JP2641657B2 - 抗酸化性を有する飲食品類 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は緑色植物の緑葉の搾汁液中に存在
する抗酸化活性物質を主体とする成分を配合した飲食品
類に関する。

【０００２】従来より、パン、麺類、ハム、ソーセー
ジ、コンビーフ、食用植物油脂、マーガリン、植物性タ
ンパク、果実酒、果実（例えばみかん）の缶詰、果汁、
飲料、冷凍食品類など（本明細書ではこれら食品類、飲
料、嗜好品等を「飲食品類」と総称する）には、保存、
鮮度保持等の目的で抗酸化剤が配合されているが、抗酸
化剤としての効果と安全性に優れたものは現在まで見出
されていない。

【０００３】従来の抗酸化剤としてはトコフェロール
類、ＢＨＡ、ＢＨＴ、ビタミンＣ（麹酸）等があるが、
トコフェロール類は油性のものに限定され、ＢＨＡ、Ｂ
ＨＴは安全性に関して必ずしも満足できず、ビタミンＣ
も用途が限定される。

【０００４】本発明者らは、抗腫瘍作用、抗高脂血症作
用、血糖低下作用、抗ウイルス作用等の数多くの生理作
用を有する成分を含むことが明らかにされている麦類植
物、その他の緑色植物（海藻を含む。以下同じ）の緑葉
に着目し、抗酸化性という立場からその成分の検討を行
った。

【０００５】その結果、イネ科植物、例えば麦類植物、
その他の緑色植物の緑葉成分中に、α−トコフェロール
と同等ないしそれ以上に強力な酸化防止活性を有する成
分が含まれており、それが飲食品類の鮮度保持、保存等
において極めて有効であり、しかも安全であることを見
い出し、本発明を完成するに至った。

【０００６】かくして、本発明は、緑色植物の緑葉から
抽出された抗酸化活性物質を配合したことを特徴とする
飲食品類を提供するものである。

【０００７】以下、本発明の飲食品類に配合される緑色
植物の緑葉から抽出された抗酸化活性物質について、さ
らに詳細に説明する。なお、本明細書における含水アル
コールの含水率％はｖ／ｖ％によるものである。

【０００８】原料となる緑色植物としては、麦類植物が
好適であるが、それ以外に、クローバー、アルファルフ
ァ、ケール、ホウレン草、レタス、パセリ、セロリ、キ
ャベツ、白菜、水菜、ピーマン、ニンジン緑葉、大根緑
葉、ササ、アシタバなどの牧草類、野菜類、山野草類植
物；さらに、スピルリナ、クロレラ、ワカメ、青ノリ等
の淡水産もしくは海水産緑色藻類、等もまた使用するこ
とができる。

【０００９】本発明において好適に使用される麦類植物
としては、大麦が最も適しているが、その他に、小麦、
裸麦、エン麦、ハト麦、トウモロコキシ、キビ、イタリ
アンダイグラスなどもまた使用することができる。

【００１０】本発明では、これら緑色植物、殊に麦類植
物の中でも成熟期前に収穫した若い植物の新鮮な茎及び
／又は葉の部分（本明細書ではこれらを総称して「緑
葉」という）が特に適している。

【００１１】緑色植物、例えば麦類植物の緑葉はまず、
ミキサー、ジューサー、等の機械的破砕手段によって搾
汁し、必要に応じて、篩別、濾過等の手段によって粗固
形分を除去することにより搾汁液（以下、これを「青
汁」という）を調製する。

【００１２】次いで、この青汁をそのままで、或いはそ
れを凍結乾燥、噴霧乾燥等の適当な乾燥手段で乾燥する
ことにより得られる青汁粉末を充分量の水又はｎ−ヘキ
サンで抽出処理する。この抽出処理は通常室温で行なう
ことができ、場合によっては２回又はそれ以上繰り返し
行なってもよく、それによって、水可溶性成分又はｎ−
ヘキサンに実質的に不溶性の成分を分離回収する。回収
された抽出成分はこの段階で前記と同様にして乾燥し固
形化することができる。

【００１３】かくして得られる水可溶性成分又はｎ−ヘ
キサン不溶性成分を次いで含水率が０〜８０％、好まし
くは１０〜７０％、さらに好ましくは１５〜５０％の含
水エタノール、例えば含水率２０％の含水エタノールで
抽出処理を行ない、該含水エタノールに可溶性の成分を
分離回収する。

