JP2021534086A - 神経変性障害を治療するためのスルホプロパン酸誘導体 - Google Patents

Abstract

本明細書で提供されるのは、式（Ｉ）の化合物：または、その薬学的に許容される塩の使用であって、アミロイド及びアミロイド様凝集体を特徴とする疾患、例えばアルツハイマー病を治療するための使用である。【選択図】なし

Description

関連出願

本出願は、２０１８年８月１日出願の米国仮出願第６２／７１３，０５６号に対する優先権を主張するものであり、その内容全体は参照により本明細書に組み込まれる。

アルツハイマー病（ＡＤ）は、主に加齢に伴う脳の進行性の変性疾患である。ＡＤに関する社会的な医療費の増大は、米国で５７０万（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ２０１８）、そして世界では３，５００万人（Ｗｏｒｌｄ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｒｅｐｏｒｔ ２０１６）を超える、地理的領域にまたがって罹患した患者の数によって強調される。ＡＤの臨床症状は、記憶、認知、推論、判断、及び方向性の喪失を特徴とする。この疾患が進行するにつれて、複数の認知機能の全体的な障害が発生するまで、運動、感覚、及び言語能力も影響を受ける。これらの認知機能の喪失は徐々に起こるが、通常、４年から１２年の範囲で重度の障害及び最終的な死亡につながる。

現在、ＡＤの承認された薬物の２つの分類は、コリンエステラーゼ阻害剤及びメマンチンである。どちらの分類も、ＡＤに見られる二次神経伝達物質の欠陥を標的とする症候性の薬剤である。ただし、どちらの分類も、臨床試験で６か月を超える治療の有効性を示すものではなく、これらの分類が基礎疾患の病理を標的としているという証拠はない。新たな抗アミロイド抗体（例えば、アデュカヌマブ）は、疾患の初期段階で使用された場合、潜在的な疾患修飾治療として有望である。例えば、Ｌａｓｓｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ Ｓａｆｅｔｙ ｏｆ Ｇａｎｔｅｎｅｒｕｍａｂ ｉｎ Ｐｒｏｄｒｏｍａｌ ＡＤ：Ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ Ｓｃａｒｌｅｔ Ｒｏａｄ−ａ Ｇｌｏｂａｌ，Ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ Ｔｒｉａｌ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ（ＡＡＩＣ）２０１５ Ａｂｓｔｒａｃｔ ＩＤ：５９６３を参照のこと。ただし、一部のアミロイド免疫療法は、浮腫を伴うアミロイド関連画像異常（ａｍｙｌｏｉｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｉｍａｇｉｎｇ ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｗｉｔｈ ｅｄｅｍａ）（ＡＲＩＡ−Ｅ）の用量依存的リスクと関連しており、ＡＰＯＥ４保因者でリスクの増大が報告されている。例えば、Ｓａｌｌｏｗａｙ ｅｔ ａｌ．Ｔｗｏ Ｐｈａｓｅ ３ Ｔｒｉａｌｓ ｏｆ Ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ ｉｎ Ｍｉｌｄ−ｔｏ−Ｍｏｄｅｒａｔｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１４；３７０：３２２−３３、Ｓｅｖｉｇｎｙ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｄｕｃａｎｕｍａｂ ｒｅｄｕｃｅｓ Ａｂｅｔａ ｐｌａｑｕｅｓ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ ２０１６；５３７：５０−６、及びＣａｓｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．Ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｏｆ ａｇｅ−ｒｅｌａｔｅｄ ｍｅｍｏｒｙ ｄｅｃｌｉｎｅ ａｎｄ ｔｈｅ ＡＰＯＥ ｅｐｓｉｌｏｎ４ ｅｆｆｅｃｔ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２００９；３６１：２５５−２６３を参照のこと。アミロイドクリアランス及び臨床的利益を示す用量は、アデュカヌマブの２つの最高用量でのＡＲＩＡ−Ｅの約４０％という発生率に関連しているので、これは開発上の課題である。Ｓｅｖｉｇｎｙ ｅｔ ａｌ．Ａ ｄｏｓｅ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｒｅｇｉｍｅｎ ｗｉｔｈ ａｄｕｃａｎｕｍａｂ ｓｔｉｌｌ ｓｈｏｗｓ ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ ３５％ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ＡＲＩＡ−Ｅ ｉｎ ＡＰＯＥ ｃａｒｒｉｅｒｓを参照のこと。例えば、Ｖｉｇｌｉｅｔｔａ ｅｔ ａｌ．，Ａｄｕｃａｎｕｍａｂ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｄｏｓｉｎｇ ｒｅｇｉｍｅｎ：１２−ｍｏｎｔｈ ｉｎｔｅｒｉｍ ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｒｏｍ ｐｒｉｍｅ，ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｄｏｕｂｌｅ ｂｌｉｎｄ，ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｐｈａｓｅ Ｉｂ ｓｔｕｄｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｒｏｄｒｏｍａｌ ｏｒ ｍｉｌｄ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｊ Ｐｒｅｖ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ ２０１６；３，ｓｕｐｐｌ １：３７８．を参照のこと。ＡＲＩＡ−Ｅは、ほとんどの患者で無症候性または軽度の症候性である場合もあるが、一部の患者は、発作またはその他の重篤な有害事象を発症する場合もある。ＡＤ患者におけるＡＲＩＡ−Ｅのリスクは、ＭＲＩモニタリングを必要とする場合があり、これは高齢集団にとって負担となり、臨床診療におけるこれらの薬剤の有用性を制限する場合がある。

現在、可溶性低分子量Ａβ４２オリゴマーは、ＡＤの病因の主要な推進因子として認識されており、Ａβ４２オリゴマーの濃度の増大は、臨床症状の発症及び進行と密接に関連している。例えば、Ｖｉｇｌｉｅｔｔａ ｅｔ ａｌ．Ｓｏｌｕｂｌｅ Ａβ ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ ｈａｖｅ ｂｅｅｎ ｓｈｏｗｎ ｔｏ ｃａｕｓｅ ｓｙｎａｐｔｉｃ ｄａｍａｇｅ，ｎｅｕｒｏｎａｌ ｄｅａｔｈ，ｐｒｏｍｏｔｅ ｔａｕ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｒｉｖｅ ｔａｕ ｐａｔｈｏｌｏｇｙを参照のこと。例えば、Ｅｓｐａｒｚａ ｅｔ ａｌ．，Ａｍｙｏｌｉｄ ｂｅｔａ ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｅｍｅｎｔｉａ ｖｓ．ｈｉｇｈ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｃｏｎｔｒｏｌｓ．Ａｎｎ Ｎｅｕｒｏｌ ２０１３；７３（１）：１０４−１１９、Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｅ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｅ４，ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｔ ｐｅｐｔｉｄｅ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２０１２；３２：１５１８１−１５１９２、Ｏｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｌｏｗ−ｎ ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ ａｓ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔｓ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２０１１；１１７：１９−２８、Ｔｏｗｎｓｅｎｄ ｅｔ ａｌ．，Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｅｃｒｅｔｅｄ ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ ｏｆ ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ−ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｓｙｎａｐｔｉｃ ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ：ａ ｐｏｔｅｎｔ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｔｒｉｍｅｒｓ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．；２００６；５７２：４７７−９２、及びＬａｍｂｅｒｔ ｅｔ ａｌ．Ｄｉｆｆｕｓｉｂｌｅ，ｎｏｎｆｉｂｒｉｌｌａｒ ｌｉｇａｎｄｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ Ａ １−４２ ａｒｅ ｐｏｔｅｎｔ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｎｓ．ＰＮＡＳ．１９９８；９５：６４４８−５３を参照のこと。重要なことに、ＡＰＯＥ４／４のＡＤ患者は、この集団の早期の発症の原因の可能性が高い、可溶性アミロイドオリゴマーの負荷が高いことが示されている（Ｕｓｕｉ ｅｔ ａｌ．，Ｓｉｔｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｂｙ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｅｎｈａｎｃｅｓ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ ｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ ａｎｄ ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ．ＰＮＡＳ．；２００９；１０６：１８５６３−８）。

現在まで、アデュカヌマブ及びＡＬＺ−８０１／トラミプロセートなどのＡβオリゴマーを標的とする薬剤のみが、アミロイド陽性ＡＤ患者で臨床的利益を示している。トラミプロセート、３−アミノ−１−プロパンスルホン酸（３ＡＰＳ）は、アミロイドベータオリゴマーの神経毒性を軽減する経口アミロイド抗凝集剤である。軽度から中等度のＡＤを対象としたトラミプロセート第３相治験では、脳海馬の容積の減少を遅らせ、サブセット分析で脳の認知及び機能を改善する能力など、優れた薬剤プロファイルが示された。例えば、Ｇａｕｔｈｉｅｒ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｒａｍｉｐｒｏｓａｔｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｉｌｄ−ｔｏ−ｍｏｄｅｒａｔｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ：ｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙ ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ＭＲＩ ｓｕｂ−ｇｒｏｕｐ ｏｆ ｔｈｅ Ａｌｐｈａｓｅ ｓｔｕｄｙ．Ｊ Ｎｕｔｒ Ｈｅａｌｔｈ Ａｇｉｎｇ １３，５５０−５５７（２００９）、Ｓａｕｍｉｅｒ，Ｄ．，Ｄｕｏｎｇ，Ａ．，Ｈａｉｎｅ，Ｄ．，Ｇａｒｃｅａｕ，Ｄ．＆ Ｓａｍｐａｌｉｓ，Ｊ．Ｄｏｍａｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｒａｍｉｐｒｏｓａｔｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｉｌｄ ｔｏ ｍｏｄｅｒａｔｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ：ＡＤＡＳ−ｃｏｇ ｓｕｂｓｃａｌｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ａｌｐｈａｓｅ Ｓｔｕｄｙ．Ｊ Ｎｕｔｒ Ｈｅａｌｔｈ Ａｇｉｎｇ １３，８０８−８１２（２００９）、及びＡｉｓｅｎ，Ｐ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｍｉｐｒｏｓａｔｅ ｉｎ ｍｉｌｄ−ｔｏ−ｍｏｄｅｒａｔｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ−ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｄ，ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，ｍｕｌｔｉ−ｃｅｎｔｒｅ ｓｔｕｄｙ（ｔｈｅ Ａｌｐｈａｓｅ Ｓｔｕｄｙ）．Ａｒｃｈ Ｍｅｄ Ｓｃｉ ７，１０２−１１１（２０１１）を参照のこと。

ＡＬＺ−８０１は、アルツハイマー病（ＡＤ）の治療のためのベータアミロイド（Ａβ）オリゴマー形成の経口小分子阻害剤として臨床開発中である。ＡＬＺ−８０１は、薬物動態特性及び胃腸の耐容性が改善されたトラミプロセートのバリンコンジュゲートである。例えば、Ｈｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ＡＬＺ−８０１，ａ Ｎｏｖｅｌ Ｐｒｏｄｒｕｇ ｏｆ Ｔｒａｍｉｐｒｏｓａｔｅ ｉｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ２０１８；３１５−３３３．Ｔｒａｍｉｐｒｏｓａｔｅ，ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｍｏｉｅｔｙ ｏｆ ＡＬＺ−８０１，ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ａβ ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏを参照のこと。例えば、Ｋｏｃｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｅｌｕｃｉｄａｔｉｎｇ ｔｈｅ Ａｂｅｔａ４２ Ａｎｔｉ−Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ Ａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒａｍｉｐｒｏｓａｔｅ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄａｔａ．ＣＮＳ Ｄｒｕｇｓ ２０１７；３１：４９５−５０９を参照のこと。経口トラミプロセートは、１００ｍｇのＢＩＤのトラミプロセート、１５０ｍｇのＢＩＤのトラミプロセート、またはプラセボで治療された軽度から中等度のＡＤ患者２，０１５人を含む、２つの第３相治験で以前に評価した。これらの第３相治験及び安全性延長試験の安全性データによって、最大２．５年というトラミプロセート曝露による好ましい安全性プロファイルが示唆されている。例えば、Ａｂｕｓｈａｋｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｒａｍｉｐｒｏｓａｔｅ ｉｎ ＡＰＯＥ ４／４ ｈｏｍｏｚｙｇｏｕｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｉｌｄ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｓｕｇｇｅｓｔ ｄｉｓｅａｓｅ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ．Ｊ Ｐｒｅｖ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ ２０１７；４：１４９−５６を参照のこと。アポリポタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ４）のε４対立遺伝子を有する対象のサブグループ解析では、認知に関する陽性の臨床的意義のある利益があった。

ＡＬＺ−８０１のトラミプロセートへの生体内変化を図１に示す。先に説明したように、トラミプロセートは、Ａβオリゴマーの形成を阻害し、軽度から中等度のＡＤの治療について評価されている。

本発明者らはここで、ヒト脳脊髄液（ＣＳＦ）及び薬物に関してナイーブ（未使用）の対象の血漿に存在するトラミプロセートの代謝産物である３−スルホプロパン酸（３−ＳＰＡ）を発見し（例えば、図２及び図３を参照のこと）、この代謝産物は、トラミプロセート自体に匹敵する効力を有する小さなオリゴマーへのＡβ４２の凝集を阻害することを特定した。例えば、図４及び図５を参照のこと。

さらに、本発明者らは、軽度から中等度のＡＤを有する対象において、認知障害の重症度と３−ＳＰＡの濃度との間に逆相関があることを確認し、これによって、認知障害の重症度が増すにつれて３−ＳＰＡのレベルが低下すること、及びより高いレベルの３−ＳＰＡを維持することが、ＡＤに関連する認知機能低下を予防または軽減するのにある役割を果たしている場合がある（例えば、対象におけるアルツハイマー病の重症度を判断するための十分に実証された方法である、対象のミニメンタルステート検査（「ＭＭＳＥ」）スコアによって測定される）ことが示唆される。例えば、Ｐａｎｇｍａｎ，ｅｔ ａｌ．，Ａｐｐｌｉｅｄ Ｎｕｒｓｉｎｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．１３（４）：２０９−２１３を参照のこと。本発明者らが見出したのは、ＭＭＳＥスコアが高い（すなわち、認知障害が少ない）ＡＤ対象は、ＭＭＳＥスコアが低い対象と比較してＣＳＦ中の３−ＳＰＡのレベルが高かったことであった。例えば、図６を参照のこと。この相関関係により、軽度から中等度のＡＤに罹患している試験母集団の対象についてのＭＭＳＥスコアとＣＳＦ中の３−ＳＰＡ濃度との間の傾向またはベストフィットのラインを決定することが可能になった。

これらの発見から、本発明者らは、３−ＳＰＡ ＣＳＦレベルを、例えば、認知障害が最も少ないＡＤ対象（すなわち、ＭＭＳＥ＝３０）で見られるレベル（「ベースライン閾値レベル」）よりも高くすること、及びそのような高いレベルを維持することは、プラセボ治療と比較して、それらの対象をさらなる認知低下から保護するか、または認知低下の速度を低下させるはずであると仮定する。このようなベースライン閾値レベルを超える３−ＳＰＡ ＣＳＦレベルの増大は、ＡＬＺ−８０１、トラミプロセート、またはその前駆体（これらは全て最終的に３−ＳＰＡを生成する）を投与することによって、または外因性型の３−ＳＰＡを直接投与することによって達成され得る。

したがって、本明細書で提供されるのは、３−ＳＰＡに代謝する、したがって、保護を必要とする対象、例えば、アルツハイマー病、認知症、または認知機能低下に罹っている対象に対する３−ＳＰＡ ＣＳＦレベルを増大させるように設計された化合物である。本明細書に記載の化合物として、式Ｉ：

、を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。

開示された化合物を使用して、特定のベースライン閾値レベル未満、例えば、３−ＳＰＡのＣＳＦ濃度（±１０％）値（様々な認知障害のＡＤを有する対象のランダムな母集団のベストフィット（最適な適合）における３０のＭＭＳＥに対して決定された）未満の３−ＳＰＡ濃度を有する対象におけるアルツハイマー病（ＡＤ）を治療するための方法も本明細書で提供される。

認知障害の様々な重症度によって定義される、選択されたＡＤ対象を治療するための方法も本明細書で提供される。例えば、一態様では、治療のために選択された対象は、例えば、軽度または軽度から中等度のＡＤ重症度を示す特定のＭＭＳＥスコアを有し得る。他の態様では、対象は特定のＭＭＳＥスコアを有し、アポリポプロテインＥ（ＡＰＯＥ）遺伝子の１つ以上のε４対立遺伝子を有し得（例えば、ＡＰＯＥ４に対してホモ接合性である）、異常なフリーアンドキュードセレクティブリマインド（Ｆｒｅｅ ａｎｄ Ｃｕｅｄ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｒｅｍｉｎｄｉｎｇ）（ＦＣＳＲ）記憶試験は、軽度認知障害、及び特定の臨床的認知症評価（ＣＤＲ）を示す。

本明細書でさらに提供されるのは、特定のベースライン閾値レベル未満、例えば、３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度（±１０％）値（認知機能低下に罹っている対象のランダムな母集団のベストフィットにおけるＭＭＳＥ３０に対して決定された）未満の３−ＳＰＡ濃度を有する対象における、認知症の予防または、さらなる認知低下の予防のための方法である。

ＡＬＺ−８０１の３−スルホプロパン酸（３−ＳＰＡ）への代謝変換を示している。 ＡＤと診断されていない薬物ナイーブ（未使用）の対象のヒト脳脊髄液（ＣＳＦ）に存在する３−ＳＰＡの濃度（ｎｇ／ｍｌ）を示すグラフである。 イオン移動度分光分析−質量分析（ＩＭＳ−ＭＳ）ドリフト時間を、Ａβ４２オリゴマーのプロファイルとの比が１：１０００である３−ＳＰＡとのＡβ４２の４時間のインキュベーション後の質量／電荷（ｍ／ｚ）の関数として示している。これらの条件下でのＡβ４２二量体、三量体、及び五量体の検出によって、４時間のインビトロインキュベーションがオリゴマー形成の完全な阻害には不十分であったことが明らかになる。 イオン移動度分光分析−質量分析（ＩＭＳ−ＭＳ）ドリフト時間を、２４時間のインキュベーション後、質量／電荷（ｍ／ｚ）の関数として示し、１，０００倍過剰の３−ＳＰＡを含むＡβ４２オリゴマーのプロファイルを示す。五量体のみが検出された。 １，０００：１過剰の３−ＳＰＡの存在下でのＡβ４２の半環状高次構造を示す分子動力学実験を示す。３−ＳＰＡの機能的結果は、トラミプロセートで見られる機能的最終結果、すなわち、Ａβ４２オリゴマー形成の阻害と類似している（Ｋｏｃｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄａｔａ．ＣＮＳ Ｄｒｕｇｓ ２０１７；３１：４９５−５０９）。 様々なＭＭＳＥスコア（ＡＤの重症度）を有するＡＤを有する対象の集団からのヒトＣＳＦにおける３−ＳＰＡレベル間の逆相関を示している。 真正の３−ＳＰＡ参照標準（ＥＤＣ及びＴＦＥＡで誘導体化）のＬＣ−ＭＳ／ＭＳスペクトルを示す。 パネルＡは、３−ＳＰＡ標準のＬＣ−ＭＳ／ＭＳクロマトグラムを示す。パネルＢは、ＭＭＳＥ ２０の単一のＡＤ対象由来のヒトＣＳＦのＬＣ−ＭＳ／ＭＳクロマトグラムを示す。 雄性ＳＤラットにおける３−ＳＰＡの単回経口及ｉｖ（静脈内）投与の平均薬物動態曲線を示している（それぞれ３０ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝３）。データは、平均±ＳＤを示す。 雄性ＳＤラット（ｎ＝３）における３０ｍｇ／ｋｇの単回経口投与後の３−ＳＰＡの平均の脳、ＣＳＦ及び血漿の濃度の時間経過を示している。データは、平均±ＳＤを示す。

１． 定義
本明細書で使用される場合、引用された基の最初または最後のハイフン（「−」）は、引用された基が定義された基に接続されるポイントを示す。例えば、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキル）とは、その基が酸素原子を介して結合されていることを意味する。

「アルキレン」という用語は、直鎖または分岐の二価アルキル基を指す。

本明細書で使用される「Ｃ_０アルキレン」という用語は、結合を意味する。したがって、本明細書で「−（Ｃ_０−Ｃ_２０アルキレン）−アリール」として定義される部分は、−アリール（すなわち、Ｃ_０アルキレン−アリール）及び−（Ｃ_１−Ｃ_２０アルキレン）−アリールの両方を含む。

「アルケニレン」という用語は、直鎖または分岐の二価アルケニル基を指す。

「アルキニレン」という用語は、直鎖または分岐の二価アルキニル基を指す。

単独で、または例えば「ハロアルキル」などのより大きな部分の一部として使用される「アルキル」という用語は、特に明記しない限り、１〜１０個の炭素原子を有する飽和一価の直鎖または分岐の炭化水素基を意味し、これには例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシルなどが挙げられる。

単独で、または例えば「ハロアルケニル」などのより大きな部分の一部として使用される「アルケニル」という用語は、特に指定のない限り、１〜１０個の炭素原子を有する、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する直鎖または分枝鎖の脂肪族部分に由来する一価基を意味する。代表的なアルケニル基としては、限定するものではないが、エテニル（「ビニル」）、プロペニル（「アリル」）、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イルなどが挙げられる。

単独で、または例えば「ハロアルキニル」などのより大きな部分の一部として使用される「アルキニル」という用語は、特に指定のない限り、１〜１０個の炭素原子を有する、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する、直鎖または分枝鎖の脂肪族部分に由来する一価基を意味する。代表的なアルキニル基としては限定するものではないが、エチニル、２−プロピニル（「プロパルギル」）、１−プロピニルなどが挙げられる。

「アルコキシ」とは、酸素リンカー（−Ｏ（アルキル））を介して別の部分に結合しているアルキル基である。非限定的な例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、及びブトキシが挙げられる。

本明細書で使用される「ハロ」及び「ハロゲン」という用語は、フッ素（フルオロ、−Ｆ）、塩素（クロロ、−Ｃｌ）、臭素（ブロモ、−Ｂｒ）、及びヨウ素（ヨード、−Ｉ）から選択される原子を指す。

本明細書で使用される「カルボシクリル」（本明細書では「カルボサイクル」「脂環式」または「シクロアルキル」とも呼ばれる）という用語は、各環が完全に飽和または部分的に飽和しているが芳香族ではない単環式炭化水素または二環式炭化水素を意味する。

単独で、または「アラルキル」、「アラルコキシ」、または「アリールオキシアルキル」のようもっと大きな部分の一部として使用される「アリール」という用語は、合計５〜１０個の環員を有する単環式及び二環式炭素環系を指し、ここでこの環系の少なくとも１つの環は芳香族である。「アリール」という用語は、「アリール環」という用語と交換可能に使用され得る。特定の実施形態では、「アリール」とは、限定するものではないが、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントラシルなどを含む芳香環系を指す。一実施形態では、「アリール」はフェニルである。指定された場合、アリール基上の任意選択の置換基は、任意の置換可能な位置に存在してもよいことが理解されよう。

単独で、または「ヘテロアリールアルキル」、「ヘテロアリールアルコキシ」、または「ヘテロアリールアミノアルキル」のように大きな部分の一部として使用される「ヘテロアリール」という用語は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を含む５〜１２員の完全芳香族環系を指す。「ヘテロアリール」という用語は、「ヘテロアリール環」、「ヘテロアリール基」、または「ヘテロ芳香族」という用語と交換可能に使用され得る。ヘテロアリール基は、単環式であっても、または二環式であってもよい。単環式ヘテロアリールとしては、例えば、チエニル、フラニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、及びピラジニルが挙げられる。二環式ヘテロアリールとしては、単環式ヘテロアリール環が１つ以上のアリールまたはヘテロアリール環に融合している基が挙げられる。非限定的な例としては、インドリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾオキソジアゾリル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、キノリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ピロロピリジニル、ピロロピリミジニル、ピロロピリジニル、チエノピリジニル、チエノピリミジニル、インドリジニル、プリニル、ナフチリジニル及びプテリジニルが挙げられる。指定された場合、ヘテロアリール基上の任意選択の置換基は、任意の置換可能な位置に存在してもよく、これには例えば、ヘテロアリールが結合している位置を含み得ることが理解されよう。

「ヘテロシクリル」という用語は、飽和または部分的に不飽和（芳香族ではない）であり、Ｎ、Ｏ、及びＳから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含む４〜１２員環系を意味する。「複素環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロシクリル環」、「複素環基」、及び「複素環部分」という用語は、本明細書では互換的に使用される。ヘテロシクリル環は、安定した構造をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子でそのペンダント基に結合され得る。ヘテロシクリル基は、単環式であっても、または二環式であってもよい。単環式飽和または部分的に不飽和の複素環式基の例としては、限定するものではないが、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、ピロリドニル、ピペリジニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、モルホリニル、ジヒドロフラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロピリジニル、テトラヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、及びテトラヒドロピリミジニルが挙げられる。二環式ヘテロシクリル基としては、例えば、別の不飽和複素環式環、シクロアルキル、芳香族環またはヘテロアリール環に融合した複素環式環、例えば、ベンゾジオキソリル、ジヒドロベンゾジオキシニル、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアゾリル、５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジニル、１，２−ジヒドロキノリニル、ジヒドロベンゾフラニル、テトラヒドロナフチリジン、インドリノン、ジヒドロピロロトリアゾール、キノリノン、ジオキサスピロデカンなどが挙げられる。指定された場合、ヘテロシクリル基上の任意選択の置換基は、任意の置換可能な位置に存在し得、例えば、ヘテロシクリルが結合している位置を含み得ることが理解されよう。

「環状部分」という用語は、飽和、不飽和、または部分的に飽和した単環式または多環式環系を指す。そのような環系としては、例えば、上記で定義されたカルボシクリル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルが挙げられた。

開示された化合物の立体化学が構造によって命名または描写されている場合、その命名または描写された立体異性体は、他の全ての立体異性体と比較して、少なくとも６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％、９９重量％または９９．９重量％純粋である。他の全ての立体異性体に対する純粋な重量パーセントは、他の立体異性体の重量に対する１つの立体異性体の重量の比率である。単一のエナンチオマーが構造によって命名または描写されている場合、その描写または命名されたエナンチオマーは少なくとも６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％、９９重量％または９９．９重量％光学的に純粋である。重量による光学純度パーセントとは、エナンチオマーの重量に加えてその光学異性体の重量に対する、エナンチオマーの重量の比である。

開示された化合物の立体化学が構造によって命名または描写され、その命名または描写された構造が複数の立体異性体を包含する場合（例えば、ジアステレオマー対のように）、包含される立体異性体の１つまたは含まれる立体異性体のうちの任意の混合物が含まれることが理解されるべきである。この命名または描写された立体異性体の立体異性体純度は、他の全ての立体異性体と比較して、少なくとも６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％、９９重量％、または９９．９重量％純粋であることがさらに理解されるべきである。この場合の立体異性体の純度は、この名前または構造に含まれる立体異性体の混合物の総重量を、全ての立体異性体の混合物の総重量で割ることによって決定される。

開示された化合物が立体化学を示さずに構造によって命名または描写され、その化合物が１つのキラル中心を有する場合、その名前または構造は、対応する光学異性体を含まない化合物の１つのエナンチオマー、その化合物のラセミ混合物、または対応する光学異性体と比較して１つのエナンチオマーが豊富な混合物を包含することが理解されるべきである。

開示された化合物が、立体化学を示さずに構造によって命名または描写され、例えば、その化合物が複数のキラル中心（例えば、少なくとも２つのキラル中心）を有する場合、その名前または構造は、他の立体異性体を含まない１つの立体異性体、立体異性体の混合物、または１つ以上の立体異性体が他の立体異性体（複数可）と比較して富化されている立体異性体の混合物を包含することが理解されるべきである。例えば、この名前または構造は、他のジアステレオマーを含まない１つの立体異性体、立体異性体の混合物、または１つ以上のジアステレオマーが他のジアステレオマー（複数可）と比較して富化されている立体異性体の混合物を含み得る。

「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書に記載の化合物上の塩基性基（例えば、アミノ基）または酸性基（例えば、スルホン酸）の塩である。塩基性の基の例示的な塩としては、限定するものではないが、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩酸物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩（ｇｅｎｔｉｓｉｎａｔｅ）、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩、及びパモン酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエート））塩が挙げられる。酸性基の例示的な塩としては、限定するものではないが、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム、クロム、鉄、銅、亜鉛、カドミウム、アンモニウム、グアニジニウム、ピリジニウム、及び有機アンモニウム塩が挙げられる。

「薬学的に許容可能な」とは、過度の毒性、不適合性、不安定性、刺激、アレルギー反応などがなく、合理的な利益／リスク比に見合った、ヒト及び下等動物の組織と接触して使用するのに適した、その用語が説明する薬物、薬剤、不活性成分などを指す。一態様では、薬学的に許容されるとは、連邦もしくは州政府の規制機関によって承認もしくは承認可能であるか、または動物、より具体的にはヒトで使用するために米国薬局方もしくは他の一般に認められている薬局方に列挙されている化合物もしくは組成物を指す。

「薬学的に許容される担体」という用語は、それと処方される化合物の薬理学的活性を破壊しない非毒性の担体、アジュバント、またはビヒクルを指す。本明細書に記載の組成物に使用され得る薬学的に許容される担体としては、限定するものではないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミン等の血清タンパク質、緩衝物質、例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸、水、塩または電解質の部分グリセリド混合物、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール及び羊毛脂が挙げられる。

用語「対象」及び「患者」は、交換可能に使用される。ある態様では、この対象とはヒトである。いくつかの態様において、この対象とは８５歳以下のヒトである。他の態様では、この対象とは６５〜８５歳のヒトである。さらに他の態様では、この対象とは５８歳以上のヒトである。

３−スルホプロパン酸及び３−ＳＰＡは交換可能に用いられ、構造

、ならびに

または

の形態を有する化合物であって、式中、Ｘ^＋が、ナトリウムなどの対イオンである化合物を指す。

本明細書で使用される場合、「治療する」、「治療する」または「治療」という用語は、ＡＤなどの神経変性疾患またはそれに関連する１つ以上の症状の進行を逆転、緩和、または阻害することを意味する。

対象がＡＤに罹患しているか否かを決定するための要因としては、例えば、対象のＭＭＳＥスコア、脳アミロイドの存在（例えば、ＰＥＴイメージングによって決定される）、対象のＣＤＲスコア、軽度認知障害と一致するＦＣＳＲ記憶試験結果、あるいはＡｂｅｔａ−４０、Ａｂｅｔａ−４２、タウタンパク質、もしくはＡｂｅｔａオリゴマー、またはそれらの組み合わせなどの脳脊髄液（ＣＳＦ）中のアミロイドの脳バイオマーカーの同定のうちの１つ以上が挙げられる。例えば、次の場合、対象はＡＤに罹患している、１）その対象がＡＰＯＥ４についてホモ接合であり、認知症状がある、２）その対象がＡＰＯＥ４についてホモ接合であり、主観的な記憶障害、ＭＣＩ、または３０というＭＭＳＥがあり、かつその対象は異常なＦＣＳＲを有する、３）その対象がＡＰＯＥ４についてホモ接合性であり、ＭＣＩまたはＭＭＳＥが２６〜３０、及びＣＤＲグローバルスコアが０．５などの初期ＡＤ症状を示す、４）その対象がＡＰＯＥ４についてヘテロ接合であり、ＭＭＳＥが２０未満である、５）その対象がＡＰＯＥ４についてヘテロ接合であり、かつＭＭＳＥが２０以上であり、かつその対象が、本明細書に記載の１つ以上の方法（例えば、ＰＥＴイメージングまたはＡｂｅｔａ−４０、Ａｂｅｔａ−４２、及びタウタンパク質から選択されるＣＳＦバイオマーカー、またはＡｂｅｔａオリゴマーに関して）によって決定される脳アミロイドを有する、または６）その対象がＡＰＯＥ４陰性であり、その対象が２０以上のＭＭＳＥスコアまたは２０未満のＭＭＳＥスコアを有し、かつその対象が本明細書に記載の１つ以上の方法（例えば、ＰＥＴイメージングまたはＡｂｅｔａ−４０、Ａｂｅｔａ−４２、及びタウタンパク質から選択されたＣＳＦバイオマーカー、またはＡｂｅｔａオリゴマーに関して）によって決定される脳アミロイドを有する。異常なＦＣＳＲの分類については、例えば、Ｅ．Ｇｒｏｂｅｒ，Ｒ．Ｂ Ｌｉｐｔｏｎ，Ｃ．Ｈａｌｌ ｅｔ ａｌ；Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ２０００；５４：８２７−８３２を参照のこと。

「有効量」または「有効用量」とは、ＡＤなどの神経変性疾患を治療するのに十分な化合物の量である。有効量は、当業者によって認識されるように、例えば、神経変性疾患の重症度、投与経路、患者の性別、年齢及び一般的な健康状態、賦形剤の使用、他の薬剤の使用など他の治療法との併用の可能性、及び治療する医師または他の医療従事者の判断に応じて変化し得る。本明細書に記載の方法において有用な化合物の例示的な有効量を以下に提供する。いくつかの態様では、有効量とは、ＣＳＦ３−ＳＰＡ濃度を所定のベースライン閾値を超えて増大させる量である。より具体的な態様では、有効量とは、ＣＳＦ ３−ＳＰＡ濃度を、予め決定されたベースライン閾値よりも１．１×、１．２×、１．３×、１．４×、１．５×、２×、２．５×、３×、４×、５×、またはそれ以上に増大させる量である。

任意の特定の患者に対する特定の投薬量及び治療レジメンは、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投薬時間、排泄速度、薬物の組み合わせ、治療する医師の判断、及び治療される特定の疾病の重症度を含む様々な要因に依存することもまた、理解されるべきである。組成物中に提供される化合物の量はまた、組成物中の特定の化合物に依存するであろう。例示的なレジメンを以下に提供する。

本発明の方法における「所定のベースライン閾値」、「所定のベースラインレベル」、または「特定のベースラインレベル」（例えば、第１から第１０、第１２、及び第１５の実施形態のように）は交換可能に使用され、以下のうち１つ以上を指す：（１）様々な程度の重症度のアルツハイマー病の対象のランダムな母集団（「ランダムＡＤ母集団」における３−ＳＰＡの濃度とＭＭＳＥスコアとの間のベストフィットのラインにおける３０というＭＭＳＥについて決定された３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度（±１０％）値、（２）ＭＭＳＥ≦２９のランダムＡＤ母集団で決定した最高３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度（±１０％）、（３）ＡＤのなんらかの症状を示す前に決定される対象自身の３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度（±５％）、（４）年齢を一致させた正常（非ＡＤ）集団で決定された平均３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度（±５％）、（５）対象がＭＭＳＥスコアのある範囲内にあることによってさらに選択される実施形態については、以下のうちの高い方：（ａ）ランダムＡＤ母集団における３−ＳＰＡの濃度とＭＭＳＥスコアとの間のベストフィットのラインでＭＭＳＥが３０の場合に決定された３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度（±１０％）値、または（ｂ）選択範囲内の最低ＭＭＳＥスコア以上のＭＭＳＥスコアのランダムＡＤ母集団で決定される最高の３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度（±１０％）（例えば、選択で２２〜２８のＭＭＳＥスコアが必要な場合、（ｂ）は２２以上のＭＭＳＥスコアのランダムＡＤ母集団で決定される最高の３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度（±１０％））、（６）対象のランダムな母集団における３−ＳＰＡの濃度とＭＭＳＥスコアとの間のベストフィットのラインによって決定される対象のＭＭＳＥスコアの３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度（±１０％）値。特に明記しない場合、上記の任意のパラメーターを使用して得られた所定のベースライン閾値の値は、治療される対象をより少なくまたはより多く包含し、及び偽陽性または偽陰性の数を減少させるために、最大１０％減少または増大され得る。アルツハイマー病の対象のランダムな母集団は、アルツハイマー病の重症度（例えば、認知機能低下の程度またはＭＭＳＥスコアによる）、年齢、体重、一般的な健康状態、性別、食事、等によるＡＤ患者の無作為に選択されたサンプリングであり、例えば、少なくとも１０人、少なくとも１５人、少なくとも２０人、少なくとも２５人、少なくとも５０人、少なくとも７５人、少なくとも１００人、少なくとも５００人、少なくとも１０００人の対象を含んでもよい。しかしながら、一態様では、対象の集団は、８５歳以下の平均年齢を有する。他の態様では、対象の集団は、６５〜８５歳の平均年齢を有する。さらに他の態様では、対象の集団は、５８歳以上の平均年齢を有する。いくつかの態様では、選択基準がさらにＡｐｏＥ４ステータスを含む場合、ベストフィットラインを導き出すか、または最高レベルの３−ＳＰＡ ＣＳＦ濃度を決定するための、重症度の程度が異なるアルツハイマー病の対象のランダムな集団は、ＡｐｏＥ４ステータス選択基準と同じＡｐｏＥ４ステータスを有するそれらのＡＤ対象に限定される。

２．使用／方法
第１の実施形態では、本明細書で提供されるのは、アミロイド凝集体を特徴とする疾患（例えば、アルツハイマー病）を、それを必要とする対象において治療する方法であり、この方法には、対象に有効量の式Ｉの化合物：

、または、その薬学的に許容される塩を投与するステップを含み、式中：
Ｒ^１は、−Ｏ−Ｒ^３，−Ｏ−Ｒ^４−ＣＨ（ＮＨＲ^６）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ^５、及び−［Ｎ（Ｒ^６）−ＣＨ（Ｒ^７）−Ｃ（Ｏ）］_１−２−Ｒ^５から選択され、
Ｒ^２は、水素、Ｒ^３、及びＲ^４−ＣＨ（ＮＨＲ^６）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^５から選択され、
各Ｒ^３は独立してＣ_１−Ｃ_２０アルキル、−Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニル、−Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニル、−（Ｃ_０−Ｃ_２０アルキレン）−アリール、−（Ｃ_０−Ｃ_２０アルキレン）−カルボシクリル、−（Ｃ_０−Ｃ_２０アルキレン）−ヘテロシクリル、−（Ｃ_０−Ｃ_２０アルキレン）−ヘテロアリール、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニレン）−アリール、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニレン）−カルボシクリル、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニレン）−ヘテロシクリル、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニレン）−ヘテロアリール、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニレン）−アリール、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニレン）−カルボシクリル、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニレン）−ヘテロシクリル、及び−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニレン）−ヘテロアリールから選択され、
各Ｒ^４は天然または非天然のαアミノ酸の独立して選択された誘導体化側鎖であり、この側鎖は誘導体化の前にこの側鎖上に存在する遊離の−ＯＨ基を通じて誘導体化されており、
各Ｒ^５は独立して、−ＯＨ，−Ｏ−Ｃ_１−Ｃ_４アルキル及び−ＮＨ_２から選択され、
各Ｒ^６は独立して水素及び−Ｃ（Ｏ）Ｒ^８から選択され、
Ｒ^７は、αアミノ酸の側鎖であり、かつ
各Ｒ^８は独立して、水素、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキレン）−アリール、及び（Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ）−アリールから選択され、
式中、Ｒ^３の各アルキル、アルキレン、アルケニル、アルケニレン、アルキニルまたはアルキニレン部分は、ハロ、−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキル）、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル）、カルボシクリル、アリール、ヘテロシクリル、及びヘテロアリールから独立して選択される最大６個の置換基で必要に応じて置換され、
Ｒ^３の各カルボシクリル、アリール、ヘテロシクリル、またはヘテロアリール部分は必要に応じて、ハロ、−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキル）、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル）、Ｃ_１−Ｃ_１８アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１８アルケニル、及びＣ_２−Ｃ_１８アルキニルから独立して選択される最大４個の置換基で置換されており、式中このＣ_１−Ｃ_１８アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１８アルケニル、またはＣ_２−Ｃ_１８アルキニルのアルキル、アルケニル、またはアルキニル部分はそれぞれ、必要に応じて、ハロ、−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキル）、及び−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル）から独立して選択される最大６個の置換基で置換されており、
Ｒ^１は、２以下の環状部分を含み、かつ
Ｒ^２は２以下の環状部分を含む。

アミロイド凝集体を特徴とする疾患としては、限定するものではないが、家族性（遺伝性）型を含むアルツハイマー病、ダウン症認知症、パーキンソン病、急性黄斑変性症（ＡＭＤ）、緑内障、封入体筋炎（ＩＢＭ）、外傷性脳損傷、レビー小体型認知症、ハンチントン病、ニーマンピック病Ｃ型、脳アミロイド血管症（ＣＡＡ）、クロイツフェルト−ヤコブ病、ＡＡアミロイドーシス、ＡＬアミロイドーシス、ＡＴＴＲアミロイドーシス、家族性アミロイド多発神経障害（ＦＡＰ）、家族性アミロイド心筋症（ＦＡＣ）、老人性全身性アミロイドーシス、及びプリオン病が挙げられる。一態様では、アミロイド凝集体を特徴とする疾患はアルツハイマー病である。

第２の実施形態では、以下のステップ：
ａ）対象に存在する３−ＳＰＡの濃度が所定のベースライン閾値よりも低い場合、対象を選択することと、
ｂ）選択された対象に、有効量の式Ｉを有する化合物：

、またはその薬学的に許容される塩であって、式Ｉの変数は、第１の実施形態で上記したとおりである、化合物または塩を投与することと、を含む、アルツハイマー病に罹患している対象を選択及び治療する方法が提供される。

第３の実施形態では、本明細書で提供されるのは、以下のステップ：
ａ）３−ＳＰＡが、所定のベースライン閾値よりも低い濃度で対象に存在するか否かを決定することと、
ｂ）選択された対象に、有効量の式Ｉを有する化合物：

、またはその薬学的に許容される塩であって、式Ｉの変数は、第１の実施形態で上記したとおりである、化合物または塩を投与することと、を含むアルツハイマー病に罹患している対象を治療する方法である。

本発明の方法の対象は、治療前にそれらのＭＭＳＥスコアによって層別化（すなわち、さらに選択）してもよい。例えば、第４の実施形態では、本明細書に記載の実施形態で（例えば、第１、第２、または第３の実施形態のように）治療される対象は、治療前に１９より大きい（例えば、２０を超えるか、２１を超えるか、２２を超えるか、２３を超えるか、２４を超えるか、２５を超えるか、または２６を超える）ＭＭＳＥスコアを有する。別の態様では、本明細書に記載の実施形態で（例えば、第１、第２、または第３の実施形態のように）治療される対象は、治療前に１６〜３０のＭＭＳＥスコア（例えば、２２〜３０のＭＭＳＥスコア、２２〜２８のＭＭＳＥスコア、１６〜１９のＭＭＳＥスコア、１８〜２６のＭＭＳＥスコア、２０〜２６のＭＭＳＥスコア、または２２〜２６のＭＭＳＥスコア）を有する。

ＭＭＳＥスコアに加えて、対象はＡＰＯＥ４対立遺伝子の存在などの特定の遺伝的要因（例えば、ＡＰＯＥ４のホモ接合性またはヘテロ接合性）を有してもよいし、または脳アミロイドの存在などの他のアミロイドマーカーを有してもよいし、またはその両方であってもよい。本明細書に記載の対象はまた、ＡＰＯＥの少なくとも１つのε４対立遺伝子を有し得る。例えば、第５の実施形態では、本明細書に記載の実施形態で（例えば、第１、第２、第３、または第４の実施形態のように）治療される対象は、治療前にＡＰＯＥ４ヘテロ接合性である。あるいは、第６の実施形態では、本明細書に記載の実施形態で（例えば、第１、第２、第３、または第４の実施形態のように）治療される対象は、治療前にＡＰＯＥ４ホモ接合性である。「ＡＰＯＥ４のヘテロ接合性」及び「ＡＰＯＥ４ヘテロ接合性」という用語は交換可能に使用され、１つのＡＰＯＥ４対立遺伝子を有する対象を指す。「ＡＰＯＥ４のホモ接合性」、「ＡＰＯＥ４ホモ接合性」、「ＡＰＯＥ４／４のホモ接合性」、及び「ＡＰＯＥ４／４ホモ接合性」という用語は交換可能に使用され、２つのＡＰＯＥ４対立遺伝子を持つ対象を指す。第６の実施形態のより具体的な態様では、対象は、ＡＰＯＥ４ホモ接合性であり、かつ２２〜２８のＭＭＳＥスコアを有する場合、治療のために選択される。

本明細書で提供される第７の実施形態は、対象（例えば、頭部外傷によるＡＤまたは認知症を有する対象）におけるアルツハイマー病または認知機能低下を予防する方法であり、この方法は、それを必要とする対象に、以下の式Ｉを有する化合物：

、またはその薬学的に許容される塩であって、式Ｉの変数が、第１の実施形態で上記したとおりである、化合物または塩を投与するステップを含む。

第８の実施形態では、第７の実施形態における対象は、以下のうちの１つ以上が存在する場合、予防を必要としている：ａ）対象における３−ＳＰＡのレベルが、所定のベースライン閾値を下回っているか、ｂ）対象が少なくとも１つのＡｐｏＥ４対立遺伝子を有するか、またはｃ）対象がアルツハイマー病の家族歴を有する。あるいは、第７の実施形態の対象は、以下のうちの１つ以上が存在する場合、予防を必要としている：ａ）対象における３−ＳＰＡのレベルが、所定のベースライン閾値を下回っている、ｂ）対象が少なくとも２つのＡｐｏＥ４対立遺伝子を有する、またはｃ）対象がアルツハイマー病の家族歴を有する。

第９の実施形態では、本明細書で提供されるのは、対象（例えば、頭部外傷によるＡＤまたは認知症を有する対象）における認知症を予防する方法であって、それを必要とする対象に式

の化合物、またはその薬学的に許容される塩であって、ここで式Ｉの変数が、第１の実施形態において上記に記載されたとおりである、化合物または塩を投与するステップを含む方法である。

第１０の実施形態では、第９の実施形態の認知症は、頭部損傷（例えば、頭部外傷）に関連している。頭部損傷は、外力が頭に強く当たって脳が頭蓋骨内で激しく動くときに発生する。この力は、震え、ねじれ、打撲傷（挫傷）、または脳の動きの突然の変化（脳震盪）を引き起こし得る。比較的軽度の頭部外傷でさえ、認知の長期的または永続的な低下を引き起こし得ることが理解される。

第１１の実施形態では、第９の実施形態の認知症は、頭部損傷に関連し、第１３の実施形態の対象は、対象の３−ＳＰＡのレベルが所定のベースライン閾値を下回る場合、予防を必要としている。

一態様では、記載された方法の対象に存在する３−ＳＰＡの濃度（例えば、第２〜第５、第８、及び第１１の実施形態のように）は、脳脊髄液の試料から決定される。したがって、一態様では、対象における３−ＳＰＡの所定のベースライン閾値は、ＡＤの症状を示す前に及び／または対象のＭＭＳＥが３０だったときに得られた対象の脳脊髄液（ＣＳＦ）中の３−ＳＰＡのベースライン濃度である。

一態様では、本方法における３−ＳＰＡの所定のベースライン閾値（例えば、第１〜第１０、第１２、及び第１５の実施形態のように）は、２５ｎｇ／ｍｌ未満（例えば、２０ｎｇ／ｍｌ未満、１５ｎｇ／ｍｌ未満、１２ｎｇ／ｍｌ未満、１０ｎｇ／ｍｌ未満、８ｎｇ／ｍｌ未満、６ｎｇ／ｍｌ未満、５ｎｇ／ｍｌ未満、４ｎｇ／ｍｌ未満、３ｎｇ／ｍｌ未満、２．９ｎｇ／ｍｌ未満、２．８ｎｇ／ｍｌ未満、２．７ｎｇ／ｍｌ未満、２．６ｎｇ／ｍｌ未満、２．５ｎｇ／ｍｌ未満、２．４ｎｇ／ｍｌ未満、２．３ｎｇ／ｍｌ未満、２．２ｎｇ／ｍｌ未満、２．１ｎｇ／ｍｌ未満、２．０ｎｇ／ｍｌ未満）の対象における３−ＳＰＡ濃度として定義される。他の態様では、３−ＳＰＡの所定のベースライン閾値は、２．０ｎｇ／ｍｌ〜２５ｎｇ／ｍＬ（例えば、７ｎｇ／ｍｌ〜２５ｎｇ／ｍＬ、８ｎｇ／ｍｌ〜２５ｎｇ／ｍＬ、９ｎｇ／ｍｌ〜２５ｎｇ／ｍＬ、６ｎｇ／ｍｌ〜２４ｎｇ／ｍＬ、または６ｎｇ／ｍｌ〜２３ｎｇ／ｍＬ）という対象における３−ＳＰＡ濃度として定義される。

一態様では、本方法における３−ＳＰＡの所定のベースライン閾値（例えば、第１〜第１０、第１２、及び第１５の実施形態のように）は、２２〜２８のＭＭＳＥスコアまたは２２〜２６のＭＭＳＥスコア、及び５ｎｇ／ｍＬ未満、４ｎｇ／ｍｌ未満、３ｎｇ／ｍｌ未満、２．９ｎｇ／ｍｌ未満、２．８ｎｇ／ｍｌ未満、２．７ｎｇ／ｍｌ未満、２．６ｎｇ／ｍｌ未満、２．５ｎｇ／ｍｌ未満、２．４ｎｇ／ｍｌ未満、２．３ｎｇ／ｍｌ未満、２．２ｎｇ／ｍｌ未満、２．１ｎｇ／ｍｌ未満、または２．０ｎｇ／ｍｌ未満という３−ＳＰＡ濃度（例えば、ＣＳＦ中）を有する対象として定義される。他の態様では、本方法における３−ＳＰＡの所定のベースライン閾値（例えば、第１〜第１０、第１２、及び第１５の実施形態のように）は、２２〜２８のＭＭＳＥスコアまたは２２〜２６のＭＭＳＥスコア及び２〜４ｎｇ／ｍＬという３−ＳＰＡ濃度（例えば、ＣＳＦ中）を有する対象として定義される。

第１２の実施形態では、本明細書で提供されるのは、ＡＤに罹患している対象を治療するための方法であり、この方法は、有効量の本明細書で定義される式Ｉを有する化合物またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含み、この対象がＭＭＳＥスコア３０を有し、ＡＰＯＥ４についてホモ接合性であり、かつＭＣＩを示す異常なＦＣＳＲ記憶試験があることを含む。異常なＦＣＳＲの分類については、例えば、Ｅ．Ｇｒｏｂｅｒ，Ｒ．Ｂ Ｌｉｐｔｏｎ，Ｃ．Ｈａｌｌ ｅｔ ａｌ；Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ２０００；５４：８２７−８３２を参照のこと。

第１３の実施形態では、ＡＤに罹患している対象を選択及び治療するための方法が本明細書に提供され、この方法は、以下：ａ）ＭＭＳＥスコアが２２〜２８である対象を選択することと、ｂ）この選択された対象に、有効量の本明細書で定義される式Ｉを有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することと、を含む。

第１４の実施形態は、本明細書で提供されるのは、ＡＤに罹患している対象を選択及び治療するための方法であり、この方法は以下：ａ）ＡＰＯＥ４ホモ接合性またはＡＰＯＥ４ヘテロ接合性である対象を選択することと、ｂ）この選択された対象に、有効量の本明細書で定義される式Ｉを有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することと、を含む。

第１５の実施形態は、本明細書で提供されるのは、ＡＤに罹患している対象を選択及び治療するための方法であり、この方法は、以下：ａ）ＭＭＳＥスコアが２２〜２８であり、ＡＰＯＥ４ホモ接合性またはＡＰＯＥ４ヘテロ接合性である対象を選択することと、ｂ）選択された対象に、有効量の本明細書で定義される式Ｉを有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することと、を含む。

第１３から第１５の実施形態のいくつかの態様では、対象が２２〜２６のＭＭＳＥスコアを有する場合、その対象が選択される。第１３から第１５の実施形態のいくつかの態様では、対象がＡＰＯＥ４ホモ接合性である場合、その対象が選択される。第１３から第１５の実施形態のいくつかの態様では、対象がＡＰＯＥ４ホモ接合性であり、かつＭＭＳＥスコアが２２〜２８である場合、その対象が選択される。第１３から第１５の実施形態のいくつかの態様では、対象がＡＰＯＥ４ホモ接合性であり、かつＭＭＳＥスコアが２２〜２６である場合、その対象が選択される。

第１６の実施形態では、本明細書で提供されるのは、ＡＤに罹患している対象を選択及び治療するための方法であり、この方法は、以下：ａ）治療前にＭＭＳＥスコアが１９を超える（例えば、２０を超える、２１を超える、２２を超える、２３を超える、２４を超える、２５を超える、または２６を超える）対象を選択することと、この選択された対象に、有効量の本明細書で定義される式Ｉを有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することと、を含む。別の態様では、本明細書で提供されるのは、ＡＤに罹患している対象を選択及び治療するための方法であり、以下：ａ）治療前にＭＭＳＥスコアが１６〜３０（例えば、ＭＭＳＥスコアが２２〜３０、ＭＭＳＥスコアが２２〜２８、ＭＭＳＥスコアが１６〜１９、ＭＭＳＥスコアが１８〜２６、ＭＭＳＥスコアが２０〜２６、またはＭＭＳＥスコアが２２〜２６）である対象を選択することと、選択された対象に、有効量の本明細書で定義される式Ｉを有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することと、を含む。

第１７の実施形態では、本明細書で提供されるのは、ＡＤを予防するための方法であり、この方法は、それを必要とする対象に、有効量の本明細書で定義される式Ｉを有する化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。

第１８の実施形態では、本明細書で提供されるのは、無症候性であるが、ＡＤまたは認知機能低下のリスクがある対象において、認知の低下を予防するための方法であって、この方法は、それを必要とする対象に、有効量の本明細書で定義される式Ｉ、またはその薬学的に許容される塩を有する化合物を投与することを含む。リスクのある対象としては、例えば、ＡＰＯＥ４／４（またはＡＰＯＥ４及びＡＰＯＥ４／４の両方）の存在、高齢、または家族性認知機能低下のパターン、または上記の２つ以上の組み合わせが挙げられよう。

無症候性であるがＡＤまたは認知機能低下のリスクがある対象におけるＡＤの予防または認知機能低下の防止に関して、以下に示すデータから、３−ＳＰＡは脳内で常に活性であり、有毒なオリゴマーの形成を防止または阻害すると本発明者らは、仮定する。したがって、３−ＳＰＡの量が少ないほど、対象が認知機能低下を発症するか、または早期に発症する可能性が高くなる。本明細書に記載されているような化合物の投与は、脳内により多くの３−ＳＰＡを生成するはずである。これにより、次に、Ａβオリゴマーの一貫した阻害、及び／または強化された阻害が確立され、それによってＡＤまたは認知力の低下の予防がもたらされる。

３． 現在の使用／方法の化合物
本発明の方法で利用される化合物としては、上記で定義された式Ｉを有する化合物、またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。

あるいは、第１６の実施形態では、本発明の方法で利用される化合物としては、上記の式Ｉを有する化合物であって、式中Ｒ^２が、水素及びＣ_１−Ｃ_６アルキルから選択され、化合物の残りの変数が式Ｉについて上記されるとおりである、化合物が挙げられる。あるいは、本方法で利用される化合物としては、上記のような式Ｉを有する化合物であって、式中Ｒ^２が−ＣＨ_３であり、かつ残りの変数が、式Ｉについて上記されるとおりである化合物が挙げられる。

あるいは、第１７の実施形態では、本発明の方法で利用される化合物としては、上記の式Ｉを有する化合物であって、式中Ｒ^１が−Ｏ−Ｒ^３、−Ｏ−Ｒ^４−ＣＨ（ＮＨＲ^６）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ^５、及び−Ｏ−Ｒ^４−ＣＨ（ＮＨＲ^６）−ＣＨ（ＯＨ）−Ｒ^５から選択され、Ｒ^３が、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルであり、かつＲ^４が、−ＣＨ（ＣＨ_３）−、−ＣＨ_２−、

、及び

から選択され、かつこの化合物の残りの変数が式Ｉ、または第２の実施形態について記載されたとおりである、化合物が挙げられる。

あるいは、第１８の実施形態では、本方法で利用される化合物としては、上記で定義された式Ｉを有する化合物であって、Ｒ^６が水素、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ベンジルから選択され、この化合物の残りの変数が、式Ｉ、または第２もしくは第３の実施形態について上記したとおりである化合物が挙げられる。

代替的に、第１９の実施の形態では、本発明の方法において利用される化合物としては、上記で定義された式Ｉを有する化合物であって、式中、Ｒ^５が、−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、及び−ＯＣＨ_２ＣＨ_３から選択され、かつこの化合物の残りの変数が、式Ｉ、または第２、第３もしくは第４の実施形態について上記したとおりである化合物が挙げられる。

あるいは、第２０の実施形態では、式Ｉの化合物は、表１の任意の化合物またはその薬学的に許容される塩から選択される：

４． 製剤化及び投与
本明細書に記載の方法の化合物は、薬学的組成物として処方されて、ヒトなどの対象に投与され得る。本明細書に記載の組成物は、経口的、非経口的、吸入スプレーによって、局所に、直腸に、経鼻的に、口腔に、経膣で、または移植リザーバーを介して投与してもよい。本明細書で使用される場合、「非経口」という用語は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、髄腔内、肝内、病巣内及び頭蓋内注射または注入技術を含む。化合物の局所または経皮投与のための液体剤形、注射剤、固体分散形態、及び剤形が本明細書に含まれる。一態様では、投与は経口である。

本開示の組成物に使用してもよい薬学的に許容される担体としては、限定するものではないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、ヒト血清アルブミン等の血清タンパク質、緩衝物質、例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸、水、塩または電解質の部分グリセリド混合物、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質（例えば、微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラクトース一水和物、ラウリル硫酸ナトリウム、及びクロスカルメロースナトリウム）、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール及び羊毛脂が挙げられる。

投与方法は、本明細書に記載の疾患の重症度を治療または軽減するのに有効な投与量及び投与経路を使用してもよい。必要とされる正確な量は、対象の人種、年齢、及び全身状態、感染の重症度、特定の薬剤、その投与様式などに応じて対象ごとに異なり得る。提供される化合物は、投与の容易さ及び投薬量の均一性のために、好ましくは単位剤形で処方される。例えば、提供される化合物は、１日あたり体重あたり０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇという化合物の投与量が、これらの組成物を投与されている患者に投与され得るように処方されてもよい。本明細書で使用される「単位剤形」という表現は、治療される患者に適切な物理的に別個の薬剤の単位を指す。しかし、本開示の化合物及び組成物の合計１日使用量は、合理的な医療判断の範囲内で担当医師により決定されることになることが理解される。特定の患者または生物についての具体的な有効用量レベルは、様々な要因に依存し、そのような要因としては、治療される障害及び障害の重篤度、使用される具体的な活性化合物の活性、使用される具体的な組成物、患者の年齢、体重、全身的な健康、性別、及び食事、使用される具体的な化合物の投与の時間、投与の経路、及び排泄速度、治療の期間、使用される具体的な化合物と併用されるかまたは同時使用になる薬物、ならびに医療分野で周知の同様の要因が挙げられる。

１．方法
ヒトＣＳＦ試料の採取及び処理

個々のＣＳＦ試料は、様々な神経発生性疾患に起因する認知障害（ＭＭＳＥ範囲１５〜３０）の６４人の男性及び女性の対象から得た（説明的な特徴は 表１にまとめられている）。これらの患者は、Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｃｅｎｔｅｒ ａｔ ｔｈｅ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｒｌｅｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２ｎｄ Ｍｅｄｉｃａｌ ｆａｃｕｌｔｙ ａｎｄ Ｍｏｔｏｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｐｒａｇｕｅ Ｃｚｅｃｈ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ（チェコ共和国プラハのカレル大学第２医学部及びモトル大学病院、神経内科の認知センター）に紹介された。６４の試料は、以下の状態であると臨床的に診断された患者から得られた：アルツハイマー型認知症（ＡＤ認知症、ｎ＝１４）、ＡＤに起因する軽度認知障害（ＡＤに起因するＭＣＩ、ｎ＝２０）、混合型認知症（ｎ＝３）、レビー小体型認知症（ＬＢＤ、ｎ＝１）、前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ、ｎ＝１８）、他の病因の軽度認知障害（ＭＣＩその他、ｎ＝７）及び進行性核上性麻痺（ｎ＝３）。ＭＲＩでコンフルエントな血管の変化が見られた場合（Ｆａｚｅｋａｓスケール２及び３）、血管疾患を考慮した。非外傷性針を使用して、椎体Ｌ３〜Ｌ５の間で仰臥位で腰椎穿刺により１２ｍｌのＣＳＦを採取した。腰椎穿刺は午前８時から午前１１時の間に行い、血清試料収集の直後に実施した。ＣＳＦを同じ階にあるＣＳＦラボに移し、室温で２０００ＲＰＭで５分間回転させた。遠心分離の後、ＣＳＦを０．５ｍｌチューブを用いて分注し、−８０℃で直ちに保存した。ポリプロピレンチューブのみをＣＳＦ吸引及び貯蔵のために使用した。ＣＳＦの吸引、スピン、及び凍結の間の処理時間は、標準化されており、合計で４５分を超えなかった。

試料は冷凍庫から取り出し、ドライアイスでＮｅｘｔｃｅａ Ｉｎｃ（Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ）に送り、受領後−８０℃を維持するように設定した冷凍庫に保管した。ＣＳＦの収集及び保管は、チェコ共和国の倫理ガイドライン及び臨床試験実施基準に従い対象がインフォームドコンセントに署名した後に、ＣＳＦの収集及びバイオバンキングの標準化に関する広く認識されているコンセンサスプロトコルに従って実施した（Ｖｉｏｌａ ｅｔ ａｌ．，Ａｍｙｌｏｉｄ β ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ａｎｄ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ．Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ ２０１５；１２９：１８３−２０６、及びＶａｎｄｅｒｓｔｉｃｈｅｌｅ ｅｔ ａｌ．Ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｅａｎａｌｙｔｉｃａｌ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ｔｅｓｔｉｎｇ ｆｏｒ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ：Ａ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｐａｐｅｒ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ Ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｅｍｅｎｔ ２０１２；８（１）：６５−７３）。認知症バイオマーカー分析（Ａβ１−４２、タウタンパク質、及びホスホ−タウ）には市販のＥＬＩＳＡキット（Ｉｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ＮＶ，Ｇｈｅｎｔ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）を使用し、検証研究から得られたカットオフ値を使用した。３−ＳＰＡのＣＳＦ濃度は、第３相北米ＡＤ治験の７８週目に、１５０ｍｇＢＩＤ用量のトラミプロセートを投与された１２人の患者でも定量化した。

ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによるヒトＣＳＦ中の３−ＳＰＡの同定及び定量
ＣＳＦ試料分析は、ＬＣ−ＭＳ及びＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方法を使用して、Ｎｅｘｔｃｅａによって行った。分析のために、合計６４のヒトＣＳＦ試料をＮｅｘｔｃｅａで受け取った。

誘導体化及びＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方法
３−ＳＰＡ標準物質及びヒトＣＳＦ試料を、Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）及び２，２，２−トリフルオロエチルアミン（ＴＦＥＡ）と混合した。試料をボルテックスし、室温で３０分間反応させた。この反応物を４５００ｒｐｍで５分間遠心分離した。この上清を分析のために新しいプレートに移した。３−ＳＰＡは、ＬＣ−ＭＳ及びＬＣ−ＭＳ／ＭＳを使用して同定及び特徴付けした。島津オートサンプラー及びＵＰＬＣポンプを使用して、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＡＱＵＡＳＩＬ ５μｍ、５０×２．１ｍｍカラムに注入した。移動相Ａは、水中の０．１％トリフルオロ酢酸であった（ｖ／ｖ）。移動相Ｂは、９０／１０アセトニトリル／水中の０．１％ギ酸であった（ｖ／ｖ）。流量は０．３５ｍＬ／分であった。１試料あたりの合計実行時間は４分であった。検出には、ＡＰＩ６５００トリプル四重極質量分析計を使用した。データは、ネガティブＬＣ−ＭＳ及びＬＣ−ＭＳ／ＭＳモードで取得した。ＥＤＣ及びＴＦＥＡで誘導体化された粗天然物質及びヒトＣＳＦ中の３−ＳＰＡの代表的なクロマトグラムを図７、図８パネルＡ、及び図８パネルＢに示す。ＬＣ−ＭＳ及びＬＣ−ＭＳ／ＭＳデータは、Ａｎａｌｙｓｔソフトウェア（ＡＢ Ｓｃｉｅｘ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ）を使用して取得した。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方法のＬＯＱは、０．１ｎｇ／ｍｌであり、０．１〜１０００ｎｇ／ｍｌというダイナミックレンジであった（ｒ＝０．９９６８８及び％ＣＶ ５．８％±２．０、保管データ）。３−ＳＰＡは、クロマトグラフィーの保持時間を一致させることによって、及びＬＣ−ＭＳ／ＭＳ遷移イオンを真正の３−ＳＰＡ参照標準（Ｐａｒａｚａ Ｐｈａｒｍａ（Ｍｏｎｔｒｅａｌ，Ｃａｎａｄａ）によって合成）と共溶出することにより、ヒトＣＳＦで同定した。

３−ＳＰＡ分子モデリング及び分子動力学シミュレーション
全ての分子モデリングは、Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒスイート（Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ Ｓｕｉｔｅ，２０１５−３；Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ，ＬＬＣ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ）を使用して実行した。分子動力学シミュレーションは、Ｄｅｓｍｏｎｄを使用して実行した。Ｖａｎｄｅｒｓｔｉｃｈｅｌｅ ｅｔ ａｌ．Ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｅａｎａｌｙｔｉｃａｌ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ｔｅｓｔｉｎｇ ｆｏｒ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ：Ａ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｐａｐｅｒ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ Ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｅｍｅｎｔ ２０１２；８（１）：６５−７３を参照のこと。シミュレーションは、ＧｅＦｏｒｃｅ ＧＴＸ Ｔｉｔａｎ Ｂｌａｃｋ ＧＰＵ（グラフィックスプロセッシングユニット）カードで実行した。Ｔｈｅ ＯＰＬＳ ３．０（Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ Ｌｉｑｕｉｄ Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ）ｆｏｒｃｅ ｆｉｅｌｄ（Ｈｏｒｔ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ ｌｉｑｕｏｒ ｔａｕ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｂｅｔａ ａｍｙｌｏｉｄ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｃｅｓｋ Ｓｌｏｖ Ｎｅｕｒｏｌ Ｎ ２００７；７０（１）：３０−３６）を、全ての相互作用をモデル化するために使用し、ＳＰＣモデルを水域に使用した。Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄａｔａ Ｂａｎｋ（ＰＤＢ）の１ＩＹＴ Ａβ４２ ＮＭＲ構造を、分子動力学シミュレーションの開始点として使用した。この構造は主にアルファヘリックスであり、無極性環境におけるペプチドを代表する。２０オングストロームの水ボックスまたは水中１％３−ＳＰＡの混合溶媒ボックスを、Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒシステムセットアップツールを使用して、ペプチドの周囲に追加した。システム全体の電荷を中和するためにイオンを追加した。シミュレーションを平衡化し、周期的境界条件を使用したＮＰＴ条件（定数（Ｎ）圧力（Ｐ）及び温度（Ｔ））で実行した。Ｎｏｓｅ−Ｈｏｏｖｅｒ Ｔｈｅｒｍｏｓｔａｔ（ノーズフーバーサーモスタット）及びＭａｒｔｉｎａ−Ｔｏｂｉａｓ−Ｋｌｅｉｎ ｂａｒｏｓｔａｔ（マルティナ−トビアス−クラインバロスタット）を使用して、それぞれ温度及び圧力を制御した。シミュレーションは、それぞれ１００ナノ秒で３回の繰り返しで実行し、その結果を分析のためにコンパイルした。主成分分析は、ＰｒｏＤｙ（Ｓｈｉｖａｋｕｍａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｔｈｅ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ Ａｂｓｏｌｕｔｅ Ｓｏｌｖａｔｉｏｎ Ｆｒｅｅ Ｅｎｅｒｇｉｅｓ Ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｎｅｘｔ Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ＯＰＬＳ Ｆｏｒｃｅ Ｆｉｅｌｄ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｔｈｅｏｒｙ Ｃｏｍｐｕｔ ２０１２；８：２５５３−８）を使用して実行し、カスタムＰｙｔｈｏｎスクリプトを使用してプロットした。

イオン移動度質量分析（ＩＭＳ ＭＳ）
Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｎａｐｔ Ｇ２−Ｓを使用した質量分析に使用した条件は、次のとおりである：感度モードでの正極性、キャピラリー＝２．５ｋＶ、ネブライザー＝２ｍｂａｒ、ソース温度＝８０℃、脱溶媒和温度＝６０℃、試料コーン設定＝３５Ｖ、ソースオフセット設定＝６０Ｖ、及び質量範囲＝５００〜４０００ｍ／ｚ。データの一貫性を確保し、優先的なイオン化条件に起因するオリゴマーの検出への影響を回避するために、これらの条件を、研究全体を通じて維持した。

試料は、Ｐｒｏｔｅａ ＰＭ−１０００シリンジポンプ及びＨａｍｉｌｔｏｎの１ｍＬシリンジを使用して１０μＬ／分の流量で質量分析計に直接注入した。アミロイドペプチドのデータ取得は、Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｎａｐｔ Ｇ２−Ｓ四重極飛行時間型質量分析計（Ｑ−ＴＯＦ ＭＳ）と進行波イオン移動度（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）を使用して実行した。データは、システム感度モードを使用して取得し、存在量の少ないオリゴマーの検出を可能にした。試料は室温で注入した。ＩＭＳ ＭＳ研究は、Ｐｒｏｔｅａ、Ｉｎｃ．（Ｍｏｒｇａｎｔｏｗｎ，ＷＶ）で実施した。

試料の調製
ＢｉｏＬｅｇｅｎｄの組換えヒトＡβ４２ペプチド１ｍｇ（純度９９％、カタログ番号８４３８０１）を、２００μＬのＦｉｓｈｅｒ Ｏｐｔｉｍａ ＬＣ／ＭＳグレードの水（カタログ番号Ｗ６−１）中で再構成し、２分間激しくボルテックスしてペプチドを可溶化し、５ｍｇ／ｍＬの溶液を作成した。次に、試料をインキュベーションの前に最終濃度２２ｐｍｏｌ／μＬに希釈した。次に、試料混合物を室温で０、４、及び２４時間インキュベートした。インキュベートした試料の取得が完了した後、Ｗａｔｅｒｓ ＭａｓｓＬｙｎｘ ｖ２．４スイートとＤｒｉｆｔＳｃｏｖｅｒ ｖ２．７を使用して生データを分析し、ペプチドのドリフト時間を視覚化した。

Ａβ４２種の特徴付け
ＩＭＳ ＭＳを使用したＡβ４２種の特徴付けは、水中で２２ｐｍｏｌ／μＬでの直接注入によって実行した。ペプチドは、ペプチドの天然状態の高次構造を維持するために水中で調製し、イオン移動度データの取得を実行して、天然状態のモノマー及びインキュベーション中に形成された可能性のある任意のオリゴマーの高次構造変化を検出及び特徴付けた。

３−ＳＰＡ ＩＭＳ ＭＳ結合研究
Ａβ４２ペプチドのデータ取得は、Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｎａｐｔ Ｇ２−Ｓ四重極飛行時間型質量分析計（Ｑ−ＴＯＦ ＭＳ）と進行波イオン移動度（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）を使用して実行した。データは、システム感度モードを使用して取得し、存在量の少ないオリゴマーの検出を可能にした。上記のように、試料は室温で注入した。

１ｍｇの３−ＳＰＡを１ｍＬのＦｉｓｈｅｒ Ｏｐｔｉｍａ ＬＣ／ＭＳグレードの水（カタログ番号Ｗ６−１）中に再構成して、完全に溶解するまで２分間激しくボルテックスした。次に、試料を希釈して２２０ｐｍｏｌ／μＬ、及び２２，０００ｐｍｏｌ／μＬの溶液を作成し、Ａβ４２ペプチドとの結合実験のために１００倍及び１，０００倍モル過剰とした。

１ｍｇの組換えヒトＡβ４２ペプチドを、２００μＬのＦｉｓｈｅｒ Ｏｐｔｉｍａ ＬＣ／ＭＳグレードの水に再構成し、激しくボルテックスして、５ｍｇ／ｍＬ溶液に可溶化した。次に、インキュベーション前に試料をその最終濃度に希釈した。試料混合物を、室温で０、４、及び２４時間インキュベートした後、上記のように分析した。

Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットにおける３−ＳＰＡの薬物動態、経口吸収及び脳への曝露
３−ＳＰＡの経口及び静脈内（ｉｖ）薬物動態は、それぞれ３０ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇの用量で雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙの絶食ラットで評価した（ｎ＝１群あたり３匹）。動物は標準的な施設に収容し、水と食物は実験に対して自由に与えた。３−ＳＰＡを、生理食塩水に溶解し、強制経口投与及びボーラスとして静脈内投与した。Ｋ２ＥＤＴＡを含むチューブに投与した後、０．２５、０．５、１、２、４、８、及び２４時間後に各動物から連続血液試料（各約１．０ ｍＬ）を収集し、遠心分離によって血漿用に処理した。血漿試料は、生体分析まで−８０℃で保存した。

動物の別の群は３０ｍｇ／ｋｇで経口投与され、脳及びＣＳＦ中の３−ＳＰＡの生物分析のために、及び血漿濃度と比較した脳浸透を推定するために、終末の脳、ＣＳＦ及び血漿の試料を１、２、６、及び２４時間で収集した（各時点で３匹の動物）。実生活研究は、Ａｇｉｌｕｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒ，ＭＡ）で、Ｇｏｏｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒａｃｔｉｃｅに沿った品質基準に従って実施した。ラットの血漿、ＣＳＦ、及び脳の生体分析は、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いてＮｅｘｔｃｅａで行った。生物分析のためにラットの脳を処理する前に、プールされた血液を除去するために脳を灌流した。薬物動態データ分析は、Ｗｉｎｎｏｎｌｉｎ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ｖ５．０．１（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）を使用して実施した。

２． 結果
薬物ナイーブ（未使用）の対象及びトラミプロセート治療されたＡＤ患者のＣＳＦ中の３−ＳＰＡの同定及び定量

３−ＳＰＡ は、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによってヒトＣＳＦで同定して、定量化した。試料は分析前にＥＤＣ及びＴＦＥＡで誘導体化した。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ遷移イオンは、誘導体化された３−ＳＰＡ参照標準のプロダクトイオンスペクトル、２−［（２，２，２−トリフルオロエチル）カルバモイル］エタン−１−スルホン酸に基づいてモニタリング用に選択した。３−ＳＰＡの［Ｍ−Ｈ］−は、ヒトＣＳＦで、ｍ／ｚ２３４．１で保持時間１．５５分で検出した。２つのＬＣ−ＭＳ／ＭＳ遷移イオンをモニタリングすることによって、酸の分子ピークと、ＭＳ−ＭＳフラグメンテーションパターンを含む２−［（２，２，２−トリフルオロエチル）−カルバモイル］エタン−１−スルホン酸誘導体の分子ピークを一致させることにより、ヒトＣＳＦ中の３−ＳＰＡを標準としての真正の試料と構造的に一致させた。ヒトＣＳＦ中の３−スルホプロパン酸の遷移イオン及び保持時間は、真正の３−スルホプロパン酸参照標準と一致した。二酸の分子ピークの遷移イオン（２３４．１／８０．９）を定量化のために選択した。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳアッセイのＬＬＯＱは、３−ＳＰＡに関して０．１ｎｇ／ｍＬであった。ヒトＣＳＦ中の３−ＳＰＡの濃度を表１に示す。別の分析では、３−ＳＰＡの存在はまた、Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ，Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，ＮＹから入手したヒトＣＳＦの薬物未使用（ナイーブ）試料のＬＣ−ＭＳ／ＭＳによっても確認した（それぞれ、ｎ＝２７及びｎ＝８８）。図２を参照のこと。

ＡＤを含む様々な認知障害疾患の患者における３−ＳＰＡのレベルは、４．１５〜２７．７ｎＭ（０．６４〜４．２７ｎｇ／ｍｌ）の範囲であった（表１）。ＡＤ患者のＡβ４２モノマーのＣＳＦ濃度（０．０４ｎＭ〜０．１ｎＭ）に関連する場合（Ｂａｋａｎ ｅｔ ａｌ．，ＰｒｏＤｙ：ｐｒｏｔｅｉｎ ｄｙｎａｍｉｃｓ ｉｎｆｅｒｒｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅｏｒｙ ａｎｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ２０１１；２７：１５７５−７、Ｓｈａｗ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ｓｉｇｎａｔｕｒｅ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｎｅｕｒｏｉｍａｇｉｎｇ ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｓｕｂｊｅｃｔｓ．Ａｎｎ Ｎｅｕｒｏｌ ２００９；６５：４０３−１３、Ｐａｎｎｅｅ ｅｔ ａｌ．Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｆｏｒ ＣＳＦ Ａｂｅｔａ１−４２ ａｎｄ ｔｈｅ ＣＳＦ Ａｂｅｔａ１−４２ ／Ａｂｅｔａ１−４０ ｒａｔｉｏ−ａ ｃｒｏｓｓｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｓｔｕｄｙ ａｇａｉｎｓｔ Ａｍｙｌｏｉｄ ＰＥＴ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ ２０１６、及びＬａｍｂｅｒｔ ｅｔ ａｌ．Ｄｉｆｆｕｓｉｂｌｅ，ｎｏｎｆｉｂｒｉｌｌａｒ ｌｉｇａｎｄｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ Ａ １−４２ ａｒｅ ｐｏｔｅｎｔ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｎｓ．ＰＮＡＳ．１９９８；９５：６４４８−５３）、可溶性Ａβ４２モノマーよりも約４０〜７００倍過剰な３−ＳＰＡがあり、これは一部の患者で部分的なＡβ抗オリゴマー凝集活性が発生する可能性のある範囲内にある（表３）。さらに、トラミプロセートの第３相治験からの患者のサブセットのＣＳＦのレトロスペクティブ分析も、トラミプロセートの一次代謝物である３−ＳＰＡの存在について評価した。表２は、ＣＳＦ中の３−ＳＰＡ濃度の記述的な概要を示している。代謝物の濃度は、７８週目のＣＳＦ試料が入手可能であった６人の患者で定量化した。３−ＳＰＡの平均ＣＳＦ濃度は、１４７ｎＭ（範囲＝１１４．３〜２３５．８ｎＭ）であり、したがって、薬物未使用（ナイーブ）患者で観察されたレベルの１２．６倍の増大に相当する。

３−ＳＰＡの抗Ａβ４２オリゴマー活性
Ａβ４２の高い高次構造の可塑性に対処し、かつ３−ＳＰＡとの相互作用を特徴付けるために、進行波イオン移動度による四重極飛行時間型質量分析計（Ｑ−ＴＯＦ ＭＳ）を備えた、イオン移動度質量分析（ＩＭＳ）を使用した。Ａβ高次構造空間の調節の結果として生じる効果は、オリゴマー形成の防止である。本発明者らは、図３及び図４に示されるように、３−ＳＰＡのこの抗Ａβ４２オリゴマー効果の濃度依存性だけでなく時間依存性も発見した。Ａβ４２に対する３−ＳＰＡの濃度過剰依存性の要約を表３に示す。Ａβ４２よりも１００倍対１，０００倍モル過剰の３−ＳＰＡは、Ａβ４２オリゴマー形成の阻害の異なる亜種プロファイルをもたらす。この活性はまた、トラミプロセートの同じ過剰依存性とも比較される。五量体を除くＡβ４２オリゴマーの形成のほぼ完全な防止が３−ＳＰＡで示されている。

機能的な最終結果、すなわちＡβ４２オリゴマー形成の阻害は、トラミプロセート及びその代謝物である３−ＳＰＡの両方で同じであるが、プロセスの高次構造ランドスケープは異なる。生理学的条件下でのジアニオンとしての３−ＳＰＡは、Ａβ４２のアミノ酸側鎖上のカチオンと相互作用する（図５）。これらは、Ａｓｐ１、Ｌｙｓ１６、Ｌｙｓ２８、Ｈｉｓ１３、１４のプロトン化されたアミノ基である。同時に、Ａβ４２の３−ＳＰＡジアニオン及びカルボキシレート基の反発力が働いている。イオン相互作用のこの相互関係は、Ａβ４２モノマー種の重要な高次構造変化に寄与する。

イオン移動度ＭＳデータ及び分子動力学の両方とも（図３、４、７、８パネルＡ、及び８パネルＢ）は、Ａβ４２モノマーと３−ＳＰＡとの多重リガンド結合相互作用を提示する。３−ＳＰＡは、トラミプロセートとは異なるイオン相互作用を介してＡβ４２と相互作用する。興味深いことに、異なるイオン結合パターンを採用しているが、同じ条件下で、ＩＭＳ ＭＳ及び分子動力学からのデータは、両方の化合物からの定性的に同じ抗Ａβ４２オリゴマーの結果を示している。トラミプロセートはインビトロで２４時間後にＡβ４２オリゴマーの形成を完全に阻害することを示したが、３−ＳＰＡは、同じ時間スケールでの五量体の形成を阻害することを除いて、同じ結果を示した。ただし、詳細な時間経過の調査ではまた、オリゴマー阻害の時間依存性の経過も示されている。４時間後、３−ＳＰＡは、二量体、三量体、五量体を除いて、オリゴマーの形成を阻害する。２４時間の持続的な曝露後、阻害されなかった唯一のオリゴマー種は、Ａβ４２の五量体であった。これらのデータによって、トラミプロセートの最初の抗オリゴマー効果の後に、トラミプロセート代謝物３−ＳＰＡの２番目の抗オリゴマー効果が続くことが示唆されている。

ラットにおける経口投与された３−ＳＰＡの薬物動態及び脳浸透
透明な溶液として生理食塩水に溶解し、それぞれ３０ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでラットに経口及び静脈内投与された、３−ＳＰＡの単回投与の血漿濃度を図９に示す。３０ｍｇ／ｋｇの３−ＳＰＡの単回経口投与後の１、２、６、及び２４時間での脳、ＣＳＦ及び対応する血漿のレベルを図１０に示す。薬物動態パラメーターの計算には、平均ＰＫ曲線を使用した。ラットにおいて得られた３−ＳＰＡの薬物動態パラメーター、経口バイオアベイラビリティ、及び脳浸透を、表４〜６に示す。

３．式Ｉの化合物の調製
３−スルホプロパン−１−アルキルエステルのアルキルエステルの一般的な合成

次の試薬をこの順序で追加する：オレフィン（０．２０ミリモル）、ＭｅＯＨ（２．０ｍＬ）、トリエチルアミン（５．５μＬ、０．０４ミリモル）及び０．５Ｍ亜硫酸水素ナトリウム水溶液（０．６ｍＬ、０．３ミリモル）（磁気撹拌棒を装備した試験管中）。反応混合物を２２℃で１４時間撹拌する。

あるいは、これらのアルキルエステルは、Ｎａ_２ＳＯ_３及び対応するアルコールと反応させることにより、ベータ−ブロモプロピオン酸から調製してもよい。

３−スルホプロパン−１−アルキルエステルを調製するための代替手順。
３−クロロ−３−オキソプロパン−１−スルホン酸と、室温でアセトニトリル中の対応するＣ_１−Ｃ_２０アルコールとの反応によって、３−スルホプロパン酸の対応するＣ_１−Ｃ_２０エステルを得る。

α−スルホカルボン酸ハロゲン化物の調製
スルホカルボン酸クロリドは、スルホカルボン酸をハロゲン化剤、例えばジエチルエーテル中のＳＯＣｌ_２及び３０°で４５時間溶解するのに必要な量のジメチルホルムアミドで処理することによって、調製してもよい。

側鎖のヒドロキシル官能基を介して結合したアミノ酸に由来する３−スルホプロパン酸エステルの一般的な合成
有機溶媒、例えばアセトニトリル（可溶化または反応物の必要に応じてＤＭＦを含む）中での１当量のＮ−保護アミノ酸またはＮ−保護及びカルボキシル誘導体化アミノ酸と１当量の３−クロロ−３−オキソプロパン−１−スルホン酸との反応物を、室温で混合する。アミノ保護基に応じて、トリエチルアミンまたはＮ−メチピペリジンを添加する。開始アミノ酸が消失するまで反応をモニターする。反応混合物を蒸発させた後、典型的な後処理を行う。

（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−［（３−スルホプロパノイル）オキシ］−プロパン酸の合成
有機溶媒、例えばアセトニトリル（可溶化または反応物の必要に応じてＤＭＦを含む）及びＮ−メチルピペリジン中での１当量のＢｏｃ−Ｌ−セリンと１当量の３−クロロ−３−オキソプロパン−１−スルホン酸との反応物を、室温で混合する。開始Ｂｏｃ−Ｌ−セリンが消失するまで反応をモニターする。反応混合物を典型的な後処理で蒸発させて、（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−［（３−スルホプロパノイル）オキシ］プロパン酸を得る。

（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（３−スルホプロパノイル）オキシ］プロパン酸の調製
（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−［（３−スルホプロパノイル）オキシ］プロパン酸を、トリフルオロ酢酸中で、またはジクロロメタンとトリフルオロ酢酸との混合物（１：１）中では、チオアニゾールの存在下で３０分間、脱保護する。

２−（カルバモイルメチルカルバモイル）エタンスルホン酸、（３−スルホプロパンアミド）酢酸、［２−（３−スルホプロパンアミド）アセトアミド］酢酸、及び２−［（カルバモイルメチルカルバモイル）メチルカルバモイル］エタンスルホン酸のコア構造を有する化合物の合成のための一般的な手順
１当量の適切にＮ保護された、及び側鎖Ｏ−保護のアミノ酸もしくはアミノ酸誘導体またはＮ−保護及び側鎖のＯ−保護ジペプチドもしくはジペプチド誘導体を、（反応物の溶解度次第で）ＤＭＦ含有のアセトニトリル中の１当量の３−クロロ−３−オキソプロパン−１−スルホン酸に添加し、次に１当量の三級塩基（例えば、トリメチルアミンまたはＮ−メチルピペリジン）を添加する。反応は室温で行い、開始アミノ酸またはジペプチド成分が消失するまでモニターする。典型的な後処理により、対応する生成物を得る。

本明細書に記載の前述の化合物の活性及び／または薬学的特性は、当業者に公知の生物学的及び／またはＡＤＭＥアッセイを使用して得てもよい。

４． 考察

本発明者らの研究から、薬物未使用（ナイーブ）の対象のヒト脳脊髄液（ＣＳＦ）に３−ＳＰＡが存在することを発見した。例えば、図２を参照のこと。また、上で例示したように（例えば、表１を参照のこと）、認知障害のある６４人のナイーブ患者のＣＳＦに３−ＳＰＡが存在することを確認した。研究からの平均３−ＳＰＡ濃度は１１．７±４．３ｎＭであった。また、３−ＳＰＡが時間と濃度の両方に依存する方法で抗Ａβ４２オリゴマー効果を誘発することも本発明者らによって示された。上記の「３−ＳＰＡの抗Ａβ４２オリゴマー活性」のセクションを参照のこと。本発明者らは、さらに、３−ＳＰＡが１００％の経口バイオアベイラビリティ及び２５％の脳浸透を示すことを示しており、これによって３−ＳＰＡが十分に吸収され、血液脳関門を通過することが示されている。表４〜６を参照のこと。まとめると、これらのデータによって、ＡＬＺ−８０１またはトラミプロセートの経口投与後のヒトの脳におけるより高いＣＳＦ濃度が、代謝物３−ＳＰＡのＣＮＳへの浸透に起因することが示唆される。

また、ＣＳＦ中の３−ＳＰＡの濃度と認知障害の重症度との間の逆相関も確認した。例えば、ＡＤの重症度が低下するにつれて、ＣＳＦ中により高濃度の３−ＳＰＡが見られた。図６を参照のこと。対照的に、ＡＤの重症度が増すにつれて、ＣＳＦ中に低濃度の３−ＳＰＡが見られた。図６を参照のこと。このデータは、脳内の３−ＳＰＡのレベルが、疾患の進行の可能性を減らすか、または発症を遅らせるのに重要な役割を果たすことを示唆している。

これらの知見から、本発明者らは、３−ＳＰＡのＣＳＦレベルの増大が、ＡＤに罹患している対象に治療上の利益を提供し得ると仮定する。また、本発明者らは、そのような増大は、認知障害が最も少ないＡＤ対象（すなわち、ＭＭＳＥ＝３０）（「ベースライン閾値レベル」））に追加の利益を提供し、及びそのような高いレベルを維持することは、プラセボ治療と比較して、それらの対象をさらなる認知低下から保護するか、または認知低下の速度を低下させるはずであると仮定する。このようなベースライン閾値レベルを超える３−ＳＰＡのＣＳＦレベルの増大は、本明細書に記載の式Ｉの化合物を投与することによって達成され得る。この新しい治療アプローチは、アミロイドベータオリゴマーの神経毒性を軽減する手段を提供し、かつＡＤなどの認知障害を治療するための臨床ルートを提供する。

本発明の多数の実施形態を説明してきたが、本発明者らの基本例は、本発明の化合物及び方法を利用する他の実施形態を提供するために変更されてもよいことが明らかである。したがって、本発明の範囲は、例として表されている特定の実施形態ではなく、添付の特許請求の範囲によって定義されるべきであることが理解されよう。

本出願を通じて引用され得る全ての参照文献（参考文献、発行済み特許、公開特許出願及び同時係属特許出願を含む）の内容は、その全体が参照により本明細書に明示的に組み込まれる。特に定義しない限り、本明細書で使用する全ての技術用語及び科学用語は、当業者に共通して知られた意味と一致する。

Claims (22)

1. アルツハイマー病に罹患している対象を治療する方法であって、前記対象に有効量の式Ｉの化合物：
   

   

   、または、その薬学的に許容される塩を投与するステップを含み、式中：
   Ｒ^１は、−Ｏ−Ｒ^３、−Ｏ−Ｒ^４−ＣＨ（ＮＨＲ^６）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ^５、及び−［Ｎ（Ｒ^６）−ＣＨ（Ｒ^７）−Ｃ（Ｏ）］_１−２−Ｒ^５から選択され、
   Ｒ^２は、水素、Ｒ^３、及びＲ^４−ＣＨ（ＮＨＲ^６）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^５から選択され、
   各Ｒ^３は独立して、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル、−Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニル、−Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニル、−（Ｃ_０−Ｃ_２０アルキレン）−アリール、−（Ｃ_０−Ｃ_２０アルキレン）−カルボシクリル、−（Ｃ_０−Ｃ_２０アルキレン）−ヘテロシクリル、−（Ｃ_０−Ｃ_２０アルキレン）−ヘテロアリール、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニレン）−アリール、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニレン）−カルボシクリル、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニレン）−ヘテロシクリル、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニレン）−ヘテロアリール、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニレン）−アリール、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニレン）−カルボシクリル、−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニレン）−ヘテロシクリル、及び−（Ｃ_２−Ｃ_２０アルキニレン）−ヘテロアリールから選択され、
   各Ｒ^４は天然または非天然のαアミノ酸の独立して選択された誘導体化側鎖であり、前記側鎖が誘導体化の前に前記側鎖上に存在する遊離の−ＯＨ基を通じて誘導体化されており、
   各Ｒ^５は独立して、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ_１−Ｃ_４アルキル及び−ＮＨ_２から選択され、
   各Ｒ^６は独立して、水素及び−Ｃ（Ｏ）Ｒ^８から選択され、
   Ｒ^７は、αアミノ酸の側鎖であり、かつ
   各Ｒ^８は独立して、水素、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキレン）−アリール、及び（Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ）−アリールから選択され、
   式中、
   Ｒ^３の各アルキル、アルキレン、アルケニル、アルケニレン、アルキニルまたはアルキニレン部分は、ハロ、−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキル）、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル）、カルボシクリル、アリール、ヘテロシクリル、及びヘテロアリールから独立して選択される最大６個の置換基で必要に応じて置換され、
   Ｒ^３の各カルボシクリル、アリール、ヘテロシクリル、またはヘテロアリール部分は必要に応じて、ハロ、−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキル）、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル）、Ｃ_１−Ｃ_１８アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１８アルケニル、及びＣ_２−Ｃ_１８アルキニルから独立して選択される最大４個の置換基で置換されており、式中前記Ｃ_１−Ｃ_１８アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１８アルケニル、またはＣ_２−Ｃ_１８アルキニルの前記アルキル、アルケニル、またはアルキニル部分はそれぞれ、必要に応じて、ハロ、−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキル）、及び−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル）から独立して選択される最大６個の置換基で置換されており、
   Ｒ^１は、２以下の環状部分を含み、かつ
   Ｒ^２は、２以下の環状部分を含む、前記方法。
2. Ｒ^２が、水素及びＣ_１−Ｃ_６アルキルから選択される、請求項１に記載の方法。
3. Ｒ^２が、水素及び−ＣＨ_３から選択される、請求項１または２に記載の方法。
4. Ｒ^１が−Ｏ−Ｒ^３、−Ｏ−Ｒ^４−ＣＨ（ＮＨＲ^６）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ^５、及び
   −Ｏ−Ｒ^４−ＣＨ（ＮＨＲ^６）−ＣＨ（ＯＨ）−Ｒ^５から選択され、
   Ｒ^３が、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルであり、かつ
   Ｒ^４が、−ＣＨ（ＣＨ_３）−、−ＣＨ_２−、
   

   

   、及び
   

   

   から選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
5. Ｒ^６が、水素、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ベンジルから選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
6. Ｒ^５が、−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、及び−ＯＣＨ_２ＣＨ_３から選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
7. 前記対象が、式：
   

   

   の化合物の内因性レベルが、治療前に所定のベースライン閾値未満であると判定された後にのみ治療される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
8. 前記対象における３−ＳＰＡの濃度が、脳脊髄液中の３−ＳＰＡの濃度である、請求項７に記載の方法。
9. 前記対象がＡｐｏＥ４ヘテロ接合性である場合にのみ、前記対象に式Ｉの化合物を投与する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
10. 前記対象がＡｐｏＥ４／４ホモ接合性である場合にのみ、前記対象に式Ｉの化合物を投与する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
11. 前記対象が治療前に２２〜２８のＭＭＳＥスコアを有する場合にのみ、前記対象が選択されるか、または式Ｉの化合物を投与される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
12. 前記対象が治療前に２２〜２６のＭＭＳＥスコアを有する場合にのみ、前記対象が選択されるか、または式Ｉの化合物を投与される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
13. 前記所定のベースライン閾値が、２５ｎｇ／ｍＬ未満の３−ＳＰＡ濃度として定義される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
14. 前記所定のベースライン閾値が、６ｎｇ／ｍｌと２５ｎｇ／ｍｌとの間の３−ＳＰＡ濃度として定義される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
15. 前記所定のベースライン閾値が５ｎｇ／ｍＬ未満の３−ＳＰＡ濃度として定義される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
16. 前記所定のベースライン閾値が２ｎｇ／ｍｌ〜４ｎｇ／ｍＬの３−ＳＰＡ濃度として定義される、請求項１〜１３及び１５のいずれか１項に記載の方法。
17. アルツハイマー病に罹患している対象を選択及び治療する方法であって：
    ａ）次の場合：
    ｉ．３−ＳＰＡが、前記対象から採取した脳脊髄液試料に１０ｎｇ／ｍｌ未満の濃度で存在し、
    ｉｉ．前記対象のベースラインＭＭＳＥスコアが２２〜２８であり、かつ
    ｉｉｉ．前記対象が少なくとも１つのＡｐｏＥ４対立遺伝子を有する、場合に前記対象を選択することと、
    ｂ）前記選択された対象に、有効量の請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することと、を含む、前記方法。
18. 前記対象の脳脊髄液中に存在する３−ＳＰＡの濃度が２〜４ｎｇ／ｍｌである、請求項１７に記載の方法。
19. 前記対象がＡｐｏＥ４ホモ接合性である、請求項１７または１８に記載の方法。
20. アルツハイマー病に罹患している対象を治療する方法であって、以下のステップ：
    ａ）前記対象の脳脊髄液に存在する３−ＳＰＡの濃度を測定することと、
    ｂ）
    ｉ）前記対象の脳脊髄液中の３−ＳＰＡの濃度が１０ｎｇ／ｍｌ未満であり、かつ
    ｉｉ）前記対象のベースラインＭＭＳＥスコアは２２から３０である場合にのみ、有効量の請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することと、を含む、前記方法。
21. 請求項２０に記載の方法であって、
    ｉ）前記対象のＣＳＦ中の内因性化合物の濃度が１０ｎｇ／ｍｌ未満であり、
    ｉｉ）前記対象のベースラインＭＭＳＥスコアが２２〜２８であり、かつ
    ｉｉｉ）前記対象は２つのＡｐｏＥ４対立遺伝子を有する場合にのみ、前記対象に有効量の前記化合物を投与する、前記方法。
22. 前記対象の脳脊髄液中の３−ＳＰＡの濃度が２〜４ｎｇ／ｍｌである場合にのみ前記対象が選択される、請求項２０または２１に記載の方法。

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