JP2899576B2 - ２’，２’−ジフルオロシチジン類の選択的単離法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は２',２'−ジフルオ
ロシチジン類の選択的単離法、更に詳しくはβ−２'−
デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジン塩酸塩または
臭化水素酸塩およびその選択的単離法に関する。

【０００２】

【従来の技術】米国特許第４,５２６,９８８号は、２'
−デオキシ−２',２'−ジフルオロヌクレオシド類が有
用な抗ウイルス剤であることを開示している。欧州特許
出願第１８４,３６５号は、同一化合物の腫瘍細胞崩壊
剤としての用途を開示している。これらの公報に開示さ
れた合成法は２個を越えない対掌性中心を含む中間体を
製造する方法である。このような中間体であって１個の
対掌性中心を有する中間体は、式：

【化１】 ［式中、Ｐは保護基である]で示されるエリトロ(erythr
o)形およびトレオ(threo)形光学的対掌体から成る保護
されたラクトンである。これらの公報は、エリトロ形光
学的対掌体が天然に産するリボースの立体化学構造を有
する炭水化物を提供するので好ましいことを開示してい
る。天然に産するリボースの立体化学構造を有する炭水
化物は、すぐれた生物学的活性を現わす最終的ヌクレオ
シド生成物を提供するので好ましい。

【０００３】米国特許第４,５２６,９８８号は、上記エ
リトロ形光学的対掌体に関して以下に述べる製造法を開
示している。最初、式:

【化２】 [式中、Ｒ⁴およびＲ⁵はそれぞれ個別にＣ₁〜Ｃ₃アルキ
ルである]で示される３−Ｒ−および３−Ｓ−ヒドロキ
シ光学的対掌体(３−Ｒ−光学的対掌体の３−Ｓ−光学
的対掌体に対する比 約３:１部)から成る２,２−ジフル
オロ−３−ヒドロキシ−３−(２,２−ジアルキルジオキ
ソラン−４−イル)プロピオン酸アルキルを製造する。
この公報は、３−Ｒ−ヒドロキシ光学的対掌体が所望の
エリトロ形光学的対掌体を与えるのに固有の立体化学構
造を有し、３−Ｒ−と３−Ｓ−光学的対掌体はカラムク
ロマトグラフィー(費用がかさみ、面倒な操作である)に
より分割可能であることを開示している。

【０００４】この特許は、３−Ｒ−ヒドロキシ光学的対
掌体を単離したら、次にこれを非常に温和な条件で加水
分解し、保護されていないラクトン、すなわち式:

【化３】 で示される２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−Ｄ−ery
thro−ペントフラノース−１−ウロースを製造すること
を開示している。この特許において、上記化合物を生成
させるのに有用な温和な条件は、温和な酸型イオン交換
樹脂またはpＫa値約２.８〜５.０を有する相対的に強い
酸(たとえば水性酢酸またはクロロ酢酸)のような加水分
解剤を使用する条件を包含することを開示している。こ
れら双方の加水分解剤は加水分解反応において問題の原
因となることがある。たとえばイオン交換樹脂の使用
は、特に大規模反応処理においてラクトン体がその水に
対する感受性のためにしばしばその開鎖前駆体に逆戻り
させるような多量の水を必要とする。他方、相対的強酸
は、好ましくない反応生成物(未反応出発物質を含む)を
多量に生成するので３−Ｒ−ヒドロキシ光学的対掌体を
保護されていないラクトン体に変換するための好ましい
加水分解剤ではない。

【０００５】保護されていないラクトン体の製造が終っ
たならば、最終的にそのラクトンのヒドロキシ基にヒド
ロキシ基を保護する基を加えることにより、該ラクトン
体を前記のような保護されたエリトロラクトン体に変換
する。ラクトンのケト部をアルコール形に変換したと
き、そのアノマー炭素原子における第二の対掌性中心が
形成される。更に詳細に論ずれば、所望のエリトロ配置
に関する２個のアノマーは、式:

【化４】 で示されるα−およびβ−アノマーとして同定される。
生物学的活性を有する２'−デオキシ−２',２'−ジフル
オロヌクレオシド類の保護された前駆体を製造するた
め、上記α−およびβ−アノマーの１位における保護さ
れていないヒドロキシ基を、終局的に異項環塩基(たと
えばシトシン)で置換する。β−アノマー前駆体からす
ぐれた生物学的活性を有する２'−デオキシ−２',２'−
ジフルオロヌクレオシド類が得られるので、β−アノマ
ー前駆体が好ましい。

【０００６】米国特許第４,５２６,９８８号は、特に保
護基としてt−ブチルジメチルシリルを使用することを
例示している。この保護基を２'−デオキシ−２',２'−
ジフルオロヌクレオシド類の合成に使用するとき、生成
物はα／β−アノマー比約４:１で構成される。この生
成物は、所望のβ−アノマーを単離するために、費用が
かさみ面倒なカラムクロマトグラフィーにより精製しな
ければならない。

【０００７】発明の構成と効果 本発明は、従来必要としたカラムクロマトグラフィーに
よる膨大な精製を行なう必要がなく所望のエリトロ形お
よびβ-立体化学構造を有する２'−デオキシ−２',２'
−ジフルオロヌクレオシド類を得るための好都合な製造
法を提供するものである。加うるに本発明は、従来可能
であった収量より高い収率で所望のエリトロ形およびβ
−立体化学構造を有する２'−デオキシ−２',２'−ジフ
ルオロヌクレオシド類を得る方法を提供する。

【０００８】本発明は、式:

【化５】 [式中、ＲはＨまたは

【化６】 を表す]で示されるエリトロ形およびトレオ形ラクトン
類の光学的対掌体を製造するに当り、式:

【化７】 [式中、Ｒは前記と同意義。Ｒ⁴およびＲ⁵はそれぞれ個
別にＣ₁〜Ｃ₃アルキルを表わす]で示される２,２−ジフ
ルオロ−３−ヒドロキシ−３−(２,２−ジアルキルジオ
キソラン−４−イル)プロピオン酸アルキルまたはその
保護された誘導体の３−Ｒ−および３−Ｓ−光学的対掌
体混合物を、加水分解剤として強酸を用いることにより
加水分解し、次いで水を共沸蒸留することから成る前記
エリトロ形およびトレオ形ラクトン類の光学的対掌体の
製造法を提供するものである。本発明の製造によれば、
安定な結晶性ラクトン体を製造することができ、それ故
開鎖前駆体に逆戻りすることを最少限にし、また好まし
くない反応生成物の生成を最少限にすることができる。

【０００９】また本発明は、式:

【化８】 で示される２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−Ｄ−ery
thro−ペントフラノース−１−ウロース−３,５−ジベ
ンゾエートを、式:

【化９】 で示されるエリトロ形およびトレオ形ラクトン類の光学
的対掌体混合物から単離するに当り、該光学的対掌体混
合物を塩化メチレンに溶解し、溶液を約−５℃〜１０℃
の温度に冷やし、沈澱したエリトロ形光学的対掌体を集
めることから成る光学的対掌体混合物から前記２−デオ
キシ−２,２−ジフルオロ−Ｄ−erythro−ペントフラノ
ース−１−ウロース−３,５−ジベンゾエートを約９５.
０％以上の純度で選択的に単離することができる。前記
のように本発明方法によれば、費用がかさみかつ面倒な
カラムクロマトグラフィーを適用する必要なく所望のエ
リトロ形光学的対掌体を得ることができる。

【００１０】更に本発明の他の実施態様は、式:

【化１０】 [式中、Ｂは

【化１１】 で示される塩基;ＸはＮまたはＣ−Ｒ⁴;Ｒ¹はヒドロキシ
またはアミノ;Ｒ²はブロモ、クロロまたはヨード; Ｒ⁴は水素、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、アミノ、ブロモ、フル
オロ、クロロまたはヨード;Ｒ⁵は水素またはＣ₁〜Ｃ₄ア
ルキル；を表わす］で示される２'−デオキシ−２',２'
−ジフルオロヌクレオシドを製造するに当り、式:

【化１２】 [式中、Ｌは脱離される基を表わす]で示される保護され
た炭水化物を、Ｂ−Ｈで示される適当な塩基と反応さ
せ、強い塩基または適度に強い塩基と反応させることに
よりベンゾイル保護基を脱離させることから成るα／β
−アノマー比が約１:１である前記２'−デオキシ−２',
２'−ジフルオロヌクレオシドの製造法に存する。本発
明の製造法により得られるα／β−アノマー比(１:１)
は、従来の製造法により得られるα／β−アノマー比
(４:１)に対比させるのが好都合である。

