HU216797B - Eljárás a (2S, 3S)-treo-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(fenil-tio)- és (2R, 3R)-treo-2-alkanoil-oxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(fenil-tio)-propionát-származékok előállítására - Google Patents
Eljárás a (2S, 3S)-treo-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(fenil-tio)- és (2R, 3R)-treo-2-alkanoil-oxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(fenil-tio)-propionát-származékok előállítására Download PDFInfo
- Publication number
- HU216797B HU216797B HU9400762A HU9400762A HU216797B HU 216797 B HU216797 B HU 216797B HU 9400762 A HU9400762 A HU 9400762A HU 9400762 A HU9400762 A HU 9400762A HU 216797 B HU216797 B HU 216797B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- compound
- methoxyphenyl
- threo
- alkyl
- formula
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/004—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of alcohol- or thiol groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P11/00—Preparation of sulfur-containing organic compounds
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
A találmány tárgya eljárás az (1) általánős képletű (1–6 szénatőmősalkil)-2-hidrőxi-3-(4-metőxi-fenil)-3-(2-X-fenil-tiő)-prőpiőnát-származékők (2S,3S)-treő enantiőmerei, az X helyett sítőkéntaminőcsőpőrtőt tartalmazó (1) általánős képletű (1–6 szénatőmősalkil)-2-hidrőxi-3-(4-metőxi-fenil)-3-(2-aminő-fenil-tiő)-prő-piőnát-származékők (2R,3R)-treő enantiőme ei és a (2) általánős képletű (1–6szénatőmős alkil)-2-(2–6 szénatőmős alkanőil-őxi)-3-(4-metőxi-fenil)-3-(2-X-fenil-tiő)-prőpiőnát-származékők (2R,3R)-treő enantiőmereielőállítására – a képletekben X jelentése –NO2, –NH2, –NHCOCH3,–NHCOCF3, –NHCO2CH3, –NHCO2C(CH3)3, vagy –NHCHO és R1 jelentése 1–6szénatőmős alkilcsőpőrt, előnyösen metil- vagy etilcsőpőrt. Az eljárásabból áll, hőgy egy racém (1) általánős képletű (1–6 szénatőmősalkil)-2-hidrőxi-3-(4-metőxi-fenil)-3-(2-X-fenil-tiő)-prőpiőnát-származékőt – X és R1 jelentése a fenti – vízmentes szerv sőldószerben lipázzal katalizálva acileznek, majd az (1) általánősképletű vegyület el nem reagált (2S,3S)-treő enantiőmerét és a (2)általánős képletű vegyület kapőtt (2R,3R)-treő enantiőmerét isme tmódőn elválasztják, és kívánt esetben a védőcsőpőrtőkat eltávőlítják.A találmány szerinti vegyületek a diltiazem szintézisénekköztitermékei. ŕ
Description
A találmány tárgya eljárás az 1 általános képletű (1-6 szénatomos alkil)-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)3-(2-X-fenil-tio)-propionát-származékok (2S, 3S)treo enantiomerei, az X helyettesítőként aminocsoportot tartalmazó 1 általános képletű (1-6 szénatomos alkil)-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(2-X-feniltio)-propionát-szármázékok (2R, 3R)-treo enantiomeijei és a 2 általános képletű (1-6 szénatomos alkil)-2-(2—6 szénatomos alkanoil-oxi)-3-(4-metoxifenil)-3-(2-X-fenil-tio)-propionát-származékok (2R, 3R)-treo enantiomerei előállítására - a képletekben X jelentése -NO2, -NH2, -NHCOCH3, -NHCOCF3, -NHCO2CH3, -NHCO2C(CH3)3, vagy -NHCHO, R jelentése 1-5 szénatomos alkilcsoport és R[ jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, előnyösen metil- vagy etilcsoport.
A fenti vegyületek jelölése X jelentése szerint a következő: a: X=-NO2, b: X=-NH2; c: X=-NHCOCH3; d: X=-NHCOCF3; e: X = -NHCO2CH3; f: X=-NHCO2C(CH3)3; g: X=-NHCHO. Ezek a vegyületek a 3 képletű diltiazem szintézisének hasznos köztitermékei. A diltiazem abszolút konfigurációja (25.35) . A klinikai alkalmazás területén a diltiazem az egyik legígéretesebb kalciumcsatoma-gátló.
A (±)-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(2-aminofenil-tio)-propionsav és -propionátok elválasztását a 3 337 176 számú német és a 4908469 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban ismertetik, a (2-nitro-fenil-tio)-propionsav megfelelő enantiomereinek elválasztását optikailag aktív aminosavakkal (például L-lizinnel) vagy borkősavval alkotott diasztereomer sók képzése útján a Chem. Pharm. Bull. 37, (1989) 3204-3208 szakirodalmi helyen ismertetik.