【００１４】この含水エタノールによる抽出処理は、前
記の如くして調製される青汁もしくはそれから水不溶性
成分を完全に除去した緑葉の水溶性成分又はそれらを凍
結乾燥、噴霧乾燥等の適当な乾燥手段で乾燥して得られ
る粉末に対して直接行なうこともできる。

【００１５】このようにして回収された含水エタノール
可溶性成分は、そのままで或いは濃縮又は溶媒を留去す
ることにより、本発明の抗酸化活性物質として使用する
ことができる。

【００１６】さらに、本発明によれば所望に応じて、上
記含水エタノール可溶成分を適当な吸着剤、例えばＳｔ
ｙｒｅｎｅ−ＤＶＢ樹脂吸着剤（例えば、ローム・アン
ド・ハース社製、アンバーライト^R吸着剤ＸＡＤ−２）
等で処理し且つ含水率０〜８０％、好ましくは２０〜７
０％、さらに好ましくは３０〜６０％の含水メタノール
で溶離処理を行なうことによって、該含水メタノールに
可溶性の成分を回収することができる。これによってさ
らに酸化防止活性に優れた画分を取得することができ
る。

【００１７】このようにして回収される含水メタノール
可溶性成分はそのまま或いは濃縮又は溶媒を除去するこ
とにより、本発明の抗酸化活性物質として利用すること
ができる。

【００１８】さらにまた、このようにして大麦から回収
される含水メタノール可溶性成分は、例えば、含水率が
３０〜７０％、好ましくは４０〜６０％の含水メタノー
ルを用いて再結晶精製することにより、抗酸化活性物質
の本体を微黄色結晶として取得することができる。この
ようにして単離された抗酸化活性物質の本体は、ＮＭ
Ｒ、質量分析等の分析の結果、下記式

【００１９】

【化２】 で示される構造を有する２′−Ｏ−グリコシル−イソビ
テキシンであることが同定された（後記参考例１参
照）。このようにして単離された抗酸化活性物質を飲食
品類に配合することもできる。

【００２０】上記構造式又はこれに類する構造を有する
抗酸化活性物質が、麦類植物をはじめとする緑色植物の
緑葉中に含まれており、それが本発明の抗酸化活性物質
の有効成分をなしているものと推定される。

【００２１】以上に述べた如くして調製される抗酸化活
性物質は、淡黄色ないし無色であり、水溶性かつアルコ
ール可溶性であって、しかも生体への吸収性にも優れて
おり各種の飲食品類に対し、それらの組成成分や外観等
に対し実質的に影響を与えることなく容易に配合するこ
とができる。例えば、飲料等においてしばしば使用され
る果糖、ブドウ糖、水飴等の甘味料；クエン酸、リンゴ
酸、酒石酸、コハク酸等の有機酸；各種ビタミン類、着
色料、香料、各種可食性増粘剤等と自由に混合すること
ができ、それらの水溶性、透明度に影響を与えず、濾過
滅菌が可能であり、しかも製品の品質に変化を与えない
等の利点がある。

【００２２】上記抗酸化活性物質の配合量は、飲食品類
の種類、用途等に応じて広い範囲で変えることができる
が、一般には、飲食品類に対して含水率２０％のエタノ
ール抽出物は０．１〜１０重量％、好ましくは０．５〜
７重量％、含水率４０％のメタノール画分は、０．００
１〜５重量％、好ましくは０．０１〜２重量％、そして
２′−Ｏ−グルコシルイソビテキシンは０．００１〜１
重量％、好ましくは０．００５〜０．５重量％の範囲内
で配合するのが適当である。

【００２３】以下、参考例及び実施例により本発明をさ
らに具体的に説明する。

【００２４】参考例 １（活性成分の分画と調製法） 成就期前の大麦の青汁の凍結感想粉末２０ｇにｎ−ヘキ
サン５００ｍｌを加え常温で約５分間よく撹拌した後、
不溶成分を遠心分離（８０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎ）に
より分離し、さらに分離した不溶成分にｎ−ヘキサン５
００ｍｌを加え、同様の操作を繰り返しｎ−ヘキサン不
溶成分を得た。

【００２５】この不溶成分に、含水率２０ｖ／ｖ％のエ
チルアルコール５００ｍｌを加え常温で約５分間よく撹
拌した後、不溶分を濾別する。濾別した不溶分を再度含
水率２０ｖ／ｖ％のエチルアルコール５００ｍｌで同様
に処理し、得られる濾液を合わせて、減圧下に溶媒を留
去擦する。これによってエチルアルコール抽出物１３．
０ｇを得た。

