明を実験例によって更に具体的
に説明するものであり、この実験例によって本発明は限
定されるものではない。実験例１ ：化合物の調製 沖繩県久米島の海中において採集した海綿動物（アゲラ
ス・マウリティアヌス（Agelas mauritianus ) ）をホ
モジナイズし凍結乾燥を行った（３４６．５ｇ）。第一
の溶媒としてメタノール‐クロロホルム（１：１）で抽
出して抽出物を得、これを減圧下濃縮して残渣を得た
（４３．６７ｇ）。残渣は粗活性画分を得るために第一
の分配溶剤として酢酸エチルと水の間で分配され、上層
の酢酸エチル層は無水硫酸ナトリウムで脱水し、下層の
水層は１‐ブタノールで抽出した。化合物（１）、
（２）、（３）および（４）を含有する酢酸エチル溶解
フラクション、及び１‐ブタノール溶解フラクションを
まとめて減圧下濃縮して残渣を得た（３６．７７ｇ）。
残渣は３０％水性メタノールで洗浄した後、メタノール
にて抽出し、抽出物を減圧下濃縮して褐色の固体４．６
６ｇを得た。この固体をシリカゲル（ワコーゲルＣ−２
００）カラムクロマトグラフに付し、最初にクロロホル
ムを用い、ついでメタノールを徐々に加えながら溶出す
ることによって分離した。５％ないし８％メタノール含
有クロロホルムを用いて溶出した画分から活性フラクシ
ョンを得（２２４．３mg）、再度メタノールにて抽出し
減圧下濃縮して褐色の固体を得た。この固体をトヨパー
ルＨＷ−４０カラムにかけ、クロロホルム‐メタノール
（１：１）を用い溶出した画分から活性フラクションを
得（１６１．８mg）、これを逆相高速液体クロマトグラ
フィー（Ｒｐ−ＨＰＬＣ；ＹＭＣ−Ｄ−ＯＤＳ−７（株
式会社ワイエムシィ製）、１００％メタノール、１１ml
／min （検出は示差屈折計））を行うことにより無色の
粉末である本発明化合物（１）（８．４mg）、化合物
（２）（３１．７mg）、化合物（３）（６．８mg）、化
合物（４）（９．９mg）をそれぞれ５０分、５３分、５
７分、６１分の溶出時間で順に得た。化合物（１）、化
合物（２）、化合物（３）および化合物（４）は以下の
スペクトルデータを示した。化合物（１） ［α］²⁸ _D ＝＋６５．４゜（１−ＰｒＯＨ、ｃ＝１．
０） ＭＳ：ＦＤＭＳ ８４６（Ｍ＋Ｈ）⁺ negative ＦＡＢＭＳ ８４４（Ｍ−Ｈ）^- ＵＶ：（λmax(nm) 、ＭｅＯＨ）２０２（ε２２００） ＩＲ：（cm^-1、ＫＢｒ）３４００、２９５０、２８７
０、１６４５、１５３５、１４７５、１０８０。 ｍｐ：１９８−２００℃ ＮＭＲ： ¹Ｈ（５００ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ；２７℃）δ
(ppm） ８．５０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．２Hz）、７．５
５（１Ｈ，ｂｓ）、７．０１（１Ｈ，ｂｓ）、６．６９
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Hz）、６．６５（１Ｈ，ｂ
ｓ）、６．５２（１Ｈ，ｂｓ）、６．３０（１Ｈ，ｂ
ｓ）、６．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Hz）、５．５９
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７Hz）、５．２８（１Ｈ，ｍ）、
４．６４（２Ｈ，ｍ）、４．５８（１Ｈ，ｍ）、４．５
３（１Ｈ，ｍ）、４．４８（２Ｈ，ｍ）、４．３９（１
Ｈ，ｍ）、４．３４（２Ｈ，ｍ）、４．３２（１Ｈ，
ｍ）、４．２７（１Ｈ，ｍ）、２．２９（１Ｈ，ｍ）、
２．１９（１Ｈ，ｍ）、１．９９（１Ｈ，ｍ）、１．８
８（２Ｈ，ｍ）、１．７３（１Ｈ，ｍ）、１．６６（２
Ｈ，ｍ）１．４６（２Ｈ，ｍ）、１．４２−１．１０
（５５Ｈ，ｍ）、０．８８（９Ｈ，ｍ）。 ¹ Ｈ（５００ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ＋Ｄ₂Ｏ；５５℃）δ
(ppm） ５．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝ ３．７Hz）、５．
１４（１Ｈ，ｍ）、４．６２（１Ｈ，ｍ）、４．５８
（２Ｈ，ｍ）、４．４８（２Ｈ，ｍ）、４．４３（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．７，１０．４Hz）、４，３２（２
Ｈ，ｍ）、４．３０（２Ｈ，ｍ）、４．２６（１Ｈ，
ｍ）、２．２１（２Ｈ，ｍ）、２．０１（１Ｈ，ｍ）、
１．９０（２Ｈ，ｍ）、１．７５（１Ｈ，ｍ）、１．７
０（２Ｈ，ｍ）、１．５５（２Ｈ，ｍ）、１．５０−
１．１５（５５Ｈ，ｍ）、０．９２（９Ｈ，ｍ）。¹³ Ｃ（１２５ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ；５５℃）δ(ppm）
１７５．９（ｓ）、１０１．２（ｄ）、７６．１
（ｄ）、７２．９（ｄ）、７２．８（ｄ）、７２．８
（ｄ）、７１．５（ｄ）、７０．９（ｄ）、７０．２
（ｄ）、６８．６（ｔ）、６２．７（ｔ）、５１．２
（ｄ）、３９．６（ｔ）、３５．７（ｔ）、３４．１
