JP2856379B2 - 蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤 - Google Patents
蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤Info
- Publication number
- JP2856379B2 JP2856379B2 JP3509994A JP3509994A JP2856379B2 JP 2856379 B2 JP2856379 B2 JP 2856379B2 JP 3509994 A JP3509994 A JP 3509994A JP 3509994 A JP3509994 A JP 3509994A JP 2856379 B2 JP2856379 B2 JP 2856379B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein phosphatase
- acid derivative
- brown
- antitumor agent
- tetronic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Furan Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、テトロン酸誘導体物質
を有効成分とする蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫
瘍剤に関する。
を有効成分とする蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫
瘍剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】蛋白質のリン酸化及び脱リン酸化は生体
機能の基本的な調節機構の一つである。蛋白質のリン酸
化酵素を阻害する薬剤は、抗腫瘍剤として数多く報告さ
れているが、同じく細胞増殖にとって必須な役割を果た
している蛋白質脱リン酸化酵素に対する阻害物質につい
ては報告が少ない。
機能の基本的な調節機構の一つである。蛋白質のリン酸
化酵素を阻害する薬剤は、抗腫瘍剤として数多く報告さ
れているが、同じく細胞増殖にとって必須な役割を果た
している蛋白質脱リン酸化酵素に対する阻害物質につい
ては報告が少ない。
【０００３】抗腫瘍剤の分野では、蛋白質脱リン酸化酵
素の阻害剤は新しい作用機序であり（Proc. Natl. Aca
d. Sci. 86:9946-9950;(1989)，Proc. Natl. Acad. Sc
i. 89:12170-12174;(1992)．参照）、さらに特異性及び
有効性に優れた蛋白質脱リン酸化酵素阻害物質の開発が
望まれている。
素の阻害剤は新しい作用機序であり（Proc. Natl. Aca
d. Sci. 86:9946-9950;(1989)，Proc. Natl. Acad. Sc
i. 89:12170-12174;(1992)．参照）、さらに特異性及び
有効性に優れた蛋白質脱リン酸化酵素阻害物質の開発が
望まれている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、蛋白
質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤を提供することで
ある。
質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤を提供することで
ある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、蛋白質脱
リン酸化酵素の脱リン酸活性を阻害する物質の探索をし
た結果、特定のテトロン酸誘導体物質が蛋白質脱リン酸
化酵素の脱リン酸活性を阻害することを見出し、本発明
を完成した。即ち、本発明は、式(I)
リン酸化酵素の脱リン酸活性を阻害する物質の探索をし
た結果、特定のテトロン酸誘導体物質が蛋白質脱リン酸
化酵素の脱リン酸活性を阻害することを見出し、本発明
を完成した。即ち、本発明は、式(I)
【０００６】
【化３】
【０００７】で示されるテトロン酸誘導体物質を有効成