【００１１】また本発明は、２'−デオキシ−２',２'−
ジフルオロシチジン塩酸塩または臭化水素酸塩のα／β
−アノマー(約１:１)混合物を熱水に溶解し、アセトン
を加え、この溶液を約−１０℃〜５０℃の温度で冷や
し、沈澱したβ−２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロ
シチジン塩酸塩または臭化水素酸塩を集めることからな
る、２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジン塩酸
塩または臭化水素酸塩のα／β−アノマー(約１:１)混
合物から少なくとも約８０.０％純度のβ−２'−デオキ
シ−２',２'−ジフルオロシチジン塩酸塩または臭化水
素酸塩を選択的に単離する方法を提供することができ
る。このように製せられたβ−２'−デオキシ−２',２'
−ジフルオロシチジン塩酸塩または臭化水素酸塩を、前
記塩生成物に関して述べた方法を繰返し行なって精製す
ることにより、約９９.０％純度のβ−２'−デオキシ−
２',２'−ジフルオロシチジン塩酸塩または臭化水素酸
塩を得ることができる。

【００１２】最後の実施態様において、本発明は、２'
−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジンまたはその
有機酸もしくは無機酸付加塩のα／β−アノマー(約１:
１)混合物を熱水に溶解し、この水性溶液のpＨを約７.
０〜９.０に上昇させ、この溶液を約−１０℃〜３０℃
の温度に冷やし、沈澱したβ−２'−デオキシ−２',２'
−ジフルオロシチジン遊離塩基を集めることから成る
２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジンまたはそ
の有機酸もしくは無機酸付加塩のα／β−アノマー(約
１:１)混合物から約９９.０％純度のβ−２'−デオキシ
−２',２'−ジフルオロシチジンを選択的に単離する方
法を提供するものである。得られたβ−２'−デオキシ
−２',２'−ジフルオロシチジン遊離塩基を熱水に溶解
し、この溶液に薬理学的に許容される有機酸または無機
酸を加え、溶液を約−１０℃〜４０℃の温度に冷やし、
沈澱を集めて純度が約９９.０％のβ−２'−デオキシ−
２',２'−ジフルオロシチジン・酸付加塩を得ることか
らなる製造法により、上記遊離塩基を薬理学的に許容さ
れる有機酸または無機酸付加塩に変換することができ
る。上記二方法は、費用がかさみ面倒なカラクロマトグ
ラフィーを用いる必要がなくβ−アノマーを得ることが
できるので、従来技術を越えて改良された製造法を提供
するものである。

【００１３】米国特許第４,５２６,９８８号は、式:

【化１３】 [式中、Ｒ⁴およびＲ⁵はそれぞれ個別にＣ₁〜Ｃ₃アルキ
ルである]で示される２,２−ジフルオロ−３−ヒドロキ
シ−３−(２,２−ジアルキルジオキソラン−４−イル)
プロピオン酸アルキルを開示している。この化合物は３
−Ｒ−光学的対掌体の３−Ｓ−光学的対掌体に対する比
が約３:１部である３−Ｒ−および３−Ｓ−ヒドロキシ
光学的対掌体から成っている。

【００１４】本発明は、上記化合物またはその保護され
た誘導体、すなわち式:

【化１４】 [式中、ＲはＨまたは

【化１５】 である]で示される化合物を、式:

【化１６】 で示されるラクトンに変換する製造法を提供するもので
ある。

【００１５】保護された上記誘導体出発物質は、保護さ
れていない２,２−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−
(２,２−ジアルキルジオキソラン−４−イル)プロピオ
ン酸アルキルをベンゾイルブロミド、ベンゾイルクロリ
ド、ベンゾイルシアニドまたはベンゾイルアジドと反応
させることにより製造することができる。この反応は、
あらかじめ第三アミンのような酸スカベンジヤーを加え
た不活性溶媒中、約−１０℃〜５０℃の温度で好都合に
行なわれる。またこの反応は、ピリジン、キノリン、イ
ソキノリンまたはルチジンのような塩基性溶媒中、もし
くはトリエチルアミン、トリブチルアミン、メチルピペ
リジンなどのような第三アミン溶媒中で行なうことがで
きる。加うるにこの反応において要すれば４−ジメチル
アミノピリジンまたは４−ピロリジノピリジンのような
触媒を使用することができる。

【００１６】この３−ヒドロキシ化合物またはその保護
されたベンゾイル誘導体を次の方法によりラクトン体に
変換する。すなわち最初、イソアルキリデン保護基を選
択的に脱離させて、式:

【化１７】 で示される２,２−ジフルオロ−３,４,５−トリヒドロ
キシペンタン酸アルキル、あるいは２,２−ジフルオロ
−３−(ベンゾイルオキシ)−４,５−ジヒドロキシペン
タン酸アルキル化合物を製造する。

【００１７】イソアルキリデン保護基の選択的脱離は、
加水分解試薬のような強酸を用いて達成される。ここに
定義される強酸という用語は、室温(２２℃)におけるp
Ｋa値約−１０.０〜２.０を有する酸である。かかる強
酸の例は、１〜８規定度の塩酸、１〜８規定度の硫酸な
どのような無機酸およびp−トルエンスルホン酸、トリ
フルオロ酢酸などのような有機酸を包含する。好ましい
強酸はpＫa値約−７.０〜０.０を有する酸である。特に
好ましい強酸は６Ｎ硫酸、トリフルオロ酢酸およびp−
トルエンスルホン酸である。強酸は一般に触媒量で使用
するが、必要に応じて触媒量以上の量で使用することが
できる。典型的に２,２−ジフルオロ−３−ヒドロキシ
−３−(２,２−ジアルキルジオキソラン−４−イル)プ
ロピオン酸アルキルまたは保護された誘導体出発物質に
比較して酸約０.０５〜０.５モル当量となるのに充分量
で酸を使用する。

【００１８】プロピオン酸エステル出発物質および強酸
を適当な溶媒に溶解し、この溶液中の水含有量を、プロ
ピオン酸エステル出発物質に比較して水約１〜５モル当
量となるように調節する。適当な溶媒は、アルコール類
(たとえばメタノール、エタノール、イソプロパノール
など)、アセトニトリルおよび関連する極性溶媒のよう
な極性溶媒を包含する。溶液中の水分含量は、数種の方
法たとえば有機または無機の強酸中にすでに存在する水
に更に水を加えることにより、正確な規定度を有する無
機酸を選んで所望の水分量を与えることにより、または
少量の水を含む溶媒(たとえば９５％エタノール)を選ぶ
ことにより、約１〜５当量の水を与えるように調節する
ことができる。一般に閉環してラクトン体を生成させた
とき、低水分含量であればこれを容易に除くことができ
るのでプロピオン酸エステル出発物質に対して水約１〜
２モル当量であるのが好ましい。

【００１９】プロピオン酸エステル出発物質、強酸、溶
媒および水を混合した後、イソアルキリデン保護基の選
択的脱離を開始するため溶液を加熱する。好ましくはこ
の溶液を反応混合物の還流温度に加熱する。好ましい温
度で反応を開始したときから約２〜８時間後にイソアル
キリデン保護基は実質的に脱離される。イソアルキリデ
ン保護基が実質的に脱離されたらこのペンタン酸エステ
ル体を閉環して所望のラクトン体を製造する。ペンタン
酸エステル体の閉環は、反応溶液から水を除くために水
／アルコール、水／アセトニトリルまたは水／アセトニ
トリル／芳香族溶媒共沸混合物を蒸留することにより行
なわれる。溶媒としてアルコールを使用するとき、好ま
しくは水とアルコールの全量が実質的に除去されるまで
水／アルコールの蒸留を続けるべきである。しかし溶媒
としてアセトニトリルを用いるとき、水および揮発性を
有する非溶媒成分を除きながらなお均質な液体を溶液と
して維持して確かに充分量の溶媒を存在させるため、新
鮮なアセトニトリルおよび／または芳香族溶媒を追加す
る。アセトニトリル溶媒溶液から水を除くとき、溶液を
共沸乾燥するためその溶媒を少なくする必要があるの
で、新しいアセトニトリルの代わりに好ましくはトルエ
ンのような芳香族溶媒を使用する。反応混合物から水が
実質的に除去されたら、ペンタン酸エステルが閉環して
高収率でラクトン体が得られる。閉環反応が実質的に完
結する時点を決定するため高性能液体クロマトグラフィ
ー試験法によりこの閉環反応を監視することができる。
生成したラクトン体は、プロピオン酸エステル出発物質
中に存在する光学的対掌体とほぼ同等の光学的対掌体比
率のエリトロ形およびトレオ形光学的対掌体からなる。