（ｔ）、３２．３（ｔ）、３０．６（ｔ）、３０．５
（ｔ）、３０．２（ｔ）、３０．２（ｔ）、３０．１
（ｔ）、２９．８（ｔ）、２８．５（ｄ）、２８．０
（ｔ）、２６．８（ｔ）、２６．１（ｔ）、２３．１
（ｔ）、２３．０（ｑ）、１４．５（ｑ）。化合物（２） ［α］²⁸ _D ＝−１．６゜（１−ＰｒＯＨ、ｃ＝１．０） ＭＳ：ＦＤＭＳ ８３８（Ｍ＋Ｈ）⁺ negative ＦＡＢＭＳ ８３６（Ｍ−Ｈ）^- ＵＶ：（λmax(nm) 、ＭｅＯＨ）２３６（ε５８００） ＩＲ：（cm^-1、ＫＢｒ）３３５０、２９２０、２８５
０、１６４０、１５３０、１４７０、１０８０。 ｍｐ：１４１．０−１４２．０℃ ＮＭＲ： ¹Ｈ（５００ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ；２７℃）δ
(ppm） ８．３３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．２Hz）、７．６
１（１Ｈ，ｄ、Ｊ＝５．５Hz）、７．２２（１Ｈ，ｂ
ｓ）、７．１２（１Ｈ，ｂｓ）、６．８６（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝４．９Hz）、６．３５（１Ｈ，ｂｓ）、６．１９
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Hz）、５．９９（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝６．７，１５．９Hz）、５．９０（１Ｈ，ｄ
ｔ，Ｊ＝６．１，１５．９Hz）、５．６４（１Ｈ，ｄ
ｔ，Ｊ＝７．３，１５．３Hz）、５．４９（１Ｈ，ｂ
ｔ，Ｊ＝６．７Hz）、４．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９
Hz）、４．７９（１Ｈ，ｍ）、４．７４（１Ｈ，ｍ）、
４．６９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．１，１０．４Hz）、
４．５６（１Ｈ，ｍ）、４．４９（１Ｈ，ｂｄ，Ｊ＝１
１．０Hz）、４．３４（１Ｈ，ｍ）、４．２１（１Ｈ，
ｍ）、４．１９（２Ｈ，ｍ）、４．０１（１Ｈ，ｍ）、
３．８８（１Ｈ，ｍ）、２．２１（２Ｈ，ｍ）、２．１
５（２Ｈ，ｍ）、２．１１（２Ｈ，ｍ）、２．００（１
Ｈ，ｍ）、１．７９（１Ｈ，ｍ）、１．７５（３Ｈ，
ｓ）、１．７０（１Ｈ，ｍ）、１．４５−１．０５（４
９Ｈ，ｍ）、０．８４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Hz）、
０．８４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Hz）。¹³ Ｃ（１２５ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ；２７℃）δ(ppm）
１７５．５（ｓ）、１３５．３（ｄ）、１３４．２
（ｓ）、１３２．１（ｄ）、１３１．９（ｄ）、１２
９．９（ｄ）、１２７．８（ｄ）、１０５．５（ｄ）、
７８．４（ｄ）、７８．４（ｄ）、７５．０（ｄ）、７
２．５（ｄ）、７２．３（ｄ）、７１．６（ｄ）、７
０．０（ｔ），６２．７（ｔ）、５４．６（ｄ）、３
５．６（ｔ）、３３．１（ｔ）、３２．７（ｔ）、３
２．０（ｔ）、３２．０（ｔ）、２９．９（ｔ）、２
９．８（ｔ）、２９．５（ｔ）、２９．４（ｔ）、２
９．４（ｔ）、２８．３（ｔ）、２５．８（ｔ）、２
２．８（ｔ）、１４．２（ｑ）、１２．７（ｑ）。化合物（３） ［α］²⁸ _D ＝＋６２．８゜（１−ＰｒＯＨ、ｃ＝１．
０） ＭＳ：ＦＤＭＳ ８６０（Ｍ＋Ｈ）⁺ negative ＦＡＢＭＳ ８５８（Ｍ−Ｈ）^- ＵＶ：（λmax(nm) 、ＭｅＯＨ）２０１（ε２３００） ＩＲ：（cm^-1、ＫＢｒ）３３５０、２９４０、２８５
０、１６６０、１５４５、１４９５、１１００。 ｍｐ：１８９．５−１９０．５℃ ＮＭＲ： ¹Ｈ（５００ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ；２７℃）δ
(ppm） ８．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Hz）、７．５
１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．９Hz）、６．９６（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝４．９Hz）、６．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７H
z）、６．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Hz）、６．４８
（１Ｈ，ｂｔ，Ｊ＝５．１Hz）、６．２４（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝３．７Hz）、６．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１H