分として含有する蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤又は抗腫
瘍剤である。以下、本発明について詳細に説明する。本
発明の蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤の有効
成分は、式(I)
分として含有する蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤又は抗腫
瘍剤である。以下、本発明について詳細に説明する。本
発明の蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤の有効
成分は、式(I)
【０００８】
【化４】
【０００９】の構造式で示されるテトロン酸誘導体物質
である。このテトロン酸誘導体物質は、例えば、ストレ
プトミセス属に属し、蛋白質脱リン酸化酵素阻害活性を
有するテトロン酸誘導体物質を生産する能力を有する微
生物を培地に培養し、培養物から該テトロン酸誘導体物
質を採取することにより製造することができる。そのよ
うな微生物としては、例えば、ストレプトミセス・エス
ピー (Streptomyces sp.) 88-682が挙げられる。この菌
株の菌学的性質は次の通りである。 (I) 形態 シュクロース・硝酸寒天培地、スターチ・無機塩寒天培
地上の生育について顕微鏡及び電子顕微鏡により形態を
観察した。88-682株はストレプトミセス属に属する形態
を示した。その形態的特徴は次のとおりである。 １．基生菌糸：寒天上に良く生育し、分岐している。 ２．気菌糸：良く着生し、胞子柄は単純分岐、成熟した
胞子体は各胞子鎖に10個以上の胞子を有する直鎖を形成
する。電子顕微鏡の観察によると、胞子表面は平滑であ
り、胞子自体は円筒形となっており、その大きさは0.85
〜1.19×0.58〜0.66μｍである。胞子嚢、厚膜胞子、菌
核等の形成は認められない。 (II)各種培地上の性質 特許庁産業審査基準に従い、各種培地を調製し、接種10
日後に観察した結果を次に記載する。 (1) シュクロース・硝酸寒天培地 生育：中程度。
である。このテトロン酸誘導体物質は、例えば、ストレ
プトミセス属に属し、蛋白質脱リン酸化酵素阻害活性を
有するテトロン酸誘導体物質を生産する能力を有する微
生物を培地に培養し、培養物から該テトロン酸誘導体物
質を採取することにより製造することができる。そのよ
うな微生物としては、例えば、ストレプトミセス・エス
ピー (Streptomyces sp.) 88-682が挙げられる。この菌
株の菌学的性質は次の通りである。 (I) 形態 シュクロース・硝酸寒天培地、スターチ・無機塩寒天培
地上の生育について顕微鏡及び電子顕微鏡により形態を
観察した。88-682株はストレプトミセス属に属する形態
を示した。その形態的特徴は次のとおりである。 １．基生菌糸：寒天上に良く生育し、分岐している。 ２．気菌糸：良く着生し、胞子柄は単純分岐、成熟した
胞子体は各胞子鎖に10個以上の胞子を有する直鎖を形成
する。電子顕微鏡の観察によると、胞子表面は平滑であ
り、胞子自体は円筒形となっており、その大きさは0.85
〜1.19×0.58〜0.66μｍである。胞子嚢、厚膜胞子、菌
核等の形成は認められない。 (II)各種培地上の性質 特許庁産業審査基準に従い、各種培地を調製し、接種10
日後に観察した結果を次に記載する。 (1) シュクロース・硝酸寒天培地 生育：中程度。
【００１０】気菌糸：良好に形成し、黄みの白色を呈す
る。胞子の着生も良好。 裏面の色：黄みの白色。 可溶性色素：生成しない。 (2) グルコース・アスパラギン寒天培地 生育：中程度。
る。胞子の着生も良好。 裏面の色：黄みの白色。 可溶性色素：生成しない。 (2) グルコース・アスパラギン寒天培地 生育：中程度。
【００１１】気菌糸：形成しない。 裏面の色：淡緑褐色〜黒褐色。 可溶性色素：淡黄色。 (3) グリセリン・アスパラギン寒天培地 生育：中程度。
【００１２】気菌糸：中程度に形成し、白色〜淡灰色を
呈する。胞子の着生は認められない。 裏面の色：黒褐色。 可溶性色素：褐色。 (4) スターチ・無機塩寒天培地 生育：良好。
呈する。胞子の着生は認められない。 裏面の色：黒褐色。 可溶性色素：褐色。 (4) スターチ・無機塩寒天培地 生育：良好。