【００２０】また本発明は、保護された化合物の光学的
対掌体から、保護されたラクトン誘導体のエリトロ形光
学的対掌体を選択的に単離する方法を提供するものであ
る。エリトロ形光学的対掌体を単離する前に、前記ラク
トン体の保護されていないヒドロキシ基(３−ヒドロキ
シプロピオン酸エステル出発物質を用いてラクトン体を
製造する場合、Ｃ−３およびＣ−５、ベンゾイル保護出
発物質を用いる場合、Ｃ−５のみ)をベンゾイル保護基
で保護する。米国特許第４,５２６,９８８号に開示され
た条件を適用し、保護されていないラクトンをベンゾイ
ルクロリド、ベンゾイルブロミド、ベンゾイルシアニド
またはベンゾイルアジドと反応させることにより保護さ
れたラクトンを製造する。保護されたラクトンを製造し
たら、光学的対掌体混合物を塩化メチレンに溶解するこ
とにより、エリトロ形光学的対掌体を単離することがで
きる。塩化メチレンのみからエリトロ形光学的掌体を単
離することができるが、対応するイソプロパノールまた
はヘキサン溶媒を用いてエリトロ形光学的対掌体量を増
大させ、これを回収することができる。それ故イソプロ
パノール／塩化メチレン溶媒およびヘキサン／塩化メチ
レン溶媒混合物は、エリトロ形光学的対掌体を単離する
ために好ましい。

【００２１】対応するイソプロパノールまたはヘキサン
溶媒を使用するとき、イソプロパノールまたはヘキサン
を光学的対掌体混合物の塩化メチレン溶液に一度に、ま
たは５分〜４時間に渡ってゆっくり加えることができ
る。対応する溶媒をゆっくり加えるための添加時間は、
もちろん加える対応溶媒の量に影響される。対応溶媒と
してイソプロパノールを使用する場合、イソプロパノー
ル添加量は、イソプロパノールの塩化メチレンに対する
比(約５:１)〜(約２０:１)容量部のイソプロパノール／
塩化メチレン溶媒混合物を得るのに必要な量で変化させ
ることができる。対応溶媒としてヘキサンを使用する場
合、ヘキサン／塩化メチレン溶媒混合物が、ヘキサンの
塩化メチレンに対する比(約５:１)容量部となるような
量を越えない量でヘキサンを加えることができる。ヘキ
サン:塩化メチレン(約３:２)(v:v)のヘキサン／塩化メ
チレン溶媒混合物が最も好ましい。

【００２２】保護されたラクトンを塩化メチレン中に実
質的に溶解し、所要の対応溶媒を加えた後、溶液に真正
な２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−Ｄ−erythro−ペ
ントフラノース−１−ウロース−３,５−ジベンゾエー
ト種結晶を加え、約−５℃〜１０℃、より好ましくは約
０℃の温度に冷やす。冷溶液を所望の温度に保持しなが
ら約３０分〜約５時間攪拌し、標準的単離方法、典型的
には濾過処理により所望のエリトロ形光学的対掌体を単
離する。 対応する溶媒を加えた後直ちにエリトロ形光
学的対掌体の結晶化が始まり、時折結晶化が進行し、対
応溶媒を一度に加えた場合、頻度高く結晶化が進行す
る。結晶化が起こった時点で単離された生成物は、２−
デオキシ−２,２−ジフルオロ−Ｄ−erythro−ペントフ
ラノース−１−ウロース−３,５−ジベンゾエートの純
度が９５.０％以下であることが多い。トルエンのよう
な芳香族溶媒中の不純物をスラリー化することにより、
純度９５.０％以下の生成物の純度を改良することがで
きる。このスラリーを約４０〜５０℃に加温して所望の
エリトロ形光学的対掌体の実質的全量(好ましくない不
純物は非常に少ない)を溶解する。不溶性不純物を標準
的単離方法(たとえば濾過)によって除去し、溶液を得
る。芳香族溶媒を除いて得られた残留物を塩化メチレン
に溶解する。次いでエリトロ／トレオ形光学的対掌体混
合物からエリトロ形光学的対掌体を単離する前記同様の
処理を行なって純度９５.０％以上のエリトロ形光学的
対掌体を回収する。

【００２３】保護されたラクトンのエリトロ形光学的対
掌体を上記のように単離し、これを米国特許第４,５２
６,９８８号に開示された方法により式：

【化１８】 ［式中、Ｌは脱離される基を表わす]で示される化合物
に変換する。適当な脱離される基は、メタンスルホネー
ト基、トルエンスルホネート基、エタンスルホネート
基、イソプロパンスルホネート基、４−メトキシベンゼ
ンスルホネート基、４−ニトロベンゼンスルホネート
基、２−クロロベンゼンスルホネート基などのようなス
ルホネート基、クロロ、ブロモなどのようなハロゲンお
よび関連する他の脱離される基を包含する。本発明の方
法のための脱離される基のうち好ましい基はメタンスル
ホネート基である。

【００２４】上記脱離される基を有する化合物を、本発
明の方法により式:

【化１９】 [式中、ＸはＮまたはＣ−Ｒ⁴;Ｒ¹はヒドロキシまたはア
ミノ;R²はブロモ、クロロまたはヨード; Ｒ⁴は水素、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、アミノ、ブロモ、フル
オロ、クロロまたはヨード;Ｒ⁵は水素またはＣ₁〜Ｃ₄ア
ルキル;を表わす]で示される塩基と反応させて、α／β
−アノマー比(約１:１)の２'−デオキシ−２',２'−ジ
フルオロヌクレオシドを得る。

【００２５】上記塩基は有機化学に関する技術者に通常
知られた化合物であって、その合成法を説明する必要は
ない。しかし数種の塩基に存在する第一アミノ基は、こ
の塩基を炭水化物とカップリングさせる前に保護される
べきである。通常のアミノ保護基たとえばトリメチルシ
リル、イソプロピルジメチルシリル、メチルジイソプロ
ピルシリル、トリイソプロピルシリル、t−ブチルジメ
チルシリル、t−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシ
カルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、
４−ニトロベンジルオキシカルボニル、ホルミル、アセ
チルなどのようなアミノ保護基を、プロテクテイブ・グ
ループス・イン・オーガニック・ケミストリー(Ｐrotec
tive Ｇroups in Ｏrganic Ｃhemistry)、マッコミー
(ＭcＯmie)編、ニューヨーク在プレナム・プレス(Ｐlen
um Ｐress,Ｎ.Ｙ.)(１９７３年);およびプロテクテイブ
・グループス・イン・オーガニック・シンセシス(Ｐrot
ectiveＧroups in Ｏrganic Ｓynthesis)、ニューヨー
ク在ジュン・ウイリー・アンド・サンズ(Ｊohn Ｗiley
and Ｓons,Ｎ.Ｙ.)(１９８１年)のような教科書に説明
されている方法に従って使用することができる。塩基の
芳香族性を増大させ、それにより塩基の攻撃で炭水化物
との結合をより容易にするため、塩基上のケト型酸素原
子をエノール型に変換するのがしばしば適当である。好
ましくは前記シリル保護基で酸素原子がエノール化され
る。塩基と炭水化物の間のカップリング反応は、米国特
許第４,５２６,９８８号に開示されている方法に従って
行なうことができる。好ましいカップリング処理は、ト
リメチルシリルトリフレート(trimethylsilyltriflate)
のような反応開始剤および１,２−ジクロロエタンのよ
うな溶媒を用い、約２０〜１００℃の温度で行なわれ
る。約２０〜１００℃で反応させるとき、約２〜２０時
間でカップリング反応が実質的に完結し、保護されたヌ
クレオシド体がα／β−アノマー(約１:１)の比で得ら
れる。

【００２６】保護基を脱離させることにより同様のアノ
マー比を有する保護されていないヌクレオシド体が得ら
れる。シリル部分を有する大概のアミノ保護基は水また
はアルコールのような極性溶媒を用いて容易に脱離され
る。ベンゾイル部分を有するヒドロキシ保護基およびア
シル部分を有するアミノ保護基は、強塩基または適度に
強い塩基を用い、約０〜１００℃で加水分解することに
より脱離される。この反応に用いるために適当な強塩基
または適度に強い塩基は、pＫa(２５℃における)約８.
５〜２０.０を有する塩基である。かかる塩基は、水酸
化ナトリウム、水酸化カリウムのような水酸化アルカリ
金属;ナトリウムメトキシドまたはカリウムt−ブトキシ
ドのようなアルカリ金属アルコキシド;ジエチルアミ
ン、ヒドロキシルアミン、アンモニアなどのようなアミ
ン類;およびヒドラジンなどのような他の通常の塩基を
包含する。好ましくはこの反応において保護基を除くた
め、アンモニアを用い、約１０℃で反応させる。脱離さ
せるべき保護基１個当り少なくとも１モル当量の塩基が
必要である。この反応において過剰量の塩基を使用する
のが好ましい。しかし保護基を脱離させるために使用す
る過剰量の塩基は決定的要件ではない。

【００２７】ヒドロキシ保護基およびアミノ保護基の脱
離は、アルコール溶媒、特にメタノールのような水性ア
ルコール中で行なうのが好都合である。しかしこの反応
はまた、エチレングリコールを含むポリオール類、テト
ラヒドロフランのようなエーテル類、アセトンおよびメ
チルエチルケトンのようなケトン類またはジメチルスル
ホキシドのような好都合な溶媒中で進行させることがで
きる。２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロヌクレオシ
ド類を製造する好ましい方法は、塩基成分として式:

