JP2612671B2 - 光学活性なプロピオン酸エステルの製造法 - Google Patents
光学活性なプロピオン酸エステルの製造法Info
- Publication number
- JP2612671B2 JP2612671B2 JP6054169A JP5416994A JP2612671B2 JP 2612671 B2 JP2612671 B2 JP 2612671B2 JP 6054169 A JP6054169 A JP 6054169A JP 5416994 A JP5416994 A JP 5416994A JP 2612671 B2 JP2612671 B2 JP 2612671B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- reaction
- alkyl group
- general formula
- enzyme
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/004—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of alcohol- or thiol groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P11/00—Preparation of sulfur-containing organic compounds
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明の目的は、一般式（Ｉ）：
【０００２】
【化４】
【０００３】（式中、Ｘは−ＮＯ2 、−ＮＨ2 、−ＮＨ
ＣＯＣＨ3 、−ＮＨＣＯＣＦ3 、−ＮＨＣＯ2 ＣＨ3 、
−ＮＨＣＯ2 Ｃ（ＣＨ3 ）3 または−ＮＨＣＨＯであ
り、Ｒ1はアルキル基、好ましくはメチル基、エチル基
またはプロピル基などのＣ1 〜Ｃ6 のアルキル基であ
る）で表わされる、光学的に純粋な（２Ｓ，３Ｓ）−お
よび（２Ｒ，３Ｒ）−スレオ−アルキル−２−ヒドロキ
シ−３−（４−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フ
ェニルチオ）−プロピオン酸エステル、または一般式
（ＩＩ）：
ＣＯＣＨ3 、−ＮＨＣＯＣＦ3 、−ＮＨＣＯ2 ＣＨ3 、
−ＮＨＣＯ2 Ｃ（ＣＨ3 ）3 または−ＮＨＣＨＯであ
り、Ｒ1はアルキル基、好ましくはメチル基、エチル基
またはプロピル基などのＣ1 〜Ｃ6 のアルキル基であ
る）で表わされる、光学的に純粋な（２Ｓ，３Ｓ）−お
よび（２Ｒ，３Ｒ）−スレオ−アルキル−２−ヒドロキ
シ−３−（４−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フ
ェニルチオ）−プロピオン酸エステル、または一般式
（ＩＩ）：
【０００４】
【化５】
【０００５】（式中、ＸおよびＲ1 は前記に同じであ
り、Ｒはメチル基、エチル基またはプロピル基などのＣ
1 〜Ｃ6 のアルキル基である）で表わされる対応するア
シル化された化合物の新規な製造法である。
り、Ｒはメチル基、エチル基またはプロピル基などのＣ
1 〜Ｃ6 のアルキル基である）で表わされる対応するア
シル化された化合物の新規な製造法である。
【０００６】これらの化合物は、式（ＩＩＩ）：
【０００７】
【化６】
【０００８】で表わされるジルチアゼムの合成において
重要な中間体として用いることができる。ジルチアゼム
の絶対配置は（２Ｓ，３Ｓ）である。臨床の使用におい
てジルチアゼムは最も有望なカルシウムチャンネル阻害
剤のうちの１つである。
重要な中間体として用いることができる。ジルチアゼム
の絶対配置は（２Ｓ，３Ｓ）である。臨床の使用におい
てジルチアゼムは最も有望なカルシウムチャンネル阻害
剤のうちの１つである。
【０００９】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
（±）−２−ヒドロキシ−３−（４−メトキシフェニ
ル）−３−（２−アミノフェニルチオ）プロピオン酸お
よび（±）−２−ヒドロキシ−３−（４−メトキシフェ
ニル）−３−（２−アミノフェニルチオ）プロピオン酸
エステルの分離が、ＤＥ３３３７１７６およびＵＳ４９
０８４６９の特許公報に記載されており、光学活性なア
ミノ酸（Ｌ−リジン）または酒石酸を用いたジアステレ
オマー塩の形成による、（２−ニトロフェニルチオ）プ
ロピオン酸の対応するエナンチオマーの分離は、出版物
「ケミカル アンド ファーマシューティカル ブレチ
ン(Chemical and Pharmaceutical Bulletin)」３７（１
９８９）、３２０４〜３２０８に記載されている。
（±）−２−ヒドロキシ−３−（４−メトキシフェニ
ル）−３−（２−アミノフェニルチオ）プロピオン酸お
よび（±）−２−ヒドロキシ−３−（４−メトキシフェ
ニル）−３−（２−アミノフェニルチオ）プロピオン酸
エステルの分離が、ＤＥ３３３７１７６およびＵＳ４９
０８４６９の特許公報に記載されており、光学活性なア
ミノ酸（Ｌ−リジン）または酒石酸を用いたジアステレ
オマー塩の形成による、（２−ニトロフェニルチオ）プ
ロピオン酸の対応するエナンチオマーの分離は、出版物
「ケミカル アンド ファーマシューティカル ブレチ
ン(Chemical and Pharmaceutical Bulletin)」３７（１
９８９）、３２０４〜３２０８に記載されている。
【００１０】従来、（２Ｓ，３Ｓ）−スレオ−アルキル
−２−ヒドロキシ−３−（４−メトキシフェニル）−３
−（２−Ｘ−フェニルチオ）プロピオン酸エステルの生
体触媒による(biocatalytical)唯一の製造法は、ラセミ
の(racemic) スレオ−メチル−２−アシロキシ−３−
（４−メトキシフェニル）−３−（２−ニトロフェニル
チオ）プロピオン酸エステル（ＩＩａ）をリパーゼを触
媒として加水分解することが記載されている（ケミカル
アンド ファーマシューティカル ブレチン、３７
（１９８９）２８７６〜２８７８）。一般式（Ｉ）およ
び（ＩＩ）のタイプ(type)の化合物はあまり水に溶けな
いので、酵素的な加水分解はゆっくり進行する。このた
め、反応は水で飽和された有機溶媒中で行なわなければ
ならないのである。さらに、反応はカイネティックコン
トロール(kinetic control) にもとづいている。このた
め、光学活性な生成物の光学純度をできる限り高くしよ
うとするならば、その収率は低くなる。
−２−ヒドロキシ−３−（４−メトキシフェニル）−３
−（２−Ｘ−フェニルチオ）プロピオン酸エステルの生
体触媒による(biocatalytical)唯一の製造法は、ラセミ
の(racemic) スレオ−メチル−２−アシロキシ−３−
（４−メトキシフェニル）−３−（２−ニトロフェニル
チオ）プロピオン酸エステル（ＩＩａ）をリパーゼを触
媒として加水分解することが記載されている（ケミカル
アンド ファーマシューティカル ブレチン、３７
（１９８９）２８７６〜２８７８）。一般式（Ｉ）およ
び（ＩＩ）のタイプ(type)の化合物はあまり水に溶けな
いので、酵素的な加水分解はゆっくり進行する。このた
め、反応は水で飽和された有機溶媒中で行なわなければ
ならないのである。さらに、反応はカイネティックコン
トロール(kinetic control) にもとづいている。このた
め、光学活性な生成物の光学純度をできる限り高くしよ
うとするならば、その収率は低くなる。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明は、一般式
（Ｉ）：
（Ｉ）：
【００１２】
【化７】
【００１３】（式中、Ｘは−ＮＯ2 、−ＮＨ2 、−ＮＨ
ＣＯＣＨ3 、−ＮＨＣＯＣＦ3 、−ＮＨＣＯ2 ＣＨ3 、
−ＮＨＣＯ2 Ｃ（ＣＨ3 ）3 または−ＮＨＣＨＯであ
り、Ｒ1はアルキル基である）で表わされるラセミ化合
物をシュードモナス・セパシア由来のリパーゼを触媒と
して無水有機溶媒中でアシル化することからなる、一般
式（Ｉ）：
ＣＯＣＨ3 、−ＮＨＣＯＣＦ3 、−ＮＨＣＯ2 ＣＨ3 、
−ＮＨＣＯ2 Ｃ（ＣＨ3 ）3 または−ＮＨＣＨＯであ
