JP2021530495A - 脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
下記の表1に示した処方によって通常の方法でエスシンを含む実施例及び比較例のヘアトニックを製造した。
下記の表2に示した処方によって通常の方法でエスシンを含むヘアローションを製造した(実施例7)。
一般的に、毛乳頭で活性化するWnt/β−カテニン信号は、毛髪の成長周期のうち退行期から活性期へ移行されるとき、即ち、毛髪が育ち始めるときから毛髪生長が起こる活性期にかけて起こる。また、休止期及び退行期には、Wnt/β−カテニン信号が弱くなるか又はなくなり、毛嚢が退化して毛髪が抜ける現状が起こる。本実験例においては、エスシンがWnt/β−カテニン信号増幅に如何に寄与するかを確認した。
ヒト来由毛乳頭細胞(dermal papilla cells,DPCs)は、プロモセル社から購入した。前記DPCsを、プロモセル社で勧めるFollicle Dermal Papilla Cell Growth Medium及びsupplement mixを用いて、37℃及び5%のCO2条件下で培養した。培養したDPCs 3,000cells/wellを96−ウェルプレートに分注した後、0.1%血清条件で24時間培養した。 その後、培養した細胞に無血清DMEMに1:1000で希釈したDMSO(vehicle)を対照群にし、エスシンを各々0.2、0.5、1,2及び5μg/mlずつ一日間処理してインキュベートした。インキュベートした後、CCK方法を用いて細胞の増殖程度を評価した。CCK−8を培養液に1:10で処理して1時間インキュベートした。1時間後、各ウェルの吸光度(absorbance)を450nmで測定した。全ての実験は3回ずつ繰り返して吸光度値の平均を計算した。その結果は、対照群を100にし、それに対する処理群のパーセントで表した。実験結果、エスシンを処理した場合、DPCs増殖効果を奏し、毛乳頭細胞の増殖効果が優秀であることを確認した。
Wnt信号が抑制される休止期及び退行期の毛乳頭細胞においては、β−カテニンがGSK−3βによって分解される。しかし、Wnt信号が増幅する活性期の毛乳頭細胞においてはGSK−3βの活性が抑制されるため、β−カテニンが分解されずβ−カテニンの発現量が増加する。ヒト毛乳頭細胞を約500,000cell/wellで6個のウェルプレートに分注した後、エスシンを各々、0.2、0.5、1、2及び5μg/mlずつ一日間処理してインキュベートした。インキュベートした後、M−PER溶解バッファーを用いて細胞を溶解し、同量の細胞溶解物をSDS−PAGEゲルにロードした。SDS−PAGEゲルにロードされた細胞溶解物をニトロセルロース膜に移した後、抗β−カテニン抗体をニトロセルロース膜に付けてタンパク質を検出した。GAPDHは、タンパク質の量を補正するcontrolとして使用された。エスシンによって増加したβ−カテニンの量を確認して、その結果を図2に示した。
毛髪の数が正常の場合に比べて著しく少ないか、または脱毛症状のある毛髪の弱い男女総105人を対象にして、本発明の脱毛治療/発毛用の組成物1(ヘアトニック)の発毛効果を実験した。前記男女総105人を15人ずつ7個群に分けて比較例1及び実施例1〜6のものを使用し、週5回ずつ6ヶ月間毛髪及び頭皮に使用した。使用後の毛髪の太さ、密集度、弾力性及び全体的な評価項目に対して改善の程度または損傷程度を各々5段階に分けて評価した(改善程度:+5、+4、+3、+2、+1、改善なし:0、損傷程度:−1、−2、−3、−4、−5)。前記評価は、使用開始後6ヶ月経過した後の使用者の問診結果の平均値として判定し、その結果を表4に示した。
毛髪の数が正常の場合に比べて顕著に少ないか、または脱毛症状のある毛髪の弱い男女総105人を対象にして本発明の脱毛治療/発毛用の組成物1(ヘアトニック)の発毛効果を実験した。前記男女総105人を15人ずつ7個群に分けて比較例1及び実施例1〜6を使用し、週5回ずつ6ヶ月間毛髪及び頭皮に使用した。使用後の臨床写真撮影による研究者の評価とフォトトリコグラムによる評価を行った。臨床写真による研究者の評価は、塗布してから2、4、6ヶ月後の比較例と実施例に対して、「Good」、「Slight」、「no change」の3項目に対して評価を行った(Good:50%〜75%好転、Slight:25%〜50%好転、no change:変化なし)。フォトトリコトグラムによる単位面積当たりの毛髪の数と毛髪の平均厚さに対する評価は、塗布してから4、6ヶ月後に比較例及び実施例に対して測定を行い、その結果を表5に示した。
ラポンチシン(Rhaponticin)、レイン(Rhein)、クリソファノール(Chrysophanol)及びフィジコン−8−O−d−グルコピラノシド(Physicon−8−O−d−glucopyranoside) のうち一種以上を下記の表6に示した処方に従って通常の方法でヘアトニックを製造した。
ラポンチシン、レイン、クリソファノール及びフィジコン−8−O−d−グルコピラノシドのうち一種以上を下記の表7に示した処方に従って通常の方法でヘアローションを製造した(実施例13)。
ヒト来由毛乳頭細胞(dermal papilla cells,DPCs)は、プロモセル社から購入した。前記DPCsを5%ウシ胎児血清(FBS;Gibco,NY,USA)、ペニシリン 100unit/mL及びストレプトマイシン 100μg/mLが含まれたDMEM(Hyclone Inc,UT,USA)で、37℃及び5%のCO2条件下で培養した。培養した DPCs 3,000cells/wellを96−ウェルプレートに分注した後、0.1%血清条件で24時間培養した。その後、培養した細胞に、無血清 DMEMに1:1000で希釈したDMSO(vehicle)を対照群にし、ミノキシジル 2μg/mlを陽性対照群にし、ラポンチシン、レイン、クリソファノール及びフィジコン−8−O−d−グルコピラノシドを各々10μg/mlずつ、そして表8のように単一物質を組み合わせた試料を一日間処理してインキュベートした。インキュベートした後、CCK方法を用いて細胞の増殖程度を評価した。CCK−8を培養液に1:10で処理し、1時間インキュベートした。1時間後、各ウェルの吸光度(absorbance)を450nmで測定した。全ての実験は、3回ずつ繰り返して吸光度値の平均を求めた。その結果は、対照群を100にし、それに対する処理群のパーセントとして表された。
一般的に毛乳頭から分泌されるVEGF、IGF−1、FGFなどは、毛髪の成長期を誘導し、Versicanは毛髪成長期のマーカーとして知られており、DKK−1は毛髪退行期のマーカーとして知られている。したがって、本発明のラポンチシン、レイン、クリソファノール及びフィジコン−8−O−d−グルコピラノシドの物質が毛乳頭細胞において成長期促進信号と退行期誘導信号に及ぶ影響を調査した。
前記製造例3で製造した本発明の脱毛治療用の組成物3(ヘアトニック)を毛髪の数が正常である場合に比べて顕著に少ないか、または脱毛症状を示して毛髪の弱い男女総40人を対象にして10人ずつ4群に分けて、比較例2及び3と、実施例8〜12を週5回ずつ6ヶ月間毛髪及び頭皮に使用した。使用後、毛髪の太さ、密集度、弾力性及び全体的な評価項目に対して改善程度(非常に好転;+3、好転;+2、少し好転;+1、変化なし;0、少し悪化;−1、悪化;−2、非常に悪化;−3)を、6ヶ月経過後に使用者の問診によって平均値として判定し、その結果を表11に示した。
Claims (14)
- エスシンを有効成分として含む、脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記有効成分の含量が、組成物の総重量に対して0.001〜10 重量%である、請求項1に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- ラポンチシン、レイン、クリソファノール及びフィジコン−8−O−d−グルコピラノシドからなる群より選択される一種以上の化合物、若しくはその塩、水和物または溶媒和物を有効成分として含む、脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記化合物が二種以上である、請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記一種以上の化合物が、(i)クリソファノール、及び(ii)レイン、ラポンチシン及びフィジコン−8−O−d−グルコピラノシドより選択された一種以上の化合物である、請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記一種以上の化合物が、ラポンチシン、レイン、クリソファノール及びフィジコン−8−O−d−グルコピラノシドである、請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記有効成分の含量が、0.00001〜50重量%である、請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記組成物が、毛乳頭細胞の増殖を促進する、請求項1または請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記組成物が、毛髪の弾力性を増加させる、請求項1または請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記組成物が、医薬組成物である、請求項1または請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記組成物が、医薬外品用の組成物である、請求項1または請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 前記組成物が、化粧料組成物である、請求項1または請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物。
- 請求項1または請求項3に記載の脱毛防止または毛髪成長促進用の組成物を含む、毛髪または頭皮用の製品。
- 前記製品が、発毛剤、頭皮クレンジング剤、頭皮スケーリング剤、 頭皮マッサージ剤、頭皮ケア剤、洗浄剤、シャンプー、トニック、ヘアコンディショナー、ヘアローション、ゲル、パック、クリーム、エッセンス、パウダー、スプレー、オイル、石けん、軟膏、ヘアスタイリング剤、染毛剤及びパーマ剤からなる群より選択される、請求項13に記載の毛髪または頭皮用製品。
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