JP2021530506A - 免疫チェックポイントを標的とする二重特異性抗体 - Google Patents

Abstract

本発明は、ヒトＰＤ−１をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７をアゴナイズする二重特異性抗体に関し、固形腫瘍および血液腫瘍を単独で、ならびに化学療法および電離放射線と組み合わせて治療するのに有用であり得る。【選択図】なし

Description

本発明は、医薬の分野に属する。具体的には、本発明は、ヒトプログラム細胞死１（ＰＤ−１）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７をアゴナイズする新規の二重特異性抗体、そのような二重特異性抗体を含む組成物、ならびにそのような二重特異性抗体を単独で、または化学療法および他の癌治療薬と組み合わせて使用して、固形腫瘍および血液腫瘍を治療する方法に関する。

免疫チェックポイントは、適応免疫応答の調節において重要な役割を果たす、複数の共阻害および共刺激受容体を含む免疫細胞（例えば、Ｔ細胞および樹状細胞）上で発現される膜タンパク質の群である。よく研究されているチェックポイントには、ＰＤ−１およびＣＤ１３７が含まれる。ＰＤ−１と、そのリガンドであるプログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）およびプログラム細胞死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）との間の相互作用は、腫瘍免疫回避および腫瘍微小環境で発生する免疫抑制において重要な役割を果たすことが示されている阻害シグナルを提供する。抗ＰＤ−１抗体および／または抗ＰＤ−Ｌ１抗体によるＰＤ−１阻害シグナル伝達の遮断は、臨床的に検証されており、特定の癌の治療に有意な臨床的進歩をもたらしているが、応答しないか、再発するか、ＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１抗体治療（複数可）に対する耐性を獲得するか、または他の方法で治療に不耐性となるかのいずれかである、多くの患者が存在する。４−１ＢＢとしても知られるＣＤ１３７は、Ｔ細胞増殖およびエフェクター機能の促進、免疫記憶のブースト、ならびに活性化誘導細胞死の阻害などによるＴ細胞駆動免疫応答の活性化において重要な役割を果たす。ＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体は、マウス腫瘍モデルでは、単剤療法および併用療法として有望であることが示されているが、ヒトＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体は、毒性および／または有効性の欠如のために、ヒト癌患者では、単剤療法および併用療法のいずれかとして十分な応答を未だに実証していない。実際に、ヒトＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体はいずれも、ヒトでの治療用途について承認されていない。したがって、免疫チェックポイント経路を標的とする追加の治療に対する必要性が存在する。

ＣＤ１３７をアゴナイズし、ＰＤ−１をアンタゴナイズする抗体の組み合わせ、例えば、ウレルマブ（すなわち、抗ＣＤ１３７アゴニストモノクローナル抗体）とニボルマブ（すなわち、抗ＰＤ−１アンタゴニストモノクローナル抗体）との組み合わせは、固形腫瘍の治療のための臨床試験で研究されている（Ｔｏｌｃｈｅｒ ａｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ２３（１８）２０１７）。しかしながら、より高い潜在的に有効な用量のウレルマブは、高トランスアミナーゼ血症および他の有害事象に関連している。ＣＤ１３７アゴニスト抗体をＰＤ−１を発現する細胞に特異的に標的化することで、アゴニストＣＤ１３７抗体の全身投与に関連する有害事象を制限することができる。したがって、ＰＤ−１を発現する細胞に優先的に結合することによって免疫ブーストを提供し、潜在的に、ＣＤ１３７アゴニズムの効果をＰＤ−１も発現する細胞に制限するように設計された本発明の二重特異性抗体に対する必要性が存在する。

ＷＯ２０１８／０４５１１０は、［ＩＣＯＳ×ＰＤ−１］および［ＣＤ１３７×ＰＤ−１］を含む、Ｔ細胞を活性化して、癌を治療するための、共阻害受容体および共刺激受容体に結合するいくつかの二重特異性抗体（Ｆａｂ−ｓｃＦｖ−Ｆｃ形式）を開示している。ＷＯ２０１８／０４５１１０に開示されるＣＤ１３７Ｆａｂは、ＢＭＳ２０Ｈ４．９に由来するようであり、これは、重度の高トランスアミナーゼ血症の発症に関連している可能性がある（Ｓｅｇａｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（２０１６）１−８）。ＷＯ２０１８／０４５１１０に開示される二重特異性抗体とは対照的に、ＩｇＧ様二重特異性抗体は、高い安定性、長い血清半減期、および低い免疫原性などの、天然ＩｇＧ抗体に関連する好ましい特性の多くを有する（Ｈａ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２０１６）Ａｒｔｉｃｌｅ３９４）。ＢＭＳ２０Ｈ４．９に関連する既知の毒性のため、およびＷＯ２０１８／０４５１１０に記載の二重特異性の望ましくない構造形式のために、ヒトＰＤ−１をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７をアゴナイズするＩｇＧ様二重特異性抗体であり、強力な抗癌免疫応答を促進し、許容できる毒性プロファイルを示す追加の二重特異性抗体に対する必要性が存在する。

本発明の二重特異性抗体は、２つの異なる重鎖のヘテロ二量体対合を好み、ホモ二量体の形成を嫌うように設計される。好ましくは、本明細書に記載の二重特異性抗体は、ヒトＩｇＧ１に由来するＦｃ部分を含有する。ＩｇＧ１は、Ｆｃガンマ受容体（ＦｃγＲ）ファミリーのタンパク質およびＣ１ｑに結合することが既知である。ＦｃγＲまたはＣ１ｑに結合するＩｇＧ１はそれぞれ、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導する。したがって、好ましくは、本明細書に記載の抗体は、ＦｃγＲおよびＣ１ｑへの抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である。好ましくは、ＥＵ番号付けにおけるＬ２３４Ａ位およびＬ２３５Ａ位のアミノ酸置換をＣＨ２領域に導入して、ＦｃγＲおよびＣ１ｑへの抗体の結合を低減する。任意で、ＥＵ番号付けにおけるＮ２９７Ｑ位のアミノ酸置換を導入して、抗体のＡＤＣＣおよびＣＤＣ活性をさらに低減する。

さらに、本明細書に記載の抗体（以下「抗体Ａ」と称する）の生成に用いられた選択的変異導入を、表１〜７に要約する。加えて、表１〜４は、親抗体７Ａ５および１１４４４と比較した、抗体Ａの可変領域（抗ＣＤ１３７アーム−７Ａ５＊／抗ＰＤ−１アーム−１１４４４＊）内の残基の選択的変異導入を示す。表５〜７は、野生型ヒトＩｇＧ１ならびに野生型（ｗｔ）ヒトラムダおよびカッパと比較した、抗体Ａの定常領域内で実行された選択的変異誘発導入を要約する。抗体Ａの２つのアームの残基の選択的変異導入、ならびに親モノクローナル抗体である抗ＣＤ１３７（７Ａ５）および抗ＰＤ−１（１１４４４）を、表８にさらに要約する。

^ａ括弧内の番号付けは、Ｋａｂａｔ番号付け（Ｋａｂａｔ ＥＡ ｅｔ ａｌ．，１９９１ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ，Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）に基づく。

^ｂ括弧内の番号付けは、ＥＵ番号付け（Ｋａｂａｔ ＥＡ ｅｔ ａｌ．，１９９１ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ，Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）に基づく。

^ｃ７Ａ５重鎖内のＭ１０１ＡおよびＧ１０６Ａの選択的変異導入を実施して、メチオニン酸化を排除し、二重特異性抗体のヒトＣＤ１３７アゴニストアームの結合親和性を低減した。ヒトＰＤ−１への抗体Ａの結合親和性は、ヒトＣＤ１３７への抗体Ａの結合親和性よりも少なくとも１０倍、好ましくは１００倍以上高い。１１４４４重鎖内のＭ５４Ｓの選択的変異導入もまた実施して、メチオニン酸化を排除した。

本発明の抗体は、抗体の各アームが、一部には２つの異なる重鎖および２つの異なる軽鎖により、その同種抗原に対する選択的な一価の結合を示すという点で、ヘテロ二量体である。本発明では、抗体の一方のアームは、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）に結合するが、他方のアームは、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）に結合する。本発明の抗体は、該二重特異性抗体が、一部にはヒトＣＤ１３７（配列番号２６）への結合親和性よりも少なくとも１０倍、好ましくは１００倍以上高いヒトＰＤ−１（配列番号２５）への結合親和性を示すという事実により、好ましい薬理学的特性を実証する。したがって、本発明の抗体は、ＰＤ−１発現細胞を選択的に標的とし、潜在的に、ＣＤ１３７アゴニズムをＰＤ−１を共発現する細胞に制限する。さらに、本発明の抗体は、親抗体の組み合わせと比較して、ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）共刺激アッセイにおいてインターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）産生を促進する機能を保持する。さらに、本明細書に記載の抗体は、親モノクローナル抗体の組み合わせと比較して、抗体がマウスに投与された場合、Ｈ２９２腫瘍組織内で独特の免疫遺伝子発現パターンを予想外に誘導する。

したがって、本発明は、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）アゴナイズする抗体を提供し、ヒトＰＤ−１への結合親和性は、ヒトＣＤ１３７への結合親和性よりも少なくとも１０倍高い。本発明は、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズする抗体を提供し、ヒトＰＤ−１への結合親和性は、ヒトＣＤ１３７への結合親和性よりも１００倍高い。

本発明はまた、ＣＤ１３７およびＰＤ−１の両方を共発現するように操作された細胞内で、本明細書に開示されるジャーカットＮＦκＢ−Ｌｕｃレポーターアッセイで測定して、ＢＭＳ２０Ｈ４．９によるＣＤ１３７アゴニズムのレベルよりも低いレベルで、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズする抗体も提供する。

本発明はまた、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズする抗体であって、抗体の第１の重鎖が、抗体の第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第２の重鎖が、抗体の第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第１の重鎖が、抗体の第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、任意で、ヒトＰＤ−１への抗体の結合親和性が、ヒトＣＤ１３７への結合親和性の１０倍以上であり、好ましくは、ヒトＰＤ−１への抗体の結合親和性が、ヒトＣＤ１３７への結合親和性の１００倍以上である、抗体も提供する。

本発明は、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズする抗体であって、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）抗体の第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有する相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号２のアミノ酸配列を有する相補性決定領域２（ＣＤＲ２）、および配列番号３のアミノ酸配列を有する相補性決定領域（ＣＤＲ３）を含み、
ｂ）抗体の第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）抗体の第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）抗体の第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む、抗体を提供する。

本発明は、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含む抗体であって、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）第１の重鎖の可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖の可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖の可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖の可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、抗体を提供する。

本発明は、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含む抗体であって、
ａ）第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、抗体を提供する。

本発明は、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含む抗体であって、抗体の第１の重鎖が、抗体の第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第２の重鎖が、抗体の第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第１の重鎖が、抗体の第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、抗体を提供する。

本発明は、本明細書に開示される抗体であって、抗体が、Ｆｃガンマ受容体への抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、抗体を提供する。

本発明は、配列番号５のアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列、配列番号１７のアミノ酸配列、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する少なくとも１つのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むＤＮＡ分子を提供する。

本発明は、配列番号５のアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列、配列番号１７のアミノ酸配列、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する少なくとも１つのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むＤＮＡ分子を含む、哺乳動物細胞を提供する。

本発明は、抗体を産生するためのプロセスであって、抗体を発現することができる哺乳動物細胞を培養することと、抗体を回収することとを含み、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）抗体の第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）抗体の第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）抗体の第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）抗体の第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、任意で、抗体の第１の重鎖が、抗体の第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第２の重鎖が、抗体の第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第１の重鎖が、抗体の第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、プロセスを提供する。

本発明は、抗体を産生するためのプロセスであって、抗体を発現することができる哺乳動物細胞を培養することと、抗体を回収することとを含み、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）第１の重鎖の可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖の可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖の可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖の可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、プロセスを提供する。

本発明は、抗体を産生するためのプロセスであって、抗体を発現することができる哺乳動物細胞を培養することと、抗体を回収することとを含み、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、
ａ）第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、プロセスを提供する。

本発明は、本明細書に開示される本発明の抗体を産生するためのプロセスであって、抗体を発現することができる哺乳動物細胞を培養することと、抗体を回収することとを含み、抗体が、Ｆｃガンマ受容体への抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、プロセスを提供する。

本発明は、抗体を発現することができる哺乳動物細胞を培養することと、抗体を回収することとを含むプロセスによって産生される抗体であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）抗体の第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）抗体の第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）抗体の第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）抗体の第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、任意で、抗体の第１の重鎖が、抗体の第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第２の重鎖が、抗体の第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第１の重鎖が、抗体の第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、抗体を提供する。

本発明は、抗体を発現することができる哺乳動物細胞を培養することと、抗体を回収することとを含むプロセスによって産生される抗体であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）第１の重鎖の可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖の可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖の可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖の可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、抗体を提供する。

本発明は、抗体を発現することができる哺乳動物細胞を培養することと、抗体を回収することとを含むプロセスによって産生される抗体であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、
ａ）第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、抗体を提供する。

本発明は、抗体を含む薬学的組成物であって、抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）抗体の第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）抗体の第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）抗体の第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）抗体の第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、抗体の第１の重鎖が、抗体の第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第２の重鎖が、抗体の第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第１の重鎖が、抗体の第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、薬学的組成物を提供する。

本発明は、抗体を含む薬学的組成物であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）第１の重鎖の可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖の可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖の可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖の可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、薬学的組成物を提供する。

本発明は、抗体を含む薬学的組成物であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、
ａ）第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、薬学的組成物を提供する。

本発明は、本発明の抗体を含む薬学的組成物であって、抗体が、Ｆｃガンマ受容体への抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、薬学的組成物を提供する。

本発明は、癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の抗体を投与することを含み、抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）抗体の第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）抗体の第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）抗体の第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）抗体の第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
抗体の第１の重鎖が、抗体の第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第２の重鎖が、抗体の第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第１の重鎖が、抗体の第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、方法を提供する。

本発明は、癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の抗体を投与することを含み、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）第１の重鎖の可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖の可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖の可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖の可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、方法を提供する。

本発明は、癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の抗体を投与することを含み、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、
ａ）第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、方法を提供する。

本発明は、癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の本明細書に記載の抗体を投与することを含み、抗体が、Ｆｃガンマ受容体への抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、方法を提供する。

本発明は、癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の本明細書に記載の抗体を投与することを含み、癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、方法を提供する。

本発明は、癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の本明細書に記載の抗体を投与することを含み、抗体が、電離放射線と組み合わせて投与される、方法を提供する。

本発明は、癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の本明細書に記載の抗体を投与することを含み、抗体が、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、方法を提供する。

本発明は、癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の本明細書に記載の抗体を投与することを含み、抗体が、電離放射線および１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、方法を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための抗体であって、抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）抗体の第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）抗体の第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）抗体の第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）抗体の第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
抗体の第１の重鎖が、抗体の第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第２の重鎖が、抗体の第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第１の重鎖が、抗体の第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、抗体を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）第１の重鎖の可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖の可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖の可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖の可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、抗体を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、
ａ）第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、抗体を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体であって、抗体が、Ｆｃガンマ受容体への抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、抗体を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体であって、癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、抗体を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体であって、抗体が、電離放射線との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、抗体を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体であって、抗体が、１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、抗体を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体であって、抗体が、電離放射線および１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、抗体を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための抗体を含む薬学的組成物であって、抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）抗体の第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）抗体の第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）抗体の第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）抗体の第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
抗体の第１の重鎖が、抗体の第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第２の重鎖が、抗体の第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第１の重鎖が、抗体の第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、薬学的組成物を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための抗体を含む薬学的組成物であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）第１の重鎖の可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖の可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖の可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖の可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、薬学的組成物を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための抗体を含む薬学的組成物であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、
ａ）第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、薬学的組成物を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体を含む薬学的組成物であって、抗体が、Ｆｃガンマ受容体への抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、薬学的組成物を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体を含む薬学的組成物であって、癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、薬学的組成物を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体を含む薬学的組成物であって、組成物が、電離放射線との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、薬学的組成物を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体を含む薬学的組成物であって、薬学的組成物が、１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、薬学的組成物を提供する。

本発明は、癌の治療における使用のための本発明の抗体を含む薬学的組成物であって、薬学的組成物が、電離放射線および１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、薬学的組成物を提供する。

本発明は、癌の治療のための医薬品の製造における本発明の抗体の使用であって、抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）抗体の第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）抗体の第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）抗体の第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）抗体の第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
抗体の第１の重鎖が、抗体の第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第２の重鎖が、抗体の第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、抗体の第１の重鎖が、抗体の第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、使用を提供する。

本発明は、癌の治療のための医薬品の製造における本発明の抗体の使用であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）第１の重鎖の可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖の可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖の可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖の可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、使用を提供する。

本発明は、癌の治療のための医薬品の製造における本発明の抗体の使用であって、抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、
ａ）第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ）第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ）第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ）第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、使用を提供する。

本発明は、癌の治療のための医薬品の製造における本発明の抗体の使用であって、抗体が、Ｆｃガンマ受容体への抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、使用を提供する。

本発明は、癌の治療のための医薬品の製造における本発明の抗体の使用であって、癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、使用を提供する。

本発明は、癌の治療のための医薬品の製造における本発明の抗体の使用であって、抗体が、電離放射線との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、使用を提供する。

本発明は、癌の治療のための医薬品の製造における本発明の抗体の使用であって、抗体が、１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、使用を提供する。

本発明は、癌の治療のための医薬品の製造における本発明の抗体の使用であって、抗体が、電離放射線および１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、使用を提供する。

本明細書に記載の治療方法に言及する実施形態では、そのような実施形態はまた、その治療に使用するための、または代替的にその治療に使用するための医薬品の製造に使用するための、さらなる実施形態でもある。

有用な化学療法薬の非限定的な例には、５−フルオロウラシル、ヒドロキシウレア、ゲムシタビン、メトトレキサート、ドキソルビシン、エトポシド、カルボプラチン、シスプラチン、シクロホスファミド、メルファラン、ダカルバジン、タキソール、カンプトテシン、ＦＯＬＦＩＲＩ、ＦＯＬＦＯＸ、ドセタキセル、ダウノルビシン、パクリタキセル、オキサリプラチン、およびそれらの組み合わせが含まれる。

本発明の抗体、またはそれを含む薬学的組成物は、非経口経路によって投与され得、この非限定的な例は、静脈内投与である。本発明の抗体は、単独で薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と一緒に単回用量または複数回用量でヒト患者に投与され得る。本発明の薬学的組成物は、当該技術分野で既知の方法によって調製することができる（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２^ｎｄ ｅｄ．（２０１２），Ａ．Ｌｏｙｄ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ）。

投薬計画は、最適な所望の応答（例えば、治療効果）を提供するように調整され得る。局所的もしくは全身的、またはそれらの組み合わせでの静脈内（ｉ．ｖ．）または非静脈内投与のための投薬スケジュールは、典型的には、単回ボーラス投薬もしくは持続注入から、１日当たり複数回の投与（例えば、４〜６時間毎）までの範囲であるか、または治療医および患者の状態によって示されるとおりである。

本明細書で使用される場合、「アンタゴナイズする」という用語は、所望の生物学的活性を遮断、妨害、抑制、または低減する行為を指す。これに関して、本発明の抗体は、ヒトＰＤ−１に結合し、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１の結合を遮断することによって、ヒトＰＤ−１をアンタゴナイズする。

本明細書で使用される場合、「アゴナイズする」という用語は、所望の生物学的活性を刺激、促進、活性化、または増強する行為を指す。これに関して、本発明の抗体は、ヒトＣＤ１３７に結合し、ＣＤ１３７に対する天然ヒトリガンドとは独立して、ＣＤ１３７の下流のシグナル伝達経路を活性化することによって、ヒトＣＤ１３７をアゴナイズする。

「治療すること」（または「治療する」または「治療」）という用語は、既存の症状、障害、状態、または疾患の進行または重症度を遅延、妨害、抑制、緩和、停止、低減、または反転させることを指す。

「有効量」とは、研究者、医師、または他の臨床医によって求められている組織、系、動物、哺乳動物、またはヒトに対する生物学的もしくは医学的応答または所望の治療効果を誘発する、本発明の抗体または本発明の抗体を含む薬学的組成物の量を意味する。抗体の有効量は、個体の病状、年齢、性別、および体重、ならびに抗体が個体において所望の応答を誘発する能力などの因子に応じて変動し得る。有効量はまた、抗体の任意の毒性効果または有害効果よりも治療的に有益な効果が上回る量である。

本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、重鎖および軽鎖がジスルフィド結合によって相互接続されるように、２つの重鎖および２つの軽鎖を有する、操作された天然に存在しないポリペプチド複合体を指し、抗体は、ＩｇＧ様抗体である。各重鎖は、Ｎ末端ＨＣＶＲ（重鎖可変領域）および重鎖定常領域からなる。各軽鎖は、Ｎ末端ＬＣＶＲ（軽鎖可変領域）および軽鎖定常領域からなる。重鎖の定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメインを含有する。

本明細書で使用される場合、「修飾ヒトＩｇＧ１」という用語は、少なくとも１つのヒトＦｃガンマ受容体へのヒトＩｇＧ１の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１を意味する。典型的には、これは、Ｆｃガンマ受容体（複数可）への抗体の結合の低減につながる残基を変異させることによって実施される。

ＨＣＶＲおよびＬＣＶＲ領域は、フレームワーク領域（「ＦＲ」）と呼ばれる、より保存されている領域が点在する、相補性決定領域（「ＣＤＲ」）と呼ばれる、超可変性の領域にさらに細分することができる。各ＨＣＶＲおよびＬＣＶＲは、以下の順序、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順でアミノ末端からカルボキシ末端へと配置された、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲからなる。本明細書では、重鎖の３つのＣＤＲを「ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３」と称し、軽鎖の３つのＣＤＲを「ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３」と称する。ＣＤＲは、抗原との特異的相互作用を形成する残基の大部分を含有する。本発明の目的のために、ＮｏｒｔｈのＣＤＲ定義を使用する。ＮｏｒｔｈのＣＤＲの定義（Ｎｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，“Ａ Ｎｅｗ Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ＣＤＲ Ｌｏｏｐ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６，２２８−２５６（２０１１））は、多数の結晶構造を有する親和性伝搬クラスタ化（ａｆｆｉｎｉｔｙ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ）に基づいている。

本発明のＤＮＡ分子は、本発明の抗体中のポリペプチドのうちの少なくとも１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする天然に存在しないポリヌクレオチド配列を含む、ＤＮＡ分子である。

ＨＣＶＲ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＨＣＶＲをコードするＤＮＡを、重鎖定常領域をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって、完全長重鎖遺伝子に変換され得る。ヒトおよび他の哺乳動物の重鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知である。これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、例えば、標準的なＰＣＲ増幅によって取得され得る。

ＬＣＶＲ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＬＣＶＲをコードするＤＮＡを軽鎖定常領域をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって、完全長軽鎖遺伝子に変換され得る。ヒトおよび他の哺乳動物の軽鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知である。これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、標準的なＰＣＲ増幅によって取得され得る。

本発明のポリヌクレオチドは、配列が発現制御配列に作動可能に連結された後に宿主細胞において発現され得る。発現ベクターは、典型的には、エピソーム、または宿主染色体ＤＮＡの一体化した部分のいずれかとして、宿主生物中で複製可能である。一般的に、発現ベクターは、所望のＤＮＡ配列で形質転換されたそれらの細胞の検出を可能にするために、選択マーカー、例えば、テトラサイクリン、ネオマイシン、およびジヒドロ葉酸レダクターゼを含有する。

目的のポリヌクレオチド配列（例えば、抗体のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドおよび発現制御配列）を含有する発現ベクターは、宿主細胞のタイプに応じて異なる既知の方法によって宿主細胞に導入され得る。

本発明の抗体は、哺乳動物宿主細胞において容易に産生することができ、この非限定的な例には、ＣＨＯ、ＮＳ０、ＨＥＫ２９３、またはＣＯＳ細胞が含まれる。宿主細胞は、当該技術分野において既知の技術を使用して培養され得る。

タンパク質精製の様々な方法を用いて、本発明の抗体を精製することができ、そのような方法は、当該技術分野において既知であり、例えば、Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ１８２：８３−８９（１９９０）、およびＳｃｏｐｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，ＮＹ（１９９４）に記載される。

抗体発現および精製
抗体Ａの重鎖および軽鎖の可変領域ならびに完全長重鎖および軽鎖のアミノ酸配列、ならびに抗体Ａの完全長重鎖および軽鎖をコードするヌクレオチド配列を、「アミノ酸およびヌクレオチド配列」と題する節に列挙する。加えて、ＣＤＲ、可変領域、定常領域、完全長重鎖および軽鎖、ならびに抗体Ａの完全長重鎖および軽鎖をコードするヌクレオチド配列の配列番号を、表９に示す。

本発明の抗体は、本質的に以下のように発現され、精製され得る。最適な所定の重鎖：軽鎖ベクター比率を使用して抗体を分泌するための発現系、または重鎖および軽鎖の両方をコードする単一のベクター系で、ＨＥＫ２９３またはＣＨＯなどの適切な宿主細胞を、一過的にまたは安定的にトランスフェクトする。本発明の抗体Ａは、配列番号５のアミノ酸配列を有する第１の重鎖、配列番号１１のアミノ酸配列を有する第１の軽鎖、配列番号１７のアミノ酸配列を有する第２の重鎖、および配列番号２３のアミノ酸配列を有する第２の軽鎖をコードする１つ以上のＤＮＡ分子を使用して抗体を分泌するための発現系で、一過的にまたは安定的にトランスフェクトされ得る。

抗体は、多くの一般的に使用される技術のうちの１つを使用して精製され得る。例えば、培地は、リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）のような適合緩衝液で平衡化された、ＭａｂＳｅｌｅｃｔカラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、またはＫａｐｐａＳｅｌｅｃｔカラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に簡便に適用され得る。カラムは、非特異的結合構成成分を除去するために洗浄され得る。結合抗体は、例えば、ｐＨ勾配（１０ｍＭクエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ３．０に対して２０ｍＭのＴｒｉｓ緩衝液ｐＨ７、または１００ｍＭグリシン緩衝液ｐＨ３．０に対してリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４など）によって溶出され得る。抗体画分は、紫外線吸光度またはＳＤＳ−ＰＡＧＥなどによって検出され得、次いで、プールされ得る。意図する使用に応じて、さらなる精製は任意である。精製抗体は、一般的な技術を使用して濃縮および／または滅菌濾過され得る。可溶性凝集体および多量体は、サイズ排除、疎水性相互作用、イオン交換、マルチモーダル、またはヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーを含む一般的な技術によって効果的に除去され得る。精製抗体は、−７０℃で直ちに凍結されてもよく、または凍結乾燥されてもよい。

抗体Ａは、ヒトＰＤ−１およびヒトＣＤ１３７に結合する
Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）２０００（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用して、３７℃での表面プラズモン共鳴によって、可溶性ヒトＰＤ−１−細胞外ドメイン（ＥＣＤ）およびヒトＣＤ１３７−ＥＣＤへの抗体Ａの結合速度論および親和性を測定する。サンプルを、ＨＢＳ−ＥＰ＋（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０、ｐＨ７．６）泳動用緩衝液（Ｔｅｋｎｏｖａカタログ番号Ｈ８０２２）で希釈する。タンパク質Ａ（５ｍｇ／ｍＬ、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍカタログ番号５３９２０２）を、アミンカップリング化学を使用して、ＣＭ５センサーチップ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅカタログ番号２９１４９６０４）のフローセル１〜４上に３０００〜４０００応答単位（ＲＵ）のレベルで固定化する。要約すると、ＥＤＣ／ＮＨＳの１：１混合物を１０μＬ／分で７分間注入することによって、４つ全てのフローセルの表面を活性化させる。タンパク質Ａを、ｐＨ４．５の１０ｍＭ酢酸緩衝液で２００μｇ／ｍＬまで希釈し、１０μＬ／分の流速での７分間の注入によって、４つ全てのフローセル上に約３０００〜４０００ＲＵまで固定化する。未反応部位を、１０μＬ／分での７分間のｐＨ８．５の１Ｍエタノールアミン−ＨＣｌの注入によって遮断する。１０μＬ／分での３０秒間のｐＨ１．５のグリシンの注入を５回行うことによって、任意の非共有結合したタンパク質を除去する。

結合を、抗体捕捉法による多重サイクル速度論を使用して評価する。各サイクルは、タンパク質Ａチップへの抗体捕捉について２０または２５μＬ／分、ならびに分析物会合および解離について１００μＬ／分の流速で、３７℃で実施する。各サイクルは、以下のステップ、フローセル上の５０ＲＵのＲｍａｘ値を標的とするＨＢＳ−ＥＰ＋への２．５μｇ／ｍＬでの抗体の注入、ＨＢＳ−ＥＰ＋への１８０または２００秒間の分析物の注入（それぞれＰＤ−１−ＥＣＤおよびＣＤ１３７−ＥＣＤの２倍段階希釈による１０００ｎＭ〜１．９５ｎＭまたは５０００ｎＭ〜１９．５ｎＭの濃度範囲）後に６００秒間の解離相、ならびに１０μＬ／分の流速を利用する、５μＬの１０ｍＭ塩酸グリシン（ｐＨ１．５）を使用した、３０秒間の接触時間にわたる再生からなる。全ての分析物濃度は、単量体分子量（ＭＷ）値を利用して決定する。ＰＤ−１−ＥＣＤの会合速度（ｋ_ｏｎ）および解離速度（ｋ_ｏｆｆ）を、０ｎＭブランク減算に加えてフローセル１の参照減算による二重参照を使用して評価し、ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアバージョン４．１で「１：１（ラングミュア）結合」モデルに適合する。解離定数（Ｋ_Ｄ）を、関係Ｋ_Ｄ＝Ｋ_ｏｆｆ／Ｋ_ｏｎに従って結合速度論から算出する。値を、平均±標準偏差として報告する。ＣＤ１３７−ＥＣＤ結合データを、二重参照を使用して評価し、「定常状態親和性」結合モデルを使用して適合して、Ｓｃｒｕｂｂｅｒ２バージョン２．０ｃ（ＢｉｏＬｏｇｉｃ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｌｔｄ．）を利用して親和性（Ｋ_Ｄ）を決定する。

本質的に上記のように実施した実験では、抗体Ａは、表１０に示されるように、それぞれの親抗体と比較して同等の親和性で、ヒトＰＤ−１−ＥＣＤ（Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ、カタログ番号１０３７７−Ｈ０８Ｈ）およびヒトＣＤ１３７−ＥＣＤ（自家生成）に結合する。

抗体Ａの親抗体は、ＢＭＳ２０Ｈ４．９とは異なる特定のアミノ酸残基でヒトＣＤ１３７に結合する
点変異をヒトＣＤ１３７に導入して、ｐ−７Ａ５（抗体Ａの抗ＣＤ１３７アームの親抗体）およびＢＭＳ２０Ｈ４．９がヒトＣＤ１３７に結合するアミノ酸残基を決定する。本明細書で使用される場合、ＢＭＳ２０Ｈ４．９は、ＵＳ７２８８６３８に以前に記載された抗体を指す。ＣＤ１３７−Ｆｃ変異体を、市販の部位特異的変異導入キット（Ｑｕｉｃｋｃｈａｎｇｅ ＩＩキット、Ｑｉａｇｅｎ）の標準プロトコールを使用して生成する。野生型および変異型ＣＤ１３７−Ｆｃタンパク質を発現させ、精製する。ここで報告された全ての変異体は、野生型ＣＤ１３７−Ｆｃと同様のサイズ排除プロファイルを有する（すなわち、導入された変異はタンパク質の構造的完全性を損なわない）。抗体の結合に対する変異の影響を決定するために、ＣＤ１３７−Ｆｃ野生型および変異体に対するポイントＥＬＩＳＡアッセイを利用する。９６ウェルＩｍｍｕｌｏｎ ４ＨＢＸ ＥＬＩＳＡプレートのウェルを、１００ナノリットルのＰＢＳ、ｐＨ７．２中の５０ナノグラムのヒトＣＤ１３７−ＥＣＤ−Ｃ１２１Ｓ−Ｆｃまたはその変異体で４℃で穏やかに撹拌しながら一晩コーティングする。（ＰＢＳＴ中５％ＢＳＡによる）遮断および洗浄後、８点の５倍希釈系列（１００〜０．００１２８ナノモル濃度）の指定抗体を添加し、穏やかに撹拌しながら室温で１時間インキュベートする。ウェルを洗浄し、ＨＲＰコンジュゲート二次抗体（ＨＲＰコンジュゲートヤギ抗Ｆａｂ抗体の１：１００００希釈液（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を添加し、標準プロトコールに従って室温でインキュベートする。ＴＭＢペルオキシダーゼ発色基質と停止液は、シグナルの視覚化と検出に関する製造元の取扱説明書に従って使用する。各濃度点の吸光度の読み取り値を、野生型相互作用の吸光度によって標準化する。各変異体について、８つの濃度の標準化された比率の平均を決定する。

変異を、Ｐ２７位、Ｎ４２位、Ｄ６３位、Ｑ６７位、Ａ９７位、Ｇ９８位、Ｓ１００位、Ｍ１０１位、Ｑ１０４位、Ｋ１１４位、Ｋ１１５位、Ｒ１３０位、Ｉ１３２位、およびＲ１３４位で、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）に個別に導入した。表１１は、ヒトＣＤ１３７の示される変異体に対するＢＭＳ２０Ｈ４．９およびｐ−７Ａ５の結合プロファイルを示し、これは、ｐ−７Ａ５が、ＢＭＳ２０Ｈ４．９と比較して、ヒトＣＤ１３７上の異なるアミノ酸残基に結合することを実証している。ヒトＰＢＭＣ共刺激アッセイにおけるＩＦＮγ産生についての以前の研究では、ｐ−７Ａ５は、ＣＤ３／ＣＤ２８共刺激によるヒトＰＢＭＣの最適以下の活性化を増強する。これに関して、５マイクログラム／ｍｌのｐ−７Ａ５による処理は、ＰＦ８３よりも高く（１．６倍の増加）、ＢＭＳ２０Ｈ４．９よりも低い（９．４倍の増加）、ＩＦＮ−ガンマの産生の３．８倍の増加をもたらす。本明細書で使用される場合、ＰＦ８３は、ＵＳ８３３７８５０に以前に記載された抗体を指す。

抗体Ａは、ヒトＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１活性をアンタゴナイズする
抗体Ａが、ＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１連結によって媒介される活性をアンタゴナイズする能力を、ＮＦＡＴ−Ｌｕｃレポーターアッセイを使用して試験する。要約すると、ＰＤ−Ｌ１を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞および人工細胞表面ＴＣＲ（Ｔ細胞受容体）活性化因子（Ｐｒｏｍｅｇａ所有）（Ｐｒｏｍｅｇａ ＣＳ１８７１０８、ＰＤ１／ＰＤ−Ｌ１遮断アッセイシステムの一部、伝搬モデルＣＳ１８７１０９）を、抗原提示細胞として使用する。ヒトＣＤ１３７を、ＰＤ−１およびＮＦＡＴ−Ｌｕｃ２レポーターを発現するジャーカット細胞へのレトロウイルス転移によって導入する（ＧｌｏＲｅｓｐｏｎｓｅ ＮＦＡＴ−ｌｕｃ２／ＰＤ−１ジャーカット、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣＳ１８７１０２、ＰＤ１／ＰＤ−Ｌ１遮断アッセイシステムの一部、伝搬モデルＣＳ１８７１０９）。ＣＨＯ−Ｋ１＋ＰＤ−Ｌ１＋ＴＣＲ活性化因子細胞（７〜９継代）をトリプシンで剥離し、１００ｕｌの成長培地中、白色不透明の９６ウェル組織培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ３５−３２９６）に４０，０００個の細胞／ウェルで播種する。ＣＨＯ−Ｋ１＋ＰＤ−Ｌ１＋ＴＣＲ活性化因子成長培地は、１０％限定ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ ＳＨ３００７０．０３）を有するハムのＦ−１２培地（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｅｌｌｇｒｏ１０−０８０−ＣＶ）、２００μｇ／ｍｌのハイグロマイシンＢ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ１０６８７−０１０）、および２５０μｇ／ｍｌのＧ４１８（Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ、Ｃｏｒｎｉｎｇ３０−２３４−ＣＩ）からなる。細胞を、３７℃、５％ＣＯ_２、および９５％ＲＨで一晩成長させる。翌日、抗体を、２ｍＭのＬ−グルタミンを有するＲＰＭＩ１６４０および２％限定ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ ＳＨ３００７０．０３）を有する１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｇｉｂｃｏ２２４００）中、２倍の作業濃度で調製する。

ＰＤ−１、ＣＤ１３７、およびＮＦＡＴ−Ｌｕｃ２レポーターを発現するジャーカット細胞を、２ｍＭのＬ−グルタミンおよび１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｇｉｂｃｏ）、１０％限定ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ）、１００μｇ／ｍｌのハイグロマイシンＢ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）、５００μｇ／ｍｌのＧ４１８（Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ、Ｃｏｒｎｉｎｇ）、および１μｇ／ｍｌのピューロマイシン（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ５４０４１１、滅菌水中）を有するＲＰＭＩ１６４０中で伝搬する。アッセイ用のこれらのジャーカットエフェクター細胞（５〜７継代の間）を調製するために、それらを遠心分離し、１．２５×１０^６個の細胞／ｍｌの濃度でＲＰＭＩ／２％限定ＦＢＳ中に再懸濁させる。９６ウェルプレート内のＣＨＯ＋ＰＤ−Ｌ１＋ＴＣＲ活性化因子細胞の単層から、９５μｌの培地を慎重に取り除く。１ウェル当たり４０μｌの２回の処理（培地単独対照を含む）を、１処理当たり３連のウェルで添加する。次いで、１ウェル当たり４０μｌのジャーカット＋ＰＤ１＋ＣＤ１３７＋ＮＦＡＴ−Ｌｕｃ２細胞を添加する（５０，０００個の細胞／ウェル）。アッセイプレートを、３７℃、５％ＣＯ_２、および９５％ＲＨで６時間インキュベートする。インキュベーションの最後に、プレートを室温（ＲＴ）で５〜１０分間平衡化する。１ウェル当たり８０μｌの再構成されたＢｉｏ−Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼ基質（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｇ７９４０）を添加し、室温で５〜１０分間インキュベートする。プレートを、ＥｎＶｉｓｉｏｎ Ｍａｎａｇｅｒソフトウェアｖ．１．１３．３００９．１４０９、超高感度モード、および０．２秒間の積分時間で、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｅｎｖｉｓｉｏｎ多重モードリーダーで読み取る。各プレート内で、発光値（相対光単位（ＲＬＵ））を、培地単独で処理した細胞から取得した値に正規化する（誘導倍率＝ＲＬＵ処理／ＲＬＵ培地単独対照）。ＥＣ_５０値を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ７ソフトウェアを使用して算出する。

本質的に上記のように実施した実験では、抗体ＡのＥＣ_５０値および抗体Ａの抗ＰＤ−１アームの親抗体はそれぞれ、７．３１ｎｍおよび１．４０ｎＭである。

抗体Ａは、ヒトＣＤ１３７をアゴナイズする
ヒトＰＤ−１およびＣＤ１３７の両方が、活性化した腫瘍浸潤リンパ球中で発現または共発現される。したがって、抗体Ａが、ヒトＣＤ１３７媒介性活性をアゴナイズする能力を、ジャーカットＮＦｋＢ−Ｌｕｃレポーターアッセイで試験し、このアッセイでは、ジャーカットＴ細胞は、ヒトＰＤ−１（１細胞当たり９，０００個のＰＤ−１分子）およびＣＤ１３７（１細胞当たり５，５００個のＣＤ１３７分子）を共発現するように操作されている。要約すると、抗体を、ジャーカット＋ＣＤ１３７＋ＰＤ１＋ＮＦｋＢ−Ｌｕｃ細胞とともに６時間インキュベートする。Ｂｉｏ−Ｇｌｏルシフェラーゼ基質を添加し、インキュベーションの最後に発光を読み取る。データ（誘導倍率＝ＲＬＵ処理／ＲＬＵ培地単独対照）を、１処理当たりの３連のウェルの平均として表す。

本質的に上記のように実施した実験では、表２に示されるように、抗体Ａは、ＰＤ−１がＣＤ１３７と同じ細胞上で発現される場合、ｐ−７Ａ５およびＰＦ−８３のそれよりも大きいが、ＢＭＳ２０Ｈ４．９のそれよりも低い用量依存性ＣＤ１３７アゴニスト活性を示す。データを、培地単独対照からのルシフェラーゼシグナルの平均倍率変化として表す（１処理当たりｎ＝３）。

抗体Ａは、ヒトＰＢＭＣによるＩＦＮγ生成を増強する
抗体Ａの機能的活性は、それがＩＦＮγ産生を促進する能力について、ヒトＰＢＭＣ共刺激アッセイを使用して調べることができる。ヒトＰＢＭＣを、Ｆｉｃｏｌｌ密度勾配遠心分離（Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ ＰＬＵＳ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して全血またはＬｅｕｋｏｐａｃ（ＮＹ Ｂｌｏｏｄ Ｃｅｎｔｅｒ、ＡｌｌＣｅｌｌｓまたはＢｉｏＳｐｅｃ）から単離し、１０％ウシ胎児血清（ＨｙＣｌｏｎｅ）を有するＲＰＭＩ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で成長させる。ＰＢＳ中の抗ヒトＣＤ３抗体クローンＨＩＴ３（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、５５５３３６）を、９６ウェルプレート上にコーティングする（典型的な範囲：３〜５ｎｇ／ウェル）。次いで、コーティングしたプレートを、４℃で一晩インキュベートする。吸引後、コーティングしたウェルを、ＰＢＳで濯ぐ。ヒトＰＢＭＣを、１．５×１０^５個の細胞／ウェルの密度でコーティングした９６ウェルプレート上に添加する。抗体Ａ、抗体ｐ−１１４４４（抗体Ａの抗ＰＤ１アームの親抗体）、抗体ｐ−７Ａ５（抗体Ａの抗ＣＤ１３７アームの親抗体）、および対照ヒトＩｇＧ１を、８０μｇ／ｍＬの開始濃度で、ＲＰＭＩ−１０％ＦＢＳ中で１：４に希釈していくことによって調製する。ＣＤ２８抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、３０２９３３）をプレートに添加（典型的な範囲０．４〜２μｇ／ｍＬ）した後に、試験抗体を添加し、加湿した５％ＣＯ_２インキュベーター内、３７℃で９６時間インキュベートする。上清を収集し、ヒトＩＦＮγレベルを、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ ＤｕｏＳｅｔ ＥＬＩＳＡキットＤＹ２８５を使用して測定する。要約すると、ＩＦＮγ捕捉抗体を、プレート（１００μｇ／ｍＬ）上に室温で一晩コーティングする。吸引および洗浄後、プレートを、室温で１時間遮断する。サンプル上清およびＩＦＮγ標準を添加し、室温で２時間インキュベートする。洗浄後、１００μｇ／ｍＬのＩＦＮγ検出抗体を添加し、室温で２時間インキュベートした後、洗浄する。ストレプトアビジン−ＨＲＰ（１００μＬの１：４０希釈）を、室温で２０分間にわたって添加する。洗浄後、１００μＬの基質溶液を２０分間にわたって添加した後、５０μＬの停止溶液を添加し、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して、４５０ｎｍでシグナルを捕捉する。データ分析を、ＳｏｆｔＭａｘ ＰｒｏソフトウェアおよびＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して実施する。誘導倍率を、サンプル平均ＩＦＮγ（ｐｇ／ｍｌ）／対照ヒトＩｇＧ１平均ＩＦＮγ（ｐｇ／ｍｌ）として算出する。

本質的に上記のように実施した実験では、ヒトＰＢＭＣによるＩＦＮγ産生（誘導倍率）に関する抗体Ａの機能的活性は、以下の表１３に示されるように、親抗体の組み合わせの機能的活性と同等である。

抗体Ａは、Ｈ２９２ ＮＳＣＬＣ Ｗｉｎｎ腫瘍モデルにおいて独特の免疫遺伝子発現パターンを誘導する
抗体Ａ、抗体ｐ−７Ａ５、抗体ｐ−１１４４４、および／または対照ヒトＩｇＧ１で治療したＨ２９２Ｗｉｎｎモデルの腫瘍組織サンプルにおける、ヒト免疫関連遺伝子（ＱｕａｎｔｉＧｅｎｅ８０重）の発現を調べる。要約すると、０日目に、マウスに、Ｈ２９２腫瘍細胞と凍結ヒト末梢血単核細胞との混合物を腹腔内注射する。抗体および対照ヒトＩｇＧ１を１０ｍｇ／ｋｇで投薬し、１、８、および１５日目に与える。１６日目に、腫瘍組織を採取し、液体Ｎ_２中で急速凍結する。急速凍結した腫瘍組織を溶解し（Ｌｉｆｅ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＭａｇＭＡＸ−９６全ＲＮＡ単離キット）、ホモジナイズする（ＱｉａｇｅｎのＴｉｓｓｕｅＬｙｓｅｒ）。全ＲＮＡを、ＭａｇＭＡＸ Ｅｘｐｒｅｓｓ−９６Ｄｅｅｐ Ｗｅｌｌ Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｐａｒｔｉｃｌｅ Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して単離し、２６０および２８０ｎｍの光学密度で分光光度計によって定量化する。次いで、全ＲＮＡ（５００ｎｇ）を、ＱｕａｎｔｉＧｅｎｅ２．０重アッセイ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ）を使用して遺伝子発現について分析し、分析を、ＦＬＥＸＭＡＰ３Ｄ Ｌｕｍｉｎｅｘ機器（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を使用して実施する。ＭＦＩデータを、品質管理分析スクリプトを使用して相対的な遺伝子発現（正規化し、調整した正味ＭＦＩ）に変換する。対照群と比較した各遺伝子の遺伝子発現の倍率変化を、式（正規化し、調整した正味ＭＦＩ治療サンプル／正規化し、調整した平均正味ＭＦＩ）によって算出する。対照と比較した各遺伝子の平均倍率変化の統計分析を、一元配置分散分析によって実施する。

本質的に上記のように実施した実験では、遺伝子発現分析は、抗体Ａが、Ｔ細胞浸潤および活性化に関連する遺伝子（例えば、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ４、ＣＤ８Ｂ、ＩＦＮγ、ＧＺＭＢ）、複数のサイトカインおよびケモカイン、ならびにＭＨＣクラスＩおよびＩＩ抗原（例、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−ＤＲＡ）を含む、インビボでＨ２９２腫瘍組織において独特の免疫関連遺伝子発現パターンを誘導することを示す。表１４に示されるように、抗体Ａに応答して観察されたプロファイルは、抗体Ａの親抗体およびそれらの組み合わせについて観察されたプロファイルとは異なる。

抗体Ａは、混合白血球中でＴ細胞活性化を誘導する（ＭＬＲ反応）
抗体ＡのＰＤ１遮断機能を、ヒトアロＭＬＲアッセイにおいて調べる。ヒトＰＢＭＣを、凍結（ＡｌｌＣｅｌｌｓ）または血漿交換に供した新鮮な全血（Ｉｎｄｉａｎａ Ｂｌｏｏｄ Ｃｅｎｔｅｒ）から取得し、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ ＰＬＵＳ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）密度勾配で分離する。ＣＤ１４^＋単球を、Ｈｕｍａｎ Ｍｏｎｏｃｙｔｅ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ ＩＩまたはＣＤ１４Ｍｉｃｒｏｂｅａｄｓ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）およびＡｕｔｏＭＡＣＳ Ｐｒｏ分離機（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用して単離する。１，０００ＩＵ／ｍＬのｈＧＭ−ＣＳＦ（Ｒ＆Ｄ、２１５−ＧＭ−０５０、またはＳａｎｏｆｉ、Ｌｅｕｋｉｎｅ、サルグラモスチム、ＮＤＣ００２４−５８４３−０１）および５００ＩＵ／ｍＬのｈＩＬ−４（Ｒ＆Ｄ、２０４−ＩＬ−０５０、または別の供給源）の存在下、１０％ＦＢＳを含有する完全ＲＰＭＩ−１６４０培地中で単球を２日間（表１４）または５日間（表１６および１７）培養することによって、未熟樹状細胞（ＤＣ）を生成する。ＣＤ４^＋Ｔ細胞を、ヒトＣＤ４^＋Ｔ細胞単離キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用して、異なる健康なドナー（ＡｌｌＣｅｌｌｓまたはＩｎｄｉａｎａ Ｂｌｏｏｄ Ｃｅｎｔｅｒ）の新鮮なヒトＰＢＭＣから精製する。次いで、異なるドナーからの２つのタイプの細胞を、１ウェル当たり５×１０^４〜１×１０^５個のＣＤ４^＋Ｔ細胞および５×１０^３個の未熟ＤＣを含有する完全なＡＩＭ−Ｖ培地Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中、９６ウェルＶ底プレート内で混合する。ヒトＩｇＧ１−ＥＮ、ｐ−１１４４４、ｐ−７Ａ５、および抗体Ａを試験する。段階希釈した対照または試験抗体を、８回反復してプレートに添加し（１００μＬ／ウェル）、５％ＣＯ_２中、３７℃で６７時間インキュベートするか、または試験抗体を、３回反復してプレートに添加し（２００μＬ／ウェル）、４日間インキュベートする。上清を回収し、製造元の指示に従ってヒトＩＦＮ−γ ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＳＩＦ５０またはＤＹ２８５）およびヒトＩＬ−２ ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｓ２０５０）に供する。抗体を、９つの異なるドナー対にわたって試験する。ＥＣ５０値を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）によって、３つのＴ：ＤＣドナー対からのデータを使用して算出する。

同種異系ヒトＤＣおよびＣＤ４＋Ｔ細胞を使用するＭＬＲアッセイでは、ｐ−１１４４４、ｐ−１１４４４とｐ−７Ａ５との組み合わせ、および抗体Ａを追加すると、各々が、ヒトＩｇＧ１と比較して、用量依存的様式でＴ細胞活性化を促進する。表ｘに示されるように、ＩＦＮ−γおよびＩＬ−２産生の平均ＥＣ_５０は、増加する。このアッセイは、抗ＣＤ１３７抗体の活性を検出することはできない。

結論として、いくつかのドナー対にわたって、抗体Ａは、同種異系ＭＬＲアッセイにおけるサイトカイン放出の増加によって測定して、ｐ−１１４４４抗体と同様の抗ＰＤ−１遮断機能を単独で保持する。

抗体Ａは、Ｈ２９２ ＮＳＣＬＣ Ｗｉｎｎ腫瘍モデルにおいて抗腫瘍有効性を実証する
抗体Ａ、ｐ−１１４４４、ｐ−７Ａ５、およびｐ−１１４４４＋ｐ−７Ａ５で治療したＨ２９２腫瘍異種移植片の腫瘍成長阻害を調べる。これらの研究では、雌のＮＯＤ／ＳＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を使用する。ヒトＮＳＣＬＣ細胞株ＮＣＩ−Ｈ２９２（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ−１８４８）およびヒトＰＢＭＣ（Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を、４：１の腫瘍細胞対ＰＢＭＣの比率で組み合わせる。混合物を遠心分離し、ペレットを、１ｍＬ当たり１０×１０^６個のＮＣＩ−Ｈ２９２細胞および２．５×１０^６個のＰＢＭＣの濃度でＨＢＳＳに再懸濁する。０日目に、各マウスの右側腹部に、０．２ｍＬの溶液を皮下移植する。腫瘍細胞単独を受けた１つの対照群を、各研究に含める。マウスを、８匹のマウスの治療群に無作為に割り当て、１日目に治療を開始する。治療群には、対照ＩｇＧ、ｐ−７Ａ５、ｐ−１１４４４、ｐ−１１４４４＋ｐ−７Ａ５の組み合わせ、および抗体Ａが含まれる。動物に、１０ｍｇ／ｋｇを１週間に１回、４週間にわたって腹腔内（ｉｐ）投薬する。体重および腫瘍体積を１週間に２回測定する。腫瘍体積（ｍｍ^３）を、式π／６＊長さ＊幅^２によって算出し、％Ｔ／Ｃを、式１００×ΔＴ／ΔＣ（幾何平均値のΔＴ＞０の場合）によって算出する。統計分析を、ＳＡＳソフトウェアのＭＩＸＥＤ手順を使用して実施する。

表１６のデータは、１０ｍｇ／ｋｇでの抗体Ａ治療が、対照ＩｇＧと比較して、腫瘍成長を阻害し（％Ｔ／Ｃ＝約２％、ｐ＜．００１）、８匹中６匹の動物が、完全応答（ＣＲ）を達成することを実証する。ｐ−１１４４４＋ｐ−７Ａ５の組み合わせおよび単剤療法ｐ−７Ａ５またはｐ−１１４４４は、有効性を示さなかった。

アミノ酸およびヌクレオチド配列
７Ａ５＊の配列
＜配列番号１、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳ
＜配列番号２、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧ
＜配列番号３、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＡＲＤＬＡＴＴＡＰＡＴＹＦＤＬ
＜配列番号４、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＹＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＬＡＴＴＡＰＡＴＹＦＤＬＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳ
＜配列番号５、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＹＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＬＡＴＴＡＰＡＴＹＦＤＬＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＤＳＧＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＧＤＭＴＫＮＱＶＱＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＡＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
＜配列番号６、ＤＮＡ、人工配列＞
ＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＴＧＧＴＧＣＡＡＴＣＡＧＧＣＧＣＡＧＡＧＧＴＡＡＡＡＡＡＡＣＣＡＧＧＧＴＣＣＡＧＣＧＴＧＡＡＡＧＴＣＴＣＡＴＧＴＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＴＴＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＣＴＡＴＴＴＣＴＴＧＧＧＴＧＡＧＡＴＡＣＧＣＣＣＣＴＧＧＧＣＡＧＧＧＡＣＴＴＧＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＡＧＧＣＡＴＴＡＴＴＣＣＣＡＴＡＴＴＣＧＧＣＡＣＡＧＣＣＡＡＴＴＡＣＧＣＧＣＡＡＡＡＡＴＴＣＣＡＧＧＧＧＡＧＧＧＴＴＡＣＴＡＴＡＡＣＡＧＣＡＧＡＴＧＡＧＡＧＴＡＣＡＴＣＡＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＧＡＡＣＴＧＡＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＡＧＣＧＡＡＧＡＣＡＣＣＧＣＴＧＴＴＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＴＡＧＡＧＡＴＣＴＴＧＣＧＡＣＧＡＣＣＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＧＴＡＣＴＴＴＧＡＴＣＴＣＴＧＧＧＧＴＡＧＡＧＧＡＡＣＣＣＴＣＧＴＡＡＣＡＧＴＧＴＣＴＴＣＣＧＣＴＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＡＴＣＧＧＴＣＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＣＡＣＣＣＴＧＣＴＣＣＡＡＧＡＧＣＡＣＣＴＣＴＧＧＧＧＧＣＡＣＡＧＣＧＧＣＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＴＣＡＡＧＧＡＣＴＡＣＴＴＣＣＣＣＧＡＡＣＣＧＧＴＧＡＣＧＧＴＧＴＣＧＴＧＧＡＡＣＴＣＡＧＧＣＧＣＣＣＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＣＴＴＣＣＣＧＧＣＴＧＴＣＣＴＡＣＡＧＴＣＣＴＣＡＧＧＡＣＴＣＴＡＣＴＣＣＣＴＣＡＧＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＴＧＧＧＣＡＣＣＣＡＧＡＣＣＴＡＣＡＴＣＴＧＣＡＡＣＧＴＧＡＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＣＡＧＣＡＡＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＧＴＴＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＣＴＧＧＴＧＡＣＡＡＡＡＣＴＣＡＣＡＣＡＴＧＣＣＣＡＣＣＧＴＧＣＣＣＡＧＣＡＣＣＴＧＡＡＧＣＣＧＣＣＧＧＧＧＧＡＣＣＧＴＣＡＧＴＣＴＴＣＣＴＣＴＴＣＣＣＣＣＣＡＡＡＡＣＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＣＡＴＧＡＴＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＣＡＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＣＧＴＧＡＧＣＣＡＣＧＡＡＧＡＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＴＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＴＡＡＴＧＣＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＣＣＧＣＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＡＣＣＡＧＡＧＣＡＣＧＴＡＣＣＧＴＧＴＧＧＴＣＡＧＣＧＴＣＣＴＣＡＣＣＧＴＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＣＣＡＡＣＡＡＡＧＣＣＣＴＣＣＣＡＧＣＣＣＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＡＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＡＧＣＣＡＡＡＧＧＧＣＡＧＣＣＣＣＧＡＧＡＡＣＣＡＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＡＴＣＣＣＧＧＧＧＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＡＧＴＣＣＡＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＣＡＡＡＧＧＣＴＴＣＴＡＴＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＧＣＡＧＣＣＧＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＧＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＴＣＣＧＡＣＧＧＣＴＣＣＴＴＣＴＴＣＣＴＣＧＣＴＴＣＣＡＡＧＣＴＣＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＣＡＧＧＧＧＡＡＣＧＴＣＴＴＣＴＣＡＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＴＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＴＣＴＣＣＣＴＧＴＣＴＣＣＧＧＧＣＡＡＡ
＜配列番号７、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＡＳＱＤＩＧＮＳＬＧ
＜配列番号８、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＦＤＡＳＤＬＥＴ
＜配列番号９、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＱＧＮＳＦＰＬＴ
＜配列番号１０、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＤＩＲＭＴＱＳＰＰＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＧＮＳＬＧＷＹＱＲＫＰＧＤＡＰＫＬＶＩＦＤＡＳＤＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＳＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＮＳＦＰＬＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫ
＜配列番号１１、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＤＩＲＭＴＱＳＰＰＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＧＮＳＬＧＷＹＱＲＫＰＧＤＡＰＫＬＶＩＦＤＡＳＤＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＳＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＮＳＦＰＬＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＫＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
＜配列番号１２、ＤＮＡ、人工配列＞
ＧＡＣＡＴＴＡＧＡＡＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＡＣＣＴＣＣＡＡＧＴＣＴＧＴＣＡＧＣＣＡＧＴＧＴＴＧＧＣＧＡＣＣＧＧＧＴＧＡＣＴＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＣＴＴＣＣＣＡＡＧＡＣＡＴＴＧＧＴＡＡＴＡＧＴＴＴＧＧＧＴＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＧＣＡＡＡＣＣＡＧＧＣＧＡＴＧＣＴＣＣＧＡＡＡＣＴＧＧＴＴＡＴＴＴＴＴＧＡＣＧＣＣＡＧＴＧＡＴＴＴＧＧＡＧＡＣＡＧＧＴＧＴＧＣＣＴＴＣＴＣＧＧＴＴＴＡＧＣＧＧＴＴＣＴＧＧＧＴＣＡＧＧＡＡＣＴＧＡＴＴＴＴＴＣＡＣＴＧＡＣＡＡＴＡＴＣＴＴＣＡＣＴＧＣＡＧＣＣＧＧＡＡＧＡＣＴＴＣＧＣＣＡＣＣＴＡＴＴＡＴＴＧＣＣＡＧＣＡＧＧＧＧＡＡＣＴＣＣＴＴＣＣＣＡＣＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＴＣＡＡＧＧＧＡＣＣＣＧＧＣＴＴＧＡＧＡＴＴＡＡＧＣＧＧＡＣＧＧＴＡＧＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＴＧＴＧＴＴＣＡＴＴＴＴＣＣＣＣＣＣＡＡＧＣＡＡＧＧＡＧＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＧＣＧＧＣＡＣＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＧＴＡＴＧＴＣＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＣＴＴＴＴＡＣＣＣＴＣＧＧＧＡＧＧＣＣＡＡＡＧＴＧＣＡＧＴＧＧＡＡＧＧＴＣＧＡＴＡＡＴＧＣＴＣＴＴＣＡＡＴＣＣＧＧＧＡＡＣＴＣＡＣＡＧＧＡＡＴＣＴＧＴＣＡＣＣＧＡＡＣＡＡＧＡＣＡＧＣＡＡＧＧＡＴＡＧＣＡＣＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＴＣＴＡＧＣＡＣＴＣＴＧＡＣＣＣＴＴＴＣＣＡＡＡＧＣＡＧＡＣＴＡＣＧＡＡＡＡＡＣＡＴＡＡＡＧＴＣＴＡＣＧＣＧＴＧＣＧＡＡＧＴＧＡＣＣＣＡＣＣＡＧＧＧＧＣＴＣＡＧＣＴＣＡＣＣＧＧＴＧＡＣＧＡＡＡＴＣＣＴＴＣＡＡＣＣＧＣＧＧＣＧＡＡＴＧＣ

１１４４４＊の配列
＜配列番号１３、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳ
＜配列番号１４、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＬＩＩＰＳＦＤＴＡＧＹＡＱＥＦＱＧ
＜配列番号１５、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＡＲＡＥＨＳＳＴＧＴＦＤＹ
＜配列番号１６、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＫＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＩＰＳＦＤＴＡＧＹＡＱＥＦＱＧＲＶＡＩＴＶＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＥＨＳＳＴＧＴＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＜配列番号１７、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＫＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＩＰＳＦＤＴＡＧＹＡＱＥＦＱＧＲＶＡＩＴＶＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＥＨＳＳＴＧＴＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＡＴＧＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＳＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＭＣＬＶＹＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＶＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
＜配列番号１８、ＤＮＡ、人工配列＞
ＣＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＣＡＡＴＣＡＧＧＧＧＣＴＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＡＡＧＴＡＧＣＧＴＴＡＡＡＧＴＣＡＧＴＴＧＣＡＡＡＧＣＧＴＣＣＧＧＴＧＧＧＡＣＡＴＴＴＡＧＣＡＧＣＴＡＴＧＣＣＡＴＣＡＧＣＴＧＧＧＴＴＣＧＧＡＡＧＧＣＡＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＧＡＣＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＡＣＴＣＡＴＡＡＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＧＡＣＡＣＴＧＣＴＧＧＴＴＡＣＧＣＡＣＡＧＧＡＧＴＴＴＣＡＡＧＧＧＡＧＧＧＴＧＧＣＧＡＴＣＡＣＡＧＴＧＧＡＣＧＡＡＴＣＡＡＣＣＡＧＣＡＣＣＧＣＧＴＡＴＡＴＧＧＡＧＣＴＧＴＣＡＴＣＴＣＴＧＡＧＧＴＣＡＧＡＡＧＡＣＡＣＣＧＣＴＧＴＴＴＡＣＴＡＴＴＧＴＧＣＣＣＧＣＧＣＴＧＡＧＣＡＴＴＣＴＴＣＣＡＣＣＧＧＧＡＣＣＴＴＣＧＡＴＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＡＧＧＡＡＣＣＣＴＧＧＴＣＡＣＡＧＴＡＴＣＡＴＣＡＧＣＴＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＡＴＣＧＧＴＣＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＣＡＣＣＣＴＣＣＴＣＣＡＡＧＡＧＣＡＣＣＴＣＴＧＧＧＧＧＣＡＣＡＧＣＧＧＣＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＴＣＡＡＧＧＡＣＴＡＣＴＴＣＣＣＣＧＡＡＣＣＧＧＴＧＡＣＧＧＴＧＴＣＧＴＧＧＡＡＣＴＣＡＧＧＣＧＣＣＣＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＧＴＧＧＣＣＡＣＣＧＧＣＣＣＧＧＣＴＧＴＣＣＴＡＣＡＧＴＣＣＴＣＡＧＧＡＣＴＣＴＡＣＴＣＣＣＴＣＡＧＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＴＧＧＧＣＡＣＣＣＡＧＡＣＣＴＡＣＡＴＣＴＧＣＡＡＣＧＴＧＡＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＣＡＧＣＡＡＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＧＴＴＧＡＧＣＣＣＡＡＡＴＣＴＴＧＴＧＡＣＡＡＡＡＣＴＣＡＣＡＣＡＴＧＣＣＣＡＣＣＧＴＧＣＣＣＡＧＣＡＣＣＴＧＡＡＧＣＣＧＣＣＧＧＧＧＧＡＣＣＧＴＣＡＧＴＣＴＴＣＣＴＣＴＴＣＣＣＣＣＣＡＡＡＡＣＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＣＡＴＧＡＴＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＣＡＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＣＧＴＧＡＧＣＣＡＣＧＡＡＧＡＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＴＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＴＡＡＴＧＣＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＣＣＧＣＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＡＣＣＡＧＡＧＣＡＣＧＴＡＣＣＧＴＧＴＧＧＴＣＡＧＣＧＴＣＣＴＣＡＣＣＧＴＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＣＣＡＡＣＡＡＡＧＣＣＣＴＣＣＣＡＧＣＣＣＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＡＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＡＧＣＣＡＡＡＧＧＧＣＡＧＣＣＣＣＧＡＧＡＡＣＣＡＣＡＧＧＴＧＴＣＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＡＴＣＣＣＧＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＡＧＴＣＡＧＣＣＴＧＡＴＧＴＧＣＣＴＧＧＴＣＴＡＴＧＧＣＴＴＣＴＡＴＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＧＣＡＧＣＣＧＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＧＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＴＣＣＧＡＣＧＧＣＴＣＣＴＴＣＴＴＣＣＴＣＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＴＣＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＣＡＧＧＧＧＡＡＣＧＴＣＴＴＣＴＣＡＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＴＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＴＣＴＣＣＣＴＧＴＣＴＣＣＧＧＧＣＡＡＡ
＜配列番号１９、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡ
＜配列番号２０、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＳＡＡＳＳＬＱＳ
＜配列番号２１、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＱＡＮＨＬＰＦＴ
＜配列番号２２、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＲＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＤＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＳＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＨＬＰＦＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ
＜配列番号２３、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＲＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＤＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＳＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＨＬＰＦＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＹＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＷＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣ
＜配列番号２４、ＤＮＡ、人工配列＞
ＣＧＣＡＴＣＣＡＧＡＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＡＣＣＴＴＣＡＡＧＣＧＴＣＴＣＣＧＣＣＴＣＣＧＴＧＧＧＡＧＡＣＡＧＧＧＴＴＡＣＴＡＴＴＡＣＡＴＧＴＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＡＧＧＧＧＡＴＣＴＣＴＴＣＡＴＧＧＣＴＧＧＣＧＴＧＧＴＡＣＣＡＡＧＡＣＡＡＧＣＣＡＧＧＣＡＡＡＧＣＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＴＴＡＴＣＴＣＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＴＣＴＣＴＧＣＡＧＴＣＣＧＧＡＧＴＴＣＣＣＴＣＣＣＧＣＴＴＣＡＧＣＧＧＴＡＧＣＧＧＧＴＣＡＧＧＣＡＣＴＧＡＣＴＴＣＡＣＣＣＴＴＡＣＡＡＴＣＴＣＴＴＣＴＣＴＧＣＡＡＣＣＴＧＡＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＡＣＡＴＡＴＴＡＴＴＧＣＣＡＧＣＡＧＧＣＡＡＡＣＣＡＴＴＴＧＣＣＡＴＴＴＡＣＴＴＴＴＧＧＣＧＧＡＧＧＴＡＣＴＡＡＧＧＴＴＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＣＣＡＧＣＣＴＡＡＡＧＣＴＧＣＣＣＣＴＡＧＣＧＴＴＡＣＣＣＴＴＴＴＣＣＣＡＣＣＧＡＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＧＣＴＧＣＡＧＧＣＣＡＡＴＡＡＡＧＣＡＡＣＣＴＴＧＧＴＣＴＧＣＴＡＣＡＴＡＴＣＡＧＡＴＴＴＴＴＡＣＣＣＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＣＣＧＴＡＧＣＡＴＧＧＡＡＡＧＣＴＧＡＴＴＣＡＴＣＣＣＣＴＧＴＧＡＡＧＧＣＣＧＧＴＧＴＴＧＡＡＡＣＴＡＣＡＡＣＣＣＣＴＴＣＣＡＡＡＣＡＡＴＣＴＡＡＣＡＡＴＡＡＡＴＡＣＧＣＧＧＣＡＴＧＧＴＣＣＴＡＣＣＴＧＴＣＣＴＴＧＡＣＡＣＣＣＧＡＧＣＡＧＴＧＧＡＡＡＴＣＴＣＡＣＡＧＡＴＣＴＴＡＣＡＧＣＴＧＣＣＡＧＧＴＣＡＣＣＣＡＣＧＡＧＧＧＧＡＧＣＡＣＴＧＴＧＧＡＧＡＡＧＡＣＣＧＴＣＧＣＧＣＣＣＡＣＴＧＡＧＴＧＣ

ヒトＰＤ−１およびヒトＣＤ１３７の配列
＜配列番号２５、ＰＲＴ１、ホモサピエンス＞
ＭＱＩＰＱＡＰＷＰＶＶＷＡＶＬＱＬＧＷＲＰＧＷＦＬＤＳＰＤＲＰＷＮＰＰＴＦＳＰＡＬＬＶＶＴＥＧＤＮＡＴＦＴＣＳＦＳＮＴＳＥＳＦＶＬＮＷＹＲＭＳＰＳＮＱＴＤＫＬＡＡＦＰＥＤＲＳＱＰＧＱＤＣＲＦＲＶＴＱＬＰＮＧＲＤＦＨＭＳＶＶＲＡＲＲＮＤＳＧＴＹＬＣＧＡＩＳＬＡＰＫＡＱＩＫＥＳＬＲＡＥＬＲＶＴＥＲＲＡＥＶＰＴＡＨＰＳＰＳＰＲＰＡＧＱＦＱＴＬＶＶＧＶＶＧＧＬＬＧＳＬＶＬＬＶＷＶＬＡＶＩＣＳＲＡＡＲＧＴＩＧＡＲＲＴＧＱＰＬＫＥＤＰＳＡＶＰＶＦＳＶＤＹＧＥＬＤＦＱＷＲＥＫＴＰＥＰＰＶＰＣＶＰＥＱＴＥＹＡＴＩＶＦＰＳＧＭＧＴＳＳＰＡＲＲＧＳＡＤＧＰＲＳＡＱＰＬＲＰＥＤＧＨＣＳＷＰＬ
＜配列番号２６、ＰＲＴ１、ホモサピエンス＞
ＭＧＮＳＣＹＮＩＶＡＴＬＬＬＶＬＮＦＥＲＴＲＳＬＱＤＰＣＳＮＣＰＡＧＴＦＣＤＮＮＲＮＱＩＣＳＰＣＰＰＮＳＦＳＳＡＧＧＱＲＴＣＤＩＣＲＱＣＫＧＶＦＲＴＲＫＥＣＳＳＴＳＮＡＥＣＤＣＴＰＧＦＨＣＬＧＡＧＣＳＭＣＥＱＤＣＫＱＧＱＥＬＴＫＫＧＣＫＤＣＣＦＧＴＦＮＤＱＫＲＧＩＣＲＰＷＴＮＣＳＬＤＧＫＳＶＬＶＮＧＴＫＥＲＤＶＶＣＧＰＳＰＡＤＬＳＰＧＡＳＳＶＴＰＰＡＰＡＲＥＰＧＨＳＰＱＩＩＳＦＦＬＡＬＴＳＴＡＬＬＦＬＬＦＦＬＴＬＲＦＳＶＶＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ

野生型ヒトＩｇＧ１定常領域の配列
＜配列番号２７、ＰＲＴ１、ホモサピエンス＞
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

野生型ヒトラムダ定常領域の配列
＜配列番号２８、ＰＲＴ１、ホモサピエンス＞
ＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣ

野生型ヒトカッパ定常領域の配列
＜配列番号２９、ＰＲＴ１、ホモサピエンス＞
ＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

抗体Ａの定常領域の配列
７Ａ５＊
＜配列番号３０、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＤＳＧＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＧＤＭＴＫＮＱＶＱＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＡＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
＜配列番号３１、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＫＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
１１４４４＊
＜配列番号３２、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＡＴＧＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＳＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＭＣＬＶＹＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＶＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
＜配列番号３３、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＹＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＷＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣ

親７Ａ５の可変領域の配列
＜配列番号３４、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＬＭＴＴＡＰＧＴＹＦＤＬＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳ
＜配列番号３５、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＡＩＲＭＴＱＳＰＰＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＧＮＳＬＧＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＶＩＦＤＡＳＤＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＳＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＮＳＦＰＬＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫ

親１１４４４の可変領域の配列
＜配列番号３６、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＩＰＭＦＤＴＡＧＹＡＱＫＦＱＧＲＶＡＩＴＶＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＥＨＳＳＴＧＴＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＜配列番号３７、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＳＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＨＬＰＦＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ

親１１４４４の可変領域の配列
＜配列番号３６、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＩＰＭＦＤＴＡＧＹＡＱＫＦＱＧＲＶＡＩＴＶＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＥＨＳＳＴＧＴＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
＜配列番号３７、ＰＲＴ１、人工配列＞
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＳＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＨＬＰＦＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ

本発明の様々な実施形態を以下に示す。
１．ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズする抗体であって、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有する相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号２のアミノ酸配列を有する相補性決定領域２（ＣＤＲ２）、および配列番号３のアミノ酸配列を有する相補性決定領域（ＣＤＲ３）を含み、
ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む、抗体。
２．ａ）前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ）前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ）前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ）前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、上記１に記載の抗体。
３．ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、上記１および２のいずれかに記載の抗体。
４．前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、上記１〜３のいずれかに記載の抗体。
５．前記抗体が、修飾ヒトＩｇＧ１である、上記１〜４のいずれかに記載の抗体。
６．配列番号５のアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列、配列番号１７のアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列を有する少なくとも１つのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、ＤＮＡ分子。
７．配列番号５のアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列、配列番号１７のアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列を有する少なくとも１つのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むＤＮＡ分子を含む、哺乳動物細胞。
８．抗体を産生するためのプロセスであって、前記抗体を発現することができる哺乳動物細胞を培養することと、前記抗体を回収することと、を含み、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、任意で、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、プロセス。
９．ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、上記８に記載のプロセス。
１０．ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、上記８および９のいずれかに記載のプロセス。
１１．前記抗体が、Ｆｃガンマ受容体への前記抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、上記８〜１０のいずれかに記載のプロセス。
１２．抗体を含む薬学的組成物であって、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、薬学的組成物。
１３．ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、上記１２に記載の薬学的組成物。
１４．ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、上記１２および１３のいずれかに記載の薬学的組成物。
１５．前記抗体が、Ｆｃガンマ受容体への前記抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、上記１２〜１４のいずれかに記載の薬学的組成物。
１６．癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の抗体を投与することを含み、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、方法。
１７．ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、上記１６に記載の方法。
１８．ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、上記１６および１７のいずれかに記載の方法。
１９．前記抗体が、Ｆｃガンマ受容体への前記抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、上記１６〜１８のいずれかに記載の方法。
２０．前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、上記１６〜１９のいずれかに記載の方法。
２１．前記抗体が、電離放射線と組み合わせて投与される、上記１６〜２０のいずれかに記載の方法。
２２．前記抗体が、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、上記１６〜２１のいずれかに記載の方法。
２３．癌の治療における使用のための抗体であって、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、使用のための抗体。
２４．ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、上記２３に記載の使用のための抗体。
２５．ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、上記２３および２４のいずれかに記載の使用のための抗体。
２６．前記抗体が、修飾ヒトＩｇＧ１である、上記２３〜２５のいずれかに記載の使用のための抗体。
２７．前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、上記２３〜２６のいずれかに記載の使用のための抗体。
２８．前記抗体が、電離放射線との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、上記２３〜２７のいずれかに記載の使用のための抗体。
２９．前記抗体が、１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、上記２３〜２８のいずれかに記載の使用のための抗体。
３０．癌の治療における使用のための抗体を含む薬学的組成物であって、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、薬学的組成物。
３１．ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、上記３０に記載の使用のための薬学的組成物。
３２．ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を含み、
ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を含み、
ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、
ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を含む、上記３０および３１のいずれかに記載の使用のための薬学的組成物。
３３．前記抗体が、修飾ヒトＩｇＧ１である、上記３０〜３２のいずれかに記載の使用のための薬学的組成物。
３４．前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、上記３０〜３３のいずれかに記載の使用のための薬学的組成物。
３５．前記組成物が、電離放射線との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、上記３０〜３４のいずれかに記載の使用のための薬学的組成物。
３６．前記組成物が、１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、上記３０〜３５のいずれかに記載の使用のための薬学的組成物。
３７．癌の治療のための医薬品の製造における抗体の使用であって、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、使用。
３８．ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、上記３７に記載の使用。
３９．ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、上記３７および３８のいずれかに記載の使用。
４０．前記抗体が、Ｆｃガンマ受容体への前記抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、上記３７〜３９のいずれかに記載の使用。
４１．前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、上記３７〜４０のいずれかに記載の使用。
４２．前記抗体が、電離放射線との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、上記３７〜４１のいずれかに記載の使用。
４３．前記抗体が、１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、上記３７〜４２のいずれかに記載の使用。
４４．ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズする抗体であって、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、抗体。
４５．ヒトＰＤ−１に対する前記抗体の結合親和性が、ヒトＣＤ１３７に対する前記抗体の結合親和性よりも１０倍以上である、上記４４に記載の抗体。
４６．ヒトＰＤ−１に対する前記抗体の結合親和性が、ヒトＣＤ１３７に対する前記抗体の結合親和性の１００倍以上である、上記４４に記載の抗体。

Claims (46)

1. ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズする抗体であって、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
   ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有する相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号２のアミノ酸配列を有する相補性決定領域２（ＣＤＲ２）、および配列番号３のアミノ酸配列を有する相補性決定領域（ＣＤＲ３）を含み、
   ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
   ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
   ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む、抗体。
2. ａ）前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
   ｂ）前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
   ｃ）前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
   ｄ）前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の抗体。
3. ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
   ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
   ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
   ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、請求項１および２のいずれか一項に記載の抗体。
4. 前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗体。
5. 前記抗体が、修飾ヒトＩｇＧ１である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体。
6. 配列番号５のアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列、配列番号１７のアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列を有する少なくとも１つのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、ＤＮＡ分子。
7. 配列番号５のアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列、配列番号１７のアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列を有する少なくとも１つのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むＤＮＡ分子を含む、哺乳動物細胞。
8. 抗体を産生するためのプロセスであって、前記抗体を発現することができる哺乳動物細胞を培養することと、前記抗体を回収することと、を含み、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
   ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
   ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
   ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
   ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、任意で、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、プロセス。
9. ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
   ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
   ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
   ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、請求項８に記載のプロセス。
10. ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、請求項８および９のいずれか一項に記載のプロセス。
11. 前記抗体が、Ｆｃガンマ受容体への前記抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、請求項８〜１０のいずれか一項に記載のプロセス。
12. 抗体を含む薬学的組成物であって、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
    ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、薬学的組成物。
13. ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、請求項１２に記載の薬学的組成物。
14. ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、請求項１２および１３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
15. 前記抗体が、Ｆｃガンマ受容体への前記抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
16. 癌を治療する方法であって、癌の治療を必要とするヒト患者に、有効量の抗体を投与することを含み、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
    ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、方法。
17. ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、請求項１６に記載の方法。
18. ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、請求項１６および１７のいずれか一項に記載の方法。
19. 前記抗体が、Ｆｃガンマ受容体への前記抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載の方法。
20. 前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、請求項１６〜１９のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記抗体が、電離放射線と組み合わせて投与される、請求項１６〜２０のいずれか一項に記載の方法。
22. 前記抗体が、１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される、請求項１６〜２１のいずれか一項に記載の方法。
23. 癌の治療における使用のための抗体であって、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
    ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、使用のための抗体。
24. ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、請求項２３に記載の使用のための抗体。
25. ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、請求項２３および２４のいずれか一項に記載の使用のための抗体。
26. 前記抗体が、修飾ヒトＩｇＧ１である、請求項２３〜２５のいずれか一項に記載の使用のための抗体。
27. 前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、請求項２３〜２６のいずれか一項に記載の使用のための抗体。
28. 前記抗体が、電離放射線との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、請求項２３〜２７のいずれか一項に記載の使用のための抗体。
29. 前記抗体が、１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、請求項２３〜２８のいずれか一項に記載の使用のための抗体。
30. 癌の治療における使用のための抗体を含む薬学的組成物であって、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
    ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、薬学的組成物。
31. ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、請求項３０に記載の使用のための薬学的組成物。
32. ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を含み、
    ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を含み、
    ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、
    ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を含む、請求項３０および３１のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組成物。
33. 前記抗体が、修飾ヒトＩｇＧ１である、請求項３０〜３２のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組成物。
34. 前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、請求項３０〜３３のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組成物。
35. 前記組成物が、電離放射線との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、請求項３０〜３４のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組成物。
36. 前記組成物が、１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、請求項３０〜３５のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組成物。
37. 癌の治療のための医薬品の製造における抗体の使用であって、前記抗体が、ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズし、前記抗体が、第１および第２の重鎖ならびに第１および第２の軽鎖を含み、各鎖が、可変領域および定常領域を含み、
    ａ）前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｂ）前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｃ）前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、
    ｄ）前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、使用。
38. ａ．前記第１の重鎖の前記可変領域が、配列番号４のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記第１の軽鎖の前記可変領域が、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記第２の重鎖の前記可変領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記第２の軽鎖の前記可変領域が、配列番号２２のアミノ酸配列を有する、請求項３７に記載の使用。
39. ａ．前記抗体の前記第１の重鎖が、配列番号５のアミノ酸配列を有し、
    ｂ．前記抗体の前記第１の軽鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、
    ｃ．前記抗体の前記第２の重鎖が、配列番号１７のアミノ酸配列を有し、
    ｄ．前記抗体の前記第２の軽鎖が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する、請求項３７および３８のいずれか一項に記載の使用。
40. 前記抗体が、Ｆｃガンマ受容体への前記抗体の結合を低減するように操作されたヒトＩｇＧ１である、請求項３７〜３９のいずれか一項に記載の使用。
41. 前記癌が、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、肝癌、結腸直腸癌、膵癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、食道癌、軟部組織肉腫、胆管細胞癌、甲状腺癌、肝細胞癌、または中皮腫である、請求項３７〜４０のいずれか一項に記載の使用。
42. 前記抗体が、電離放射線との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、請求項３７〜４１のいずれか一項に記載の使用。
43. 前記抗体が、１つ以上の化学療法剤との同時、別々、または順次の組み合わせで投与される、請求項３７〜４２のいずれか一項に記載の使用。
44. ヒトＰＤ−１（配列番号２５）をアンタゴナイズし、ヒトＣＤ１３７（配列番号２６）をアゴナイズする抗体であって、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第１の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第２の重鎖が、前記抗体の前記第２の軽鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成し、前記抗体の前記第１の重鎖が、前記抗体の前記第２の重鎖と少なくとも１つのジスルフィド結合を形成する、抗体。
45. ヒトＰＤ−１に対する前記抗体の結合親和性が、ヒトＣＤ１３７に対する前記抗体の結合親和性よりも１０倍以上である、請求項４４に記載の抗体。
46. ヒトＰＤ−１に対する前記抗体の結合親和性が、ヒトＣＤ１３７に対する前記抗体の結合親和性の１００倍以上である、請求項４４に記載の抗体。