z）、５．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７Hz）、５．２４
（１Ｈ，ｍ）、４．６０（２Ｈ，ｍ）、４．５６（１
Ｈ，ｍ）、４．５０（１Ｈ，ｂｓ）、４．４５（２Ｈ，
ｍ）、４．３５（１Ｈ，ｍ）、４．３１（３Ｈ，ｍ）、
４．２４（１Ｈ，ｍ）、２．２６（１Ｈ，ｍ）、２．１
８（１Ｈ，ｍ）、１．９８（１Ｈ，ｍ）、１．８７（２
Ｈ，ｍ）、１．７３（１Ｈ，ｍ）、１．６５（２Ｈ，
ｍ）、１．４２−１．１０（５９Ｈ，ｍ）、０．８８
（９Ｈ，ｍ）。 ¹ Ｈ（５００ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ＋Ｄ₂Ｏ；５５℃）δ
(ppm） ５．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７Hz）、５．０
４（１Ｈ，ｍ）、４．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，
７．４Hz）、４．５６（１Ｈ，ｍ）、４．５４（１Ｈ，
ｍ）、４．４６（１Ｈ，ｍ）、４．４５（１Ｈ，ｍ）、
４．４４（１Ｈ，ｍ）、４．３８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
４．９，５．０Ｈｚ）、４．３３（１Ｈ，ｍ）、４．３
１（１Ｈ，ｍ）、４．２８（１Ｈ，ｍ）、４．２５（１
Ｈ，ｍ）、２．１９（２Ｈ，ｍ）、２．０７（１Ｈ，
ｍ）、１．９５（１Ｈ，ｍ）、１．７５（２Ｈ，ｍ）、
１．５０−１．２０（６１Ｈ，ｍ）、１．００（９Ｈ，
ｍ）。¹³ Ｃ（１２５ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ；２７℃）δ(ppm)
１７５．０（ｓ）、１０１．２（ｄ）、７６．５
（ｄ）、７２．９（ｄ）、７２．４（ｄ）、７２．４
（ｄ）、７１．６（ｄ）、７０．９（ｄ）、７０．２
（ｄ）、６８．３（ｔ）、６２．６（ｔ）、５０．６
（ｄ）、３６．８（ｔ），３５．５（ｔ）、３４．５
（ｄ）、３４．４（ｔ）、３２．１（ｔ）、３０．３
（ｔ）、３０．３（ｔ）、３０．１（ｔ）、３０．０
（ｔ）、２９．８（ｔ）、２９．７（ｔ）、２９．５
（ｔ）、２７．３（ｔ）、２６．４（ｔ）、２５．８
（ｔ）、２２．９（ｔ）、１９．３（ｑ）、１４．２
（ｑ）、１１．５（ｑ）。¹³ Ｃ（１２５ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ；５５℃）δ(ppm)
１７６．４（ｓ）、１０１．２（ｄ）、７５．９
（ｄ）、７３．０（ｄ），７３．０（ｄ）、７３．０
（ｄ）、７１．６（ｄ）、７１．０（ｄ）、７０．３
（ｄ）、６８．９（ｔ）、６２．８（ｔ）、５１．５
（ｄ）、３７．４（ｔ）、３５．８（ｔ）、３５．１
（ｄ）、３３．６（ｔ）、３２．６（ｔ）、３０．８
（ｔ）、３０．６（ｔ）、３０．４（ｔ）、３０．４
（ｔ）、３０．４（ｔ）、３０．３（ｔ）、３０．２
（ｔ）、３０．０（ｔ）、２７．８（ｔ）、２６．９
（ｔ）、２６．１（ｔ）、２３．３（ｔ）、１９．９
（ｑ）、１４．７（ｑ）、１２．０（ｑ）。化合物（４） ［α］²⁸ _D ＝−２．０゜（１−ＰｒＯＨ、ｃ＝１．０） ＭＳ：ＦＤＭＳ ８５２（Ｍ＋Ｈ）⁺ negative ＦＡＢＭＳ ８５０（Ｍ−Ｈ）^- ＵＶ：（λmax(nm) 、ＭｅＯＨ）２３６（ε５５００） ＩＲ：（cm^-1、ＫＢｒ）３３５０、２９２０、２８５
０、１６４０、１５３０、１４７０、１０８０。 ｍｐ：１５８．５−１５９．５℃ ＮＭＲ： ¹Ｈ（５００ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ；２７℃）δ
(ppm) ８．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Hz）、７．６
２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．５Hz）、７．２２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝３．７Hz）、７．１３（１Ｈ，ｂｓ）、６．８７
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．９Hz）、６．３６（１Ｈ，ｂｔ，
Ｊ＝６．１Hz）、６．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３H
z）、５．９９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．７，１５．９H
z）、５．８９（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝６．１，１５．９H
z）、５．６３（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．３，１５．３H
z）、５．４９（１Ｈ，ｂｔ，Ｊ＝６．７Hz）、４．８
９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Hz）、４．７８（１Ｈ，