り、Ｒ1はアルキル基である）で表わされるラセミ化合
物をシュードモナス・セパシア由来のリパーゼを触媒と
して無水有機溶媒中でアシル化することからなる、一般
式（Ｉ）：
【００１４】
【化８】
【００１５】（式中、ＸおよびＲ1 は前記に同じ）で表
わされる（２Ｓ，３Ｓ）−スレオ−アルキル−２−ヒド
ロキシ−３−（４−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ
−フェニルチオ）プロピオン酸エステルおよび一般式
（ＩＩ）：
わされる（２Ｓ，３Ｓ）−スレオ−アルキル−２−ヒド
ロキシ−３−（４−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ
−フェニルチオ）プロピオン酸エステルおよび一般式
（ＩＩ）：
【００１６】
【化９】
【００１７】（式中、ＸおよびＲ1 は前記に同じであ
り、ＲはＣ1 〜Ｃ6 のアルキル基である）で表わされる
（２Ｒ，３Ｒ）−スレオ−アルキル−２−アシロキシ−
３−（４−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フェニ
ルチオ）プロピオン酸エステルの製造法に関する。ここ
で、Ｒ1 で示されるアルキル基がＣ1 〜Ｃ6 のアルキル
基である製造法、リパーゼが、単離された粉末状で用い
られるか、またはセライト(Celite)もしくはクロモソル
ブ(Chromosorb)に固定されている製造法、酸無水物、ビ
ニルエステルまたは酢酸アセトンオキシム(acetoneoxim
e acetate)をアシル化試薬として用いる製造法、溶媒と
して前記一般式（Ｉ）および（II）で表わされる化合物
が溶解する無水有機溶媒を用いる製造法、反応温度が２
０℃〜６０℃である製造法、（２Ｓ，３Ｓ）形の化合物
（Ｉ）を、分別結晶法またはクロマトグラフィーによっ
て、（２Ｒ，３Ｒ）形の化合物（II）から分離しうる製
造法が好ましい。
り、ＲはＣ1 〜Ｃ6 のアルキル基である）で表わされる
（２Ｒ，３Ｒ）−スレオ−アルキル−２−アシロキシ−
３−（４−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フェニ
ルチオ）プロピオン酸エステルの製造法に関する。ここ
で、Ｒ1 で示されるアルキル基がＣ1 〜Ｃ6 のアルキル
基である製造法、リパーゼが、単離された粉末状で用い
られるか、またはセライト(Celite)もしくはクロモソル
ブ(Chromosorb)に固定されている製造法、酸無水物、ビ
ニルエステルまたは酢酸アセトンオキシム(acetoneoxim
e acetate)をアシル化試薬として用いる製造法、溶媒と
して前記一般式（Ｉ）および（II）で表わされる化合物
が溶解する無水有機溶媒を用いる製造法、反応温度が２
０℃〜６０℃である製造法、（２Ｓ，３Ｓ）形の化合物
（Ｉ）を、分別結晶法またはクロマトグラフィーによっ
て、（２Ｒ，３Ｒ）形の化合物（II）から分離しうる製
造法が好ましい。
【００１８】本発明の目的は、簡単な酵素的な方法でラ
セミのスレオ−アルキル−２−ヒドロキシ−３−（４−
メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フェニルチオ）プ
ロピオン酸エステル（Ｉ）を分割することであり、これ
は無水有機溶媒中での化合物（Ｉ）の２位の第二級水酸
基の、生体触媒による、実際ほとんどエナンチオ特異的
な(enantiospecific) アシル化反応にもとづくものであ
る。化合物（Ｉ）および（ＩＩ）が溶解する種々の無水
有機溶媒が溶媒として用いられる。たとえば、テトラヒ
ドロフラン（以下、ＴＨＦという）、ジエチルエーテ
ル、トルエン、酢酸ビニル、ジイソプロピルエーテルな
どがあげられる。酵素としてのタンパク質は有機溶媒に
は溶けないので、基質および生成物が選択された溶媒に
溶けるということにとくに注意しなければならない。記
載した方法の利点はそのつぎの反応に関して化合物
（Ｉ）が安定であることである。反応収率は緩やかな条
件では良好である。反応温度は２０℃〜６０℃が好まし
い。記載した生体触媒による分割は、ラセミ混合物の
「逆の(wrong) 」エナンチオマーとアキラルな基質との
選択的な反応にもとづくものであり、ジアステレオマー
の生成にもとづくものではないということも好都合であ
る。ジアステレオマーの生成と類似の化学的分割におい
ては、光学的に純粋な化合物（たとえば、Ｌ−リジン）
の入手しやすさ、ジアステレオマーの分解(dismountin
g) 、たとえば遊離の(liberated) Ｌ−リジンの単離、
および１つの分割から別の分割へそれをリサイクルする
ことが要求される。本発明の反応では、アシル化されて
いない（２Ｓ，３Ｓ）−エナンチオマーを、あとで記載
する方法を用いて（２Ｓ，３Ｓ）−シス−ジルチアゼム
の製造に用いることができる。
セミのスレオ−アルキル−２−ヒドロキシ−３−（４−
メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フェニルチオ）プ
ロピオン酸エステル（Ｉ）を分割することであり、これ
は無水有機溶媒中での化合物（Ｉ）の２位の第二級水酸
基の、生体触媒による、実際ほとんどエナンチオ特異的
な(enantiospecific) アシル化反応にもとづくものであ
る。化合物（Ｉ）および（ＩＩ）が溶解する種々の無水
有機溶媒が溶媒として用いられる。たとえば、テトラヒ
ドロフラン（以下、ＴＨＦという）、ジエチルエーテ
ル、トルエン、酢酸ビニル、ジイソプロピルエーテルな
どがあげられる。酵素としてのタンパク質は有機溶媒に
は溶けないので、基質および生成物が選択された溶媒に
溶けるということにとくに注意しなければならない。記
載した方法の利点はそのつぎの反応に関して化合物
（Ｉ）が安定であることである。反応収率は緩やかな条
件では良好である。反応温度は２０℃〜６０℃が好まし
い。記載した生体触媒による分割は、ラセミ混合物の
「逆の(wrong) 」エナンチオマーとアキラルな基質との
選択的な反応にもとづくものであり、ジアステレオマー
の生成にもとづくものではないということも好都合であ
る。ジアステレオマーの生成と類似の化学的分割におい
ては、光学的に純粋な化合物（たとえば、Ｌ−リジン）
の入手しやすさ、ジアステレオマーの分解(dismountin
g) 、たとえば遊離の(liberated) Ｌ−リジンの単離、
および１つの分割から別の分割へそれをリサイクルする
ことが要求される。本発明の反応では、アシル化されて
いない（２Ｓ，３Ｓ）−エナンチオマーを、あとで記載
する方法を用いて（２Ｓ，３Ｓ）−シス−ジルチアゼム
の製造に用いることができる。
【００１９】
【実施例】化合物（Ｉ）において、Ｘが−ＮＯ2 である
ものを（Ｉａ）とし、Ｘ＝−ＮＨ2 のものを（Ｉｂ）と
し、Ｘ＝−ＮＨＣＯＣＨ3 のものを（Ｉｃ）とし、Ｘ＝
−ＮＨＣＯＣＦ3 のものを（Ｉｄ）とし、Ｘ＝−ＮＨＣ
Ｏ2 ＣＨ3 のものを（Ｉｅ）とし、Ｘ＝−ＮＨＣＯ2 Ｃ
（ＣＨ3 ）3 のものを（Ｉｆ）とし、Ｘ＝−ＮＨＣＨＯ
のものを（Ｉｇ）と称することにする。
ものを（Ｉａ）とし、Ｘ＝−ＮＨ2 のものを（Ｉｂ）と
し、Ｘ＝−ＮＨＣＯＣＨ3 のものを（Ｉｃ）とし、Ｘ＝
−ＮＨＣＯＣＦ3 のものを（Ｉｄ）とし、Ｘ＝−ＮＨＣ
Ｏ2 ＣＨ3 のものを（Ｉｅ）とし、Ｘ＝−ＮＨＣＯ2 Ｃ
（ＣＨ3 ）3 のものを（Ｉｆ）とし、Ｘ＝−ＮＨＣＨＯ
のものを（Ｉｇ）と称することにする。
【００２０】生体触媒として、種々の市販のリパーゼに
ついて、それ自体で（たとえば、単離された粉末状で）
または固体支持体（セライト（登録商標(registered tr
adename) またはクロモソルブ（登録商標））に固定し
た状態のいずれで用いることもできる。リパーゼとし
て、ムコール・ミーハイ(Mucor miehei)由来（バイオキ
ャタリスト(Biocatalysts)社（イギリス）製）、キャン
ディダ・リポリティカ(Candida lypolytica)由来（バイ
オキャタリスト社製）、キャンディダ・シリンドラセア
(Candida cylindracea) 由来（シグマ(Sigma) 社製）、
