JP2022511993A - Ｒｎａ保存溶液、及び製造方法及び使用方法 - Google Patents

Abstract

核酸保存組成物及びその製造方法及び使用方法が開示されている。組成物には、キャリア、カオトロピック剤、緩衝剤、キレート剤、界面活性剤、アルコール、及び還元剤が含まれる。水溶液としての組成物は、キャリアとして水を含んでもよい。好ましい実施形態は、ＲＮＡｓｅを含まない水、塩化リチウム、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、ＣＴＡＢ又はＳＬＳ、ＳＤＡ ３Ｃ、及びＴＣＥＰを含み、ｐＨを調整するためにＨＣｌが任意に添加される。いくつかの実施形態は、視覚的指示薬として着色染料を含む。製造方法は、成分を混合して水溶液などの混合物にすることを含む。使用方法は、核酸、好ましくはＲＮＡを含む生物学的サンプルを提供すること、及び生物学的サンプルを組成物と接触させることを含む。キットには、生物学的サンプル収集装置及び組成物が含まれる。組成物は、必要に応じて、収集装置の一部に配置される。

Description

本開示は、核酸、特にリボ核酸（ＲＮＡ）の保存に関する。具体的には、本開示は、更なる分析のために、唾液などの生物学的サンプル中のヒトＲＮＡを保存するための組成物及び方法に関する。

核酸は、細胞及び／又は無細胞核酸を含む、体液及び組織サンプルなどの生物学的サンプルから抽出することができる。抽出された核酸（ＲＮＡなど）は、遺伝子発現プロファイリングを含むさまざまな分析目的に使用できる。核酸を含む生物学的サンプルは、特定の種類の核酸分析のために適切に処理する必要があることがよくある。例えば、ＲＮＡシーケンス（ＲＮＡ－Ｓｅｑ）、マイクロアレイ、発現配列タグ（ＥＳＴ）、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）、蛍光インサイツ（ｉｎ ｓｉｔｕ）ハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）、ノーザンブロット分析などの分析技術では、使用する特定のプラットフォームに応じて、特定の処理または前処理ステップが必要になる場合がある。

いくつかの例では、サンプル又はその核酸を安定化するために、核酸を含む生物学的サンプルを処理するか、又はステップを選んで用いる必要がある場合がある。特に、ＲＮＡは、特定の条件下で（例えば、溶液中、及び／又はヌクレアーゼ、好ましくない温度、ＵＶ光、及び／又はさまざまな化学物質にさらされた場合）、非常に不安定及び／又は分解に敏感であることが知られている。安定化又は保存試薬（例えば、溶液）は、分析が実行できるまで、核酸、特にＲＮＡの少なくとも一部の生存を確実にするために、保存及び処理ステップ中に核酸を含む生物学的サンプルに添加されることがよくある。特定の理論に縛られることなく、ＲＮＡの保存又は安定化は、一般に、ＤＮＡの保存又は安定化よりもはるかに難しいと考えられている。

従来の安定化溶液は、唾液などの特定の生物学的サンプルからのＲＮＡの安定化、及び／又はそれを行うための特定の種類の分析技術又はデバイスにとって最適ではない場合がある。例えば、最適又は適切なｑＲＴ－ＰＣＲ分析用に処方されたＲＮＡ安定化溶液は、ＥＳＴプラットフォームでの分析には最適又は適切ではない可能性がある。いくつかの例では、不適切な処方により、分析アーティファクト、高いバックグラウンド信号（又はノイズ）、微生物核酸の汚染及び／又は保持が生じたり、それらにつながる可能性があり、ヒト核酸の結果が不明瞭になったり、生物学的サンプル中のヒト核酸の安定性、純度、及び／又は総潜在的収量が減少したりする可能性がある。

従来の安定化溶液は、微生物の生活を制御する上で不十分な可能性もある。唾液、組織、細胞などの生物学的サンプルは、１つ又は複数の微生物（細菌、真菌など）を含む、及び／又はそれらに汚染される可能性がある。これらの微生物は、生物学的サンプルの宿主又は供給源の核酸と干渉又は検出される可能性のある核酸を含んでいる。保存溶液は、微生物の核酸を不注意に安定化させたり、微生物の増殖を可能にしたりする可能性がある。

従って、さまざまな分析技術及び／又はデバイスに適しており、従来の製品と比較して、生物学的サンプル中のＲＮＡの全体的な収量、純度、及び／又は安定性を提供し、従来の製品、及びそれらの組み合わせと比較して、微生物の成長を制御し、及び／又は微生物の核酸汚染を減らすなどにより、生物学的サンプルの品質を向上させるＲＮＡ安定化溶液の必要性が引き続き存在する。

本開示の様々な実施形態が、添付の図面を参照してここで議論される。これらの図面は、本開示の典型的な実施形態のみを示しており、従って、その範囲を限定するものと見なされるべきではないことが理解される。

本開示の一実施形態による様々なＲＮＡ保存組成物についてのＲＮＡの平均収量を示す。 本開示の一実施形態による様々なＲＮＡ保存組成物の平均ＲＮＡ品質スコア（ＲＱＳ）を示す。 本開示の一実施形態によるＲＮＡ保存組成物中での収集直後の唾液サンプルから抽出されたＲＮＡの収量、純度、忠実度の結果を各々示す。 本開示の一実施形態によるＲＮＡ保存組成物中での収集直後の唾液サンプルから抽出されたＲＮＡの収量、純度、忠実度の結果を各々示す。 本開示の一実施形態によるＲＮＡ保存組成物中での収集直後の唾液サンプルから抽出されたＲＮＡの収量、純度、忠実度の結果を各々示す。 本開示の一実施形態によるＲＮＡ保存組成物中において室温で４８時間保存された後の唾液サンプルから抽出されたＲＮＡの収量、純度、忠実度の結果を各々示す。 本開示の一実施形態によるＲＮＡ保存組成物中において室温で４８時間保存された後の唾液サンプルから抽出されたＲＮＡの収量、純度、忠実度の結果を各々示す。 本開示の一実施形態によるＲＮＡ保存組成物中において室温で４８時間保存された後の唾液サンプルから抽出されたＲＮＡの収量、純度、忠実度の結果を各々示す。 本開示の一実施形態によるＲＮＡ保存組成物中で４８時間凍結保存された後の唾液サンプルから抽出されたＲＮＡの収量、純度、忠実度の結果を各々示す。 本開示の一実施形態によるＲＮＡ保存組成物中で４８時間凍結保存された後の唾液サンプルから抽出されたＲＮＡの収量、純度、忠実度の結果を各々示す。 本開示の一実施形態によるＲＮＡ保存組成物中で４８時間凍結保存された後の唾液サンプルから抽出されたＲＮＡの収量、純度、忠実度の結果を各々示す。

本開示の実施形態は、核酸（例えば、ＲＮＡ）の保存、安定化、及び／又は調製組成物、それを含むキット、ならびにそれを製造及び使用する方法に関する当技術分野における前述又は他の問題の１つ以上を解決する。例えば、本開示のいくつかの実施形態は、生物学的サンプル中の核酸（例えば、ＲＮＡ）を保存、安定化、及び／又は調製するための組成物を含む。特定の実施形態では、生物学的サンプルは唾液又は別の体液であってもよい。組成物は、さまざまな分析技術及びデバイスでの使用に適している可能性がある。具体的には、組成物は、様々な分析技術及びデバイスでの使用に適合するように処方してもよい。組成物は、その後の分析及び／又は処理のために大量の核酸（例えば、ＲＮＡ）をもたらすことができる。例えば、組成物は、大量のヒト核酸（例えば、ＲＮＡ）、好ましくは及び／又は任意に、その後の分析及び／又は処理のための少量の微生物（例えば、細菌）核酸（例えば、ＲＮＡ及び／又はＤＮＡ）を有する。組成物は、溶液又は水系の（例えば、水性）液体、任意に（淡い）青色を含んでもよい。組成物は、ヒト核酸（例えば、ＲＮＡ）の安定化、好ましくは細菌汚染及び／又は増殖の防止における使用、及び（長期）サンプル保存に適している可能性がある。

少なくとも一態様では、本開示の実施形態は、リボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物を含む。保存組成物は、キャリア、バッファ又は緩衝剤、及び（金属）キレート剤を含んでもよい。組成物は、好ましくはカオトロピック剤、洗剤又は界面活性剤、アルコール、及び還元剤からなる群から選択される、１つ以上の追加の試薬も含んでもよい。組成物はまた、４～７のｐＨを有しても、そして／又は適量の酸を有して４～７のｐＨ、好ましくは５．５のｐＨにしてもよい。組成物は、任意の視覚的指示薬も含まれる。

少なくとも一態様では、本開示の実施形態は、キャリアと、緩衝剤と、キレート剤と、カオトロピック剤と、を含む、ＲＮＡ保存組成物を含む。組成物は、好ましくは洗剤又は界面活性剤、アルコール、及び還元剤からなる群から選択される、１つ以上の追加の試薬も含んでもよい。組成物はまた、４～７のｐＨを有しても、そして／又は適量の酸を有して４～７のｐＨ、好ましくは５．５のｐＨにしてもよい。組成物は、任意の視覚的指示薬も含まれる。

少なくとも一態様では、本開示の実施形態は、キャリアと、緩衝剤と、キレート剤と、カオトロピック剤と、洗剤又は界面活性剤と、を含む、ＲＮＡ保存組成物を含む。組成物は、好ましくはアルコール及び還元剤からなる群から選択される１つ以上の追加の試薬も含んでもよい。組成物はまた、４～７のｐＨを有しても、そして／又は適量の酸を有して４～７のｐＨ、好ましくは５．５のｐＨにしてもよい。組成物は、任意の視覚的指示薬も含まれる。

少なくとも一態様では、本開示の実施形態は、キャリアと、緩衝剤と、キレート剤と、カオトロピック剤と、アルコールと、を含む、ＲＮＡ保存組成物を含む。組成物は、好ましくは洗剤又は界面活性剤及び還元剤からなる群から選択される、１つ以上の追加の試薬も含んでもよい。組成物はまた、４～７のｐＨを有しても、そして／又は適量の酸を有して４～７のｐＨ、好ましくは５．５のｐＨにしてもよい。組成物は、任意の視覚的指示薬も含まれる。

少なくとも一態様では、本開示の実施形態は、キャリアと、緩衝剤と、キレート剤と、カオトロピック剤と、還元剤と、アルコールと、を含む、ＲＮＡ保存組成物を含む。組成物は、洗剤又は界面活性剤も含んでもよい。組成物はまた、４～７のｐＨを有しても、そして／又は適量の酸を有して４～７のｐＨ、好ましくは５．５のｐＨにしてもよい。組成物は、任意の視覚的指示薬も含まれる。

少なくとも一態様では、本開示の実施形態は、キャリアと、カオトロピック剤と、緩衝剤と、（金属）キレート剤と、洗剤（又は界面活性剤）と、アルコールと、還元剤と、を含む、ＲＮＡ保存組成物を含む。いくつかの実施形態では、酸（又は塩基）を加えて、適切な最終ｐＨを達成してもよい。組成物は、４～７のｐＨを有しても、そして／又は適量の酸を有して４～７のｐＨ、好ましくは５．５のｐＨにしてもよい。組成物は、任意の視覚的指示薬も含まれる。

少なくとも一態様では、本開示の実施形態は、キャリアと、緩衝剤と、キレート剤と、及び任意に、カオトロピック剤、洗剤又は界面活性剤、及び還元剤からなる群から選択される１つ以上の試薬又は成分と、を含む、アルコールを含まないリボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物を含む。いくつかの実施形態では、酸（又は塩基）を加えて、適切な最終ｐＨを達成してもよい。組成物は、４～７のｐＨを有しても、そして／又は適量の酸を有して４～７のｐＨ、好ましくは５．５のｐＨにしてもよい。組成物は、任意の視覚的指示薬も含まれる。いくつかの実施形態では、組成物は、キャリア、緩衝剤、キレート剤、カオトロピック剤、洗剤又は界面活性剤、及び還元剤を含む。いくつかの実施形態では、酸（又は塩基）を加えて、適切な最終ｐＨ４～７、好ましくはｐＨ５．５を達成してもよい。

様々な態様又はその実施形態では、組成物は、液体、又は液体形態であっても、それを含んでもよい。好ましくは、組成物は溶液であるか、又は溶液を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、キャリアは流体又は液体キャリアであってもよい。好ましい実施形態では、キャリアは水性キャリアである。キャリアは、水、好ましくは濾過、精製、蒸留、及び／又は脱イオン化された、ＲＮＡｓｅを含まない水を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、約０．１％～１０％ｗ／ｗ、好ましくは約０．５～５％ｗ／ｗ、より好ましくは約１％～２％ｗ／ｗの緩衝剤を含んでもよい。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、クエン酸ナトリウム（例えば、クエン酸三ナトリウム二水和物、Ｃ_６Ｈ_５Ｏ_７Ｎａ_３・２Ｈ_２Ｏ））又は別の適切な緩衝剤であっても、それを含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、約１％～１０％ｗ／ｗ、好ましくは約２～８％ｗ／ｗ、より好ましくは約３％～７％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約３．３３％～６．６６％ｗ／ｗのカオトロピック剤を含んでもよい。いくつかの実施形態では、カオトロピック剤は、塩化リチウム（ＬｉＣｌ）又は別の適切なカオトロピック剤であっても、それらを含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、約０．０１～１％ｗ／ｗ、好ましくは約０．０５～０．５％ｗ／ｗ、より好ましくは約０．１％～０．３％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約０．２％ｗ／ｗの（金属）キレート剤を含んでもよい。いくつかの実施形態では、（金属）キレート剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、好ましくはＥＤＴＡ二ナトリウム塩、より好ましくはＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物（別名エデト酸二ナトリウム二水和物）又は別の適切な（金属）キレート剤であっても、それを含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、約１％～１０％ｗ／ｗ、好ましくは約２～８％ｗ／ｗ、より好ましくは約３％～５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約４％ｗ／ｗの洗剤（又は界面活性剤）を含んでもよい。いくつかの実施形態では、洗剤（又は界面活性剤）は、Ｎ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩（別名ラウロイルサルコシンナトリウム（ＳＬＳ）、サルコシルＮＬ、Ｎ－ドデカノイル－Ｎ－メチルグリシンナトリウム塩）又は別の適切な洗剤（又は界面活性剤）であっても、それらを含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、約０．５％～３０％ｗ／ｗ、好ましくは約１～２０％ｗ／ｗ、より好ましくは約２％～１５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約５～１０％ｗ／ｗのアルコールを含んでもよい。いくつかの実施形態では、アルコールは、エタノール、好ましくは特別に変性されたアルコール（ＳＤＡ）又はエタノールとイソプロパノールの混合物、より好ましくは約９５％ｖ／ｖのエタノールと約５％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物、又はＳＤＡ ３Ｃ、又は別の適切なアルコールであっても、それを含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、０．０１～１％ｗ／ｗ、好ましくは約０．０５～０．５％ｗ／ｗ、より好ましくは約０．１％～０．５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約０．１％～０．３％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約０．２％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよい。いくつかの実施形態では、還元剤は、トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）又は別の適切な還元剤であっても、それらを含んでもよい。

いくつかの実施形態では、酸は、存在する場合、塩酸であるか、又は塩酸を含んでもよい。いくつかの実施形態では、酸は、適量含まれて、ｐＨを４～７にしてもよく、好ましくは４．５～６．５、より好ましくは５～６、さらに好ましくは５．２～５．８、さらにより好ましくは５．４～５．６、最も好ましくは５．５である。

いくつかの実施形態では、任意の視覚的指示薬は、染料（例えば、ＦＤ＆Ｃ Ｂｌｕｅ Ｎｏ．１）などの着色剤であっても、それを含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、ヒトＲＮＡ、好ましくはヒト生物学的サンプルからの、ヒトＲＮＡの保存における使用に（適切である）ものであってもよい。ヒト生物学的サンプルは、流体サンプル、好ましくはヒト唾液又はヒト唾液サンプルであってもよい。従って、特定の態様では、本開示の実施形態は、ヒトＲＮＡの保存に使用するためのヒトＲＮＡ保存組成物又はＲＮＡ保存組成物を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、約１％～１０％ｗ／ｗのカオトロピック剤、約０．１～１０％ｗ／ｗの緩衝剤、約０．０１～１％ｗ／ｗのキレート剤、約１％～２０％ｗ／ｗの界面活性剤、約１％～２０％ｗ／ｗのアルコール、及び／又は約０．０１～１％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよく、そのｐＨは、４～７、好ましくは約５．５である。

いくつかの実施形態では、組成物は、約３％～７％ｗ／ｗのカオトロピック剤、約０．５～５％ｗ／ｗの緩衝剤、約０．０５～０．５％ｗ／ｗのキレート剤、約２％～６％ｗ／ｗの界面活性剤、約２％～１５％のアルコール、及び／又は約０．１～０．５％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよく、そのｐＨは、４～７、好ましくは約５．５である。

いくつかの実施形態では、組成物は、約３．３３％～６．６６％ｗ／ｗのカオトロピック剤、約１～２％ｗ／ｗの緩衝剤、約０．２％ｗ／ｗのキレート剤、約４％ｗ／ｗの界面活性剤、約５％～１０％ｗ／ｗのアルコール、及び／又は約０．２％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよく、そのｐＨは、４～７、好ましくは約５．５である。

いくつかの実施形態では、組成物は、約２～８％ｗ／ｗの緩衝剤、約１％～１０％ｗ／ｗのカオトロピック剤、約０．０１～１％ｗ／ｗのキレート剤、約１％～５％ｗ／ｗの界面活性剤、約５％～３０％のアルコール、及び／又は約０．０１～１％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよく、そのｐＨは、４～７である。

いくつかの実施形態では、組成物は、約３％～７％ｗ／ｗのカオトロピック剤、約４～６％ｗ／ｗの緩衝剤、約０．１～０．３％ｗ／ｗのキレート剤、約２％～４％ｗ／ｗの界面活性剤、約９％～２１％のアルコール、及び／又は約０．１～０．２５％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよく、そのｐＨは、４～７である。

いくつかの実施形態では、組成物は、約３．３３％～６．６５％ｗ／ｗのカオトロピック剤、約５．９９％ｗ／ｗの緩衝剤、約０．２％ｗ／ｗのキレート剤、約２．９９％ｗ／ｗの界面活性剤、約９．９８％～１９．９６％ｗ／ｗのアルコール、及び／又は約０．１７％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよく、そのｐＨは、４～７である。

様々な実施形態は、適量から１００％ｗ／ｗのキャリアを含んでもよい。

少なくとも１つの実施形態では、組成物は、約３．３３％～６．６６％ｗ／ｗの塩化リチウム（ＬｉＣｌ）、約１～２％ｗ／ｗのクエン酸三ナトリウム二水和物、約０．２％ｗ／ｗのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）二ナトリウム二水和物、約４％ｗ／ｗのＮ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩（ＳＬＳ）又はセチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）、好ましくはＣＴＡＢ、好ましくは本質的に約９５％ｖ／ｖのエタノール及び約５％ｖ／ｖのイソプロパノールからなる、約５％～１０％ｗ／ｗのアルコール、約０．２％ｗ／ｗのトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）、任意に、着色された色素、及び適量から１００％のＲＮＡｓｅを含まない水を含むか、又は本質的にそれらからなってもよく、そのｐＨは４～７、好ましくは約５．５である。

いくつかの実施形態は、約０．０００３７％ｗ／ｗ、視覚的指示薬（例えば、ＦＤ＆Ｃ Ｂｌｕｅ Ｎｏ．１）又はその同等物（例えば、０．１８５％ｗ／ｗ、０．２％ｗ／ｗ、視覚的指示薬濃縮物（例えば、水中で））をさらに含んでもよい。