ｍ）、４．７４（１Ｈ，ｍ）、４．６９（１Ｈ，ｄｄ，
Ｊ＝６．１，１０．４Hz）、４．５６（１Ｈ，ｍ）、
４．４９（１Ｈ，ｍ）、４．３４（１Ｈ，ｍ）、４．２
１（１Ｈ，ｍ）、４．１９（２Ｈ，ｍ）、４．０１（１
Ｈ，ｍ）、３．８８（１Ｈ，ｍ）、２．２１（２Ｈ，
ｍ）、２．１５（２Ｈ，ｍ）、２．１１（２Ｈ，ｍ）、
２．００（１Ｈ，ｍ）、１．７９（１Ｈ，ｍ）、１．７
５（３Ｈ，ｓ）、１．７０（１Ｈ，ｍ）、１．４５−
１．０５（５１Ｈ，ｍ）、０．８４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝
６．７Hz）、０．８４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Hz）。¹³ Ｃ（１２５ＭＨｚ、Ｃ₅ Ｄ₅ Ｎ；２７℃）δ(ppm)
１７５．５（ｓ）、１３５．５（ｄ）、１３４．２
（ｓ）、１３２．０（ｄ）、１３１．９（ｄ）、１２
９．９（ｄ）、１２７．８（ｄ）、１０５．４（ｄ）、
７８．４（ｄ）、７８．３（ｄ）、７５．０（ｄ）、７
２．５（ｄ）、７２．３（ｄ）、７１．６（ｄ）、６
９．９（ｔ）、６２．８（ｔ）、５４．６（ｄ）、３
５．６（ｔ）、３３．１（ｔ）、３２．６（ｔ）、３
２．０（ｔ）、３１．９（ｔ）、２９．９（ｔ）、２
９．８（ｔ）、２９．５（ｔ）、２９．４（ｔ）、２
９．３（ｔ）、２８．３（ｔ）、２５．８（ｔ）、２
２．８（ｔ）、１４．２（ｑ）、１２．６（ｑ）。

【００１０】実験例２：本発明化合物の抗腫瘍活性 １．腹腔内におけるＢ１６ マウスメラノーマ細胞に対
する抗腫瘍活性 日本エスエルシー株式会社より購入した６週令、メスの
ＢＤＦ₁ マウスを１群６匹として実験を行った。Ｂ１６
マウスメラノーマ細胞８×１０⁵ 個／マウスを腹腔内に
移植し（移植日を０日目）、移植後より１，５および９
日目に、各用量に調製したサンプルをマウス体重２０ｇ
あたり０．２ml腹腔内投与し、死亡するまでの日数を測
定した。 結果を表１に示した。各化合物は顕著な抗腫瘍活性を示
した。 ２．皮下におけるＢ１６マウス メラノーマ細胞に対す
る抗腫瘍活性 日本エスエルシー株式会社より購入した６週令、メスの
ＢＤＦ₁ マウスを１群６匹として実験を行った。Ｂ１６
マウスメラノーマ細胞を１×１０⁶ 個／マウス皮下に移
植し、その１５日後（ｄａｙ１５）に背部皮下の腫瘍体
積（長径×短径×高さ）／２を測定し、平均値がほぼ同
じになるように群分けを行なった。サンプルは１５、１
７、１９、２１、２３日後（ｄａｙ１５，１７，１９，
２１，２３）に尾静脈内投与を行い、１５，１９，２
２，２６日後（ｄａｙ１５，１９，２２，２６）の腫瘍
体積を測定した。 表 ２ サンプル 投与量 腫 瘍 体 積 （mm3 ） (化合物) (mg／kg) day15 day19 day22 day26 対照群 - 340 1073 1749 4283 （１） 0.1 318 577 921 2222 (6.5)^* (46.2) (47.3) (48.1) （３） 0.1 310 617 667 1335 (9.0) (42.6) (61.9) (68.8) 表２に示す結果の通り、化合物（１）および化合物
（３）は腫瘍増殖を顕著に抑制した。本発明化合物の免疫賦活活性 １．リンパ球混合培養反応 Ｃ５７ＢＬ／６マウスの脾臓より常法に従って取り出し
た脾臓細胞をマイトマイシンＣ ５０μｇ／mlで処理し
たものを標的細胞とし、一方ＢＡＬＢ／ｃマウスのリン
パ節より常方に従って取り出したリンパ球を反応細胞と
した。上述の脾臓細胞、及びリンパ球を１０％ＦＣＳ
ＲＰＭＩ １６４０を培地として各々２×１０⁶ 個／ml
に調製した。丸底９６穴プレートを用い、上記両細胞浮
遊液各５０μｌ／wellおよびサンプル（１０μｌ／wel
l）を加え、４日間３７℃−５％ＣＯ₂ の条件下で培養
を行なった後、 ³Ｈ‐サイミジン（ ³Ｈ−ＴｄＲ）０．
５μＣｉ／wellを加えた。そして８時間後に細胞のハー
ベストを行い液体シンチレーションカウンターにより ³
Ｈ‐ＴｄＲの取り込みを測定した。 表 ３ ³Ｈ−ＴｄＲ 取り込み （対照に対する％） サンプル／濃度（μg/ml) ₁₀-1 ₁₀-2 ₁₀-3 ₁₀-4 ₁₀-5 （化合物） （１） 236 220 184 189 179 （２） 169 134 142 127 147 （３） 255 209 179 164 168 （４） 202 182 141 117 127 表３に示す結果より、いずれのサンプルも１０^-5μｇ／
mlという低濃度でも強いリンパ球混合培養反応増強活性
を示した。 ２．ナチュラル キラー（ＮＫ）細胞活性増強作用(in
vivo） 日本エスエルシー株式会社より購入した６週令、メスの
Ｃ５７ＢＬ／６マウスを実験に用いた。サンプル各０．
１mg／kgを２日間連続腹腔内投与を行い、３日目にマウ
スから脾臓を取り出した。取り出した脾臓より常法に従
って脾細胞を取り出し、塩化アンモニウム‐トリス等張
緩衝液により赤血球を除去後１×１０⁷ 個／mlとなるよ
うに１０％ＦＣＳ ＲＰＭＩ １６４０に浮遊させた。
この細胞浮遊液を９６穴丸底マイクロプレートに１００
μｌずつ分注する（エフェクター細胞１×１０⁶ 個／we