キャンディダ・シリンドラセア由来（ＡＹ３０、天野製
薬（株）製）、アスペルギルス・ニガー(Aspergillus n
iger) 由来（ＡＰ−６、天野製薬（株）製）およびシュ
ードモナス・セパシア(Pseudomonas cepacia) 由来（リ
パーゼＰＳ、天野製薬（株）製）のものなどがあげられ
るが、そのうち、天野製薬（株）のリパーゼＰＳがとく
に好ましい。ほとんどのばあい、リパーゼは実際エナン
チオ特異的に作用する。すなわち、反応は５０％の転化
率で停止し、分割生成物（ラセミ混合物の未反応の（２
Ｓ，３Ｓ）形のエナンチオマー（Ｉ）および（２Ｒ，３
Ｒ）形の反応生成物（ＩＩ））は、光学的に純粋な物質
としてほとんど１００％の収率で単離することができ
る。固定化したリパーゼの活性は、無処理の酵素の活性
と比較したばあい、相乗的で(multiple)あり、固定化し
た酵素の活性は再使用しても、より長く持続する。
ついて、それ自体で（たとえば、単離された粉末状で）
または固体支持体（セライト（登録商標(registered tr
adename) またはクロモソルブ（登録商標））に固定し
た状態のいずれで用いることもできる。リパーゼとし
て、ムコール・ミーハイ(Mucor miehei)由来（バイオキ
ャタリスト(Biocatalysts)社（イギリス）製）、キャン
ディダ・リポリティカ(Candida lypolytica)由来（バイ
オキャタリスト社製）、キャンディダ・シリンドラセア
(Candida cylindracea) 由来（シグマ(Sigma) 社製）、
キャンディダ・シリンドラセア由来（ＡＹ３０、天野製
薬（株）製）、アスペルギルス・ニガー(Aspergillus n
iger) 由来（ＡＰ−６、天野製薬（株）製）およびシュ
ードモナス・セパシア(Pseudomonas cepacia) 由来（リ
パーゼＰＳ、天野製薬（株）製）のものなどがあげられ
るが、そのうち、天野製薬（株）のリパーゼＰＳがとく
に好ましい。ほとんどのばあい、リパーゼは実際エナン
チオ特異的に作用する。すなわち、反応は５０％の転化
率で停止し、分割生成物（ラセミ混合物の未反応の（２
Ｓ，３Ｓ）形のエナンチオマー（Ｉ）および（２Ｒ，３
Ｒ）形の反応生成物（ＩＩ））は、光学的に純粋な物質
としてほとんど１００％の収率で単離することができ
る。固定化したリパーゼの活性は、無処理の酵素の活性
と比較したばあい、相乗的で(multiple)あり、固定化し
た酵素の活性は再使用しても、より長く持続する。
【００２１】本発明の方法の特徴は、一般式（Ｉ）：
【００２２】
【化１０】
【００２３】（式中、Ｘは−ＮＯ2 、−ＮＨ2 、−ＮＨ
ＣＯＣＨ3 、−ＮＨＣＯＣＦ3 、−ＮＨＣＯ2 ＣＨ3 、
−ＮＨＣＯ2 Ｃ（ＣＨ3 ）3 または−ＮＨＣＨＯであ
り、Ｒ1はアルキル基、好ましくはメチル基、エチル基
またはプロピル基などのＣ1 〜Ｃ6 のアルキル基であ
る）で表わされるラセミ化合物のエナンチオマーを、無
処理の市販の酵素または固体支持体に固定化した酵素の
存在下、有機溶媒中２０℃〜６０℃の温度で適当なアシ
ル化試薬と反応させて、一般式（ＩＩ）：
ＣＯＣＨ3 、−ＮＨＣＯＣＦ3 、−ＮＨＣＯ2 ＣＨ3 、
−ＮＨＣＯ2 Ｃ（ＣＨ3 ）3 または−ＮＨＣＨＯであ
り、Ｒ1はアルキル基、好ましくはメチル基、エチル基
またはプロピル基などのＣ1 〜Ｃ6 のアルキル基であ
る）で表わされるラセミ化合物のエナンチオマーを、無
処理の市販の酵素または固体支持体に固定化した酵素の
存在下、有機溶媒中２０℃〜６０℃の温度で適当なアシ
ル化試薬と反応させて、一般式（ＩＩ）：
【００２４】
【化１１】
【００２５】（式中、ＸおよびＲ1 は前記に同じであ
り、Ｒはメチル基、エチル基またはプロピル基などのＣ
1 〜Ｃ6 のアルキル基である）で表わされるアシル化さ
れた（２Ｒ，３Ｒ）−スレオ−アルキル−２−アセトキ
シ−３−（４−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フ
ェニルチオ）プロピオン酸エステルを生成させ、これを
未反応の（２Ｓ，３Ｓ）形のエナンチオマー（Ｉ）か
ら、クロマトグラフィーによって、またはジエチルエー
テルまたはトルエンから分別結晶法によって、分離して
えることである。
り、Ｒはメチル基、エチル基またはプロピル基などのＣ
1 〜Ｃ6 のアルキル基である）で表わされるアシル化さ
れた（２Ｒ，３Ｒ）−スレオ−アルキル−２−アセトキ
シ−３−（４−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フ
ェニルチオ）プロピオン酸エステルを生成させ、これを
未反応の（２Ｓ，３Ｓ）形のエナンチオマー（Ｉ）か
ら、クロマトグラフィーによって、またはジエチルエー
テルまたはトルエンから分別結晶法によって、分離して
えることである。
【００２６】有用な医薬物質ジルチアゼムは、（２Ｓ，
３Ｓ）形のエナンチオマー（Ｉ）から保護基を除去した
のち（およびＸがＮＯ2 であればニトロ基を還元したの
ち）、式（ＩＶ）：
３Ｓ）形のエナンチオマー（Ｉ）から保護基を除去した
のち（およびＸがＮＯ2 であればニトロ基を還元したの
ち）、式（ＩＶ）：
【００２７】
【化１２】
【００２８】で示される（２Ｓ，３Ｓ）形の酸をラクト
ン化することにより、えられる。
ン化することにより、えられる。
【００２９】式（Ｖａ）：
【００３０】
【化１３】
【００３１】で示されるラクタムのアミノアルキル化
は、たとえば溶媒としてトルエンおよびＮ−メチルピロ
リジン−２−オンの混合物を、塩基として炭酸カリウム
を用いることにより行なわれる。こうしてえられる式
（Ｖｂ）：
は、たとえば溶媒としてトルエンおよびＮ−メチルピロ
リジン−２−オンの混合物を、塩基として炭酸カリウム
を用いることにより行なわれる。こうしてえられる式
（Ｖｂ）：
【００３２】
【化１４】
【００３３】で示されるアミノアルキル化された中間体
は、無水酢酸でアシル化され、えられるジルチアゼム
（ＩＩＩ）はエタノールからその塩酸塩として結晶化さ
れる。
は、無水酢酸でアシル化され、えられるジルチアゼム
（ＩＩＩ）はエタノールからその塩酸塩として結晶化さ
れる。
【００３４】本発明の方法を用いることによって、リパ
ーゼの特異性を用いて有機溶媒中で対応する（２Ｒ，３
Ｒ）形のエナンチオマーをアシル化するとき、立体化学
的に純粋な（２Ｓ，３Ｓ）形の化合物（Ｉ）を製造する
ことができる。化合物（Ｉａ）のばあい、チオフェノー
ル環の２位のＮＯ2 基は、ジルチアゼムを合成するため
にはＮＨ2 基に還元しなければならない。化合物（Ｉ
ｂ）のばあい、酵素的なアシル化とともに、つねにいく
ばくかの、チオフェノール環のＮＨ2 基の非酵素的なア
シル化がおこる。そのため、前記のＮＨ2 基が分割前に
適当な保護基で保護されるならば、最終的な結果は生成
物の性質の観点からするとよりあいまいでなく(unambig
uous) なる。化合物（Ｉｃ）、（Ｉｄ）、（Ｉｅ）、
（Ｉｆ）または（Ｉｇ）を製造する際、アミノ基の保護
および分割後の保護基の除去は通常の方法で行なわれ
る。
ーゼの特異性を用いて有機溶媒中で対応する（２Ｒ，３
Ｒ）形のエナンチオマーをアシル化するとき、立体化学
的に純粋な（２Ｓ，３Ｓ）形の化合物（Ｉ）を製造する
ことができる。化合物（Ｉａ）のばあい、チオフェノー
ル環の２位のＮＯ2 基は、ジルチアゼムを合成するため
にはＮＨ2 基に還元しなければならない。化合物（Ｉ
ｂ）のばあい、酵素的なアシル化とともに、つねにいく
ばくかの、チオフェノール環のＮＨ2 基の非酵素的なア
シル化がおこる。そのため、前記のＮＨ2 基が分割前に
適当な保護基で保護されるならば、最終的な結果は生成
物の性質の観点からするとよりあいまいでなく(unambig
uous) なる。化合物（Ｉｃ）、（Ｉｄ）、（Ｉｅ）、
（Ｉｆ）または（Ｉｇ）を製造する際、アミノ基の保護
および分割後の保護基の除去は通常の方法で行なわれ
る。
【００３５】本発明の方法によれば、立体的に束縛され
た(hindered)アルコール（Ｉ）をアシル化するのに充分
効果的で、反応が適度な時間に完結するようなアシル化
試薬であれば、どんなものでも用いることができる。ま
た、アシル化試薬ゆえに、エステル交換反応の平衡がで