【化２０】 で示されるシトシンを用い、２'−ジオキシ−２',２'−
ジフルオロシチジンをα／β−アノマー(１:１)混合物
として得る方法である。前記のように本発明は、２'−
デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジンのα／β−ア
ノマー(約１:１)混合物から、最終的にβ−２'−デオキ
シ−２',２'−ジフルオロシチジンまたはその有機酸も
しくは無機酸付加塩を約９９.０％純度で選択的に単離
する方法を提供する。

【００２８】β−アノマーを選択的に単離する一つの方
法は、出発物質としてα／β−アノマー(１:１)混合物
の塩酸塩または臭化水素酸塩を使用する方法である。α
／β混合物の塩酸塩または臭化水素酸塩は、α／β(１:
１)混合物をイソプロパノールと合し、要すれば加熱し
てアノマー混合物を溶媒に溶解することにより単離され
る。イソプロパノールの使用量は重要ではないが、塩酸
または臭化水素酸付加終了後のアノマー混合物を完全に
溶解させるのに充分量であって、しかも結晶化および単
離の間における過剰の生成物損失を避けることができる
ような最少量とすべきである。イソプロパノールの好ま
しい使用量は、アノマー混合物g当り溶媒約２〜１２mｌ
である。

【００２９】アノマー混合物が実質的に溶媒に溶解した
ら、塩酸または臭化水素酸を加えてαおよびβ−アノマ
ーのそれぞれ塩酸塩または臭化水素酸塩を製造する。イ
ソプロパノール溶液に酸を加えた後、未溶解アノマー混
合物を溶解させる。試薬級液体濃塩酸および水性４８％
臭化水素酸は、塩酸または臭化水素酸・αおよびβ塩の
製造に使用するための好ましい型の塩酸および臭化水素
酸である。酸の添加量は、アノマー混合物に対して少な
くともわずかに過剰量の酸を使用する限り重要なことで
はない。アノマー混合物の１モル当量に対して塩酸また
は臭化水素酸２モル当量を使用するのが好ましい。

【００３０】酸を加えた後、αおよびβ−塩酸塩または
臭化水素酸塩が結晶化し始める。塩酸塩または臭化水素
酸塩の製造において、α／β−アノマー(１:１)混合物
少量たとえば５.０g以下を使用する場合、α−アノマー
に比較してβ−アノマーが選択的に結晶化する。このよ
うにただ単にα／β−アノマー(１:１)混合物をイソプ
ロパノールを合し、混合物に塩酸または臭化水素酸を加
え、この溶液を約−１０℃〜５０℃に冷やし、沈澱した
固体を集めることにより、α／β−アノマー(１:１)混
合物少量を精製してα／β−アノマー比少なくとも約
(１:４)の２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジ
ン塩酸塩または臭化水素酸塩を得ることができる。

【００３１】しかし、より多量のα／β−アノマー(１:
１)混合物を使用して塩酸塩または臭化水素酸塩を製造
するとき、α塩およびβ塩は、α／β混合物中に存在す
る比率とほぼ同一の(１:１)比で沈澱する。α塩とβ塩
を高収率で得るためには、溶液を約−１０℃〜５０℃に
冷やすべきである。以下に説明するように、溶液から沈
澱したα／β(約１:１)の２'−デオキシ−２',２'−ジ
フルオロシチジン塩酸塩または臭化水素酸塩を、標準的
単離方法、典型的には濾過処理により単離し、精製して
ほぼ９９.０％のβ−アノマーを得ることができる。最
初、α／β−アノマー(１:１)塩混合物を熱水に溶解す
る。熱水の温度は重要ではないが、水温は約５０℃〜ほ
ぼ還流温度(１００℃)であるのが好ましい。好ましい熱
水温は約８０℃である。水中のアノマー塩混合物の濃度
は、全溶解を確実にするのに充分量の水を使用する限り
重要ではない。使用する水の量は、結晶化および単離の
間の生成物の過剰な損失を避けることができる範囲で最
少限であるのが好ましい。水中のアノマー塩混合物の適
当な濃度は、水mｌ当り混合物約５０〜４００ｍｇの範
囲で変えられる。β−アノマーの単離に使用する好まし
い濃度は水mｌ当りアノマー塩混合物約２００ｍｇであ
る。

【００３２】アノマー塩混合物を水に溶解したら、この
熱溶液にアセトンを加えて溶媒混合物を調製する。溶媒
混合物の組成は水１容量部に対してアセトン約７〜３０
容量部の範囲で変えることができる。アセトン:水の組
成(約１２:１)(v:v)であるのが好ましい。アセトン添加
後、β−アノマーが結晶化し始める。β−アノマーを高
収率で得るため、溶液を約−１０℃〜５０℃、好ましく
は約０〜１５℃に冷やすべきである。冷溶液を所望の温
度に保持しながら約３０分〜約２４時間攪拌し、標準的
単離法、典型的には濾過処理により溶液からα／β−ア
ノマー比少なくとも約１:４の２'−デオキシ−２',２'
−ジフルオロシチジン塩酸塩または臭化水素酸塩を単離
する。このように単離したアノマー(１:４)混合物を、
必要に応じて前記α／β−アノマー(１:４)混合物の製
造で行なった処理を繰返すことにより更に精製すること
ができる。このようにして得られた純度少なくとも８
０.０％のβ−２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシ
チジン塩酸塩または臭化水素酸塩を熱水に溶解し、アセ
トンを加え、溶液を約−１０℃〜５０℃に冷やし、沈澱
した固体を集めることにより、純度ほぼ９９.０％のβ
−２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジン塩酸塩
または臭化水素酸塩を得ることができる。

【００３３】２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチ
ジンのα／β−アノマー(約１:１)混合物から、β−２'
−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジンの酸付加塩
を選択的に単離する第二の方法は、β'−２'−デオキシ
−２',２'−ジフルオロシチジンを選択的に単離するた
め、わずかに塩基性の水性溶液中、遊離塩基型のα−お
よびβ−アノマーの間の溶解性の差異を利用する方法で
ある。遊離塩基型のβ−アノマーを単離したらこれはそ
の有機酸または無機酸付加塩に容易に変換される。

【００３４】遊離塩基型β−アノマーを単離する方法
は、従来の公知方法より高い収率でβ−アノマーを得る
ことができるので、β−２'−デオキシ−２',２'−ジフ
ルオロシチジン酸付加塩を選択的に単離するための好ま
しい方法である。加うるに遊離塩基型α−アノマーばか
りでなくまたα／β−アノマー(１:１)混合物中に存在
する他の不純物(アンモニウム・トリフレート(ammonium
triflate)および無機塩類(たとえば硫酸マグネシウム)
などのような不純物)の双方に比較して遊離塩基型β−
アノマーを選択的に結晶化するので、遊離塩基型β−ア
ノマーの単離方法は生成物の純度を改良するために使用
することができる。α／β−アノマー(１:１)混合物ま
たはその有機酸もしくは無機酸付加塩を熱水(約４５〜
９０℃)に溶解することにより、遊離塩基型β−アノマ
ーが単離される。非塩型アノマー混合物の溶解を助ける
ため、塩酸などのような通常の有機酸または無機酸を用
いて水のpＨを約２.５〜５.０に調節することができ
る。酸付加塩型アノマー混合物を用いるならば、溶解を
助けるため通常の有機塩基または無機塩基(たとえば水
酸化ナトリウムなど)を用いて水のpＨを約２.５〜５.０
に調節することができる。使用する水の量は重要ではな
く、アノマー混合物またはその塩の溶解を完全にするの
に充分であるべきであるが、なお結晶化および単離処理
時間における生成物の過剰の損失を避けることができる
範囲で最少量にすべきである。

【００３５】上記製造法の範囲に含まれる有機酸または
無機酸付加塩型α／β−アノマー(１:１)混合物は、酒
石酸、クエン酸、酢酸などのような有機酸から形成され
る塩、ならびに塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸などの
ような無機酸から形成される塩を包含する。塩酸および
臭化水素酸付加塩は特に本発明の製造法において好まし
い。かかる塩型α／β−アノマー(１:１)混合物は、こ
の分野の技術者によく知られた方法、たとえば前記のよ
うな塩酸塩または臭化水素酸塩型α／β−アノマー(１:
１)混合物の製造法と同様の方法により製造することが
できる。アノマー混合物またはその塩を水に実質的に溶
解したら、この熱溶液のpＨを通常の有機塩基または無
機塩基(たとえば水酸化ナトリウムなど)で約７.０〜９.
０に上昇させる。好ましくはこの水溶液のpＨを約８.０
〜８.５に上昇させる。pＨを所望の値に調節した後、溶
液を冷やす。遊離塩基型 β−アノマーを高収率で得る
ために溶液を約−１０℃〜３０℃に冷やすべきである。
この溶液に要すれば任意にβ−２'−デオキシ−２',２'
−ジフルオロシチジンの真正な種結晶を加えた後、約３
０分〜約２４時間攪拌する。標準的単離方法、典型的に
は濾過により、溶液から結晶化したβ'−２'−デオキシ
−２',２'−ジフルオロシチジンが約９９.０％の純度で
単離される。