【００１３】気菌糸：良好に形成し、黄みの白色を呈す
る。胞子の着生は中程度。 裏面の色：淡黄褐色〜黒褐色。 可溶性色素：淡黄色。 (5) チロシン寒天培地 生育：良好。
る。胞子の着生は中程度。 裏面の色：淡黄褐色〜黒褐色。 可溶性色素：淡黄色。 (5) チロシン寒天培地 生育：良好。
【００１４】気菌糸：良好に形成し、白色〜淡灰色を呈
する。胞子の着生は認められない。 裏面の色：黒褐色。 可溶性色素：黒褐色。 (6) 栄養寒天培地 生育：良好。
する。胞子の着生は認められない。 裏面の色：黒褐色。 可溶性色素：黒褐色。 (6) 栄養寒天培地 生育：良好。
【００１５】気菌糸：形成しない。 裏面の色：淡褐色。 可溶性色素：生成しない。 (7) イースト・麦芽寒天培地 生育：良好。
【００１６】気菌糸：良好に形成し、黄みの白色を呈す
る。胞子の着生は認められない。 裏面の色：黒褐色。 可溶性色素：褐色。 (8) オートミール寒天培地 生育：良好。
る。胞子の着生は認められない。 裏面の色：黒褐色。 可溶性色素：褐色。 (8) オートミール寒天培地 生育：良好。
【００１７】気菌糸：良好に形成し、黄みの白色を呈す
る。胞子の着生は認められない。 裏面の色：淡褐色〜淡黒褐色。 可溶性色素：淡黄色。 (9) ペプトン・イースト・鉄寒天培地 生育：良好。
る。胞子の着生は認められない。 裏面の色：淡褐色〜淡黒褐色。 可溶性色素：淡黄色。 (9) ペプトン・イースト・鉄寒天培地 生育：良好。
【００１８】気菌糸：形成しない。 裏面の色：黒褐色。 可溶性色素：黒褐色。 (III) 生理的性質 (1) 生育温度範囲：11℃〜37℃。 (2) 最適生育温度：28℃〜32℃。 (3) スターチの加水分解：陽性。 (4) 脱脂粉乳：凝固性 陽性。
【００１９】ペプトン化 陰性。 (5) メラニン様色素の生成： チロシン寒天培地 陽性。 ペプトン・イースト・鉄寒天培地 陽性。 (6) ゼラチンの液化：陰性。 (IV)各種炭素源の利用性 プリドハム・ゴトリープ寒天培地（ディフコ製）に各種
の糖を添加して88-682株を培養した結果は次の通りであ
る。
の糖を添加して88-682株を培養した結果は次の通りであ
る。
【００２０】L-アラビノース ：＋ D-キシロース ：＋ D-グルコース ：＋＋ D-フラクトース ：＋ シュークロース ：− イノシトール ：＋ L-ラムノース ：− ラフィノース ：＋＋ D-マンニトール ：− 注）＋＋：良く生育する ＋ ：生育する − ：生育しない (V) 全菌体中のジアミノピメリン酸 全菌体中のジアミノピメリン酸を分析した結果、L,L-ジ
アミノピメリン酸を検出した。
アミノピメリン酸を検出した。
【００２１】88-682株の菌学的性質は以上の如くである
が、本菌株の特徴を要約すると次のとおりである。 １．気菌糸をよく着生し、色調は黄みの白色から淡灰色
を呈する。胞子柄は単純分岐、10個以上の胞子が連鎖し
胞子連鎖は直状。胞子は円筒形、表面は平滑である。ス
トレプトミセス属に属する形態を有する。 ２．菌の集落の裏面は主に単褐色から黒褐色を呈する。 ３．メラニン様色素を形成する。 ４．シュクロース、ラムノース、マンニトールを除き各
種の糖を利用する。 ５．L,L-ジアミノピメリン酸を有する。
が、本菌株の特徴を要約すると次のとおりである。 １．気菌糸をよく着生し、色調は黄みの白色から淡灰色
を呈する。胞子柄は単純分岐、10個以上の胞子が連鎖し
胞子連鎖は直状。胞子は円筒形、表面は平滑である。ス
トレプトミセス属に属する形態を有する。 ２．菌の集落の裏面は主に単褐色から黒褐色を呈する。 ３．メラニン様色素を形成する。 ４．シュクロース、ラムノース、マンニトールを除き各
種の糖を利用する。 ５．L,L-ジアミノピメリン酸を有する。
【００２２】以上の諸性状を「インターナショナル・ジ
ャーナル・オブ・システマティック・バクテリオロジー
（International Journal of Systematic Bacteriolog
y）」第18巻、第69〜189 頁、第279 〜392 頁、（1968
年）、第19巻、第391 〜512 頁（1969年）及び第22巻、
第265 〜394 頁（1972年）並びに「バージェイズ・マニ
ュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー
（Bergey's Manual ofSystematic Bacteriology）」第
４巻（1989年）に報告されている多くの既知菌株と比較
した結果、ストレプトミセス・ナシュビレンシス（Stre
ptomycesnashvillensis）の性状と極めて類似している
ことが判明したが、88-682株とは気菌糸の色調や炭素源
の利用において若干の相違が認められ、同一種とする決
定的な根拠が得られなかったので、本菌株をストレプト
ミセス・エスピー（Streptomyces sp.）88-682株と命名
した。この菌株は、青森県黒石市の土壌から採取・分離
されたものであり、工業技術院生命工学工業技術研究所
にFERM P-14189として寄託されている。
ャーナル・オブ・システマティック・バクテリオロジー
（International Journal of Systematic Bacteriolog
y）」第18巻、第69〜189 頁、第279 〜392 頁、（1968
年）、第19巻、第391 〜512 頁（1969年）及び第22巻、
第265 〜394 頁（1972年）並びに「バージェイズ・マニ
ュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー
（Bergey's Manual ofSystematic Bacteriology）」第
４巻（1989年）に報告されている多くの既知菌株と比較
した結果、ストレプトミセス・ナシュビレンシス（Stre
ptomycesnashvillensis）の性状と極めて類似している
ことが判明したが、88-682株とは気菌糸の色調や炭素源
の利用において若干の相違が認められ、同一種とする決
定的な根拠が得られなかったので、本菌株をストレプト
ミセス・エスピー（Streptomyces sp.）88-682株と命名
した。この菌株は、青森県黒石市の土壌から採取・分離
されたものであり、工業技術院生命工学工業技術研究所
にFERM P-14189として寄託されている。
【００２３】ストレプトミセス・エスピー 88-682 株
は、他のストレプトミセス属の放線菌と同様に、その性
状が変化しやすく、たとえば紫外線、エックス線、放射
線、人工変異剤などを用いる人工的変異手段で容易に変
異しうるものであり、このような変異であっても、蛋白
質脱リン酸化酵素の脱リン酸活性を阻害する活性を有す
るテトロン酸誘導体物質の生産能を有するものは、すべ
て使用することができる。
は、他のストレプトミセス属の放線菌と同様に、その性
状が変化しやすく、たとえば紫外線、エックス線、放射
線、人工変異剤などを用いる人工的変異手段で容易に変
異しうるものであり、このような変異であっても、蛋白
質脱リン酸化酵素の脱リン酸活性を阻害する活性を有す
るテトロン酸誘導体物質の生産能を有するものは、すべ
て使用することができる。
【００２４】上記微生物の培養に使用する培地として
は、窒素源、無機塩類、ビタミン類、その他の栄養源を
適宜含有した培地を使用すればよい。ここで、窒素源と
しては、例えば硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、
硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウム等の無機態窒素
源でも、例えば尿素、イーストエキス、ペプトン、グル
タミン酸又はグルタミン酸ナトリウム等の有機態窒素源
でもよい。培地のｐＨは、６〜10、好ましくは6.5 〜7.
5 、培養温度は、通常10〜35℃、好ましくは20〜27℃で
ある。
は、窒素源、無機塩類、ビタミン類、その他の栄養源を
適宜含有した培地を使用すればよい。ここで、窒素源と
しては、例えば硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、
硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウム等の無機態窒素
源でも、例えば尿素、イーストエキス、ペプトン、グル
タミン酸又はグルタミン酸ナトリウム等の有機態窒素源
でもよい。培地のｐＨは、６〜10、好ましくは6.5 〜7.
