CN115137662B - 一种乌发育发组合物及其制备和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及包含表棓儿茶素棓酸酯和二苯乙烯苷的乌发育发组合物及其应用，所述乌发育发组合物，包含：1～10重量份的表棓儿茶素棓酸酯；1～5重量份的二苯乙烯苷；和1～5重量份的γ‑氨基丁酸。该组合物能够显著刺激毛发黑色素的增加，增加黑发比例，除此以外还能够刺激毛发的生长。
Description
技术领域
本发明涉及包含表棓儿茶素棓酸酯和二苯乙烯苷的乌发育发组合物及其应用，该组合物能够显著刺激毛发黑色素的增加，增加黑发比例。
背景技术
头上的白发主要是由于头发髓质和皮质里黑色素颗粒减少的缘故。正常情况下，毛乳头内有丰富的血管，为毛乳头、毛球部提供充足的营养，黑色素颗粒便顺利合成。当黑色素颗粒在毛乳头、毛球部的形成发生障碍，或虽然形成但因某种因素，不能运送到毛发中去，从而使毛发髓质、皮质部分的黑色素颗粒减少、消失时，就会出现白发。
表棓儿茶素棓酸酯(Epigallocatechin gallate)属于黄烷醇类化合物，研究表明，表棓儿茶素棓酸酯能够促进纤维芽细胞的活性，有活肤作用，可用于抗衰化妆品；对UVB具有吸收作用，可保护皮肤免受光伤害。但是未见其在乌发及育发中的用途。
二苯乙烯苷为何首乌提取物的有效成分，多羟基芪类化合物，研究发现,二苯乙烯苷具有多种生理活性与药用价值,已在降血脂、抗衰老、抑制肿瘤等方面显示出较强的功能性。已知二苯乙烯苷在防治脱发[CN105663148A]中的用途。
γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid)在临床上多用于降低血氨、降压，但是未见其在乌发及育发中的用途。
目前，未见将表棓儿茶素棓酸酯、二苯乙烯苷和γ-氨基丁酸组合用于乌发育发中的用途。
发明内容
本发明的目的是提供乌发育发组合物，其用于减少白发的数量或者密度，并且增加个体的黑发。
本发明发明目的由以下技术方案实现：
本发明提供一种乌发育发组合物，包含：
表棓儿茶素棓酸酯；
二苯乙烯苷。
尽管已知二苯乙烯苷在防脱发、乌发育发中的用途，但二苯乙烯苷对光线敏感，且在弱酸性和弱碱性的体系中不稳定，因此，已知含有二苯乙烯苷的弱酸性或者弱碱性洗发制剂几乎是没有。然而意外发现，表棓儿茶素棓酸酯能够稳定二苯乙烯苷，该组合物在较宽的pH范围内(4.0～8.0)仍然保持稳定。
在本发明其中一个实施方式中，所述组合物还包含γ-氨基丁酸。令人惊奇地是，γ-氨基丁酸虽然未被发现具有育发乌发的功效，但是在γ-氨基丁酸存在下，整体组合物表现出刺激黑色素细胞合成黑色素的活性显著增加，且组合物在较宽的pH范围内(4.0～8.0)仍然是稳定的。
在本发明其中一个实施方式中，所述组合物中含有：
1～10重量份的表棓儿茶素棓酸酯；
1～5重量份的二苯乙烯苷；和
1～5重量份的γ-氨基丁酸。
在本发明其中一个实施方式中，所述组合物中含有：
8重量份的表棓儿茶素棓酸酯；
2重量份的二苯乙烯苷；和
5重量份的γ-氨基丁酸。
在本发明其中一个实施方式中，所述组合物中含有：
10重量份的表棓儿茶素棓酸酯；
2重量份的二苯乙烯苷；和
3重量份的γ-氨基丁酸。
在本发明其中一个实施方式中，所述组合物中含有：
5重量份的表棓儿茶素棓酸酯；
2重量份的二苯乙烯苷；和
3重量份的γ-氨基丁酸。
对于表棓儿茶素棓酸酯、二苯乙烯苷和γ-氨基丁酸三者的重量份数，本发明仅列举了效果较优的实施方式，但是包含在本发明限定的重量范围内的任意值均应在本发明要求保护的范畴内。
由此，本发明另一目的在于提供一种乌发育发洗发液，包含所述乌发育发组合物1～5％。更优选为1％或1.5％。
在洗发液中，所述乌发育发组合物可以作为主要或唯一的功效成分存在。
在本发明其中一个实施方式中，还包含表面活性剂、调理剂、防腐剂、螯合剂、香精、酸化剂和去离子水。
在本发明其中一个实施方式中，所述表面活性剂选自月桂醇聚醚硫酸铵、月桂醇聚醚硫酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱和椰油酰基二乙醇胺中的一种或多种。其在所述洗发液中的含量优选为10～22％，更优选为20％或22％。
在本发明其中一个实施方式中，所述调理剂选自聚季铵盐-47、聚二甲基硅氧烷醇和瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵中的一种或多种。其在所述洗发液中的含量优选为0.1～3％，更优选为0.5～2％，更优选为1％或1.5％。
在本发明其中一个实施方式中，所述防腐剂为苯氧乙醇或苯甲酸钠。其在所述洗发液中的含量优选为0.01～0.1％，更优选为0.1％。
在本发明其中一个实施方式中，所述螯合剂为EDTA-二钠。其在所述洗发液中的含量优选为0.01～0.05％，更优选为0.01或0.02％。
在本发明其中一个实施方式中，所述酸化剂为柠檬酸。所述柠檬酸的量以能够调节所述乌发育发洗发液的pH至5.0～6.5为准。
由此，本发明另一目的在于提供制备所述乌发育发洗发液的方法，包括以下步骤：
将去离子水、表面活性剂和调理剂加入搅拌锅内，混合均匀，加热至70℃～85℃；降温至40℃～45℃，加入乌发育发组合物、防腐剂、螯合剂和香精，并且用酸化剂调节pH为5.0～6.5，即得。
在本发明其中一个较优选的实施方式中，提供一种乌发育发洗发液，其包含：
乌发育发组合物1～5％；
月桂醇聚醚硫酸铵1～10％；
椰油酰胺丙基甜菜碱1～10％；
瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵0.1～3％；
苯氧乙醇0.01～0.1％；
EDTA-二钠0.01～0.05％；和
去离子水余量；
柠檬酸调节pH为5.0～6.5。
虽然本发明仅仅列举了将本发明乌发育发组合物制备成洗发液的实施方式，但是不影响将本发明制备成其他制剂形式，比如：洗发膏、护发素等。这些制剂的形式虽然不同，但原则上不应该影响本发明乌发育发组合物的效用。
具体实施方式
通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。
实施例1～4、乌发育发洗发液及其制备(表1，质量分数)
制备方法：
将去离子水、月桂醇聚醚硫酸铵、椰油酰胺丙基甜菜碱和瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵加入搅拌锅内，混合均匀，加热至70～85℃；降温至40～45℃，加入表棓儿茶素棓酸酯、二苯乙烯苷、γ-氨基丁酸、苯氧乙醇、EDTA-二钠和香精，并且用柠檬酸调节pH为5.5，即得。
实施例5、与实施例1的区别在于，采用柠檬酸调节洗发液pH为4.0，其余参数与实施例1相同。
实施例6、与实施例1的区别在于，采用柠檬酸调节洗发液pH为5.0，其余参数与实施例1相同。
实施例7、与实施例1的区别在于，采用柠檬酸调节洗发液pH为6.0，其余参数与实施例1相同。
实施例8、与实施例1的区别在于，采用柠檬酸调节洗发液pH为8.0，其余参数与实施例1相同。
对比例1、与实施例1区别在于，乌发育发组合物仅包含二苯乙烯苷，其余参数与实施例1相同。
对比例2、与实施例1区别在于，乌发育发组合物仅包含表棓儿茶素棓酸酯，其余参数与实施例1相同。
对比例3、与实施例1区别在于，乌发育发组合物仅包含γ-氨基丁酸，其余参数与实施例1相同。
对比例4、与实施例1区别在于，采用表棓儿茶素棓酸葡糖苷替代表棓儿茶素棓酸酯，其余参数与实施例1相同。
一、刺激黑色素生成体外共培养实验
黑素细胞和角质形成细胞接触并发生联系，构成“表皮黑素单元”，在体外采用角质形成细胞与黑色素细胞共培养的模式可以模拟“表皮黑素单元”结构，构建符合生理学特点的体外共培养模型。
将实施例1～8以及对比例1～4样品采用蒸馏水稀释成浓度为10％(w/w)的样品液，取上述样品液分别与正常人角质形成细胞(NHK)和正常人黑色素细胞(NHM)在体外共培养72h，空白组采用不含乌发育发组合物的洗发液处理，共培养结束后收集各组细胞上清液，通过比色法(405nm)测定各组细胞上清中的黑色素含量，计算黑色素生成的上调率(式1)，结果如表2所示。
式1：黑色素生成的上调率(％)＝(试验组共培养72后细胞上清中的黑色素含量-空白组72h细胞上清中的黑色素含量)/空白组72h细胞上清中的黑色素含量*100％。
表2：不同样品处理后细胞黑色素生成上调率结果
分析表2可知，表棓儿茶素棓酸酯、二苯乙烯苷的组合；表棓儿茶素棓酸酯、二苯乙烯苷、γ-氨基丁酸组合以及表棓儿茶素棓酸葡糖苷、二苯乙烯苷、γ-氨基丁酸的组合均能刺激黑色素的增加，其中，刺激作用最明显是表棓儿茶素棓酸酯、二苯乙烯苷、γ-氨基丁酸的组合，然而单独的γ-氨基丁酸不能明显刺激黑色素的增加，而组合刺激黑色素增加的重量远大于单独的刺激，产生了协同的作用。
二、刺激毛囊生长试验(Philpott试验)
取体外处于生长期的游离毛囊，将游离的毛囊移入24孔培养板中，每孔1根毛囊，加入M199培养基，37℃，5％CO2恒温培养箱中培养24h，选取生长较为明显的毛囊(＞0.1mm)分别加入实施例1～4以及对比例1～4制备的洗发液继续培养，空白组采用不含乌发育发组合物的洗发液处理，每组随机选取20根毛囊，测量毛囊的初始长度和共培养10天后每根毛囊的长度，计算每组的最终长度，根据下式算得每组毛囊毛发生长率，结果如表3。
毛囊毛发生长率％＝(最终长度-初始长度)/初始长度*100％
表3：毛囊毛发生长率比较
由表3可知，表棓儿茶素棓酸酯、二苯乙烯苷、γ-氨基丁酸的组合促进毛发生长的能力显著优于其他组合。
三、临床研究
选取180名白发志愿者，随机分为9组，每组20例，分别为实施例1～4以及对比例1～4、空白组，试验组每组患者每两天一次使用对应的洗发液样品，空白组使用不含乌发育发组合物的洗发液处理，持续使用4个月，计数每组患者使用前后的白发密度(毛发数量/cm2)变化，以白发减少率进行评价，结果如下表4所示。
白发减少率＝(使用后白发密度-使用前白发密度)/使用前白发密度*100％
表4：白发减少率
| 样品 | 白发减少率(％) |
| 空白组 | -1.5％ |
| 实施例1 | -21.4％ |
| 实施例2 | -18.5％ |
| 实施例3 | -19.2％ |
| 实施例4 | -11.7％ |
| 对比例1 | -7.3％ |
| 对比例2 | -4.2％ |
| 对比例3 | -1.6％ |
| 对比例4 | -14.8％ |
由表4可见，使用含有表棓儿茶素棓酸酯、二苯乙烯苷、γ-氨基丁酸组合的实施例1～3洗发液可显著减少白发密度，使用4个月后，白发相比使用前平均减少了19.7％。
四、不同pH体系中二苯乙烯苷的稳定性
将实施例1～8以及对比例1和4洗发液置于45℃下保存3个月(不避光)，采用高效液相色谱系统测定处理前后洗发液中二苯乙烯苷的含量变化(参考李玥，二苯乙烯苷的体外稳定性研究)，计算降解率，结果如表5所示。
高效液相色谱条件：色谱柱为Waters SymmetryShield TM RP18(150mm*3.9mm,5μm)；流动相：乙腈-水-磷酸(v/v)(25:75:0.05)；流速为1.0ml/min；检测波长为320nm；柱温：室温。
降解率＝(放置3个月后样品中二苯乙烯苷含量-放置前样品中二苯乙烯苷含量)/放置前样品中二苯乙烯苷含量*100％
表5：二苯乙烯苷含量变化
| 样品 | 45℃放置3个月二苯乙烯苷降解率％ |
| 实施例1 | -5.12％ |
| 实施例2 | -5.39％ |
| 实施例3 | -4.73％ |
| 实施例4 | -4.94％ |
| 实施例5 | -6.24％ |
| 实施例6 | -6.05％ |
| 实施例7 | -5.26％ |
| 实施例8 | -6.47％ |
| 对比例1 | -31.45％ |
| 对比例4 | -28.16％ |
由表5可知，在弱酸性(pH5.5)的条件下，二苯乙烯苷不稳定，放置3个月后降解率达到31.45％，而在pH为4.0～8.0的范围内，包含表棓儿茶素棓酸酯、二苯乙烯苷、γ-氨基丁酸组合的实施例1～8洗发液中二苯乙烯苷较为稳定，降解率不超过10％。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种乌发育发组合物，其特征在于，包含：
1~10重量份的表棓儿茶素棓酸酯；
1~5重量份的二苯乙烯苷；和
1~5重量份的γ-氨基丁酸。
2.根据权利要求1所述乌发育发组合物，其特征在于，所述组合物中含有：
8重量份的表棓儿茶素棓酸酯；
2重量份的二苯乙烯苷；和
5重量份的γ-氨基丁酸。
3.一种乌发育发洗发液，其特征在于，包含根据权利要求1或2所述乌发育发组合物1~5%。
4.根据权利要求3所述乌发育发洗发液，其特征在于，还包含表面活性剂、调理剂、防腐剂、螯合剂、香精、酸化剂和去离子水。
5.根据权利要求4所述乌发育发洗发液，其特征在于， 所述表面活性剂选自月桂醇聚醚硫酸铵、月桂醇聚醚硫酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱和椰油酰基二乙醇胺中的一种或多种。
6.根据权利要求4所述乌发育发洗发液，其特征在于，所述调理剂选自聚季铵盐-47、聚二甲基硅氧烷醇和瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵中的一种或多种。
7.根据权利要求4所述乌发育发洗发液，其特征在于，所述防腐剂为苯氧乙醇或苯甲酸钠；所述螯合剂为EDTA-二钠；所述酸化剂为柠檬酸。
8.制备根据权利要求3~7任一所述乌发育发洗发液的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将去离子水、表面活性剂和调理剂加入搅拌锅内，混合均匀，加热至70℃~85℃；降温至40℃~45℃，加入乌发育发组合物、防腐剂、螯合剂和香精，并且用酸化剂调节pH为4.0~8.0，即得。
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