【００２６】このエチルアルコール可溶分をアンバーラ
イトＸＡＤ−２カラムに吸着させた後、蒸留水、含水率
がそれぞれ８０、６０、４０、２０及び０ｖ／ｖ％の含
水メタノール、ならびにアセトンで順次離溶させ、溶出
液を得た。

【００２７】各溶出液は減圧蒸留にて溶媒を留去し、そ
の結果、水抽出物４．７７ｇ、２０％メタノール抽出物
１８０ｍｇ、４０％メタノール抽出物１３１ｍｇ、６０
％メタノール抽出物１９９ｍｇ、８０％メタノール抽出
物３２ｍｇ、１００％メタノール抽出物１６５ｍｇ、ア
セトン抽出物０．８７ｍｇを得た（ここで、メタノール
の％は含水メタノール中のメタノール濃度ｖ／ｖ％であ
る）。

【００２８】上記の如くして得られた６０％メタノール
抽出物を、さらに６０％メタノールを用いて再結晶し、
１８０ｍｇの微黄色の結晶を得た。この結晶の構造決定
を質量分析及びＮＭＲにより行った。

【００２９】質量分析はＦＡＢ−ＭＳ：ＶＧ ＺＡＢ−
２Ｆ、（Ｘｅｎｏｎ Ｇｕｎ）（Ｊｏｎ Ｔｅｃｈ）型
質量分析装置を用いて行い、第１図に示す結果が得られ
た。この質量スペクトルからｍ／ｚ＝５９５に［Ｍ＋Ｈ
⁺］のピークがみられ、分子量は５９４であることが決
定され、元素分析の結果と併せて考慮するとき、本物質
の分子式はＣ₂₇Ｈ₃₀Ｏ₁₅であると判断される。

【００３０】本物質の紫外線吸収スペクトルをＨ₂Ｏ及
びメタノール中で測定したところ、それぞれ第２図及び
第３図に示すようになりフラボノイドグルコシドの吸収
を示した。

【００３１】赤外線吸収スペクトルをＪＡＳＣＯ ＦＴ
／ＩＲ−７０００ＳによりＫＢｒ法を適用して測定した
結果を第４図に示す。３４２２ｃｍ^-1にＯＨ基の存在を
示している。

【００３２】本物質は常法により塩酸−メタノールで加
水分解するときグルコースを１分子遊離して、イソビテ
キシンを生成した。

【００３３】さらに、本物質の¹³Ｃ ＮＭＲスペクトル
（５００ＭＨｚ）を、精製抗酸化活性物質２５ｍｇを用
いてＧＥ ＯＭＥＧＡ３００型核磁気共鳴スペクトル吸
収測定装置によりテトラメチルシラン［ＴＭＳ，（ＣＨ
₃）₄Ｓｉ］を内部標準として用いて測定し、第５図に示
す結果を得た。第５図においては、化学シフトをδで表
示した。精製抗酸化活性物質はＭｅＯＨ−ｄ₄中で２７
炭素原子に対するシグナルを与え、イソビテキシンの¹³
Ｃ−ＮＭＲの標準値［Ｒａｍａｒａｔｈｎａｍ，Ｎ．，
Ｏｓａｗａ，Ｔ．，Ｎａｍｉｋｉ，Ｍ．ａｎｄ Ｋａｗ
ａｋｉｓｈｉ，Ｓ．：Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈ
ｅｍ．，３７，３１６−３１９（１９８９）］を基礎と
して次の構造式であることを推定した。

【００３４】

【化３】 本物質は、この構造式より、２′−Ｏ−グルコシル−イ
ソビテキシンと命名する。

【００３５】参考例２（脂質過酸化生成物、ＭＡ¹⁾のガ
スクロマトグラフィ分析） ミクロソーム及びアラキドン酸７．５ｍｇにα−トコフ
ェロール０．２２ｍｇまたは２′−Ｏ−グルコシル−イ
ソビテキシン０．２２ｍｇを加え、これにトリス塩酸緩
衝液（０．０５Ｍ ＴｒｉｚｍａＨＣｌ、ｐＨ７．４；
０．１５Ｍ ＫＣｌ；０．２％ＳＤＳ）５ｍｌを加え、
軽く振り混ぜて懸濁し、さらにフェントン試液（ＦｅＣ
ｌ₂／Ｈ₂Ｏ₂）２００μｌを加え、３７℃にて１６時間
反応させた。４％ＢＨＴ²⁾５０μｌを加えて、反応を停
止させた後、Ｎ−メチルヒドラジン４０μｌを加えて室
温にて１時間、Ｎ−メチルヒドラジン誘導体を生成さ
せ、これに飽和食塩水１５ｍｌを加え、ジクロロメタン
５ｍｌで３時間抽出した。

【００３６】ジクロロメタン層を分取し、一定量のガス
クロマトグラフィ内部標準駅（Ｉ．Ｓ．）を加え、さら
にジクロロメタンにて正確に１０ｍｌとしてガスクロマ
トグラフィ分析用試料とし、以下の条件下にクロマトグ
ラフィーにかけた。

【００３７】キャピラリーカラム：ＤＢ−ＷＡＸ ２５ｍ×０．２５ｍｍ カラム温度：３５℃（保持１．０分）〜１９０℃（保持
２０分） 昇温４０℃／分 注入口温度：２５０℃ 検出器温度：３００℃ 検出器：ＮＰＤ（ｎｉｔｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈｏｒｕ
ｓ ｄｅｔｅｃｔｏｒ） キャリア−ガス：ヘリウム 上記の構造式で示した２′−Ｏ−グルコシル−イソビテ
キシンは、第６図、第７図および第８図に示すようにＭ
Ａ生成のみならず、４ＨＮ（４−ヒドロキシノネナー
ル）の生成に対しても著しい抑制効果を示すことが明ら
かとなった。さらに６０％メタノール抽出画分も同様の
活性を示した。

【００３８】註）１）ＭＡ＝マロンジアルデヒド ２）ＢＨＴ＝ジブチルヒドロキシトルエン

【００３９】

【実施例】

実施例 １ 大麦若葉の緑葉を洗浄した後、搾汁して得られた青汁を
噴霧乾燥して粉末化した青汁粉末１ｋｇをヘキサン２０
Ｌにて２回抽出を繰り返し、ヘキサン不溶部分に水１０
Ｌを加えて水可溶性成分を噴霧乾燥後、３８０ｇの噴霧
乾燥物を得た。次いで、本乾燥粉末に含水率２０％の含
水エタノール１０Ｌを加えて、含水率２０％の含水エタ
ノール可溶性成分３００ｇを得、エタノールを留去し
た。

【００４０】得られた含水率２０％の含水エタノール可
溶性の抽出物を次の処法で配合して、飲料を調製した。
調製後、ジュースは８５℃、３０分間の加熱殺菌を行っ
た。 グラニュー糖 ２０ｇ 果糖 ３５ｇ クエン酸 ３ｇ コハク酸 ０.１ｇ 含水率２０％エタノール抽出物 １０ｇ 香料 適量 全容 １ｌ 本製品は、特有の好ましい香味を有する口臭の抑制に効
果的な飲料であった。 実施例 ２ 実施例１で得られた含水率２０％のエタノール抽出物を
アンバーライトＸＡＤ‐２に吸着させ、含水率４０％メ
タノールで分画された画分を乾燥物として、次の組成の
ジュースに配合した。調製後、ジュースは８５℃、３０
分間の加熱殺菌を行った。

【００４１】 グラニュー糖 ２０ｇ 果糖 ３５ｇ クエン酸 ３ｇ 酒石酸 ０.１ｇ β‐カロチン １０ｍｇ （三栄化学工業株式会社カロチンベースＮｏ３１２５
８） 含水率４０％メタノール画分 ０.５ｇ 香料 適量 全容 １ｌ 本製品を自然光のもとで１５日間放置後、β‐カロチン
は８３％残存していた。これに対し含水率４０％メタノ
ールを添加しないものは、β‐カロチンは完全に消失し
た。なお、β‐カロチンの定量は日本薬学会編；衛生試
験法・注解、３４７〜３４９頁（１９９０年金原出版株
式会社）に記載の方法に準拠して行った。

【００４２】実施例 ３ 実施例２において含水率４０％メタノール画分の代りに
２′−Ｏ−グルコシルイソビテキシン０．０１％を添加
してジュースを調製した。本製品を自然光のもと１５日
間放置後β‐カロチンは７３．２％残存していたが、
２′−Ｏ−グルコシルイソビテキシン無添加のジュース
ではβ‐カロチンは完全に消失した。

【００４３】実施例 ４ 牛肉の脂肪を除去し、食塩を加え、５日間漬けこみ、そ
の後煮熟して肉繊維をほぐし、食塩、香辛料、脂肪、調
味料と共に、含水率４０％メタノール画分を０．１％に
なるように添加してコンビーフを製造し、冷蔵庫で１０
日間保存した。その結果、含水率４０％メタノール画分
無添加のものは酸化により著るしく変色したが、本製品
は製造時のピンク色を保持していた。

【００４４】実施例 ５ 通常の方法によりマーガリンを製造する際に、含水率２
０％エタノール抽出物１０ｇ／１０００ｇの割合で添加
し、約３ケ月室温保存した。該抽出物無添加のものは香
味が変性し食用に適さない状態となったが、本製品は香
味に殆んど変化がなかった。

【００４５】実施例 ６ 通常の方法で固形状ヨーグルトを製造する工程で、含水
率２０％エタノール抽出物を０．２％添加し、小型容器
に充填し培養しヨーグルト製品を調製した。この製品は
特有の好ましい芳香を有しており長期保存後も安定して
いた。

【００４６】実施例 ７ 通常の方法でヨーグルトを製造し、培養後、β‐カロチ
ンを０.００１％及び２′−Ｏ−グルコシルイソビテキ
シンを０．０２％添加して液状ヨーグルトを製造した。
本製品を積み重ねて直射日光の下で３日間放置後でも変
色は生じなかった。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、参考例１で得られた２′−Ｏ−グルコ
シル−イソビテキシンのＦＡＢ−ＭＳ法による測定チャ
ートを示す。

【図２】図２は、２′−Ｏ−グルコシル−イソビテキシ
ンのＨ₂Ｏ系における紫外部吸収スペクトルである。

【図３】図３は、２′−Ｏ−グルコシル−イソビテキシ
ンのＭｅＯＨ系における紫外部吸収スペクトルである。

【図４】図４は、２′−Ｏ−グルコシル−イソビテキシ
ンの赤外線吸収スペクトルである。

【図５】図５は、２′−Ｏ−グルコシル−イソビテキシ
ンの¹³Ｃ−ＮＭＲの測定結果を示す図である。

【図６】図６は、図５の続きである。

【図７】図７は、図６の続きである。

【図８】図８は、フェントン試験を用いるアラキドン酸
の脂質酸化生成物、ＭＡ及び４ＨＮのガスクロマトグラ
フチャート（対照）である。

【図９】図９は、フェントン試験を用いるアラキドン酸
の脂質過酸化生成物、ＭＡ及び４ＨＮのガスクロマトグ
ラフチャート（α−トコフェロール）である。

【図１０】図１０は、フェントン試験を用いるアラキド
ン酸の脂質過酸化生成物、ＭＡ及び４ＨＮのガスクロマ
トグラフチャート（２′−Ｏ−グルコシル−イソビテキ
シ

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ２３Ｌ 2/38 Ａ２３Ｌ 2/38 Ｆ 2/44 Ｃ０９Ｋ 15/34 Ｃ０９Ｋ 15/34 Ｃ０７Ｈ 17/07 // Ｃ０７Ｈ 17/07 Ａ２３Ｌ 2/00 Ｐ

Claims (9)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ２′−Ｏ−グルコシル−イソビテキシン
   又は緑色植物の緑葉から抽出された２′−Ｏ−グルコシ
   ル−イソビテキシンを含んでなる抗酸化活性画分を配合
   したことを特徴とする飲食品類。
2. 【請求項２】 抗酸化活性画分が、緑色植物の緑葉の水
   可溶性成分であって、含水率が０〜８０％の含水エタノ
   ールに可溶性である成分よりなる請求項１記載の飲食品
   類。
3. 【請求項３】 抗酸化活性画分が、緑色植物の緑葉成分
   であって、ｎ−ヘキサンに実質的に不溶性で且つ含水率
   が０〜８０％の含水エタノールに可溶性である成分より
   なる請求項１記載の飲食品類。
4. 【請求項４】 含水エタノールが含水率１５〜５０％の
   エタノールである請求項２または３記載の飲食品類。
5. 【請求項５】 緑色植物が麦類植物である請求項１〜４
   のいずれかに記載の飲食品類。
6. 【請求項６】 抗酸化活性画分が、緑色植物の緑葉成分
   であって、ｎ−ヘキサンに実質的に不溶性で且つ含水率
   が０〜８０％の含水エタノールに可溶性であり、さらに
   含水率が０〜８０％の含水メタノールに可溶性である成
   分よりなる請求項１記載の飲食品類。
7. 【請求項７】 含水エタノールが含水率１５〜５０％の
   エタノールである請求項６記載の飲食品類。
8. 【請求項８】 含水メタノールが含水率１０〜７０％の
   含水メタノールである請求項６または７に記載の飲食品
   類。
9. 【請求項９】 緑色植物が麦類植物である請求項６〜８
   のいずれかに記載の飲食品類。