【００３６】得られたβ−２'−デオキシ−２',２'−ジ
フルオロシチジンをその薬理学的に許容される有機酸ま
たは無機酸付加塩に変換するとき、このβ-アノマーを熱
水(約４５〜９０℃)に溶解することができる。使用する
水の量は重要ではなく、β−アノマーを完全に溶解させ
るのに充分量とすべきであるが、なお、結晶化および単
離の間に生成物の過剰な損失を避けることができるよう
に最少量とすべきである。β−アノマーの溶解を助ける
ため、要すれば薬理学に許容される酸を用いて水のpＨ
を約２.５〜５.０に調節することができる。β−アノマ
ーが実質的に溶解したら、薬理学的に許容される有機酸
または無機酸を加えて酸付加塩を生成させる。本発明の
範囲内で考えられる薬理学的に許容される有機酸または
無機酸は、酒石酸、クエン酸、酢酸、安息香酸などのよ
うな有機酸および塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸など
のような無機酸を包含する。本発明の方法で使用するた
め塩酸および臭化水素酸が好ましい。添加する酸の量
は、遊離塩基型β−アノマーに対して少なくともわずか
にモル過剰量の酸を使用する限り重要事項ではない。

【００３７】酸を加えた後、酸付加塩型β−２'−デオ
キシ−２',２'−ジフルオロシチジンの結晶化が始ま
る。塩型β−アノマーを高収率で得るため、溶液を約−
１０℃〜４０℃、好ましくは約０〜１５℃に冷やすべき
である。要すれば溶液に２'−デオキシ−２',２'−ジフ
ルオロシチジン塩の真正な種結晶を加え、約３０分間〜
約２４時間攪拌する。最終的に溶液から生成物を、標準
的単離方法(典型的には濾過)により単離し、約９９.０
％純度の薬理学的に許容される酸付加塩型２'−デオキ
シ−２',２'−ジフルオロシチジンを得る。

【００３８】次に実施例により本発明の特定の実施態様
を説明する。実施例はいずれかの点で本発明の範囲に制
限を付けようとするものではなく、またそのように解釈
されるべきものではない。

【００３９】

【実施例】実施例１ Ｄ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−２,２
−ジフルオロペントフラノース−１−ウロース−３−ベ
ンゾエートの製造 還流冷却器を取付けた２ｌのフラスコに、３−Ｒ−ベン
ゾイルオキシ光学的対掌体３部と３−Ｓ−ベンゾイルオ
キシ光学的対掌体１部から成る純度９６.０％の２,２−
ジフルオロ−３−(ベンゾイルオキシ)−３−(２,２−ジ
メチルジオキソラン−４−イル)プロピオン酸エチル１
０４g(０.２７モル)を加える。アセトニトリル１０００
mｌ、脱イオン水２５mｌ(１.３５モル)およびトリフル
オロ酢酸６.４g(０.０５モル)を加える。得られた溶液
をその還流温度(約７８℃)に加熱し、その温度で４時間
攪拌する。４時間後、沸騰液を還流よりむしろ蒸留する
ために冷却器を修正する。揮発性アセトニトリル、水お
よびテトラフルオロ酢酸が蒸留されるに従って溶液容量
を約１０００mｌに保持するための新しい乾燥アセトニ
トリルを加える。液体全３０００mｌを蒸留した後、溶
液を室温(２２℃)に冷やす。

【００４０】高性能液体クロマトグラフィー(ＨＰＬＣ)
により、真正な対照標準品と比較して上記溶液中の主成
分の同定を次のように行なった。２５mｌフラスコに反
応溶液１２５μｌを入れ、イソプロパノール２mｌを加
え、次いでこの溶液をヘキサンで２５mｌに希釈するこ
とにより試験試料を調製する。このカラムをイソプロパ
ノール６容量％およびヘキサン９４容量％から成る溶離
剤で溶出する。使用したカラムは２５cmゾルバックス
(Ｚorbax)ＣＮである。検出器の波長は２３０nm、カラ
ム流速は２.０mｌ／分、注入容量は１０μｌである。Ｈ
ＰＬＣ試験により、反応溶液は生成物としてＤ−erythr
o−およびＤ−threo−２−デオキシ−２,２−ジフルオ
ロペントフラノース−１−ウロース−３−ベンゾエート
の光学的対掌体混合物８７.２重量％を含むことを確定
した。またＨＰＬＣ試験によれば、存在する主不純物は
未反応プロピオネート体２.７重量％および２,２−ジフ
ロオロ−３−(ベンゾイルオキシ)−４,５−ジヒドロキ
シペンタン酸エチル５.５重量％であることが認められ
た。

【００４１】実施例２ Ｄ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−２,２
−ジフルオロペントフラノース−１−ウロース−３−ベ
ンゾエートの光学的対掌体混合物の製造 ガラスライニングした１１０ｌ反応容器に、アセトニト
リル６４ｌ、２,２−ジフロオロ−３−(ベンゾイルオキ
シ)−３−(２,２−ジメチルジオキソラン−４−イル)プ
ロピオン酸エチルの(３−Ｒ−):(３−Ｓ−)光学的対掌
体(３:１(部))混合物、トリフルオロ酢酸０.５７kg(４.
４モル)および純水１５００mｌ(８３.３モル)を入れ
る。この溶液をその還流温度(約７８℃)に加熱し、その
温度で５.５時間攪拌する。次いでアセトニトリル、水
およびトリフルオロ酢酸の溶液１６ｌを蒸留し、トルエ
ン１６ｌで置き換える。得られた溶液を約９６.５℃に
加熱し、更に揮発分１６ｌを蒸留する。新しいトルエン
１６ｌを加え、溶液を再び９６.５℃に加熱する。揮発
成分１０７ｌが留去されるまで、蒸留、新しいトルエン
の添加および９６.５℃に加熱する操作を繰返す。反応
容器が冷える間に反応容器中に確実に湿った空気が入ら
ないようにするため、反応容器中にわずかに窒素気流を
導入しながら、残留溶液を室温(２２℃)に冷やす。得ら
れた溶液は、実施例１と同様のＨＰＬＣ試験により、Ｄ
−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−２,２−
ジフルオロペントフラノース−１−ウロース−３−ベン
ゾエートの光学的対掌体混合物８１.８重量％の生成物
を含むものと同定された。またＨＰＬＣ試験により、存
在する主不純物は、２.２重量％の未反応プロピオネー
ト体および７.７重量％の２,２−ジフロオロ−３−(ベ
ンゾイルオキシ)−４,５−ジヒドロキシペンタン酸エチ
ルであると認められた。

【００４２】実施例３ Ａ．Ｄ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−
２,２−ジフルオロペントフラノース−１−ウロース−
３,５−ジベンゾエートの光学的対掌体混合物の製造 Ｄ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−２,２
−ジフルオロペントフラノース−１−ウロース−３−ベ
ンゾエートのトルエン溶液を実施例２記載の方法で製造
する。この溶液は、実施例１と同様のＨＰＬＣにより試
験した結果、７３.０重量％のＤ−エリトロ−およびＤ
−トレオ−２−デオキシ−２,２−ジフルオロペントフ
ラノース−１−ウロース−３−ベンソエートと認められ
る生成物を含む。この溶液を減圧下、５０℃に加温して
トルエンを除き、油状物としてＤ−erythro−およびＤ
−threo−光学的対掌体２０.０g(５３.６ミリモル)を得
る。油状物を５００mｌフラスコに移し、酢酸エチル１
００mｌとピリジン１１.６g(１４６.８ミリモル)を加え
る。酢酸エチル１００mｌに塩化ベンゾイル１０.３g(７
３.５ミリモル)を溶解し、この溶液を上記５００mｌフ
ラスコ内容物に２時間に渡って滴加する。混合物を約６
０℃に加熱し、この温度で３.５時間攪拌後、室温(２２
℃)に冷やして一夜攪拌する。得られた混合物を順次、
水２００mｌ、１Ｎ塩酸２００mｌ、水２００mｌ、飽和
炭酸水素ナトリウム溶液２００mｌおよび飽和塩化ナト
リウム溶液２００mｌで洗い、無水硫酸マグネシウムで
乾燥する。乾燥溶液を減圧下に濃縮して油状物２６.０g
を得る。この油状物の代表試料をアセトニトリルに溶解
し、実施例１と同様のＨＰＬＣ試験を行ない、油状物が
５２重量％の２−デオキシ−２,２−ジフロオロ−Ｄ−e
rythro−ペントフラノース−１−ウロース−３,５−ジ
ベンソエートおよび１６.７重量％の対応するＤ−threo
−光学的対掌体から成ることを確定した。

