JP2655618B2 - 微生物凝集剤ｎｏｃ―１の製造方法 - Google Patents
微生物凝集剤ｎｏｃ―１の製造方法Info
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- JP2655618B2 JP2655618B2 JP8708690A JP8708690A JP2655618B2 JP 2655618 B2 JP2655618 B2 JP 2655618B2 JP 8708690 A JP8708690 A JP 8708690A JP 8708690 A JP8708690 A JP 8708690A JP 2655618 B2 JP2655618 B2 JP 2655618B2
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- noc
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- coagulant
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W10/00—Technologies for wastewater treatment
- Y02W10/10—Biological treatment of water, waste water, or sewage
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- Activated Sludge Processes (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
- Separation Of Suspended Particles By Flocculating Agents (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、微生物を凝集する機能を有する微生物凝集
剤NOC−１を高い生産効率で製造することができる微生
物凝集剤NOC−１の製造方法に関するものである。
剤NOC−１を高い生産効率で製造することができる微生
物凝集剤NOC−１の製造方法に関するものである。
（従来の技術） ロードコッカス属に属する微生物凝集剤NOC−１生成
菌を培養することにより、活性汚泥処理場におけるデフ
ロック防止に有効な微生物凝集剤NOC−１を製造できる
ことは、本発明者の特公昭56−39633号公報により既に
知られている。
菌を培養することにより、活性汚泥処理場におけるデフ
ロック防止に有効な微生物凝集剤NOC−１を製造できる
ことは、本発明者の特公昭56−39633号公報により既に
知られている。
この公報に記載の製造方法は、グルコース、蔗糖等の
炭素源と、硫安、ペプトン等の窒素源等を含む基質が充
填された醗酵槽内に微生物凝集剤NOC−１生成菌を投入
し、10日間程度の回分培養を行う方法である。
炭素源と、硫安、ペプトン等の窒素源等を含む基質が充
填された醗酵槽内に微生物凝集剤NOC−１生成菌を投入
し、10日間程度の回分培養を行う方法である。
ところがこのような回分培養法を継続すると、菌体量
は次第に増加していくのにもかかわらず10日間を経過す
る頃から微生物凝集剤NOC−１の生産効率が急激に低下
するため、微生物凝集剤NOC−１を工業的に量産するう
えで大きな障害となっていた。
は次第に増加していくのにもかかわらず10日間を経過す
る頃から微生物凝集剤NOC−１の生産効率が急激に低下
するため、微生物凝集剤NOC−１を工業的に量産するう
えで大きな障害となっていた。
（発明が解決しようとする課題） 本発明はこのような従来の問題点を解決して、微生物
凝集剤NOC−１を高い生産効率を維持しつつ工業的に量
産することができる微生物凝集剤NOC−１の製造方法を
提供するために完成されたものである。
凝集剤NOC−１を高い生産効率を維持しつつ工業的に量
産することができる微生物凝集剤NOC−１の製造方法を
提供するために完成されたものである。
（課題を解決するための手段） 本発明者は従来の回分培養法において生産速度を高め
ることのできない原因を研究した結果、微生物凝集剤NO
C−１が生産菌の菌体成分と同様な多糖類蛋白であるこ
とから、醗酵槽内で死滅した菌体から生じる蛋白質分解
酵素がこれを分解するためではないかと考え、この着想
に基づいて本発明を完成した。