5 、培養温度は、通常10〜35℃、好ましくは20〜27℃で
ある。
【００２５】培養は、微生物の生育状況等により適宜決
定し得るが、通常は３〜14日間好気的条件下で行う。培
養物からのテトロン酸誘導体物質の単離・精製は、微生
物代謝生産物を培養物から単離・精製するために常用さ
れる方法、例えば有機溶媒による抽出、吸着剤による吸
着及び溶出、クロマトグラフィー等を適当に組み合わせ
て実施することができる。
定し得るが、通常は３〜14日間好気的条件下で行う。培
養物からのテトロン酸誘導体物質の単離・精製は、微生
物代謝生産物を培養物から単離・精製するために常用さ
れる方法、例えば有機溶媒による抽出、吸着剤による吸
着及び溶出、クロマトグラフィー等を適当に組み合わせ
て実施することができる。
【００２６】以上の微生物等によって得られるテトロン
酸誘導体物質を、その蛋白質脱リン酸化酵素活性の阻害
作用に基づく蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤又は抗腫瘍剤
として使用する場合の投与方法は次の通りある。注射剤
として使用する場合、本有効成分にpH調整剤、緩衝剤、
安定化剤、賦形剤等を添加してもよい。また、常法によ
って凍結乾燥を行ない、凍結乾燥注射剤とても使用する
ことができる。さらには、本有効成分にpH調整剤、緩衝
剤、安定化剤、等張剤、局麻剤糖を添加し、常法により
溶液又は懸濁液の形の皮下、筋肉内、静脈内用注射剤と
しても使用することができる。
酸誘導体物質を、その蛋白質脱リン酸化酵素活性の阻害
作用に基づく蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤又は抗腫瘍剤
として使用する場合の投与方法は次の通りある。注射剤
として使用する場合、本有効成分にpH調整剤、緩衝剤、
安定化剤、賦形剤等を添加してもよい。また、常法によ
って凍結乾燥を行ない、凍結乾燥注射剤とても使用する
ことができる。さらには、本有効成分にpH調整剤、緩衝
剤、安定化剤、等張剤、局麻剤糖を添加し、常法により
溶液又は懸濁液の形の皮下、筋肉内、静脈内用注射剤と
しても使用することができる。
【００２７】一方、固形製剤として使用する場合は、本
有効成分に通常の賦形剤、安定化剤、必要によって結合
剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を添加
し、常法により錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等にす
ることができる。本有効成分物質の投与量は、投与方
法、症状によって変動するが、通常は成人に対する１回
投与量として0.1 〜1000mg/kg が好ましく、１日３回又
は症状によって１日３回以上投与する。
有効成分に通常の賦形剤、安定化剤、必要によって結合
剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を添加
し、常法により錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等にす
ることができる。本有効成分物質の投与量は、投与方
法、症状によって変動するが、通常は成人に対する１回
投与量として0.1 〜1000mg/kg が好ましく、１日３回又
は症状によって１日３回以上投与する。
【００２８】
【実施例】以下、実施例により本発明を更に具体的に説
明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定される
ものではない。 （製造例１）グルコース２％、可溶性澱粉１％、肉エキ
ス0.1 ％、酵母0.4 ％、食塩0.2 ％、リン酸第二カリウ
ム0.005 ％、及び大豆粉2.5 ％の組成からなる培地 (pH
7.0)に、放線菌88-682株を接種して、28℃で96時間振
盪培養を行った。この培養液350mlを同組成の培地36Lに
接種し、28℃で96時間にわたって毎分18Lの通気を行い
ながら、毎分300 回転の攪拌培養を行った。
明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定される
ものではない。 （製造例１）グルコース２％、可溶性澱粉１％、肉エキ
ス0.1 ％、酵母0.4 ％、食塩0.2 ％、リン酸第二カリウ
ム0.005 ％、及び大豆粉2.5 ％の組成からなる培地 (pH
7.0)に、放線菌88-682株を接種して、28℃で96時間振
盪培養を行った。この培養液350mlを同組成の培地36Lに
接種し、28℃で96時間にわたって毎分18Lの通気を行い
ながら、毎分300 回転の攪拌培養を行った。
【００２９】上記培養液を高速遠心分離器（15000 回転
／分）で菌体と上清に分離し、70％アセトン12Lを用い
て菌体を抽出した。減圧濃縮後、得られた水溶液をpH
3.0に調製し、５Lの酢酸エチルで２回抽出を繰り返し
た。抽出後、全ての酢酸エチルを合わせて減圧濃縮し、
褐色のシロップ43.7gを得た。得られたシロップ43.7gを
クロロホルム30mlに溶解し、クロロホルムで調製したシ