【００４３】Ｂ．２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−
Ｄ−erythro−ペントフラノース−１−ウロース−３,５
−ジベンゾエートの単離 前記のように製せられた残余の油状物を塩化メチレン２
０mｌに溶解する。これを攪拌しながらヘキサン３０mｌ
を加える。溶液に真正な２−デオキシ−２,２−ジフル
オロ−Ｄ−erythro−ペントフラノース−１−ウロース
−３,５−ジベンゾエート種結晶を加え、更にヘキサン
／塩化メチレン(３:２)(v:v)溶液２５mｌを加える。溶
液を約０℃に１５分間冷やす。沈澱した固体を減圧下に
濾集し、ヘキサン／塩化メチレン(３:２)(v:v)冷(０℃)
溶液２５mｌで洗う。得られた結晶を減圧オーブン中、
４０℃で３時間乾燥し、所望の光学的対掌体９.０gを得
た。これを３００ＭＨz装置上、ＮＭＲ分析により次に
示すデータを有する物質として同定した。ＣＤＣｌ₃:δ
＝４.７０(一重線、２Ｈ);４.９９(一重線、１Ｈ);５.
７６(一重線、１Ｈ):７.４〜８.２(広い多重線、１０
Ｈ)。乾燥結晶の代表試料をアセトニトリルに溶解し、
実施例１と同様のＨＰＬＣ試験を行なった。ＨＰＬＣ試
験により、生成物は９８.０％純度の２−デオキシ−２,
２−ジフルオロ−Ｄ−erythro−ペントフラノース−１
−ウロース−３,５−ジベンゾエートであることが認め
られた。

【００４４】実施例４ Ａ．Ｄ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−
２,２−ジフルオロペントフラノース−１−ウロース−
３,５−ジベンゾエートの光学的対掌体混合物の製造 Ｄ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−２,２
−ジフルオロペントフラノース−１−ウロース−３−ベ
ンゾエート(実施例２と同様の処理方法に従って製せら
れる)１６９.０g(０.４７２モル)の酢酸エチル８４５m
ｌ溶液を、２ｌフラスコに入れる。このフラスコにピリ
ジン１１１.５g(１.４１０モル)を加え、溶液を約５℃
に冷やす。塩化ベンゾイル１３２.２g(０.９４０モル)
を酢酸エチル３００mｌに溶解し、この溶液を上記２ｌ
フラスコ中に３０分間に渡って滴加する。混合物を室温
(２２℃)に上昇させ、その温度で一夜攪拌する。翌朝、
混合物を約５℃に冷やし、反応の間に生成したピリジン
塩酸塩を濾去する。次いで溶液を減圧下に濃縮して油状
物２４９.０gを得る。油状物の代表試料をアセトニトリ
ルに溶解し、実施例１と同様のＨＰＬＣ試験を行ない、
油状物は２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−Ｄ−eryth
ro−ペントフラノース−１−ウロース−３,５−ジベン
ゾエート５２.２重量％と対応するＤ−threo−光学的対
掌体１４.９重量％から成ることを確定した。

【００４５】Ｂ．２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−
Ｄ−erythro−ペントフラノース−１−ウロース−３,５
−ジベンゾエートの単離 前記油状生成物の残余を塩化メチレン１７４mｌに溶解
する。溶液を攪拌しながらヘキサン２４９mｌを３０分
間に渡って添加する。この溶液を室温(２２℃)で３０分
間攪拌後、約５℃に冷やし、この温度で更に３０分間攪
拌する。沈澱した固体を減圧下に濾集し、ヘキサン／塩
化メチレン(３:２)(v:v)冷(０℃)溶液２６４mｌで洗
う。生成した結晶を減圧オーブン中、室温(２２℃)で乾
燥して所望の光学的対掌体８５.８gを得る。実施例１と
同様のＨＰＬＣ試験法により、回収した結晶は９９.６
％純度の２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−Ｄ−eryth
ro−ペントフラノース−１−ウロース−３,５−ジベン
ゾエート(融点１１６〜１１８℃)であることを確定し
た。

【００４６】実施例５ Ａ．Ｄ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−
２,２−ジフルオロペントフラノース−１−ウロースの
光学的対掌体混合物の製造 ５００mｌフラスコに、２,２−ジフルオロ−３−ヒドロ
キシ−３−(２,２−ジメチルジオキソラン−４−イル)
プロピオン酸エチルの(３−Ｒ−):(３−Ｓ−)光学的対
掌体(３:１)(部)混合物５０.０g(０.２モル)、エタノー
ル２５０mｌおよび６Ｎ硫酸６.０mｌを入れる。この溶
液をその還流温度(約７６℃)に加熱し、その温度で３.
５時間攪拌する。３.５時間後、エタノール／水混合物
１００mｌを蒸留し、新しいエタノール１００mｌに置き
換える。溶液を室温(２２℃)に冷やし、無水炭酸ナトリ
ウム４.５gを加える。１０分後、３Ａ分子篩２０gを加
える。得られた混合物を一夜冷蔵する。翌朝、炭酸ナト
リウムと分子篩を濾去し、生成した溶液を実施例１と同
様にＨＰＬＣ試験で同定し、溶液mｌ当りＤ−erythro−
およびＤ−threo−２−デオキシ−２,２−ジフルオロペ
ントフラノース−１−ウロース２３１ｍｇを含むことを
見いだした。溶液のカールフィツシャー分析により、水
分含量は水０.９重量％であることが示された。

【００４７】Ｂ．Ｄ−erythro−およびＤ−threo−２−
デオキシ−２,２−ジフルオロペントフラノース−１−
ウロース−３,５−ジベンゾエートの光学的対掌体混合
物の製造 上記生成物のエタノール溶液を減圧下に加熱してエタノ
ールを除く。生成した油状物を酢酸エチル１００mｌに
溶解する。溶液を減圧下に加熱して酢酸エチルを除く。
生成ガム状物質を塩化メチレン１００mｌに溶解する。
塩化メチレン溶液をカールフィツシャー分析するとその
水分含量は約０.０９重量％であることが示された。こ
の塩化メチレン溶液を更に塩化メチレン２２５mｌで希
釈し、次いで２,６−ルチジン４８.３g(０.４５モル)お
よび４−ジメチルアミノピリジン３.０g(０.０２モル)
を加える。得られた溶液を氷浴上、約８℃に冷やし、反
応溶液の温度が約１５℃以下に保持される速度で塩化ベ
ンゾイル６３.４g(０.４５モル)を更に１８分間に渡っ
て滴加する。塩化ベンゾイル滴加後、溶液を室温(２２
℃)に上昇させ、２,６−ルチジン塩酸塩が沈殿する。反
応混合物を順次、水２５０mｌ、炭酸水素ナトリウム５
重量％溶液２５mｌ、２Ｎ塩酸２５０mｌおよび飽和食塩
溶液２５０mｌで洗う。この塩化メチレン溶液を無水硫
酸マグネシウムで乾燥し、実施例１と同様のＨＰＬＣ試
験法で試験する。ＨＰＬＣ試験により塩化メチレン溶液
はＤ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−２,
２−ジフルオロペントフラノース−１−ウロース−３,
５−ジベンゾエート２８.３gを含むことが示された。

【００４８】Ｃ．２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−
Ｄ−erythro−ペントフラノース−１−ウロース−３,５
−ジベンゾエートの単離 上記のように製せられた塩化メチレン溶液を蒸留して濃
厚シロップ状物質に濃縮する。このシロップ状物質を新
鮮な塩化メチレン３０mｌに再溶解する。イソプロパノ
ール３００mｌを加え、Ｄ−エリトロ形生成物の結晶化
が始まる。１０分以内に生成物が粘稠なスラリーを形成
するような程度に沈殿する。スラリーの粘性を低下させ
るために更に塩化メチレン１０mｌとイソプロパノール
１００mｌを加え、この混合物を５℃で一夜冷蔵する。
沈殿した固体を減圧下に濾集し、冷(０℃)イソプロパノ
ールと冷(０℃)ヘキサンで順次洗う。生成した結晶を減
圧オーブン中、２２℃で乾燥し、得られたＤ−エリトロ
形生成物１７.４gを３００ＭＨz装置上、ＣＤＣｌ₃中Ｎ
ＭＲ分析により同定した:δ＝４.７０(一重線、２Ｈ);
４.９９(一重線、１Ｈ);５.７６(一重線、１Ｈ);７.４
〜８.２(広い多重線、１０Ｈ)。生成物(融点１１９〜１
１９.５℃)は２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−Ｄ−e
rythro−ペントフラノース−１−ウロース−３,５−ジ
ベンゾエート純度９５.０％以上であると考えられる。

【００４９】実施例６ Ａ．Ｄ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−
２,２−ジフルオロペントフラノース−１−ウロース−
３,５−ジベンゾエートの光学的対掌体混合物の製造 ２５０mｌフラスコに、実施例５の処理により製せられ
たＤ−erythro−およびＤ−threo−２−デオキシ−２,
２−ジフルオロペントフラノース−１−ウロースの光学
的対掌体混合物(エリトロ形光学的対掌体６２.４％)２.
３３g(１３.８９ミリモル)を含むメタノール／水(２:
１)(v:v)溶液７３mｌを加える。この溶液を減圧下に加
熱して油状物を得る。油状物を酢酸エチル１００mｌに
溶解し、溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥する。硫酸
マグネシウムを濾去した後、溶液を再び減圧下に濃縮し
て濃厚油状物を得る。この油状物を塩化メチレン１８m
ｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン０.１７g(１.
３８ミリモル)を加える。溶液を約０℃に冷やし、２,６
−ルチジン３.４１g(３１.８５ミリモル)と塩化ベンゾ
イル４.５０g(３１.９８ミリモル)を加える。溶液を室
温(２２℃)に上昇させた後、約６４時間攪拌する。攪拌
後、塩化メチレンで溶液容量を約５０mｌに増加させ
る。溶液を５重量％、塩酸溶液２５mｌ、５重量％炭酸
水素ナトリウム溶液２５mｌおよび水２５mｌで順次洗
う。この塩化メチレン溶液を無水硫酸マグネシウムで乾
燥し、減圧下に濃縮して油状物を得る。この油状物の分
析は行なわなかったが、所望のＤ−erythro−およびＤ
−threo−２−デオキシ−２,２−ジフルオロペントフラ
ノース−１−ウロース−３,５−ジベンゾエートの光学
的対掌体混合物であると考えられる。

【００５０】Ｂ．２−デオキシ−２,２−ジフルオロ−
Ｄ−erythro−ペントフラノース−１−ウロース−３,５
−ジベンゾエートの単離 上記油状物を塩化メチレン３.５mｌに溶解する。イソプ
ロパノール３５mｌを加え、溶液を氷浴上、約０℃に冷
やし、真正な化合物の種結晶を加える。約０℃で３時間
攪拌後、混合物を濾過する。濾過した固体を冷イソプロ
パノールおよび室温(２２℃)ヘキサンで洗い、減圧オー
ブン中、２２℃で乾燥し、生成物を実施例１と同様の分
析操作により、純度９７.０％の２−デオキシ−２,２−
ジフルオロ−Ｄ−erythro−ペントフラノース−１−ウ
ロース−３,５−ジベンゾエート０.８７gであることを
確定した。融点１１７〜１１８℃。また生成物を３００
ＭＨz装置上、ＣＤＣｌ₃中ＮＭＲ分析により同定した:
δ＝４.７０(一重線、２Ｈ);４.９９(一重線、１Ｈ);
５.７６(一重線、１Ｈ);７.４〜８.２(広い多重線、１
０Ｈ)。

【００５１】実施例７ ２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジンのα／β
−アノマー(１:１)混合物の製造 １,２−ジクロロエタン２５０mｌを入れた５００mｌ三
頚丸底フラスコに、２−デオキシ−２,２−ジフルオロ
−Ｄ−erythro−ペントフラノース−３,５−ジベンゾエ
ート−１−メタンスルホネート１５.００g(３２.８８ミ
リモル)、ビス−トリメチルシリル−Ｎ−アセチルシト
シン１５.６５g(５２.６０ミリモル)およびトリフルオ
ロメタンスルホニルオキシトリメチルシラン９.５０g
(４２.７４ミリモル)を加える。この溶液を還流温度(８
４℃)に約８時間加熱する。反応溶液を室温(２２℃)に
冷やし、５重量％の塩酸溶液１００mｌを加える。約５
分間攪拌後、各層を分離し、水層を塩化メチレン２５m
ｌで洗う。有機層を合して順次、５重量％炭酸水素ナト
リウム溶液１００mｌと飽和食塩溶液１００mｌで洗う。
得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧
下に濃縮して泡状物質を得る。

【００５２】メタノール１５０mｌを加えて泡状物を溶
解する。溶液を約０℃に冷やす。溶液にアンモニアガス
を約１分通して発泡させる。減圧下に揮発成分を除いて
ガム状物質を得る。ガム状物質を酢酸エチル１００mｌ
と水１００mｌに溶解する。各層を分離して有機層を水
２５mｌで洗う。双方の水層を合してジエチルエーテル
１００mｌで洗い、水溶液を減圧下に濃縮してガム状物
質を得る。メタノール約１０mｌを加えてガム状物質を
溶解する。この溶液を減圧下に濃縮乾固し、２'−デオ
キシ−２',２'−ジフルオロシチジン４.１４gを得る。
生成物をＨＰＬＣにより真正の対照標準化合物と比較
し、次のようにその特性決定を行なった。生成物３ｍｇ
を５mｌメスフラスコに入れ、０.１Ｎ塩酸で容量希釈す
る。カラムをメタノール５容量％と０.０４Ｍ酢酸ナト
リウム９５容量％から成る溶離剤で溶離する。使用する
カラムは２５cm・ＹＭＣ型Ａ−３０３である。検出器波
長２７５nm、カラム流速１.０mｌ／分、注入容量２０μ
ｌおよびカラム温度は雰囲気温度(２２℃)である。ＨＰ
ＬＣ試験により、２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロ
シチジンのα／β−アノマー(約１:１)混合物として、
生成物を確定した。

【００５３】実施例８ ９０.５％純度のβ−２'−デオキシ−２',２'−ジフル
オロシチジン塩酸塩の製造 前記実施例７に従って製せられた２'−デオキシ−２',
２'−ジフルオロシチジンのα／β−アノマー(約１:１)
混合物を、熱イソプロパノール(８０℃)６mｌに溶解す
る。この熱溶液に濃塩酸１５滴を加える。溶液に真正の
β−２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジン塩酸
塩の種結晶を加え、室温に冷やし、週末まで冷蔵する。
混合物を濾過し、濾過固体をイソプロパノールで洗い、
減圧下に２２℃で乾燥し、実施例７と同様の分析法によ
り試験し、９０.５％純度のβ−２'−デオキシ−２',
２'−ジフルオロシチジン塩酸塩としての生成物０.３８
gを得る。また生成物を３００ＭＨz装置上、ＣＤＣｌ₃
中でのＮＭＲ分析により次のように同定した：δ:３.８
１(三重線、２Ｈ)；３.９３(二重線、１Ｈ)；４.２３
(三重線、１Ｈ)；４.８０(二重線、２Ｈ)；６.０８(二
重線、１Ｈ)；６.３２(二重線、１Ｈ)；８.２１(二重
線、１Ｈ)；９.０(一重線、１Ｈ)；１０.１７(一重線、
１Ｈ)。室温で一夜放置後、濾液から更に結晶を生成さ
せる。これらの結晶を回収して前記のように乾燥し、前
記ＨＰＬＣ操作により確定された追加のβ−２'−デオ
キシ−２',２'−ジフルオロシチジン塩酸塩(８２.０％
純度)０.１７gを得る。

【００５４】実施例９ ９９．４％純度のβ−２’−デオキシ−２’，２’−ジ
フルオロシチジン塩酸塩の製造 還流冷却器を取り付けた５０ｍｌのフラスコに、２’−
デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン塩酸塩（実
施例８と同様の処理により製せられた８８．７％純度の
β−アノマー）１００．０ｍｇと水０．５ｍｌを加え
る。混合物を加熱還流（１００℃）して全固体を溶解す
る。この溶液を還流する間にアセトン１０ｍｌを加え
る。溶液を室温に冷やし、一夜冷蔵する。混合物をろ過
して生成した結晶を減圧オーブン中、２２℃で乾燥し、
実施例７に記載の分析法により確定した９９．４％純度
のβ−２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジ
ン塩酸塩６９．０ｍｇを得る。この物質のＮＭＲスペク
トルは実施例８記載のそれと同一である。

【００５５】実施例１０ ７９％純度のβ−２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロ
シチジン臭化水素酸塩の製造 前記実施例７の操作により製せられた２'−デオキシ−
２',２'−ジフルオロシチジンのα／β−アノマー(約
１:１)混合物３００ｍｇを、熱イソプロパノール(６０
℃)３mｌに実質的に溶解する。この熱溶液に水性臭化水
素酸(臭化水素酸４８重量％水溶液０.３mｌ)を加え、残
留固体すべてを溶解する。イソプロパノールを更に１m
ｌ加えて溶液を一夜冷蔵する。混合物を濾過し、濾過固
体をイソプロパノールで洗い、減圧下に２２℃で乾燥
し、得られた生成物１１０ｍｇを実施例７に記載の分析
法により、７９.０％純度のβ−２'−デオキシ−２',
２'−ジフルオロシチジン臭化水素酸塩としての分析結
果を得た(実施例７の分析法と異なる唯一の変法は、本
実施例の試料を容量希釈するため０.１Ｎ塩酸よりむし
ろ０.１Ｎ臭化水素酸を使用することにある)。 元素分析、Ｃ₉Ｈ₁₂Ｎ₃Ｏ₄Ｆ₂Ｂrとして、 計算値:Ｃ,３１.４１;Ｈ,３.５２;Ｎ,１２.２１;Ｆ,１
１.０４;Ｂr,２３.２２、 実測値:Ｃ,２９.５４;Ｈ,３.６４;Ｎ,１１.０２;Ｆ,１
０.９０;Ｂr,２３.１６。