ll）。一方常法に従って⁵¹Ｃｒ標識したＹＡＣ−１細胞
を１×１０⁶ 個／mlとなるように１０％ＦＣＳ ＲＰＭ
Ｉ １６４０に浮遊させ、これを標的細胞とし１０μｌ
ずつウェルに分注した。この場合Ｅ／Ｔ比（エフェクタ
ー細胞数／標的細胞数）は１００：１となるがエフェク
ター細胞数を変えることにより比率を５０：１、２５：
１と変えた。上記標的細胞、エフェクター細胞の反応系
を４時間３７℃−５％ＣＯ₂ の条件下で培養する。４時
間後に各ウェルの上清を７０μｌずつカウンター用バイ
アルに採取し、ガンマーカウンターで標的細胞の溶解量
を測定した。 表 ４ 特異的細胞障害率(%) * _{サンプル Ｅ／Ｔ比 ２５：１ ５０：１ 100 ：１} （化合物） 対 照 ０．５ １．３ ２．３ （１） １４．０ ２３．９ ３９．８ （２） ３．６ ８．０ １８．７ （３） １８．５ ３３．５ ５５．４ （４） ８．３ １７．５ ３７．２ 表４に示す結果より、いずれのサンプルもin vivo でＮ
Ｋ細胞活性増強作用を示した。 ３．マクロファージ活性化作用（in vivo ） ８週令のＢＡＬＢ／ｃマウスを実験に用いた。化合物
（３）を０．１mg／kg、２日間連続腹腔内投与を行い３
日目にマウスから腹腔浸出細胞（ＰＥＣ）を取り出し
た。さらにこのＰＥＣをプラスチックディッシュ付着細
胞と非付着細胞とに分け、ＭｅｔｈＡ細胞に対する細胞
増殖抑制作用を検討した。ＰＥＣあるいはプラスチック
ディッシュ付着細胞、非付着細胞を５×１０⁶ 個／mlと
なるように１０％ＦＣＳ ＲＰＭＩ １６４０に浮遊さ
せた。この細胞浮遊液を９６穴丸底マイクロプレート上
に１００μｌずつ分注する（エフェクター細胞５×１０
⁵ 個／well）。一方標的細胞としてＭｅｔｈＡを５×１
０⁵ 個／mlとなるように１０％ＦＣＳＲＰＭＩ １６４
０に浮遊させ、この細胞浮遊液を１０μｌずつウェルに
分注した。この場合Ｅ／Ｔ比は１００：１となるがエフ
ェクター細胞数を変えて比率を表５、６のように変え
た。上記の標的細胞−エフェクター細胞の反応系を４８
時間３７℃−５％ＣＯ₂ の条件下で培養を行った後、 ³
Ｈ−ＴｄＲ ０．５μＣｉ／wellを加えた。そして６時
間後に細胞のハーベストを行い液体シンチレーションカ
ウンターにより ³Ｈ− ＴｄＲの取り込みを測定した。
なおエフェクター細胞のみの ³Ｈ−ＴｄＲの取り込みは
標的細胞の取り込みの１％以下であったことから以下の
式により計算を行った。 表 ５ 腫瘍細胞増殖抑制作用（％） Ｅ／Ｔ比 100 ：１ ５０：１ ２５：１ ＰＥＣ 対 照 ６８．２ ３０．５ −３．８ 化合物（３） ９５．７ ８２．７ ４１．２ 表 ６ 腫瘍細胞増殖抑制作用（％） Ｅ／Ｔ比 ２０：１ １０：１ ５：１ 非付着細胞 対 照 ９．７ １．４ −１１．４ 化合物（３） １２．６ ０．２ −６．３ 付着細胞 対 照 ４１．４ １５．４ １．６ 化合物（３） ７７．０ ５４．９ ２３．５ 表５に示したように化合物（３）の投与を行ったマウス
のＰＥＣは顕著な細胞増殖抑制作用を示した。そして表
６からも明らかなように、この細胞増殖抑制作用はプラ
スチックディッシュ付着細胞（主としてマクロファー
ジ）に起因することが示された。表５及び表６の結果よ
り化合物（３）はin vivo において顕著なマクロファー
ジ活性化作用を有することが明らかとなった。

【００１１】実験例３：合成例 化合物（１）の合成法およびその物理化学的性質は下記
の通りである（合成法中の化合物番号については前記反
応経路式を参照されたい）。なお、ＮＭＲのデーターは
主たるピークについて記載する。 (i) 化合物１の合成 化合物１は、アグリカルチュラル・アンド・バイオロジ
カル・ケミストリー(Agricultural and Biological Che
mistry), 54 巻,3号,663-667頁,1990 年に従って合成す
ることができる。 (ii)化合物３の合成 ウィテッヒ塩２（化合物２）１５．０ｇにテトラヒドロ
フラン６０mlを加え、アルゴン置換した。−１０℃に
て、２規定ｎ‐ブチルリチウム‐ヘキサン溶液を１４．
４ml加え、３０分攪拌した。アルデヒド１（化合物１）
５．７４ｇをテトラヒドロフラン１０mlに溶かして加え
た。さらにテトラヒドロフラン８mlを加えた。室温に戻
し、１５時間攪拌した。濃縮し、食塩水を加えて酢酸エ
チルで２回抽出した。食塩水で洗浄し、濃縮した。シリ
カゲルカラム（ワコーゲルＣ−２００，２００ｇ，ヘキ
サン：酢酸エチル＝５：１）で精製し、アルコール３
（化合物３）を得た。収量５．０６ｇ。収率６７．６
％。化合物３のデータ ¹ Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃ ）δ(ppm) ：
７．２０−７．３５（１５Ｈ，ｍ）、５．７１（１Ｈ，
ｍ）、５．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７，９．５H
z）５．３７（１Ｈ，ｍ）、５．１１（１Ｈ，ｍ）、
４．３０−４．７０（６Ｈ，ｍ）、４．４２（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝９．５，５．８Hz）、４．０６（１Ｈ，ｍ）、