Az ez ideig ismert egyetlen biokatalitikus eljárás a (25.35) -treo-alkil-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(2-Xfenil-tio)-propionátok előállítására a 2a képletű racém treo-metil-2-acil-oxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(2-nitro-feniltio)-propionát lipázzal katalizált hidrolízise, amelyet a Chem. Pharm. Bull 37, (1989) 2876-2878 szakirodalmi helyen ismertetnek. Az enzimes hidrolízis lassan játszódik le, mivel az 1 és a 2 általános képletű vegyületek vízben gyengén oldódnak. Ez az oka annak, hogy a reakciókat vízzel telített szerves oldószerben hajtják végre. Továbbá, a reakció kinetikus kontrollal megy végbe. így az optikailag aktív termék hozama alacsony marad, ha a lehető legjobb optikai tisztaságot kívánják elérni.
A találmány tárgya az 1 általános képletű racém treo-alkil-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(2-X-fenil-tio)propionátok rezolválása egyszerű enzimes módszerrel, amely az 1 általános képletű vegyületek 2-helyzetű szekunder hidroxilcsoportjának vízmentes szerves oldószerben lejátszódó biokatalitikus, gyakorlatilag szinte enantiospecifikus acilezési reakcióján alapszik.
A kiindulási anyagul szolgáló fenti racém vegyületek ismertek, előállításuk például a Chem. Pharm. Bulletin 18 (10), 2028-2037 (1970) szakirodalmi helyen szerepel.
Oldószerként különböző szerves oldószereket alkalmazhatunk. Mivel a proteinek, így az enzimek szerves oldószerben nem oldódnak, különleges gondot kell arra fordítani, hogy a szubsztrátok és a termékek az adott oldószerben oldódjanak. A találmány szerinti eljárás előnye az 1 általános képletű vegyületeknek a végrehajtott reakciókban mutatott stabilitásában áll. A reakciók hozama enyhe reakciókörülmények mellett jó. További előny, hogy a találmány szerinti biokatalitikus rezolválás a racemát „rossz” enantiomerének az akirális szubsztráttal való reakcióján alapszik, nem pedig diasztereomerek képződésén. A diasztereomerek képződéséhez hasonló kémiai rezolválásokhoz optikailag tiszta vegyületek (például L-lizin) hozzáférhetősége szükséges, majd a diasztereomer elkülönítése, és a szabaddá váló L-lizin vagy más optikailag tiszta vegyület elkülönítése, és az egyik rezolválási folyamatból a másikba való reciklizálása szükséges. A reakcióban részt nem vevő acilezetlen (25,35)-enantiomer felhasználható a (2S,3S)-cisz-diltiazem előállítására a későbbiekben ismertetendő eljárással.
Biokatalizátorként különböző kereskedelmi forgalomban kapható lipázokat vizsgáltunk önmagukban vagy szilárd hordozón rögzített formájukban (például celiten vagy chromosorbon rögzítve). A vizsgált Mucor miehei (Biocatalysts), Candida lypolytica (Biocatalysts), Candida cylindracea (Sigma), Candida cylindracea (AY 30, Amano), Aspergillus niger (AP-6, Amano) és Pseudomonas cepacia (lipáz PS, Amano) lipázok közül a célnak legjobban az Amano cég lipáz PS terméke felelt meg. Ez legtöbb esetben gyakorlatilag enantiospecifikusan működik, azaz a reakció 50%-os átalakulásnál leáll, és a rezolválás termékei [az 1 általános képletű racém elegy (2S,3S) reagálatlan enantiomere és a 2 általános képletű (2R,3R) reakciótermék] optikailag tiszta anyagokként, mintegy 100%-os hozammal izolálhatok. A rögzített lipáz PS aktivitása többszöröse a kezeletlen enzimének, és a rögzített enzim aktivitása ismételt használat során tovább tart.
A találmány szerinti eljárás jellemzője, hogy az 1 általános képletű racém vegyület (2R, 3R) enantiomerét - a képletben X jelentése -NO2, -NH2, -NHCOCH3, -NHCOCF3, -NHCO2CH3, -NHCO2C(CH3)3 vagy -NHCHO és Rj jelentése alkilcsoport, például -CH3, -CH2CH3 - megfelelő acilezőszerrel reagáltatjuk egy kezeletlen, kereskedelmi forgalomban kapható enzim vagy egy szilárd hordozón rögzített enzim jelenlétében, szerves oldószerben 20 és 60 °C közötti hőmérsékleten, így a 2 általános képletű acilált (1-6 szénatomos alkil)-2acetoxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(2-X-fenil-tio)-propionát (2R, 3R)-treo enantiomerét nyerjük, amelyet az 1 általános képletű vegyület reagálatlan (2S,3S)-enantiomerétől kromatográfiás úton vagy dietil-éterből vagy toluolból végzett frakcionált kristályosítással választunk el.
Az értékes hatóanyagot, a diltiazemet, az 1 általános képletű vegyület (2S,3S)-enantiomeréből a védőcsoport eltávolítása után - amennyiben X jelentése nitrocsoporttól eltérő - kapott 4 általános képletű (2S,3S)sav laktonizálásával - és amennyiben X jelentése nitrocsoport, ennek redukálásával - állítjuk elő.