ることのできない原因を研究した結果、微生物凝集剤NO
C−１が生産菌の菌体成分と同様な多糖類蛋白であるこ
とから、醗酵槽内で死滅した菌体から生じる蛋白質分解
酵素がこれを分解するためではないかと考え、この着想
に基づいて本発明を完成した。
即ち、このようにしてなされた本発明は、ロードコッ
カス属に属する微生物凝集剤NOC−１生成菌を培養する
ことにより微生物凝集剤NOC−１を製造する方法におい
て、醗酵液中の溶存酸素濃度が0.2ppm以上となる好気的
条件下で回分培養後に引き続いて連続培養に移行し、基
質を連続的に投入しつつ死滅した菌体から生じる蛋白分
解酵素を透過するが菌体及び微生物凝集剤NOC−１は透
過しない分離膜により、菌体濃度の高められた濃縮液と
蛋白分解酵素を含む透過液とに分離し、濃縮液の一部も
しくは全部を醗酵槽内に戻し、透過液として系外に抜き
出す量と培養液および／または濃縮液を系外に抜き出す
量とを調節することにより醗酵槽内の菌体濃度を乾燥菌
体重量として0.7g/以上に維持し、生成菌の活性を失
わせることなく、得られた培養物から微生物凝集剤NOC
−１を採取することを特徴とするものである。
カス属に属する微生物凝集剤NOC−１生成菌を培養する
ことにより微生物凝集剤NOC−１を製造する方法におい
て、醗酵液中の溶存酸素濃度が0.2ppm以上となる好気的
条件下で回分培養後に引き続いて連続培養に移行し、基
質を連続的に投入しつつ死滅した菌体から生じる蛋白分
解酵素を透過するが菌体及び微生物凝集剤NOC−１は透
過しない分離膜により、菌体濃度の高められた濃縮液と
蛋白分解酵素を含む透過液とに分離し、濃縮液の一部も
しくは全部を醗酵槽内に戻し、透過液として系外に抜き
出す量と培養液および／または濃縮液を系外に抜き出す
量とを調節することにより醗酵槽内の菌体濃度を乾燥菌
体重量として0.7g/以上に維持し、生成菌の活性を失
わせることなく、得られた培養物から微生物凝集剤NOC
−１を採取することを特徴とするものである。
上記のように、本発明ではロードコッカス属に属する
微生物凝集剤NOC−１生成菌により、微生物凝集剤NOC−
１を製造する。この菌体としては、前記の特公昭56−39
633号公報に詳細に記載されたノカルデア・エリスロポ
レスKR−256−２（寄託番号FERM−P No.3923）を使用す
ることができる。この菌株の菌体学的性質は次の通りで
あるが、その他の性質については上記公報と参照された
い。なお、旧名ノカルデア・エリスロポレスは1980年国
際微生物分類同定委員会により、ロードコッカス・エリ
スロポレスと再整理・再分類されている。
微生物凝集剤NOC−１生成菌により、微生物凝集剤NOC−
１を製造する。この菌体としては、前記の特公昭56−39
633号公報に詳細に記載されたノカルデア・エリスロポ
レスKR−256−２（寄託番号FERM−P No.3923）を使用す
ることができる。この菌株の菌体学的性質は次の通りで
あるが、その他の性質については上記公報と参照された
い。なお、旧名ノカルデア・エリスロポレスは1980年国
際微生物分類同定委員会により、ロードコッカス・エリ
スロポレスと再整理・再分類されている。
グラム染色 ＋ 運動性 − コロニー（ブイヨン培地） 色 ピンクの入った白色クリーム 光沢 湿光沢 形 なめらか、円形 有機酸資化性 酢酸 ＋ クエン酸 ＋ ギ酸 ＋ 乳酸 ＋ オキザロ酢酸 ＋ コハク酸 ＋ また微生物凝集剤NOC−１は、中性で水に可溶、アセ
トン、アルコールに不溶の白色粉末であり、糖、アミノ
酸を主体とする多糖蛋白と推定されている。
トン、アルコールに不溶の白色粉末であり、糖、アミノ
酸を主体とする多糖蛋白と推定されている。
本発明においては、第１図に示すように醗酵槽（１）
と分離膜（２）とを組合せ、まず醗酵槽（１）の中に基
質と微生物凝集剤NOC−１生成菌とを投入し、回分培養
を行わせる。このとき醗酵槽（１）内の醗酵液中の溶存
酸素濃度が0.2ppm以上となる好気的条件を維持する。溶
存酸素濃度がこれより低いと菌体の活性が低下し、目的
とする高い生産性を得ることができない。このようにし
て100〜300時間程度回分培養を行い、菌体活性が所要の
レベルに達した時点で基質の連続投入と培養液の連続引
出しを開始して連続培養に移行する。
と分離膜（２）とを組合せ、まず醗酵槽（１）の中に基
質と微生物凝集剤NOC−１生成菌とを投入し、回分培養
を行わせる。このとき醗酵槽（１）内の醗酵液中の溶存
酸素濃度が0.2ppm以上となる好気的条件を維持する。溶
存酸素濃度がこれより低いと菌体の活性が低下し、目的
とする高い生産性を得ることができない。このようにし
て100〜300時間程度回分培養を行い、菌体活性が所要の
レベルに達した時点で基質の連続投入と培養液の連続引
出しを開始して連続培養に移行する。
分離膜（２）は死滅した菌体から生じる蛋白質分解酵
素を透過するが菌体及び微生物凝集剤NOC−１は透過し
ないもので、初期の回分培養を経過して連続培養に移行
した後は、基質を連続的に投入しつつ醗酵槽（１）から
培養液を連続的に引出し、これを分離膜（２）により菌
体濃度の高められた濃縮液と蛋白質分解酵素を含む透過
液とに分離し、濃縮液の一部もしくは全部を醗酵槽
（１）内に戻す。これにより醗酵槽（１）内の蛋白質分
解酵素を系外に排出することにより、それまで低い値に
抑制されていた生産性を急激に上昇させることができ
る。そしてこの引出された培養液から高い収率で微生物
凝集剤NOC−１を得ることができる。
素を透過するが菌体及び微生物凝集剤NOC−１は透過し
ないもので、初期の回分培養を経過して連続培養に移行
した後は、基質を連続的に投入しつつ醗酵槽（１）から
培養液を連続的に引出し、これを分離膜（２）により菌
体濃度の高められた濃縮液と蛋白質分解酵素を含む透過
液とに分離し、濃縮液の一部もしくは全部を醗酵槽
（１）内に戻す。これにより醗酵槽（１）内の蛋白質分
解酵素を系外に排出することにより、それまで低い値に
抑制されていた生産性を急激に上昇させることができ
る。そしてこの引出された培養液から高い収率で微生物
凝集剤NOC−１を得ることができる。
また、透過液として系外に抜き出す量と培養液および
／または濃縮液を系外に抜き出す量とを調節することに
より醗酵槽内の菌体濃度を乾燥菌体重量として0.7g/
以上に維持することにより、高い生産性を得ることがで
きる。
／または濃縮液を系外に抜き出す量とを調節することに
より醗酵槽内の菌体濃度を乾燥菌体重量として0.7g/
以上に維持することにより、高い生産性を得ることがで
きる。
本発明においては、次の実施例のデータに示されるよ
うに、連続培養に移行後の生成菌の活性は高いレベルに
維持される。
うに、連続培養に移行後の生成菌の活性は高いレベルに
維持される。
以下に本発明の実施例を示す。
（実施例） ブドウ糖１％、果糖１％、酵母エキス0.2％、肉エキ
ス0.02％からなる液体培地で約４日間、30℃で浸とう培
養したRhodococcus erythroporisの菌種100mlを、実容
量３のファーメンタに入ったブドウ糖0.5％、果糖0.5
％、酵母エキス0.05％からなる液体培地に無菌的に投入
し、培養温度30℃、空気量１／min（醗酵液中の溶
存酸素濃度、8ppm）の条件で回分培養を行った。その間
の微生物凝集剤NOC−１の生産速度は0.019（1/hr）であ
った。回分培養をそのまま長時間継続すると、第３図に
白丸で示すように活性が低下し始める。
ス0.02％からなる液体培地で約４日間、30℃で浸とう培
養したRhodococcus erythroporisの菌種100mlを、実容
量３のファーメンタに入ったブドウ糖0.5％、果糖0.5
％、酵母エキス0.05％からなる液体培地に無菌的に投入
し、培養温度30℃、空気量１／min（醗酵液中の溶
存酸素濃度、8ppm）の条件で回分培養を行った。その間
の微生物凝集剤NOC−１の生産速度は0.019（1/hr）であ
った。回分培養をそのまま長時間継続すると、第３図に
白丸で示すように活性が低下し始める。
そこで本発明では所定時間の回分培養の後、死滅した
菌体から生じる蛋白質分解酵素を透過するが菌体及び微
生物凝集剤NOC−１は透過しない分離膜（クラレ製SF501
膜）を用いて、第１図のように溶媒液を菌体濃度の高め
られた濃縮液と蛋白質分解酵素を含有する透過液とに分
離し、蛋白質分解酵素を系外に排出しつつ、培養温度30
℃、空気量１／min、希釈率0.012（1/hr）の条件で
連続的に濾過培養を行った。その結果、生産速度は0.08
0（1/hr）となり、回分培養に比較して4.4倍高い値とな
った。この状態を第２図に示した。
菌体から生じる蛋白質分解酵素を透過するが菌体及び微
生物凝集剤NOC−１は透過しない分離膜（クラレ製SF501
膜）を用いて、第１図のように溶媒液を菌体濃度の高め
られた濃縮液と蛋白質分解酵素を含有する透過液とに分
