JP2023501394A - タンパク質水溶液中での可視粒子形成の防止 - Google Patents

タンパク質水溶液中での可視粒子形成の防止 Download PDF

Info

Publication number
JP2023501394A
JP2023501394A JP2022526146A JP2022526146A JP2023501394A JP 2023501394 A JP2023501394 A JP 2023501394A JP 2022526146 A JP2022526146 A JP 2022526146A JP 2022526146 A JP2022526146 A JP 2022526146A JP 2023501394 A JP2023501394 A JP 2023501394A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
antibody
composition
glass
antibodies
composition according
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2022526146A
Other languages
English (en)
Inventor
アルメンディンガー，アンドレア
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of JP2023501394A publication Critical patent/JP2023501394A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medical Preparation Storing Or Oral Administration Devices (AREA)

Abstract

本発明は、水性タンパク質製剤中の可視粒子の形成を防止する方法、ならびに前記方法で得られる組成物および医薬品を提供する。【選択図】なし

Description

本発明は、遊離脂肪酸を含む可視粒子の形成に対して安定化された水性タンパク質組成物、特に医薬抗体製剤の分野に関する。
界面活性剤は、タンパク質凝集をもたらす可能性がある界面応力から不安定なタンパク質を保護するので、タンパク質製剤における重要な賦形剤である。モノクローナル抗体（ｍＡｂ）などのタンパク質は非経口投与され、このことは、最も一般的に使用される界面活性剤ポリソルベート２０（ＰＳ２０）のうちの１つだけでなく、ポリソルベート８０、ポロキサマー１８８、およびＫｏｌｌｉｐｈｏｒ／Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ １５（１２－ヒドロキシステアリン酸のポリオキシエチレンエステル）も含む界面活性剤の選択を制限する。１ＰＳ２０は、製品の貯蔵寿命にわたって酸化分解または酵素的加水分解のいずれかによって分解し得る。特に、後者は分解産物として遊離脂肪酸（ＦＦＡ）を生成し、これは溶液中で沈殿し、続いて可視では見えない粒子および可視粒子を形成し得る。２生物医薬製剤に典型的に見られる条件下で、ＦＦＡは、温度に依存してそれらの溶解限界未満でさえ沈殿し得るが、粒子の沈殿の時点は、十分に特徴付けられた分解プロファイルについてさえ、あまり理解されていない。このことは、核生成因子の関与を示唆している。
したがって、特に長期保存のために、タンパク質水溶液中での可視粒子の形成を防止するための効率的な溶液を提供する必要がある。本発明は、一次包装材料の選択および処理による溶解限界未満のＦＦＡ粒子形成の軽減オプションを提供し、結果として、核生成因子として作用するガラス浸出物の量を減少させる。
以前の研究では、単一バイアルロットのガラス表面の不均一性が実証されており、これは保存時のガラス浸出の違いを反映する可能性がある。３本発明では、ＦＦＡ粒子形成の核生成因子としてのガラス浸出物を研究した。
３回の最終滅菌後に２０ｍＭグリシン溶液（ｐＨ１０）で充填したＥｘｐａｎｓｉｏｎ ５１バイアルから生成したガラス浸出物にミリスチン酸をスパイクした後、可視粒子をＦＴＩＲによって遊離脂肪酸（ＦＦＡ）として同定。ＦＦＡ粒子の少数の選択物のみを強調している。 ＳＥＭ－ＥＤＸによる金フィルタ上のアルミニウム（暗い丸でほとんど強調されていない）およびマグネシウム（破線の円）を有する代表的なＦＦＡ粒子。粒子の化学組成を以下の表に要約する。ガラス浸出物（グリシン溶液でＥｘｐ３３バイアルから生成）を、分解されたＰＳ２０／遊離脂肪酸の混合物を含有するエージングタンパク質溶液（２２Ｍ ５℃）にスパイクした後、粒子を同定した。 ミリスチン酸およびアルミニウムについて例示的に示した核生成因子に依存するＦＦＡ粒子形成の提案された機構。 貯蔵寿命の終わりでの浸出物濃度を証明する、保存時間およびバイアル形式に依存してＥｘｐ５１バイアルの３つの異なるプラセボ溶液から生成したガラス浸出物の過去のリアルタイムデータ。 保存時間および温度に依存するｍＡｂ１およびｍＡｂ２のＰＳ ２０濃度。 保存時間および温度に依存するｍＡｂ１およびｍＡｂ２のミリスチン酸（Ａ）およびラウリン酸（Ｂ）濃度。可視粒子の存在は、第１のグラフの破線の灰色ボックスによって示されている。スパイク実験に使用された試料は、破線の黒色ボックスによって示されている。 保存時間および温度に依存するｍＡｂ１およびｍＡｂ２のミリスチン酸（Ａ）およびラウリン酸（Ｂ）濃度。可視粒子の存在は、第１のグラフの破線の灰色ボックスによって示されている。スパイク実験に使用された試料は、破線の黒色ボックスによって示されている。
界面活性剤の分解、特にＰＳ２０および／またはＰＳ８０の分解の結果としてのＦＦＡを構成する可視粒子の形成は、非経口界面活性剤の選択肢が限られているため、バイオ医薬品産業における大きな課題である。ＦＦＡは特定の核生成因子なしにそれらの溶解限界を超えて沈殿することができるので、様々な手段によってＦＦＡなどのＰＳ２０分解および分解産物を減少させることが重要である。しかしながら、溶解限界未満では、核生成因子がＦＦＡの沈殿を誘発し、製品の貯蔵寿命を制限する可能性がある。
界面活性剤は、界面応力およびその後のタンパク質凝集から保護するタンパク質製剤中の必須構成成分である。現在の業界全体の課題の１つは、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）などの非経口界面活性剤の酵素分解であり、これは、例えば市販の水性抗体製剤などの市販のタンパク質含有調製物の貯蔵寿命の経過にわたって、可視粒子を形成する遊離脂肪酸（ＦＦＡ）の形成を潜在的にもたらす。ＦＦＡの濃度を確実に定量することはできるが、ガラスバイアルに保存された溶液中の粒子形成の時点は予測不可能なままである。したがって、本発明者らは、ＦＦＡ粒子形成の核生成因子として、例えばガラス浸出物などの無機イオンの影響を検討した。
以下の表Ａは、保存された溶液、ガラス材料の調製（例えば、最終滅菌）、溶液保存時間、および温度に応じて、異なる一次包装材料に最も関連するガラス浸出物の濃度を要約しており、コーティングされていないガラスバイアル（Ｅｘｐ３３／Ｄｕｒａｎ（登録商標）およびＥｘｐ５１／Ｆｉｏｌａｘ（登録商標）バイアル）と比較して、表面改質ガラスバイアルの浸出物の減少を明確に強調している。表面改質バイアルの中には、シリコン処理バイアル、ＴｏｐＬｙｏ（登録商標）バイアル（Ｓｉ－Ｏ－Ｃ－Ｈ層、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｓｃｈｏｔｔ．ｃｏｍ／ｄ／ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ＿ｐａｃｋａｇｉｎｇ／７ｆ６２９ｂ７ｅ－ｅ９７８－４４１７－ａ１５ｅ－８６２１ｆ９６９ｄ２２５／１．４／ｓｃｈｏｔｔ－ｄａｔａｓｈｅｅｔ－ｓｃｈｏｔｔ－ｔｏｐｌｙｏ－ｅｎｇｌｉｓｈ－１４０６２０１７．ｐｄｆ）、およびＴｙｐｅ Ｉ ｐｌｕｓ（登録商標）バイアル（共有結合ＳｉＯ２層、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｓｃｈｏｔｔ．ｃｏｍ／ｄ／ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ＿ｐａｃｋａｇｉｎｇ／ｆｆ５９２ｅ９ｅ－４ａ７ｆ－４９５ｆ－９９５２－９６５ｃ４ｄ７ｂ１ｅｄ８／１．４／ｓｃｈｏｔｔ－ｄａｔａｓｈｅｅｔ－ｓｃｈｏｔｔ－ｔｙｐｅ－ｉ－ｐｌｕｓ－ｅｎｇｌｉｓｈ－１４０６２０１７．ｐｄｆ）がある。
表Ａ：保存温度、時間、およびガラス調製に依存する異なる溶液を有する異なるガラスタイプにおけるガラス浸出物である、アルミニウム、ホウ素、ケイ素、およびナトリウムの濃度。濃度を、溶液のガラス浸出物の初期濃度およびそれらの定量限界（ＬＯＱ）と比較する。
ＴＳ＝最終滅菌、ｎ．ｍ．＝測定せず
Figure 2023501394000001
Figure 2023501394000002
本発明によれば、ＦＴＩＲによって同定されるＦＦＡ粒子は、ＳＥＭ－ＥＤＸによる化学組成のさらなる特性評価によって解明されるように、無機イオン／構成成分、例えばアルミニウムなどのガラス浸出物による沈殿の結果であることがここで見出された。このことは、これらの粒子の形成における無機元素の関与を示唆している。二酸化ケイ素、三酸化ホウ素、および三酸化アルミニウムは、非経口製品に使用されるタイプＩホウケイ酸ガラスの典型的なガラスネットワーク形成剤である。アルカリ酸化物（例えば、ナトリウム、カリウム）、およびアルカリ土類金属の酸化物（例えば、カルシウムおよびマグネシウム）のような様々なガラスネットワーク改質剤は、ガラスの溶融温度を低下させるためにガラス製造プロセス中に添加される。理論に束縛されるものではないが、ガラスタイプ、製剤、および保存条件に応じてガラスバイアルから浸出する無機元素は、ＦＦＡ粒子形成のための核生成シードとして作用し得ると結論付けられ得る。本研究では、ラウリン酸およびミリスチン酸を酵素的ＰＳ２０分解からの主な分解産物として使用し４、本研究は、溶解限界未満の遊離脂肪酸がその存在下で沈殿するという仮説を検証するために、異なるガラス浸出物およびそれらの混合物を標的とした。
本発明によれば、驚くべきことに、無機塩、特にＮａＡｌＯ２およびＣａＣｌ２は、それらの溶解限界未満のミリスチン酸またはラウリン酸の存在下で可視粒子の形成を開始することが見出された。これらの塩は、非経口製品に典型的に使用されるタイプＩホウケイ酸ガラスからの浸出物を模倣する。特に驚くべきことに、異なる製剤を有する異なるガラスタイプでのオートクレーブ処理サイクルによって得られた混合物中、および５℃で２～３年の貯蔵寿命にわたるタンパク質性薬物製品の代表的な浸出物の濃度での関連するガラス浸出物により、市販の非経口抗体製剤中にＰＳ２０などのポリソルベートの主要な分解産物であるラウリン／ミリスチン酸による粒子形成を確認した。Ｅｘｐ３３バイアルおよびＥｘｐ５１バイアル中の異なる製剤中の粒子は、アルミニウムまたはケイ素などの異なるガラス浸出物を有するＦＦＡ塩として同定された。さらに、本発明は、特に、関連するアルミニウム濃度に応じたＦＦＡ粒子形成を実証した。本発明による一実施形態では、前記アルミニウム濃度はｐｐｂ範囲である。本知見は、様々なＦＦＡの混合物をもたらす酵素的ＰＳ２０分解プロファイルを示す推奨保存温度（２２Ｍ、５℃）でエージングしたモノクローナル抗体（ｍＡｂ）製剤を用いた２つの事例研究で検証された。これらにおいて、ガラス浸出物の混合物のスパイクは、アルミニウム、ケイ素、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、カルシウムおよび遊離脂肪酸などのガラス浸出物の複合体として同定される即時の可視粒子形成をもたらした。本結果に基づいて、リアルタイム条件下での長期保存に対するタンパク質製剤における粒子形成を検証する。
したがって、一実施形態では、本発明は、タンパク質と一緒に、薬学的に許容され得る賦形剤、例えば緩衝液、酸化防止剤を含む安定剤、および界面活性剤を含む安定な水性組成物を提供し、前記組成物は、ガラスバイアルなどの包装材料から拡散した１つまたはいくつかの種類の無機イオンと前記界面活性剤の分解から生じる物質との混合物を、可視粒子を形成することなく、さらに含む。一態様では、前記無機イオンは、アルミニウム、ホウ素、ケイ素、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウムから選択される。別の態様では、前記無機イオンの濃度は、それぞれ非表面改質バイアル（Ｅｘｐ３３およびｅｘｐ５１バイアルと呼ばれる）の各イオンおよび各バイアルタイプについて表Ａ（６Ｍ ４０℃）に開示される濃度までの任意の濃度である。さらに別の態様では、特に、異なるバイアルフォーマットのＥｘｐ５１バイアルの場合、前記無機イオンの濃度は、図４に開示される各イオンのそれぞれの濃度までの任意の濃度である。
別の実施形態では、前記組成物のｐＨが５～７の範囲である、上記で定義される組成物が提供される。一態様では、ｐＨは約６である。
別の実施形態では、本発明は、タンパク質が抗体である、本明細書で前に定義される組成物を提供する。一態様では、抗体はモノクローナル抗体である。別の態様では、抗体は、ヒトまたはヒト化モノクローナル、単一または二重特異性抗体である。
一態様では、本発明は、前記組成物中に存在する界面活性剤の分解から生じる１つまたはいくつかの種類の物質（分解産物）をさらに含む、本明細書で前に定義される組成物を提供する。一態様では、前記界面活性剤はポリソルベート（ＰＳ）から選択される。別の態様では、前記界面活性剤はＰＳ２０またはＰＳ８０から選択される。別の態様では、前記分解産物は、異なる鎖長および飽和度の様々な脂肪酸と、異なる極性頭部基、異なる脂肪酸尾部、および異なる程度のエステル化のポリマーエステルからなる残りのＰＳ２０残基との混合物である。一態様では、前記分解産物は、本明細書で定義される遊離脂肪酸である。一態様では、ポリソルベート分解から生じる前記物質は、それぞれの溶解度レベル以下の濃度での遊離脂肪酸である。別の態様では、前記遊離脂肪酸は、ＰＳ２０のＵＳＰで定義されるように選択される。別の態様では、前記遊離脂肪酸は、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン／オレイン酸、カプリン酸、およびステアリン酸から選択される。別の態様では、前記遊離脂肪酸はラウリン酸および／またはミリスチン酸から選択され、室温での水中で、ラウリン酸の溶解度レベルは１５μｇ／ｍｌであり、ミリスチン酸の溶解度レベルは７μｇ／ｍｌである。
一実施形態では、本発明は、濃度が０．０３μｇ／ｍｌまでのアルミニウム、および／または０．０５μｇ／ｍｌまでのホウ素、および／または０．５μｇ／ｍｌまでのケイ素である、本明細書で前に定義される組成物を提供する。
別の実施形態では、本発明は、安定剤が糖、糖アルコール、糖誘導体、またはアミノ酸からなる群から選択される、本明細書で前に定義される組成物を提供する。一態様では、安定剤は、（１）スクロース、トレハロース、シクロデキストリン、ソルビトール、マンニトール、グリシン、または／および（２）メチオニン、および／または（３）アルギニン、またはリジンである。さらに別の態様では、前記安定剤の濃度は、それぞれ、（１）５００ｍＭまで、または（２）５～２５ｍＭ、または／および（３）３５０ｍＭまでである。
別の実施形態では、本発明は、緩衝液が酢酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、アルギニン、ヒスチジン、リン酸塩、トリス、グリシン、アスパラギン酸塩、およびグルタミン酸塩緩衝系からなる群から選択される、本明細書で前に定義される組成物を提供する。一態様では、緩衝液は、遊離ヒスチジン塩基およびヒスチジン－ＨＣｌまたは酢酸塩またはコハク酸塩および／またはアスパラギン酸塩から構成される。さらに、この実施形態においては、前記緩衝液のヒスチジン濃度は５～５０ｍＭである。
別の実施形態では、本発明は、界面活性剤が非イオン性界面活性剤からなる群から選択される、本明細書で前に定義される組成物を提供する。一態様では、界面活性剤はポリソルベート（ＰＳ）である。別の態様では、界面活性剤は、ＰＳ２０またはＰＳ８０またはポリオキシル１５ヒドロキシステアレートである。さらに別の態様では、前記界面活性剤の濃度は０．０１％～１％（ｗ／ｖ）である。
別の実施形態では、本発明は、薬学的に許容され得る賦形剤が、２０ｍＭ ＨｉｓＨＣｌ緩衝液ｐＨ５．５中の１０００Ｕ／ｍＬヒアルロニダーゼ、１０５ｍＭトレハロース、１００ｍＭスクロース、１０ｍＭメチオニン、および０．０４％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０である、本明細書で前に定義される組成物を提供する。
別の実施形態では、本発明は、可視粒子を含まないままであることを特徴とする、本明細書で前に定義される組成物を提供する。一態様では、前記可視粒子は、本明細書で定義される分解産物および無機イオンからなる。一態様では、前記可視粒子は、本明細書で定義される遊離脂肪酸および無機イオンからなる。
別の実施形態では、本発明は、本明細書で前に定義される組成物を提供し、前記組成物は、その認可された貯蔵寿命が終わるまで前記可視粒子を含まないままである。別の態様では、前記組成物は、５年間まで、または３年間まで、または２４ヶ月間まで、または１８ヶ月間まで、または１２ヶ月間まで、前記可視粒子を含まないままである。
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される組成物を得る方法を提供し、前記方法は、本明細書で定義される１つまたはいくつかの無機イオンの前記組成物への浸出を防止する一次包装材料を選択することを含む。一態様では、前記方法は、表Ａ（６Ｍ ４０℃、非表面改質バイアル）および／または図４に示されるそれぞれの濃度を超える前記１つまたはいくつかの無機イオンの浸出を防止する。別の実施形態では、本方法は、０．０３μｇ／ｍｌまでのアルミニウム、および／または０．０５μｇ／ｍｌまでのホウ素、および／または０．５μｇ／ｍｌまでのケイ素の浸出を防止する。
一実施形態では、本発明は、本明細書で定義される組成物を得る方法を提供し、前記一次包装材料は、以下から選択される：
ｏ内面コーティングを有するガラスバイアル
ｏ共有結合的に改質された表面を有するガラスバイアル
ｏ純粋なＳｉＯ２（＞９９％）のガラスバイアル
ｏ以下に記載されるように洗浄および滅菌されたガラスバイアル
ｏポリマーバイアル
ｏ内面コーティングまたは表面改質を有するポリマーバイアル。
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される組成物を得る方法を提供し、前記一次包装材料は、以下から選択される：
ｏシリコン処理バイアル、
ｏＴｏｐＬｙｏ（登録商標）バイアル、
ｏＴｙｐｅ Ｉ ｐｌｕｓ（登録商標）バイアル、
ｏＰｕｒ Ｑ（登録商標）バイアル、
ｏＣｒｙｓｔａｌ Ｚｅｎｉｔｈ（登録商標）バイアル、
ｏＳｉＯ２ ｍａｔｅｒｉａｌ ｓｃｉｅｎｃｅＳＭバイアル、
ｏ以下に記載されるように洗浄および滅菌されたＤｕｒａｎ（登録商標）バイアル、ならびに／または
ｏ以下に記載されるように洗浄および滅菌されたＦｉｏｌａｘ（登録商標）バイアル。
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される組成物を得る方法であって、使用前に、例えば水性タンパク質組成物を充填する前に、一次包装材料をａ）洗浄／乾燥する工程および／またはｂ）発熱物質除去する工程をさらに含む、方法を提供する。一態様では、洗浄は５０℃を超える水温で行われ、続いて５０μｌ未満の残留水を許容する乾燥工程が行われる。一態様では、発熱物質除去は、４００℃以下の温度で行われる。別の態様では、発熱物質除去は１８０～３４０℃の間の温度で行われ、滅菌トンネル内での滞留時間は８時間に制限される。
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される組成物を得る方法を提供し、前記方法は、可視粒子の形成に対する前記組成物の安定性をもたらす。一態様では、前記可視粒子は、本明細書で定義される、１つまたはいくつかの分解産物および１つまたはいくつかの種類の無機イオンを含む。別の態様では、前記可視粒子は、本明細書で定義される、１つまたはいくつかの遊離脂肪酸および１つまたはいくつかの無機イオンからなる。さらに別の態様では、本発明による方法は、組成物、例えば市販の医薬抗体組成物を提供し、これはその認可された貯蔵寿命が満了するまで可視粒子を含まないままである。別の態様では、本方法は、５年間まで、または３年間まで、または２４ヶ月間まで、または１８ヶ月間まで、または１２ヶ月間まで、前記可視粒子を含まないままである組成物を提供する。
別の実施形態では、本発明は、容器内に本明細書で定義される組成物、例えば水性抗体組成物を含む医薬剤形を提供し、その組成物中の１つまたはいくつかの無機イオンの濃度は、前記医薬剤形の認可された貯蔵寿命の間、実質的に一定のままである。一態様では、１つまたはいくつかの無機イオンの前記濃度は、保存の開始時、例えば２週間後、または前記組成物を前記容器または包装材料に充填した直後に、同じ容器内の同じ組成物を含む医薬剤形で測定された同じイオン（複数可）の濃度と比較した場合、保存の最大５年間、または３年間、または２４ヶ月間、または１８ヶ月、または１２ヶ月間、実質的に一定のままである。一態様では、容器は、本明細書で定義される、ガラスバイアルまたは一次包装材料である。一態様では、無機イオンは、アルミニウム、ホウ素、ケイ素、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウムから選択される。
別の実施形態では、本発明は、本明細書で前に定義される医薬剤形、例えば、容器内の水性抗体製剤を提供し、前記剤形中の１つまたはいくつかの無機イオンの濃度の増加は、表Ａ（非表面改質バイアル、６Ｍ ４０℃）および／または図４の各イオンおよび各バイアルタイプについて示されるそれぞれの濃度未満のままである。別の態様では、バイアルタイプとは無関係に、保存の開始時、例えば２週間後、または前記組成物を前記容器または包装材料に充填した直後に、同じ容器内の同じ組成物を含む医薬剤形で測定された同じイオン（複数可）の濃度と比較した場合、保存の最大５年、または３年、または２４ヶ月、または１８ヶ月、または１２ヶ月後に、アルミニウムの濃度は０．０３μｇ／ｍｌ未満のままであり、および／またはホウ素の濃度は０．０５μｇ／ｍｌ未満のままであり、および／またはケイ素の濃度は０．５μｇ／ｍｌ未満のままである。一態様では、無機イオンは、アルミニウム、ホウ素、ケイ素、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウムから選択される。一態様では、容器は、本明細書で定義される、ガラスバイアル、または一次包装材料である。
別の実施形態では、本発明は、水性抗体調製物の保存のための、本明細書で前に定義される「一次包装材料」の使用を提供する。別の実施形態では、本発明は、水性抗体調製物の保存中の可視粒子、例えばＦＦＡを含む粒子の形成を低減または回避するための、本明細書で定義される前記「一次包装材料」の使用を提供する。一実施形態では、前記一次包装材料は、本明細書で定義されるポリマーバイアルである。別の実施形態では、前記一次包装材料は、本明細書で定義される表面改質ガラスバイアルである。さらに別の実施形態では、前記抗体はモノクローナル抗体である。別の実施形態では、前記保存は、前記抗体調製物が、少なくとも対応する抗体製品の認可された貯蔵寿命の間、可視粒子を含まないままであることを特徴とする。別の実施形態では、前記保存は、前記抗体調製物が最大５年間、または３年間、または２４ヶ月間、または１８ヶ月間、または１２ヶ月間保存しても可視粒子を含まないままであることを特徴とする。
「賦形剤」という用語は、対象に対して非毒性である、活性成分以外の医薬組成物または製剤中の成分を指す。賦形剤には、緩衝液、酸化防止剤を含む安定剤、界面活性剤、または保存剤が含まれるが、これらに限定されない。
「無機イオン」という用語は、無機化学の当業者に周知である。本明細書で使用される無機イオンは、アルミニウム、ホウ素、ケイ素、ナトリウム、マグネシウム、カリウム、およびカルシウムを意味する。好ましい無機イオンは、アルミニウム、カルシウム、およびマグネシウムである。本発明によれば、前記無機イオンは、０．０３μｇ／ｍｌまでのアルミニウム、および／または０．０５μｇ／ｍｌまでのホウ素、および／または０．５μｇ／ｍｌまでのケイ素の濃度で存在することができる。
「緩衝液」という用語は、例えば医薬調製物の開発などの有機化学または薬学の当業者に周知である。本明細書で使用される緩衝液は、酢酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、アルギニン、ヒスチジン、リン酸塩、トリス、グリシン、アスパラギン酸塩、およびグルタミン酸塩緩衝系を意味する。さらに、この実施形態においては、前記緩衝液のヒスチジン濃度は５～５０ｍＭである。好ましい緩衝液は、遊離ヒスチジン塩基およびヒスチジン－ＨＣｌまたは酢酸塩またはコハク酸塩および／またはアスパラギン酸塩である。さらに、この実施形態においては、前記緩衝液のヒスチジン濃度は５～５０ｍＭである。
「界面活性剤」という用語は、有機化学の当業者に周知である。本明細書で使用される界面活性剤は、非イオン性界面活性剤を意味する。好ましい界面活性剤はポリソルベート、特にＰＳ２０またはＰＳ８０である。本発明によれば、前記界面活性剤は、０．０１％～１％（ｗ／ｖ）の濃度で存在することができる。
「安定剤」という用語は、例えば医薬調製物の開発などの有機化学または薬学の当業者に周知である。本発明による安定剤は、糖、糖アルコール、糖誘導体、またはアミノ酸からなる群から選択される。一態様では、安定剤は、（１）スクロース、トレハロース、シクロデキストリン、ソルビトール、マンニトール、グリシン、または／および（２）メチオニン、および／または（３）アルギニン、またはリジンである。さらに別の態様では、前記安定剤の濃度は、それぞれ、（１）５００ｍＭまで、または（２）５～２５ｍＭ、または／および（３）３５０ｍＭまでである。
本明細書で使用される「ポリソルベートの分解から生じる物質」または「分解産物」という用語は、当業者に公知のポリソルベートの分解から生じる任意の物質を意味する。一態様では、前記物質は遊離脂肪酸である。「脂肪酸」（または「ＦＡ」）という用語は、有機化学の当業者に周知である。一態様では、脂肪酸は、脂肪族鎖を有する任意のカルボン酸を意味し、脂肪族鎖は、飽和または不飽和の直鎖状または分岐状であり、４～２８個、または８～２４個、または１０～２２個、または１２～２０個の炭素原子を含む。一態様では、前記遊離脂肪酸は、ＰＳ２０のＵＳＰで定義されるように選択される。一態様では、前記遊離脂肪酸は、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン／オレイン酸、カプリン酸、およびステアリン酸から選択される。別の態様では、前記遊離脂肪酸は、ラウリン酸および／またはミリスチン酸から選択される。本発明によれば、ポリソルベートの分解から生じる前記物質は、室温でそれぞれの水への溶解度レベルまでの濃度で存在することができる。別の態様では、そのような物質は、室温での水への溶解度レベル未満の任意の濃度で存在する。本明細書で使用される「室温」という用語は、その通常の意味を有する。一態様では、室温は、２０～２８℃、好ましくは２２～２６℃を意味する。
本明細書で使用される「包装材料」または「一次包装材料」という用語は、製品と接触する材料を意味する。一実施形態では、一次包装材料という用語は、以下を意味する：
・内面コーティングを有するガラスバイアル、
・共有結合的に改質された表面を有するガラスバイアル、
・純粋なＳｉＯ２（＞９９％）のガラスバイアル、
・以下に記載されるように洗浄および滅菌されたガラスバイアル、
・ポリマーバイアル、
・内面コーティングまたは表面改質を有するポリマーバイアル。
一実施形態では、一次包装材料という用語は、以下を意味する：
・シリコン処理バイアル、
・ＴｏｐＬｙｏ（登録商標）バイアル、
・Ｔｙｐｅ Ｉ ｐｌｕｓ（登録商標）バイアル、
・Ｐｕｒ Ｑ（登録商標）バイアル、
・Ｃｒｙｓｔａｌ Ｚｅｎｉｔｈ（登録商標）バイアル、
・ＳｉＯ２ ｍａｔｅｒｉａｌ ｓｃｉｅｎｃｅＳＭバイアル、
・以下に記載されるように洗浄および滅菌されたＤｕｒａｎ（登録商標）バイアル、ならびに／または
・以下に記載されるように洗浄および滅菌されたＦｉｏｌａｘ（登録商標）バイアル。
ある特定の実施形態では、包装材料は、前記安定な水性タンパク質組成物を受ける前に洗浄および／または発熱物質除去される。前記包装材料の洗浄は、当業者に公知の任意の手段によって行うことができる。好ましくは、前記洗浄は５０℃を超える水温で行われ、続いて５０ｕＬ未満の残留水を許容する乾燥工程が行われる。前記包装材料の発熱物質除去は、当業者に公知の任意の手段によって行うことができる。好ましくは、前記発熱物質除去は、４００℃以下の温度で行われる。より好ましくは、前記発熱物質除去は１８０～３４０℃の間の温度で行われ、滅菌トンネル内での滞留時間は８時間に制限される。
本明細書で使用される「タンパク質」という用語は、任意の治療上関連するポリペプチドを意味する。一実施形態では、タンパク質という用語は抗体を意味する。別の実施形態では、タンパク質という用語はイムノコンジュゲートを意味する。
「抗体」という用語は、本明細書では最も広い意味で使用され、それらが所望の抗原結合活性を呈する限り、限定されるものではないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、および抗体断片を含む、様々な抗体クラスまたは構造を包含する。一実施形態では、これらの抗体のいずれかは、ヒトまたはヒト化されている。一態様では、抗体は、アレムツズマブ（ＬＥＭＴＲＡＤＡ（登録商標））、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標））、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標）、２Ｃ４）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ（登録商標））、アブシキシマブ（ＲＥＯＰＲＯ（登録商標））、アダリムマブ（ＨＵＭＩＲＡ（登録商標））、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネオズマブ、バシリキシマブ（ＳＩＭＵＬＥＣＴ（登録商標））、バビツキシマブ、ベリムマブ（ＢＥＮＬＹＳＴＡ（登録商標））、ブリアキヌマブ（ｂｒｉａｎｋｉｎｕｍａｂ）、カナキヌマブ（ＩＬＡＲＩＳ（登録商標））、セデリズマブ、セルトリズマブペゴル（ＣＩＭＺＩＡ（登録商標））、シドフシツズマブ、シドツズマブ、シクスツムマブ、クラザキズマブ、クレネズマブ、ダクリズマブ（ＺＥＮＡＰＡＸ（登録商標））、ダロツズマブ、デノスマブ（ＰＲＯＬＩＡ（登録商標）、ＸＧＥＶＡ（登録商標））、エクリズマブ（ＳＯＬＩＲＩＳ（登録商標））、エファリズマブ、エプラツズマブ、エリズマブ、エミシズマブ（ＨＥＭＬＩＢＲＡ（登録商標））、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゴリムマブ（ＳＩＭＰＯＮＩ（登録商標））、イピリムマブ、イムガツズマブ、インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（登録商標））、ラベツズマブ、レブリキズマブ、レキサツムマブ、リンツズマブ、ルカツムマブ、ルリズマブペゴル、ルムレツズマブ、マパツムマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モガムリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ、ムロノマブ、ナタリズマブ（ＴＹＳＡＢＲＩ（登録商標））、ネシツムマブ（ＰＯＲＴＲＡＺＺＡ（登録商標））、ニモツズマブ（ＴＨＥＲＡＣＩＭ（登録商標））、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オロキズマブ、オマリズマブ（ＸＯＬＡＩＲ（登録商標））、オナルツズマブ（ＭｅｔＭＡｂとしても公知）、パリビズマブ（ＳＹＮＡＧＩＳ（登録商標））、パスコリズマブ、ペクフシツズマブ、ペクツズマブ、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標））、ペキセリズマブ、プリリキシマブ、ラリビズマブ、ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標））、レスリビズマブ、レスリズマブ、レシビズマブ、ロバツムマブ、ロンタリズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、サリルマブ、セクキヌマブ、セリバンツマブ、シファリムマブ、シブロツズマブ、シルツキシマブ（ＳＹＬＶＡＮＴ（登録商標））、シプリズマブ、ソンツズマブ、タドシズマブ、タリズマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ（ＡＣＴＥＭＲＡ（登録商標））、トラリズマブ、ツクシツズマブ、ウマビズマブ、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ（ＳＴＥＬＡＲＡ（登録商標））、ベドリズマブ（ＥＮＴＹＶＩＯ（登録商標））、ビシリズマブ、ザノリムマブ、ザルツムマブから選択される。
「抗体断片」とは、インタクトな抗体が結合する抗原に結合するインタクトな抗体の一部を含む、インタクトな抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；ダイアボディ；直鎖状抗体；一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖおよびｓｃＦａｂ）；単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）；および抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の抗体断片の総説については、ＨｏｌｌｉｇｅｒおよびＨｕｄｓｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２３：１１２６～１１３６（２００５）を参照されたい。
抗体の「クラス」とは、その重鎖によって保有される定常ドメインまたは定常領域のタイプを指す。抗体には、次の５種類の主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭが存在し、これらのうちのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２にさらに分けられる場合がある。ある特定の態様では、抗体はＩｇＧ１アイソタイプのものである。ある特定の態様では、抗体は、Ｆｃ領域エフェクター機能を低下させるためにＰ３２９Ｇ、Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５Ａ変異を有するＩｇＧ１アイソタイプのものである。他の態様では、抗体はＩｇＧ２アイソタイプのものである。ある特定の態様では、抗体は、ＩｇＧ４抗体の安定性を改善するためにヒンジ領域にＳ２２８Ｐ変異を有するＩｇＧ４アイソタイプのものである。免役グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、ａ、ｄ、ｅ、ｇ、およびｍと呼ばれる。抗体の軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）およびラムダ（λ）と呼ばれる２種類の１つに割り当てられ得る。
「ヒト抗体」とは、ヒトもしくはヒト細胞により産生される抗体、またはヒト抗体レパートリーもしくはヒト抗体をコードする配列を利用した非ヒト起源由来の抗体のアミノ酸に対応するアミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を明確に除外する。
「ヒト化」抗体とは、非ヒトＣＤＲ由来のアミノ酸残基およびヒトＦＲ由来のアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。ある特定の態様では、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、通常２つの実質的にすべての可変ドメインを含み、すべてまたは実質的にすべてのＣＤＲは、非ヒト抗体のＣＤＲに対応し、すべてまたは実質的にすべてのＦＲは、ヒト抗体のＦＲに対応する。ヒト化抗体は、任意に、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部を含んでいてもよい。抗体、例えば、非ヒト抗体の「ヒト化形態」とは、ヒト化を受けた抗体を指す。
本明細書で使用される、「超可変領域」または「ＨＶＲ」という用語は、配列において超可変性であり、抗原結合特異性を決定する、抗体可変ドメインの領域、例えば「相補性決定領域」（ＣＤＲ）のそれぞれを指す。一般に、抗体は６つのＣＤＲを含み、３つがＶＨにあり（ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）、３つがＶＬにある（ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３）。本明細書における例示的なＣＤＲとしては、以下が挙げられる：
（ａ）アミノ酸残基２６～３２（Ｌ１）、５０～５２（Ｌ２）、９１～９６（Ｌ３）、２６～３２（Ｈ１）、５３～５５（Ｈ２）、および９６～１０１（Ｈ３）で生じる超可変ループ（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１～９１７（１９８７））；
（ｂ）アミノ酸残基２４～３４（Ｌ１）、５０～５６（Ｌ２）、８９～９７（Ｌ３）、３１～３５ｂ（Ｈ１）、５０～６５（Ｈ２）、および９５～１０２（Ｈ３）で生じるＣＤＲ（Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ（１９９１））；ならびに
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ～３６（Ｌ１）、４６～５５（Ｌ２）、８９～９６（Ｌ３）、３０～３５ｂ（Ｈ１）、４７～５８（Ｈ２）、および９３～１０１（Ｈ３）で生じる抗原接触（ＭａｃＣａｌｌｕｍら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２～７４５（１９９６））。
特に指示がない限り、ＣＤＲは、上記のＫａｂａｔらに従い決定される。当業者は、ＣＤＲの表記がまた、上記のＣｈｏｔｉａ、上記のＭｃＣａｌｌｕｍ、または任意の他の科学的に許容される命名システムに従って決定され得ることを理解するであろう。
「イムノコンジュゲート」は、細胞傷害性薬剤を含むが、これに限定されない１つ以上の異種分子にコンジュゲートされた抗体である。
「個体」または「対象」は、哺乳動物である。哺乳動物には、家畜（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、およびウマ）、霊長類（例えば、ヒト、およびサルなどの非ヒト霊長類）、ウサギ、およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）が含まれるが、これらに限定されない。ある特定の態様では、個体または対象はヒトである。
「単離」抗体は、その自然環境の構成成分から分離された抗体である。いくつかの態様では、抗体は、例えば、電気泳動（例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、等電点（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）またはクロマトグラフィー（例えば、イオン交換または逆相ＨＰＬＣ）法によって決定される場合、純度が９５％または９９％より高くなるまで精製される。抗体純度を評価する方法の総説については、例えば、Ｆｌａｔｍａｎら、Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ８４８：７９～８７（２００７）を参照されたい。
「医薬組成物」または「医薬製剤」という用語は、その中に含有される活性成分の生物学的活性が有効であることを可能にするような形態であり、医薬組成物が投与される対象に対して許容できないほどに毒性である追加の構成成分を含有しない調製物を指す。
「薬学的に許容され得る担体」とは、医薬組成物または製剤中の活性成分以外の成分を指し、これは対象にとって非毒性である。薬学的に許容され得る担体には、本明細書で定義される賦形剤が含まれるが、これに限定されない。
Ａ．キメラおよびヒト化抗体
ある特定の態様では、本明細書で提供される抗体はキメラ抗体である。ある特定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８１：６８５１～６８５５（１９８４）に記載されている。一例では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、または非ヒト霊長類、例えば、サル由来の可変領域）およびヒト定常領域を含む。更なる例では、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のそれから変更されている「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合断片を含む。
ある特定の態様では、キメラ抗体はヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、ヒトに対する免疫原性を低減する一方で、親非ヒト抗体の特異性および親和性は保持するようにヒト化される。通常、ヒト化抗体は、ＣＤＲ（またはその一部）が非ヒト抗体に由来し、ＦＲ（またはその一部）がヒト抗体配列に由来する、１つ以上の可変ドメインを含む。ヒト化抗体はまた、任意に、ヒト定常領域の少なくとも一部を含む。いくつかの態様では、ヒト化抗体のいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性または親和性を回復または改善するために、非ヒト抗体（例えば、ＣＤＲ残基が由来する抗体）からの対応する残基で置換される。
ヒト化抗体およびその作製方法は、例えば、ＡｌｍａｇｒｏおよびＦｒａｎｓｓｏｎ、Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９～１６３３（２００８）、ならびに例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、
Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３～３２９（１９８８）；Ｑｕｅｅｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：１００２９～１００３３（１９８９）；米国特許第５，８２１，３３７号、同第７，５２７，７９１号、同第６，９８２，３２１号、および同第７，０８７，４０９号；Ｋａｓｈｍｉｒｉら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：２５～３４（２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）グリフトを記載）；Ｐａｄｌａｎ、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９～４９８（１９９１）（「リサーフェイシング」を記載）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：４３～６０（２００５）（「ＦＲシャッフリング」を記載）；ならびにＯｓｂｏｕｒｎら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：６１～６８（２００５）およびＫｌｉｍｋａら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、８３：２５２～２６０（２０００）（ＦＲシャッフリングの「ガイドセレクション」アプローチを記載）にさらに記載されている。
ヒト化のために使用され得るヒトフレームワーク領域としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：「ベストフィット」法を使用して選択されたフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照）；軽鎖または重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８９：４２８５（１９９２）；およびＰｒｅｓｔａら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１５１：２６２３（１９９３）を参照）；ヒト成熟（体細胞変異）フレームワーク領域またはヒト生殖細胞系フレームワーク領域（例えば、ＡｌｍａｇｒｏおよびＦｒａｎｓｓｏｎ、Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９～１６３３（２００８）を参照）；およびＦＲライブラリのスクリーニングに由来するフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８～１０６８４（１９９７）およびＲｏｓｏｋら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１～２２６１８（１９９６）を参照）。
Ｂ．ヒト抗体
ある特定の態様では、本明細書で提供される抗体はヒト抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で公知の様々な技法を使用して作製され得る。ヒト抗体は、一般に、ｖａｎ Ｄｉｊｋおよびｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８～７４（２００１）およびＬｏｎｂｅｒｇ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０～４５９（２００８）に記載されている。
ヒト抗体は、免疫原を、抗原チャレンジに応答して、インタクトなヒト抗体またはヒト可変領域を有するインタクトな抗体を産生するように改変されたトランスジェニック動物に投与することによって調製されてもよい。このような動物は、典型的には、内因性免疫グロブリン遺伝子座に取って代わるか、または染色体外に存在するか、もしくは動物の染色体にランダムに組み込まれるヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部または一部分を含む。そのようなトランスジェニックマウスでは、内因性免疫グロブリン遺伝子座は、一般的に不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得る方法の総説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ、Ｎａｔ．
Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７～１１２５（２００５）を参照されたい。また、例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術を記載する米国特許第６，０７５，１８１号および同第６，１５０，５８４号；ＨＵＭＡＢ（登録商標）技術を記載する米国特許第５，７７０，４２９号、Ｋ－Ｍ ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載する米国特許第７，０４１，８７０号、およびＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載する米国特許出願公開第２００７／００６１９００号も参照されたい。そのような動物によって生成されるインタクトな抗体からのヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることによってさらに改変されてもよい。
ヒト抗体はまた、ハイブリドーマベースの方法によって作製することができる。ヒトモノクローナル抗体を産生するためのヒト骨髄腫およびマウス－ヒト異種骨髄腫細胞株が記載されている。（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１３３：３００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、５１～６３頁（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８７）；およびＢｏｅｒｎｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７：８６（１９９１）を参照されたい）ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して生成されるヒト抗体はまた、Ｌｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１０３：３５５７～３５６２（２００６）に記載されている。さらなる方法には、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を記載）およびＮｉ、Ｘｉａｎｄａｉ Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ、２６（４）：２６５～２６８（２００６）（ヒト－ヒトハイブリドーマを記載）に記載されるものが含まれる。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）はまた、ＶｏｌｌｍｅｒｓおよびＢｒａｎｄｌｅｉｎ、Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ、２０（３）：９２７～９３７（２００５）ならびにＶｏｌｌｍｅｒｓおよびＢｒａｎｄｌｅｉｎ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２７（３）：１８５～９１（２００５）に記載されている。
ヒト抗体はまた、ヒト由来のファージ・ディスプレイ・ライブラリから選択される可変ドメイン配列を単離することによって生成することができる。次いで、そのような可変ドメイン配列は、所望のヒト定常ドメインと組み合わせられてもよい。抗体ライブラリからヒト抗体を選択する技法は以下に記載されている。
Ｃ．抗体誘導体
ある特定の態様では、本明細書で提供される抗体は、当技術分野で公知であり、容易に入手可能なさらなる非タンパク質性部分を含むようにさらに改変され得る。抗体の誘導体化に適した部分としては、水溶性ポリマーが挙げられるが、これらに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、限定されないが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールの共重合体、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸共重合体、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダム共重合体のいずれか）、およびデキストランまたはポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｏｘｉｄｅ）／エチレンオキシド共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにこれらの混合物が挙げられる。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性のため、製造時に有利であり得る。ポリマーは、任意の分子量であってもよく、分岐していても、分岐していなくてもよい。抗体に付着しているポリマーの数は様々であり得、複数のポリマーが付着している場合には、それらは同じ分子であっても、異なった分子であってもよい。一般に、誘導体化のために使用されるポリマーの数および／または種類は、限定するものではないが、改良される抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が定義される条件下で治療に使用されるかどうかなどを含む考慮事項に基づいて決定することができる。
Ｄ．イムノコンジュゲート
本発明はまた、細胞傷害性薬剤、化学療法剤、薬物、成長阻害剤、毒素（例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、もしくは動物起源の酵素活性毒素、またはそれらの断片）、または放射性同位体などの１つ以上の治療剤にコンジュゲート（化学的に結合）された本明細書の抗体を含む、イムノコンジュゲートを提供する。
一態様では、イムノコンジュゲートは、抗体が、前述の治療剤の１つ以上にコンジュゲートしている、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）である。抗体は、典型的には、リンカーを使用して、１つ以上の治療剤に接続される。治療剤および薬物およびリンカーの例を含む、ＡＤＣ技術の概観は、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖｉｅｗ ６８：３～１９（２０１６）に記載されている。
別の態様では、イムノコンジュゲートは、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、外毒素Ａ鎖（シュードモナス・アエルギノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）由来）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファ－サルシン、アレウリテス・フォーディ（Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ ｆｏｒｄｉｉ）タンパク質、ジアンシンタンパク質、フィトラカ・アメリカーナ（Ｐｈｙｔｏｌａｃａ ａｍｅｒｉｃａｎａ）タンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ－Ｓ）、モモルディカ・チャランチア（ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ）阻害剤、クルシン、クロチン、サポナリア・オフィシナリス（ｓａｐａｏｎａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、およびトリコテセンを含むがこれらに限定されない、酵素活性毒素またはその断片にコンジュゲートされた本明細書に記載される抗体を含む。
別の態様では、イムノコンジュゲートは、放射性原子にコンジュゲートされ、放射性コンジュゲートを形成する、本明細書に記載される抗体を含む。放射性コンジュゲートの生成には、様々な放射性同位体が利用可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、およびＬｕの放射性同位体が挙げられる。放射性コンジュゲートが検出のために使用される場合、それは、シンチグラフィ研究のための放射性原子、例えばｔｃ９９ｍもしくはＩ１２３、または核磁気共鳴（ＮＭＲ）イメージング（磁気共鳴イメージング、ｍｒｉとしても公知）のためのスピンラベル、例えば再びヨウ素１２３、ヨウ素１３１、インジウム１１１、フッ素１９、炭素１３、窒素１５、酸素１７、ガドリニウム、マンガンもしくは鉄を含んでもよい。
抗体と細胞傷害性薬剤とのコンジュゲートは、様々な二官能性タンパク質カップリング剤を使用して作製することができる：例えば、Ｎ－スクシンイミジル－３－（２－ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（ジメチルアジピミデートＨＣｌなど）、活性エステル（ジスクシンイミジルスベラートなど）、アルデヒド（グルタルアルデヒドなど）、ビス－アジド化合物（ビス（ｐ－アジドベンゾイル）ヘキサンジアミンなど）、ビス－ジアゾニウム誘導体（ビス－（ｐ－ジアゾニウムベンゾイル）－エチレンジアミンなど）、ジイソシアネート（トルエン２，６－ジイソシアネートなど）、および二活性フッ素化合物（１，５－ジフルオロ－２，４－ジニトロベンゼンなど）。例えば、リシン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３８：１０９８（１９８７）に記載されているように調製することができる。炭素－１４－標識１－イソチオシアナトベンジル－３－メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ－ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドを抗体にコンジュゲートするための例示的なキレート剤である。国際公開第９４／１１０２６号を参照されたい。リンカーは、細胞内において細胞傷害性薬物の放出を容易にする「切断可能リンカー」であってもよい。例えば、酸不安定性リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、感光性リンカー、ジメチルリンカーまたはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５２：１２７～１３１（１９９２）；米国特許第５，２０８，０２０号）が使用されてもよい。
本明細書におけるイムノコンジュゲートまたはＡＤＣは、限定されないが、（例えばＰｉｅｒｃｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ．、Ｕ．Ｓ．Ａから）市販されている、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ－ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ－ＥＭＣＳ、スルホ－ＧＭＢＳ、スルホ－ＫＭＵＳ、スルホ－ＭＢＳ、スルホ－ＳＩＡＢ、スルホ－ＳＭＣＣ、およびスルホ－ＳＭＰＢ、ならびにＳＶＳＢ（スクシンイミジル－（４－ビニルスルホン）ベンゾエート）を含むがこれらに限定されない、架橋試薬を用いて調製されるコンジュゲートを明確に意図している。
Ｅ．多重特異性抗体
ある特定の態様では、本明細書で提供される抗体は、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体である。「多重特異性抗体」とは、少なくとも２つの異なる部位、すなわち異なる抗原上の異なるエピトープまたは同じ抗原上の異なるエピトープに対して結合特異性を有するモノクローナル抗体である。ある特定の態様では、多重特異性抗体は３つ以上の結合特異性を有する。多重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片として調製することができる。
多重特異性抗体を作製するための技法には、限定されないが、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖－軽鎖ペアの組換え共発現（ＭｉｌｓｔｅｉｎおよびＣｕｅｌｌｏ、Ｎａｔｕｒｅ ３０５：５３７（１９８３）を参照）および「ノブ－イン－ホール」操作（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号およびＡｔｗｅｌｌら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７０：２６（１９９７）を参照）が含まれる。多重特異性抗体はまた、抗体Ｆｃヘテロ二量体分子を作製するための静電ステアリング効果の操作（例えば、国際公開第２００９／０８９００４号を参照）；２つ以上の抗体または断片の架橋（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号、およびＢｒｅｎｎａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２２９：８１（１９８５）を参照）；ロイシンジッパーを使用した二重特異性抗体の産生（例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４８（５）：１５４７～１５５３（１９９２）および国際公開第２０１１／０３４６０５号を参照）；軽鎖のミスペアリング問題を回避するための、一般的な軽鎖技術の使用（例えば国際公開第９８／５０４３１号を参照）；二重特異性抗体断片を作製するための「ダイアボディ」技術の使用（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４～６４４８（１９９３）を参照）；および一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体の使用（例えば、Ｇｒｕｂｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１５２：５３６８（１９９４）を参照）；および例えばＴｕｔｔら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）に記載されている三重特異性抗体の調製によって作製することができる。
例えば、「オクトパス（Ｏｃｔｏｐｕｓ）抗体」を含む３つ以上の抗原結合部位を有する操作抗体、またはＤＶＤ－Ｉｇも本明細書に含まれる（例えば、国際公開第２００１／７７３４２号および国際公開第２００８／０２４７１５号を参照されたい）。３つ以上の抗原結合部位を有する多重特異性抗体の他の例は、国際公開第２０１０／１１５５８９号、国際公開第２０１０／１１２１９３号、国際公開第２０１０／１３６１７２号、国際公開第２０１０／１４５７９２号、および国際公開第２０１３／０２６８３１号に見出すことができる。二重特異性抗体またはその抗原結合断片はまた、２つの異なる抗原または同じ抗原の２つの異なるエピトープに結合する抗原結合部位を含む「二重作用性（Ｄｕａｌ Ａｃｔｉｎｇ）ＦＡｂ」または「ＤＡＦ」を含む（例えば、米国特許出願公開第２００８／００６９８２０号および国際公開第２０１５／０９５５３９号を参照されたい）。
多重特異性抗体はまた、同じ抗原特異性の１つ以上の結合アームにドメインクロスオーバーを持つ非対称の形態で、すなわちＶＨ／ＶＬドメイン（例えば、国際公開第２００９／０８０２５２号および国際公開第２０１５／１５０４４７号を参照）、ＣＨ１／ＣＬドメイン（国際公開第２００９／０８０２５３号を参照）または完全なＦａｂアーム（国際公開第２００９／０８０２５１号、国際公開第２０１６／０１６２９９号を参照、Ｓｃｈａｅｆｅｒら、ＰＮＡＳ、１０８（２０１１）１１８７～１１９１、およびＫｌｅｉｎら、ＭＡｂｓ ８（２０１６）１０１０～２０も参照）を交換することによってもたらされ得る。一態様では、多重特異性抗体はクロス－Ｆａｂ断片を含む。「クロスＦａｂ断片」または「ｘＦａｂ断片」または「クロスオーバーＦａｂ断片」という用語は、重鎖および軽鎖の可変領域または定常領域のいずれかが交換されたＦａｂ断片を指す。クロスＦａｂ断片は、軽鎖可変領域（ＶＬ）および重鎖定常領域１（ＣＨ１）で構成されるポリペプチド鎖、ならびに重鎖可変領域（ＶＨ）および軽鎖定常領域（ＣＬ）で構成されるポリペプチド鎖を含む。非対称Ｆａｂアームは、荷電または非荷電アミノ酸変異をドメイン界面に導入して正しいＦａｂペアリングを指向することによって操作することもできる。例えば、国際公開第２０１６／１７２４８５号を参照されたい。
多重特異性抗体の様々なさらなる分子フォーマットが当技術分野で公知であり、本明細書に含まれる（例えば、Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ ６７（２０１５）９５～１０６を参照されたい）。
Ｆ．組換え方法および組成物
抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているように、組換え方法および組成物を使用して産生することができる。これらの方法のために、抗体をコードする１つ以上の単離された核酸が提供される。
２つの核酸が必要とされるネイティブ抗体またはネイティブ抗体断片の場合、１つは軽鎖またはその断片のためのものであり、１つは重鎖またはその断片のためのものである。このような核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列および／またはＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖および／または重鎖（複数可））をコードする。これらの核酸は、同じ発現ベクター上、または異なる発現ベクター上にあってもよい。
４つの核酸が必要とされるヘテロ二量体の重鎖を有する二重特異性抗体の場合、１つは第１の軽鎖のため、１つは第１のヘテロモノマーＦｃ領域ポリペプチドを含む第１の重鎖のため、１つは第２の軽鎖のため、および１つは第２のヘテロモノマーＦｃ領域ポリペプチドを含む第２の重鎖のためのものである。４つの核酸は、１つ以上の核酸分子または発現ベクターに含まれ得る。このような核酸は、第１のＶＬを含むアミノ酸配列および／または第１のヘテロモノマーＦｃ領域を含む第１のＶＨを含むアミノ酸配列および／または第２のＶＬを含むアミノ酸配列および／または抗体の第２のヘテロモノマーＦｃ領域を含む第２のＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の第１および／もしくは第２の軽鎖ならびに／または第１および／もしくは第２の重鎖）をコードする。これらの核酸は、同じ発現ベクターまたは異なる発現ベクター上にあってもよく、通常、これらの核酸は、２つまたは３つの発現ベクター上に位置しており、すなわち、１つのベクターは、これらの核酸のうち、２つ以上を含んでいてもよい。これらの二重特異性抗体の例は、クロス（Ｃｒｏｓｓ）Ｍａｂである（例えば、Ｓｃｈａｅｆｅｒ，Ｗ．ら、ＰＮＡＳ、１０８（２０１１）１１１８７～１１９１を参照されたい）。例えば、ヘテロモノマー重鎖の１つは、いわゆる「ノブ変異」（Ｔ３６６Ｗと、任意に、Ｓ３５４ＣまたはＹ３４９Ｃのうち１つ）を含み、他方は、いわゆる「ホール変異」（Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖと、任意に、Ｙ３４９ＣまたはＳ３５４Ｃ）を含む（例えば、Ｃａｒｔｅｒ，Ｐ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．２（１９９６）７３）（ＥＵインデックス付番に従う）。
抗体の組換え産生に関しては、例えば、上述の抗体をコードする核酸が単離され、さらなるクローニングおよび／または宿主細胞内での発現のために、１つ以上のベクターに挿入される。このような核酸は、容易に単離することができ、従来の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合できるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）配列決定することができるか、または組換え方法によって産生されるか、または化学合成によって得られる
抗体をコードするベクターのクローニングまたは発現に適した宿主細胞には、本明細書に記載の原核細胞または真核細胞が含まれる。例えば、抗体は、特に、グリコシル化およびＦｃエフェクター機能が必要とされていない場合には、細菌中で産生されてもよい。細菌中での抗体断片およびポリペプチドの発現については、例えば、米国特許第５，６４８，２３７号、米国特許第５，７８９，１９９号、および米国特許第５，８４０，５２３号を参照されたい。（また、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）における抗体断片の発現を記載する、Ｃｈａｒｌｔｏｎ，Ｋ．Ａ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、第２４８巻、Ｌｏ，Ｂ．Ｋ．Ｃ．（編）、Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ（２００３）、２４５～２５４頁を参照されたい。）発現後、抗体は、可溶性画分中で細菌細胞ペーストから単離され得、さらに精製され得る。
原核生物に加えて、糸状菌や酵母などの真核生物は、抗体をコードするベクターのクローニングまたは発現宿主として適しており、その中には、グリコシル化経路が「ヒト化」された真菌および酵母株が含まれ、その結果、部分的または完全にヒトのグリコシル化パターンを有する抗体が産生される。Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ，Ｔ．Ｕ．、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２２（２００４）１４０９～１４１４；およびＬｉ，Ｈ．ら、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２４（２００６）２１０～２１５を参照されたい。
また、（グリコシル化）抗体の発現に適した宿主細胞は、多細胞生物（無脊椎動物および脊椎動物）に由来する。無脊椎動物細胞の例としては、植物および昆虫細胞が挙げられる。多くのバキュロウイルス株が同定されており、特に、ツマジロクサヨトウ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）細胞のトランスフェクションのために、昆虫細胞と組み合わせて使用してもよい。
植物細胞培養物も、宿主として利用することができる。例えば、米国特許第５，９５９，１７７号、米国特許第６，０４０，４９８号、米国特許第６，４２０，５４８号、米国特許第７，１２５，９７８号、および米国特許第６，４１７，４２９号（トランスジェニック植物において抗体を産生するためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）技術を記載）を参照されたい。
脊椎動物細胞も、宿主として使用され得る。例えば、懸濁液中で成長するように適合した哺乳動物細胞株が有用な場合がある。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０（ＣＯＳ－７）によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株；ヒト胚腎臓株（例えば、Ｇｒａｈａｍ，Ｆ．Ｌ．ら、Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６（１９７７）５９～７４に記載されているような、２９３または２９３Ｔ細胞）；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスセルトリ細胞（例えば、Ｍａｔｈｅｒ，Ｊ．Ｐ．、Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３（１９８０）２４３～２５２に記載されているようなＴＭ４細胞）；サル腎臓細胞（ＣＶ１）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ）；バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）；マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ ０６０５６２）；ＴＲＩ細胞（例えば、Ｍａｔｈｅｒ，Ｊ．Ｐ．ら、Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３（１９８２）４４～６８に記載）、ＭＲＣ５細胞；およびＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株には、ＤＨＦＲ－ＣＨＯ細胞（Ｕｒｌａｕｂ，Ｇ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７（１９８０）４２１６～４２２０）を含む、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞；ならびに骨髄腫細胞株、例えば、Ｙ０、ＮＳ０およびＳｐ２／０が含まれる。抗体産生に適したある特定の哺乳動物宿主細胞株の総説については、例えば、Ｙａｚａｋｉ，Ｐ．およびＷｕ，Ａ．Ｍ．、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、第２４８巻、Ｌｏ，Ｂ．Ｋ．Ｃ．（編）、Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ（２００４）、２５５～２６８頁を参照されたい。
ここで、本発明を、以下の非限定的な実施例によってさらに説明する。
材料および方法
ＦＦＡ溶液（ストック溶液）
ストック水溶液を、Ｄｏｓｈｉら６によって以前に記載されたように、（１）５ｍｇ／ｍＬおよび（２）１２．５ｍｇ／ｍＬ（ラウリン酸、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ／Ｍｅｒｃｋ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、ＤＥ）、または（１）１．５ｍｇ／ｍＬおよび（２）５ｍｇ／ｍＬ（ミリスチン酸、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ／Ｍｅｒｃｋ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、ＤＥ）の規定濃度で０．０２％ ＰＳ２０（Ｃｒｏｄａ、Ｅｄｉｓｏｎ、ＮＪ、ＵＳＡ）中で調製した。手順は、ＦＦＡ／ＰＳ２０ストック溶液を１：１０希釈前に、０．２２μｍ ＰＶＤＦ Ｓｔｅｒｉｆｌｉｐフィルタ（Ｍｅｒｃｋ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、ＤＥ）を使用して滅菌フィルタにかけ、続いてＨｅｉｄｏｌｐｈ Ｒｏｔａｍａｘ １２０オービタルシェーカー（Ｓｃｈｗａｂａｃｈ、ＤＥ）を使用して１００ｒｐｍ、２５℃で１時間、マグネチックスターラーなしでホモジナイズするように適合させた。１：５００希釈後、溶液を２５℃で１時間ホモジナイズした後、２～８℃で一晩ホモジナイズした。１２～４０μＬのストック溶液をスパイク実験に使用して、（１）１０μｇ／ｍＬおよび（２）２５μｇ／ｍＬ（ラウリン酸）、または（１）３μｇ／ｍＬおよび（２）１０μｇ／ｍＬ（ミリスチン酸）の最終ＦＦＡ濃度を得た。ストック溶液１での希釈により、溶解限界未満のＦＦＡ濃度が得られるが、ストック溶液２は、可視粒子の形成によって確認される陽性対照として作用する。ＬＣ－ＭＳ試料ａｃｃ．によって選択したＦＦＡ濃度を検証した。Ｈｏｎｅｍａｎｎら７
無機塩溶液
異なる塩のストック水溶液を１ｍｇ／ｍＬで調製し、最終濃度が２５０ｍｇ／ｍＬ～１ｇ／ｍＬの間になるようにスパイク実験に使用した。ＮａＣｌ、ＮａＡｌＯ２、ＮａＢＯ２、Ｂ２Ｏ３、およびＣａＣｌ２（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ／Ｍｅｒｃｋ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、ＤＥ）を、それらの溶解産物（イオン）がタイプＩホウケイ酸ガラスからの典型的なガラス浸出物を表すように選択した。ＮａＡｌＯ２およびＮａＢＯ２ストック溶液のｐＨをＨＣｌを使用してｐＨ６に調整し、続いて０．２２μｍ ＰＶＤＦ Ｓｔｅｒｉｖｅｘフィルタ（Ｍｅｒｃｋ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、ＤＥ）を使用してフィルタにかけ、誘導結合プラズマ質量分析（ＩＣＰ－ＭＳ）によって真の元素濃度を決定した。元素濃度は、それぞれ０．０４８μｇ／ｍＬのアルミニウムおよび２９５μｇ／ｍＬのナトリウムおよび７８μｇ／ｍＬのホウ素および１６８μｇ／ｍＬであった。ＦＦＡを用いたスパイク実験を二連で行った。
ガラス浸出物の溶液
加速エージング条件に相当する３回のオートクレーブ処理サイクル（１２１℃、２０分）によって、３つの異なるタイプのガラスバイアル、例えば６ｍＬフォーマットのＥｘｐ３３およびＥｘｐ５１（Ｓｃｈｏｔｔ ＡＧ、Ｍｕｌｌｈｅｉｍ、ＤＥおよびＳｃｈｏｔｔ Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａ Ｉｎｃ．、ＮＹ、ＵＳＡ）からガラス浸出物の代表的な混合物を得た。バイアルを、６ｍＬの注射用水（ＷＦＩ）、２０ｍＭグリシン溶液ｐＨ１０、または２０ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ緩衝液ｐＨ６．０、１０ｍＭメチオニン、２４０ｍＭスクロース（Ｆｅｒｒｏ Ｐｆａｎｓｔｉｅｈｌ、Ｗａｕｋｅｇａｎ、ＩＬ、ＵＳＡ）、および０．０２％ ＰＳ２０からなるタンパク質製剤に使用される典型的なプラセボ溶液のいずれかで充填した。グリシン溶液のｐＨを、オートクレーブ処理後にＨＣｌでｐＨ６．０に調整し、０．２２μｍ ＰＶＤＦ Ｓｔｅｒｉｖｅｘフィルタ（Ｍｅｒｃｋ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、ＤＥ）に通してフィルタにかけた。浸出物の濃度を、Ｄｉｔｔｅｒら８によって記載されているようにＩＣＰ－ＭＳで検証した（表１）。ＦＦＡを用いたスパイク実験を三連で行った。
表１：スパイク溶液中の選択されたガラス浸出物の濃度
Figure 2023501394000003
 ｍＡＢ製剤
ｍＡｂ１（ＩｇＧ１、Ｍｗ＝１４５．５ｋＤａ、ペルツズマブ）およびｍＡｂ２（ＩｇＧ１、Ｍｗ＝１４８ｋＤａ、トラスツズマブ）をＦ．Ｈｏｆｆｍａｎｎ－Ｌａ Ｒｏｃｈｅから入手し、２０ｍＭ ＨｉｓＨＣｌ緩衝液ｐＨ５．５中の１０００Ｕ／ｍＬヒアルロニダーゼ、１０５ｍＭトレハロース、１００ｍＭスクロース、１０ｍＭメチオニン、および０．０４％ポリソルベート２０と一緒に製剤化した。対応するプラセボは、タンパク質を含まない同じ製剤であった。製剤を５℃および２５℃で２４ヶ月間保存した。プラセボを伴うそれぞれの対照を含むスパイク実験を、無機塩溶液（１０＋１希釈のＣａＣｌ２およびＮａＡｌＯ２）または１０＋１希釈もしくは１００＋１希釈のストック溶液からのガラス浸出物のいずれかを使用して三連で行った。
分析特性評価
試料を、Ｄｉｔｔｅｒら９によって以前に記載されたように、Ｓｅｉｄｅｎａｄｅｒ Ｖ ９０－Ｔ機器（Ｓｅｉｄｅｎａｄｅｒ Ｍａｓｃｈｉｎｅｎｂａｕ ＧｍｂＨ、Ｍａｒｋｔ Ｓｃｈｗａｂｅｎ、ＤＥ）で、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．９．２０．１０による黒色／白色パネルを使用して目視検査により分析し、Ｅ／Ｐボックスに多くの粒子（＞７）、粒子がほとんどない（４～７）、または粒子を実質的に含まない（０～４）として分類し、Ｓｅｉｄｅｎａｄｅｒにより、多くの粒子（＞１０）、粒子がほとんどない（６～１０）、粒子を本質的に含まない（１～５）、または粒子を含まない（０）として分類した。
サブ可視粒子（ＳＶＰ）を、Ｄｉｔｔｅｒら９によって以前に記載されたように、ＨＲＬＤ－１５０センサ（Ｓｋａｎ ＡＧ、Ａｌｌｓｃｈｗｉｌｌ、ＣＨ）を備えたＨＩＡＣ／ＲＯＹＣＯ ９７０３液体シリンジサンプラ３０００Ａを使用して、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．９．１９．１１に従って光遮蔽によって決定した。
濁度は、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．２．１１２に概説されているように、比モードでＨａｃｈ ２１００ＡＮ濁度計（Ｈａｃｈ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｌｏｖｅｌａｎｄ、Ｃｏ）を使用して決定した。
２０μｍを超える粒子を、Ｎｉｃｏｌｅｔ（商標）ｉＮＴＭ１０赤外線顕微鏡（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用したフーリエ変換赤外分光法（ＦＴＴＩＲ）によって、参照スペクトルとの比較によってさらに同定した。試料を、金コーティングポリカーボネートフィルタ（孔径０．８μｍ、直径１３ｍｍ、Ｓｔｅｒｌｉｔｅｃｈ）を通る層流下でフィルタにかけた。フィルタコンディショニングには、少量のエタノール液滴とそれに続く１ｍＬの粒子を含まない水が含まれた。試料のフィルタ後、分析前の最終洗浄工程として約１ｍＬの粒子を含まない冷却水を使用した。
選択した粒子の化学組成を、ＬＯＴ Ｑｕａｎｔｕｍ Ｄｅｓｉｇｎ ＧｍｂＨ製のＰｈｅｎｏｍ ＸＬ装置を使用して、エネルギー分散型Ｘ線分光法を伴う走査型電子顕微鏡法（ＳＥＭ－ＥＤＸ）によって検証した。
すべての溶液のｐＨを検証した。スパイクの直後に、最大７日間にわたって定期的に試料を目視検査した。ＨＩＡＣ、濁度、ＦＴＩＲ、およびＳＥＭ－ＥＤＸによるさらなる特性評価を、１日目にのみ行った。すべての試料は、室温に（４時間）平衡化して分析した。
ｍＡｂ試料のポリソルベート含有量は、蒸発光散乱検出を使用する混合モードＨＰＬＣによって決定した。
実施例１人工ガラス浸出物（塩）はＦＦＡ粒子形成をもたらす
人工ガラス浸出物をシミュレートして、異なる無機塩溶液、すなわちＣａＣｌ２、ＮａＡｌＯ２、ＮａＢＯ２、Ｂ２Ｏ３、およびＮａＣｌを調製した。加水分解的ＰＳ２０分解からの主な分解産物としてのミリスチン酸およびラウリン酸をそれらの溶解限界未満の濃度で添加し、可視粒子、ＳＶＰ、および濁度について試料を分析した。試料を関連する対照と比較し、ｐＨをｐＨ６で確認した。
ＮａＡｌＯ２を含むミリスチン酸およびラウリン酸の両方について、塩濃度に依存して、スパイク後に可視粒子の即時形成が観察された。試験したすべての塩濃度について、ＣａＣｌ２を含むミリスチン酸でスパイクした直後に、特に、即時の粒子形成が特に見られた。粒子形成の増加は、一般に、両方の脂肪酸溶液に対するインキュベーション時間の増加、ならびにＮａＡｌＯ２およびＣａＣｌ２濃度それぞれの増加と相関した。検査の時点に応じて、表１に要約されているように、粒子は、特にカルシウムの存在下でミリスチン酸についてＥ／Ｐボックスでも見ることができた。続いて、粒子をＦＴＩＲによってＦＦＡ粒子として同定した（データは示さず）。ＮａＢＯ２およびＢ２Ｏ３溶液に対しては、経時的に塩濃度に依存してミリスチン酸およびラウリン酸の両方について、しかしＣａＣｌ２およびＮａＡｌＯ２と比較してはるかに少ない程度で、Ｓｅｉｄｅｎａｄｅｒで可視粒子が得られた。１ｍｇ／ｍＬの塩濃度まで塩化ナトリウムを添加した場合、粒子形成は観察されなかった。
スパイク実験は、非経口製品の一次包装として典型的に使用されるホウケイ酸ガラスからの関連するガラス浸出物をシミュレートして、塩の存在下での可視範囲でのＦＦＡ粒子形成の実現可能性を実証する。粒子形成は、Ｃａ２＋またはＡｌ３＋などのイオン／塩の種類および濃度、ならびにインキュベーション時間に大きく依存することが見出された。適切な対照に加えて、試料の検査および平衡化の時点／溶液の温度がこれらの実験にとって重要である。ＦＦＡ溶解度は温度に大きく依存し、より低い温度、例えば１時間対４時間の室温への平衡時間でより多くの粒子が検出される。ＦＦＡの溶解限界はまた、ｐＨに大きく依存する。したがって、実験をｐＨ６で行った。しかしながら、ＮａＡｌＯ２およびＮａＢＯ２は、最初、溶液中で水酸化物を形成する（約ｐＨ１０）。したがって、スパイク溶液のｐＨを調整し、続いて残りのイオン濃度（濾過後）をＩＣＰ－ＭＳによってチェックする必要がある。スパイク溶液中に存在する正確なイオン濃度は、方法の項に概説されている。特にアルミニウムについては、図４に要約されているように、関連するプラセボ製剤についてのＥｘｐａｎｓｉｏｎ５１バイアルから得られたリアルタイムデータに匹敵する関連する浸出物の濃度で濃度を使用した。
表２：溶解限界未満の（Ａ）ミリスチン酸および（Ｂ）ラウリン酸を、異なる塩濃度で異なる無機塩溶液（ＣａＣｌ２およびＮａＡｌＯ３）にスパイクした後の可視粒子。二連でのデータを提示し、これを陰性対照（塩なし）および陽性対照（溶解限界を超えるＦＦＡ）に対して検証した。粒子を、Ｅ／Ｐボックスに多くの粒子（＞７、ｘｘｘ）、粒子がほとんどない（４～７、ｘｘ）、または粒子を実質的に含まない（０～４、／）と、Ｓｅｉｄｅｎａｄｅｒにより、多くの粒子（＞１０、ｘｘｘ）、粒子がほとんどない（６～１０、ｘｘ）、粒子を本質的に含まない（１～５、ｘ）、または粒子を含まない（０、／）として分類した。ｄ＝検査の日。ｄ０＝スパイク直後。＊ｐＨ調整および濾過前の名目上塩濃度。
Figure 2023501394000004
 実施例２：「実際の」ガラス浸出物（混合物）はＦＦＡ粒子形成をもたらす
ガラス浸出物は、異なるタイプのガラスバイアル、例えばＥｘｐ３３およびＥｘｐ５１バイアルから、ＷＦＩ、ｐＨ６に調整されたグリシン溶液、およびｍＡｂ製剤を代表するプラセボ溶液を含む異なるマトリックス溶液を用いて生成された。ガラス浸出物の濃度を表１に示す。溶解限界未満の規定量のミリスチン酸およびラウリン酸をガラス浸出物の溶液／混合物に添加し、分析した。Ｓｅｉｄｅｎａｄｅｒの可視粒子を表３に要約し、様々な対照とは対照的にすべての試料について検出された。粒子形成は、ガラス浸出物溶液に依存し、インキュベーション時間に依存した。検査の時点（ｄ１）でのＳＶＰおよび濁度について明確な傾向は判定されなかったが、可視粒子がまだ形成されていない場合、データはＳＶＰの増加を示唆している。粒子形成のインキュベーション時間に対する依存性の例を、Ｅｘｐ５１バイアル／グリシン溶液からのガラス浸出物溶液中のミリスチン酸について表３に提供する。実施例は、スパイク直後に粒子がなく、インキュベーションの５および７日目で１０粒子を超えるという、粒子形成のキネティクスを強調している。選択された試料について、粒子を、ＦＴＩＲによってさらに特性評価および同定し、遊離脂肪酸の存在を確認した。ＦＦＡは、ＷＦＩにより生成されるガラス浸出物溶液についてはＦＴＩＲによって確認されず、これは、ｄ１でのＦＴＩＲ分析の時点およびこれらの試料についての粒子形成の遅れた開始に繋がる。陽性対照は、ＦＦＡシードを潜在的に可溶化する追加の０．０２％ ＰＳ２０の存在に起因して陰性であることが判明したので、プラセボ試料をＦＴＩＲによってさらには分析しなかった。ＳＥＭ－ＥＤＸによる粒子の特性評価により、ＦＦＡ粒子の表面上にアルミニウムまたはケイ素のようなガラス浸出物の存在が確認された。図１は、ＦＴＩＲ分析後の金フィルタの典型的な写真を示し、異なるサイズの少数のＦＦＡ粒子および代表的なＦＦＡスペクトルを強調している。スパイク研究は、「実際の」ガラス浸出物の混合物が、ガラス浸出物の混合物および量ならびにインキュベーション時間に依存して、ＦＦＡの沈殿および可視範囲での粒子形成をもたらすことを強調している。
表３：可視粒子（Ｓｅｉｄｅｎａｄｅｒ）およびＦＴＩＲおよびＳＥＭ－ＥＤＸにより選択された試料の粒子同定（ｄ１）。溶解限界未満のラウリン酸およびミリスチン酸を、異なるガラスバイアルにおける３回のオートクレーブ処理サイクルによって生成される異なるガラス浸出物含有溶液にスパイクした後、可視粒子が報告されている。三連からの結果は、７日間までのインキュベーション時間にわたって、より少ない粒子から最も多い粒子までの互いに対する相対的な順位付け（＋、＋＋、＋＋＋）で報告されている。インキュベーション時間に対する粒子形成の依存性は、Ｅｘｐ５１／グリシンマトリックスのミリスチン酸について例示的に示されている。ｎ．ｔ．＝試験せず
Figure 2023501394000005
Figure 2023501394000006
 実施例３：エージングマトリックス中のガラス浸出物の存在下でのＦＦＡ粒子形成の検証（事例研究）
タンパク質マトリックス中のＦＦＡ粒子の沈殿を、異なる濃度の「実際の」ガラス浸出物の添加によって、エージングしたｍＡｂ１およびｍＡｂ２溶液（２２Ｍ、５℃）においてさらに研究した。この実験では、ＦＦＡの存在は、薬物製品の貯蔵寿命にわたって形成するＰＳ２０分解の結果であった。Ｍａｂ１およびｍＡｂ２を同じマトリックスに製剤化したが、ｍＡｂ（ＣＤＲ）の種類が異なる。異なる原薬プロセスおよび精製プロセスに由来して、ＰＳ２０分解速度は異なり（図５）、ならびにその後の結果としてＦＦＡの種類および濃度が異なること（図６）が見出された。興味深いことに、ｍＡｂ２は、２５℃で１２Ｍの保存後、ＦＦＡおよびアルミニウムとして特徴付けられる可視粒子を示したが、ｍＡｂ１は示さなかった。２５℃で１２Ｍの保存＋５℃で１０Ｍの保存後、両方の製剤は、ＦＦＡと異なるガラス浸出物との複合体として同定される可視粒子を示した。
製品は、実験（５℃で２２Ｍの保存）前に可視粒子を含まないと特徴付けられた。両方の製剤について、既に５０または５００μＬのガラス浸出物の異なる混合物とのインキュベーション後に、Ｓｅｉｄｅａｎｄｅｒ検査機器での可視粒子の形成が観察された（表４）。結果を、初期時点のような様々な対照と比較し、可視粒子を含まないままであったスパイクされたプラセボ溶液と比較した。選択された粒子は、高分解能ＳＥＭ－ＥＤＸによって無機イオンの混合物と組み合わせたＦＦＡ粒子（ＦＴＩＲ）としてさらに同定された。図２は、ＦＦＡ粒子の代表的なＳＥＭ写真を示し、アルミニウムおよびマグネシウムの存在を強調している。様々なガラス浸出物の存在を示す化学組成を要約する。これは、核生成因子として作用するスパイクされたガラス浸出物の存在下でのＦＦＡの沈殿を示唆している。これらの知見に基づいて、理論に束縛されるものではないが、粒子形成の潜在的な機構を図３に示す。ＦＦＡは、生物製剤に関連するｐＨ値でそれらのプロトン化および脱プロトン化形態の平衡状態で存在する。アルミニウムの例を挙げると、三重荷電アルミニウムイオンは、脱プロトン化ＦＦＡと反応し、核生成シードとして作用する高度に不溶性のアルミニウム－脂肪酸－トリカルボキシレートを形成し得る。ＦＦＡの疎水性鎖は、疎水性相互作用によってさらに相互作用し、シード成長を促進し得る。図３に示すように、アルミニウムの存在下でのミリスチン酸について提案された機構が示されている。最後に、疎水性の増加に起因して粒子が沈殿し得る。
表４：可視粒子（Ｓｅｉｄｅｎａｄｅｒ）。異なる混合物および量のガラス浸出物をスパイクした後に、プラセボと比較した、エージングしたｍＡｂ１およびｍＡｂ２製剤（２２Ｍ、５℃）。ｄ＝検査の日
Figure 2023501394000007
 実施例４：ポリソルベート分解の結果としての粒子の核生成に対する洗浄および滅菌手順の影響
ガラスバイアルの調製
２０ｃｃコンフィグレーションのＥｘｐａｎｓｉｏｎ５１ガラスバイアル（Ｆｉｏｌａｘ（登録商標））をＳｃｈｏｔｔ Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａ Ｉｎｃ．（ＮＹ、ＵＳＡ）から購入した。バイアルは、欧州薬局方（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）によるタイプＩガラスに適合する。以下に記載されるような洗浄および発熱物質除去の後、バイアルに、（１．）さらなる賦形剤を含まない（陰性対照、ＮＣ）、（２．）０．４ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０（ＰＳ２０）、または（３．）最終的なＡｌ３＋濃度が約２５０ｐｐｂ（陽性対照、ＰＣ）になるようにＡｌＣｌ３をさらにスパイクした０．４ｍｇ／ｍＬ ＰＳ２０を含有する、１２．２ｍＬのプラセボ緩衝液（２０ｍＭ Ｈｉｓ／Ｈｉｓ－ＨＣｌ、２４０ｍＭスクロース、１０ｍＭメチオニン、ｐＨ５．５）を充填した。事前に、０．４ｍｇ／ｍＬ ＰＳ２０を、前述１３のようにＣ．Ａｎｔａｒｃｔｉｃａ結合ビーズで約１０％分解した。バイアルを５℃、２５℃／６０％ ＲＨおよび４０℃／７０％ ＲＨで直立状態で保存した。
洗浄および発熱物質除去
ＦＡＷ １０２０バイアル洗浄機（Ｂａｕｓｃｈ＆Ｓｔｒｏｅｂｅｌ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、バイアルを７０℃（水と空気圧１バール、最終空気圧２．５バール）で注射用水（ＷＦＩ）で洗浄した。続いて、バイアルをステンレス鋼箱に入れ、層流下で９６時間乾燥させた。
バイアルを、表５に明記されるようなベストまたはワーストケースの滅菌条件のいずれかに従ってさらに処理した。すべてのバイアルの発熱物質除去をＤＨＴ２５５０滅菌トンネル（Ｂａｕｓｃｈ＆Ｓｔｒｏｅｂｅｌ、Ｇｅｒｍａｎｙ）で行った。プロセス条件は、残留水分の存在、加熱ゾーン温度、滅菌温度、トンネル内の滞留時間、およびコンベヤベルト速度が異なる。ワーストケースの条件に従って処理されるバイアルに、残留水分の存在をシミュレートするために、発熱物質除去の前に２８１μＬのＷＦＩを充填した。さらに、バイアルがトンネル内での延長された滞留時間のために、滅菌ゾーンに入った後、コンベヤベルトを停止させた。加熱、滅菌、および冷却ゾーンの時間は、ベストケースの条件（合計１３４．５分）ではそれぞれ４１分、４３．５分、および５０分であると計算され、ワーストケースの条件（合計９６６．５分）でのそれぞれ３分、１６時間、および３．５分と比較された。
表５．発熱物質除去プロセスパラメータ
Figure 2023501394000008
 ＊デフォルトとして８０μＬの残留水分を有する２ｃｃバイアルの表面積に対して正規化された体積。正規化体積＝表面積×Ｆ；Ｆ＝８０μＬ／２ｃｃバイアルの表面積
目視検査
粒子を、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．９．２０による黒色／白色パネルおよびＳｅｉｄｅｎａｄｅｒ Ｖ ９０－Ｔ機器（Ｓｅｉｄｅｎａｄｅｒ Ｍａｓｃｈｉｎｅｎｂａｕ ＧｍｂＨ、Ｍａｒｋｔ Ｓｃｈｗａｂｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）の両方を使用して目視検査によって同定した。後者は、本研究では強化された目視検査と称される。強化された目視検査のために、試料を後方ならびに底部および上部から照明した。容器を回転させ、２倍の拡大鏡を通して検査した。両方の機器について、容器を３時間室温に平衡させた後、試料を検査した。５バイアルの平均としての粒子数を報告する。
結果：
強化された目視検査によって分析した場合、２５℃および４０℃で保存後の２ヶ月目から、ワーストケースの滅菌試料について粒子形成が観察された（表６Ａ）。ベストケースの試料については、粒子形成は３ヶ月後に４０℃で始まるが、その程度はより小さい。粒子形成が確率的事象であることを考えると、Ｅ／Ｐボックス（表６Ｂ）による分析からの傾向は、より敏感な強化された目視検査からの結果に従っている。４０℃のワーストケースの滅菌バイアルについては、粒子形成が３ヶ月後に始まった。一般に、試験した目視検査方法および試料のいずれについても、５℃で３ヶ月までの保存では粒子形成は観察されなかった。すべての温度および分析時点に対して、目視検査方法の両方の使用により、陰性対照は粒子の非存在が確認され、陽性対照は粒子の存在が確認された。
したがって、洗浄および滅菌手順は、ポリソルベート分解の結果としての粒子の核生成に大きな影響を及ぼすと結論付けることができる。
表６：目視検査結果の要約
Figure 2023501394000009
 参考文献
（１）Ｋｉｓｈｏｒｅ ＲＳ．Ｐａｒｔ ＩＩ：Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ｗｉｔｈ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ－Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｑｕａｌｉｔｙ，ｉｎ Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｒｏｄｕｃｔ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＡＡＰＳ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｓｅｒｉｅｓ ３８．Ｗａｒｎｅ ＮおよびＭａｈｌｅｒ ＨＣ編 Ｓｐｒｉｎｇｅｒ ２０１８、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ．２５～６２頁。
（２）Ｋｈａｎ ＴＡ，Ｍａｈｌｅｒ ＨＣ，Ｋｉｓｈｏｒｅ ＲＳ．Ｋｅｙ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ：Ａ ｒｅｖｉｅｗ．Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｐｈａｒｍ、２０１５．９７：６０～７。
（３）米国食品医薬品局（ＵＳ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）：Ｈｉｇｈｌｉｇｈｔｓ ｏｆ ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｆｏｒ（…）ＶＡＲＵＢＩ（登録商標）（ｒｏｌａｐｉｔａｎｔ）ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ ｅｍｕｌｓｉｏｎ，ｆｏｒ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ｕｓｅ．ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｃｃｅｓｓｄａｔａ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｒｕｇｓａｔｆｄａ＿ｄｏｃｓ／ｌａｂｅｌ／２０１７／２０８３９９ｓ０００ｌｂｌ．ｐｄｆ（２９．０４．２０１９）
（４）Ｋｅｒｗｉｎ ＢＡ．Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅｓ ２０ ａｎｄ ８０ Ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ Ｐａｔｈｗａｙｓ．Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ、２００８．９７（８）、２９２４～２９３５。
（５）Ｄｉｔｔｅｒ Ｄ，Ｍａｈｌｅｒ ＨＣ，Ｒｏｅｈｌ Ｈ，Ｗａｈｌ Ｍ，Ｈｕｗｙｌｅｒ Ｊ，Ｎｉｅｔｏ Ａ，Ａｌｌｍｅｎｄｉｎｇｅｒ Ａ．Ｃｈａｒａｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｒｆａｃｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｇｌａｓｓ ｖｉａｌｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｐｒｉｍａｒｙ ｐａｃｋａｇｉｎｇ ｍａｔｅｒｉａｌ ｆｏｒ ｐａｒｅｎｔｅｒａｌｓ．Ｅｕ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｐｈａｒｍ、２０１８．１２５：５８～６７。
（６）Ｄｏｓｈｉ Ｎ，Ｄｅｍｅｕｌｅ Ｂ，Ｙａｄａｖ Ｓ．Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ Ｐａｒｔｉｃｌｅ Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ：Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｆｒｅｅ Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄ ａｓ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ２０ Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ Ｂｙｐｒｏｄｕｃｔｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍ、２０１５．１２（１１）：３７９２～８０４。
（７）Ｈｏｎｅｍａｎｎ Ｍ，Ｗｅｎｄｌｅｒ Ｊ，Ｇｒａｆ Ｔ，Ｂａｔｈｋｅ Ａ，Ｂｅｌｌ ＣＨ．Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｉｎ ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｕｓｉｎｇ ａ ＱＣ－ｒｅａｄｙ ｆｒｅｅ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ Ａｎａｌｙｔ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｍｅｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．２０１９ Ｍａｒ ２６；１１１６：１～８。
（８）Ｄｉｔｔｅｒ Ｄ，Ｎｉｅｔｏ Ａ，Ｍａｈｌｅｒ ＨＣ，Ｒｏｅｈｌ Ｈ，Ｗａｈｌ Ｍ，Ｈｕｗｙｌｅｒ Ｊ，Ａｌｌｍｅｎｄｉｎｇｅｒ Ａ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｌａｓｓ Ｄｅｌａｍｉｎａｔｉｏｎ Ｒｉｓｋ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ １０ｍＬ／１０Ｒ Ｖｉａｌｓ．Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ、２０１８．１０７（２）：６２４～６３７。
（９）Ｄｉｔｔｅｒ Ｄ，Ｍａｈｌｅｒ ＨＣ，Ｇｏｈｌｋｅ Ｌ，Ｎｉｅｔｏ Ａ，Ｒｏｅｈｌ Ａ，Ｈｕｗｙｌｅｒ Ｊ，Ｗａｈｌ Ｍ，Ａｌｌｍｅｎｄｉｎｇｅｒ Ａ．Ｉｍｐａｃｔ ｏｆ Ｖｉａｌ Ｗａｓｈｉｎｇ ａｎｄ Ｄｅｐｙｒｏｇｅｎａｔｉｏｎ ｏｎ Ｓｕｒｆａｃｅ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｎｄ Ｄｅｌａｍｉｎａｔｉｏｎ Ｒｉｓｋ ｏｆ Ｇｌａｓｓ Ｖｉａｌｓ．Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ、２０１８．３５（７）：１４６。
（１０）欧州薬局方（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ）９．４，２０１９．Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ：Ｖｉｓｉｂｌｅ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ［２．９．２０］
（１１）欧州薬局方（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ）９．４，２０１９．Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ：Ｓｕｂｖｉｓｉｂｌｅ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ［２．９．１９］
（１２）欧州薬局方（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ）９．４，２０１９．Ｃｌａｒｉｔｙ ａｎｄ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｏｐａｌｅｓｃｅｎｃｅ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄｓ［２．２．１］
（１３）Ｇｒａｆら、Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ２０ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ－Ａ ｎｅｗ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ａｓｓｅｓｓ ｔｈｅ ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ２０ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｎ ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｐｒｏｄｕｃｔ ｑｕａｌｉｔｙ ｉｎ ｓｈｏｒｔｅｎｅｄ ｔｉｍｅ．Ｅｕ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｐｈａｒｍ．２０２０（１５２）３１８～３２６頁。

Claims (15)

  1. タンパク質と、薬学的に許容され得る賦形剤、例えば緩衝液、酸化防止剤を含む安定剤、および界面活性剤とを一緒に含む安定な水性組成物であって、前記組成物は、ガラスバイアルなどの包装材料から拡散した１つまたはいくつかの種類の無機イオンと前記界面活性剤の分解から生じる物質との混合物を、可視粒子を形成することなく、さらに含む、安定な水性組成物。
  2. 前記無機イオンが、アルミニウム、ホウ素、ケイ素、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウムから選択される、請求項２に記載の組成物。
  3. 前記組成物のｐＨが、５～７の範囲、好ましくはおよそ６である、請求項１または２に記載の組成物。
  4. 前記タンパク質が抗体、好ましくはモノクローナル抗体である、請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
  5. ０．０３μｇ／ｍｌまでのアルミニウム、および／または０．０５μｇ／ｍｌまでのホウ素、および／または０．５μｇ／ｍｌまでのケイ素の濃度を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
  6. 前記安定剤が、糖、糖アルコール、糖誘導体、またはアミノ酸からなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
  7. 前記緩衝液が、酢酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、アルギニン、ヒスチジン、リン酸塩、トリス、グリシン、アスパラギン酸塩、およびグルタミン酸塩緩衝系からなる群から選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載の組成物。
  8. 前記界面活性剤が、非イオン性界面活性剤、好ましくはポリソルベートからなる群から選択される、請求項１から７のいずれか一項に記載の組成物。
  9. 前記界面活性剤の分解から生じる物質が、室温での水への溶解度レベル未満の遊離脂肪酸である、請求項１から８のいずれか一項に記載の組成物。
  10. 前記薬学的に許容され得る賦形剤が、２０ｍＭ ＨｉｓＨＣｌ緩衝液ｐＨ５．５中の１０００Ｕ／ｍＬヒアルロニダーゼ、１０５ｍＭトレハロース、１００ｍＭスクロース、１０ｍＭメチオニン、および０．０４％ポリソルベート２０である、請求項１から９のいずれか一項に記載の組成物。
  11. 請求項１から１０のいずれか一項に記載の組成物を得るための方法であって、請求項１に記載の１つまたはいくつかの前記無機イオンが前記組成物へ浸出することを防止する一次包装材料を選択することを含む、方法。
  12. 前記一次包装材料がガラスまたはポリマーバイアルである、請求項１１に記載の方法。
  13. 使用前の前記一次包装材料のａ）洗浄および／またはｂ）発熱物質除去の工程をさらに含む、請求項１１または１２に記載の方法。
  14. 可視粒子の形成に対する前記組成物の安定性をもたらす、請求項１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
  15. 容器中に請求項１から１０のいずれか一項に記載の組成物を含む医薬剤形であって、前記組成物中のアルミニウム、ホウ素、ケイ素、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウムから選択される１つまたはいくつかの無機イオンの濃度が、その認可された貯蔵寿命の期間中に実質的に一定のままである、医薬剤形。
JP2022526146A 2019-11-15 2020-11-13 タンパク質水溶液中での可視粒子形成の防止 Pending JP2023501394A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP19209359.9 2019-11-15
EP19209359 2019-11-15
PCT/EP2020/081999 WO2021094508A1 (en) 2019-11-15 2020-11-13 Prevention of visible particle formation in aqueous protein solutions

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2023501394A true JP2023501394A (ja) 2023-01-18

Family

ID=68583138

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2022526146A Pending JP2023501394A (ja) 2019-11-15 2020-11-13 タンパク質水溶液中での可視粒子形成の防止

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20220395458A1 (ja)
EP (1) EP4057980A1 (ja)
JP (1) JP2023501394A (ja)
KR (1) KR20220101079A (ja)
CN (1) CN114641270A (ja)
AU (1) AU2020384917A1 (ja)
BR (1) BR112022008172A2 (ja)
CA (1) CA3152314A1 (ja)
IL (1) IL292899A (ja)
MX (1) MX2022005317A (ja)
WO (1) WO2021094508A1 (ja)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4153130A1 (en) * 2020-05-19 2023-03-29 F. Hoffmann-La Roche AG The use of chelators for the prevention of visible particle formation in parenteral protein solutions

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
CA2103059C (en) 1991-06-14 2005-03-22 Paul J. Carter Method for making humanized antibodies
CA2116774C (en) 1991-09-19 2003-11-11 Paul J. Carter Expression in e. coli antibody fragments having at least a cysteine present as a free thiol. use for the production of bifunctional f(ab') 2 antibodies
NZ258392A (en) 1992-11-13 1997-09-22 Idec Pharma Corp Chimeric and radiolabelled antibodies to the b lymphocyte cellsurface antigen bp35 (cd-20) and their use in the treatment of b cell lymphona
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
DE69830901T2 (de) 1997-05-02 2006-05-24 Genentech Inc., San Francisco ein verfahren zur herstellung multispezifischer antikörper die heteromultimere und gemeinsame komponenten besitzen
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
DK1034298T3 (da) 1997-12-05 2012-01-30 Scripps Research Inst Humanisering af murint antistof
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
DE60022369T2 (de) 1999-10-04 2006-05-18 Medicago Inc., Sainte Foy Verfahren zur regulation der transkription von fremden genen in gegenwart von stickstoff
AU2001247616B2 (en) 2000-04-11 2007-06-14 Genentech, Inc. Multivalent antibodies and uses therefor
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
US7041870B2 (en) 2000-11-30 2006-05-09 Medarex, Inc. Transgenic transchromosomal rodents for making human antibodies
AU2005230848B9 (en) 2004-03-31 2011-06-02 Genentech, Inc. Humanized anti-TGF-beta antibodies
US20080044455A1 (en) 2006-08-21 2008-02-21 Chaim Welczer Tonsillitus Treatment
US10118970B2 (en) 2006-08-30 2018-11-06 Genentech, Inc. Multispecific antibodies
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US8242247B2 (en) 2007-12-21 2012-08-14 Hoffmann-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
DK2235064T3 (en) 2008-01-07 2016-01-11 Amgen Inc A process for the preparation of heterodimeric Fc molecules using electrostatic control effects
MX2011010159A (es) 2009-04-02 2011-10-17 Roche Glycart Ag Anticuerpos multiespecificos que comprenden anticuerpos de longitud completa y fragmentos fab de cadena sencilla.
JP5616428B2 (ja) 2009-04-07 2014-10-29 ロシュ グリクアート アクチェンゲゼルシャフト 三価の二重特異性抗体
EP2435473B1 (en) 2009-05-27 2013-10-02 F.Hoffmann-La Roche Ag Tri- or tetraspecific antibodies
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
WO2011034605A2 (en) 2009-09-16 2011-03-24 Genentech, Inc. Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof
PL2748202T3 (pl) 2011-08-23 2018-12-31 Roche Glycart Ag Dwuswoiste cząsteczki wiążące antygen
KR20230155605A (ko) 2013-12-20 2023-11-10 제넨테크, 인크. 이중 특이적 항체
UA117289C2 (uk) 2014-04-02 2018-07-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифічне антитіло
EP3174897B1 (en) 2014-07-29 2020-02-12 F.Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies
KR20240093813A (ko) 2015-04-24 2024-06-24 제넨테크, 인크. 다중특이적 항원-결합 단백질
BR112019000135A2 (pt) * 2016-07-05 2019-04-16 Sanofi formulações de anticorpo

Also Published As

Publication number Publication date
KR20220101079A (ko) 2022-07-19
EP4057980A1 (en) 2022-09-21
BR112022008172A2 (pt) 2022-07-12
IL292899A (en) 2022-07-01
MX2022005317A (es) 2022-05-26
CA3152314A1 (en) 2021-05-20
CN114641270A (zh) 2022-06-17
US20220395458A1 (en) 2022-12-15
AU2020384917A1 (en) 2022-03-31
WO2021094508A1 (en) 2021-05-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2022169598A (ja) タウ認識抗体
RU2742606C2 (ru) Антитела к с5 и способы их применения
BR112021005585A2 (pt) proteínas de ligação a sirpa e métodos de uso das mesmas
CA3093777A1 (en) Cd47 binding agents
JP7194985B2 (ja) タウ認識抗体
JP2018532397A (ja) 抗ｔｉｇｉｔ抗体及び使用方法
JP7263256B6 (ja) Ｐｄ－ｌ１抗体医薬組成物およびその使用
JP2020520231A (ja) タウ認識抗体
US10457736B2 (en) Binding agents
JP2022524588A (ja) タウ認識抗体
CN110678482A (zh) 包含pd-1结合蛋白的制剂及其制备方法
JP2021501579A (ja) 抗ａｐｏｃ３抗体およびその使用方法
US20220395458A1 (en) Prevention of visible particle formation in aqueous protein solutions
JP7191833B2 (ja) 抗スクレロスチン抗体およびその使用
EA031471B1 (ru) Антитела, направленные на m-csf
US20230233684A1 (en) Use of chelators for the prevention of visible particle formation in parenteral protein solutions
JP2023520249A (ja) 非経口タンパク質溶液中の可視粒子形成の防止方法
US20230346931A1 (en) Alternative surfactants as stabilizers for therapeutic protein formulations
TW202342516A (zh) 識別分選蛋白的抗體
AU2022346447A1 (en) Methods of treating cancer with anti-her2 biparatopic antibodies
WO2023039672A1 (en) Methods of treating cancer with anti-her2 biparatopic antibodies

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20231108