Az 5a képletű laktám amino-alkilezését például toluol és N-metil-pirrolidin-2-on oldószerelegy és kálium-karbonát bázis alkalmazásával hajtjuk végre. Az
HU 216 797 Β amino-alkilezés így kapott 5b képletű köztitermékét ecetsavanhidriddel acilezzük, majd a kapott 3 képletű diltiazemet hidrogén-klorid sója formájában etanolból kristályosítjuk.
Az 5 általános képletű vegyületnek azt az esetét, amikor Y jelentése hidrogénatom, 5a, ahol Y jelentése -CH2CH2N(CH3)2, 5b képlettel jelöljük.
A találmány szerinti eljárás alkalmazásával a megfelelő racém vegyületekből sztereokémiailag tiszta (2S,3S) enantiomer formájú 1 általános képletű vegyületek nyerhetők az acilezést szerves oldószerben végrehajtva a lipáz (2R,3R)-enantiomerek iránti fajlagosságának kihasználásával. Az la képletű vegyület (2S,3S)-treo-enantiomere esetén a tiofenolgyűrű 2-helyzetű nitrocsoportját diltiazem szintéziséhez aminocsoporttá kell redukálni. Az lb képletű vegyület esetén az enzimes acilezéssel egyidejűleg mindig bekövetkezik a tiofenolgyűrű aminocsoportjának némi nem enzimes acileződése is. Ezért a termék minőségét illetően a végeredmény egyértelműbb akkor, ha az említett aminocsoportot megfelelő védőcsoporttal látjuk el a rezolválást megelőzően. Az aminocsoport védelme (az lc-g képletű vegyületek létrehozása), és a védőcsoport eltávolítása a rezolválást követően ismert eljárásokkal végezhető.
A találmány szerinti eljárás szerint bármely olyan acilező reagens alkalmazható, amelyik kielégítően hatékonyan acilezi az 1 általános képletű, térbelileg gátolt alkoholt ahhoz, hogy a reakció ésszerű időtartamon belül lejátszódjon. Arra is szükség van, hogy az átészterezési reakció egyensúlya oly mértékben kedvezzen a terméknek, amennyire csak lehetséges, mivel az acilező reagens a termékkel reverz enzimatikus reakcióba lépő nukleofilt képezhet, amely reakció terméke a kiindulási anyag. Megfelelő acilező reagensek a savanhidridek, oxim-észterek, vinil-észterek és aktivált észterek, például a 2,2,2-trifluor-etil-acetát. Egyes acilezőszerek, például a vinil-észterek alkalmazhatók oldószerekként is. Más, megfelelő oldószerek különösen a dietil-éter és a toluol, mivel ezek alkalmazásakor az 1 általános képletű vegyület reagálatlan (2S,3S)-treo-enantiomere bepárlást követően frakcionált kristályosítással izolálható, ha az enzimet először a reakcióelegyből kiszűrjük.
A továbbiakban a találmányt példákban mutatjuk be. A példákban az általános képlet előtt szereplő (2S,3S), illetve (2R,3R) megjelölés a rajzon ábrázolt racém vegyületnek megfelelő jelölt enantiomer vegyületet jelenti.
1. példa
Lipáz PS fajlagossága és a racém la-g alkoholok acilezése A eljárás
Az la-g racém alkoholok (Rj = -CH3 vagy -CH2CH3) valamelyikére nézve 0,05 mol/l-es és vinilvagy aceton-oxim-acetátra vagy ecetsavra vagy tejsavanhidridre nézve 0,2 mol/l-es oldószerből 1 ml-t olyan reaktorba adunk, amely bizonyos mennyiségű kereske10 delmi forgalomban kapható lipáz PS-t tartalmaz. Az enzim vizsgálatának eredményeit az 1. táblázatban mutatjuk be. A reakcióelegyet erőteljesen rázzuk a táblázatban megadott hőmérsékleten. A reakció előrehaladását a reakcióelegyből időközönként vett mintából el15 lenőrizzük, az enzimet az elegyből kiszűrjük, és a mintát folyadékkromatográfiás oszlopra injektáljuk (C18 oszlop, az eluens metanol és víz 70:30 arányú elegye). A reakció mintegy 50%-os átalakulásnál áll le. A reagálatlan (2S,3S)-enantiomert nagynyomású fo20 lyadékkromatográfiás eljárással határozzuk meg (oszlop : chiralcel OG; eluens: hexán és izopropil-alkohol 70:30 arányú elegye), a meghatározást közvetlenül a reakcióelegyből vett mintából végezzük, az la, b és c általános képletű vegyületek esetén az enantiomerek nem különülnek el tökéletesen a nagynyomású folyadékkromatográfiás elválasztás körülményei között. Ez az oka annak, hogy Eu(hfc)3 jelenlétében az enantiomertúlsúly- (e. t.) értékeket is meghatározzuk 'H-NMRspektroszkópiás úton.