離し、蛋白質分解酵素を系外に排出しつつ、培養温度30
℃、空気量１／min、希釈率0.012（1/hr）の条件で
連続的に濾過培養を行った。その結果、生産速度は0.08
0（1/hr）となり、回分培養に比較して4.4倍高い値とな
った。この状態を第２図に示した。
第２図の縦軸の白丸は培養液の活性を示し、黒丸はOD
（波長660nmで測定した光学的濁度：発酵槽中の菌体濃
度を表す）を示し、半黒丸はDO（溶存酸素濃度）を示
す。なお、活性の測定法は次の通りである。まずカオリ
ンを純水中に5000ppmとなるように懸濁し１時間スター
ラで撹拌し、メスシリンダに80ml入れる。次に培養液0.
5mlを20倍に希釈して10mlとし、このメスシリンダに添
加し、更に10％CaCl2溶液を10ml添加して転倒、撹拌す
る。この溶液を0.1NのNaOHによりPH7.0に調整し、撹拌
後５分間静置して上清30mlをデカンテーションに取る。
そして550nmの濁度を測定し、次式により活性を算出す
る。
（波長660nmで測定した光学的濁度：発酵槽中の菌体濃
度を表す）を示し、半黒丸はDO（溶存酸素濃度）を示
す。なお、活性の測定法は次の通りである。まずカオリ
ンを純水中に5000ppmとなるように懸濁し１時間スター
ラで撹拌し、メスシリンダに80ml入れる。次に培養液0.
5mlを20倍に希釈して10mlとし、このメスシリンダに添
加し、更に10％CaCl2溶液を10ml添加して転倒、撹拌す
る。この溶液を0.1NのNaOHによりPH7.0に調整し、撹拌
後５分間静置して上清30mlをデカンテーションに取る。
そして550nmの濁度を測定し、次式により活性を算出す
る。
活性＝（1/凝集剤を添加した上清の濁度）−（1/凝集剤
の代わりに水を添加した上清の濁度） この活性の値は、培養液中の微生物凝集剤NOC−１の
量（濃度）を示すものである。なお、第２図のグラフで
は回分培養の際には活性の勾配が大きいにもかかわらず
微生物凝集剤NOC−１の生産速度は0.019（1/hr）と小さ
く、連続培養に移行した後は活性の勾配がほぼ水平にな
っているにもかかわらず、生産速度は0.080（1/hr）と
大きくなっている。これは、回分培養の際には発酵槽中
の培養液の活性の勾配が直接NOC−１の生産速度を示す
のに対して、連続培養に移行した後は生産された微生物
凝集剤NOC−１が連続して系外に取り出されるため、発
酵槽中の培養液中のNOC−１の量（濃度）がそのままNOC
−１の生産速度を示さないためである。
の代わりに水を添加した上清の濁度） この活性の値は、培養液中の微生物凝集剤NOC−１の
量（濃度）を示すものである。なお、第２図のグラフで
は回分培養の際には活性の勾配が大きいにもかかわらず
微生物凝集剤NOC−１の生産速度は0.019（1/hr）と小さ
く、連続培養に移行した後は活性の勾配がほぼ水平にな
っているにもかかわらず、生産速度は0.080（1/hr）と
大きくなっている。これは、回分培養の際には発酵槽中
の培養液の活性の勾配が直接NOC−１の生産速度を示す
のに対して、連続培養に移行した後は生産された微生物
凝集剤NOC−１が連続して系外に取り出されるため、発
酵槽中の培養液中のNOC−１の量（濃度）がそのままNOC
−１の生産速度を示さないためである。
（発明の効果） 以上に説明したように、本発明によれば醗酵槽内で死
滅した菌体から生じる蛋白質分解酵素による悪影響を回
避して、デフロック防止に有効な微生物凝集剤NOC−１
を従来の４倍以上の高い生産速度を維持しつつ工業的に
連続生産することができる。よって本発明は従来の問題
点を解消した微生物凝集剤NOC−１の製造方法として、
産業の発展に寄与するところは極めて大きいものがあ
る。
滅した菌体から生じる蛋白質分解酵素による悪影響を回
避して、デフロック防止に有効な微生物凝集剤NOC−１
を従来の４倍以上の高い生産速度を維持しつつ工業的に
連続生産することができる。よって本発明は従来の問題
点を解消した微生物凝集剤NOC−１の製造方法として、
産業の発展に寄与するところは極めて大きいものがあ
る。
第１図は本発明の実施のための装置を示すブロック図、
第２図は培養時間と培養液の活性との関係を示すグラ
フ、第３図は回分培養をそのまま長時間継続すると活性
が低下することを示すグラフである。 （１）：醗酵槽、（２）：分離膜
第２図は培養時間と培養液の活性との関係を示すグラ
フ、第３図は回分培養をそのまま長時間継続すると活性
が低下することを示すグラフである。 （１）：醗酵槽、（２）：分離膜
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:365） 合議体 審判長 酒井 雅英 審判官 佐伯 裕子 審判官 新海 岳 (56)参考文献 特開 昭50−36680（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−232084（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−257181（ＪＰ，Ａ) 特公 昭56−39633（ＪＰ，Ｂ２) 微生物培養工学（1985．11）ｐ．121, ｐ．134−136
Claims (1)
- 【請求項１】ロードコッカス属に属する微生物凝集剤NO
C−１生成菌を培養することにより微生物凝集剤NOC−１
を製造する方法において、醗酵液中の溶存酸素濃度が0.
2ppm以上となる好気的条件下で回分培養後に引き続いて
連続培養に移行し、基質を連続的に投入しつつ死滅した
菌体から生じる蛋白分解酵素を透過するが菌体及び微生
物凝集剤NOC−１は透過しない分離膜により、菌体濃度
の高められた濃縮液と蛋白分解酵素を含む透過液とに分
離し、濃縮液の一部もしくは全部を醗酵槽内に戻し、透
過液として系外に抜き出す量と培養液および／または濃
縮液を系外に抜き出す量とを調節することにより醗酵槽
内の菌体濃度を乾燥菌体重量として0.7g/以上に維持
し、生成菌の活性を失わせることなく、得られた培養物
から微生物凝集剤NOC−１を採取することを特徴とする
微生物凝集剤NOC−１の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8708690A JP2655618B2 (ja) | 1990-03-31 | 1990-03-31 | 微生物凝集剤ｎｏｃ―１の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8708690A JP2655618B2 (ja) | 1990-03-31 | 1990-03-31 | 微生物凝集剤ｎｏｃ―１の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03285691A JPH03285691A (ja) | 1991-12-16 |
| JP2655618B2 true JP2655618B2 (ja) | 1997-09-24 |
Family
ID=13905140
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8708690A Expired - Lifetime JP2655618B2 (ja) | 1990-03-31 | 1990-03-31 | 微生物凝集剤ｎｏｃ―１の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2655618B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5263768B2 (ja) * | 2008-10-15 | 2013-08-14 | 日鉄住金環境株式会社 | 有機性廃液の処理方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3886046A (en) * | 1973-06-28 | 1975-05-27 | Squibb & Sons Inc | Recycle fermentation process |
| JPS5939633A (ja) * | 1982-08-31 | 1984-03-05 | Konishiroku Photo Ind Co Ltd | 給紙装置 |
-
1990
- 1990-03-31 JP JP8708690A patent/JP2655618B2/ja not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 微生物培養工学（１９８５．１１）ｐ．１２１，ｐ．１３４−１３６ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH03285691A (ja) | 1991-12-16 |
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