きる限り完全に生成物を生成するのに有利に働く(favou
rs) ということも必要である。酸無水物、オキシムエス
テル、ビニルエステルおよび２，２，２−トリフルオロ
エチル酢酸エステルなどの活性化されたエステルなどが
アシル化試薬として好ましい。たとえば、（ＣＨ3 Ｃ
Ｏ）2 Ｏ、（ＰｒＣＯ2 ）Ｏ、ＣＨ3 ＣＯ2 ＣＨ＝ＣＨ
2 、ＣＨ3 ＣＯ2 −Ｎ＝Ｃ（ＣＨ3 ）2 、ＣＨ3 ＣＯ2
Ｃ（ＣＨ3 ）＝ＣＨ2 などがあげられる。ビニルエステ
ルなどの、ある種のアシル化試薬は溶媒として用いるこ
ともできる。ほかの好ましい溶媒としては、酵素をまず
反応混合物から濾過によって除去し、未反応の（２Ｓ，
３Ｓ）体（Ｉ）を濃縮後分別結晶法によって単離するな
ら、とりわけジエチルエーテルおよびトルエンがあげら
れる。
た(hindered)アルコール（Ｉ）をアシル化するのに充分
効果的で、反応が適度な時間に完結するようなアシル化
試薬であれば、どんなものでも用いることができる。ま
た、アシル化試薬ゆえに、エステル交換反応の平衡がで
きる限り完全に生成物を生成するのに有利に働く(favou
rs) ということも必要である。酸無水物、オキシムエス
テル、ビニルエステルおよび２，２，２−トリフルオロ
エチル酢酸エステルなどの活性化されたエステルなどが
アシル化試薬として好ましい。たとえば、（ＣＨ3 Ｃ
Ｏ）2 Ｏ、（ＰｒＣＯ2 ）Ｏ、ＣＨ3 ＣＯ2 ＣＨ＝ＣＨ
2 、ＣＨ3 ＣＯ2 −Ｎ＝Ｃ（ＣＨ3 ）2 、ＣＨ3 ＣＯ2
Ｃ（ＣＨ3 ）＝ＣＨ2 などがあげられる。ビニルエステ
ルなどの、ある種のアシル化試薬は溶媒として用いるこ
ともできる。ほかの好ましい溶媒としては、酵素をまず
反応混合物から濾過によって除去し、未反応の（２Ｓ，
３Ｓ）体（Ｉ）を濃縮後分別結晶法によって単離するな
ら、とりわけジエチルエーテルおよびトルエンがあげら
れる。
【００３６】以下に例をあげて本発明を説明するが、本
発明はこれらに限定されるものではない。
発明はこれらに限定されるものではない。
【００３７】実施例１ リパーゼＰＳの特異性およびラ
セミアルコール（Ｉａ）〜（Ｉｇ）のアシル化 方法Ａ ラセミアルコール（Ｉａ）〜（Ｉｇ）（Ｒ1 はＣＨ3 ま
たはＣＨ2 ＣＨ3 ）のうちの１つに関して０．０５Ｍで
あり、酢酸ビニルもしくは酢酸アセトンオキシム、無水
酢酸または無水酪酸などのアシル化試薬に関して０．２
Ｍである、有機溶媒１ｍｌを、市販のリパーゼＰＳが一
定量入った反応容器に加えた。使用した試薬、溶媒およ
び酵素の分析結果をそれぞれ表１に示す。反応混合物を
表１に記載の温度で振とう器中で効果的に振とうした。
反応の進行は適当な間隔で反応混合物をサンプリングす
ることによって追跡し、酵素を濾過によって除去したの
ち、サンプルを液体クロマトグラフ（カラム：Ｃ−１
８、溶離剤：ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏ＝７０／３０）に注入し
た。反応は約５０％の転化率で停止した。過剰の未反応
の（２Ｓ，３Ｓ）形のエナンチオマーを、ＨＰＬＣ法
（カラム：キラルセル(Chiralcel) ＯＧ（商品名、キラ
ルなＨＰＬＣカラム）、溶離剤：ヘキサン／イソプロピ
ルアルコール＝７０／３０）によって、反応混合物から
採取したサンプルから直接検出した。化合物（Ｉａ）、
（Ｉｂ）および（Ｉｃ）のばあい、エナンチオマーはＨ
ＰＬＣの条件では完全には分離しない。このため、ｅ．
ｅ．の値はＥｕ（ｈｆｃ）3 の存在下で 1Ｈ ＮＭＲ分
光法によっても決定したのである。
セミアルコール（Ｉａ）〜（Ｉｇ）のアシル化 方法Ａ ラセミアルコール（Ｉａ）〜（Ｉｇ）（Ｒ1 はＣＨ3 ま
たはＣＨ2 ＣＨ3 ）のうちの１つに関して０．０５Ｍで
あり、酢酸ビニルもしくは酢酸アセトンオキシム、無水
酢酸または無水酪酸などのアシル化試薬に関して０．２
Ｍである、有機溶媒１ｍｌを、市販のリパーゼＰＳが一
定量入った反応容器に加えた。使用した試薬、溶媒およ
び酵素の分析結果をそれぞれ表１に示す。反応混合物を
表１に記載の温度で振とう器中で効果的に振とうした。
反応の進行は適当な間隔で反応混合物をサンプリングす
ることによって追跡し、酵素を濾過によって除去したの
ち、サンプルを液体クロマトグラフ（カラム：Ｃ−１
８、溶離剤：ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏ＝７０／３０）に注入し
た。反応は約５０％の転化率で停止した。過剰の未反応
の（２Ｓ，３Ｓ）形のエナンチオマーを、ＨＰＬＣ法
（カラム：キラルセル(Chiralcel) ＯＧ（商品名、キラ
ルなＨＰＬＣカラム）、溶離剤：ヘキサン／イソプロピ
ルアルコール＝７０／３０）によって、反応混合物から
採取したサンプルから直接検出した。化合物（Ｉａ）、
（Ｉｂ）および（Ｉｃ）のばあい、エナンチオマーはＨ
ＰＬＣの条件では完全には分離しない。このため、ｅ．
ｅ．の値はＥｕ（ｈｆｃ）3 の存在下で 1Ｈ ＮＭＲ分
光法によっても決定したのである。
【００３８】方法Ｂ 用いる酵素は使用前に固体支持体に固定した。そのた
め、０．４ｇのリパーゼＰＳを２０ｍＭのＴＲＩＳ：Ｈ
Ｃｌ−バッファー（ｐＨ８．０）１５ｍｌにアイスバッ
チ（icebatch）を用いて溶解した。これにサッカロース
２４０ｍｇおよび４ｇの支持物質（セライト（アルドリ
ッチ（Aldrich ）社製）またはクロモソルブ１０１（８
０〜１００メッシュ、シグマ社製）を加えた。混合物は
１０〜１５分間撹拌した。酵素調製物（preparation ）
は室温にてガラス上で乾燥させた。
め、０．４ｇのリパーゼＰＳを２０ｍＭのＴＲＩＳ：Ｈ
Ｃｌ−バッファー（ｐＨ８．０）１５ｍｌにアイスバッ
チ（icebatch）を用いて溶解した。これにサッカロース
２４０ｍｇおよび４ｇの支持物質（セライト（アルドリ
ッチ（Aldrich ）社製）またはクロモソルブ１０１（８
０〜１００メッシュ、シグマ社製）を加えた。混合物は
１０〜１５分間撹拌した。酵素調製物（preparation ）
は室温にてガラス上で乾燥させた。
【００３９】化合物（Ｉａ）〜（Ｉｇ）（Ｒ1 ＝Ｃ
Ｈ3 ）の酢酸ビニルによるアシル化は、酵素調製物の量
を秤量することおよび含有されるリパーゼＰＳの量が表
１に与えられている量と一致することを除いて、方法Ａ
に示されているように行なった。使用した試薬、溶媒な
どは同じく表１に示した。
Ｈ3 ）の酢酸ビニルによるアシル化は、酵素調製物の量
を秤量することおよび含有されるリパーゼＰＳの量が表
１に与えられている量と一致することを除いて、方法Ａ
に示されているように行なった。使用した試薬、溶媒な
どは同じく表１に示した。
【００４０】方法ＡおよびＢからえられた結果を表１に
示す。
示す。
【００４１】
【表１】
【００４２】
【表２】
【００４３】実施例２ （２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉａ）およ
び（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩａ）の製造 ＴＨＦ６０ｍｌに１．１ｇ（０．００３０ｍｏｌ）のラ
セミ化合物（Ｉａ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）および０．８０ｍ
ｌ（０．００８５ｍｏｌ）の酢酸無水物を溶解させたも
のを、６ｇの酵素（リパーゼＰＳ）の入った反応容器に
加えた。反応混合物を室温で２日間振とうし、その後反
応は停止した。濾過により酵素を分離し、ＴＨＦを蒸発
させた。ジクロロメタンに溶解させた残渣を飽和のＮａ
ＨＣＯ3溶液および水で洗浄した。（２Ｓ，３Ｓ）体
（Ｉａ）および（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩａ）（Ｒ＝ＣＨ
3 ）は、溶離剤としてＣＨ2 Ｃｌ2 ／ヘキサン／酢酸エ
チル（６３／３１／６）の混合物を用いてフラッシュク
ロマトグラフィーで（flash-chromatographically ）分
離した。その結果、実施例１のＨＰＬＣ法によれば光学
的に純粋な生成物である、未反応の出発物質（Ｉａ）
０．５６ｇ（０．００１５ｍｏｌ）、および化合物（Ｉ
Ｉａ）（Ｒ＝ＣＨ3 ）０．６３ｇ（０．００１５ｍｏ
ｌ）がえられた。両方の化合物とも、同じく 1Ｈ ＮＭ
Ｒ分光法による測定（Ｉａ：ＣＯ2 Ｍｅ、Ｅｕ（ｈｆ
ｃ）3 をシフト試薬として用いたとき、σ＝３．８４お
よび３．９４）によって、光学的に純粋（ｅ．ｅ．＞＞
９５％）であった。
び（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩａ）の製造 ＴＨＦ６０ｍｌに１．１ｇ（０．００３０ｍｏｌ）のラ
セミ化合物（Ｉａ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）および０．８０ｍ
ｌ（０．００８５ｍｏｌ）の酢酸無水物を溶解させたも
のを、６ｇの酵素（リパーゼＰＳ）の入った反応容器に
加えた。反応混合物を室温で２日間振とうし、その後反
応は停止した。濾過により酵素を分離し、ＴＨＦを蒸発
させた。ジクロロメタンに溶解させた残渣を飽和のＮａ
ＨＣＯ3溶液および水で洗浄した。（２Ｓ，３Ｓ）体
（Ｉａ）および（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩａ）（Ｒ＝ＣＨ
3 ）は、溶離剤としてＣＨ2 Ｃｌ2 ／ヘキサン／酢酸エ
チル（６３／３１／６）の混合物を用いてフラッシュク
ロマトグラフィーで（flash-chromatographically ）分
離した。その結果、実施例１のＨＰＬＣ法によれば光学
的に純粋な生成物である、未反応の出発物質（Ｉａ）
０．５６ｇ（０．００１５ｍｏｌ）、および化合物（Ｉ
Ｉａ）（Ｒ＝ＣＨ3 ）０．６３ｇ（０．００１５ｍｏ
ｌ）がえられた。両方の化合物とも、同じく 1Ｈ ＮＭ
Ｒ分光法による測定（Ｉａ：ＣＯ2 Ｍｅ、Ｅｕ（ｈｆ
ｃ）3 をシフト試薬として用いたとき、σ＝３．８４お
よび３．９４）によって、光学的に純粋（ｅ．ｅ．＞＞
９５％）であった。
【００４４】調製された前記の光学的に純粋な化合物
（Ｉａ）の絶対配置を決定するために、対応する酸に加
水分解した。前記の分離された化合物（Ｉａ）０．３９
ｇをメタノールおよびＮａＯＨ溶液（０．５Ｍ）２／１
の混合物１５ｍｌに溶解した。加水分解が完結したと
き、反応混合物を塩酸を用いて酸性にすることによって
生成した酸は沈澱した。えられた酸の融点は１１３〜１
１４℃であり、
（Ｉａ）の絶対配置を決定するために、対応する酸に加
水分解した。前記の分離された化合物（Ｉａ）０．３９
ｇをメタノールおよびＮａＯＨ溶液（０．５Ｍ）２／１
の混合物１５ｍｌに溶解した。加水分解が完結したと
き、反応混合物を塩酸を用いて酸性にすることによって
生成した酸は沈澱した。えられた酸の融点は１１３〜１
１４℃であり、
【００４５】
【数１】
【００４６】であった。酸の（２Ｓ，３Ｓ）形のエナン
チオマーに対して対応する文献での値は融点が１１１℃
で、
チオマーに対して対応する文献での値は融点が１１１℃
で、
【００４７】
【数２】
【００４８】である（セヌマ（Senuma）ら、ケミカル
アンド ファーマシューティカル ブレチン、３７（１
９８９）３２０４）。
アンド ファーマシューティカル ブレチン、３７（１
９８９）３２０４）。
【００４９】実施例３ 化合物（Ｉｂ）の分割 酵素を実施例１に記載のようにセライトに固定した。ジ
エチルエーテル４０ｍｌに１．３３ｇ（０．００４０ｍ
ｏｌ）の化合物（Ｉｂ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）および０．９
２ｍｌ（０．００８０ｍｏｌ）の酢酸アセトンオキシム
を溶解させたものを、セライトに固定した酵素１．２５
ｇ（リパーゼＰＳ ０．２ｇ）の入った反応容器に加え
た。２日後転化率５２％で反応を停止した。濾過により
酵素を分離し、未反応の出発物質（Ｉｂ）および反応生
成物（ＩＩｂ）（Ｒ＝ＣＨ3 ）を、溶離剤としてＣＨ2
Ｃｌ2 ／トルエン／酢酸エチル（１／１／１）の混合物
を用いてフラッシュクロマトグラフィーで分離した。そ
の結果
エチルエーテル４０ｍｌに１．３３ｇ（０．００４０ｍ
ｏｌ）の化合物（Ｉｂ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）および０．９
２ｍｌ（０．００８０ｍｏｌ）の酢酸アセトンオキシム
を溶解させたものを、セライトに固定した酵素１．２５
ｇ（リパーゼＰＳ ０．２ｇ）の入った反応容器に加え
た。２日後転化率５２％で反応を停止した。濾過により
酵素を分離し、未反応の出発物質（Ｉｂ）および反応生
成物（ＩＩｂ）（Ｒ＝ＣＨ3 ）を、溶離剤としてＣＨ2
Ｃｌ2 ／トルエン／酢酸エチル（１／１／１）の混合物
を用いてフラッシュクロマトグラフィーで分離した。そ
の結果
【００５０】
【数３】
【００５１】および融点１０７〜１０９℃である、白色
結晶の化合物（Ｉｂ）０．５９ｇ（０．００１８ｍｏ
ｌ）がえられた。固有の旋光度によれば、この化合物は
純粋な（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｂ）であった（ＵＳ４９０
８４６９では２２℃での固有の旋光度は＋２９４°（ｃ
０．５、ＭｅＯＨ）であり、融点は１０８〜１０９℃で
あった）。また、この反応では、０．６８ｇ（０．００
１８ｍｏｌ）の黄色がかった非晶質の化合物（２Ｒ，３
Ｒ）体（ＩＩｂ）（Ｒ＝ＣＨ3 ）、
結晶の化合物（Ｉｂ）０．５９ｇ（０．００１８ｍｏ
ｌ）がえられた。固有の旋光度によれば、この化合物は
純粋な（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｂ）であった（ＵＳ４９０
８４６９では２２℃での固有の旋光度は＋２９４°（ｃ
０．５、ＭｅＯＨ）であり、融点は１０８〜１０９℃で
あった）。また、この反応では、０．６８ｇ（０．００
１８ｍｏｌ）の黄色がかった非晶質の化合物（２Ｒ，３
Ｒ）体（ＩＩｂ）（Ｒ＝ＣＨ3 ）、
【００５２】
【数４】
【００５３】もえられた。
【００５４】実施例４ 化合物（Ｉｃ）の分割および
（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｂ）および（２Ｒ，３Ｒ）体（Ｉ
ｂ）の製造 ジエチルエーテル３２０ｍｌに６．０ｇ（０．０１６ｍ
ｏｌ）のラセミ化合物（Ｉｃ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）および
５．５ｇ（０．０６４ｍｏｌ）の酢酸ビニルを溶解させ
たものを、１．６ｇの酵素（リパーゼＰＳ）の入った反
応容器に加えた。反応混合物は反応温度４４℃で振とう
または混合したのち、４８時間で、転化率５０％で反応
は停止した。反応の追跡はＨＰＬＣ法（カラム：Ｃ−１
８、溶離剤：ＭｅＯＨ／Ｈ2 Ｏ＝７０／３０）を用いて
行なった。酵素を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し
た。その後、酵素は再使用することができる。エーテル
溶液は混合して濃縮した。（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｃ）は
−４℃で反応混合物から結晶化した。粗生成物をジイソ
プロピルエーテルから再結晶させると、
（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｂ）および（２Ｒ，３Ｒ）体（Ｉ
ｂ）の製造 ジエチルエーテル３２０ｍｌに６．０ｇ（０．０１６ｍ
ｏｌ）のラセミ化合物（Ｉｃ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）および
５．５ｇ（０．０６４ｍｏｌ）の酢酸ビニルを溶解させ
たものを、１．６ｇの酵素（リパーゼＰＳ）の入った反
応容器に加えた。反応混合物は反応温度４４℃で振とう
または混合したのち、４８時間で、転化率５０％で反応
は停止した。反応の追跡はＨＰＬＣ法（カラム：Ｃ−１
８、溶離剤：ＭｅＯＨ／Ｈ2 Ｏ＝７０／３０）を用いて
行なった。酵素を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し
た。その後、酵素は再使用することができる。エーテル
溶液は混合して濃縮した。（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｃ）は
−４℃で反応混合物から結晶化した。粗生成物をジイソ
プロピルエーテルから再結晶させると、
【００５５】
【数５】
【００５６】および融点１２８〜１２９℃である、白色
結晶２．６１ｇ（０．００７０ｍｏｌ、理論上の収率８
７％）がえられた。フラッシュクロマトグラフィーを用
いると、（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｃ）の収率は５０％であ
った。すなわち分割の理論上の収率は１００％であっ
た。
結晶２．６１ｇ（０．００７０ｍｏｌ、理論上の収率８
７％）がえられた。フラッシュクロマトグラフィーを用
いると、（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｃ）の収率は５０％であ
った。すなわち分割の理論上の収率は１００％であっ
た。
【００５７】残った反応混合物から、溶離剤としてトル
エン／酢酸エチル／ＣＨ2 Ｃｌ2 （１／１／１）を用い
て、３．４１ｇ（０．００８０ｍｏｌ、理論上の収率１
００％）のアセチル化された反応生成物（２Ｒ，３Ｒ）
体（ＩＩｃ）を分離した。生成物は黄色がかった油状物
であり、
エン／酢酸エチル／ＣＨ2 Ｃｌ2 （１／１／１）を用い
て、３．４１ｇ（０．００８０ｍｏｌ、理論上の収率１
００％）のアセチル化された反応生成物（２Ｒ，３Ｒ）
体（ＩＩｃ）を分離した。生成物は黄色がかった油状物
であり、
【００５８】
【数６】
【００５９】であった。
【００６０】光学的に純粋な（＋）−（２Ｓ，３Ｓ）体
（Ｉｃ）０．５ｇ（０．００１３ｍｏｌ）を硫酸０．０
０５２ｍｏｌの存在下メタノール３０ｍｌ中で１８時間
還流した。反応混合物を炭酸水素ナトリウムで中和し、
メタノールを蒸発させた。生成物はジエチルエーテルか
ら再結晶させた。生成物として、
（Ｉｃ）０．５ｇ（０．００１３ｍｏｌ）を硫酸０．０
０５２ｍｏｌの存在下メタノール３０ｍｌ中で１８時間
還流した。反応混合物を炭酸水素ナトリウムで中和し、
メタノールを蒸発させた。生成物はジエチルエーテルか
ら再結晶させた。生成物として、
【００６１】
【数７】
【００６２】および融点１０８〜１１０℃である、（２
Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｂ）０．４２ｇ（０．００１３ｍｏ
ｌ、９８％）をえた。ＵＳ４９０８４６９では、同じエ
ステルの固有の旋光度は２２℃において＋２９４°（ｃ
０．５、ＭｅＯＨ）であった。メタノール５０ｍｌ中で
１．１ｇ（０．００２６ｍｏｌ）の（−）−（２Ｒ，３
Ｒ）体（ＩＩｃ）（Ｒ＝ＣＨ3 ）を同様に（correspond
ingly ）還流するとき、
Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｂ）０．４２ｇ（０．００１３ｍｏ
ｌ、９８％）をえた。ＵＳ４９０８４６９では、同じエ
ステルの固有の旋光度は２２℃において＋２９４°（ｃ
０．５、ＭｅＯＨ）であった。メタノール５０ｍｌ中で
１．１ｇ（０．００２６ｍｏｌ）の（−）−（２Ｒ，３
Ｒ）体（ＩＩｃ）（Ｒ＝ＣＨ3 ）を同様に（correspond
ingly ）還流するとき、
【００６３】
【数８】
【００６４】および融点１０８〜１０９℃である、化合
物の（２Ｒ，３Ｒ）体（Ｉｂ）０．８１１ｇ（０．００
２４ｍｏｌ、９４％）がえられた。固有の旋光度にもと
づけば分割生成物は光学的に純粋であった。
物の（２Ｒ，３Ｒ）体（Ｉｂ）０．８１１ｇ（０．００
２４ｍｏｌ、９４％）がえられた。固有の旋光度にもと
づけば分割生成物は光学的に純粋であった。
【００６５】実施例５ （２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｅ）およ
び（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩｅ）の製造 方法Ａ ジエチルエーテル２０５ｍｌに４．０ｇ（０．００１０
ｍｏｌ）のラセミ化合物（Ｉｅ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）およ
び３．５ｇ（０．００４１ｍｏｌ）の酢酸ビニルを溶解
させたものを、１．０３ｇの酵素（リパーゼＰＳ）の入
った反応容器に加えた。反応混合物は室温にて振とうす
ることによって効果的に撹拌した。液体クロマトグラフ
ィー（カラム：Ｃ−１８、溶離剤：ＭｅＯＨ／Ｈ2 Ｏ＝
８０／２０）を用いたところ、反応は２日間で（転化率
５０％で）完結していることがわかり、ＨＰＬＣの測定
（カラム：キラルセルＯＧ、溶離剤：ヘキサン／イソプ
ロピルアルコール＝７０／３０）によれば、未反応の
（２Ｓ，３Ｓ）形のエナンチオマー（Ｉｅ）は光学的に
純粋であった（ｅ．ｅ．１００％）。酵素を濾取し、再
使用するため洗浄した。えられたエーテル溶液をあわせ
て濃縮して、（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｅ）は−４℃で結晶
化させた。粗生成物をジイソプロピルエーテルから再結
晶させた。収量は１．３９ｇ（理論上の収率の７０％）
であり、
び（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩｅ）の製造 方法Ａ ジエチルエーテル２０５ｍｌに４．０ｇ（０．００１０
ｍｏｌ）のラセミ化合物（Ｉｅ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）およ
び３．５ｇ（０．００４１ｍｏｌ）の酢酸ビニルを溶解
させたものを、１．０３ｇの酵素（リパーゼＰＳ）の入
った反応容器に加えた。反応混合物は室温にて振とうす
ることによって効果的に撹拌した。液体クロマトグラフ
ィー（カラム：Ｃ−１８、溶離剤：ＭｅＯＨ／Ｈ2 Ｏ＝
８０／２０）を用いたところ、反応は２日間で（転化率
５０％で）完結していることがわかり、ＨＰＬＣの測定
（カラム：キラルセルＯＧ、溶離剤：ヘキサン／イソプ
ロピルアルコール＝７０／３０）によれば、未反応の
（２Ｓ，３Ｓ）形のエナンチオマー（Ｉｅ）は光学的に
純粋であった（ｅ．ｅ．１００％）。酵素を濾取し、再
使用するため洗浄した。えられたエーテル溶液をあわせ
て濃縮して、（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｅ）は−４℃で結晶
化させた。粗生成物をジイソプロピルエーテルから再結
晶させた。収量は１．３９ｇ（理論上の収率の７０％）
であり、
【００６６】
【数９】
【００６７】および融点１１９〜１２１℃である白色結
晶であった。ＨＰＬＣの測定によれば、生成物は光学的
に純粋であった。
晶であった。ＨＰＬＣの測定によれば、生成物は光学的
に純粋であった。
【００６８】残った反応混合物から、溶離剤としてトル
エン／ジエチルエーテル（２／１）を用いたフラッシュ
クロマトグラフィーで、２．１５ｇ（０．００５ｍｏ
ｌ、１００％）の油性生成物（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩ
ｅ）を分離した。生成物は
エン／ジエチルエーテル（２／１）を用いたフラッシュ
クロマトグラフィーで、２．１５ｇ（０．００５ｍｏ
ｌ、１００％）の油性生成物（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩ
ｅ）を分離した。生成物は
【００６９】
【数１０】
【００７０】であった。
【００７１】２日間の反応時間で反応混合物から濾過さ
れた酵素の再使用の効果を表２に示す。それぞれにおい
て反応は５０％の転化率まで進行し、（２Ｓ，３Ｓ）体
（Ｉｅ）が光学的に純粋にえられ、反応時間は長くなっ
た。
れた酵素の再使用の効果を表２に示す。それぞれにおい
て反応は５０％の転化率まで進行し、（２Ｓ，３Ｓ）体
（Ｉｅ）が光学的に純粋にえられ、反応時間は長くなっ
た。
【００７２】
【表３】
【００７３】方法Ｂ 実施例１に記載のように酵素をセライトに固定した。ジ
エチルエーテル２４０ｍｌに４．６４ｇ（０．０１１９
ｍｏｌ）のラセミ化合物（Ｉｅ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）およ
び４．１ｇ（０．０４７ｍｏｌ）の酢酸ビニルを溶解さ
せたものを、前記の調製されたセライトに固定した酵素
５．５１ｇ（リパーゼＰＳ ０．４７５ｇ）の入った反
応容器に加えた。反応は１日で５０％の転化率で停止し
た。反応混合物の処理（work-up ）は方法Ａと同様であ
る。（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｅ）の収量は１．９０ｇ（８
２％）であり、
エチルエーテル２４０ｍｌに４．６４ｇ（０．０１１９
ｍｏｌ）のラセミ化合物（Ｉｅ）（Ｒ1 ＝ＣＨ3 ）およ
び４．１ｇ（０．０４７ｍｏｌ）の酢酸ビニルを溶解さ
せたものを、前記の調製されたセライトに固定した酵素
５．５１ｇ（リパーゼＰＳ ０．４７５ｇ）の入った反
応容器に加えた。反応は１日で５０％の転化率で停止し
た。反応混合物の処理（work-up ）は方法Ａと同様であ
る。（２Ｓ，３Ｓ）体（Ｉｅ）の収量は１．９０ｇ（８
２％）であり、
【００７４】
【数１１】
【００７５】および融点１１８〜１１９℃である白色結
晶であった。（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩｅ）（Ｒ＝Ｃ
Ｈ3 ）の収量は２．４６ｇ（９３％）であり、
晶であった。（２Ｒ，３Ｒ）体（ＩＩｅ）（Ｒ＝Ｃ
Ｈ3 ）の収量は２．４６ｇ（９３％）であり、
【００７６】
【数１２】
【００７７】であった。
【００７８】１日間の反応時間で反応混合物から濾過さ
れた酵素の調製物（preparate ）の再使用の効果を表３
に示す。
れた酵素の調製物（preparate ）の再使用の効果を表３
に示す。
【００７９】
【表４】
【００８０】
【発明の効果】本発明の方法によれば、簡単な酵素的な
方法で、スレオ−アルキル−２−ヒドロキシ−３−（４
−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フェニルチオ）
プロピオン酸エステルのラセミ化合物を分割することが
できる。
方法で、スレオ−アルキル−２−ヒドロキシ−３−（４
−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フェニルチオ）
プロピオン酸エステルのラセミ化合物を分割することが
できる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 マルチ ヒュテーネン フィンランド共和国、02700 エスポー、 ヘイシプーンクヤ ２アー １
Claims (6)
- 【請求項１】 一般式（Ｉ）： 【化１】 （式中、Ｘは−ＮＯ2 、−ＮＨ2 、−ＮＨＣＯＣＨ3 、
−ＮＨＣＯＣＦ3 、−ＮＨＣＯ2 ＣＨ3 、−ＮＨＣＯ2
Ｃ（ＣＨ3 ）3 または−ＮＨＣＨＯであり、Ｒ1はアル
キル基である）で表わされるラセミ化合物をシュードモ
ナス・セパシア由来のリパーゼを触媒として無水有機溶
媒中でアシル化することからなる、一般式（Ｉ）： 【化２】 （式中、ＸおよびＲ1 は前記に同じ）で表わされる（２
Ｓ，３Ｓ）−スレオ−アルキル−２−ヒドロキシ−３−
（４−メトキシフェニル）−３−（２−Ｘ−フェニルチ
オ）プロピオン酸エステルおよび一般式（ＩＩ）： 【化３】 （式中、ＸおよびＲ1 は前記に同じであり、ＲはＣ1 〜
Ｃ6 のアルキル基である）で表わされる（２Ｒ，３Ｒ）
−スレオ−アルキル−２−アシロキシ−３−（４−メト
キシフェニル）−３−（２−Ｘ−フェニルチオ）プロピ
オン酸エステルの製造法。 - 【請求項２】 Ｒ1 で示されるアルキル基がＣ1 〜Ｃ6
のアルキル基である請求項１記載の製造法。 - 【請求項３】 酸無水物、ビニルエステルまたは酢酸ア
セトンオキシムをアシル化試薬として用いる請求項１ま
たは２記載の製造法。 - 【請求項４】 溶媒として、前記一般式（Ｉ）および
（ＩＩ）で表わされる化合物が溶解する無水有機溶媒を
用いる請求項１、２または３記載の製造法。 - 【請求項５】 反応温度が２０℃〜６０℃である請求項
１、２、３または４記載の製造法。 - 【請求項６】 （２Ｓ，３Ｓ）形の化合物（Ｉ）を、分
別結晶法またはクロマトグラフィーによって、（２Ｒ，
３Ｒ）形の化合物（ＩＩ）から分離しうる請求項１、
２、３、４または５記載の製造法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI931298 | 1993-03-24 | ||
| FI931298A FI93741C (fi) | 1993-03-24 | 1993-03-24 | Menetelmä optisesti puhtaitten (2S,3S)- ja (2R,3R)-threo-alkyyli-2-hydroksi-3-(4-metoksifenyyli)-3-(2-X-fenyylitio)propionaattien tai vastaavien asyloitujen yhdisteiden valmistamiseksi |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07303495A JPH07303495A (ja) | 1995-11-21 |
| JP2612671B2 true JP2612671B2 (ja) | 1997-05-21 |
Family
ID=8537616
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6054169A Expired - Lifetime JP2612671B2 (ja) | 1993-03-24 | 1994-03-24 | 光学活性なプロピオン酸エステルの製造法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5514589A (ja) |
| EP (1) | EP0617130A3 (ja) |
| JP (1) | JP2612671B2 (ja) |
| CA (1) | CA2119670A1 (ja) |
| FI (1) | FI93741C (ja) |
| HU (1) | HU216797B (ja) |
| IL (1) | IL109041A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FI97725C (fi) * | 1995-02-17 | 1997-02-10 | Orion Yhtymae Oy | Menetelmä diltiatseemin valmistamiseksi |
| IT1295376B1 (it) * | 1997-10-22 | 1999-05-12 | Zambon Spa | Processo per il riciclo di un sottoprodotto della sintesi del diltiazem |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1152721B (it) * | 1982-10-15 | 1987-01-07 | Luso Farmaco Inst | Risoluzione ottica dell'acido dl-alfa-2-idrossi-3-(4-metossifenil)-3-(2-amminofeniltio)propionico |
| JPS6032775A (ja) * | 1983-07-30 | 1985-02-19 | Daikin Ind Ltd | 含フッ素ベンゾジアゼピン類 |
| EP0342904A3 (en) * | 1988-05-18 | 1991-01-30 | MARION LABORATORIES, INC. (a Delaware corporation) | 2-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-3-(2-aminophenylthio)propionic acid, 8'-phenylmenthyl ester, especially for diltiazem |
| US4908469A (en) * | 1988-05-18 | 1990-03-13 | Marion Laboratories, Inc. | 2-Hydroxy-propanoic acid acyclic alkyl esters for benzothiazepines |
| IT1226300B (it) * | 1988-07-26 | 1990-12-27 | Zambon Spa | Processo per la preparazione di intermedi per la sintesi del diltiazem. |
| JPH02190195A (ja) * | 1989-01-19 | 1990-07-26 | Rikagaku Kenkyusho | 光学活性プロピオン酸エステル類化合物の製法 |
| IT1232306B (it) * | 1989-07-27 | 1992-01-28 | Zambon Spa | Processo di risoluzione di intermedi utili per la preparazione del diltiazem |
| US5210030A (en) * | 1990-06-25 | 1993-05-11 | Merck & Co., Inc. | Process for selectively acylating immunomycin |
| FR2672600B1 (fr) * | 1991-02-08 | 1994-10-14 | Synthelabo | Procede de preparation du (-)-(2r,3s)-2,3-epoxy-3-(4-methoxyphenyl) propionate de methyle. |
-
1993
- 1993-03-24 FI FI931298A patent/FI93741C/fi active
-
1994
- 1994-03-12 HU HU9400762A patent/HU216797B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-03-18 IL IL109041A patent/IL109041A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-03-22 US US08/215,529 patent/US5514589A/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-03-23 CA CA002119670A patent/CA2119670A1/en not_active Abandoned
- 1994-03-23 EP EP94104620A patent/EP0617130A3/en not_active Ceased
- 1994-03-24 JP JP6054169A patent/JP2612671B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI931298A (fi) | 1994-09-25 |
| JPH07303495A (ja) | 1995-11-21 |
| IL109041A (en) | 1998-02-08 |
| HU216797B (hu) | 1999-08-30 |
| FI93741C (fi) | 1995-05-26 |
| FI931298A0 (fi) | 1993-03-24 |
| CA2119670A1 (en) | 1994-09-25 |
| IL109041A0 (en) | 1994-08-26 |
| EP0617130A3 (en) | 1995-03-08 |
| FI93741B (fi) | 1995-02-15 |
| US5514589A (en) | 1996-05-07 |
| HUT70752A (en) | 1995-10-30 |
| EP0617130A2 (en) | 1994-09-28 |
| HU9400762D0 (en) | 1994-06-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5728876A (en) | Resolution of the racemates of primary and secondary amines by enzyme-catalyzed acylation | |
| JP2707076B2 (ja) | 光学活性化合物の製造法 | |
| EP0274277B1 (en) | A process for the enzymatic separation of the optical isomers of racemic oxazolidinonic derivatives | |
| IT9020348A1 (it) | Processo per la preparazione di intermedi per la sintesi del diltiazem | |
| JP2852545B2 (ja) | 複数の不斉点を持つ光学活性化合物および製造法 | |
| JP2612671B2 (ja) | 光学活性なプロピオン酸エステルの製造法 | |
| JP2687789B2 (ja) | 光学活性３−フェニルグリシッド酸エステル類化合物の製法 | |
| US4863859A (en) | Process for preparing optically active glycerol derivatives | |
| CA2089626C (en) | Process for separating 1,2-isopropylideneglycerol benzoyl ester enantiomers | |
| EP0239122B1 (en) | Process for the enzymatic resolution of racemic 2-amino-1-alkanols | |
| KR100650797B1 (ko) | 광학활성 사이클로프로판 카복사미드의 제조방법 | |
| SK69793A3 (en) | Enzymatic process of separation of racemic delta-valerolactones mixtures | |
| KR100650798B1 (ko) | 광학활성 카복실산의 제조방법 | |
| KR920006869B1 (ko) | 광학 활성 화합물 및 이의 제조방법 | |
| EP1428888B1 (en) | Method for the production of (1S,4R)-(-)-4-Hydroxycyclopent-2-enyl esters | |
| US8008062B2 (en) | Production of (R)- and (S)-4-(1-aminoethyl) benzoic acid methyl ester sulfate by lipase acylation of racemic 4-(1-aminoethyl) benzoic acid methyl ester and sulfuric acid precipitation | |
| JP3010382B2 (ja) | （ｒ）−２−プロポキシベンゼン誘導体の製造法 | |
| JPH05227991A (ja) | 光学活性な３−ピロリジノール誘導体の製造法 | |
| JP2838527B2 (ja) | 光学活性化合物の製造法 | |
| JP2000023693A (ja) | 光学活性な２−アセチルチオ−３−フェニルプロピオン酸の製造方法 | |
| JPH0755157B2 (ja) | 生化学的手法による光学活性なアルコ−ルとエステルの製造法 | |
| JPH05111392A (ja) | 光学活性含硫黄化合物の製造法 | |
| JPH10248592A (ja) | 光学活性２−ベンジルコハク酸およびその誘導体の製法 | |
| JPH07115992A (ja) | 光学活性化合物の酵素による製造法 | |
| JPH05111393A (ja) | 光学活性含硫黄化合物の製造方法 |