３．５５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．８，３．０Hz）、３．
５０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Hz）、２．９９（１Ｈ，
ｍ）、１．８５−２．００（２Ｈ，ｍ）、１．５１（１
Ｈ，ｍ）、１．１０−１．４０（１２Ｈ，ｍ）、０．８
５＆０．８４（ｅａｃｈ ３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Hz）。 (iii) 化合物４の合成 アルコール３の０．１９ｇにピリジン１．９ml加えて、
塩化メタンスルホニル５０．３μｌを−５℃で加え、室
温で１５時間攪拌した。濃縮して、トルエンで共沸し
た。ジエチルエーテルを加え食塩水で洗った。濃縮し
て、シリカゲルカラム（ワコーゲルＣ−２００，１０
ｇ，ヘキサン：アセトン＝６：１）で精製し、メシル体
４（化合物４）を得た。収量０．２１ｇ。収率９７．４
％。化合物４のデータ ¹ Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）δ(ppm) ：
７．２５−７．４０（１５Ｈ，ｍ）、５．７９（１Ｈ，
ｍ）、５．４８（１Ｈ，ｔ ｌｉｋｅ，Ｊ＝１０．４H
z）、５．３６（１Ｈ，ｍ）、５．００−５．１２（２
Ｈ，ｍ）、４．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．６Hz）、
４．３５−４．５５（６Ｈ，ｍ）、３．７６（１Ｈ，
ｍ）、３．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７，６．７H
z）、３．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７，３．０H
z）、２．９３（３Ｈ，ｓ），１．５１（１Ｈ，ｍ）、
１．１０−１．４０（１２Ｈ，ｍ）、０．８５＆０．８
４（ｅａｃｈ３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Hz）。 ＦＤＭＳ ６６３（Ｍ＋Ｈ）⁺ 。 (iv)化合物５の合成 パラジウムブラック０．５８ｇに、メシル体４の５．８
４ｇを酢酸エチル５０mlに溶かして加えた。水素置換
し、室温で１５時間攪拌した。セライト濾過し、濃縮し
た（トリオール５（化合物５））。収量３．３７ｇ。収
率９６．６％。化合物５のデータ ¹ Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭHz，ＣＤＣｌ₃ ）δ(ppm) ：
５．０４（１Ｈ，ｍ）、４．０４（２Ｈ，ｍ）、３．６
１（２Ｈ，ｂｓ）、３．２０（３Ｈ，ｓ）、１．１−
１．４（２３Ｈ，ｍ）、０．８７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．
７Hz）。 (v) 化合物６の合成 トリオール５の３．３７ｇにジメチルホルムアミド６
７．４mlとアジ化ナトリウム４．９１ｇを加えた。１０
０℃で１５時間攪拌した。濃縮し、食塩水を加え、酢酸
エチルで抽出した。食塩水で洗浄し、濃縮し、シリカゲ
ルカラム（ワコーゲルＣ−２００，１１０ｇ，ヘキサ
ン：アセトン＝３：１）で精製し、アジド体６（化合物
６）を得た。収量２．０９ｇ。収率７１．６％。化合物６のデータ ¹ Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭHz，ＣＤＣｌ₃ ）δ(ppm) ：
３．９７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，４．９Hz）、
３．９０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１１．６，４．３Hz）、
３．７７（２Ｈ，ｍ）、３．６２（１Ｈ，ｍ）、１．５
２（１Ｈ，ｍ）、１．１−１．４（２２Ｈ，ｍ）、０．
８６（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Hz）。 (vi)化合物７の合成 アジド体６の２１１mgにピリジン１．１mlと塩化トリフ
ェニルメチル２５７mgを加えて、５０℃で１５時間攪拌
した。濃縮し、トルエンで共沸した。シリカゲルカラム
（ワコーゲルＣ−２００，１５ｇ，ヘキサン：酢酸エチ
ル＝５：１）で精製し、トリチル体７（化合物７）を
０．３０ｇ得た。収率８４．０％。 (vii) 化合物８の合成 トリチル体７の０．３０ｇにピリジン３．０mlを加え、
塩化ベンゾイル０．１８mlと４‐ジメチルアミノピリジ
ン５．８mgを加えて攪拌した。１５時間後、エタノール
を少量加えて攪拌し、濃縮した。トルエン共沸し、シリ
カゲルカラム（ワコーゲルＣ−２００，１５ｇ，ヘキサ
ン：酢酸エチル＝１２：１）で精製し、ベンゾイル体８
（化合物８）を０．４０ｇ得た。収率定量的。 (viii)化合物９の合成 ベンゾイル体８の０．４０ｇに塩化メチレン８mlとメタ
ノール４mlを加えた。ｐ‐トルエンスルホン酸・１水塩
を４８．５mg加え、室温で３日間攪拌した。濃縮し、酢
酸エチルと重曹水を加え、分液した。食塩水で洗浄し、
濃縮した。シリカゲルカラム（ワコーゲルＣ−２００，
１０ｇ，ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、ア
ルコール９（化合物９）を０．２２ｇ得た。収率７９．
７％。化合物９のデータ ¹ Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭHz，ＣＤＣｌ₃ ）δ(ppm) ：
８．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３）、７．９８（２Ｈ，
ｄ，Ｊ＝６．７Hz）、７．６０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３
Hz）、７．５５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Hz）、７．４６
（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Hz）、７．４１（２Ｈ，ｔ，Ｊ
＝７．９Hz）、５．５１−５．５６（２Ｈ，ｍ）、３．
９８（１Ｈ，ｍ）、３．７９（２Ｈ，ｍ）、０．８４
（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Hz）。 (ix)化合物１０の合成 パラジウムブラック５mgに、アルコール９の３８mgをテ
トラヒドロフラン１mlに溶かして加えた。水素置換し、
室温で１５時間攪拌した。セライト濾過し、濃縮した
（アミン１０（化合物１０））。そのまま、次の反応へ
用いた。 (x) 化合物１１の合成 上記反応で得たアミン１０に、α‐Ｒ‐アセトキシテト
ラコサン酸のｐ‐ニトロフェニルエステル４１mgをテト
ラヒドロフラン２．０mlに溶かして加えた。室温で１日
攪拌後、濃縮し、シリカゲルカラム（ワコーゲルＣ−２
００，１０ｇ，ヘキサン：アセトン＝３：１）で精製
し、セラミド１１（化合物１１）を２５．５mg得た。ア
ルコール９からの収率３９．６％。化合物１１のデータ ¹ Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）δ(ppm) ：
８．０６＆７．９６（ｅａｃｈ ２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３
Hz）、７．６４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Hz）、７．５４
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Hz）、７．５０＆７．３９（ｅ
ａｃｈ ２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Hz）、７．０５（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝９．２Hz）、５．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．
１，２．４Hz）、５．３８（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝９．８，
３．１Hz）、５．２０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．１Hz）、
４．３６（１Ｈ，ｍ）、３．５５−３．７０（２Ｈ，
ｍ）、１．５１（１Ｈ，ｍ）、０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ
＝６．７Hz）、０．８６（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Hz）。 ＦＤＭＳ ９３５（Ｍ＋Ｈ）⁺ 。 (xi)化合物１２の合成 セラミド１１の９０mgにテトラヒドロフラン３．０ml、
塩化第一スズ４２．９mg、過塩素酸銀４６．９mg、モレ
キュラーシーブス４Ａパウダー３００mgを混ぜ、３０分
攪拌した。−１０℃に冷却し、ベンジルフッ化糖７８．
４mgをテトラヒドロフラン１．２mlに溶解して加えた。
徐々に室温に戻し、１５時間攪拌した。塩化第一スズ４
２．９mg、過塩素酸銀４６．９mg、モレキュラーシーブ
ス４Ａパウダー３００mgを追加し、４時間後、ベンジル
フッ化ガラフトース７０mgをテトラヒドロフラン０．９
mlに溶解して加えた。さらに２０時間後、同量の塩化第
一スズと過塩素酸銀を加え、２４時間攪拌した。セライ
ト濾過し、少量のアセトンで濾物を抽出した。水を加
え、酢酸エチルで３回抽出した。濃縮し、シリカゲルカ
ラム（ワコーゲルＣ−２００，１５ｇ，ヘキサン：酢酸
エチル＝６：１）で精製し、α−グリコシド１２（化合
物１２）を５０．３mg得た。収率３５．８％。原料１１
の回収は３６．８mg（回収率４０．９％）。化合物１２のデータ ¹ Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）δ(ppm) ：
８．０２＆７．９０（ｅａｃｈ ２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９
Hz）、７．５９＆７．５０（ｅａｃｈ １Ｈ，ｔ，Ｊ＝
６．４Hz）、７．４５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Hz）、
７．１６−７．３５（２２Ｈ，ｍ）、５．７８（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝９．８，２．６Hz）、５．３９（１Ｈ，
ｍ）、５．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６，５．２H
z）、４．８７，４．７３，４．６６，４．６３，４．
５５，４．４８＆４．４０（ｅａｃｈ １Ｈ，ｄ，Ｊ＝
１１．３Hz）、４．７３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．３H
z）、４．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Hz）、３．９８
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，３．３Hz）、３．９２
（１Ｈ，ｍ）、３．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．９，
２．４Hz）、３．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．８，２．
４Hz）、３．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１，２．３
Hz）、３．５２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．９，６．４H
z）、３．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，６．７H
z）、２．０２（３Ｈ，ｓ）、０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ
＝７．０Hz）、０．８５（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Hz）。 ＦＤＭＳ １４５６（Ｍ⁺ ）。 (xii) 化合物１４（化合物（１））の合成 α‐グリコシド１２の５０．１mgに酢酸エチル３．０ml
とパラジウムブラック８．０mgを加え、水素置換し、室
温で１５時間攪拌した。セライト濾過し、濃縮し、テト
ラオール１３（化合物１３）３３．２mgを得た。収率８
８．１％。ＦＤＭＳ １０９６（Ｍ⁺ ）。 テトラオール１３の３３．０mgにメタノール３mlと１規
定のナトリウムメトキシドメタノール溶液０．３ml加
え、３時間放置した。レジン（ＤＯＷＥＸ ５０Ｗ Ｘ
８）を加えｐＨ７とし、濾過した。クロロホルム−メタ
ノール（１：１）で濾物をよく抽出し、濃縮した。シリ
カゲルカラム（ワコーゲルＣ−２００，５ｇ，クロロホ
ルム：メタノール＝５：１）で精製し、化合物１４（化
合物（１））を１３．２mg得た。収率５１．８％。化合物１４のデータ ¹ Ｈ−ＮＭＲ，¹³Ｃ−ＮＭＲ，ＦＤＭＳのデーターは天
然物より得られた化合物（１）のデーターと同一であっ
た。

【００１２】

【発明の効果】本発明化合物は、優れた抗腫瘍活性およ
び免疫賦活活性を有するスフィンゴ糖脂質であり、抗腫
瘍剤および免疫賦活剤として期待できる。本発明化合物
がこのような生理活性を有することは、当業者にとって
思いがけなかったことと解される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 秋 元 功 司 群馬県高崎市宮原町３番地 麒麟麦酒株 式会社 医薬開発研究所内 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07H 15/04 A61K 31/7028 A61P 35/00,37/04 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims (3)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】次式（Ｉ）で示されるスフィンゴ糖脂質。 【化１】 ここで、Ｒ_１はα−Ｄ−ガラクトピラノシルであり、Ｒ
   _２は下記の基（ａ）であり、Ｒ_３は下記の基（ｂ）また
   は（ｃ）である。 （ａ） −（ＣＨ_２）_２１−ＣＨ_３ （ｂ） −ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ_２）_１１−ＣＨ（ＣＨ_３）_２ （ｃ） −ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ_２）_１１−ＣＨ（ＣＨ_３）−Ｃ
   Ｈ_２−ＣＨ_３
2. 【請求項２】請求項１に記載の化合物の１種または２種
   を有効成分として含有する抗腫瘍剤。
3. 【請求項３】請求項１に記載の化合物の１種または２種
   を有効成分として含有する免疫賦活剤。