いくつかの実施形態では、成分の１つ以上（例えば、各々）の量は、±１０％（ここで、「±／－１０％」における成分又は材料の２０％ｗ／ｗは、１８％ｗ／ｗから２２％ｗ／ｗ、１０％ｗ／ｗから３０％ｗ／ｗの範囲ではない）であってもよく、好ましくは±９％、より好ましくは±８％、さらにより好ましくは±７％、さらにより好ましくは±６％、さらにより好ましくは±５％、さらに好ましくは±４％、さらに好ましくは±３％、さらに好ましくは±２％、さらに好ましくは±１％である。

いくつかの実施形態では、組成物は、４～７のｐＨを有してもよく、好ましくは４．５～７、４．５～６．５、５～７、又は５～６．５のｐＨ、さらにより好ましくは５～６のｐＨ、さらにより好ましくは５．２～５．８のｐＨ、さらにより好ましくは５．４～５．６のｐＨ、最も好ましくは５．５のｐＨである。

１つ以上の実施形態は、（追加又はいずれか）抗菌剤（例えば、殺菌剤及び／又は静菌剤）（例えば、アルコール、カオトロピック剤、界面活性剤／洗剤、及び／又は還元剤に加えて、又はそれ以外）を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。１つ以上の実施形態は、（追加又はいずれか）リボヌクレアーゼ阻害剤、又はリボヌクレアーゼの阻害剤（例えば、カオトロピック剤に加えて、又はそれ以外）を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。１つ以上の実施形態は、プロテアーゼ、プロテイナーゼＫ、及び／又はプロテアーゼ阻害剤を（実質的に）含まなくてもよい。

１つ以上の実施形態は、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）又はβ－メルカプトエタノール（ＢＭＥ）を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。１つ以上の実施形態は、イミダゾリウム塩を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。１つ以上の実施形態は、ＤＮａｓｅを（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。１つ以上の実施形態は、チオシアン酸グアニジン、イソシアン酸グアニジン、及び塩酸グアニジンを（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。１つ以上の実施形態は、ＳＤＳ及び／又はＳＬＳを（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。１つ以上の実施形態は、Ｔｒｉｓ、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、Ｔｒｉｚｍａ（登録商標）塩基、クエン酸塩、ＭＥＳ、ＢＥＳ、Ｂｉｓ－Ｔｒｉｓ、ＨＥＰＥＳ、ＭＯＰＳ、Ｂｉｃｉｎｅ、Ｔｒｉｃｉｎｅ、ＡＤＡ、ＡＣＥＳ、ＰＩＰＥＳ、重炭酸塩、リン酸塩、ＴＡＥ、ＴＢＥ、ホウ酸ナトリウム、及び／又はカコジル酸ナトリウム（バッファ）を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。１つ以上の実施形態は、メタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、トリフルオロエタノール、フェノール、又は２、６－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メチルフェノールを（実質的に）も含まないか、又は含有しなくてもよい。

いくつかの実施形態は、核酸（例えば、ＲＮＡ）を安定化する方法を含む。この方法は、ＲＮＡを含む生物学的サンプルを（本明細書に記載）本開示の組成物と接触させることを含んでもよい。生物学的サンプルは、ヒト唾液を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、方法は、核酸（例えば、ＲＮＡ）を含む生物学的サンプルを提供するステップ、及び本開示の組成物を生物学的サンプルと組み合わせることを含んでもよい。この方法は、当技術分野で知られている他の処理ステップも含んでもよい。本開示の一実施形態は、核酸（例えば、ヒトＲＮＡなどのヒト核酸）を安定化する方法を含む。一実施形態は、核酸（例えば、ＲＮＡ）を含む生物学的サンプルを本開示の組成物と接触させるステップを含む。一実施形態では、生物学的サンプルは、（ヒト）唾液、血液、尿などの体液を含む。他の実施形態では、生物学的サンプルは生体組織又は細胞を含む。

いくつかの実施形態は、生物学的サンプル保存キットを含む。キットは、サンプル収集装置及び本開示の組成物を含んでもよく、好ましくは、サンプル収集装置の溶液区画に配置される。

いくつかの実施形態では、キットは、サンプル収集装置及び核酸（例えば、ＲＮＡ）保存組成物を含んでもよい。サンプル収集装置は、溶液区画を含んでもよい。核酸又はＲＮＡ保存組成物は、溶液区画に配置してもよい。本開示の実施形態は、サンプル収集装置の一部に配置された本開示の組成物を含むキットを含む。

いくつかの実施形態は、本開示の組成物を製造する方法を含む。この方法は、本開示の成分を組み合わせるステップを含んでもよい。この方法は、当技術分野で知られている他の製造ステップも含んでもよい。本開示の一実施形態は、核酸又はＲＮＡ安定化組成物を製造する方法を含む。一実施形態は、キャリアを得て、本開示の組成物の成分又は材料をキャリアに添加するステップを含む。

本開示の例示的な実施形態の追加の特徴及び利点は、以下の説明に記載され、その説明から部分的に明らかになるか、又はそのような例示的な実施形態の実施によって習得することができる。そのような実施形態の特徴及び利点は、添付の特許請求の範囲で特に指摘されている機構及び組み合わせによって実現及び取得し得る。これら及び他の特徴は、以下の説明及び添付の特許請求の範囲からより完全に明らかになるか、又は以下に説明するような例示的な実施形態の実施によって習得してもよい。

本開示の様々な実施形態を詳細に説明する前に、本開示は、特定のパラメータ、及び実施形態ごとに異なり得る特に例示されるシステム、方法、及び／又は製品の説明に限定されないことが理解される。従って、本開示の特定の実施形態は、特定の特徴（例えば、構成、パラメータ、特性、ステップ、構成要素、成分、部材、要素、部品、及び／又は部分など）を参照して詳細に説明されるが、説明は例示であり、本開示及び／又は特許請求される発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。さらに、本明細書で使用される用語は、実施形態を説明するためのものであり、必ずしも本開示及び／又は特許請求される発明の範囲を限定することを意図するものではない。

詳細な説明はセクションに分かれているが、各セクション内のセクションヘッダー及び内容は、自己完結型の説明及び実施形態であることを意図したものではない。むしろ、詳細な説明内の各セクションの内容は、１つのセクションの要素が他のセクションに関連し、及び／又は他のセクションに情報を提供する場合がある集合した全体で読み、理解されることを意図している。従って、あるセクション内で具体的に開示された実施形態は、同じ及び／又は同様のシステム、デバイス、方法、及び／又は用語を有する別のセクションにおける追加及び／又は代替の実施形態に関連し、及び／又はそれらとして機能し得る。

［定義された用語の簡略リスト］
前述及び今後の書面による説明及び添付の特許請求の範囲の範囲及び内容の理解を容易にするために、選択したいくつかの用語を以下に直接定義する。別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示が関係する当業者によって一般に理解されるものと同じような意味を有する。

本明細書で使用される場合、移行句「～から本質的になる」は、クレームの範囲が、クレームに記載された特定の材料又はステップ、及び「基本的かつ新規な特性に実質的に影響を及ぼさないもの」）」を包含すると解釈されることを意味する。Ｉｎ ｒｅ Ｈｅｒｚ、５３７ Ｆ．２ｄ ５４９、５５１－５２、１９０ Ｕ．Ｓ．Ｐ．Ｑ．４６１、４６３（ＣＣＰＡ １９７６）（強調はオリジナル通り）参照と、ＭＰＥＰ § ２１１１．０３も参照。従って、本開示の特許請求の範囲で使用される「本質的にからなる」という用語は、「含む」と同等であると解釈されることを意図していない。

本明細書で使用される「核酸」という用語は、ＤＮＡ又はＲＮＡ又はＤＮＡ－ＲＮＡハイブリッド、一本鎖又は二本鎖、センス又はアンチセンスに関係なく、ワトソン－クリック塩基対形成による相補性核酸にハイブリダイズすることができる、天然又は合成のオリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチドを指す。本発明の核酸は、ヌクレオチド類似体（例えば、ＢｒｄＵ、ｄＵＴＰ、７－デアザ－ｄＧＴＰ）、及び非ホスホジエステルヌクレオシド間結合（例えば、ペプチド核酸（ＰＮＡ）又はチオジエステル結合）も含んでもよい。特に、核酸には、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｃＤＮＡ、ｇＤＮＡ、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＤＮＡ、又はそれらの任意の組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。

「サンプル」、「生物学的サンプル」などの用語は、動物、動物の組織又は器官、細胞（対象、又は培養状態で保持された細胞又は培養細胞株から直接収集した対象内の細胞）、細胞溶解物（又は溶解物画分）又は細胞抽出物、細胞、細胞物質、又はウイルス物質（例えば、ポリペプチド又は核酸）に由来する１つ以上の分子を含む溶液、又は本明細書に記載されるようにアッセイされる、又はアッセイされ得る、天然又は非天然の核酸を含む溶液を指す。サンプルは、細胞、核、又は無細胞核酸を含むがこれらに限定されない、１つ以上の細胞、細胞成分、又は核酸を含む体液又は排泄物でもあり得る。

「体液」とは、動物（例えば、ヒト又はヒト以外の動物）からの液体、半固体、空気混入液体、液体－気体混合物などを含むがこれらに限定されない、天然に存在する液体を意味する。そのような体液には、唾液、痰、血清、血漿、血液、尿、粘液、汗、涙又は他の眼液、耳液、膿（例えば、水疱又はただれからのもの）、胃液、糞便液、膵液、精液、授乳又は月経の産物、脊髄液、液体骨髄、又はリンパ液が含まれるが、これらに限定されない。

「痰」とは、哺乳動物の鼻腔又は頬腔に含まれる、又はそこから排出される粘液を意味する。本明細書で使用される痰は、一般に、唾液、及び肺を含む気道からの排出物を含む。

「唾液」とは、耳下腺、顎下腺、及び舌下腺を含む唾液腺のいずれかからの分泌物、又は分泌物の組み合わせ、任意に頬腺からの分泌物と混合されるものを意味する。

「ムコイド」とは、ムチンを含む体液を意味する。

「ムチン」とは、それを分泌する細胞を囲む培地の粘性を上げるあらゆるムコタンパク質を意味する。

本明細書で使用される場合、値に関して「約」という用語は、記載された値又はそれによって表される量の±１０％を意味する。例えば、本開示全体を介して、用語「約」は、（例えば、任意に又は好ましくは、ｗ／ｗパーセント、ｗ／ｖパーセント、ｖ／ｖパーセントなどとして測定される、流体又は液体混合物、水性混合物、溶液などの混合物中）成分又は材料のパーセント濃度又は組成に関連して使用される。そのような例では、「約」という用語及び／又は「＋／－１０％」という用語は、記載されたパーセントの＋／－１０パーセントポイントとは対照的に、記載された数値の＋／－１０％を意味及び／又は含む。例として、成分又は材料の２０％ｗ／ｗが全混合物１００ｍＬあたり２０ｇの成分又は材料を表す場合、用語「約」及び／又は用語「＋／－１０％」は、１０％ｗ／ｗから３０％ｗ／ｗの範囲ではなく、１８ｇから２２ｇまでの記載された範囲（即ち、１８％ｗ／ｗから２２％ｗ／ｗ）を含み及び／又は意味する。いわゆる「約」値及び／又は＋／－１０％の代替には、記載された値の、＋／－１％、＋／－２％、＋／－３％、＋／－４％、＋／－５％、＋／－６％、＋／－７％、＋／－８％、又は＋／－９％を含み、これらは各々、用語「約」又は＋／－１０％の使用の適切な対案又は代替として意図されている。

本明細書で使用される用語「略」及び「実質的に」は、記載された量に近い（又は任意の）量（例えば、依然として所望の機能を達成する、又は（所望又は期待される）結果を達成する）量を表す又は意味する。例えば、「略」及び「実質的に」という用語は、記載された量の１０％、５％、１％、０．１％、０．０１％、又は他のパーセント以内又はそれ未満の量を指し得る。本明細書で使用される場合、用語「実質的に含まない」とは、（１）検出不能又は定量化不可能な量、（２）当業者が検出可能又は定量化可能な量を反映すると一般に考えている量より少ない又は未満、及び／又は（３）当業者が機能的又は（好ましい又は期待される）結果を達成できると一般に見なす量より少ない又は未満（例えば、１０％、５％、１％、０．１％、０．０１％、又はその他のパーセント未満）を意味する。

「Ｑｕａｎｔｕｍ ｓａｔｉｓ」（「適量」とも呼ばれる）とは、十分な量を意味する。従って、成分又は材料「適量１００％」、「適量１００％で提供」、又は「適量から１００％」は、その成分又は材料が、組成物を完成させ又は全体（記載されているかどうかにかかわらず、全ての成分の）１００％とするのに十分な量で提供又は含まれることを示す。但し、（最終）成分又は材料「適量１００％」、「適量１００％で提供」、又は「適量から１００％」は、混合物が次のものからなる、本質的にそれらのみからなる、又は「適量１００％」成分の直前にリスト又は列挙されている成分が含まれている。言い換えると、「適量１００％」及び同様の用語は、その剰余が何であれ、剰余の出所を示す無制限の表現であることを意味する。

「アルコール」とは、水酸基を含む水混和性有機化合物を意味し、水酸基含有有機化合物の水混和性混合物を含む。

「水性」とは、（体積又は重量で）３０％以上の水を含む媒体又は物質を意味する。

「水溶液」とは、体積で３０％以上の水を含む溶液又は懸濁液を意味する。

「変性剤」とは、添加されたものの自然状態を変化させる物質を意味する。

「カオトロピック剤」とは、カオトロピック活性を発揮する分子を意味する。当業者に理解されるように、カオトロピック活性を発揮する分子は、水分子間の水素結合ネットワークを破壊し、それにより、疎水効果を弱めることによって他の分子（溶液中）、主に高分子（タンパク質、核酸）の本来の状態の安定性に影響を及ぼす可能性がある。従って、カオトロピック活性を発揮する分子は、タンパク質変性活性（又はタンパク質変性剤）を有する可能性がある。

「抗菌剤」とは、有機体の非存在下における成長速度と比較して、有機体の成長速度を低下させる物質又は物質群を意味する。生物の成長速度を低下させることは、少なくとも５％、より好ましくは少なくとも１０％、さらに好ましくは少なくとも２０％、５０％、又は７５％、最も好ましくは９０％以上であってもよい。この定義は、生物の生存率、病毒性、又は病原性に影響を与える物質にも拡張される。抗菌剤は、天然（例えば、細菌又は他の供給源に由来する）、合成、又は組換えであってもよい。抗菌剤は、静菌性、殺菌性、又はその両方であってもよい。阻害された細胞の生存率に影響を与えずに細胞分裂を阻害する場合、抗菌剤は、静菌性である。細胞死を引き起こす場合、抗菌剤は殺菌性である。細胞死は通常、液体増殖培地（例えば、濁りがない）又は固体表面（例えば、寒天上にコロニー形成がない）での細胞増殖の欠如によって検出される。当業者は、所与の濃度で静菌性である物質又は物質群が、より高い濃度で殺菌性となり得ることを知っている。特定の静菌性物質は、どの濃度でも殺菌性がない。

本明細書で使用される「組成物」という用語は、製品、製剤、及び混合物、ならびにデバイス、装置、アセンブリ、キットなどを含む。同様に、「方法」という用語には、プロセス、順序、ステップなどが含まれる。

システム、方法、及び／又は製品を含む本開示のさまざまな態様は、本質的に例示的な１つ以上の実施形態又は実施を参照して説明してもよい。本明細書で使用される「実施形態」及び「実施」という用語は、「例、事例、又は例示としての役割を達成する」ことを意味し、必ずしも本明細書に開示される他の態様よりも好ましい又は有利であると解釈されるべきではない。さらに、本開示又は本発明の「実施」への言及は、その１つ以上の実施形態への特定の言及を含み、逆もまた同様であり、本発明の範囲を限定することなく例示的な例を提供することを意図しており、それは、その説明ではなく添付の特許請求の範囲によって示される。

本明細書で使用される場合、本開示又は本明細書に開示される実施形態の「特徴」は、当面の主題の特性、成分、材料、要素、部品、部分、（方法）ステップ、又は他の側面を指す。

この開示全体で使用されているように、「できる」及び「でもよい」という言葉は、必須の意味（つまり、しなければならないという意味）ではなく、許容的な意味（つまり、する可能性があるという意味）で使用されている。さらに、用語「含む」、「有する」、「関与する」、「含有する」、「特徴付けられる」、それらの変形、及び特許請求の範囲を含む本明細書で使用される類似の用語は、包括的及び／又は開放的であり、「含む」という言葉及びその変形のような意味を持ち、例として、追加の、言及されていない要素又は方法のステップを除外しない。

本明細書で使用される「又は」という言葉は、特定のリストの任意の１つの部材を意味し、そのリストの部材の任意の組み合わせも含まれる。

本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈上明確に別段の指示がない限り、単数形及び複数形の両方を意図し、含み、具体的に開示する。例えば、「タンパク質」への言及は、１つだけでなく２つ以上のタンパク質を意図し、具体的に開示する。同様に、複数の指示対象の使用は、必ずしも複数のそのような指示対象を必要としないが、文脈上明らかに別段の指示がない限り、そのような指示対象の１つ及び２つ以上を想定し、含み、具体的に開示する。

本開示の実施形態は、本明細書に記載の特徴の２つ以上の１つ以上の組み合わせを含んでもよいことに留意する。本明細書で使用される「特徴」及び類似の用語は、例えば、組成物、材料、成分、要素、部材、部品、部分、システム、方法、構成、パラメータ、特性などを含んでもよい。実施形態は、本開示の他の態様又は実施形態を含む、本開示の他の場所に記載されている特徴、オプション、及び／又は可能性のいずれかを含んでもよい。また、本明細書に記載される前述、以下、及び／又は他の特徴の各々が、本開示の別個の実施形態を表すことにも留意する。特徴はまた、任意の適切な組み合わせ及び／又は順序で別の１つ以上の他の特徴と組み合わせ及び／又は組み合わせ可能であり、１つ以上の追加の特徴が含まれる、又はそれの間に行われるかどうかにかかわらず、独自の実施形態を形成することができ、これらのそれぞれは、本開示において企図される。そのような特徴の２つ以上のそのような組み合わせは、本開示の異なる実施形態を表す。従って、本開示は、本明細書で詳細に説明される例示的な実施形態の特定の組み合わせに限定されず、本開示の特定の実施形態に関する特定の特徴の開示は、特定の実施形態への前記特徴の適用又は包含を制限するものと解釈されるべきではない。

さらに、特定の実施形態では特徴が必要であると説明されていない限り、様々な実施形態で説明されている特徴はオプションであり、本開示の他の実施形態には含まれない場合がある。さらに、特徴がそれと組み合わせて別の特徴を必要とするものとして説明されない限り、本明細書の任意の特徴は、本明細書に開示される同じ又は異なる実施形態の他の任意の特徴と組み合わせてもよい。同様に、本明細書に記載及び／又は特許請求の範囲に記載の方法に記載されているステップは、任意の適切な順序で行ってもよく、別段の記載がない限り（明示的又は黙示的に）、記載及び／又は記載された順序に必ずしも限定されない。しかし、そのようなステップは、本開示の特定の実施形態では特定の順序で行われることが要求されることもある。

２つ以上の値、又は値の範囲（例えば、特定の値未満、より大きい、少なくとも、及び／又は特定の値まで、及び／又は２つの列挙された値の間）が開示又は列挙されていることも理解される、開示された値又は値の範囲内に入る特定の値又は値の範囲は、同様に本明細書で具体的に開示され、意図されている。従って、約１０単位以下又は０と１０単位の間の例示的な測定値（例えば、長さ、幅、厚さなど）の開示には、例として、（ｉ）９単位、５単位、１単位、又は０単位及び／又は１０単位を含む０から１０単位の間のその他の値、及び／又は（ｉｉ）９単位と１単位の間、８単位と２単位の間、６単位と４単位の間、及び／又は０単位と１０単位の間の他の値の範囲の特定の開示が含まれる。

理解を容易にするために、同様の参照（即ち、成分及び／又は要素の同様の命名）が、可能な場合、本開示の異なる実施形態に共通の同様の要素を示すために使用されている。同様に、同様の成分又は同様の機能を備える成分には、可能な場合、同様の参照指定が与えられる。本明細書では、例示的な実施形態を説明するために特定の用語が使用される。それにもかかわらず、本開示の範囲の限定は意図されていないことが理解されるであろう。むしろ、例示的な実施形態を説明するために使用される文言は、単なる例示であり、（そのような文言が本明細書において本質的であると明示的に説明されない限り）開示の範囲を限定するものとして解釈されるべきではないことを理解する。

［例示的な実施形態］
以下の実施形態の説明は、本開示の１つ以上の実施形態に関連する開示を含む。従って、いくつかの実施形態は、本開示の範囲から逸脱することなく、以下の例に開示される特徴を含んでもよい。言い換えると、以下の実施形態に開示される特徴は、本明細書に開示される実施形態のいずれか１つ以上に含まれ及び／又は組み込まれてもよい。

［組成物］
本開示のいくつかの実施形態は、組成物を含む。組成物は、好ましくは液体形態のリボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物であるか、又はリボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物を含んでもよい。組成物は、生物学的サンプル、好ましくは（ヒト）流体生物学的サンプル（例えば、痰又は唾液、組織、細胞など）中のＲＮＡを安定化することができ、及び／又は生物学的サンプルを精製及び分析のための実行可能なＲＮＡ源にしてもよい。組成物は、核酸、特にリボ核酸（ＲＮＡ）の化学的安定化、及びリボヌクレアーゼを含むヌクレアーゼ及び微生物増殖の阻害の有利な特性を提供する。サンプル中の核酸（ＲＮＡなど）の化学的安定化は、緩衝剤、酸、キレート剤、還元剤、カオトロピック剤、界面活性剤、及びアルコールを使用して達成できる。特に、本開示の本発明の組成物は、汚染微生物核酸に関して、よりクリーンなヒトＲＮＡ分析結果を有利に導くことができる。組成物は、保存されたサンプルを様々な分析方法及び／又はデバイスでの使用に適したものにするという有利な特性も提供してもよい。

さらに、本開示の組成物は、生物学的サンプル（例えば、ムチン含有体液、組織サンプル、細胞など）と混合されると、長期間、室温（例えば、周囲条件下）で又は室温以下（例えば、冷蔵又は冷凍）で核酸（例えば、ＲＮＡ）を保存してもよい。サンプルは冷蔵することもできるが、いくつかの実施形態では、核酸（例えば、ＲＮＡ）の回収及び精製の前にサンプルを凍結する必要がない場合がある。本開示の特定の組成物の特性は、（ａ）生物学的サンプル中の核酸、特にＲＮＡを化学的に安定化させ、（ｂ）サンプル中に存在する可能性のあるヌクレアーゼを阻害し、（ｃ）オリゴまたはポリヌクレオチドを精製及び／又は処理（例えば、増幅、シーケンス、逆転写など）するために使用される試薬と適合性があることである。

従って、本開示の組成物は、汚染微生物又は微生物核酸を含んでもよい流体生物学的サンプルからのヒトＲＮＡのための「普遍的」保存溶液を提供してもよい。特に、本開示の組成物は、（１）ヒト対象（例えば、一部の対象は、他の対象よりも唾液中に多く又は異なる微生物を有するためである）、（２）保存条件（一部のサンプルは室温で収集、輸送、及び／又は貯蔵され得、他のサンプルは冷蔵または凍結され得るためである）、及び／又は（３）サンプル処理（一部のＲＮＡサンプルはＲＮＡシーケンスに使用される場合があるが、他のサンプルはＲＴ－ＰＣＲ又は他のテクノロジーを使用して処理されるためである）に関して「普遍的」であるように特別に処方される。

［キャリア］
少なくとも１つの実施形態では、組成物はキャリアを含んでもよい。好ましくは、キャリアは液体キャリア又は溶媒、より好ましくは水性キャリア又は溶媒、さらにより好ましくは水であってもよい。最も好ましくは、キャリアは、精製、濾過（例えば、０．２ミクロン濾過）、蒸留、及び／又は脱イオン化されたＲＮＡｓｅを含まない水であっても、それを含んでもよい。従って、組成物はキャリアを含んでもよい。キャリアは、濾過水、精製水、蒸留水、又は脱イオン水などの水であるか、又は水を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、適量から１００％のキャリアを含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、１０～６０％ｗ／ｗ、好ましくは１５～５５％ｗ／ｗ、より好ましくは２０～５０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは２５～４５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは２８～４０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは３０～３５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは３１～３４％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは３２～３３％ｗ／ｗ、又はそれらの間の任意の値または値の範囲のキャリアを含んでもよい。

［カオトロピック剤］
組成物は、カオトロピック剤（例えば、１つ以上のカオトロピック剤）を含んでもよい。いくつかの実施形態では、カオトロピック剤は、塩化リチウム（ＬｉＣｌ）であっても、それを含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、本質的に塩化リチウム（ＬｉＣｌ）からなるカオトロピック剤を含んでもよく、ＭＷ４２．３９である。

いくつかの実施形態では、カオトロピック剤は、グアニジン（又はグアニジニウム）又はその適切な塩、例えばチオシアン酸グアニジン、塩化グアニジン、塩酸グアニジン、ヨウ化グアニジニウム、イソチオシアン酸グアニジン、塩酸グアニジン、チオシアン酸カリウム、ヨウ化ナトリウム、過塩素酸ナトリウム、尿素などであっても、含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、カオトロピック剤は、チオシアン酸又はイソチオシアン酸であっても、それらを含んでもよい。

しかし、いくつかの実施形態では、組成物は、ＬｉＣｌに加えて、又はＬｉＣｌ以外のカオトロピック剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ＬｉＣｌを含み、ＬｉＣｌに加えて、又はＬｉＣｌ以外のカオトロピック剤を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、グアニジン（又はグアニジニウム）又はその適切な塩、例えばチオシアン酸グアニジン、塩化グアニジン、塩酸グアニジン、ヨウ化グアニジニウム、イソチオシアン酸グアニジンなどを実質的に含まない又は含有しなくてもよい。少なくとも１つの実施形態では、組成物は、チオシアン酸又はイソチオシアン酸を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。

いくつかの実施形態では、カオトロピック剤は、乾燥、固体、粉末、無水、及び／又は粒状形態であっても、それを有しても、含んでも、提供してもよい。いくつかの実施形態では、カオトロピック剤は、少なくとも、最大、及び／又は約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、又は９９．９％（適切な材料アッセイで測定）の純度を有してもよい。いくつかの実施形態では、カオトロピック剤は、任意の適切な濃度を有するストック溶液（例えば、水中）を含んでも、又はその形態であってもよい（その形態で提供されてもよい）。

いくつかの実施形態では、組成物は、約１～２０％ｗ／ｗ、好ましくは約１～１０％ｗ／ｗ、より好ましくは約３～７％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約３．３３～６．６６％ｗ／ｗ、又はそれの間の任意の値又は値の範囲のカオトロピック剤（例えば、塩化リチウム）を含んでもよい。好ましい実施形態では、組成物は、（約）３．３３％ｗ／ｗ、又は（約）６．６６％ｗ／ｗのカオトロピック剤を含んでもよい。最も好ましくは、組成物は、（約）３．３３％ｗ／ｗ、又は（約）６．６６％ｗ／ｗの塩化リチウムを含んでもよい。

１つ以上の実施形態では、カオトロピック剤はタンパク質変性剤であってもよい。

［緩衝剤］
組成物は、緩衝剤（又は緩衝剤、ｐＨ緩衝剤など）（例えば、１つ以上の緩衝剤（又は緩衝剤、ｐＨ緩衝剤など））を含んでもよい。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、クエン酸ナトリウム（例えば、クエン酸三ナトリウム二水和物（Ｃ_６Ｈ_５Ｏ_７Ｎａ_３・２Ｈ_２Ｏ））であっても、それを含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、クエン酸ナトリウム（例えば、クエン酸三ナトリウム二水和物（Ｃ_６Ｈ_５Ｏ_７Ｎａ_３・２Ｈ_２Ｏ）、ＭＷ２９４．１）から本質的になる緩衝剤を含んでもよい。

代替の実施形態では、緩衝剤は、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリスとしても知られると、トリス塩基、２－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）－１，３－プロパンジオール、ＴＨＡＭ、トロメタモール）又はその適切な製剤（例、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩、又はＴｒｉｓ－ＨＣｌ、）、Ｔｒｉｚｍａ（登録商標）塩基（例、水中の４０％ｗ／ｗのトリスストック溶液）、クエン酸塩、２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）－２－アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、１，３－ビス（トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）プロパン（ビス－トリス）、４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、３－（Ｎ－モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）グリシン（ビシン）、Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシン（トリシン）、Ｎ－２－アセトアミド－２－イミノ二酢酸（ＡＤＡ）、Ｎ－（２－アセトアミド）－２－アミノエタンスルホン酸（ＡＣＥＳ）、ピペラジン－１，４－ビス（２－エタンスルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、重炭酸、リン酸、ＴＡＥ、ＴＢＥ、ホウ酸ナトリウム、カコジル酸ナトリウム、又はそれらの任意の組み合わせであっても、それを含んでもよい。

しかし、いくつかの実施形態では、組成物は、クエン酸ナトリウム（例えば、クエン酸三ナトリウム二水和物（Ｃ_６Ｈ_５Ｏ_７Ｎａ_３・２Ｈ_２Ｏ））に加えて、又はそれ以外の緩衝剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、クエン酸ナトリウム（例えば、クエン酸三ナトリウム二水和物（Ｃ_６Ｈ_５Ｏ_７Ｎａ_３・２Ｈ_２Ｏ））を含んでもよく、クエン酸ナトリウム（例えば、クエン酸三ナトリウム二水和物（Ｃ_６Ｈ_５Ｏ_７Ｎａ_３・２Ｈ_２Ｏ））に加えて、又はそれ以外の緩衝剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリスとしても知られるものとして、トリス塩基、２－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）－１，３－プロパンジオール、ＴＨＡＭ、トロメタモール）又は適切なその製剤（例、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩、又はトリス－ＨＣｌ、）、Ｔｒｉｚｍａ（登録商標）塩基（例、水中の４０％ｗ／ｗのトリスストック溶液）、クエン酸塩、２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）－２－アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、１，３－ビス（トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）プロパン（ビス－トリス）、４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、３－（Ｎ－モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ）、Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシン（トリシン）、Ｎ－２－アセトアミド－２－イミノ二酢酸（ＡＤＡ）、Ｎ－（２－アセトアミド）－２－アミノエタンスルホン酸（ＡＣＥＳ）、ピペラジン－１，４－ビス（２－エタンスルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、重炭酸、リン酸、ＴＡＥ、ＴＢＥ、ホウ酸ナトリウム、カコジル酸ナトリウム、又はそれらの任意の組み合わせを（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。

いくつかの実施形態では、緩衝剤は、乾燥、固体、粉末、無水、及び／又は粒状形態であっても、それを有しても、含んでも、提供してもよい。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、少なくとも、最大、及び／又は約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、又は９９．９％（適切な材料アッセイで測定）の純度を有してもよい。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、任意の適切な濃度を有するストック溶液（例えば、水中）を含んでも、その形態であってもよい（例えば、その形態で提供されてもよい）。

いくつかの実施形態では、組成物は、約０．０５～１２％ｗ／ｗ、好ましくは約０．１～１０％ｗ／ｗ、より好ましくは約０．１～８％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約０．１～６％ｗ／ｗ、又はそれの間の任意の値又は値の範囲の緩衝剤、好ましくはクエン酸ナトリウム（例えば、クエン酸三ナトリウム二水和物（Ｃ_６Ｈ_５Ｏ_７Ｎａ_３・２Ｈ_２Ｏ））を含んでもよい。緩衝剤、好ましくはクエン酸ナトリウム（例えば、クエン酸三ナトリウム二水和物（Ｃ_６Ｈ_５Ｏ_７Ｎａ_３・２Ｈ_２Ｏ））は、いくつかの実施形態では、組成物中に約６％（又は約５．９９％）ｗ／ｗであり、他の実施形態では約１．６７％ｗ／ｗであり、さらに他の実施形態では、約０．１％ｗ／ｗである。

［キレート剤］
少なくとも１つの実施形態では、組成物は、（金属）キレート剤（又はキレーター）（例えば、１つ以上のキレート剤（又はキレーター））を含んでもよい。いくつかの実施形態では、キレート剤は、対イオン（例えば、ナトリウム）を含む、包含する、又は提供する。少なくとも１つの実施形態では、キレート剤は、水和物（例えば、二水和物）を含む、包含する、又は水和物として提供される。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上のキレート剤を含んでもよい。組成物のキレート剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、シクロヘキサンジアミン四酢酸（ＣＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、テトラアザシクロドデカン四酢酸（ＤＯＴＡ）、テトラアザシクロテトラデカン四酢酸（ＴＥＴＡ）、デスフェリオキシミン、ニトリロ三酢（ＮＴＡ）、エチレンジアミン（又は１，２－ジアミノエタン）、又はそれらのそれぞれのキレーター類似体、塩、及び／又は水和物からなる群から選択してもよい。好ましくは、キレート剤は、ＥＤＴＡ又はその適切な塩及び／又は水和物（例えば、ＥＤＴＡ二ナトリウム塩として、好ましくはＥＤＴＡ二ナトリウム（塩）二水和物として）であっても、それを含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ＥＤＴＡ又はその適切な塩及び／又は水和物（例えば、ＥＤＴＡ二ナトリウム塩、好ましくはＥＤＴＡ二ナトリウム（塩）二水和物として、ＭＷ３７２．２）から本質的になる（金属）キレート剤を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、ＥＤＴＡ又はその適切な塩及び／又は水和物（例えば、ＥＤＴＡ二ナトリウム塩として、好ましくはＥＤＴＡ二ナトリウム（塩）二水和物として）から本質的になるキレート剤（又はキレーター）を含んでもよい。

少なくとも１つの代替実施形態では、キレート剤は、エチレングリコール四酢酸エチレン、又はグリコール－ビス（β－アミノエチルエーテル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－四酢酸（ＥＧＴＡ）、シクロヘキサンジアミン四酢酸（ＣＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、テトラアザシクロドデカン四酢酸（ＤＯＴＡ）、テトラアザシクロテトラデカン四酢酸（ＴＥＴＡ）、デスフェリオキシミン、ニトリロ三酢酸、又はＮ，Ｎ－ビス（カルボキシメチル）グリシン（ＮＴＡ）、エチレンジアミン又は１，２－ジアミノエタン）、又はそれぞれのキレーター類似体、塩、及び／又は水和物、又はそれらの任意の組み合わせであっても、それを含んでもよい。

しかし、いくつかの実施形態では、組成物は、ＥＤＴＡ又はその適切な塩及び／又は水和物（例えば、ＥＤＴＡ二ナトリウム塩又はＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物）に加えて、又はそれ以外の緩衝剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ＥＤＴＡ又はその適切な塩及び／又は水和物（例えば、ＥＤＴＡ二ナトリウム塩又はＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物）を含んでも、ＥＤＴＡ又は適切な塩及び／又はその水和物（例えば、ＥＤＴＡ二ナトリウム塩又はＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物）に加えて、又はそれ以外の緩衝剤を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、エチレングリコール四酢酸エチレン、又はグリコール－ビス（β－アミノエチルエーテル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－四酢酸（ＥＧＴＡ）、シクロヘキサンジアミン四酢酸（ＣＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、テトラアザシクロドデカン四酢酸（ＤＯＴＡ）、テトラアザシクロテトラデカン四酢酸（ＴＥＴＡ）、デスフェリオキシミン、ニトリロ三酢酸、又はＮ，Ｎ－ビス（カルボキシメチル）グリシン（ＮＴＡ）、エチレンジアミン（又は１，２－ジアミノエタン）、又はそれぞれのキレーター類似体、塩、及び／又は水和物、又はそれらの任意の組み合わせを（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。

いくつかの実施形態では、キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）は、乾燥、固体、粉末、無水、及び／又は粒状形態であっても、それを有しても、含んでも、提供してもよい。いくつかの実施形態では、キレート剤は、少なくとも、最大、及び／又は約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、又は９９．９％（適切な材料アッセイで測定）の純度を有してもよい。いくつかの実施形態では、キレート剤は、任意の適切な濃度を有するストック溶液（例えば、水中）を含んでも、又はその形態であってもよい（その形態で提供されてもよい）。

いくつかの実施形態では、キレート剤は、約０．０５％ｗ／ｗから約５％ｗ／ｗ、好ましくは約０．１％～約４％ｗ／ｗ、より好ましくは約０．１５％～約３％、さらにより好ましくは約０．２％～約２．６６％の範囲、又はそれの間の任意の値又は値の範囲、又は前述のいずれかのモル当量で組成物中に含まれてもよい。

いくつかの実施形態では、キレート剤は、約０．０５％ｗ／ｗから約０．５％ｗ／ｗ、又は約１％ｗ／ｗから約５％ｗ／ｗ、好ましくは約０．１％ｗ／ｗから約０．４％ｗ／ｗ、又は約１．５％ｗ／ｗから約４％ｗ／ｗ、より好ましくは約０．１５％～約０．３％ｗ／ｗ、又は約２％ｗ／ｗから約３％ｗ／ｗ、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ、又は約２．６６％ｗ／ｗ、又はそれの間の任意の値又は値の範囲、又は前述のいずれかのモル当量で組成物中に含まれてもよい。最も好ましくは、組成物は、（約）０．２％ｗ／ｗのＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ二ナトリウム（塩）二水和物、又は（約）２．６６％ｗ／ｗのＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ二ナトリウム（塩）二水和物、又はいずれかのモル当量を含んでもよい。例として、いくつかの実施形態では、キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）は、組成物中に約５．４ｍＭで含まれてもよい。

理論に縛られることなく、キレート剤は、ヌクレアーゼによるＲＮＡ（及びＤＮＡ）の分解を触媒するために不可欠な遷移金属イオンを複合化してもよい。キレート剤は、抗菌活性を有してもよい。

［界面活性剤］
少なくとも１つの実施形態では、組成物は、界面活性剤又は洗剤（例えば、１つ以上の界面活性剤又は洗剤）を含んでもよい。好ましくは、界面活性剤は、ラウロイルサルコシネート、より好ましくは、Ｎ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩又はナトリウムラウロイルサルコシネート（ＳＬＳ、サルコシル洗剤、ＭＷ２９３．４）又はセチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ、ＭＷ３６４．４）であっても、それを含んでもよい。いくつかの実施形態では、界面活性剤又は洗剤は、ラウロイルサルコシネート、より好ましくは、Ｎ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩又はナトリウムラウロイルサルコシネート（ＳＬＳ、サルコシル洗剤）であっても、それを含んでもよい。いくつかの実施形態では、界面活性剤又は洗剤は、セチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）であっても、それを含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ラウロイルサルコシネート、より好ましくは、Ｎ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩又はナトリウムラウロイルサルコシネート（ＳＬＳ、サルコシル洗剤）及び／又はセチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）から本質的になる界面活性剤又は洗剤を含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、本質的にラウロイルサルコシネート、より好ましくはＮ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩又はナトリウムラウロイルサルコシネート（ＳＬＳ、サルコシル洗剤）から本質的になる界面活性剤又は洗剤を含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、セチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）から本質的になる界面活性剤又は洗剤を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、ＳＬＳは、ＳＤＳ又は他の（溶解性は低いが、より一般的な）界面活性剤よりも好ましい場合がある。理論に拘束されることなく、ＳＬＳは、本開示の組成物中及び／又はそのｐＨで、他の材料／成分と組み合わせると、他のより一般的な洗剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、尿素、トゥイーンなど）よりも実質的に溶解性が高いことがわかった。いくつかの実施形態では、ＣＴＡＢは、ＳＤＳ又は他の（溶解性は低いが、より一般的な）界面活性剤よりも好ましい場合がある。理論に拘束されることなく、ＣＴＡＢは、本開示の組成物中及び／又はそのｐＨで、他の材料／成分と組み合わせると、他のより一般的な洗剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、尿素、トゥイーンなど）よりも実質的に溶解性が高いことがわかった。いくつかの実施形態では、ＣＴＡＢがＳＬＳよりも好ましい場合がある。いくつかの実施形態では、ＳＬＳはＣＴＡＢよりも好ましい場合がある。

少なくとも１つの代替実施形態では、界面活性剤は、尿素、過塩素酸塩、及びドデシル硫酸（ナトリウム）（ＳＤＳ）からなる群から選択される１つ以上の成分であっても、それらを含んでもよい。少なくとも１つの代替実施形態では、界面活性剤は、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、尿素、過塩素酸塩、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ（商標）、ラウリルジメチルアミン酸化物、ポリエトキシル化アルコール、ポリオキシエチレンソルビタン、オクトキシノール（Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ１００（商標））、Ｎ，Ｎ－ジメチルドデシルアミン－Ｎ－酸化物、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド（ＨＴＡＢ）、ポリオキシル１０ラウリルエーテル、胆汁酸塩（デオキシコール酸ナトリウム、コール酸ナトリウム）、ポリオキシルヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（商標））、ノニルフェノールエトキシレート（Ｔｅｒｇｉｔｏｌ（商標））、シクロデキストリン、レシチン、塩化メチルベンゼトニウム（Ｈｙａｍｉｎｅ（商標））、ドデシル硫酸リチウム（ＬＤＳ）、タウロデオキシコール酸ナトリウム（ＮａＴＤＣ）、タウロコール酸ナトリウム（ＮａＴＣ）、グリココール酸ナトリウム（ＮａＧＣ）、デオキシコール酸ナトリウム（ＮａＤＣ）、コール酸ナトリウム、ナトリウムアルキルベンゼンスルホン酸塩（ＮａＡＢＳ）、Ｎ－ラウロイルサルコシン（ＮＬＳ）、カルボン酸塩（即ち、石鹸）、スルホン酸塩、硫酸塩、リン酸及びポリリン酸エステル、アルキルリン酸塩、モノアルキルリン酸塩（ＭＡＰ）、及び／又はパーフルオロカルボン酸の塩からなる群から選択される１つ以上の成分であっても、それらを含んでもよい。

しかし、いくつかの実施形態では、組成物は、ＳＬＳに加えて、又はＳＬＳ以外の界面活性剤又は洗剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ＣＴＡＢに加えて、又はＣＴＡＢ以外の界面活性剤又は洗剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ＳＬＳ及び／又はＣＴＡＢに加えて、又はそれ以外の界面活性剤又は洗剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物はＳＬＳを含み、ＳＬＳに加えて、又はＳＬＳ以外の界面活性剤又は洗剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物はＣＴＡＢを含み、ＣＴＡＢに加えて、又はＣＴＡＢ以外の界面活性剤又は洗剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ＳＬＳ及び／又はＣＴＡＢを含み、ＳＬＳ及び／又はＣＴＡＢに加えて、又はそれ以外の界面活性剤又は洗剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。

一部の実施形態では、組成物は、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、尿素、過塩素酸塩、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ（商標））、ラウリルジメチルアミン酸化物、ポリエトキシル化アルコール、ポリオキシエチレンソルビタン、オクトキシノール（Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ１００（商標））、Ｎ，Ｎ－ジメチルドデシルアミン－Ｎ－酸化物、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド（ＨＴＡＢ）、ポリオキシル１０ラウリルエーテル、胆汁酸塩（デオキシコール酸ナトリウム、コール酸ナトリウム）、ポリオキシルヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（商標））、ノニルフェノールエトキシレート（Ｔｅｒｇｉｔｏｌ（商標））、シクロデキストリン、レシチン、塩化メチルベンゼトニウム（Ｈｙａｍｉｎｅ（商標））、ドデシル硫酸リチウム（ＬＤＳ）、タウロデオキシコール酸ナトリウム（ＮａＴＤＣ）、タウロコール酸ナトリウム（ＮａＴＣ）、グリココール酸ナトリウム（ＮａＧＣ）、デオキシコール酸ナトリウム（ＮａＤＣ）、コール酸ナトリウム、アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム（ＮａＡＢＳ）、Ｎ－ラウロイルサルコシン（ＮＬＳ）、カルボン酸塩（即ち、石鹸）、スルホン酸塩、硫酸塩、リン酸及びポリリン酸エステル、リン酸アルキル、リン酸モノアルキル（ＭＡＰ）、及び／又はパーフルオロカルボン酸の塩を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ＳＬＳを実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。一部の実施形態では、組成物は、ＣＴＡＢを実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。

いくつかの実施形態では、界面活性剤は、乾燥、固体、粉末、無水、及び／又は粒状形態であっても、それを有しても、含んでも、提供してもよい。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、少なくとも、最大、及び／又は約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、又は９９．９％（適切な材料アッセイで測定）の純度を有してもよい。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、任意の適切な濃度（例えば、約１０％、１５％、２０％、２５％、２８％、２９％、３０％、３２％、３５％、４０％、又は４５％ｗ／ｗの、水溶液（例えば、水中）、好ましくは約３０％ｗ／ｗ、又はそれらのモル当量を有するストック溶液（例えば、水中）を含んでも、又はその形態であってもよい（その形態で提供されてもよい）。

いくつかの実施形態では、界面活性剤（例えば、ＳＬＳ）は、約２．９９％ｗ／ｗ、又は１０２ｍＭで組成物中に含まれてもよい。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、組成物中に約１％～約５％ｗ／ｗ、好ましくは約１．５％～約４．５％ｗ／ｗ、より好ましくは約２％～約４％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは、約２．５％～約３．５％ｗ／ｗの範囲、又は前述のいずれかのモル当量で含まれてもよい。少なくとも１つの実施形態では、組成物は、ＳＬＳ以外の界面活性剤又は洗剤を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。

いかなる理論にも束縛されないが、界面活性剤又は洗剤は、汚染微生物（例えば、細菌）を含む細胞を溶解し、タンパク質を変性させ、核酸を放出させるのに有用であってもよい。

［アルコール］
少なくとも１つの実施形態では、組成物はアルコール（例えば、１つ以上のアルコール）を含んでもよい。好ましくは、アルコールはエタノールであっても、エタノールを含んでもよい。より好ましくは、アルコールは、エタノールと１つ以上の追加の化学薬品又は成分との混合物であっても、それらを含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、１つ以上の追加の化学薬品又は成分は、イソプロパノールであっても、イソプロパノールを含んでもよい。さらにより好ましくは、アルコールは、エタノールとイソプロパノールの混合物であっても、それらを含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、アルコールは、特別に変性されたアルコール（ＳＤＡ）であっても、それを含んでもよい。より好ましくは、アルコールは、約９５％ｖ／ｖのエタノールと約５％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含むことが当業者に知られているように、ＳＤＡ ３Ｃであっても、それを含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、組成物は、本質的にエタノールからなるアルコール、又はエタノールとイソプロパノールの混合物を含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、組成物は、本質的に特別に変性されたアルコール（ＳＤＡ）、好ましくはＳＤＡ ３Ｃ（比重０．７９）からなるアルコールを含んでもよい。いくつかの実施形態は、アルコールを含まなくてもよい。

少なくとも１つの代替実施形態では、アルコールは、エタノールと、メタノール、プロパノール、ブタノール、イソブタノールなどからなる群から選択される１つ以上の追加の化学物質又は成分との混合物であっても、それらを含んでもよい。組成物は、エタノール、メタノール、プロパノール、及び／又はイソプロパノールなどのアルコール、好ましくはエタノールと、メタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、トリフルオロエタノール、フェノール又は２、６－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メチルフェノールなどの別のアルコールとの混合物、より好ましくはエタノールとイソプロパノールの混合物、さらにより好ましくは特別変性アルコール（ＳＤＡ）である。少なくとも１つの代替実施形態では、アルコールは、メタノール、ｎ－プロパノール、ｎ－ブタノール、トリフルオロエタノール、フェノール、又は２，６－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メチルフェノールであっても、それらを含んでもよい。

しかし、いくつかの実施形態では、組成物は、エタノールに加えて、又はエタノール以外のアルコールを実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、エタノール及びイソプロパノールに加えて、又はそれ以外のアルコールを実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ＳＤＡ ３Ｃに加えて、又はＳＤＡ ３Ｃ以外のアルコールを実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。しかし、いくつかの実施形態では、組成物はエタノールを含み、エタノールに加えて、又はエタノール以外のアルコールを実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、エタノール及びイソプロパノールを含み、エタノール及びイソプロパノールに加えて、又はそれ以外のアルコールを実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、ＳＤＡ ３Ｃを含み、ＳＤＡ ３Ｃに加えて、又はそれ以外のアルコールを実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、メタノール、プロパノール、ｎ－プロパノール、ブタノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール、トリフルオロエタノール、フェノール、及び／又は２、６－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メチルフェノールを実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。

いくつかの実施形態では、アルコールは、液体、水性、及び／又は溶液形態であっても、それを有しても、含んでも、提供してもよい。いくつかの実施形態では、アルコールは、任意の適切な濃度のアルコール（例えば、水中）を有するストック溶液（例えば、（ＲＮＡｓｅを含まない）水中）の形態を含んでも、その形態であっても（その形態で提供されてもよい）。いくつかの実施形態では、アルコールは実質的に純粋であっても、実質的に純粋なアルコールの混合物であってもよい。いくつかの実施形態では、アルコールは、少なくとも、最大、及び／又は約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、又は９９．９％（又は純粋なエチルアルコール、２００プルーフ）（適切な材料アッセイで測定）の純度を有してもよい。

いくつかの実施形態では、アルコールは、約９５％ｖ／ｖのエタノールと約５％ｖ／ｖのイソプロパノールの、又はそれを含む混合物又はストック溶液であっても、それらを含んでもよい。いくつかの実施形態では、アルコールは、９０～９９％ｖ／ｖのエタノール及び約１～１０％ｖ／ｖイソプロパノールの、又はそれを含む混合物又はストック溶液であっても、それらを含んでもよい。特定の実施形態では、アルコールは、５０～９９％ｖ／ｖのエタノール及び１～５０％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含んでもよい。より好ましくは、アルコールは、６０～９８％ｖ／ｖのエタノールと２～４０％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含んでもよい。さらにより好ましくは、アルコールは、７５～９７％ｖ／ｖのエタノール及び３～２５％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含んでもよい。さらにより好ましくは、アルコールは、８０～９６％ｖ／ｖのエタノールと４～２０％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含んでもよい。さらにより好ましくは、アルコールは、８５～９５％ｖ／ｖのエタノール及び５～１５％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含んでもよい。さらにより好ましくは、アルコールは、９０～９５％ｖ／ｖのエタノール及び５～１０％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含んでもよい。さらにより好ましくは、アルコールは、９２～９５％ｖ／ｖのエタノール及び５～８％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含んでもよい。さらにより好ましくは、アルコールは、９５％ｖ／ｖのエタノール及び５％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含んでもよい。最も好ましくは、アルコールはＳＤＡ ３Ｃ（比重＝０．７９）であっても、それを含んでもよい。

いくつかの実施形態では、アルコール（例えば、好ましくはエタノール、エタノール及びイソプロパノール、又はＳＤＡ ３Ｃを含む）は、約１％ｗ／ｗから約３０％ｗ／ｗ、好ましくは約２％ｗ／ｗから約２８％ｗ／ｗ、より好ましくは約４％ｗ／ｗから約２５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約５％ｗ／ｗから約２０％ｗ／ｗの範囲、又はそれの間の任意の値又は値の範囲、又は前述のいずれかのモル当量で組成物中に含まれてもよい。いくつかの実施形態では、アルコールは、約１％ｗ／ｗから約１５％ｗ／ｗ、又は約１５％ｗ／ｗから約２５％ｗ／ｗ、好ましくは約２％ｗ／ｗから約１２％ｗ／ｗ、又は約１８％ｗ／ｗから約２２％ｗ／ｗ、より好ましくは約５％～約１０％ｗ／ｗ、又は約１９％ｗ／ｗから約２１％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは、約５％ｗ／ｗ、又は約６％ｗ／ｗ、約１０％ｗ／ｗ（約９．９９％ｗ／ｗ）、又は約２０％ｗ／ｗ（約１９．９５％ｗ／ｗ、又は約１９．９９％ｗ／ｗ）、又はそれの間の値又は値の範囲、又は前記のいずれかのモル当量で組成物中に含まれてもよい。

いくつかの実施形態では、組成物に含まれるアルコールの量は、約２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３２％、３５％、３８％、４０％、４５％、又は５０％ｗ／ｗ、又はそれの間の値又は値の範囲より少なくともよい。いくつかの実施形態では、組成物に含まれるアルコールの量は、典型的な、従来の、又は既存の核酸又はＲＮＡ保存溶液より（例えば、約５％、１０％、１５％、２０％、２２％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、又は６０％以下）少なくともよい（例えば、組成物を移送又は輸送に対してより修正しやすくする）。

理論に束縛されるものではないが、アルコールは、汚染微生物（例えば、細菌）及び／又は変性タンパク質を含む細胞を溶解する可能性がある。

［酸とｐＨ］
少なくとも１つの実施形態では、組成物は酸（例えば、１つ以上の酸）を含んでもよい。好ましくは、酸は塩酸（ＨＣｌ）であっても、それを含んでもよい。

少なくとも１つの代替実施形態では、酸は、臭化水素酸（ＨＢｒ）、過塩素酸（ＨＣｌＯ_４）、硝酸（ＨＮＯ_３）、又は硫酸（Ｈ_２ＳＯ_４）であっても、それらを含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、酸は、炭酸（Ｈ_２ＣＯ_３）又は酢酸（ＣＨ_３ＣＯＯＨ）であっても、それらを含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、酸は、リン酸（Ｈ_３ＰＯ_４）、ホウ酸（Ｈ_３ＢＯ_３）、又はエメラルドセーフ酸（ＥＳＡ）などであっても、又はそれらを含んでもよい。

しかし、いくつかの実施形態では、組成物は、ＨＣｌに加えて、又はＨＣｌ以外の酸を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。しかし、いくつかの実施形態では、組成物はＨＣｌを含み、ＨＣｌに加えて、又はＨＣｌ以外の酸を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、臭化水素酸（ＨＢｒ）、過塩素酸（ＨＣｌＯ_４）、硝酸（ＨＮＯ_３）、硫酸（Ｈ_２ＳＯ_４）、炭酸（Ｈ_２ＣＯ_３）、酢酸（ＣＨ_３ＣＯＯＨ）、リン酸（Ｈ_３ＰＯ_４）、ホウ酸（Ｈ_３ＢＯ_３）、及び／又はエメラルドセーフ酸（ＥＳＡ）を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。

いくつかの実施形態では、酸は、乾燥、固体、粉末、無水、及び／又は顆粒形態であっても、それを有しても、含んでも、提供してもよい。いくつかの実施形態では、酸は、少なくとも、最大、及び／又は約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、又は９９．９％（適切な材料アッセイで測定）の純度を有してもよい。いくつかの実施形態では、酸は、任意の適切な濃度（例えば、約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３２％、３５％、３７％、３８％、４０％、４５％、５０％、又はそれ以上のｗ／ｗの水溶液（例えば、水中）、好ましくは約３７％ｗ／ｗ、又はそれらのモル当量（例えば、１Ｍと約１２Ｍの間）を含んでも、その形態であってもよい（その形態で提供されてもよい）。

少なくとも１つの実施形態では、組成物は、約ｐＨ４～７、ｐＨ４．５～６．５、ｐＨ４．５～６、ｐＨ５～７、ｐＨ５～６．５、又はｐＨ５～６の範囲（又は任意の値又はその間の値の範囲）のｐＨを有してもよい。いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは４より大きくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは７未満であってもよい。いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは４より大きく７未満であってもよく、好ましくは約４．５から約６．５のｐＨ範囲内、より好ましくは約５から約６のｐＨ範囲内、さらにより好ましくは約５．２から約５．８のｐＨ範囲内、さらにより好ましくは約５．３から約５．７のｐＨ範囲内、さらにより好ましくは約５．４から約５．６のｐＨ範囲内、最も好ましくは約５．５のｐＨである。

少なくとも１つの実施形態では、酸は、組成物中に適量で、又は組成物を約ｐＨ４～７、ｐＨ４．５～６．５、ｐＨ４．５～６、ｐＨ５～６．５、又はｐＨ５～６の範囲（又はそれの間の値又は値の範囲）、ｐＨ４を超える、ｐＨ７未満、ｐＨ４を超えて７未満、好ましくは約４．５から約６．５のｐＨ範囲、より好ましくは約５から約６のｐＨ範囲、さらにより好ましくは約５．２から約５．８のｐＨ範囲、さらにより好ましくは約５．３から約５．７のｐＨ範囲、さらに好ましくは、約５．４から約５．６のｐＨ範囲内であり、最も好ましくは、約５．５のｐＨとするのに適した量で含んでもよい。

実例として、いくつかの実施形態では、適した量の約３７％ｗ／ｗ、又は約１２ＭのＨＣｌストック（水性）溶液、又はその同等物を、組成物中に適量に、又は約ｐＨ４～７、ｐＨ４．５～６．５、ｐＨ４．５～６、ｐＨ５～７、ｐＨ５～６．５、又はｐＨ５～６の範囲のｐＨ（又はそれの間の任意の値又は値の範囲）、４を超えるｐＨ、７未満のｐＨ、４を超え７未満のｐＨ、好ましくは約４．５～約６．５のｐＨ範囲内、より好ましくは約５～約６のｐＨ範囲内、さらにより好ましくは約５．２から約５．８のｐＨ範囲、さらにより好ましくは約５．３から約５．７のｐＨ範囲、さらにより好ましくは約５．４から約５．６のｐＨ範囲、最も好ましくは約５．５のｐＨとするために、添加しても、含んでもよい。

いかなる理論にも束縛されるものではないが、酸を組成物に加えて、組成物のｐＨを調整（即ち、低下）してもよい。組成物のｐＨを調整すると、サンプル中のＲＮＡ及び／又は他の（高分子）分子の安定性に影響を与える可能性がある。

理論に拘束されることなく、当業者は、異なる酸が異なる「強度」又はプロトン（Ｈ^＋）を失う酸の能力又は傾向を有することに留意する。強酸は、（十分な溶媒がある場合）溶液中で完全にイオン化（解離）するものである。例えば、水中では、１モルの強酸ＨＡが溶解して、１モルのＨ^＋（ヒドロニウムイオンＨ_３Ｏ^＋以上の凝集体として）と１モルの共役塩基Ａ^－を生成する。基本的に、イオン化されていない酸ＨＡは残らない。強酸の例としては、塩酸（ＨＣｌ）、ヨウ化水素酸（ＨＩ）、臭化水素酸（ＨＢｒ）、過塩素酸（ＨＣｌＯ_４）、硝酸（ＨＮＯ_３）、硫酸（Ｈ_２ＳＯ_４）などがある。水溶液では、これらは、各々本質的に１００％イオン化する。対照的に、弱酸は部分的にしか解離しない。水中での例には、炭酸（Ｈ_２ＣＯ_３）と酢酸（ＣＨ_３ＣＯＯＨ）が含まれる。平衡状態では、酸と共役塩基の両方が溶液中に存在する。強い酸は、弱い酸よりも酸解離定数（Ｋａ）が大きく、対数定数（ｐＫａ＝－ｌｏｇＫａ）が小さくなる。酸が強いほど、プロトンであるＨ＋を失いやすくなる。脱プロトン化の容易さに寄与する２つの重要な要因は、Ｈ－Ａ結合の極性と、Ｈ－Ａ結合の強度を決定する原子Ａの大きさである。酸の強度は、共役塩基の安定性にも依存する。

前記に照らして、組成物のｐＨを所望のレベルにするために必要な各酸のｗ／ｗ量は異なる。例えば、実例として、（約）４％塩酸３７％ｗ／ｗ（水中）は、本開示の特定の実施形態をｐＨ（約）５．５にするために十分である可能性があるが、４％酢酸３７％ｗ／ｗ（水中）は、同様の実施形態をｐＨ（約）５．５にするには弱すぎる可能性があり、４％硫酸３７％ｗ／ｗ（水中）は、実施形態をｐＨ（約）５．５にするには強すぎる可能性があり、４％硝酸３７％ｗ／ｗ（水中）は、アルコールなどを酸化する可能性がある。理論に拘束されることなく、当業者であっても、更なる試験を行っても、本開示の１つ以上の実施形態ではどの酸が適切であるかを決定できない場合がある。

［還元剤］
少なくとも１つの実施形態では、組成物は還元剤（例えば、１つ以上の還元剤）を含んでもよい。好ましくは、還元剤は、トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ、ＭＷ２８６．６５）又はＤＬ－ジチオスレイトール（ＤＴＴ、ＭＷ１５４．３）、より好ましくはＴＣＥＰであっても、それらを含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、組成物は、トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）又はＤＬ－ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、より好ましくはＴＣＥＰから本質的になる還元剤を含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、組成物は、トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）から本質的になる還元剤を含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、組成物は、ＤＬ－ジチオスレイトール（ＤＴＴ）から本質的になる還元剤を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、ＴＣＥＰは、ＤＴＴ又は他の（より強力で、より一般的な）還元剤（例えば、アセチルシステイン（例えば、Ｎ－アセチルシステイン（ＮＡＣ）、例えば、Ｎ－アセチル－Ｌ－システイン、Ｎ－アセチル－Ｄ－システイン、及びラセミＮ－アセチルシステイン又はＮ－アセチル－Ｌ－システインとＮ－アセチル－Ｄ－システインの（ラセミック）混合物）、アスコルビン酸、ジチオン酸塩、エリチオル酸塩、システイン、グルタチオン、２－メルカプトエタノール（ＢＭＥ）、ジエリスリトール、樹脂支持チオール、樹脂支持ホスフィン、ビタミンＥ、及び／又はトロロックス、又はそれらの塩、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、ヨウ化カリウム、塩化アンモニウム、グアイフェネシン（又はグアイフェンシン）、トルバルサム、バサカ、アンブロキソール、カルボシステイン、エルドステイン、メシステイン、ドルナーゼアルファなどよりも好ましい場合がある。理論に拘束されることなく、いくつかの（強い）還元剤は、多くの場合不快な「腐った卵のような」匂いを持つ場合がある。いくつかの実施形態では、不快な匂いは、より弱い還元剤より好ましくない場合がある。例として、一部の唾液収集装置、キット、及び／又はシステムでは、ユーザは鼻を溶液の入った（収集）容器に近づけて、還元剤のにおいを嗅ぐことがある。

しかし、少なくとも１つの代替実施形態では、還元剤は、アセチルシステイン（例えば、Ｎ－アセチルシステイン（ＮＡＣ）、例えば、Ｎ－アセチル－Ｌ－システイン、Ｎ－アセチル－Ｄ－システイン、及びラセミＮ－アセチルシステイン、又はＮ－アセチル－Ｌ－システインとＮ－アセチル－Ｄ－システインの（ラセミ）混合物）、アスコルビン酸、ジチオン酸塩、エリチオル酸塩、システイン、メシステイン、カルボシスチングルタチオン、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、２－メルカプトエタノール（ＢＭＥ）、ジエリスリトール、樹脂支持チオール、樹脂支持ホスフィン、ビタミンＥ、及び／又はトロロックス、又はそれらの塩であっても、それを含んでもよい。

１つ以上の実施形態では、組成物は、アセチルシステイン、Ｎ－アセチルシステイン（ＮＡＣ）、Ｎ－アセチル－Ｌ－システイン、Ｎ－アセチル－Ｄ－システイン、ラセミＮ－アセチルシステイン、又はＮ－アセチル－Ｌ－システイン及びＮ－アセチル－Ｄ－システイン、アスコルビン酸、ジチオン酸塩、エリチオル酸塩、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、２－メルカプトエタノール（ＢＭＥ）、ジエリスリトール、樹脂支持チオール、樹脂支持ホスフィン、ビタミンＥ、トロロックス、及び／又はその塩を含有しない。少なくとも１つの実施形態は、アセチルシステイン、Ｎ－アセチルシステイン（ＮＡＣ）、Ｎ－アセチル－Ｌ－システイン、Ｎ－アセチル－Ｄ－システイン、ラセミＮ－アセチルシステイン、又はＮ－アセチル－Ｌ－システインとＮ－アセチル－Ｄ－システインの（ラセミック）混合物、アスコルビン酸、ジチオン酸塩、エリチオル酸塩、ジチオスレイトール、２－メルカプトエタノール、ジエリスリトール、樹脂支持チオール、樹脂支持ホスフィン、ビタミンＥ、トロロックス、及び／又はそれらの塩を（実質的に）含有しない。少なくとも１つの実施形態では、組成物は、ＤＴＴ、ＢＭＥ、Ｎ－アセチル－Ｄ－システイン、及び／又は他の前述の還元剤（例えば、Ｎ－アセチル－Ｌ－システイン）のいずれかを（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。少なくとも１つの実施形態では、組成物は、ＴＣＥＰに加えて（又はそれ以外の）還元剤を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物はＴＣＥＰを含み、ＴＣＥＰに加えて（又はそれ以外の）還元剤を（実質的に）含まないか、又は含有しなくてもよい。

いくつかの実施形態では、還元剤は、乾燥、固体、粉末、無水、及び／又は粒状形態であっても、それを有しても、含んでも、提供してもよい。いくつかの実施形態では、還元剤は、少なくとも、最大、及び／又は約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、又は９９．９％（適切な材料アッセイで測定）の純度を有してもよい。いくつかの実施形態では、還元剤は、任意の適切な濃度を有するストック溶液（例えば水中）を含んでも、その形態であってもよい（例えば、その形態で提供されてもよい）。

還元剤（例えば、ＴＣＥＰ）は、組成物中に、約０．０１％～約１％、好ましくは約０．０５％～約０．５％、より好ましくは約０．０８％～約０．４％、さらにより好ましくは約０．１％～約０．３％、さらにより好ましくは約０．１２％～約０．２５％、さらにより好ましくは約０．１５％～約０．２２％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約０．１７％～約０．２％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約０．１７％ｗ／ｗ、又は約０．２％ｗ／ｗの範囲で含まれてもよい。

いかなる理論にも束縛されることなく、還元剤は粘液可溶化剤であるか、又は粘液可溶化剤を含んでも、及び／又は（例えば、ジスルフィド架橋を還元又は切断することにより）タンパク質の変性を助けることができる。さらに、遊離スルフヒドリル基を含む成分又は材料（例えば、化学物質又は製剤）は、抗酸化剤として機能する可能性があり、及び／又はＲＮＡ安定化溶液中の溶存酸素の制御に役立つ可能性がある。いくつかの実施形態では、還元剤に加えて、又は還元剤の代わりに、還元剤ではない粘液可溶化剤を（システイン結合の還元のために）使用してもよい。

［任意の視覚的指示薬］
一部の実施形態は、視覚的指示薬を含んでもよい。視覚的指示薬は、着色剤であっても、着色剤を含んでもよい。視覚的指示薬は、染料又は着色染料であっても、それらを含んでもよい。染料又は着色染料は、青色染料であっても、又は青色染料を含んでもよい。青色染料は、ＦＤ＆Ｃ Ｂｌｕｅ Ｎｏ．１（例えば、エリオグラウシン）であっても、それを含んでもよい。従って、いくつかの実施形態では、組成物は、視覚的指示薬、好ましくは着色剤、より好ましくは着色染料、さらにより好ましくは青色染料、さらにより好ましくはＦＤ＆ＣブルーＮｏ．１を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、視覚的指示薬は、乾燥、固体、粉末、無水、及び／又は粒状の形態であっても、それを有しても、含んでも、提供してもよい。いくつかの実施形態では、視覚的指示薬は、少なくとも、最大、及び／又は約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、又は９９．９％（適切な材料アッセイで測定）の純度を有してもよい。いくつかの実施形態では、視覚的指示薬は、任意の適切な濃度（例えば、約０．０１％、０．０５％、０．０７５％、０．１％、０．１２５％、０．１５％、０．１７５％、０．２％、０．２５％、０．３％、又は０．５％ｗ／ｗの水溶液（例えば、水中）、好ましくは０．２％の濃縮物）を有するストック（溶液（例えば、水中））の形態であっても（その形態で提供しても）、それを含んでもよい。いくつかの実施形態では、ストック溶液は、乾燥、固体、粉末、無水、及び／又は粒状の材料を使用して製造してもよい。

視覚的指示薬（例えば、ＦＤ＆ＣブルーＮｏ．１）は、約０．００００５％～約０．００１％、好ましくは約０．０００１％～約０．０００７５％、より好ましくは約０．０００２％～約０．０００５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約０．０００３％～約０．０００４５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約０．０００３５％～約０．０００４％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは約０．０００３７％ｗ／ｗ、又は約０．０００４％ｗ／ｗなどの視覚的に適切な任意の量で組成物中に含んでもよい。

少なくとも１つの実施形態では、視覚的指示薬（例えば、ＦＤ＆Ｃ Ｂｌｕｅ Ｎｏ．１）は、０．２％濃縮物などの濃縮物として組成物に添加してもよい。濃縮物は、いくつかの実施形態では、水性又は水系の濃縮物であってもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、約０．０１～２．５％ｗ／ｗ、０．０１～５％ｗ／ｗ（水中）の視覚的指示薬濃縮物、好ましくは約０．０５～１％ｗ／ｗ、０．０５～１％ｗ／ｗ（水中）の視覚的指示薬濃縮物、より好ましくは約０．０７５～０．５％ｗ／ｗ、０．０７５～０．５％ｗ／ｗ（水中）の視覚的指示薬濃縮物、さらにより好ましくは約０．１～０．２５％ｗ／ｗ、０．１～０．２５％ｗ／ｗ（水中）の視覚的指示薬濃縮物、さらにより好ましくは、約０．１８５％ｗ／ｗ、０．２％ｗ／ｗ（水中）の視覚的指示薬濃縮物を含むことができる。少なくとも１つの実施形態では、視覚的指示薬（例えば、ＦＤ＆Ｃ Ｂｌｕｅ Ｎｏ．１）は、約０．２％ストック（水性）溶液又はその同等物の約０．１８５％ｗ／ｗで組成物中に含まれてもよい。いくつかの実施形態では、視覚的指示薬（例えば、ＦＤ＆ＣブルーＮｏ．１）は、約０．２％ｗ／ｗの濃縮物又はストック（水性）溶液、又はその同等物の約０．６％ｗ／ｗで組成物中に含まれてもよい。

［抗菌剤］
いくつかの実施形態では、組成物は抗菌剤を含んでもよい。いくつかの実施形態では、前述の成分の１つ以上が抗菌活性を示してもよい。例えば、アルコール、カオトロピック剤、界面活性剤、及び／又は還元剤は、いくつかの実施形態では、抗菌性であっても、抗菌活性を示してもよい。従って、特定の実施形態は、別個の抗菌剤（例えば、殺菌剤及び／又は静菌剤）を含む必要はない。１つ以上の実施形態では、アルコール（例えば、ＳＤＡ ３Ｃ）の抗菌特性は、本開示の上記の実施形態では、アルコールが提供するより低い濃度（例えば、約９．９９％～１９．９９％ｗ／ｗなど）でさえ持続する。いくつかの実施形態では、組成物は、カオトロピック剤、界面活性剤、アルコール、及び還元剤以外の抗菌剤、殺菌剤、及び／又は静菌剤を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。

［リボヌクレアーゼ阻害剤］
いくつかの実施形態は、リボヌクレアーゼ阻害剤、又はリボヌクレアーゼの阻害剤、例えばヘパリン、ヘパラン硫酸、オリゴ（ビニルスルホン酸）、ポリ（ビニルスルホン酸）、オリゴ（ビニルホスホン酸）、及びポリ（ビニルスルホン酸）、又はそれらの塩を含む。特定の（例えば、好ましい）実施形態では、組成物は、リボヌクレアーゼ阻害剤又はリボヌクレアーゼの阻害剤を含まないか、又は（実質的に）１つ以上（例えば、いずれか）のリボヌクレアーゼ阻害剤又はリボヌクレアーゼ阻害剤（例えば、固有のＲＮＡｓｅ阻害活性を有する可能性のあるＬｉＣｌなどのカオトロピック剤、界面活性剤、アルコール、及び還元剤）を含まないか又は含有しない。

［プロテアーゼ］
いくつかの実施形態は、プロテアーゼを含む。特定の（例えば、好ましい）実施形態では、組成物はプロテアーゼを含まないか、又は１つ以上（例えば、いずれか）のプロテアーゼを（実質的に）含まないか、又は含有しない。いくつかの実施形態では、組成物はプロテイナーゼＫを含まないか、又は（実質的に）含まないか又は含有しない。いかなる理論にも束縛されないが、プロテアーゼ（又はタンパク質分解酵素、ペプチダーゼ又はプロテイナーゼ）は、加水分解による１つ以上のペプチド結合を分解して、タンパク質はより小さなタンパク質断片（又はペプチド）又は個々のタンパク質サブユニット（又はアミノ酸）に変換される酵素のタイプである。

［タンパク質変性剤］
いくつかの実施形態は、１つ以上のタンパク質変性剤を含む。例えば、少なくとも１つの実施形態では、（ｉ）カオトロピック剤は、タンパク質変性剤（又はタンパク質を変性する、又はタンパク質変性活性を有する又は示す）であっても、それを含んでも、又はタンパク質変性剤として機能してもよい。少なくとも１つの実施形態では、（ｉｉ）界面活性剤／洗剤は、タンパク質変性剤（又はタンパク質を変性する、又はタンパク質変性活性を有する又は示す）であっても、それを含んでも、又はタンパク質変性剤として機能してもよい。少なくとも１つの実施形態では、（ｉｉｉ）アルコールは、タンパク質変性剤（又はタンパク質を変性する、又はタンパク質変性活性を有する又は示す）であっても、それを含んでも、タンパク質変性剤として機能してもよい。少なくとも１つの実施形態では、（ｉｖ）還元剤は、タンパク質がアクセス可能なジスルフィド結合又は架橋を含む場合など、タンパク質変性剤（又はタンパク質を変性する、又はタンパク質変性活性を有する又は示す）であっても、それを含んでも、又はそれとして機能してもよい。いくつかの実施形態では、（ｉ）カオトロピック剤、（ｉｉ）界面活性剤／洗剤、（ｉｉｉ）アルコール、及び（ｉｖ）還元剤のうちの２つ以上は、タンパク質変性剤（又はタンパク質を変性させる、又はタンパク質変性活性を有する又は示す）であっても、それを含んでも、又はそれとして機能してもよい。いくつかの実施形態では、（ｉ）カオトロピック剤、（ｉｉ）界面活性剤／洗剤、（ｉｉｉ）アルコール、及び（ｉｖ）還元剤の各々又は全ては、タンパク質変性剤（又はタンパク質を変性させるか、又はタンパク質変性剤を有するか、又はタンパク質変性剤を有するか、又は示す）であっても、それを含んでも、又はそれとして機能してもよい。

理論に拘束されるものではないが、前述の成分又は材料の１つ以上のタンパク質変性活性は、濃度及び／又は時間依存性であってもよい。

［製剤］
本開示の様々な実施形態は、キャリア、カオトロピック剤、緩衝剤、キレート剤、界面活性剤、アルコール、及び／又は還元剤を含む、核酸（例えば、ＲＮＡ）保存組成物（又は製剤）を含む。いくつかの実施形態は、組成物を好ましいｐＨ又はｐＨ範囲にするために、任意の酸又は塩基をさらに含む。いくつかの実施形態は、任意の視覚的指示薬をさらに含む。

本開示の一実施形態は、キャリア、バッファ又は緩衝剤、及び（金属）キレート剤を含むリボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物を含む。本開示の他の実施形態は、キャリア、緩衝剤、キレート剤、及びカオトロピック剤を含むＲＮＡ保存組成物を含む。本開示の他の実施形態は、キャリア、緩衝剤、キレート剤、カオトロピック剤、及び洗剤又は界面活性剤を含むＲＮＡ保存組成物を含む。本開示の他の実施形態は、キャリア、緩衝剤、キレート剤、カオトロピック剤、及びアルコールを含むＲＮＡ保存組成物を含む。本開示の他の実施形態は、キャリア、緩衝剤、キレート剤、カオトロピック剤、及び還元剤を含むＲＮＡ保存組成物を含む。本開示の他の実施形態は、キャリア、緩衝剤、キレート剤、カオトロピック剤、還元剤、及びアルコールを含むＲＮＡ保存組成物を含む。本開示の他の実施形態は、キャリア、緩衝剤、キレート剤、カオトロピック剤、還元剤、及び洗剤（又は界面活性剤）を含むＲＮＡ保存組成物を含む。本開示の他の実施形態は、水性キャリア、カオトロピック剤、緩衝剤、（金属）キレート剤、洗剤（又は界面活性剤）、アルコール、及び還元剤を含むＲＮＡ保存組成物を含む。

いくつかの実施形態では、酸（又は塩基）を加えて、適切な最終ｐＨを達成してもよい。組成物は、４～７のｐＨを有しても、そして／又は適量の酸を有して４～７のｐＨにしてもよい。好ましくは、組成物は、約５．５のｐＨを有しても、そして／又は適量の酸を有して約５．５のｐＨにしてもよい。組成物は、任意の視覚的指示薬も含んでもよい。

一実施形態は、例えば、１～１０％ｗ／ｗのカオトロピック剤、１～１０％ｗ／ｗの緩衝剤、０．０１～２％ｗ／ｗのキレート剤、１～５％ｗ／ｗの界面活性剤、５～４０％ｗ／ｗのアルコール、及び／又は０．０１～０．２％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよい。組成物は、ｐＨ４～７、又は適量の酸を有してｐＨ４～７にしてもよい。組成物は、適量から１００％のキャリアを有してもよい。一実施形態は、０．００５～２．５％ｗ／ｗの視覚的指示薬をさらに含んでもよい。

一実施形態は、例えば、約３％～７％ｗ／ｗのカオトロピック剤、約４～６％ｗ／ｗの緩衝剤、約０．１～０．３％ｗ／ｗのキレート剤、約２％～４％ｗ／ｗの界面活性剤、約９％～２１％のアルコール、及び／又は約０．１～０．２５％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよい。

一実施形態は、例えば、約３．３３％～６．６５％ｗ／ｗのカオトロピック剤、約５．９９％ｗ／ｗの緩衝剤、約０．２％ｗ／ｗのキレート剤、約２．９９％ｗ／ｗの界面活性剤、約９．９８％～１９．９６％ｗ／ｗのアルコール、及び／又は約０．１７％ｗ／ｗの還元剤を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、組成物は、微生物（例えば、細菌、真菌、及び／又はウイルス）汚染を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、（約）１００ｃｆｕ／ｇ以下の細菌又は細菌汚染を有してもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、（約）９９、９８、９７、９６、９５、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、又は５ｃｆｕ／ｇの細菌又は細菌汚染を有してもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、（約）１００ｃｆｕ／ｇ以下の真菌（又は酵母及び／又はカビなどの真菌）又は真菌汚染を有してもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、（約）９９、９８、９７、９６、９５、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、又は５ｃｆｕ／ｇ真菌（又は酵母及び／又はカビなどの真菌）又は真菌汚染を有してもよい。本明細書で使用される場合、「ｃｆｕ／ｇ」は、（（最終及び／又ｗは液体）組成物の）ｇあたりの（１つ以上の微生物の）コロニー形成単位を指す。

以下の表は、本開示による組成物の様々な例示的で非限定的な実施形態を示す。

前述の製剤のいずれか、又は本開示の他の実施形態に、適切な量の視覚的指示薬（例えば、ＦＤ＆Ｃ Ｂｌｕｅ Ｎｏ．１（エリオグラウシン）の０．２％濃縮物の０．２％ｗ／ｗ）を加えてもよい。

図１及び図２は、本開示の組成物の様々な特定の製剤についてのＲＮＡ収量（図１）及びＲＮＡ品質スコアデータ（図２）を示す。各例では、示された１．５ｍＬのＲＮＡ保存溶液を１．５ｍＬの（ヒト）唾液に加えた。サンプルの保存テストは、室温で５日後、及び冷蔵で７日後に行われた。本開示の組成物の特定の製剤の各々が、その後の分析のために十分な量及び質のＲＮＡをもたらすことが理解されるであろう。長期保存試験の結果（図示せず）は、本発明の組成物がヒト唾液サンプルからの溶液中のＲＮＡを、室温で５日、冷蔵で７日をはるかに超えて安定化することを示す。

図３Ａ～図３Ｃ、図４Ａ～図４Ｃ、及び図５Ａ～図５Ｃは各々、ＲＮＡ保存組成物１．０で、唾液サンプルから抽出したＲＮＡを収集直後（図３Ａ～図３Ｃ）、室温で４８時間保存後（図４Ａ～図４Ｃ）、凍結（－８０℃）で４８時間保存した後（図５Ａ～図５Ｃ）、収量（Ａ）、純度（Ｂ）、及び忠実度（Ｃ）結果を示す。試験は、保存剤の２つの独立したバッチ（全て作成後３０～６０日間、室温及び４℃で保管されたもの）を使用して完了した。試験は、テストされた全ての変数にわたって５人の独立した被験者を使用して行われた。全血ＤＮＡ抽出用に最適化されたＣｈｅｍａｇｅｎビーズ系の抽出薬品は、全てのＲＮＡ抽出に使用された。保存剤と唾液のいくつかの比率（２：１、１：１、１：２）が評価された。結果は、本発明のＲＮＡ保存組成物での保存は、純度及び品質を保持しながら、即時抽出よりも収量を増加できることを示す。さらに、いくつかの実施形態では、保存剤と唾液の１：１の比率又は１：２の比率（ｖ／ｖ）が最適であってもよい。

［キット］
本開示の１つ以上の実施形態は、生物学的サンプル収集及び／又は保存キットなどのキットを含んでもよい。１つ以上の実施形態では、本開示の組成物は、キットに含まれても、キットに組み込まれてもよい。いくつかの実施形態は、生物学的サンプル収集装置（又は容器）及び本開示の組成物を含むキットを含んでもよい。例示的なサンプル収集装置は、サンプル収集部分を有する容器又はバイアル（例えば、管）を含んでもよい。例えば、容器は、内部区画に少なくとも部分的に接する外壁を含んでもよい。容器は、区画と流体連通する開口部を有してもよい。容器は、装置の開口部を閉鎖又は密封するためのキャップを有してもよい。

少なくとも１つの実施形態では、組成物は、サンプル収集装置の一部に配置してもよい。例として、内部区画は、生物学的サンプルを加えてもよい組成物を含んでもよい。あるいは、サンプルを区画に加え、組成物を収集後にサンプルに加えてもよい。従って、収集装置（又は容器）は、生物学的サンプル（例えば、その内部区画内）を受け取り、そこに組成物を加えるように構成してもよい。例えば、装置は、サンプル収集の前又は後に、区画に組成物を加えるための組成物ディスペンサを含んでもよい。例えば、いくつかの実施形態では、組成物は、デバイスのキャップ又は蓋の一部に配置してもよい。キャップは、組成物が容器の区画に追加されるまで、組成物を保持するための区画を有してもよい。いくつかの実施形態では、蓋を閉じることにより、生物学的サンプルが配置される区画に組成物を散布してもよい。

いくつかの実施形態では、キット内の組成物は、（前記のように）微生物汚染を実質的に含まないか、又は含有しなくてもよい。

［製造方法］
いくつかの実施形態は、本開示の組成物を製造する方法を含む。実施形態は、本明細書に記載されるように、キャリアを提供又は取得するステップを含んでもよい。実施形態は、キャリアに、本明細書に記載の１つ以上の成分又は材料の適切な量を（例えば、本明細書に記載の最終濃度まで）添加するステップを含んでもよい。実施形態は、本明細書に記載の１つ以上の成分又は材料の記載された量のストック溶液をキャリアに添加するステップを含んでもよい。

少なくとも１つの実施形態は、カオトロピック剤、緩衝剤、キレート剤、界面活性剤、アルコール、及び／又は還元剤をキャリアに添加するステップを含む。１つ以上の実施形態は、キャリアに任意の酸及び／又は視覚的指示薬を添加することを含んでもよい。

少なくとも１つの実施形態は、（液体）キャリアに、カオトロピック剤を最終濃度１～１０％ｗ／ｗ、緩衝剤を最終濃度１～１０％ｗ／ｗ、キレート剤を最終濃度０．０１～２％ｗ／ｗ、界面活性剤を最終濃度１～５％ｗ／ｗ、アルコールを最終濃度５～３０％ｗ／ｗ、及び／又は還元剤を最終濃度０．０１～２％ｗ／ｗに添加することを含む。少なくとも１つの実施形態は、（液体）キャリアに、任意にｐＨ４～７（又は４より大きく７未満）の適量の酸及び／又は視覚的指示薬を最終濃度０．００００５～０．５％ｗ／ｗに添加することを含む。キャリアは、適量から１００％まで含んでもよい。本明細書に記載の他の濃度も考えられる。

いくつかの実施形態では、カオトロピック剤はＬｉＣｌであるか、又はそれを含み、緩衝剤はクエン酸ナトリウムであってもそれを含んでもよく、キレート剤はＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ二ナトリウム（塩）二水和物であってもそれを含んでもよく、界面活性剤はＳＬＳであってもそれを含んでも、アルコールはエタノール及び／又はイソプロパノール（例えば、ＳＤＡ ３Ｃ）であってもそれを含んでもよく、還元剤はＴＣＥＰであってもそれを含んでもよく、酸はＨＣｌであってもそれを含んでもよく、キャリアは（ＲＮＡｓｅを含まない）水であってもそれを含んでもよく、及び／又は任意の視覚的指示薬は、ＦＤ＆Ｃ Ｂｌｕｅ Ｎｏ．１であっても、それを含んでもよい。

核酸又はＲＮＡの安定化及び／又は保存組成物を製造する方法は、容器にキャリアを添加するステップ（例えば、混合タンクに（濾過、脱イオンなど）水を充填するステップ）を含んでもよい。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の成分又は材料がキャリアに追加される前に、ミキサを作動させてもよい。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の成分又は材料がキャリアに追加された後にミキサを作動させてもよい。いくつかの実施形態では、ミキサを速度設定２～８、好ましくは３～７、より好ましくは４～６、さらにより好ましくは５及び／又はスイープ設定２～８、好ましくは３～７、より好ましくは４～６、さらにより好ましくは５に設定してもよい。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の成分又は材料をキャリアに加える前に、キャリアを適切な混合温度に加熱してもよい。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の成分又は材料をキャリアに加えた後に、キャリアを適切な混合温度に加熱してもよい。いくつかの実施形態では、適切な混合温度は、（約）５５～９５±５°Ｆ、好ましくは６０～９０±５°Ｆ、より好ましくは６５～８５±５°Ｆ、さらにより好ましくは７０～８０±５°Ｆ、最も好ましくは７５±５°Ｆであってもよい。

いくつかの実施形態では、適切な量のカオトロピック剤（例えば、ＬｉＣｌ）を（例えば、組成物の約１％～１０％ｗ／ｗの最終濃度まで）キャリアに加えてもよい。いくつかの実施形態では、カオトロピック剤は、一定時間（例えば、３０～３００分、好ましくは６０～２４０分、より好ましくは１２０～１８０、さらにより好ましくは１４０～１６０分、最も好ましくは１５０分）又はカオトロピック剤がキャリアに（溶液中に）溶解するまで混合してもよい。

いくつかの実施形態では、適切な量の緩衝剤（例えば、クエン酸ナトリウム）を（例えば、組成物の約１％～１０％ｗ／ｗの最終濃度まで）キャリアに加えてもよい。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、一定時間（例えば、１～９０分、好ましくは５～６０分、より好ましくは１０～４５、さらにより好ましくは１２～３０分、さらにより好ましくは１５～２５分、最も好ましくは（約）２０分）、又は緩衝剤がキャリアに（溶液中）溶解するまで混合してもよい。

いくつかの実施形態では、適切な量のキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ、ＥＤＴＡ二ナトリウム塩、ＥＤＴＡ二ナトリウム（塩）二水和物）を（例えば、組成物の約０．０１％～２％ｗ／ｗの最終濃度まで）キャリアに加えてもよい。いくつかの実施形態では、キレート剤は、一定時間（例えば、１～９０分、好ましくは５～６０分、より好ましくは１０～４５、さらにより好ましくは１２～３０分、さらにより好ましくは１５～２５分、最も好ましくは（約）２０分）、又はキレート剤がキャリアに（溶液中に）溶解するまで混合してもよい。少なくとも１つの実施形態では、（概略）同時に、同時に、同時に、及び／又は（実質的に）同時に（又は同時に）、共に事前混合されているかどうかにかかわらず、緩衝剤及びキレート剤を共にキャリアに加えてもよい。いくつかの実施形態では、緩衝剤及びキレート剤は、キャリアに別々に添加してもよい。

いくつかの実施形態では、適切な量の界面活性剤（例えば、ＳＬＳ）を（例えば、組成物の約１％～５％ｗ／ｗの最終濃度まで）キャリアに添加してもよい。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、一定時間（例えば、１～９０分、好ましくは５～６０分、より好ましくは１０～４５分、さらにより好ましくは１５～３５分、さらにより好ましくは２０～３０分、最も好ましくは（約）２５分）、又は界面活性剤がキャリアに（溶液中に）溶解するまで混合してもよい。

いくつかの実施形態では、適切な量のアルコール（例えば、エタノール、エタノールとイソプロパノールなどの別の化学物質の混合物、又はＳＤＡ、好ましくはＳＤＡ ３Ｃ）を（例えば、組成物の約５％～３０％ｗ／ｗの最終濃度まで）キャリアに加えてもよい。いくつかの実施形態では、アルコールは、一定時間（例えば、５～９０分、好ましくは１０～７５分、より好ましくは１５～６０、さらにより好ましくは２５～４５分、さらにより好ましくは３０～４０分、最も好ましくは（約）３５分）、又はアルコールが（溶液中に）キャリアに溶解するまで混合してもよい。

いくつかの実施形態では、適切な量の任意の視覚的指示薬（例えば、着色剤、染料、好ましくはＦＤ＆Ｃ Ｂｌｕｅ Ｎｏ．１などの青色染料）を（例えば、組成物の約０．０００３７％ｗ／ｗの最終濃度まで）キャリアに加えてもよい。いくつかの実施形態では、視覚的指示薬は、一定時間（例えば、５～９０分、好ましくは１０～６０分、より好ましくは１５～４５、さらにより好ましくは１０～３０分、さらにより好ましくは１５～２５分、最も好ましくは（約）２０分）、又はアルコールがキャリアに（溶液中）溶解するまで混合してもよい。

いくつかの実施形態では、適切な量の酸（例えば、塩酸）を、（例えば、適量のｐＨ４～７）キャリアに加えてもよい。いくつかの実施形態では、酸は、一定時間（例えば、５～９０分、好ましくは１０～６０分、より好ましくは１５～４５分、さらにより好ましくは１０～３０分、さらにより好ましくは１５～２５分、最も好ましくは（約）２０分）、又は酸がキャリアに（溶液中に）溶解するまで、及び／又は混合物が所望のｐＨで平衡化するまで混合してもよい。

いくつかの実施形態では、適切な量の粘液可溶化剤（又は還元剤）（例えば、ＴＣＥＰ）を、（例えば、組成物の約０．０１％～２％ｗ／ｗの最終濃度まで）キャリアに加えてもよい。いくつかの実施形態では、酸は、一定時間（例えば、５～９０分、好ましくは１０～６０分、より好ましくは１５～４５分、さらにより好ましくは１０～３０分、さらにより好ましくは１５～２５分、最も好ましくは（約）２０分）、又は酸がキャリアに（溶液中に）溶解し、及び／又は混合物が所望のｐＨで平衡化するまで混合してもよい。

例示的な製造方法を以下に提供する（表１～１６を参照）。

ステップ１。ＲＮＡｓｅを含まない容器内で、周辺温度で成分１～４を組み合わせる。

ステップ２。最低４時間、又は目に見えて完全に溶解するまで材料を混ぜる。

ステップ３。材料５～６を溶液に加える（項目５は溶液１．０には含まれない）。

ステップ４。最低３０分間、又は目に見えて完全に溶解するまで混合を続ける。

ステップ５。ｐＨをチェックする。材料７でｐＨ５．５に調整し、使容量を記録する。

ステップ６。材料９を溶液に加える（材料８は溶液１．０でのみ使用される）。

ステップ７。完全に溶解するまで混合を続ける。

ステップ８。ＲＮＡｓｅを含まない水（材料１）を追加して、最終容量を１５０ｍＬに調整する。使容量に注意する。

ステップ９。０．２ミクロンのフィルタを介して、ラベルが貼られた、ＲＮＡｓｅを含まない新しい容器に濾過する（滅菌濾過）。

ステップ１０。密閉可能な蓋を使用して、容器を閉じる。溶液は室温で保存できる。

品質管理テストは、製造中の適切な時点で実行できる。例えば、各バッチの大量製造プロセスが完了すると、２つのサンプル（各々約４オンス）が、タンクの中心近くのバッチの上面、タンクの側壁近くのバッチの上面、タンクの中心近くのバッチの中央、タンクの側壁近くのバッチの中央、タンクの中心近くのバッチの底、およびタンクの側壁近くのバッチの底の各場所からサンプルを取得するための清潔で消毒された承認済みの適切なツールを使用して、バルクブレンドタンクから無菌的に取得された。各サンプルを滅菌カップに入れ、ラベル付けをした。

各サンプルは、適切な外観、比重、及びｐＨについてテストされる。さらに、キレート剤、アルコール、及び還元剤の協調及び／又は有効性をテストするために、アッセイを行った。さらに、総好気性プレート数、酵母とカビ、黄色ブドウ球菌、緑膿菌を測定することにより、汚染（微生物限界）をテストした。表１７は、さまざまな品質管理手段のテスト仕様を示す。

いくつかの実施形態では、この方法は、組成物を適切な保管容器又はサンプル収集装置の一部（例えば、容器又はバイアル（例えば、管）の組成物保管部分）に密封するステップを含んでもよい。サンプルはまた、貯蔵容器及びサンプル収集装置において、制御された室温（ＣＲＴ）および加速（ＡＣＣ）安定性試験に供された。

いくつかの実施形態では、この方法は、（前記のように）微生物汚染が実質的に含まなくても、含有しなくても、組成物を生成又はもたらすことができる。

［使用方法］
いくつかの実施形態は、リボ核酸を保存及び／又は安定化する方法を含む。この方法は、リボ核酸を含む生物学的サンプルを提供するステップ、及び本開示の組成物を生物学的サンプルと組み合わせるステップを含んでもよい。少なくとも１つの実施形態では、生物学的サンプルは、痰又は唾液などのムチン含有体液又は組織であってもよい。この方法は、ムチン含有体液又は組織の粘性を低下させるステップを含んでもよい（例えば、ムチンに固有のジスルフィド結合を粘液可溶化剤又は還元剤で還元することによる）。いくつかの実施形態では、生物学的サンプルは、血液サンプル、脳脊髄液サンプル、尿サンプルなどの体液サンプルであってもよい。いくつかの実施形態では、生物学的サンプルは、細胞サンプル、器官サンプル、又は組織サンプルであってもよい。いくつかの実施形態では、生物学的サンプルはアーム細胞又は組織サンプルであってもよい。

少なくとも１つの実施形態では、核酸はＲＮＡである。いくつかの実施形態では、組成物は、核酸又はＲＮＡを、（例えば、分解によって）安定してもよい。理論に拘束されることなく、ＲＮＡは特定の条件下（例えば、溶液中及び／又はヌクレアーゼ、好ましくない温度、ＵＶ光、及び／又はさまざまな化学物質にさらされた場合）で非常に不安定及び／又は分解に敏感であることが知られている。安定化又は保存試薬（溶液中）は、分析を実行できるようになるまで、ＲＮＡ（の少なくとも一部分）の生存を確保するために、保管、出荷、取り扱い、及び前処理ステップ中に、生物学的サンプル（唾液サンプルなど）でのＲＮＡを保存及び／又は安定化するために必要である。一般に、ＲＮＡの保存又は安定化は、ＤＮＡの保存又は安定化よりもはるかに困難であると考えられており、既存のＲＮＡ保存および安定化溶液は、輸送、取り扱い、および前処理中に唾液などの特定の生物学的サンプルからのＲＮＡを安定化するため、および／又は同じことを実行するための特定のタイプの分析技術またはデバイスに最適でない場合がある。

いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、（溶液中及び／又は生物学的（例えば唾液）サンプルからの）ＲＮＡを第１の期間安定してもよい。いくつかの実施形態では、第１の期間は、約１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、２１日、２８日、３０日、４５日、６０日、９０日、１２０日、２４０日、３００日、又は３６５日以上であってもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、（溶液中及び／又は生物学的（例えば唾液）サンプルからの）ＲＮＡを（ｉ）室温、約１５℃から３０℃、又は約２０℃から２５℃、（ｉｉ）冷蔵、約１℃から２０℃、又は約１℃から１５℃、（ｉｉｉ）冷凍、約－８０℃から０℃、又は約－２０℃から０℃の間、又は（ｉｖ）他の適切な温度又は温度範囲で安定化させる。実際、本開示の組成物は、冷蔵（例えば、約１℃から１５℃、好ましくは約１℃から１０℃、より好ましくは約１℃から８℃、さらにより好ましくは約１℃から６℃、さらにより好ましくは約２℃から６℃、最も好ましくは約４℃）で少なくとも７日間、（溶液中及び／又は生物学的（例えば唾液）サンプルからの）ＲＮＡ（適切な量）を安定化することが示されている。さらに、本開示の組成物は、（適切な量の）ＲＮＡ（溶液中及び／又は生物学的（例えば唾液）サンプルから）を室温（例えば、約１５℃から３０℃、好ましくは約２０℃から２５℃、より好ましくは約２１℃から２５℃、さらにより好ましくは約２２℃から２４℃、最も好ましくは約２３℃）で少なくとも５日間安定化することが示されている。

前述にもかかわらず、適切な量のＲＮＡは、７日（冷蔵）及び５日（室温）をはるかに超えて持続するようである。予測データ（図示せず）に基づいて試験が進行中の間、本開示の組成物は、（溶液中及び／又は生物学的（例えば唾液）からの）（適切な量の）ＲＮＡを、少なくとも７日間、好ましくは少なくとも８日間、より好ましくは少なくとも９日間、さらにより好ましくは少なくとも１０日間、さらにより好ましくは少なくとも１１日間、さらにより好ましくは少なくとも１２日間、さらにより好ましくは少なくとも１３日間、さらに好ましくは少なくとも１４日間、室温（例えば、約１５℃から３０℃、好ましくは約２０℃から２５℃、より好ましくは約２１℃から２５℃、さらにより好ましくは約２２℃から２４℃、最も好ましくは約２３℃）、及び少なくとも１０日間、好ましくは少なくとも１１日間、より好ましくは少なくとも１２日間、さらにより好ましくは少なくとも１３日間、さらにより好ましくは少なくとも１４日、さらにより好ましくは少なくとも１５日、さらにより好ましくは少なくとも１６日、より好ましくは少なくとも１７日、さらにより好ましくは少なくとも１８日、さらにより好ましくは少なくとも１９日、さらにより好ましくは少なくとも２０日、さらにより好ましくは少なくとも２１日冷蔵（例えば、約１℃から１５℃、好ましくは約１℃から１０℃、より好ましくは約１℃から８℃、さらにより好ましくは約１℃から６℃、さらにより好ましくは約２℃から６℃、最も好ましくは約４℃）、安定化するのに効果的であると予想される。

いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、第２の期間安定（例えば、貯蔵安定）であってもよい。いくつかの実施形態では、第２の期間は、約１２ヶ月、１８ヶ月、２４ヶ月、３０ヶ月、又は３６ヶ月以上であってもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、（ｉ）室温、約１５℃から３０℃、又は約２０℃から２５℃、（ｉｉ）冷蔵、約１℃から２０℃、又は約１℃から１５℃の間、（ｉｉｉ）凍結、約－８０℃から０℃、又は約－２０℃から０℃の間、又は（ｉｖ）他の適切な温度又は温度範囲の間で安定であり得る。実際、本開示の組成物は、少なくとも６０日間、冷蔵で（例えば、約１℃から１５℃、好ましくは約１℃から１０℃、より好ましくは約１℃から８℃、さらに好ましくは約１℃から６℃、さらにより好ましくは約２℃から６℃、最も好ましくは約４℃）安定であることが示されている。さらに、本開示の組成物は、室温（例えば、約１５℃から３０℃、好ましくは約２０℃から２５℃、より好ましくは約２１℃から２５℃、さらにより好ましくは約２２℃から２４℃、最も好ましくは約２３℃）で少なくとも３０日間（貯蔵）安定であることが示されている。

前述にもかかわらず、本開示の組成物は、６０日（冷蔵）及び３０日（室温）をはるかに超えて（貯蔵）安定であるようである。表１～１６の実施形態組成物にリストされた各成分は、リストされた濃度の水中で本質的に安定であることに留意する。いくつかの実施形態では、各材料の濃度は、冷蔵だけでなく、周辺温度又は室温での長期（貯蔵）安定性を達成するのに十分に低く保持される。試験が進行中の間、表１～１６に示される組成物、ならびに本開示の他の組成物、それに類似する組成物、及び／又は１つ以上の材料を含む組成物は、開示された濃度範囲内（本開示の実施形態で組み合わせるように）、周辺温度又は室温で、及び冷蔵で、少なくとも１年間は（貯蔵）安定である。

少なくとも１つの実施形態は、唾液又は痰から核酸（例えば、ＲＮＡ）を回収する方法を含み、ｉ）対象から唾液又は痰を得るステップ、ｉｉ）唾液又は痰を本開示の組成物と接触させ、サンプル混合物を形成するステップ、ｉｉｉ）任意に、混合物をプロテアーゼと接触させるステップ、ｉｖ）混合物から核酸（例えば、ＲＮＡ）を回収するステップを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、回収されたＲＮＡに対してＲＮＡ分析を行うことをさらに含んでもよい。１つ以上の実施形態では、本開示のＲＮＡ保存溶液（例えば、表１～１６に例示的に示す）１．５ｍＬを、（ヒト）唾液又は痰１．５ｍＬに添加する。

少なくとも１つの実施形態は、生体液サンプルから核酸（例えば、ＲＮＡ）を回収する方法を含み、ｉ）対象から生体液を得るステップ、ｉｉ）生体液を本開示の組成物と接触させ、サンプル混合物を形成するステップ、ｉｉｉ）任意に混合物をプロテアーゼと接触させるステップ、及びｉｖ）混合物から核酸（例えば、ＲＮＡ）を回収するステップを含む。１つ以上の実施形態では、本開示のＲＮＡ保存溶液（例えば、表１～１６に例示的に示す）１．５ｍＬを（ヒト）体液１．５ｍＬに添加する。

少なくとも１つの実施形態は、組織サンプルから核酸（例えば、ＲＮＡ）を回収する方法を含み、ｉ）対象から組織を取得するステップ、ｉｉ）組織を本開示の組成物と接触させてサンプル混合物を形成するステップ、ｉｉｉ）任意に、混合物をプロテアーゼと接触させるステップ、及びｉｖ）混合物から核酸（例えば、ＲＮＡ）を回収するステップを含む。１つ以上の実施形態では、１．５ｍＬの本開示のＲＮＡ保存溶液（例えば、表１～１６に例示的に示す）は、組織又は細胞サンプルの適切な体積又は塊である。いくつかの実施形態では、安定化溶液の存在下で組織を均質化してもよい。

いくつかの実施形態では、生物学的サンプルに適切な量で加えられる場合、本開示の組成物は、その後の核酸分析、例えば、ＲＮＡ（例えば、ナノストリング）の直接検出、ＲＮＡのｃＤＮＡへの逆転写、ＤＮＡ増幅（例えば、ＰＣＲによる）、核酸（ＤＮＡ）シーケンス（例えば、次世代（ＮｅｘｔＧｅｎ）シーケンス、マイクロアレイ分析など）を有意に阻害または妨害せず、これは、遺伝子発現分析に有用であり得る。

［サンプル収集］
本開示のいくつかの実施形態は、生物学的サンプル（例えば、ヒト対象などの対象から）を入手、提供、及び／又は収集するステップを含む。いくつかの実施形態では、生物学的サンプルは、（ヒト）唾液、体液、組織などであっても、それらを含んでもよい。（ヒト）サンプルは、（（微生物）汚染を避けるために）無菌的に収集してもよい。１つ以上の実施形態では、サンプルは、サンプル収集装置又はそのサンプル容器に収集してもよい。いくつかの実施形態では、サンプル収集装置又は容器はキットの一部であってもよく、及び／又は本開示の組成物を含んでもよい。実施形態は、サンプルを本開示の組成物と接触させるステップを含んでもよい。

［ＲＮＡの抽出と分析］
本開示のいくつかの実施形態は、生物学的サンプルから核酸（例えば、ＲＮＡ）を抽出するステップを含む。以下、本開示の組成物での使用に適している可能性のある、抽出又は抽出順序の様々なモードの非網羅的なリスト又は説明である。

［抽出化学］
有機－フェノールクロロホルム抽出は、研究室と臨床検査室の両方で採用されている一般的な順序／メカニズムであり、組織ソースに関してはサンプルの種類に依存すると考えられている。本開示のいくつかの実施形態では、（受動（手＃動））フェノール／クロロホルム抽出プロトコル、続いて有機溶媒混入の除去を助けるクロロホルム逆抽出が、全ＲＮＡを抽出するために行われる及び／又は行われ得る。

固相－いかなる理論にも束縛されないが、核酸精製用の固相支持体にＤＮＡを結合させるためのスピンカラム及び真空マニホールド溶液は、ＲＮＡ精製に適合する場合がある。ＲＮＡが支持体に付着したら、一連の洗浄を行うことができる。最終的に、ＲＮＡは、分析のために少量の固体支持体から溶出される可能性がある。スピンカラム化学は、研究室と臨床研究室の両方で多くの場合使用される。

ビーズ系－ビーズ又は（常磁性ビーズ）は、全体のＲＮＡを結合するために、さまざまな結合部分を使用して、又は電荷によって調製される。ビーズは磁場によって捕捉されるため、ビーズに結合していないものは全て、精製プロセスの一環として洗い流すことができる。洗浄が完了すると、ＲＮＡを可溶化する溶液を使用して核酸をビーズから溶出し、その後、磁場を再度適用することによってビーズを除去する。研究及び臨床環境におけるこのアプローチには、少量及び大量の自動化溶液がある。

本開示のいくつかの実施形態では、１つ以上の市販のキット又は化学物質の結合緩衝液、又は他の緩衝液、試薬などは、本開示の１つ以上の組成物と適合性があるように改変（最適化）され得る。例えば、ｐＨとバッファ組成の変化は、基質へのＲＮＡ結合の効率に直接影響を与える可能性があり、抽出収率や、任意にサンプルの品質に影響を与える可能性がある。

［分析的アプローチ］
いくつかの実施形態は、抽出された核酸（例えば、ＲＮＡ）の処理及び／又は分析を含む。抽出された核酸（ＲＮＡなど）の分析には、いくつかの方法がある。以下、本開示の組成物での使用に適している可能性がある抽出された核酸（例えば、ＲＮＡ）を分析するための様々な方法の非網羅的なリスト又は説明である。

［ＲＴ－ＰＣＲ］
逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）分析は、定性的及び定量的ＲＮＡ分析のための迅速で費用効果の高い手段である。ＲＮＡは逆転写及び増幅され、任意に、（例えば、ｄｓＤＮＡ結合染料蛍光によって）リアルタイムで増幅を監視する。又は、（さまざまな大きさのアンプリコンの）一連のＰＣＲ反応が全ての逆転写ｃＤＮＡテンプレートから生成され、正しい大きさの増幅産物を得るために電気泳動によって分離される。ＰＣＲアンプリコン大きさの範囲は、全てのＲＮＡ抽出産物の忠実度に関する情報を提供する。

［ｑＰＣＲ］
定量的ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）は、ＰＣＲアンプリコンの定量に二重標識蛍光プローブを使用する。Ｔａｑｍａｎ薬品を利用した絶対的及び示差的な遺伝子発現は、全ての抽出アプローチにわたって収集及び抽出されたＲＮＡ転写物の絶対量及び相対量の両方を決定するために使用される。対象の遺伝子発現レベルは、分析されている全ての変数の存在量と相対的な違いについて測定される。全ての定量的測定は三重で行われる。

［ｄＰＣＲ］
デジタルＰＣＲ（ｄＰＣＲ）は、サンプル中の遺伝子発現標的を限られた量及び／又は限られた品質で高感度に検出するために採用されている新しい技術である。抽出された全てのＲＮＡサンプルの絶対感度を決定するために、同じＴａｑｍａｎアッセイが使用される。ｄＰＣＲの感度を考えると、分析されている各転写物の最終的な検出レベルを決定することができる。

［マイクロアレイ］
ＲＮＡ転写物の同時測定は、単一のＲＮＡサンプルの発見と臨床分類の両方に関して、非常に大きな意味を持つ。感度と特異性の要件はＱＰＣＲ 系の分析とは完全に異なり、遺伝子発現定量のアプローチも異なる。この分析アプローチは、ＲＮＡ転写物の定量化にハイブリダイゼーション系のメカニズムを使用するためである。異なるＲＮＡ抽出薬品で処理されたドナー全体の相対的な遺伝子発現レベルは、重要な分析終点になる。

［ＮｅｘｔＧｅｎ シーケンス-ＲＮＡ－Ｓｅｑ］
本明細書で使用される「次世代シーケンス」（ＮＧＳ）は、ハイ処理量シーケンスとしても知られており、非サンガー系のハイ処理量ＲＮＡシーケンス技術を指す。ＮＧＳにより、数百万又は数十億のＲＮＡストランドを並行してシーケンスできるため、処理量が大幅に向上し、サンガーゲノムのシーケンスでよく使用される断片クローニング方法の必要性が最小限に抑えられる。ＮＧＳは、ピロシーケンス、合成によるシーケンス、ライゲーションによるシーケンス、イオン半導体シーケンス、及び当技術分野で知られている他のものを含む、さまざまな最新のシーケンス技術又はプラットフォームを説明するために使用される包括的な用語である。

当業者には理解されているように、ＮＧＳは一般に、大量のＲＮＡのシーケンスをサンガーシーケンスよりはるかに迅速かつ手頃な価格で可能にする。ＮＧＳでは、膨大な数のショートリードが１回のストロークでシーケンスされる。これを行うには、まず入力サンプルを短いセクションに切断する。これらのセクションの長さは、使用される特定のシーケンス機構によって異なる。特定のＮＧＳ技術の実例には、例えば、Ｉｌｌｕｍｉｎａ（登録商標）（ＳＢＳ薬品）シーケンス、Ｉｏｎ ｔｏｒｒｅｎｔ、Ｓ５シーケンスなどが含まれる。

Ｒｏｃｈｅ ａｎｄ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓによって以前に提供されたＮｅｘｔＧｅｎ技術も、特定の実施形態に適している場合がある。理論に縛られることなく、Ｒｏｃｈｅ４５４シーケンスは、Ｉｌｌｕｍｉｎａ（登録商標）よりも長いリードのシーケンスに適している可能性がある。Ｉｌｌｕｍｉｎａ（登録商標）のように、塩基が追加されるときに光信号を読み出すことにより、複数のリードを一度にシーケンスすることによりこれを行うことができる。Ｉｌｌｕｍｉｎａ（登録商標）の場合と同様に、ＤＮＡ又はＲＮＡはより短いリード（この場合は最大１ｋｂ）に断片化される。一般的なアダプターが末端に追加され、ビーズごとに１つのＤＮＡ断片でビーズにアニールされる。断片は、アダプター特異的プライマーを使用してＰＣＲによって増幅される。次に、各ビーズをスライドの１つのウェルに配置する。従って、各ウェルには、単一のシーケンスの多くのＰＣＲコピーで覆われた単一のビーズが含まれる。ウェルには、ＤＮＡポリメラーゼとシーケンスバッファも含まれている。スライドには、４つのＮＴＰ種のうちの１つがあふれている。このヌクレオチドがシーケンスの次の場所にある場合、それはシーケンスリードに追加される。その単一塩基が反復すると、さらに追加される。従って、グアニン塩基が大量にあり、シーケンスの次の部分がＧの場合、１つのＧが追加されるが、シーケンスの次の部分がＧＧＧＧの場合、４つのＧが追加される。各ヌクレオチドの付加は、光信号を放出する。これらの信号の位置が検出され、ヌクレオチドが追加されたビーズを決定するために使用される。このＮＴＰミックスは洗い流される。次のＮＴＰミックスが追加され、プロセスが繰り返され、４つのＮＴＰが循環する。この種のシーケンスでは、各シーケンスリードのグラフが生成され、各ヌクレオチド洗浄の信号密度が示される。シーケンスは、各洗浄の信号密度から算出で決定できる。サイクルごとに異なる数の塩基が追加されるため、４５４から取得する全てのシーケンスリードは異なる長さになる。

イルミナのシーケンスでは、１００～１５０ｂｐのリードが使用される。やや長い断片は、一般的なアダプターにライゲートされ、アダプターを使用してスライドにアニールされる。ＰＣＲを実行して各リードを増幅し、同じリードのコピーを複数含むスポットを作成する。その後、それらはシーケンスのために一本鎖に分離される。スライドには、ヌクレオチドとＤＮＡポリメラーゼがあふれている。これらのヌクレオチドは、塩基に対応する色で蛍光標識されている。ターミネーターも付いているため、一度に追加される塩基は１つだけである。スライドの画像が撮影される。各リード位置には、追加された塩基を示す蛍光信号がある。その後、スライドは次のサイクルに向けて準備される。ターミネーターが取り除かれ、次の塩基が付加され、蛍光信号が除去され、信号が次の画像を汚染するのを防ぐ。このプロセスが繰り返され、一度に１つのヌクレオチドが追加され、その間に撮像が行われる。次に、コンピュータを使用して各画像の各部位の塩基を検出し、これらを使用してシーケンスを構築する。リードの長さは行われるサイクル数に依存するため、全てのシーケンスリードは同じ長さになる。

Ｉｌｌｕｍｉｎａ（登録商標）（及びＲｏｃｈｅ４５４）とは異なり、Ｉｏｎ ｔｏｒｒｅｎｔ及びＳ５シーケンスは光信号を使用しない。代わりに、ＤＮＡポリマーにｄＮＴＰを付加するとＨ＋イオンが放出されるという事実を使用している。他の種類のＮＧＳと同様に、入力されたＤＮＡ又はＲＮＡは断片化されているが、今回は約２００ｂｐである。アダプターが追加され、１つの分子がビーズに配置される。分子は、エマルションＰＣＲによってビーズ上で増幅される。各ビーズは、スライドの１つのウェルに配置される。Ｒｏｃｈｅ ４５４のように、スライドには、バッファとポリメラーゼと共に、一度に１つのＮＴＰ種のｄＮＴＰがあふれている。放出された各Ｈ＋イオンがｐＨを低下させるため、各ウェルでｐＨが検出される。ｐＨの変化により、シーケンスリードに追加されたその塩基及びその塩基数を決定することができる。ｄＮＴＰは洗い流され、さまざまなｄＮＴＰ種を循環してこのプロセスが繰り返される。ｐＨの変化があれば、それを使用して、各サイクルで追加された塩基の数（ある場合）を決定する。

さらに、又は代替として、シーケンスは、より一般には、蛍光基盤のシーケンス技術及び／又は電流基盤のシーケンス技術によって行われ得る。蛍光基盤のシーケンス技術の実例には、例えば、Ｉｌｌｕｍｉｎａ（登録商標）基盤のシーケンス方法及びシステムを使用したシーケンスなど、フルオロフォアにコンジュゲートされたヌクレオチドを組み込むあらゆる技術が含まれる。電流基盤のシーケンス技術の実例には、ポリヌクレオチドが荷電膜に挿入された細孔を通過する際のポリヌクレオチドの電流を測定するか、又はセンサ及び／又は帯電した膜の電流を特異的に妨げるシーケンス技術（ストランドシーケンス法を含む）が含まれる。

いくつかの実施形態では、例えば、ロングリード技術を利用した直接検出ＮＧＳ（例えば、オックスフォード・ナノポア、ＰａｃＢｉｏ）もまた、特定の実施形態では適切であってもよい。直接検出ＮＧＳ技術の非限定的な例には、Ｏｘｆｏｒｄ ＮａｎｏＰｏｒｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（登録商標）のＮａｎｏｐｏｒｅ ＤＮＡシーケンスシステム及び方法が含まれる。

実例として、０．５Ｘのカバレッジを有するデータを生成するシーケンスランは、理論的にはサンプルの半分が表示されないままになる。シーケンスのために核酸を小さな断片に「切り刻む」シーケンス法を使用すると、最終的な産物は、全参照ゲノムの約半分を表すシーケンスライブラリーである可能性があり、配列された参照ゲノムには、より小さな核酸の一致が散在している。一方、ストランドシーケンス法を使用すると、再び低いカバレッジ（例えば、０．５Ｘ）で、結果は、再び、総参照ゲノムの約半分を表すシーケンスライブラリーになる可能性がある。但し、参照ゲノムと整列させると、一致する部分がはるかに長くなり、どのシーケンスが削除、複製、挿入されたかなど、より決定的な情報が提供される可能性がある。これも問題になる可能性がある。ゲノムのより長い連続部分はストランドシーケンスアプローチによって表される可能性があるが、ゲノムの長い連続部分も未知のままである。従って、ストランドシーケンス法はゲノムの一部のより高精細なビューを可能にする可能性があるが、より小さなシーケンスリードは、ゲノム全体のよりグローバルな全体像を提供する可能性がある。この方法及び他の方法で、ストランドのシーケンスは、コピー数多型を分析するための堅牢なモデルを提供する可能性がある。

上記は、既知のシーケンス技術、及び本明細書に開示された本発明の方法及びシステムへのそれらの適用を例示したものであるが、これは、まだ発見されていない、又は開示されていないシーケンス方法が本発明の範囲内に適用されることを排除しないことを理解する。即ち、多くの実施形態では、シーケンス方法自体は必須の進歩性ではない（例えば、特定のシーケンス技術の使用によって方法及び／又はシステムに改良が提供されない限り）。むしろ、シーケンス方法によって提供されるシーケンスデータを使用して何が行われるか、及び／又はそれらのデータがどのように適用されるかは、一般に進歩性を含む。従って、開示された方法又はシステムのツールとして使用される場合、将来のシーケンス技術（及び本明細書に明示的にリストされていないシーケンス技術）は、本出願の範囲内に含まれることを理解する。

さらに、前述のシーケンス技術のいずれも、任意の数又は容量で、また、各シーケンス反応／実行に対して提供されるシーケンスリードの総数に影響を与える任意の数のフローセル又は他の同様の入力と共に使用してもよい。

次世代シーケンスは、最終的には、ＤＮＡ及びＲＮＡターゲットの両方の分析の標準になる可能性がある。ｑＰＣＲ、ｄＰＣＲ、及び配列基盤のターゲットでカバーされるＲＮＡ転写物を含むターゲットパネルは、標準のライブラリー調製プロセスを介して、全てのＲＮＡサンプルに対して作成される。サンプルは、バリアント分析のためにＮｅｘｔＧｅｎ プラットフォームでバーコード化され、多重化される。データはデマルチプレックスされ、他の全てのプラットフォーム間で遺伝子型の呼び出しを直接比較するために分析される。

［結論］
本開示の組成物は、驚くべきことに、従来のＲＮＡ保存製品よりも著しく優れている。特に、本開示の組成物が非常にうまく機能することは驚くべきことであり、予想外であった（例えば、大量の（ヒト）リボ核酸（ＲＮＡ）を生成し、及び／又は微生物汚染のレベルが低いか、又はそれを示す）。本開示の組成物が、いくつかの実施形態で提供される少量のアルコールで非常にうまく機能することは、さらに驚くべきことであり、予想外であった。例えば、いくつかの実施形態では、組成物に含まれるアルコールの量は、典型的な、従来の、又は既存の核酸又はＲＮＡ保存溶液よりも少なくともよい（例えば、約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、又は６０％以下））。さらに、アルコールの量が少ないほど、より経済的であり、及び／又は（例えば、輸送要件及び規制をより容易に順守し、揮発性を低減するなど）組成物を移送又は輸送に対してより修正しやすくする。

特定の成分又は材料が、より一般的な成分又は材料よりも、ＲＮＡ保存溶液での使用に適しているとは言わないまでも、適切であることはさらに驚くべきことであり、予想外であった。例えば、いくつかの実施形態では、唾液サンプルからのヒトＲＮＡの保存に関して、塩化リチウム（ＬｉＣｌ）は、より一般的なチオシアン酸グアニジン、イソシアン酸グアニジン、及び塩酸グアニジンよりも効果的なカオトロピック剤であることがわかった。同様に、いくつかの実施形態では、セチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）は、唾液サンプルからのヒトＲＮＡの保存において、（より強い）洗剤ＳＤＳ、ＳＬＳなどと同等の洗剤として有効であることが判明した。ＲＮＡ保存溶液のいくつかの実施形態では、約５．５のｐＨが最適であることはさらに驚くべきことであり、予想外であった。クエン酸ナトリウム（クエン酸三ナトリウム二水和物）が、Ｔｒｉｓ、Ｔｒｉｓ－ＨＣ、Ｔｒｉｚｍａ（登録商標）塩基、クエン酸、ＭＥＳ、ＢＥＳ、Ｂｉｓ－Ｔｒｉｓ、ＨＥＰＥＳ、ＭＯＰＳ、Ｂｉｃｉｎｅ、Ｔｒｉｃｉｎｅ、ＡＤＡ、ＡＣＥＳ、ＰＩＰＥＳ、重炭酸塩、リン酸塩、ＴＡＥ、ＴＢＥ、ホウ酸ナトリウム、カコジル酸ナトリウムなどのより一般的なバッファよりも、ＲＮＡ保存溶液での使用に適していることは、さらに驚くべきことであり、予想外であった。特別に変性したアルコール（ＳＤＡ ３Ｃなど）を含めると、エタノールの有効性を保持しながら、さまざまな規制順守の問題と関連コストを回避できるという利点もある。

特定の実施形態（例えば、組成物、キット、方法など）は、本明細書に開示及び／又は記載される他の実施形態で記載された、特徴（例えば、特性、構成要素、成分、要素、部品、部分、ステップなど）を含むか、組み込むか、又は含んでもよいことが理解されるであろう。従って、一実施形態の様々な特徴は、本開示の他の実施形態と互換性があり、それらと組み合わされ、含まれ、及び／又は組み込まれることができる。本開示の一実施形態に関する特定の特徴の開示は、当該特徴の特定の実施形態への適用又は包含を制限するものと解釈すべきではない。むしろ、本開示の範囲から必ずしも逸脱することなく、他の実施形態も前記特徴を含み得ることが理解されるであろう。さらに、特徴がそれと組み合わせて別の特徴を必要とするとして説明されていない限り、本明細書に記載した任意の特徴は、本明細書に開示された同じ又は異なる実施形態の他の任意の特徴と組み合わせることができる。

説明された実施形態は、あらゆる点で単なる例示であり、限定的ではないと考えられるべきである。従って、本発明の範囲は、前述の説明ではなく、添付の特許請求の範囲によって示される。特許請求の範囲と同等の意味及び範囲内にある全ての変更は、その範囲内に含まれるものとする。関連技術の当業者に思い付き、本開示を所有する本明細書に例示された特徴の様々な変更及び／又は修正及び追加の適用は、定義された本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、例示された実施形態に対して行うことができる特許請求の範囲に記載されており、本開示の範囲内とみなされる。様々な特徴及び実施形態が本明細書に開示されてきたが、他の特徴及び実施形態が企図される。例えば、よく知られた特徴及び実施形態は、説明される実施形態の態様を不明瞭にすることを避けるために、本明細書では特に詳細に説明されない。しかし、そのような特徴及び実施形態もまた、本明細書において企図されている。

〔実施の態様〕
（１） リボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物であって、
約３．３３～６．６６％ｗ／ｗの塩化リチウム（ＬｉＣｌ）と、
約１～２％ｗ／ｗのクエン酸三ナトリウム二水和物と、
約０．２～０．５％ｗ／ｗのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）二ナトリウム二水和物と、
約３～４％ｗ／ｗのＮ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩（ＳＬＳ）又はセチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）と、
本質的に約９５％ｖ／ｖのエタノール及び約５％ｖ／ｖのイソプロパノールからなる、約５～２０％ｗ／ｗのアルコールと、
約０．１５～０．３％ｗ／ｗのトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）と、
必要に応じて、着色染料と、
適量から１００％のＲＮＡｓｅを含まない水と、から本質的になり、
前記組成物は、約５．５のｐＨを有する、組成物。
（２） リボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物であって、
キャリアと、
緩衝剤と、
キレート剤と、
カオトロピック剤と、洗剤又は界面活性剤と、アルコールと、還元剤と、からなる群から選択された１つ以上と、を含み、
前記組成物は、４～７のｐＨを有する、組成物。
（３） 前記キャリアは、ＲＮＡｓｅを含まない水を含み、
前記カオトロピック剤は、塩化リチウム（ＬｉＣｌ）を含み、
前記緩衝剤は、クエン酸ナトリウム又はクエン酸三ナトリウム二水和物を含み、
前記金属キレート剤は、ＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物を含み、
前記界面活性剤は、Ｎ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩（ＳＬＳ）又はセチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）を含み、
前記アルコールは、エタノール、好ましくは、エタノールとイソプロパノールの混合物を含み、そして／又は
前記還元剤は、トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）を含む、実施態様２に記載の組成物。
（４） 前記組成物が、
約３．３３～６．６６％ｗ／ｗの前記カオトロピック剤、
約１～２％ｗ／ｗの前記緩衝剤、
約０．２～０．５％ｗ／ｗの前記キレート剤、
約３～４％ｗ／ｗの前記界面活性剤、
約５％～２０％ｗ／ｗの前記アルコール、及び／又は
約０．１５～０．３％ｗ／ｗの前記還元剤、を含む、実施態様２又は３に記載の組成物。
（５） 前記組成物が、
約３％～７％ｗ／ｗの前記カオトロピック剤、
約０．５～５％ｗ／ｗの前記緩衝剤、
約０．０５～１％ｗ／ｗの前記キレート剤、
約２％～６％ｗ／ｗの前記界面活性剤、
約２％～２５％ｗ／ｗの前記アルコール、及び／又は
約０．１～０．５％ｗ／ｗの前記還元剤、を含む、実施態様２又は３に記載の組成物。

（６） 前記組成物が、
約１％～１０％ｗ／ｗの前記カオトロピック剤、
約０．１～１０％ｗ／ｗの前記緩衝剤、
約０．０１～２％ｗ／ｗの前記キレート剤、
約１％～２０％ｗ／ｗの前記界面活性剤、
約１％～３０％ｗ／ｗの前記アルコール、及び／又は
約０．０１～１％ｗ／ｗの前記還元剤、を含む、実施態様２又は３に記載の組成物。
（７） 前記組成物のｐＨが４．５～６．５、好ましくは５～６、より好ましくは５．２～５．８、さらにより好ましくは５．４～５．６、最も好ましくは５．５である、実施態様２～６のいずれかに記載の組成物。
（８） 前記組成物は、前記カオトロピック剤、前記界面活性剤、前記アルコール、及び前記還元剤以外の抗菌剤、殺菌剤、及び／又は静菌剤を実質的に含まないか、又は含有しない、実施態様２～７のいずれかに記載の組成物。
（９） 前記組成物が、リボヌクレアーゼ阻害剤、又は前記カオトロピック剤、前記界面活性剤、前記アルコール、及び前記還元剤以外のリボヌクレアーゼの阻害剤を実質的に含まないか、又は含有しない、実施態様２～８のいずれかに記載の組成物。
（１０） 前記組成物が、プロテアーゼ、プロテイナーゼＫ、及び／又はプロテアーゼ阻害剤を実質的に含まないか、又は含有しない、実施態様２～９のいずれかに記載の組成物。

（１１） 前記組成物が、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）又はβ－メルカプトエタノール（ＢＭＥ）を実質的に含まないか、又は含有しない、実施態様２～１０のいずれかに記載の組成物。
（１２） 前記組成物が、イミダゾリウム塩を実質的に含まないか、又は含有しない、実施態様２～１１のいずれかに記載の組成物。
（１３） 前記組成物が、実質的にＤＮＡｓｅを含まない、又は含有しない、実施態様２～１２のいずれかに記載の組成物。
（１４） 前記アルコールが、約９５％ｖ／ｖのエタノールと約５％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含む、実施態様２～１３のいずれかに記載の組成物。
（１５） 染料又は着色剤をさらに含む、実施態様２～１４のいずれかに記載の組成物。

（１６） リボ核酸保存キットであって、
サンプル収集装置と、
好ましくは、前記サンプル収集装置の溶液区画に配置される、実施態様１～１５のいずれかに記載の組成物と、を含む、リボ核酸保存キット。
（１７） 核酸保存組成物の製造方法であって、
キャリアを取得するステップと、
前記キャリアに、緩衝剤、キレート剤、及びカオトロピック剤、洗剤又は界面活性剤、アルコール、及び粘液可溶化剤又は還元剤からなる群から選択される１つ以上の試薬を加え、それによって混合物を形成するステップと、
前記混合物のｐＨが４～７でない場合は、前記混合物のｐＨを４～７に調整するステップと、を含む、方法。
（１８） リボ核酸（ＲＮＡ）を安定化する方法であって、ＲＮＡを含む生物学的サンプルを、実施態様１～１５のいずれかに記載の組成物と接触させるステップを含む、方法。
（１９） 前記生物学的サンプルがヒト唾液を含む、実施態様１８に記載の方法。
（２０） アルコールを含まないリボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物であって、
好ましくは、ＲＮＡｓｅを含まない水を含むキャリアと、
緩衝剤、好ましくは、クエン酸三ナトリウム二水和物と、
好ましくは、ＥＤＴＡを含むキレート剤と、
カオトロピック剤と、洗剤又は界面活性剤と、還元剤とからなる群から選択された１つ以上と、を含み、
前記組成物が４～７のｐＨを有する、組成物。

Claims (20)

1. リボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物であって、
   キャリアと、
   緩衝剤と、
   キレート剤と、
   カオトロピック剤と、洗剤又は界面活性剤と、アルコールと、還元剤と、からなる群から選択された１つ以上と、を含み、
   前記組成物は、４～７のｐＨを有する、組成物。
2. 前記キャリアは、ＲＮＡｓｅを含まない水を含み、
   前記カオトロピック剤は、塩化リチウム（ＬｉＣｌ）を含み、
   前記緩衝剤は、クエン酸ナトリウム又はクエン酸三ナトリウム二水和物を含み、
   前記金属キレート剤は、ＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物を含み、
   前記界面活性剤は、Ｎ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩（ＳＬＳ）又はセチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）を含み、
   前記アルコールは、エタノール、好ましくは、エタノールとイソプロパノールの混合物を含み、そして／又は
   前記還元剤は、トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）を含む、請求項１に記載の組成物。
3. 前記組成物が、
   約３．３３～６．６６％ｗ／ｗの前記カオトロピック剤、
   約１～２％ｗ／ｗの前記緩衝剤、
   約０．２～０．５％ｗ／ｗの前記キレート剤、
   約３～４％ｗ／ｗの前記界面活性剤、
   約５％～２０％ｗ／ｗの前記アルコール、及び／又は
   約０．１５～０．３％ｗ／ｗの前記還元剤、を含む、請求項１又は２に記載の組成物。
4. 前記組成物が、
   約３％～７％ｗ／ｗの前記カオトロピック剤、
   約０．５～５％ｗ／ｗの前記緩衝剤、
   約０．０５～１％ｗ／ｗの前記キレート剤、
   約２％～６％ｗ／ｗの前記界面活性剤、
   約２％～２５％ｗ／ｗの前記アルコール、及び／又は
   約０．１～０．５％ｗ／ｗの前記還元剤、を含む、請求項１又は２に記載の組成物。
5. 前記組成物が、
   約１％～１０％ｗ／ｗの前記カオトロピック剤、
   約０．１～１０％ｗ／ｗの前記緩衝剤、
   約０．０１～２％ｗ／ｗの前記キレート剤、
   約１％～２０％ｗ／ｗの前記界面活性剤、
   約１％～３０％ｗ／ｗの前記アルコール、及び／又は
   約０．０１～１％ｗ／ｗの前記還元剤、を含む、請求項１又は２に記載の組成物。
6. 前記組成物のｐＨが４．５～６．５、好ましくは５～６、より好ましくは５．２～５．８、さらにより好ましくは５．４～５．６、最も好ましくは５．５である、請求項１～５のいずれか１項に記載の組成物。
7. 前記組成物は、前記カオトロピック剤、前記界面活性剤、前記アルコール、及び前記還元剤以外の抗菌剤、殺菌剤、及び／又は静菌剤を実質的に含まないか、又は含有しない、請求項１～６のいずれか１項に記載の組成物。
8. 前記組成物が、リボヌクレアーゼ阻害剤、又は前記カオトロピック剤、前記界面活性剤、前記アルコール、及び前記還元剤以外のリボヌクレアーゼの阻害剤を実質的に含まないか、又は含有しない、請求項１～７のいずれか１項に記載の組成物。
9. 前記組成物が、プロテアーゼ、プロテイナーゼＫ、及び／又はプロテアーゼ阻害剤を実質的に含まないか、又は含有しない、請求項１～８のいずれか１項に記載の組成物。
10. 前記組成物が、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）又はβ－メルカプトエタノール（ＢＭＥ）を実質的に含まないか、又は含有しない、請求項１～９のいずれか１項に記載の組成物。
11. 前記組成物が、イミダゾリウム塩を実質的に含まないか、又は含有しない、請求項１～１０のいずれか１項に記載の組成物。
12. 前記組成物が、実質的にＤＮＡｓｅを含まない、又は含有しない、請求項１～１１のいずれか１項に記載の組成物。
13. 前記アルコールが、約９５％ｖ／ｖのエタノールと約５％ｖ／ｖのイソプロパノールの混合物を含む、請求項１～１２のいずれか１項に記載の組成物。
14. 染料又は着色剤をさらに含む、請求項１～１３のいずれか１項に記載の組成物。
15. リボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物であって、
    約３．３３～６．６６％ｗ／ｗの塩化リチウム（ＬｉＣｌ）と、
    約１～２％ｗ／ｗのクエン酸三ナトリウム二水和物と、
    約０．２～０．５％ｗ／ｗのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）二ナトリウム二水和物と、
    約３～４％ｗ／ｗのＮ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩（ＳＬＳ）又はセチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）と、
    本質的に約９５％ｖ／ｖのエタノール及び約５％ｖ／ｖのイソプロパノールからなる、約５～２０％ｗ／ｗのアルコールと、
    約０．１５～０．３％ｗ／ｗのトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）と、
    必要に応じて、着色染料と、
    適量から１００％のＲＮＡｓｅを含まない水と、から本質的になり、
    前記組成物は、約５．５のｐＨを有する、組成物。
16. リボ核酸保存キットであって、
    サンプル収集装置と、
    好ましくは、前記サンプル収集装置の溶液区画に配置される、請求項１～１５のいずれか１項に記載の組成物と、を含む、リボ核酸保存キット。
17. 核酸保存組成物の製造方法であって、
    キャリアを取得するステップと、
    前記キャリアに、緩衝剤、キレート剤、及びカオトロピック剤、洗剤又は界面活性剤、アルコール、及び粘液可溶化剤又は還元剤からなる群から選択される１つ以上の試薬を加え、それによって混合物を形成するステップと、
    前記混合物のｐＨが４～７でない場合は、前記混合物のｐＨを４～７に調整するステップと、を含む、方法。
18. リボ核酸（ＲＮＡ）を安定化する方法であって、ＲＮＡを含む生物学的サンプルを、請求項１～１５のいずれか１項に記載の組成物と接触させるステップを含む、方法。
19. 前記生物学的サンプルがヒト唾液を含む、請求項１８に記載の方法。
20. アルコールを含まないリボ核酸（ＲＮＡ）保存組成物であって、
    好ましくは、ＲＮＡｓｅを含まない水を含むキャリアと、
    緩衝剤、好ましくは、クエン酸三ナトリウム二水和物と、
    好ましくは、ＥＤＴＡを含むキレート剤と、
    カオトロピック剤と、洗剤又は界面活性剤と、還元剤とからなる群から選択された１つ以上と、を含み、
    前記組成物が４～７のｐＨを有する、組成物。

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