B eljárás
Az alkalmazott enzimet felhasználás előtt szilárd hordozón rögzítjük. Ebből a célból 0,4 g lipáz PS-t oldunk 15 ml 20 mmol/l-es trisz-HCl pufferben (pH=8,0) jégfurdőben való hűtés mellett. Az oldatba 240 mg sza35 charózt és 4 g hordozóanyagot [Celite (Aldrich) vagy Chromosorb 101 (80-100 mesh, Sigma)] adunk. Az elegyet 10-15 percig keverjük, az enzimkészítményt üvegen, szobahőmérsékleten szárítjuk.
Az la-g általános képletű vegyületek (R1 = -CH3) acilezését vinil-acetáttal végezzük az A eljárásban leírt módon, azzal az eltéréssel, hogy az enzimkészítményből olyan mennyiséget mérünk ki, hogy a lipáz PS mennyiség az 1. táblázatban szereplő mennyiségeknek megfelelő legyen.
Az A és B eljárással kapott eredményeinket az 1. táblázatban mutatjuk be.
1. táblázat
| -X(R,=CH3) | Oldószer | Acilezőreagens | Amano ps,g/i | Idő, nap | Átalakulás, % | e. t.d, % (2S,3S) |
| -no2 | THF (22 °C) | (CH3CO)2O | 100 | 2 | 50 | >>95 |
| -no2 | THF (22 °C) | (PrCO)2O | 100 | 4 | 50 | >>95 |
| -no2 | THF (22 °C) | CH3CO2CH=CH2 | 100 | 7 | 48 | >>95 |
| -nh2 | Et2O (22 °C) | CH3CO2CH=CH2 | 25 | 3 | 50 | - |
| -nh2 | Et2O (20 °C) | CH3CO2-N=C(CH3)2 | 25 | 2 | 46 | - |
| -nh2> | Et2O (22 °C) | CH3CO2-N=C(CHj)2 | 5 | 2 | 51 | >>95 |
| -nh2· | Et2O (22 °C) | CH3CO2C(CH3)=CH2 | 5 | 2 | 50 | - |
| -NHCO2CH3 | Et2O (22 °C) | CH3CO2CH=CH2 | 5 | 2 | 50 | >>95 |
HU 216 797 Β
1. táblázat folytatása
| -X(R,=CH3) | Oldószer | Acilezöreagens | Amano PS, g/1 | Idő, nap | Átalakulás, % | e. tA % (2S,3S) |
| -nhco2ch3 | Et2O (44 °C) | CH3CO2CH=CH2 | 5 | 1 | 50 | >>95 |
| -nhco2ch3 | CH3CO2CH=CH2 (44 °C) | ch3co2ch=ch2 | 12,5 | 2 | 49 | 95 |
| -NHCO2CH3 | ch3co2ch=ch2 /Et2O (1/1) (22 °C) | ch3co2ch=ch2 | 12,5 | 2 | 51 | 98 |
| -NHCO2CH3> | Et2O (22 °C) | ch3co2ch=ch2 | 5 | 1 | 50 | >>95 |
| -NHCO2CH3 b | Et2O (44 °C) | ch3co2ch=ch2 | 2 | 1 | 50 | >>95 |
| -NHCO2CH3 | toluol (53 °C) | ch3co2ch=ch2 | 5 | 3 | 50 | >>95 |
| -NHCO2CH3 c | Et2O (22 °C) | ch3co2ch=ch2 | 100 | 1 | 50 | >>95 |
| -NHCO2CH3‘ | i-Pr2O (44 °C) | ch3co2ch=ch2 | 100 | 1 | 49 | >>95 |
| -NHCO2CH3 c | toluol (44 °C) | ch3co2ch=ch2 | 100 | 4 | 51 | >>95 |
| -NHCO2C(CH3)3 | az adott körülmények között nincs reakció | |||||
| -NHCOCH3 | Et2O (44 °C) | ch3co2ch=ch2 | 5 | 2 | 50 | >>95 |
| -nhcoch3 | CH3CO2CH=CH2 (44 °C) | ch3co2ch=ch2 | 50 | 2 | 49 | - |
| -NNCOCH3 | toluol (53 °C) | ch3co2ch=ch2 | 12,5 | 3 | 50 | >>95 |
| -NHCOCNj’ | Et2O (44 °C) | ch3co2ch=ch2 | 2 | 1 | 46 | - |
| -NHCOCH3 b | Et2O (44 °C) | ch3co2ch=ch2 | 2 | 1 | 52 | >>95 |
| -NHCOCF3 | Et2O (44 °C) | ch3co2ch=ch2 | 12,5 | 4 | 50 | >>95 |
| -NHCHO | CH3CO2CN=CH2 | ch3co2ch=ch2 | 25 | 2 | 50 | - |
a Az enzim chromosorbon rögzített; b Az enzim celiten rögzített; c R| = -CH2CH3; d e. t. >>95%, csak egy kimutatható enantiomer van.