リカゲルカラム（直径６cm、長さ90cm）に浸潤させ、最
初にクロロホルムを２L流した後、クロロホルム−メタ
ノール溶液を配合割合を順次変えて（99：１、19：１、
９：１、４：１、１：１）それぞれ１Lづつ流し、最後
にメタノール２Lを流した。
／分）で菌体と上清に分離し、70％アセトン12Lを用い
て菌体を抽出した。減圧濃縮後、得られた水溶液をpH
3.0に調製し、５Lの酢酸エチルで２回抽出を繰り返し
た。抽出後、全ての酢酸エチルを合わせて減圧濃縮し、
褐色のシロップ43.7gを得た。得られたシロップ43.7gを
クロロホルム30mlに溶解し、クロロホルムで調製したシ
リカゲルカラム（直径６cm、長さ90cm）に浸潤させ、最
初にクロロホルムを２L流した後、クロロホルム−メタ
ノール溶液を配合割合を順次変えて（99：１、19：１、
９：１、４：１、１：１）それぞれ１Lづつ流し、最後
にメタノール２Lを流した。
【００３０】活性はクロロホルムーメタノール溶液
（４：１）の画分に溶出した。これを減圧濃縮すること
によって12.3gの白色粉末を得た。さらにこの白色粉末
をクロロホルム−メタノール溶液（１：１）に溶解し、
同じ溶液で調製したセファデックス LH-20（ファルマシ
ア社製）のカラム（直径4.5 cm、長さ120 cm）にかけ
て、クロロホルム−メタノール溶液（１：１）で溶出し
た。それぞれ10mlずつ分画し、主な活性画分であるフラ
クションNo.39-48を集め、このフラクションから減圧濃
縮により1.1 gの白色粉末を得た。
（４：１）の画分に溶出した。これを減圧濃縮すること
によって12.3gの白色粉末を得た。さらにこの白色粉末
をクロロホルム−メタノール溶液（１：１）に溶解し、
同じ溶液で調製したセファデックス LH-20（ファルマシ
ア社製）のカラム（直径4.5 cm、長さ120 cm）にかけ
て、クロロホルム−メタノール溶液（１：１）で溶出し
た。それぞれ10mlずつ分画し、主な活性画分であるフラ
クションNo.39-48を集め、このフラクションから減圧濃
縮により1.1 gの白色粉末を得た。
【００３１】最後に、ODSカラム（直径２cm、長さ25cm;
カプセルパック、資生堂社製）を用いて高速液体クロ
マトグラフィーによる分取を行った。なお、用いた溶媒
はテトラヒドロフランー水（２：３）であり、流速は6.
0 ml／分で Rt.は14.1分であった。この結果、白色粉末
として精製標品約170 mgを得た。得られた精製標品の理
化学的性質について調べたところ、以下の通りであっ
た。 (a) 分子式：Ｃ21Ｈ36Ｏ5 (b) 分子量：368 (c) 融点：225 〜227 ℃ (d) 外観：白色粉末 (e) 物質の性状：酸性物質
カプセルパック、資生堂社製）を用いて高速液体クロ
マトグラフィーによる分取を行った。なお、用いた溶媒
はテトラヒドロフランー水（２：３）であり、流速は6.
0 ml／分で Rt.は14.1分であった。この結果、白色粉末
として精製標品約170 mgを得た。得られた精製標品の理
化学的性質について調べたところ、以下の通りであっ
た。 (a) 分子式：Ｃ21Ｈ36Ｏ5 (b) 分子量：368 (c) 融点：225 〜227 ℃ (d) 外観：白色粉末 (e) 物質の性状：酸性物質
【００３２】
【００３３】(g) 溶解性：熱メタノールに易溶。酢酸エ
チル、クロロホルム及びメタノールに可溶。水に不溶。 (h) 呈色反応：Ｉ2 による呈色反応に陽性。塩化第二鉄
に陰性。 (i) 紫外線吸収スペクトル： λmax(MeOH)(ε) ；230 nm（2570）、265 nm（2755）
（図１） (j) 赤外線吸収スペクトル：3400、2920、1710、1640、
1460cm-1（図２） (k) 核磁気共鳴スペクトル： 重メタノール中で測定した 1Ｈ−ＮＭＲの結果・・・図
３に示す通りである。
チル、クロロホルム及びメタノールに可溶。水に不溶。 (h) 呈色反応：Ｉ2 による呈色反応に陽性。塩化第二鉄
に陰性。 (i) 紫外線吸収スペクトル： λmax(MeOH)(ε) ；230 nm（2570）、265 nm（2755）
（図１） (j) 赤外線吸収スペクトル：3400、2920、1710、1640、
1460cm-1（図２） (k) 核磁気共鳴スペクトル： 重メタノール中で測定した 1Ｈ−ＮＭＲの結果・・・図
３に示す通りである。
【００３４】重メタノール中で測定した13Ｃ−ＮＭＲの
結果・・・図４に示す通りである。 以上の理化学的性質に基づき、本物質の構造を決定した
結果、該物質は式(I)
結果・・・図４に示す通りである。 以上の理化学的性質に基づき、本物質の構造を決定した
結果、該物質は式(I)
【００３５】
【化５】
【００３６】の構造式で示されるテトロン酸誘導体物質
であった。 （試験例１）製造例１で得られたテトロン酸誘導体物質
の活性を以下の方法に従って測定した。まず、pGEX-VHR
遺伝子を導入した大腸菌から、可溶化した抽出液をグル
タチオン−アガロースゲルに吸着させ、５mMグルタチオ
ンで溶出して、蛋白質脱リン酸化酵素を調製した。この
蛋白質脱リン酸化酵素に3.125 、6.25、12.5及び25.0μ
g/mlの濃度となるようにテトロン酸誘導体物質を加え、
基質としてパラニトロフェニルホスフェート（シグマ社
製）を用い、37℃で30分間反応させた。反応後、１Ｎの
水酸化ナトリウムを加え、生成したパラニトロフェノー
ルの吸光度をEIAリーダー（モデル２５５０：バイオラ
ッド社製）で測定した。この測定結果に基づき、テトロ
ン酸誘導体物質の各濃度における蛋白質脱リン酸化酵素
活性の阻害率を算出した。結果を表１に示す。
であった。 （試験例１）製造例１で得られたテトロン酸誘導体物質
の活性を以下の方法に従って測定した。まず、pGEX-VHR
遺伝子を導入した大腸菌から、可溶化した抽出液をグル
タチオン−アガロースゲルに吸着させ、５mMグルタチオ
ンで溶出して、蛋白質脱リン酸化酵素を調製した。この
蛋白質脱リン酸化酵素に3.125 、6.25、12.5及び25.0μ
g/mlの濃度となるようにテトロン酸誘導体物質を加え、
基質としてパラニトロフェニルホスフェート（シグマ社
製）を用い、37℃で30分間反応させた。反応後、１Ｎの
水酸化ナトリウムを加え、生成したパラニトロフェノー
ルの吸光度をEIAリーダー（モデル２５５０：バイオラ
ッド社製）で測定した。この測定結果に基づき、テトロ
ン酸誘導体物質の各濃度における蛋白質脱リン酸化酵素
活性の阻害率を算出した。結果を表１に示す。
【００３７】
【表１】
【００３８】この結果、ストレプトミセス・エスピー 8
8-682 株から製造したテトロン酸誘導体物質は、蛋白質
脱リン酸化酵素の活性を阻害することが明らかとなっ
た。
8-682 株から製造したテトロン酸誘導体物質は、蛋白質
脱リン酸化酵素の活性を阻害することが明らかとなっ
た。
【００３９】
【発明の効果】本発明によれば、蛋白質脱リン酸化酵素
阻害剤及び抗腫瘍剤を提供することができる。
阻害剤及び抗腫瘍剤を提供することができる。
【図１】 テトロン酸誘導体物質の紫外線吸収スペクト
ル（methanol）のチャートである。
ル（methanol）のチャートである。
【図２】 テトロン酸誘導体物質の赤外線吸収スペクト
ル（Neat）のチャートである。
ル（Neat）のチャートである。
【図３】 テトロン酸誘導体物質の 1Ｈ−NMR (methano
l-d4) の結果を表すチャートである。
l-d4) の結果を表すチャートである。
【図４】 テトロン酸誘導体物質の13Ｃ−NMR (methano
l-d4) の結果を表すチャートである。
l-d4) の結果を表すチャートである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者 濱口 卓也 東京都豊島区高田３丁目24番１号 大正 製薬株式会社内 (56)参考文献 特開 平５−43568（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) A61K 31/365 C07D 307/60 ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (2)
- 【請求項１】 式(I) 【化１】 で示されるテトロン酸誘導体物質を有効成分として含有
する蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤。 - 【請求項２】 式(I) 【化２】 で示されるテトロン酸誘導体物質を有効成分として含有
する抗腫瘍剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3509994A JP2856379B2 (ja) | 1994-03-04 | 1994-03-04 | 蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3509994A JP2856379B2 (ja) | 1994-03-04 | 1994-03-04 | 蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07242545A JPH07242545A (ja) | 1995-09-19 |
| JP2856379B2 true JP2856379B2 (ja) | 1999-02-10 |
Family
ID=12432500
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3509994A Expired - Fee Related JP2856379B2 (ja) | 1994-03-04 | 1994-03-04 | 蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2856379B2 (ja) |
-
1994
- 1994-03-04 JP JP3509994A patent/JP2856379B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH07242545A (ja) | 1995-09-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4521145B2 (ja) | 抗生物質カプラザマイシン類およびその製造法 | |
| JP4054576B2 (ja) | 抗生物質トリプロペプチン類およびその製造法 | |
| EP0345735A2 (en) | Glycoside antibiotics BU-3608D and BU-3608E | |
| JP2856379B2 (ja) | 蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤及び抗腫瘍剤 | |
| JPH0641067A (ja) | 新規カルパイン阻害物質ｋｐ−１２４１及びその製造法 | |
| US4780311A (en) | Antihypercholesterolemic tri-yne carbonates | |
| KR950013857B1 (ko) | 신규 항생물질 무레이도마이신 a, b, c 및 d 그의 제조 방법 및 치료학적 용도 | |
| JPH0912550A (ja) | ２， ２’ −ビピリジン誘導体、その製造方法及び該誘導体を含有する抗腫瘍剤 | |
| JPH03157372A (ja) | Ｙｌ―０１８６９ｐ物質及びその製造法 | |
| JPH10234396A (ja) | 新規抗腫瘍剤およびソヤサポゲノールｂの製造法 | |
| US4833079A (en) | Process for producing 3,7-dihydroxytropolone and antitumor use thereof | |
| US4883758A (en) | Biologically pure culture of the microorganism Streptomycas tropolofaciens used for producing 3,7-dihydroxytropolone and antitumor use | |
| US5096817A (en) | Process for producing antibiotics BU-3608 D and BU-3608 E | |
| JP3564566B2 (ja) | 新規ｒｋ−７５物質、その製造方法及び用途 | |
| KR100942368B1 (ko) | 신규한 스트렙토마이세스 속 ｙａ1766 균주 | |
| JP3066166B2 (ja) | 新規化合物ｈｃ３４、その使用および製造 | |
| WO2001046451A1 (fr) | Migrastatine, procede de production et compositions medicales correspondants | |
| KR100427411B1 (ko) | 아스퍼질러스 속 Ｆ７０６０９（ＫＣＴＣ１８０５５Ｐ）와 β－글루코시다제 저해제 | |
| JPH10114777A (ja) | 抗生物質スピロキシマイシンとその製造法 | |
| JPH0429995A (ja) | 新規抗生物質ｗｆ３０１０およびその製造法 | |
| JP2007131552A (ja) | 新規抗生物質ｓｆ２８５６物質、その製造法および医薬組成物 | |
| JPH02167092A (ja) | リソリピンｘを含む抗腫瘍剤およびリソリピンｘの製造法 | |
| NO174432B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av antitumor-aktive forbindelser, samt biologisk ren kultur av streptomyces hygroscopicus ATCC 53709 | |
| JPS62434A (ja) | 新規化合物ｓｓ７３１３ａ及びその製造法並びにこれを含有する免疫調節剤 | |
| JPH0585998A (ja) | 新規化合物ｃａ３９‐ａおよびｃａ３９‐ｂ、ならびにその使用および製造 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20071127 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081127 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081127 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091127 Year of fee payment: 11 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101127 Year of fee payment: 12 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111127 Year of fee payment: 13 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |