JP2740640B2 - Ｌｅｕ３表現型Ｔ細胞媒介性自己免疫病の治療用組成物 - Google Patents
Ｌｅｕ３表現型Ｔ細胞媒介性自己免疫病の治療用組成物Info
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Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は製薬組成物の分野に
属し、特に、Ｌｅｕ３表現型Ｔ細胞媒介性自己免疫病の
治療用組成物に関する。 【０００２】 【従来の技術】自己免疫（自己抗原に対する免疫）は多
くの免疫病において中心的役割を担っている。自己免疫
は、Ｂ細胞の活性とあるＴ細胞の活性とが免疫学的に不
均衡になることにより生じ、特に、調節Ｔ細胞における
サプレッサー活性とヘルパー活性との間のバランスがく
ずれることにより生じることが知られている。自己免疫
病のモデルあるいは患者におけるＴ細胞サブセットの分
布を調べた研究により、所定の自己免疫病には特別なＴ
細胞サブセットが関与することが示唆されている。例え
ば、Ｌｅｕ３（Ｔ４）表現型（マウスではＬ３Ｔ４と呼
ばれている）のヒトヘルパーＴ細胞は、多発性硬化症お
よびそれに対応する実験モデルである実験的アレルギー
性脳脊髄炎（ＥＡＥ）の発病に関与する。 【０００３】Science（1983）219：308-310。Ｔ細胞枯
渇実験動物はＥＡＥを進行させる能力を欠失しているこ
とが示された。J Exp Med（1962）116：177-186およびS
cience（1974）186：839-841。 【０００４】Immunological Rev（1983）74：30-56に
は、Ｌ３Ｔ４表現型ネズミＴ細胞を認識し補体存在下で
細胞溶解性の高いラットモノクローナル抗体が記載され
ている。J Exp Med（1981）153：193-198には、これに
相当するネズミモノクローナル抗Ｌｅｕ３抗体が述べら
れている。Monoclonal Antibodies and T Cell Product
s（1982）CRC Press, Katz, D. H., Ed., pp 71-89に
は、ヒトヘルパー／インデューサーＴ細胞を選択的に認
識するネズミモノクローナル抗体が記載され、これはＯ
ＫＴ４と命名されている。この文献には、慢性関節リウ
マチ、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、シェー
グレン病、甲状腺疾患および重症筋無力症を含む自己免
疫病の一般的な特徴として、ＯＫＴ８+Ｔ細胞（サプレ
ッサー／細胞障害性Ｔ細胞）に対するＯＫＴ４+Ｔ細胞
の割合が増加することあるいはＴ細胞サブセット間の相
互関係が欠失することが示されている。 【０００５】Nature（1984）312：548-551には、抗Ｌ３
Ｔ４抗体を器官移植の際の免疫抑制薬として用いること
が述べられている。 【０００６】 【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、Ｌｅ
ｕ３表現型Ｔ細胞媒介性自己免疫病の治療用組成物を提
供することにある。 【０００７】 【課題を解決するための手段】本発明の組成物は、Ｌｅ
ｕ３表現型Ｔ細胞媒介性の自己免疫病の治療に用いられ
る組成物であって、Ｔ細胞に対し細胞障害性を有しかつ
補体結合するイソタイプの抗Ｌｅｕ３抗体を含有する。 【０００８】 【発明の実施の形態】「Ｌｅｕ３」という言葉は、ここ
でヒトの治療に関連して用いられるように、ヒトヘルパ
ーＴ細胞に限定される特別な膜抗原を意味するものとす
る。この抗原はJ Exp Med（1981）153：193-198に記載
されている。便宜上「Ｌｅｕ３」という言葉は、上記ヒ
トＴ細胞膜抗原のみでなく他の種に見られるこれと相同
なＴ細胞膜抗原をも指して用いられる場合がある。 【０００９】「モノクローナル抗体」という言葉はここ
では、相同な抗体集団を持つ抗体成分を意味し、この集
団のメンバーは同一の抗原決定基に結合する。 【００１０】「治療する（treat)」および「治療（ther
apy)」という言葉およびその同原語はここでは、予防あ
るいは現疾患の減弱化を意味するものとする。従って、
本発明の方法はＬｅｕ３+Ｔ細胞媒介性の自己免疫病を
予防あるいは軽減するために用いることができる。 【００１１】Ｔ細胞サブセットを特徴づける膜抗原は哺
乳動物種間では非常によく保存されていると考えられて
いる。よって、Ｌｅｕ３相同物が他の哺乳動物種に存在
する。そこで、本発明の組成物は、ヒトの場合は抗Ｌｅ
ｕ３を用い、他の種ではＬｅｕ３相同物に対する抗体を
用いることにより、哺乳動物一般に対して自己免疫病の
治療に利用することができる。ここで、まず第一にヒト
の治療に用いられ、次いで、家畜、ペット、および競技
用動物の治療に用いられることは言うまでもない。 【００１２】指摘されているように、本発明の組成物を
用いて治療することが可能な自己免疫病はＬｅｕ３表現
型Ｔ細胞媒介性のものである。このような病気には、多
発性硬化症、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデ
ス、乾癬、若年型糖尿病、シェーグレン病、甲状腺疾患
および重症筋無力症が含まれる。 【００１３】抗Ｌｅｕ３抗体はモノクローナル抗体もし
くは精製ポリクローナル抗体であってよいが、モノクロ
ーナル抗体の方が好ましい。抗Ｌｅｕ３は種間で抗原交
叉応答を引き起こすことはないらしいので、抗体の哺乳
動物種は重要ではない。現在興味をもたれているモノク
ローナル抗体はマウスもしくはラット由来のものが典型
的である。これは、囓歯類の腫瘍融合パートナーが交雑
に有効であるからである。モノクローナル抗体はKohle
r, G. and Milstein, C., Nature（1975）256：495-497
に最初に記載された体細胞交雑法により作ることができ
る。抗Ｌｅｕ３産生リンパ球融合パートナーは、ヒト末
梢血液リンパ球あるいはＴ細胞が濃縮されたヒト末梢血
液リンパ球を用いて適当な宿主動物を免疫化して作るこ
とができる。 【００１４】抗Ｌｅｕ３抗体はヒト補体を結合するイソ
タイプのもので、かつ標的Ｌｅｕ３+Ｔ細胞に対し強い
細胞障害性を有する。抗体の結合定数は正常では少なく
とも107L/mol程度であり、普通107〜108L/molである。 【００１５】抗体は、注射投与用として、製剤的に投与
しやすくするための従来の非経口賦形剤とともに処方し
てもよい。このような賦形剤には、本来、毒性も治療効
果もない。例えば、水、食塩水、リンガー溶液、ブドウ
糖溶液およびハンク溶液がある。製剤組成として、等張
性を維持する物質、生理学的pHを維持する物質（例え
ば、緩衝剤）および安定性を維持する物質（防腐剤）の
ような添加物を微量含有してもよい。抗体は、実質的に
凝集物および他の蛋白質を含まない精製状態で、約0.1
〜10mg/mlの濃度で処方するのが好ましい。抗体は非経
口投与、代表的には静注投与してもよく、このとき巨丸
剤として１回投与してもあるいは間欠もしくは連続投与
してもよい。投与量は患者および患者の既往歴に依る。
投与量は、患者のＬｅｕ３+Ｔ細胞集団の実質量部、普
通その約90％以上を枯渇させるに十分な量でなければな
らない。代表的な成人用量は約10mgと100mgの範囲内に
ある。小児用量または他の動物種への投与量は成人用量
から相対体重に基づいて換算する。 【００１６】 【実施例】 (抗Ｌ３Ｔ４によるＥＡＥの予防)感受性マウスＳＪＬ/
Ｊの尾部静脈に、百日咳菌（Bordetella pertussis）の
生菌30×109を含むリン酸緩衝塩溶液（ＰＢＳ）0.5mlを
注射した。次いで、マウス脊髄ホモジネート（ＭＳＣ
Ｈ）５mgを、Freundの完全アジュバントと４mg/mlH37Ra
マイコバクテリウム含有ＰＢＳの１：１エマルジョン0.
1mlに懸濁し、後肢パッドに注射して、マウスを免疫化
した。２日目、再度百日咳生菌を注射した。このように
して誘導されたＥＡＥは次のような特徴的な臨床経過を
示す。免疫処理12〜15日後に症状の最初の徴候（体重が
減少し、毛がぼうぼうとなりそして尾が弱々しくなる）
が出現し、その５〜７日後にわたり後肢麻痺が進行しと
きには完全な麻痺状態となる。そしてマウスは、21日後
までには、死亡するかあるいは回復して本質的に無症候
性となるかのいずれかである。 【００１７】ハイブリドーマＧＫ1.5はDr.F.W.Fitchか
ら入手した。このハイブリドーマはサブクラスＩｇＧ２
ｂのラット抗体を産生する。この抗体はネズミヘルパー
Ｔ細胞のＬ３Ｔ４細胞表面抗原を認識する。Ｌ３Ｔ４
は、ヒトＴ細胞の細胞表面抗原Ｌｅｕ３に対応する、ネ
ズミでの相同物である。これらハイブリドーマ、抗体お
よび抗原に関してはImmunological Rev（1983）74：29-
56に詳述されている。ハイブリドーマＧＫ1.5を血清無
添加ＨＢ101培地で増殖させた。培養上清を50％飽和硫
酸アンモニウムで沈澱させ、透析により残った硫酸アン
モニウムを除去し、ＱＡＥセファデックスＡ-50イオン
交換ゲルを用いたクロマトグラフィーにより純度＞95％
のモノクローナル抗Ｌ３Ｔ４を精製した。緩衝液は50mM
トリス、150mM NaCl, pH8.2を用いた。抗体をＰＢＳで
0.2mg/mlに稀釈し免疫マウスへの投与に用いた。 【００１８】免疫マウスに抗体100μgを様々な注射レジ
メに従って注射した。ＰＢＳのみを注射したものを対照
群とした。少なくとも32日間にわたりマウスを検査し、
それらが何らかの症候を示した場合には病気として記録
した。試験の最後に、組織学的に病変の有無を調べた。
各マウスについて、PNAS（USA）(1981）78：7111および
J Exp Med（1985）158：1362に記載の方法に従って、脳
および脊髄の６つの標準切片を作成し検査した。スライ
ドにコードをつけ、処理プロトコールを知らない観察者
が判定した。これら試験の結果を下記表１に示す。 【００１９】 【表１】【００２０】これら試験から、ＥＡＥを引き起こす能力
をもつＴ細胞が既に生成された後でも抗Ｌ３Ｔ４抗体を
投与すると、この抗体によりＥＡＥの出現が臨床的にも
組織学的にも妨げられることがわかる。ＭＳＣＨで免疫
化して９日後、既にマウスには、健常受容体にＥＡＥを
引き起こす能力をもつＴ細胞が生成されていた。このよ
うにＭＳＣＨで免疫化されたマウスに、９日目から始め
て繰り返し抗Ｌ３Ｔ４を注射するとＥＡＥは出現しなか
った。ＥＡＥ誘導用の免疫処理前２日間および処理翌日
に抗Ｌ３Ｔ４を注射した場合、２週間経ってもマウスは
１匹も症状を示さなかった。この２週間というのはＰＢ
Ｓを注射した対照群の約90％が麻痺状態を示した時期で
ある。 【００２１】(抗Ｌ３Ｔ４によるＥＡＥの逆転)ＳＪＬ／
Ｊマウスを上記同様に免疫化した。抗体処理はマウスが
軽度のＥＡＥ症状を示したとき（代表的には12〜14日
目）に開始した。その時点で、300μgの抗Ｌ３Ｔ４をマ
ウスに腹腔内注射した。処理開始に続く２日間は、それ
ぞれ100μgの抗Ｌ３Ｔ４を注射した。 【００２２】処理開始72時間後、マウスの臨床状態を次
の段階に従って類別した。神経症状が無いかあるいはわ
ずかな尾部虚弱化とそれに伴う体重増加を示した場合は
「無」、弛緩性尾部および体重減少を伴う不全対麻痺お
よび毛組織の質低下を示した場合は「軽度」、そして後
肢シザリングを伴う四肢麻痺を示した場合は「重症」と
した。臨床状態は、処理プロトコールを知らない観察者
が類別した。 【００２３】７日目に死亡したマウスの数を記録した。 【００２４】これら試験の結果を下記表２に示す。 【００２５】 【表２】 【００２６】表２に示される通り、抗Ｌ３Ｔ４による処
理は、マウスにＥＡＥの最初の徴候が出現した後でこの
抗体を注射しても、有効であった。対照群のマウスとは
異なり、抗Ｌ３Ｔ４処理マウスは後肢麻痺、四肢麻痺あ
るいは死亡まで進行せず、抗Ｌ３Ｔ４処理を開始して72
時間後までには、処理マウスの90％に臨床上の改善が見
られわずかな神経性欠陥も示さなかった。四肢麻痺マウ
スあるいは瀕死マウスを抗Ｌ３Ｔ４で処理した場合、麻
痺は改善されず、死亡も防げなかった。 【００２７】 【発明の効果】多発性硬化症、慢性関節リウマチおよび
全身性エリテマトーデスのようなある自己免疫病は、Ｌ
ｅｕ３表現型Ｔ細胞に対し細胞障害性を有しかつヒト補
体を結合するイソタイプの抗Ｌｅｕ３抗体を用いた治療
により、予防あるいは減弱される可能性がある。
属し、特に、Ｌｅｕ３表現型Ｔ細胞媒介性自己免疫病の
治療用組成物に関する。 【０００２】 【従来の技術】自己免疫（自己抗原に対する免疫）は多
くの免疫病において中心的役割を担っている。自己免疫
は、Ｂ細胞の活性とあるＴ細胞の活性とが免疫学的に不
均衡になることにより生じ、特に、調節Ｔ細胞における
サプレッサー活性とヘルパー活性との間のバランスがく
ずれることにより生じることが知られている。自己免疫
病のモデルあるいは患者におけるＴ細胞サブセットの分
布を調べた研究により、所定の自己免疫病には特別なＴ
細胞サブセットが関与することが示唆されている。例え
ば、Ｌｅｕ３（Ｔ４）表現型（マウスではＬ３Ｔ４と呼
ばれている）のヒトヘルパーＴ細胞は、多発性硬化症お
よびそれに対応する実験モデルである実験的アレルギー
性脳脊髄炎（ＥＡＥ）の発病に関与する。 【０００３】Science（1983）219：308-310。Ｔ細胞枯
渇実験動物はＥＡＥを進行させる能力を欠失しているこ
とが示された。J Exp Med（1962）116：177-186およびS
cience（1974）186：839-841。 【０００４】Immunological Rev（1983）74：30-56に
は、Ｌ３Ｔ４表現型ネズミＴ細胞を認識し補体存在下で
細胞溶解性の高いラットモノクローナル抗体が記載され
ている。J Exp Med（1981）153：193-198には、これに
相当するネズミモノクローナル抗Ｌｅｕ３抗体が述べら
れている。Monoclonal Antibodies and T Cell Product
s（1982）CRC Press, Katz, D. H., Ed., pp 71-89に
は、ヒトヘルパー／インデューサーＴ細胞を選択的に認
識するネズミモノクローナル抗体が記載され、これはＯ
ＫＴ４と命名されている。この文献には、慢性関節リウ
マチ、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、シェー
グレン病、甲状腺疾患および重症筋無力症を含む自己免
疫病の一般的な特徴として、ＯＫＴ８+Ｔ細胞（サプレ
ッサー／細胞障害性Ｔ細胞）に対するＯＫＴ４+Ｔ細胞
の割合が増加することあるいはＴ細胞サブセット間の相
互関係が欠失することが示されている。 【０００５】Nature（1984）312：548-551には、抗Ｌ３
Ｔ４抗体を器官移植の際の免疫抑制薬として用いること
が述べられている。 【０００６】 【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、Ｌｅ
ｕ３表現型Ｔ細胞媒介性自己免疫病の治療用組成物を提
供することにある。 【０００７】 【課題を解決するための手段】本発明の組成物は、Ｌｅ
ｕ３表現型Ｔ細胞媒介性の自己免疫病の治療に用いられ
る組成物であって、Ｔ細胞に対し細胞障害性を有しかつ
補体結合するイソタイプの抗Ｌｅｕ３抗体を含有する。 【０００８】 【発明の実施の形態】「Ｌｅｕ３」という言葉は、ここ
でヒトの治療に関連して用いられるように、ヒトヘルパ
ーＴ細胞に限定される特別な膜抗原を意味するものとす
る。この抗原はJ Exp Med（1981）153：193-198に記載
されている。便宜上「Ｌｅｕ３」という言葉は、上記ヒ
トＴ細胞膜抗原のみでなく他の種に見られるこれと相同
なＴ細胞膜抗原をも指して用いられる場合がある。 【０００９】「モノクローナル抗体」という言葉はここ
では、相同な抗体集団を持つ抗体成分を意味し、この集
団のメンバーは同一の抗原決定基に結合する。 【００１０】「治療する（treat)」および「治療（ther
apy)」という言葉およびその同原語はここでは、予防あ
るいは現疾患の減弱化を意味するものとする。従って、
本発明の方法はＬｅｕ３+Ｔ細胞媒介性の自己免疫病を
予防あるいは軽減するために用いることができる。 【００１１】Ｔ細胞サブセットを特徴づける膜抗原は哺
乳動物種間では非常によく保存されていると考えられて
いる。よって、Ｌｅｕ３相同物が他の哺乳動物種に存在
する。そこで、本発明の組成物は、ヒトの場合は抗Ｌｅ
ｕ３を用い、他の種ではＬｅｕ３相同物に対する抗体を
用いることにより、哺乳動物一般に対して自己免疫病の
治療に利用することができる。ここで、まず第一にヒト
の治療に用いられ、次いで、家畜、ペット、および競技
用動物の治療に用いられることは言うまでもない。 【００１２】指摘されているように、本発明の組成物を
用いて治療することが可能な自己免疫病はＬｅｕ３表現
型Ｔ細胞媒介性のものである。このような病気には、多
発性硬化症、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデ
ス、乾癬、若年型糖尿病、シェーグレン病、甲状腺疾患
および重症筋無力症が含まれる。 【００１３】抗Ｌｅｕ３抗体はモノクローナル抗体もし
くは精製ポリクローナル抗体であってよいが、モノクロ
ーナル抗体の方が好ましい。抗Ｌｅｕ３は種間で抗原交
叉応答を引き起こすことはないらしいので、抗体の哺乳
動物種は重要ではない。現在興味をもたれているモノク
ローナル抗体はマウスもしくはラット由来のものが典型
的である。これは、囓歯類の腫瘍融合パートナーが交雑
に有効であるからである。モノクローナル抗体はKohle
r, G. and Milstein, C., Nature（1975）256：495-497
に最初に記載された体細胞交雑法により作ることができ
る。抗Ｌｅｕ３産生リンパ球融合パートナーは、ヒト末
梢血液リンパ球あるいはＴ細胞が濃縮されたヒト末梢血
液リンパ球を用いて適当な宿主動物を免疫化して作るこ
とができる。 【００１４】抗Ｌｅｕ３抗体はヒト補体を結合するイソ
タイプのもので、かつ標的Ｌｅｕ３+Ｔ細胞に対し強い
細胞障害性を有する。抗体の結合定数は正常では少なく
とも107L/mol程度であり、普通107〜108L/molである。 【００１５】抗体は、注射投与用として、製剤的に投与
しやすくするための従来の非経口賦形剤とともに処方し
てもよい。このような賦形剤には、本来、毒性も治療効
果もない。例えば、水、食塩水、リンガー溶液、ブドウ
糖溶液およびハンク溶液がある。製剤組成として、等張
性を維持する物質、生理学的pHを維持する物質（例え
ば、緩衝剤）および安定性を維持する物質（防腐剤）の
ような添加物を微量含有してもよい。抗体は、実質的に
凝集物および他の蛋白質を含まない精製状態で、約0.1
〜10mg/mlの濃度で処方するのが好ましい。抗体は非経
口投与、代表的には静注投与してもよく、このとき巨丸
剤として１回投与してもあるいは間欠もしくは連続投与
してもよい。投与量は患者および患者の既往歴に依る。
投与量は、患者のＬｅｕ３+Ｔ細胞集団の実質量部、普
通その約90％以上を枯渇させるに十分な量でなければな
らない。代表的な成人用量は約10mgと100mgの範囲内に
ある。小児用量または他の動物種への投与量は成人用量
から相対体重に基づいて換算する。 【００１６】 【実施例】 (抗Ｌ３Ｔ４によるＥＡＥの予防)感受性マウスＳＪＬ/
Ｊの尾部静脈に、百日咳菌（Bordetella pertussis）の
生菌30×109を含むリン酸緩衝塩溶液（ＰＢＳ）0.5mlを
注射した。次いで、マウス脊髄ホモジネート（ＭＳＣ
Ｈ）５mgを、Freundの完全アジュバントと４mg/mlH37Ra
マイコバクテリウム含有ＰＢＳの１：１エマルジョン0.
1mlに懸濁し、後肢パッドに注射して、マウスを免疫化
した。２日目、再度百日咳生菌を注射した。このように
して誘導されたＥＡＥは次のような特徴的な臨床経過を
示す。免疫処理12〜15日後に症状の最初の徴候（体重が
減少し、毛がぼうぼうとなりそして尾が弱々しくなる）
が出現し、その５〜７日後にわたり後肢麻痺が進行しと
きには完全な麻痺状態となる。そしてマウスは、21日後
までには、死亡するかあるいは回復して本質的に無症候
性となるかのいずれかである。 【００１７】ハイブリドーマＧＫ1.5はDr.F.W.Fitchか
ら入手した。このハイブリドーマはサブクラスＩｇＧ２
ｂのラット抗体を産生する。この抗体はネズミヘルパー
Ｔ細胞のＬ３Ｔ４細胞表面抗原を認識する。Ｌ３Ｔ４
は、ヒトＴ細胞の細胞表面抗原Ｌｅｕ３に対応する、ネ
ズミでの相同物である。これらハイブリドーマ、抗体お
よび抗原に関してはImmunological Rev（1983）74：29-
56に詳述されている。ハイブリドーマＧＫ1.5を血清無
添加ＨＢ101培地で増殖させた。培養上清を50％飽和硫
酸アンモニウムで沈澱させ、透析により残った硫酸アン
モニウムを除去し、ＱＡＥセファデックスＡ-50イオン
交換ゲルを用いたクロマトグラフィーにより純度＞95％
のモノクローナル抗Ｌ３Ｔ４を精製した。緩衝液は50mM
トリス、150mM NaCl, pH8.2を用いた。抗体をＰＢＳで
0.2mg/mlに稀釈し免疫マウスへの投与に用いた。 【００１８】免疫マウスに抗体100μgを様々な注射レジ
メに従って注射した。ＰＢＳのみを注射したものを対照
群とした。少なくとも32日間にわたりマウスを検査し、
それらが何らかの症候を示した場合には病気として記録
した。試験の最後に、組織学的に病変の有無を調べた。
各マウスについて、PNAS（USA）(1981）78：7111および
J Exp Med（1985）158：1362に記載の方法に従って、脳
および脊髄の６つの標準切片を作成し検査した。スライ
ドにコードをつけ、処理プロトコールを知らない観察者
が判定した。これら試験の結果を下記表１に示す。 【００１９】 【表１】【００２０】これら試験から、ＥＡＥを引き起こす能力
をもつＴ細胞が既に生成された後でも抗Ｌ３Ｔ４抗体を
投与すると、この抗体によりＥＡＥの出現が臨床的にも
組織学的にも妨げられることがわかる。ＭＳＣＨで免疫
化して９日後、既にマウスには、健常受容体にＥＡＥを
引き起こす能力をもつＴ細胞が生成されていた。このよ
うにＭＳＣＨで免疫化されたマウスに、９日目から始め
て繰り返し抗Ｌ３Ｔ４を注射するとＥＡＥは出現しなか
った。ＥＡＥ誘導用の免疫処理前２日間および処理翌日
に抗Ｌ３Ｔ４を注射した場合、２週間経ってもマウスは
１匹も症状を示さなかった。この２週間というのはＰＢ
Ｓを注射した対照群の約90％が麻痺状態を示した時期で
ある。 【００２１】(抗Ｌ３Ｔ４によるＥＡＥの逆転)ＳＪＬ／
Ｊマウスを上記同様に免疫化した。抗体処理はマウスが
軽度のＥＡＥ症状を示したとき（代表的には12〜14日
目）に開始した。その時点で、300μgの抗Ｌ３Ｔ４をマ
ウスに腹腔内注射した。処理開始に続く２日間は、それ
ぞれ100μgの抗Ｌ３Ｔ４を注射した。 【００２２】処理開始72時間後、マウスの臨床状態を次
の段階に従って類別した。神経症状が無いかあるいはわ
ずかな尾部虚弱化とそれに伴う体重増加を示した場合は
「無」、弛緩性尾部および体重減少を伴う不全対麻痺お
よび毛組織の質低下を示した場合は「軽度」、そして後
肢シザリングを伴う四肢麻痺を示した場合は「重症」と
した。臨床状態は、処理プロトコールを知らない観察者
が類別した。 【００２３】７日目に死亡したマウスの数を記録した。 【００２４】これら試験の結果を下記表２に示す。 【００２５】 【表２】 【００２６】表２に示される通り、抗Ｌ３Ｔ４による処
理は、マウスにＥＡＥの最初の徴候が出現した後でこの
抗体を注射しても、有効であった。対照群のマウスとは
異なり、抗Ｌ３Ｔ４処理マウスは後肢麻痺、四肢麻痺あ
るいは死亡まで進行せず、抗Ｌ３Ｔ４処理を開始して72
時間後までには、処理マウスの90％に臨床上の改善が見
られわずかな神経性欠陥も示さなかった。四肢麻痺マウ
スあるいは瀕死マウスを抗Ｌ３Ｔ４で処理した場合、麻
痺は改善されず、死亡も防げなかった。 【００２７】 【発明の効果】多発性硬化症、慢性関節リウマチおよび
全身性エリテマトーデスのようなある自己免疫病は、Ｌ
ｅｕ３表現型Ｔ細胞に対し細胞障害性を有しかつヒト補
体を結合するイソタイプの抗Ｌｅｕ３抗体を用いた治療
により、予防あるいは減弱される可能性がある。
フロントページの続き
(72)発明者 サブラマニアン スリラム
アメリカ合衆国 ヴァーモント 05401,
バーリントン，アップル ツリー ポイ
ント 73
(72)発明者 レオナルド エイ．ハーゼンバーグ
アメリカ合衆国 カリフォルニア
94305，スタンフォード，シドロ ウェ
イ 876
(72)発明者 レオノア エイ．ハーゼンバーグ
アメリカ合衆国 カリフォルニア
94305，スタンフォード，シドロ ウェ
イ 876
(56)参考文献 特開 昭55−145616（ＪＰ，Ａ)
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．133
Ｎｏ．４（1984）ｐｐ．1938−1942
Claims (1)
- (57)【特許請求の範囲】 １．Ｌｅｕ３（ＣＤ４）表現型Ｔ細胞媒介性の自己免疫
病の個体における治療に用いるための組成物の調製方法
であって、以下の工程を包含する、方法： 抗Ｌｅｕ３（ＣＤ４）抗体を提供する工程；および 個体においてＬｅｕ３（ＣＤ４）表現型Ｔ細胞を正常値
より低い値に減少させるに十分な量の該抗体と製剤的に
投与しやすくするための賦形剤とを混合する工程。 ２．前記抗Ｌｅｕ３（ＣＤ４）抗体が、通常は細胞傷害
性のイソタイプのものである、請求項１に記載の方法。 ３．前記抗Ｌｅｕ３（ＣＤ４）抗体の量が、個体におい
てＬｅｕ３（ＣＤ４）表現型Ｔ細胞を実質量部減少させ
るに十分である、請求項１または２に記載の方法。 ４．前記抗Ｌｅｕ３（ＣＤ４）抗体の量が、個体におい
てＬｅｕ３（ＣＤ４）表現型Ｔ細胞を約90％減少させる
に十分である、請求項１または２に記載の方法。 ５．前記個体がヒトである、請求項１または２に記載の
方法。 ６．前記自己免疫病が、多発性硬化症、慢性関節リウマ
チ、全身性エリテマトーデス、乾癬、若年型糖尿病、シ
ェーグレン病、甲状腺疾患、または重症筋無力症であ
る、請求項１または２に記載の方法。 ７．前記自己免疫病が多発性硬化症である、請求項１ま
たは２に記載の方法。 ８．前記自己免疫病が慢性関節リウマチである、請求項
１または２に記載の方法。 ９．前記量が10mgと100mgの範囲内である、請求項１ま
たは２に記載の方法。 １０．前記抗体の結合定数が少なくとも約107L/molであ
る、請求項１または２に記載の方法。 １１．Ｌｅｕ３（ＣＤ４）表現型Ｔ細胞媒介性の自己免
疫病の個体を治療するために用いるための組成物であっ
て、以下を含有する、組成物： 該個体においてＬｅｕ３（ＣＤ４）表現型Ｔ細胞を正常
値より低い値に減少させるに十分な量のＬｅｕ３（ＣＤ
４）抗体；および 製剤的に投与しやすくするための賦形剤。 １２．前記抗Ｌｅｕ３（ＣＤ４）抗体が、通常は細胞傷
害性のイソタイプのものである、請求項１１に記載の組
成物。 １３．前記抗Ｌｅｕ３（ＣＤ４）抗体の量が、個体にお
いて前記Ｌｅｕ３（ＣＤ４）表現型Ｔ細胞を実質量部減
少させるに十分である、請求項１１または１２に記載の
組成物。 １４．前記抗Ｌｅｕ３（ＣＤ４）抗体の量が、個体にお
いて前記Ｌｅｕ３（ＣＤ４）表現型Ｔ細胞を約90％減少
させるに十分である、請求項１１または１２に記載の組
成物。
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-
1984
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Non-Patent Citations (1)
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