【００５６】実施例１１ ２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジン塩酸塩の
α／β−アノマー(１:１)混合物の製造 Ａ．２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジンの製
造 １,２−ジクロロエタン２００mｌを入れた５００mｌ三
頚丸底フラスコに、Ｎ−アセチルシトシン１０.０g(６
５.７ミリモル)、１,１,１,３,３,３−ヘキサメチルジ
シラザン(ＨＭＤＳ)１２.０g(７４.５ミリモル)および
クロロトリメチルシラン(ＣＴＭＳ)０.４７g(４.３８ミ
リモル)を加える。このスラリーを加熱還流(８４℃)
し、１５分以内に溶液が生成する。溶液を約１時間還流
後、溶媒を除いて濃厚な残留物を得る。濃厚残留物を
１,２−ジクロロエタン２００mｌに溶解する。溶液にト
リフルオロメタンスルホニルオキシトリメチルシラン１
９.５５g(８８.０ミリモル)、ＨＭＤＳ３.６g(２２.２
ミリモル)およびＣＴＭＳ２.４g(２２.１ミリモル)を加
える。この溶液を室温(２２℃)で３０分間攪拌し、２−
デオキシ−２,２−ジフルオロ−Ｄ−erythro−ペントフ
ラノース−３,５−ジベンゾエート−１−メタンスルホ
ネートの１,２−ジクロロエタン溶液５８mｌ(溶媒mｌ当
りメタンスルホネート０.３４５g、全メタンスルホネー
ト２０.０g)を加える。溶液を約１８時間加熱還流(８４
℃)後、室温(２２℃)に冷やし、メタノール１０mｌと水
１４５mｌを加える。約５分間攪拌後、各層を分離し、
有機層を再び水１４５mｌと合する。再度、各層を分離
し、この２回の水層を合して１,２−ジクロロエタン２
５mｌで洗う。上記有機層をジクロロエタン洗液と合し
てこれを順次、５重量％炭酸水素ナトリウム溶液１４５
mｌと水１４５mｌで洗う。得られた有機層を無水硫酸マ
グネシウムで乾燥し、減圧下に濃縮して泡状物を得る。
メタノール２２０mｌを加えて泡状物を溶解する。溶液
を約５℃に冷やし、溶液にアンモニアガス６.０gを通し
て発泡させる。減圧下に揮発成分を除いて油状残留物を
得る。この残留物を酢酸エチル１４５mｌと水１４５mｌ
に溶解する。各層を分離し、有機層を水５０mｌで２回
洗う。水層を合してこの溶液を減圧下に濃縮乾固し、実
施例７記載のＨＰＬＣ方法で確定された２'−デオキシ
−２',２'−ジフルオロシチジンのα／β−アノマー(約
１:１)混合物８.４gを得る。

【００５７】Ｂ．２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロ
シチジン塩酸塩のα／β−アノマー(１:１)混合物の製
造 前項で製せられたガム状物質を熱(６０℃)イソプロパノ
ールに溶解する。熱溶液に試薬級濃塩酸５.１mｌを加え
る。この溶液を室温(２２℃)に冷やし、一夜冷蔵する。
沈殿生成物を減圧濾集し、順次、冷(５℃)イソプロパノ
ールおよびヘキサン(室温)で洗い、減圧オーブン中４０
℃で乾燥し、得られた化合物５.１５gを、実施例７記載
のＨＰＬＣ分析法により２'−デオキシ−２',２'−ジフ
ルオロシチジン塩酸塩のα／β−アノマー(約１:１)混
合物であるとの分析結果を得た。

【００５８】実施例１２ ２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジン塩酸塩の
α／β−アノマー(１:１)混合物から９７.７％純度のβ
−２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジンの製造 前記実施例１１で得られた２'−デオキシ−２',２'−ジ
フルオロシチジン塩酸塩のα／β−アノマー(約１:１)
混合物５gを、熱水(５０℃)５０mｌ含有１００mｌ丸底
フラスコに入れる。水のpＨが約３.０になるまで２Ｎ水
酸化ナトリウムを加え、その時点ですべての固体が溶解
する。５Ｎ水酸化ナトリウムを用いて水溶液のpＨを約
８.２に上昇させる。この塩基性溶液を室温(２２℃)に
冷やし、一夜冷蔵する。沈殿した固体を減圧下に濾集
し、pＨ８.５の冷水 ５mｌで洗い、減圧オーブン中、４
０℃で乾燥し、得られた生成物１.６５gは、実施例７記
載のＨＰＬＣ法により９７.７％純度のβ−２'−デオキ
シ−２',２'−ジフルオロシチジンであるとの分析結果
を得た。

【００５９】実施例１３ ２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジンのα／β
−アノマー(１:１)混合物から９８.８％純度のβ−２'
−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジンの製造 熱水(５０℃)１７mｌに、実施例１１記載の方法により
製せられた２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジ
ンのα／β−アノマー(１:１)混合物８.４gを加える。
この水溶液のpＨを２Ｎ水酸化ナトリウムで約８.２に上
昇させる。塩基性溶液を室温(２２℃)に冷やし、一夜冷
蔵する。沈殿した固体を減圧下に濾集し、冷水(pＨ８.
５)５mｌで洗い、減圧オーブン中、４０℃で乾燥した。
実施例７記載のＨＰＬＣ法により、得られた生成物は９
８.８％純度のβ−２'−デオキシ−２',２'−ジフルオ
ロシチジンであるとの分析結果が得られた。

【００６０】実施例１４ ９９.７％純度のβ−２'−デオキシ−２',２'−ジフル
オロシチジンからの１００％純度のβ−２'−デオキシ
−２',２'−ジフルオロシチジン塩酸塩の製造 熱水(５５℃)１００mｌを入れた５００mｌ四頚丸底フラ
スコに、実施例１２の処理により製せられた９９.７％
純度のβ−２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジ
ン２０.０gをゆっくり加える。このジフルオロシチジン
体を添加する間、同時にフラスコ中に、水溶液のpＨ約
３.０を維持するような速度で試薬級濃塩酸を加える。
ジフルオロシチジン体添加終了後、更に濃塩酸１３mｌ
を加える。この溶液を氷浴上、約０℃に冷やし、この温
度で約３時間攪拌する。沈殿した固体を減圧下に濾集
し、pＨ１.０の水５mｌとアセトン１０mｌで順次洗い、
減圧オーブン中、４５℃で乾燥した。得られた生成物２
１.３gは、実施例７記載のＨＰＬＣ法により、１００％
純度のβ−２'−デオキシ−２',２'−ジフルオロシチジ
ン塩酸塩であるとの分析結果が得られた。生成物を更に
３００ＭＨz装置上、ＮＭＲ分析を行なった結果、生成
物は実施例８記載の生成物と同一スペクトルを有するも
のであった。

フロントページの続き (72)発明者 ペリー・クラーク・ヒース アメリカ合衆国インディアナ46227、イ ンディアナポリス、サウス・デラウェア 7130番 (72)発明者 ローレンス・エドワード・パターソン アメリカ合衆国インディアナ46226、イ ンディアナポリス、イースト・フォーテ ィセカンド・ストリート3839番 (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C07H 19/06 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims (2)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 α／β−アノマー比が１：１である２’
   −デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン塩酸塩ま
   たは臭化水素酸塩のアノマー混合物を熱水に溶解し、ア
   セトンを加え、この溶液を−１０℃〜５０℃の温度に冷
   やし、沈殿した固体を集めることを特徴とする、少なく
   とも８０．０％純度のβ−２’−デオキシ−２’，２’
   −ジフルオロシチジン塩酸塩または臭化水素酸塩を選択
   的に単離する方法。
2. 【請求項２】 α／β−アノマー比が１：１である２’
   −デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン塩酸塩ま
   たは臭化水素酸塩のアノマー混合物を熱水に溶解し、ア
   セトンを加え、この溶液を−１０℃〜５０℃の温度に冷
   やし、沈殿した固体を集めることにより、少なくとも８
   ０．０％純度のβ−２’−デオキシ−２’，２’−ジフ
   ルオロシチジン塩酸塩または臭化水素酸塩を選択的に単
   離し、次いで、これを熱水に溶解し、アセトンを加え、
   この溶液を−１０℃〜５０℃の温度に冷やし、沈殿した
   固体を集めることからなる処理段階を包含する９９．０
   ％純度のβ−２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロ
   シチジン塩酸塩または臭化水素酸塩を選択的に単離する
   方法。