2. példa (2S,3S)-la és (2R,3R)-2a előállítása
1,1 g, 0,0030 mól olyan racém la általános képletű vegyületet, amelyben R[ = -CH3, és 0,80 ml, 0,0085 mól ecetsavanhidridet 60 ml tetrahidrofuránban oldunk, és az oldatot 6 g lipáz PS enzimet tartalmazó reaktorba visszük. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 napig rázzuk, erre az időre a reakció leáll. Az enzimet szűréssel elkülönítjük, a szűrletből a tetrahidrofuránt lepároljuk. A visszamaradó anyagot diklór-metánban oldjuk, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk. A (2S,3S)-la és a (2R,3R)-2a (R=-CH3) vegyületeket flash-kromatográfiás eljárással elkülönítjük, eluensként diklór-metán, hexán és etil-acetát 63:31:6 arányú elegyét alkalmazzuk. így 0,56 g, 0,0015 mól reagálatlan la kiindulási anyagot kapunk, (2S, 3S)-treo enantiomer formában, amely az 1. példában ismertetett nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat szerint optikailag tiszta termék, nyerünk emellett 0,63 g, 0,0015 mól 2a vegyületet (2R,3R)-treo enantiomer formában (R=-CH3) is. Mindkét vegyület optikailag tiszta (e. t. >>95%), ezt mutatja az ’H-NMR spektroszkópiás meghatározás is (la, Eu(hfc)3: CO2Me, d, δ=3,84 és 3,94).
Az előzőek szerint előállított optikailag tiszta la képletű vegyület abszolút konfigurációjának meghatározására a vegyületet a megfelelő savvá hidrolizáljuk. 0,39 g fentiek szerint elkülönített la képletű vegyületet metanol és 0,5 mol/l-es nátrium-hidroxid-oldat 2:1 arányú elegyének 15 ml-ében oldjuk. A hidrolízis befejezése után a képződött savat az elegy hidrogén-kloriddal való megsavanyításával kicsapjuk. A kapott sav olvadáspontja 113-114 °C és [a]j}= + 112° (c= 1, CHClj). A sav (2S,3S)-enantiomerének megfelelő irodalmi adatai: olvadáspont: 111 °C, [a]2 * *D5 = + 121° (c=l, CHC13). [Senuma és munkatársai, Chem. Pharm. Bull. 37, 3204(1989)].
3. példa
Az lb általános képletű vegyület rezolválása Az enzimet az 1. példában leírt módon celiten rögzítjük. 1,33 g, 0,0040 mól olyan lb általános képletű vegyületet, amelyben Rj jelentése -CH3 és 0,92 ml, 0,0080 mól aceton-oxim-acetátot 40 ml dietil-éterben oldunk, és az oldatot 1,25 g celiten rögzített, 0,2 g lipáz PS-t tartalmazó enzimet tartalmazó reaktorba adjuk. A reakció 2 nap után 52%-os átalakulásnál leáll. Az enzimet kiszűrjük, és a reagálatlan lb képletű kiindulási anyagot és a reakció 2b képletű termékét (R=-CH3) flash-kromatográfiás eljárással elkülönítjük, eluensként diklór-metán, toluol és etil-acetát 1:1:1 arányú elegyét alkalmazzuk. Ily módon 0,59 g, 0,0018 mól fehér, kristályos lb vegyületet nyerünk, amelynek olvadáspontja 107-109 °C, [α]$ =+294° (c=0,5, MeOH). A fajlagos optikai forgatás szerint a vegyület tiszta (2S,3S)-lb vegyület (a 4908469 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett fajlagos optikai forgatóképesség 22 °C hőmérsékleten +294 ° (c=0,5, MeOH), és a vegyület ol4
HU 216 797 Β vadáspontja 108-109 °C). A fenti reakció során nyerünk még 0,68 g, 0,0018 mól sárgás, amorf (2R,3R)-2b vegyületet (R=-CH3) is. [a]2D° =-258° (c=0,5, MeOH).
4. példa
Az lc képletű vegyület rezolválása és (2S,3S)-lb és (2R,3R)-lb előállítása
6,0 g, 0,016 mól racém lc vegyületet (R] = -CH3) és
5.5 g, 0,064 mól vinil-acetátot 320 ml dietil-éterben oldunk, és 1,6 g lipáz PS enzimet tartalmazó reaktorba adjuk. A reakcióelegyet 44 °C reakció-hőmérsékleten rázzuk vagy keveijük a reakció 50%-os átalakulásnál való leállásáig, ez 48 órát vesz igénybe. A reakció előrehaladását nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálattal követjük nyomon (oszlop: C-18;eluens: metanol és víz 70:30 arányú elegye). Az enzimet az elegyből ezután kiszűijük, dietil-éterrel mossuk, ezután az enzimet újra felhasználhatjuk. Az éteres oldatokat egyesítjük és besűrítjük. A (2S,3S)-lc vegyület a reakcióelegyből -4 °C hőmérsékleten kristályosodik. A kapott nyersterméket diizopropil-éterből átkristályosítjuk, így 87%-os hozammal 2,61 g, 0,0070 mól fehér, kristályos terméket nyerünk, [a]^ = + 159° (c = l, CH2C12), olvadáspontja 128-129 °C. A flash-kromatográfiás eljárás szerint 50%-os hozammal nyeljük a (2S,3S)-lc vegyület, azaz a rezolválás elméleti hozamának 100%-ával.
A visszamaradó reakcióelegyből 3,41 g, 0,0080 mól acetilezett (2R,3R)-2c reakcióterméket nyerünk (az elméleti hozam 100%-a) toluol, etil-acetát és diklór-metán 1:1:1 arányú elegyét alkalmazva eluensként. A termék sárgás olaj, [α]π = -175° (c = l, CH2C12).
0,5 g, 0,0013 mól optikailag tiszta (+)-(2S,3S)-lc vegyületet 30 ml metanolban, 0,0052 mól kénsav jelenlétében 18 órán át visszafolyató hűtő alatt forralunk. Az elegyet ezután nátrium-hidrogén-karbonáttal semlegesítjük, és a metanolt lepároljuk róla. A terméket dietil-éterből átkristályosítjuk. így 98%-os hozammal 0,42 g, 0,0013 mól (2S,3S)-lb vegyületet nyerünk, [a]^=+296° (c=0,5, MeOH). A tennék olvadáspontja 108-110 °C. A 4 908 469 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ennek az észternek a fajlagos optikai rotációja: +294° (c=0,5, MeOH) 22 °C hőmérsékleten. Ha hasonló módon 1,1 g, 0,026 mól (-)-(2R,3R)-2c vegyületet (R=-CH3) forralunk visszafolyató hűtő alatt 50 ml metanolban, 94%-os hozammal 0,811 g, 0,0024 mól (2R,3R)-lb vegyületet nyerünk. [a]f> = -306° (c=0,5, MeOH), a vegyület olvadáspontja 108-109 °C. A fajlagos optikai rotáció szerint a rezolválás termékei optikailag tiszták.
5. példa (2S,3S)-le és (2R,3R)-2e előállítása
A eljárás
4,0 g, 0,0010 mól racém 1 e vegyületet (Rj=-CH3) és
3.5 g, 0,0041 mól vinil-acetátot 205 ml dietil-éterben oldunk, és az oldatot 1,03 g lipáz PS enzimet tartalmazó reaktorba adjuk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten való rázással kellően keveijük. Folyadékkromatográfiás eljárással (oszlop: C-18, eluens: metanol és víz
80:20 arányú elegye) megállapíthatjuk, hogy a reakció 2 nap alatt befejeződik (50%-os átalakulással), ekkor nagynyomású folyadékkromatográfiás meghatározás szerint (oszlop: Chiralcel OG; eluens: hexán és izopropilalkohol 70:30 arányú elegye) a reagálatlan (2S,3S)-le enantiomer optikailag tiszta (e. t. 100%). Az enzimet az elegyből kiszűijük, és ismételt használat céljára mossuk. A kapott éteres oldatokat egyesítjük, besűrítjük, és -4 °C hőmérsékleten kikristályosítjuk belőle a (2S,3S)-le vegyületet. A nyersterméket diizopropil-éterből átkristályosítjuk. így 70%-os hozammal 1,39 g fehér, kristályos anyagot nyerünk. [a]j; = +207° (c=l, CH2C12), olvadáspont: 119-121 °C. Nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat szerint a termék optikailag tiszta.
A visszamaradó reakcióelegyből 2,15 g, 0,005 mól (2R,3R)2e vegyületet különítünk el (100%-os hozam) olajos termékként flash-kromatográfiás eljárással, eluensként toluol és dietil-éter 2:1 arányú elegyének alkalmazásával. [a]jj=-193° (c=l, CH2C12).
A fenti reakcióelegyből kiszűrt enzim ismételt alkalmazásnál való hatását 2 napos reakcióidő mellett a 2. táblázatban mutatjuk be. A reakció minden esetben 50%-os átalakulásig megy, és optikailag tiszta (2S,3S)le vegyületet nyerünk, ha a reakcióidőt kiterjesztjük.
2. táblázat
| Alkalmazások száma | Átalakulás, % | e. t. (2S.3S), % |
| 1 | 50 | >>95 |
| 2 | 41 | 94 |
| 3 | 40 | 80 |
B eljárás
Az enzimet celiten rögzítjük az 1. példában leírt módon. 4,64 g, 0,0119 mól olyan racém le vegyületet, amelyben R! jelentése -CH3, és 4,1 g, 0,047 mól vinilacetátot oldunk 240 ml dietil-éterben, és az oldatot 5,51 g celiten rögzített enzimet tartalmazó tartályba visszük, a fenti enzimkészítmény lipáz- PS-tartalma 0,475 g. A reakció 1 nap elteltével 50%-os átalakulásnál leáll. A reakcióelegy feldolgozását az A eljárásban leírt módon végezzük. 82%-os hozammal 1,90 g (2S,3S)-le vegyületet nyerünk fehér kristályok formájában. [cc]d = +212° (c=1, CH2C12), a termék olvadáspontja 118-119 °C. A (2R,3R)2e általános képletnek megfelelő, R helyettesítőként metilcsoportot tartalmazó terméket 93%-os hozammal nyerjük, a termék mennyisége 2,46 g. [a]2D5=-199° (c=l, CH2C12).
A fenti reakcióelegyből kiszűrt enzimkészítmény ismételt felhasználásának hatása 1 nap reakcióidő mellett a 3. táblázatban látható.
3. táblázat
| Alkalmazások száma | Átalakulás, % | e. t. (2S,3S), % |
| 1 | 48 | 98 |
| 2 | 51 | >>95 |
| 3 | 50 | >>95 |
Claims (7)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás az (1) általános képletű (1-6 szénatomos alkil)-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(2-X-fenil-tio)propionát-származékok (2S,3S)-treo enantiomerei, az X helyettesítőként aminocsoportot tartalmazó (1) általános képletű (1-6 szénatomos alkil)-2-hidroxi-3-(4metoxi-fenil)-3-(2-amino-fenil-tio)-propionát-származ ékok (2R,3R)-treo enantiomerei és a 2 általános képletű (1-6 szénatomos alkil)-2-(2—6 szénatomos alkanoiloxi)-3-(4-metoxi-fenil)-3-(2-X-fenil-tio)-propionát-származékok (2R,3R)-treo enantiomerei előállítására - a képletekben X jelentése -NO2, -NH2, -NHCOCH3, -NHCOCF3, -NHCO2CH3, -NHCO2C(CH3)3, vagy -NHCHO, R jelentése 1-5 szénatomos alkilcsoport, és R[ jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, előnyösen metil- vagy etilcsoport - racém (1) általános képletű (1-6 szénatomos alkil)-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3(2-X-fenil-tio)-propionát-származékokból, azzal jellemezve, hogy a racém (1) általános képletű vegyületet vízmentes szerves oldószerben lipázzal katalizálva acilezzük, majd az (1) általános képletű vegyület el nem reagált (2S,3S)-treo enantiomerét és a (2) általános képletű vegyület kapott (2R,3R)-treo enantiomerét ismert módon elválasztjuk, és kívánt esetbeni) egy kapott (2S,3S)-treo enantiomer formájú, (1) általános képletű vegyületet - ahol X jelentése nitro- és aminocsoporttól eltérő - az aminocsoport védőcsoportjának ismert módon való eltávolításával X helyettesítőként aminocsoportot tartalmazó megfelelő vegyületté alakítunk, vagy ii) egy kapott (2R,3R)-treo enantiomer formájú, (2) általános képletű vegyületet - ahol X jelentése nitro- és aminocsoporttól eltérő - a hidroxilcsoport és az aminocsoport védőcsoportjának eltávolításával X helyettesítőként aminocsoportot tartalmazó megfelelő (2R,3R)treo enantiomer formájú (1) általános képletű vegyületté alakítunk.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy lipázként Pseudomonas cepacia lipázát alkalmazzuk.
- 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az enzimet izolált por vagy celiten, vagy chromosorbon rögzített formájában alkalmazzuk.
- 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy acilezőreagensként savanhidridet, vinil-észtert vagy aceton-oxim-acetátot alkalmazunk.
- 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy oldószerként olyan vízmentes szerves oldószereket alkalmazunk, amelyekben az (1) és (2) általános képletű vegyületek oldódnak.
- 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reagáltatást 20-60 °C hőmérsékleten hajtjuk végre.
- 7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a (2S,3S)-(1) általános képletű vegyületet a (2R,3R)-(2) általános képletű vegyülettől frakcionált kristályosítással vagy kromatográfiás úton választjuk el.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI931298A FI93741C (fi) | 1993-03-24 | 1993-03-24 | Menetelmä optisesti puhtaitten (2S,3S)- ja (2R,3R)-threo-alkyyli-2-hydroksi-3-(4-metoksifenyyli)-3-(2-X-fenyylitio)propionaattien tai vastaavien asyloitujen yhdisteiden valmistamiseksi |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9400762D0 HU9400762D0 (en) | 1994-06-28 |
| HUT70752A HUT70752A (en) | 1995-10-30 |
| HU216797B true HU216797B (hu) | 1999-08-30 |
Family
ID=8537616
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9400762A HU216797B (hu) | 1993-03-24 | 1994-03-12 | Eljárás a (2S, 3S)-treo-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(fenil-tio)- és (2R, 3R)-treo-2-alkanoil-oxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(fenil-tio)-propionát-származékok előállítására |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5514589A (hu) |
| EP (1) | EP0617130A3 (hu) |
| JP (1) | JP2612671B2 (hu) |
| CA (1) | CA2119670A1 (hu) |
| FI (1) | FI93741C (hu) |
| HU (1) | HU216797B (hu) |
| IL (1) | IL109041A (hu) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FI97725C (fi) * | 1995-02-17 | 1997-02-10 | Orion Yhtymae Oy | Menetelmä diltiatseemin valmistamiseksi |
| IT1295376B1 (it) * | 1997-10-22 | 1999-05-12 | Zambon Spa | Processo per il riciclo di un sottoprodotto della sintesi del diltiazem |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1152721B (it) * | 1982-10-15 | 1987-01-07 | Luso Farmaco Inst | Risoluzione ottica dell'acido dl-alfa-2-idrossi-3-(4-metossifenil)-3-(2-amminofeniltio)propionico |
| JPS6032775A (ja) * | 1983-07-30 | 1985-02-19 | Daikin Ind Ltd | 含フッ素ベンゾジアゼピン類 |
| US4908469A (en) * | 1988-05-18 | 1990-03-13 | Marion Laboratories, Inc. | 2-Hydroxy-propanoic acid acyclic alkyl esters for benzothiazepines |
| EP0342904A3 (en) * | 1988-05-18 | 1991-01-30 | MARION LABORATORIES, INC. (a Delaware corporation) | 2-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-3-(2-aminophenylthio)propionic acid, 8'-phenylmenthyl ester, especially for diltiazem |
| IT1226300B (it) * | 1988-07-26 | 1990-12-27 | Zambon Spa | Processo per la preparazione di intermedi per la sintesi del diltiazem. |
| JPH02190195A (ja) * | 1989-01-19 | 1990-07-26 | Rikagaku Kenkyusho | 光学活性プロピオン酸エステル類化合物の製法 |
| IT1232306B (it) * | 1989-07-27 | 1992-01-28 | Zambon Spa | Processo di risoluzione di intermedi utili per la preparazione del diltiazem |
| US5210030A (en) * | 1990-06-25 | 1993-05-11 | Merck & Co., Inc. | Process for selectively acylating immunomycin |
| FR2672600B1 (fr) * | 1991-02-08 | 1994-10-14 | Synthelabo | Procede de preparation du (-)-(2r,3s)-2,3-epoxy-3-(4-methoxyphenyl) propionate de methyle. |
-
1993
- 1993-03-24 FI FI931298A patent/FI93741C/fi active
-
1994
- 1994-03-12 HU HU9400762A patent/HU216797B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-03-18 IL IL109041A patent/IL109041A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-03-22 US US08/215,529 patent/US5514589A/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-03-23 CA CA002119670A patent/CA2119670A1/en not_active Abandoned
- 1994-03-23 EP EP94104620A patent/EP0617130A3/en not_active Ceased
- 1994-03-24 JP JP6054169A patent/JP2612671B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI93741B (fi) | 1995-02-15 |
| HU9400762D0 (en) | 1994-06-28 |
| IL109041A0 (en) | 1994-08-26 |
| IL109041A (en) | 1998-02-08 |
| CA2119670A1 (en) | 1994-09-25 |
| US5514589A (en) | 1996-05-07 |
| FI931298A0 (fi) | 1993-03-24 |
| JPH07303495A (ja) | 1995-11-21 |
| EP0617130A2 (en) | 1994-09-28 |
| EP0617130A3 (en) | 1995-03-08 |
| HUT70752A (en) | 1995-10-30 |
| FI931298A (fi) | 1994-09-25 |
| FI93741C (fi) | 1995-05-26 |
| JP2612671B2 (ja) | 1997-05-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1805316B1 (de) | Verfahren zur herstellung der enantiomeren formen von cis-3-hydroxycyclohexancarbonsäure-derivaten unter verwendung von hydrolasen | |
| EP0274277B1 (en) | A process for the enzymatic separation of the optical isomers of racemic oxazolidinonic derivatives | |
| US6346632B1 (en) | Process for the preparation of intermediates useful for the synthesis for benzothiazepines | |
| EP0605033B1 (en) | Enzymatic process for the stereoselective preparation of a hetero-bicyclic alcohol enantiomer | |
| US5169779A (en) | Process for the preparation of methyl (-)-(2R,3S)-2,3-epoxy-3-(4-methoxy-phenyl)propionate | |
| AU2001230192B2 (en) | Method for the enzymatic resolution of the racemates of aminomethyl-aryl-cyclohexanol derivatives | |
| EP2077987B1 (en) | Mandelic acid derivatives and preparation thereof | |
| HU216797B (hu) | Eljárás a (2S, 3S)-treo-2-hidroxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(fenil-tio)- és (2R, 3R)-treo-2-alkanoil-oxi-3-(4-metoxi-fenil)-3-(fenil-tio)-propionát-származékok előállítására | |
| NZ247636A (en) | Separation of racemic mixtures of deltavalerolactones using an enzyme; the pure enantiomers | |
| Senanayake et al. | Rabbit liver esterase-mediated enantioselective synthesis of 2-arylpropanoic acids | |
| US5518903A (en) | Process for producing optically active 3-aminobutanoic acid and the ester intermediates | |
| JPH0568588A (ja) | 光学活性３−フエニルグリシツド酸エステル類化合物の製法 | |
| JPH05227991A (ja) | 光学活性な３−ピロリジノール誘導体の製造法 | |
| FR2829152A1 (fr) | Procede enzymatique pour la resolution enantiomerique d'acides amines | |
| JP2006519603A (ja) | 光学的に活性なフェニルグリシデートを調製するための、立体選択的な化学酵素的方法 | |
| EP0490407A2 (en) | Process for the enzymatic separation of the optical isomers of tosyloxy-alkanols | |
| JPH0513636B2 (hu) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |