JP2022516816A - 非共有結合的に付着された有機ナノ構造分子を含むニトロセルロース膜 - Google Patents
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Abstract
Description
Lは、トリアゾール部分を含む有機ナノ構造分子の線形領域部分であって、Lはさらに以下を含む:
(1)標的分子に選択的に結合するように適合された捕捉分子を共有結合するように適合された線形領域末端官能基、または
(2)標的分子に選択的に結合するように適合された共有結合した捕捉分子、
Q1は、少なくとも3つの酸化状態を持つ前記有機ナノ構造分子の中心原子であり、
a1は2からQ1-1の酸化状態までの整数であり、
各Tは独立して、前記有機ナノ構造分子を前記多孔性ニトロセルロース膜に非共有結合的に付着させるように適合された分岐末端領域官能基を含む前記有機ナノ構造分子の分岐末端領域部分であり、
および、前記有機ナノ構造分子は、複数の前記分岐末端領域官能基によって前記多孔性ニトロセルロース膜に非共有結合的に付着される。
a、b、およびcのそれぞれは、独立して0または1であり、
cが0またはcが1の場合、xは1であり、xは、1からQ4-1の酸化状態までの整数であり、
bが0またはbが1の場合、yは1であり、yは、1からQ3-1の酸化状態までの整数であり、
aが0またはaが1の場合、zは1であり、zは、1からQ2-1の酸化状態までの整数であり、
nは、1からQ1-1の酸化状態までの整数であり、
L および Q1は本明細書に定義される通りであり、
Q2、Q3、Q4はそれぞれ独立して、少なくとも3の酸化状態を持つ分岐原子であり、
R2、R3、R4、およびR5はそれぞれ独立してリンカーであり、および
Yは前記分岐末端領域官能基である、
ただし、n、x、y、およびzの積(product)が少なくとも3である場合。リンカーであるR2、R3、R4、およびR5は、例えば、O、S、またはNR(ここで、RはHまたはC1-C6アルキルであってよい)などのヘテロ原子を任意に持つアルキレン(例えば、メチレン、エチレン、プロピレンなど)であってよい。用語「アルキレン」は、1~12、好ましくは1~6の炭素原子の飽和直鎖飽和二価炭化水素部分、または3~12、好ましくは3~6の炭素原子の分岐飽和二価炭化水素部分を指す。例示的なアルキレン基には、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレンなどが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの態様において、R2、R3、R4、およびR5はそれぞれ独立して -CH2-、-CH2^O-、-CH2-CH2-、-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-CH2-などからなる群から選択される。
Q1、Q2、Q3、Q4、R2、R3、R4、R5、Y、a、b、c、x、y、z、および nは本明細書に定義される通りであり、
Raは
ここで
点線は任意の二重結合を表し、
Zは、標的分子に選択的に結合するように適合される捕捉分子であって、前記Zは、式L1の化合物のアルデヒド官能基または式L2の化合物のエポキシド官能基を使用して共有結合される。
定量試験の再現性の改善を決定するために、上記の実施例に記載されている試験と同様に試験を行った。
Nitrocellulose membrane matrix ニトロセルロース膜マトリックス
Capture molecule 捕捉分子
Linker リンカー
No-treated 未処理
Water 水
fold molar linker 倍モルリンカー
times reproducibility improvement 倍再現性向上
epoxide linker エポキシドリンカー
aldehyde linkerアルデヒドリンカー
charge 電荷
sequential 連続
mixing 混合
Claims (18)
- 多孔性ニトロセルロース膜の表面に非共有結合的に付着している複数の末端部分を有する有機ナノ構造化合物を含む多孔性ニトロセルロース膜であって、前記有機ナノ構造は共有結合した捕捉分子をさらに含むものであって、
前記有機ナノ構造は、
中心原子、
前記多孔性ニトロセルロース膜の表面に非共有結合的に付着している複数の末端部分を有する分岐領域、および
線形領域の末端に共有結合した捕捉分子を有する線形領域であって、前記捕捉分子は、標的物質に選択的に結合するように適合されるものである、線形領域、
を含む、多孔性ニトロセルロース膜。 - 前記有機ナノ構造の前記分岐領域が前記ニトロセルロース膜の表面に非共有結合的に付着している少なくとも3つの末端部分を含む、請求項1に記載の多孔性ニトロセルロース膜。
- サンプル中の標的分子の存在を検出するために適合された多孔性ニトロセルロース膜を製造する方法であって、
前記方法は、
(A)複数の非共有結合的付着により前記ニトロセルロース膜の表面に有機ナノ構造を固定化する工程であって、
前記有機ナノ構造は、
(i)中心原子、
(ii)前記多孔性ニトロセルロース膜の表面に非共有結合的に付着している複数の末端部分を有する分岐領域、および
(iii)線形領域の末端に共有結合した捕捉分子を有する線形領域であって、前記捕捉分子は、標的物質がサンプル中に存在する場合、標的物質に選択的に結合するように適合される、線形領域
を含む、(A)の工程、または
(B)
(i)複数の非共有結合的付着により前記ニトロセルロース膜の表面に有機ナノ構造を固定化する工程であって、
前記有機ナノ構造は、
(a)中心原子、
(b)前記多孔性ニトロセルロース膜の表面に非共有結合的に付着している複数の末端部分を有する分岐領域、および
(c)標的物質がサンプル中に存在する場合、標的物質に選択的に結合するように適合される捕捉分子に共有的に付着するように適合される官能基を有する末端を含む線形領域、
を含む工程、および
(ii)共有結合した捕捉分子を含む前記有機ナノ構造の線形領域を生成するのに十分な条件下で、捕捉分子を前記線形領域の末端の官能基と反応させる工程、
を含む、(B)の工程、
を含む、方法。 - サンプル中の標的分子の存在を検出する方法であって、
前記方法は、
(a)標的物質がサンプル中に存在する場合、標的物質を前記有機ナノ構造の線形領域の末端に存在する捕捉分子に結合させるのに十分な条件下で、請求項1に記載の多孔性ニトロセルロース膜をサンプルと接触させ、それにより、捕捉分子-標的物質複合体を形成する工程、
(b)前記工程(a)の多孔性ニトロセルロース膜に検出物質を接触させる工程であって、捕捉分子-標的物質複合体が存在する場合、前記検出物質は、捕捉分子-標的物質複合体に選択的に結合する検出分子を含む、工程、および
(c)前記工程(b)の多孔性ニトロセルロース膜を分析して、サンプル中の標的物質の存在を決定する工程、
を含む、方法。 - 前記分析する工程(c)が定量分析、定性分析、またはそれらの組み合わせを含む、請求項4に記載の方法。
- 前記有機ナノ構造の分岐領域の複数の末端のそれぞれは独立して正電荷または負電荷を含み、それにより、前記多孔性ニトロセルロース膜の表面への前記有機ナノ構造の分岐領域の非共有結合的付着を可能にする、請求項4に記載の方法。
- 前記検出分子は、酵素、フルオロフォア、磁性粒子、ナノ粒子、金属粒子、ナノファイバー粒子、またはそれらの組み合わせを含む、請求項4に記載の方法。
- 前記捕捉分子は、抗原、抗体、DNA、RNA、PNA、アプタマー、脂質、ホルモン、無機物、細胞、リガンド、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項4に記載の方法。
- 前記サンプルは、生体サンプル、化学サンプル、環境サンプル、および食品サンプルからなるグループから選択される、請求項4に記載の方法。
- 前記標的物質は、抗原、抗体、ペプチド、DNA、RNA、PNA、アプタマー、リガンド、代謝産物、毒性化合物、脂質、ホルモン、細菌、ウイルス、エキソソーム、マクロベシクル、マイクロベシクル、細胞、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項4に記載の方法。
- サンプル中の標的物質の存在を分析するためのアッセイキットであって、請求項1に記載の多孔性ニトロセルロース膜を含むアッセイキット。
- 前記捕捉分子が抗原、抗体、DNA、RNA、PNA、アプタマー、脂質、ホルモン、無機物、細胞、リガンド、ペプチド、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項12に記載のアッセイキット。
- 前記アッセイキットが、フロースルータイプ、側方流動タイプ、またはマイクロフルイディクスとニトロセルロース膜の混合である、請求項12に記載のアッセイキット。
- 表面と非共有結合的に固定化された式Aの有機ナノ構造分子を含む多孔性ニトロセルロース膜であって、
Lは、トリアゾール部分を含む前記有機ナノ構造分子の線形領域部分であって、Lはさらに以下を含む:
(1)標的分子に選択的に結合するように適合された捕捉分子を共有結合するように適合された線形領域末端官能基、または
(2)標的分子に選択的に結合するように適合された共有結合した捕捉分子、
Q1は、少なくとも3つの酸化状態を持つ前記有機ナノ構造分子の中心原子であり、
a1は2からQ1-1の酸化状態までの整数であり、および
各Tは独立して、前記有機ナノ構造分子を前記多孔性ニトロセルロース膜に非共有結合的に付着させるように適合された分岐末端領域官能基を含む前記有機ナノ構造分子の分岐末端領域部分であり、
および、前記有機ナノ構造分子は、複数の前記分岐末端領域官能基によって前記多孔性ニトロセルロース膜に非共有結合的に付着される、多孔性ニトロセルロース膜。 - 請求項15に記載の多孔性ニトロセルロース膜であって、前記有機ナノ構造分子は次の式IAのものである:
a、b、およびcのそれぞれは、独立して0または1であり、
cが0またはcが1の場合、xは1であり、xは、1からQ4-1の酸化状態までの整数であり、
bが0またはbが1の場合、yは1であり、yは、1からQ3-1の酸化状態までの整数であり、
aが0またはaが1の場合、zは1であり、zは、1からQ2-1の酸化状態までの整数であり、
nは、1からQ1-1の酸化状態までの整数であり、
L および Q1は請求項15に定義される通りであり、
Q2、Q3、Q4はそれぞれ独立して、少なくとも3の酸化状態を持つ分岐原子であり、
R2、R3、R4、およびR5はそれぞれ独立してリンカーであり、および
Yは前記分岐末端領域官能基である、
ただし、n、x、y、およびzの積が少なくとも3である場合。
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