JP2021507716A - 融合タンパク質 - Google Patents
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Abstract
Description
成人がんおよび小児がんの両方に対する細胞傷害性化学療法の進歩にかかわらず、いくつかの主ながんサブタイプは、まだ極めて予後不良であることが明らかである。免疫療法は、悪性がん細胞を直接標的化することに対する代替的アプローチを提供し、標準的なアプローチの正常細胞への毒性副作用を回避する。
急性骨髄性白血病は、最もよく見られる成人急性白血病であり、2番目によく見られる小児白血病である。発生率は年齢と共に増加し、高い危険性または再発性疾患を有する患者について、予後は極めて不良であり、造血幹細胞移植にもかかわらず成人における生存期間は<12カ月である。高齢患者または共存症を有する患者について、標準的な化学療法レジメンは、耐容性不良であり、至適以下の治療、および治癒の達成不能に至る。AMLに対して有効な新薬はほとんど開発されておらず、それゆえに免疫療法薬は、別のアプローチの可能性を与える。CD33は、AML芽球上にほぼ例外なく発現され、免疫毒素に基づく治療法についての有効な標的であることが判明した(ゲムツズマブオゾガマイシン)。抗CD33 CAR−T細胞は、in vitroでAML芽球に対して細胞傷害性であり、in vivoで白血病の重荷を根絶する。これを基に、抗CD33 CAR T細胞の第I相臨床試験が中国で開始された(NCT01864902およびNCT02958397)。化学療法難治性AMLの1人の患者からの報告は、骨髄AML芽球の低減を示した。これらの結果は、抗CD33 CAR T細胞が有効であり得るという原理証明を提供する。しかし、血液中および骨髄中の両方で測定可能なCAR−T細胞が残っているにもかかわらず、疾患は、CAR注入の9週間後までに再発した。この結果は、白血病の微小環境によりCAR−T細胞が不活性にされたことを示唆している(回避のメカニズムとしてAML芽球上のCD33が消失したという証拠はない)。
成人においてほぼ例外なく予後不良のアスベスト関連腫瘍である中皮腫は、細胞表面糖タンパク質メソセリンを発現する。メソセリンはまた、卵巣腺がん、肺腺がん、および膵臓がんなどの上皮がん上に発現される。メソセリンは、SS1Pなどの免疫毒素による受動免疫療法のための有効で選択的な標的であることが実証されており、CAR T技術における開発のためにそれが選択されることにつながる。マウスモデルにおいて、抗メソセリンCAR−T細胞は、明白で存続性の抗腫瘍活性を実際に示す。抗メソセリンCAR−T細胞はまた、これらの腫瘍を有する患者にも投与されており、それぞれの場合で限定的な応答(PR、SD)が検出されたものの、腫瘍は進行した。CAR−T細胞の存続性は、極めて不良であり、初めの投与または繰り返し投与のわずか数日以内で細胞が検出不能になった。CAR−T細胞が腫瘍内に、したがって標的抗原に近接して置かれた場合であっても、応答は弱いままであり、これは、T細胞の機能を低減する強い免疫抑制微小環境を示唆している。
膠芽腫は、成人および小児の両方の最も壊滅的な脳腫瘍の1つであり、患者は、集中的な化学療法および放射線療法に基づくレジメンにもかかわらず、急速な疾患進行および治療の失敗をしばしば経験する。膠芽腫は、上皮成長因子受容体の変異体、EGFRvIIIを発現し、免疫療法によって標的化することができる腫瘍特異抗原を提供する。EGFRvIIIはまた、進行結腸直腸がんの約3分の1に発現され得る。抗EGFRvIIII CAR−T細胞は、同所マウス異種移植片における膠芽腫の疾患制御を実際に示した。しかし、すべての場合で、脳を含むすべての器官において検出可能なレベルのCAR−T細胞があるにもかかわらず、腫瘍は成長し続け、マウスの死亡をもたらす。やはり、このデータは、CAR−T細胞が腫瘍の微小環境によって不活性化されることを示唆している。この理論的根拠に基づく第I相試験が、現在進行中である(NCT02844062、NCT02664363)。
アルギニンは、健康な組織によって細胞生存性、増殖およびタンパク質合成を含むいくつかの細胞過程のために必要とされる準必須アミノ酸である。全身アルギニンレベルは、主として食事摂取によって維持され、より少ない度合いで、「腸−腎軸(intestinal−renal axis)」中における前駆体からの合成によって維持される。細胞レベルで、アルギニンは、陽イオンアミノ酸(CAT;SLC7A)ファミリーの輸送体を経由して細胞外液から搬入され、尿素回路に入る。炎症、妊娠、およびがんなどの高い需要の条件で、アルギニンレベルは局所組織微小環境中および全身で不足してくる可能性がある。一部の組織および細胞は、アルギニノコハク酸シンターゼ(ASS1)およびオルニチントランスカルバミラーゼ(OTC)の発現により前駆体からアルギニンを再合成することによって自らを防御することができる。これらの酵素のうち少なくとも一方の発現を欠く細胞は、細胞外アルギニンの搬入に依存し、これは、アルギニン栄養要求として知られる状況である。
融合標的結合タンパク質は、本発明のタンパク質が発現される細胞の所望の生物学的性質に付与すべき所望の特異性を可能にする人工融合タンパク質である。簡潔にするために、それらもまた、本開示において「タンパク質」または「本発明のタンパク質」と称される。本発明に関連してそれぞれ提供することができる異なる種類の細胞および所望の生物学的性質は、本明細書の他の箇所にさらに述べられる。典型的には、融合標的結合タンパク質およびそのようなタンパク質を発現している細胞の医学的使用の状況で、疾患に関連する細胞(がん細胞または感染細胞など)に対して標的化された細胞破壊活性は、必要とされる治療的有用性を付与する。
本明細書は、いくつかの例示的なタンパク質および核酸配列を含有する。融合標的結合タンパク質およびそれらをコードする核酸と同様に、これらは、標的結合部分、細胞内シグナル伝達領域、および酵素ドメインの配列を含む。
本発明は、アルギニンまたはアルギニン前駆体の合成を促進するドメインを含む融合標的結合タンパク質に関する。
本発明のタンパク質は、アルギニンまたはアルギニン前駆体の合成を促進するドメインを含む。ドメインがこの機能を果たす能力、いわばアルギニンまたはアルギニン前駆体の合成を促進する能力は、任意の適切な手段またはアッセイによって検討される場合がある。
本発明のタンパク質中の組込みに適したASS−1酵素ドメインの一例を配列番号1に示す。
本発明のタンパク質中の組込みに適したOTC酵素ドメインの一例を配列番号2に示す。
本発明のタンパク質中の組込みに適したASL酵素ドメインの一例は、配列番号30に示される核酸配列によってコードされる。
本発明のタンパク質中の組込みに適したODC1酵素ドメインの一例は、配列番号31に示される核酸配列によってコードされる。
本発明のCAR中の組込みに適したArgG酵素ドメインの一例は、配列番号32に示される核酸配列によってコードされる。
本発明のタンパク質中の組込みに適したArgH酵素ドメインの一例は、配列番号33に示される核酸配列によってコードされる。
本発明のタンパク質中の組込みに適したArgF酵素ドメインの一例は、配列番号34に示される核酸配列によってコードされる。
本発明は、トリプトファンまたはトリプトファン前駆体の合成を促進するドメインを含むタンパク質に関する。
本発明のタンパク質は、トリプトファンまたはトリプトファン前駆体の合成を促進するドメインを含む。ドメインがこの機能を果たす能力、いわばトリプトファンまたはトリプトファン前駆体の合成を促進する能力は、任意の適切な手段またはアッセイによって検討される場合がある。
本発明のタンパク質中の組込みに適したTRP5酵素ドメインの一例は、配列番号35に示される核酸配列によってコードされる。
本発明のタンパク質中の組込みに適したIDO酵素ドメインの一例は、配列番号36に示される核酸配列によってコードされる。
本発明のタンパク質は、標的結合部分を含む。標的結合部分は、タンパク質の結合特異性、およびそれゆえに標的結合部分によって認識される標的分子がその上に見出される、細胞などの標的構造に対する本発明のタンパク質を発現している細胞の細胞破壊活性の特異性を付与する。
GD2標的結合部分は、ジシアロガングリオシド2(GD2)に結合することができる部分であり、ガングリオシドGD2と称される場合もある。GD2標的結合部分を含む本発明のタンパク質は、GD2分子を含む標的、例えばGD2を発現している細胞に対する本発明のタンパク質を発現している細胞の細胞破壊活性を発揮することが望まれる状況における使用に適している。
CD33標的結合部分は、CD33(Siglec−3としても知られる)に結合することができる部分である。CD33は、膜貫通タンパク質である。CD33標的結合部分を含む本発明のタンパク質は、CD33分子を含む標的、例えばCD33を発現している細胞に対して、本発明のタンパク質を発現している細胞の生物学的活性を発揮することが望まれる状況における使用に適している。
メソセリン標的結合部分は、メソセリンに結合することができる部分である。メソセリンは、MSLNの産物の40kDaタンパク質である。メソセリン標的結合部分を含む本発明のタンパク質は、メソセリン分子を含む標的、例えばメソセリンを発現している細胞に対して、本発明のタンパク質を発現している細胞の生物学的活性を発揮することが望まれる状況における使用に適している。
EGFRvIII標的結合部分は、上皮成長因子受容体変異体III(EGFRvIII)に結合することができる部分である。EGFRvIII標的結合部分を含む本発明のタンパク質は、EGFRvIII分子を含む標的、例えばEGFRvIIIを発現している細胞に対して、本発明のタンパク質を発現している細胞の生物学的活性を発揮することが望まれる状況における使用に適している。
本発明のタンパク質は、少なくとも1つの細胞内シグナル伝達領域を含む。細胞内シグナル伝達領域は、標的分子への標的結合部分の結合を、タンパク質を発現している細胞の他の生物学的活性と共役させるために役立つ。特に、適切な細胞内シグナル伝達領域は、標的結合部分のその標的分子への結合を、細胞の細胞破壊活性の活性化および/または細胞が活性化に応答して増殖する能力と共役させる場合がある。
GD2を標的化する本発明のタンパク質は、GD2標的化部分を、適切な細胞内シグナル伝達領域(4−1BB細胞内シグナル伝達領域およびCD3 ζ細胞内シグナル伝達領域など)と組み合わせて含む場合がある。タンパク質は、ASS−1ドメイン、および/またはOTCドメイン、および/またはASLドメイン、および/またはOCD1ドメイン、および/またはArgGドメイン、および/またはArgHドメイン、および/またはArgFドメインをさらに含む場合がある。適切には、タンパク質は、ASS−1ドメイン、および/またはOTCドメインを含む場合がある。
メソセリンを標的化する本発明のタンパク質は、適切な細胞内シグナル伝達領域(4−1BB細胞内シグナル伝達領域およびCD3 ζ細胞内シグナル伝達領域など)と組み合わせて抗メソセリンSS1抗体由来のメソセリン標的化部分を含む場合がある。タンパク質は、ASS−1ドメイン、および/またはOTCドメイン、および/またはASLドメイン、および/またはOCD1ドメイン、および/またはArgGドメイン、および/またはArgHドメイン、および/またはArgFドメインをさらに含む場合がある。適切には、タンパク質は、ASS−1ドメイン、および/またはOTCドメインを含む場合がある。
CD33を標的化する本発明のタンパク質は、抗CD33 my96抗体に由来するCD33標的化部分を、適切な細胞内シグナル伝達領域(4−1BB細胞内シグナル伝達領域およびCD3 ζ細胞内シグナル伝達領域など)と組み合わせて含む場合がある。タンパク質は、ASS−1ドメイン、および/またはOTCドメインASS−1ドメイン、および/またはOTCドメイン、および/またはASLドメイン、および/またはOCD1ドメイン、および/またはArgGドメイン、および/またはArgHドメイン、および/またはArgFドメインをさらに含む場合がある。適切には、タンパク質は、ASS−1ドメイン、および/またはOTCドメインを含む場合がある。
EGFRvIIIを標的化する本発明のタンパク質は、適切な細胞内シグナル伝達領域(4−1BB細胞内シグナル伝達領域およびCD3 ζ細胞内シグナル伝達領域など)と組み合わせて抗EGFRvIII 139抗体に由来するEGFRvIII標的化部分を含む場合がある。タンパク質は、ASS−1ドメインおよび/またはOTCドメイン、および/またはASLドメイン、および/またはOCD1ドメイン、および/またはArgGドメイン、および/またはArgHドメイン、および/またはArgFドメインをさらに含む場合がある。特に、タンパク質は、ASS−1ドメイン、および/またはOTCドメインを含む場合がある。
本発明の第3の態様は、本発明のタンパク質をコードする核酸を提供する。タンパク質は、本明細書に記載される本発明の態様または実施形態のうちのいずれかによる場合がある。
本発明の第2の態様は、本発明の第1の態様によるタンパク質を含む細胞を提供する。細胞は、タンパク質を発現する場合がある。タンパク質は、本明細書に記載される本発明の第1の態様の実施形態のうちのいずれかによる場合がある。
本発明のタンパク質を含む本発明の細胞は、疾患の予防および/または治療などの適用に有益ないくつかの活性を表す。
本発明の目的では、細胞破壊活性は、本発明の細胞(例えば、本発明のタンパク質を発現している細胞)が他の細胞を殺滅する任意の活性を包含すると考えるべきである。例として、他の細胞の殺滅は、本発明の細胞の細胞傷害作用によって、または本発明の細胞により媒介される特異的細胞溶解によって達成される場合がある。
治療効果を発揮している細胞のin vivo存続性、特に対象内の存続性は、疾患の効果的な予防および/または治療に重要である。以前に言及されたように、神経芽腫などの腫瘍周辺の微小環境は、特にCAR T細胞などの治療用細胞に有害である。この微小環境の効果、および治療用細胞がその中で存続できないことは、多くの先行技術の治療に関して観察される失敗の顕著な一因となったと考えられる。
対応する標的分子へのタンパク質の結合を介する本発明の細胞の活性化は、細胞増殖を誘導する。これは、治療活性を発揮することができる増加した数の細胞の産生を可能にする。しかし、そのような細胞増殖は、通常、腫瘍微小環境中で阻害され、これは、先行技術において開示されたCAR T細胞治療の失敗の一因となった。
特にそのようなタンパク質を発現する本発明の第2の態様の細胞の形態の、本発明のタンパク質は、医学的使用、つまり、疾患の予防および/または治療における医薬としての使用にうってつけである。そのような医学的使用は、本発明の第5、第6、および第7の態様の主題である。
特に、本発明のタンパク質、細胞、核酸、または医薬組成物は、がんの予防および/または治療に有用な場合がある。本発明の細胞がアルギニン枯渇腫瘍微小環境中で機能する、存続するおよび増殖できることが特に有利であることが、これらの適用に含まれる。
本発明はまた、本発明のタンパク質、細胞、または核酸を含む組成物も提供する。特に本発明は、所与の用量またはその分割量での投与のための、本発明のタンパク質、細胞、または核酸を含む単位用量形態の組成物などの、医薬組成物および製剤を提供する。医薬組成物および製剤は、一般的に、1つまたは複数の随意の薬学的に許容される担体または賦形剤を含む。一部の実施形態では、組成物は、少なくとも1つの追加的な治療剤を含む。
用量のサイズまたは量
本発明のタンパク質、細胞、または核酸は、第1の用量および場合により後続の用量の中に提供される場合がある。一部の実施形態では、第1または後続の用量は、本発明のいくつかのタンパク質、細胞、または核酸を対象の体重1キログラムあたり約105〜約106個のそのような細胞、および/または約105個以下または約106個以下であるいくつかのそのような細胞の範囲で含有する。例えば、一部の実施形態では、第1の用量または後続の用量は、対象の体重1キログラムあたり1×105個もしくは約1×105個未満もしくは以下、2×105個もしくは約2×105個未満もしくは以下、5×105個もしくは約5×105個未満もしくは以下、または1×106個もしくは約1×106個未満もしくは以下のそのような細胞を含む。一部の実施形態では、第1の用量は、対象の体重1キログラムあたり1×105個もしくは約1×105個、2×105個もしくは約2×105個、5×105個もしくは約5×105個、または1×106個もしくは約1×106個のそのような細胞、あるいは前記値のうちの任意の2つの間の範囲内の値を含む。
一部の態様では、第2または後続の用量のタイミングは、第1の用量の開始から後続の用量の開始までとして測定される。他の実施形態では、後続の用量のタイミングは、第1の用量の完了から、または、例えば用量が1日よりも長くかけて、例えば2日かけてもしくは3日かけて投与される本明細書に記載される分割投薬の状況で、第1の用量の投与の中央値の日から測定される。
当業者は、本発明の核酸などの核酸が、タンパク質を発現している形質導入細胞の産生に使用され得る適切な方法を認識しているであろう。そのような方法は、本発明のタンパク質を発現する本発明の細胞の産生に使用される場合がある。
本発明者らは、図1aに示すAMPHO Phoenix細胞の上清中でレトロウイルス粒子の濃度が72時間にわたり増加することを示した。
本発明者らは、不死化ヒトTリンパ球細胞(Jurkat細胞)株におけるアルギニン経路酵素の役割を検討した。本研究の結果を図2に示す。
本発明者らは、ヒトドナー細胞からのPBMCにおけるアルギニン経路酵素の役割を検討した)。本研究の結果を図3に示す。
正常アルギニン(RPMI+10%FCS)、LAN−1神経芽腫馴化上清、および75%アルギニン枯渇培地条件で培養された場合に、アルギニンの合成を促進するドメインを含む融合標的結合タンパク質T細胞、(GD2−ASSおよびGD2−OTC)がシトルリン代謝を高める能力を、培養上清のELISAによって検出した。図4aに示すように、腫瘍由来低アルギニン条件で、GD2−ASS−1融合標的結合タンパク質およびGD2−OTC融合標的結合タンパク質は、対照(アルギニンの合成を促進するドメインを有さない、GD2のみ)と比較して、酵素の発現および活性化と一致してシトルリン代謝を有意に上方調節した。
NOG−SCIDマウスにGD2+腫瘍細胞を移植した。尾静脈注射を介してASS−1ドメインを含むCAR−T細胞(GD2−ASS)および有さないCAR−T細胞(GD2−CAR)を投与した。相対腫瘍成長を経時的に測定した。図5aに示すように、GD2−ASS−1 CAR T細胞の投与は、GD2−CAR T細胞と比較して腫瘍成長における低減をもたらした。
静脈内投与された、5×106個の抗GD2 CAR−T Jurkat細胞(対照細胞)、またはGD2標的部分およびASS−1ドメインを含む本発明のタンパク質を発現しているJurkat細胞(GD2−ASS)、またはGD2標的部分およびOTCドメインを含む本発明のタンパク質を発現している細胞(GD2−OTC)を移植されたNOG−SCIDマウスにおいて本発明の細胞の改善された存続性が実証された。再現性のある低アルギニン微小環境を生み出す(そして、腫瘍微小環境を再現する)ために、マウスに組換えPEG−アルギナーゼを1週間に2回投与した。ELISAによって低アルギニン条件を確認した(データは示さず)。17日後にマウスを屠殺し、血液中のCAR−T細胞の率(対照であろうと本発明の細胞であろうと)をフローサイトメトリーによって測定した。GD2−ASS−1 CAR−T細胞およびGD2−OTC CAR−T細胞は、未改変GD2 CAR−T構築物を含む対照細胞と比較して有意に高い存続性を示した。これらの結果を図6に示す。
ヒトドナーからのPBMC(特にT細胞)に、ASS−1ドメインおよび/またはOTCドメインを、GD2、CD33、メソセリン、またはEGFRvIIIからなるリストから選択される標的結合部分と組み合わせて含む本発明のタンパク質を形質導入した。ウエスタンブロットにより、対照細胞(各ウエスタンブロットの左側のカラム)と比較して本発明のタンパク質を形質導入された細胞においてASS−1およびOTCの発現が増加していることが示される。これを図7aに示す。
CD33標的化ドメインをASS−1ドメイン、OTCドメインまたはASS−1およびOTCドメインのいずれかと組み合わせて含む本発明のタンパク質の発現によって、本発明のCAR−T細胞を産生した。CAR T細胞をK562白血病細胞の存在下にて異なるエフェクター対標的比で4時間培養した。すべてのCAR−T細胞構築物は、特異的に白血病細胞を効果的に殺滅する(70〜90%)。図8に示すように、本発明のタンパク質によるCD33 CAR T細胞の形質導入は、CAR T細胞の細胞傷害性に有害な影響を及ぼさない。実施例の残りに示すように、本発明のタンパク質を含む細胞が、増加した存続性および増殖も実際に示す一方で、細胞破壊活性を維持する能力は、それらの治療的有用性を例証している。
細胞に形質導入して、
・ GD2結合ドメインおよびASS−1ドメインを含むタンパク質
・ GD2結合ドメインおよびOTCドメインを含むタンパク質
・ GD2結合ドメインと、ASS−1およびOTCドメインの両方とを含むタンパク質
・ CD33結合ドメインおよびASS−1ドメインを含むタンパク質
・ CD33結合ドメインおよびOTCドメインを含むタンパク質
・ CD33結合ドメインと、ASS−1およびOTCドメインの両方とを含むタンパク質
・ メソセリン結合ドメインおよびASS−1ドメインを含むタンパク質
・ メソセリン結合ドメインおよびOTCドメインを含むタンパク質
・ メソセリン結合ドメインと、ASS−1およびOTCドメインの両方とを含むタンパク質
・ EGFRvIII結合ドメインおよびASS−1ドメインを含むタンパク質
・ EGFRvIII結合ドメインおよびOTCドメインを含むタンパク質
・ EGFRvIII結合ドメインと、ASS−1およびOTCドメインの両方とを含むタンパク質
の本発明のタンパク質のうちの1つを発現させた。
GD2結合部分をASS−1ドメイン、OTCドメイン、またはASS−1およびOTCドメインのいずれかと組み合わせて含む本発明のタンパク質を発現している細胞を、神経芽腫馴化培地中で培養した。そのような培地は、腫瘍細胞の作用が原因で低アルギニン条件を有する。酵素ドメインを有さない抗GD2 CAR−T細胞を対照細胞として使用した。
HL−60急性骨髄性白血病(AML)細胞をNOG−SCIDマウスに移植した。担白血病マウスを、CD33結合部分と、ASS−1ドメイン、OTCドメイン、またはASS−1ドメインおよびOTCドメインのいずれかとを含む、本発明のタンパク質を発現している細胞で治療した。酵素ドメイン(未改変CAR−T細胞)を欠如する抗CD33 CAR−T細胞を対照として使用した。本発明の細胞または対照細胞を5×106個の細胞の用量で静脈内投与した。
神経芽腫異種移植片マウスを、GD2結合部分およびASS−1ドメインを含む本発明のタンパク質を発現している細胞で治療した。対照動物は、GD2 CAR−T細胞(ASS−1ドメインなし)、またはCAR−T治療なしのいずれかを受けた。すべての動物の脾臓を採取し、フローサイトメトリーによって特徴づけられる白血球を抽出した。結果を図12のA欄に示し、細胞数が対照細胞と比較して本発明の細胞について顕著に増加したことを例証する。これは、本発明の細胞(ASS−1ドメインを含む本発明のタンパク質を発現している)が、対照と比較して治療されたマウスの脾臓中で改善された存続性を有することを指し示す。
CD33結合部分と、ASS−1ドメイン、OTCドメイン、またはASS−1ドメインおよびOTCドメインのうちの1つとを含む本発明のタンパク質を発現している細胞でAML異種移植マウスを治療した。対照群は、CD33 CAR−T細胞(酵素ドメインなし、「−酵素」として示す)、またはCAR−T治療なしのいずれかを受けた。すべての動物の脾臓を採取し、抽出された白血病をフローサイトメトリーによって特徴づけた。図13のA欄に示す結果は、対照細胞と比較して本発明の細胞について細胞数が顕著に増加したことを例証している。これは、本発明の細胞がまた、AMLの状況で治療されたマウスの脾臓において(対照と比較して)改善された存続性を有することを指し示す。
本発明の細胞は、レトロウイルスおよびレンチウイルス形質導入アプローチによってうまく産生された。本発明の細胞のレトロウイルス産生のための例示的なプロトコールの詳細を下述する。
以下は、本発明の核酸の形質移入による本発明の細胞の産生のためのプロトコールを提供するものである。
夕方に、−80からPhoenix Ampho細胞(ヒト細胞の形質導入のためのレトロウイルスパッケージング細胞株)を入手し、培養する。10% FCS、1% L−グルタミン(抗生物質なし)を有するDMEM中でPhoenix Ampho細胞を成長させる。Phoenix Ampho細胞を集密に到達させてはならない。典型的には、2〜3×106個のPhoenix Ampho細胞を各T150フラスコ中の培地30ml中に入れる。0日目に約30〜40×106個のPhoenix Ampho細胞を有するべきである。
TryLEを使用してPhoenix Ampho細胞をトリプシン処理し、10% FCSおよび1% L−グルタミンを有する30mlのDMEM(抗生物質なし)(T150フラスコについての体積、適宜増減する)中に細胞8×106個/フラスコでPhoenix Ampho細胞をセットアップする。細胞を一晩インキュベートする(37℃/5%CO2)。
Phoenix Ampho細胞は、形質移入の日に50〜80%集密であるべきである。次に、以下の方法によって細胞に形質移入するべきである(T150フラスコについて、異なるフラスコを使用する場合は適宜増減する)。
2. Phoenix Ampno細胞上の培地を、10%FCSおよびグルタミンを有する9mlの新鮮DMEMに非常にそっと交換し、次に直ちに細胞上にDNA/fugene複合体またはOptiMEM(模擬対照用)を重層する。プレートの東西南北の移動によってそっと混合する。
3. 細胞を24時間インキュベートする(37℃/5%CO2)。
T細胞は、活性化後48時間中に増大しないので、典型的には、形質導入に必要なだけの数(または細胞が死滅する場合は、より多く)のT細胞を活性化させる。
1. 新鮮白血球尖形管にリンパ球を調製する(lymphoprep)。
2. 細胞を計数し、T細胞培地(1%ヒト血清、10% FCS、P/S、L−グルタミンRPMI)中に入れて1×106/mlで培養する。典型的には、T150フラスコ1つあたり200ml。
3. 300U/mlのIL−2を添加し、30ng/mlのOKT3(抗CD3)を添加し、30ng/mlの抗CD28 mAB(#MAB342−SP、R&D)を添加する。
4. 37℃/5%CO2で48時間インキュベートする。
1. 新しい尖形管にリンパ球を調製する。細胞を計数し、PBMCの50%がCD3+ T細胞であると仮定する。
2. 15ml容falcon中に1mlの5%ヒト血清、PBSあたり10×106個のCD3+ T細胞で細胞を再懸濁する。
3. 1つのCD3+細胞あたり2つのDynabeads(登録商標) Human T−Activator CD3/CD28を加える。dynabeadsを洗浄し:ビーズのバイアルを30秒間ボルテックス撹拌する。ビーズの必要な体積を取り出し、15ml容falcon中に入れる。1mlの無菌PBSを添加し、ピペットで十分に混合する。dynabeadマグネット上にfalconを置く。dynabeadsはfalconの端部にへばり付く。ビーズを乱さずに上清を慎重に取り除く。falconをマグネットから外し、洗浄ステップを繰り返す。少量のPBS中のT細胞にdynabeadsを添加する。
4. T細胞をタンブラー上にて室温で少なくとも1時間インキュベートする。T細胞は、このステップの間にdynabeadsと結合し、同時にCD3+ T細胞の選択および活性化が可能になる。
5. dynabeadマグネット上に細胞を置いて、未結合の細胞を除去する。細胞を計数し、IL−2 300U/mlを有するT細胞培地(1% ヒト血清、10% FCS、P/S、L−グルタミン RPMI)中に1×106個/mlで培養する。
6. 37℃/5%CO2で48時間インキュベートする。
Phoenix ampho細胞は、今やプラスミドDNAを含有するレトロウイルスを産生しているので、細胞/上清を扱う場合にこれを考慮する。TCフード内部にオートクレーブ用バッグを入れ、レトロウイルス(細胞/上清)が夾雑する何らかのプラスチックもその中に入れる。作業が終わったら、オートクレーブ用バッグを密封し、オートクレーブ用金属容器に入れる。いかなる廃液も廃棄物ポットに入れ、密封する。レトロウイルスが夾雑する廃棄物を取り出して、できるだけ早く洗浄する。
1. 2mlのレトロネクチン(30μg/ml)(#T100B、Takara RetroNectin(登録商標)組換えヒトフィブロネクチンフラグメント)を6ウェルプレート(非組織培養処理)のウェルの必要数のそれぞれに添加し、室温で3時間インキュベートする(前日にセットアップし、冷蔵庫内で一晩コーティングすることもできる)。実験に模擬形質移入対照用のウェルを含めることを忘れないこと。培養プレートをレトロネクチン中でコーティングしてT細胞とウイルス粒子とを共局在させて、細胞の効率的な形質導入を可能にする。
2. レトロネクチンを除去し(これは、なくなるまで再利用できる)、ウェルを2.5mlの無菌PBS/2% BSA/ウェルで30分間ブロッキングする。ブロッキング溶液を除去し、ウェルを2.5mlの無菌PBSで2回洗浄する(ウイルスを添加する用意ができるまで最終PBS洗浄液をウェルに入れたままにする)。
3. いくらかのT細胞培地を予め加温する。
4. スピンフェクション(spinfection)用の遠心分離機を空のバケットと共に3160rpm/2000gにて32℃で60分間回転させることによって予め加温する。スピンフェクションの準備ができたら、これを中断することができる。
5. Phoenix Ampho細胞からレトロウイルス含有培養上清を採取し、遠沈する(1500rpmで5分間)。レトロウイルス上清を新しいチューブに移す。0.45μmフィルターを使用してレトロウイルスを濾過して、夾雑しているPhoenix ampho細胞を除去する人もいるが、これは、レトロウイルスの力価を減少させる可能性がある。必要ならば、ドライアイス/エタノールのスラリー上でウイルスを急速凍結し、−80℃で保存することができるが、凍結解凍の度に力価は半減する。
6. スピンフェクション:2ml/ウェルのウイルス上清(または模擬上清)をレトロネクチンでコーティングされたウェルに添加し、3160rpm/2000gにて32℃で2時間遠心分離する。
7. この遠心分離が終わる45分前に、形質導入予定のT細胞を調製する。T細胞を採取し、計数する。T細胞をT細胞培地+IL2(100U/ml)中に1×106個で再懸濁し、15〜20分間インキュベートして(37℃/5%CO2)、遠心分離から細胞を回収できるようにする。
8. ウイルスの遠心分離が完了したら、上清を取り除き、ウェルをPBS(2.5ml/ウェル)で1回洗浄する。
9. ウイルス/レトロネクチンでコーティングされたプレートからPBSを除去し、形質導入予定のT細胞を添加する(2ml/ウェル)。東西南北に揺らすことによって細胞がプレート上に均一に分布していることを確実にする。プレートを1300rpmで5分間遠心分離する。
10. プレートをインキュベーター中に入れる(37℃/5%CO2)。
別の6mlのT細胞培地+IL2(100IU/ml)をT細胞の各ウェルに添加し、インキュベーターに戻す(37℃/5%CO2)。
細胞に形質導入して本発明の細胞を産生するための方法の効率は、以下の手順を使用して決定され得る。
1. FACs緩衝液(10% FCS、PBS)で1回洗浄する
2. 50μlのFACs緩衝液中、CD34−APC(1μl/試料)、CD4−FITC(2μl/試料)およびCD8−PE(1μl/試料)で染色する
3. 氷上で20分間インキュベートする
4. FACS緩衝液で1回洗浄する
5. 200μlのFACs緩衝液中に細胞を再懸濁し、フローサイトメトリー(LSRII)によって分析する
のように染色する。
CAR−形質導入細胞(T細胞など)を
1. T細胞を1500rpmで5分間遠沈し、上清を捨てる。
2. 細胞を10mlの冷MACS緩衝液中に再懸濁し、1500rpmで5分間遠心分離し、上清を捨てる。
3. 細胞を300μlの冷MACS緩衝液中に再懸濁し、100μlのFcRブロッキング剤および100μlのCD34マイクロビーズ(Miltenyi Biotech 130−046−702)を添加する。これらの量は、最大108個の細胞に適しており、それよりも多い場合は、適宜スケールアップする。
4. よく混合し、冷蔵庫(2〜8℃)内で30分間インキュベートする。
5. 50mlの冷MACS緩衝液中で洗浄し、1500rpmで5分間遠心分離し、上清を捨てる。
6. 500μlの冷MACS緩衝液中に細胞を再懸濁し、500μlの冷MACS緩衝液で予めすすいでおいたMSカラムに細胞懸濁液を負荷する。
7. 自然流下により細胞液を滴らせ、500μlの冷MACS緩衝液でカラムを3回洗浄する。
8. カラムを磁石から外し、1mlの冷MACS緩衝液を流し、細胞を無菌チューブ内に集める。
9. 選別されたCAR T細胞を遠心分離し、1×106個のCAR T細胞/mlの濃度で通常のT細胞培地(1% ヒト血清、10% FBS、P/S、L−グルタミン、100U/ml IL−2、RPMI 1640)中に再懸濁する。
10. 翌日にCD34表面抗体染色によってCAR T細胞の純度をチェックする。
のように選別する。
1. 5×106個の細胞/試料をペレットにする(十分な細胞がある場合、追加で基質なし対照のために5×106個の細胞をペレットにする)。
2. 20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤(0.1% Triton−Xは、50mlチューブに入れて分子研究室にて4℃で保存する)中に再懸濁し、時々ボルテックス撹拌しながら氷上で20分間インキュベートする。
3. 試料を13,000rpmにて4℃で20分間遠心分離して、細胞デブリをペレットにする。
4. 20μlの細胞溶解液を新しいエッペンドルフに入れ、氷上に保つ。
5. 各試料について新しいエッペンドルフを採用し、10μlのL−シトルリン(4mM、pH7.5)、10μlのL−アスパラギン酸(4mM、pH7.5)、10μlのMgCl2(6mM)、10μlのATP(4mM、pH7.5)、40μlのトリス−HCl(20mM)および20μlの細胞溶解液を添加する。
6. 酵素なし対照について、細胞溶解液の代わりに20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤を添加する。
7. 基質なし対照を行う場合、ASS−1基質もArgG基質も添加しない、すなわちL−シトルリンおよびL−アスパラギン酸を添加しない。その代わりに、トリス−HCl(20mM)で100μlの最終体積に調整する。
8. 試料を37℃で1.5時間インキュベートする。ASS−1またはArgG酵素反応が起こる。
9. 4mM L−シトルリン溶液の1:4希釈を行うことにより1mM L−シトルリン溶液を作ることによってL−シトルリン標準を作る。エッペンドルフに10、20、30、50、80および100μlのL−シトルリン(1mM)を添加し、各標準を無菌蒸留水で100μlに調整する。これにより、0、10、20、30、50、80および100nMのL−シトルリン濃度が作られる。ブランク対照を含める。
10. 各標準に10μlのL−アスパラギン酸(4mM、pH7.5)、10μlのMgCl2(6mM)、10μlのATP(4mM、pH7.5)および20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤を添加する。ASS−1またはArgG酵素活性試料内のL−シトルリン濃度をより正確に決定するために、ASS−1またはArgG酵素試薬を標準に添加する。
11. 37℃で1.5時間後に、各試料および標準に80μlの停止溶液(リン酸と硫酸とのそれぞれ3:1の混合物)および20μlの3% 2,3ブタンジオンモノオキシム(ひどい悪臭のため、無菌蒸留水を用いてヒュームフード中で当日新たに作る)を添加する。
12. ボルテックス撹拌およびパルス遠心分離によってチューブを混合する。すべての試料および標準を95℃で30分間インキュベートする。2,3ブタンジオンモノオキシムがL−シトルリンと95℃の酸性条件で反応するにつれて黄/橙色が出現する。
13. チューブを13000rpmで1分間遠心分離して、何らかのデブリをペレットにする。2つ組で、50μlの上清を96ウェル平底プレートのウェルに添加する。
14. マイクロプレート吸光度リーダを使用して490nmで吸光度を読み取る。
1. 5×106個の細胞/試料をペレットにする(十分な細胞がある場合、追加で基質なし対照用に5×106個の細胞をペレットにする)。
2. 20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤(0.1% Triton−Xは50mlチューブに入れて分子研究室にて4℃で保存する)中に再懸濁し、時々ボルテックス撹拌しながら氷上で20分間インキュベートする。
3. 試料を13,000rpmにて4℃で20分間遠心分離して、細胞デブリをペレットにする。
4. 20μlの細胞溶解液を新しいエッペンドルフ内に入れ、氷上に保つ。
5. 各試料のために新しいエッペンドルフを採用し、25μLのL−オルニチン(50mM、pH8.0)、25μlのトリエタノールアミン(ボトルから直接ピペッティングする、溶液は非常に粘稠であるので、ゆっくりとピペッティングする)、25μLの新鮮調製カルバミルリン酸(150mM、pH8.0)、および10ulのSDWを添加する。
6. 次に、各チューブに20ulの細胞溶解液を添加する。酵素なし対照について、細胞溶解液の代わりに20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤を添加する。
7. 基質なし対照を行う場合、OTCもArgF基質も添加しない、すなわちL−オルニチンおよびカルバミルリン酸を添加しない。その代わりにSDWで100μlの最終体積に調整する。
8. 試料を37℃で1.5時間インキュベートする。OTCまたはArgF酵素反応が起こる。
9. 4mM L−シトルリン溶液(ASS−1酵素活性アッセイのために使用した−20中の原液)の1:4希釈を行うことによって1mM L−シトルリン溶液を作ることによってL−シトルリン標準を作る。エッペンドルフに10、20、30、50、80および100μlのL−シトルリン(1mM)を添加し、各標準を無菌蒸留水で100μlに調整する。これにより、0、10、20、30、50、80および100nMのL−シトルリン濃度が作られる。ブランク対照を含める。
10. 各標準に25μLのL−オルニチン(50mM)、25μlのトリエタノールアミン、25μLの新鮮調製カルバミルリン酸(150mM)および20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤を添加する。OTCまたはArgF酵素活性試料内のL−シトルリン濃度をより正確に決定するためにOTC酵素試薬を標準に添加する。
11. 37℃で1.5時間後に、各試料および標準に80μlの停止溶液(リン酸と硫酸とのそれぞれ3:1の混合物)および20μlの3% 2,3ブタンジオンモノオキシム(ひどい悪臭のため、無菌蒸留水を用いてヒュームフード中で当日新たに作る)を添加する。
12. ボルテックス撹拌およびパルス遠心分離によってチューブを混合する。すべての試料および標準を95℃で30分間インキュベートする。2,3ブタンジオンモノオキシムがL−シトルリンと95℃の酸性条件で反応するにつれ、黄/橙色が出現する。
13. チューブを13000rpmで1分間遠心分離して、何らかのデブリをペレットにする。2つ組で、50μlの上清を96ウェル平底プレートのウェルに添加する。
14. マイクロプレート吸光度リーダを使用して490nmの吸光度を読み取る。
1. 5×106個の細胞/試料をペレットにする(十分な細胞がある場合、追加で基質なし対照用に5×106個の細胞をペレットにする)。
2. 20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤(0.1% Triton−Xは50mlチューブに入れて分子研究室にて4℃で保存する)中に再懸濁し、時々ボルテックス撹拌しながら氷上で20分間インキュベートする。
3. 試料を13,000rpmにて4℃で20分間遠心分離して、細胞デブリをペレットにする。
4. 20μlの細胞溶解液を新しいエッペンドルフ中に入れ、氷上に保つ。
5. 各試料のために新しいエッペンドルフを採用し、25μLのL−アルギニノコハク酸(11.7mM)、および55μlのPBSを添加する。
6. 次に、20ulの細胞溶解液を各チューブに添加する。酵素なし対照用に、細胞溶解液の代わりに20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤を添加する。
7. 基質なし対照を行う場合、ASL基質もArgH基質も添加しない、すなわちL−アルギニノコハク酸を添加しない。その代わりに、SDWで100μlの最終体積に調整する。
8. 試料を37℃で1.5時間インキュベートする。ASLまたはArgH酵素反応が起こる。
9. 4mM L−フマル酸塩溶液の1:4希釈を行うことにより1mM L−フマル酸塩溶液を作ることによってL−フマル酸塩標準を作る。エッペンドルフに10、20、30、50、80および100μlのL−フマル酸塩(1mM)を添加し、各標準を無菌蒸留水で100μlに調整する。これにより、0、10、20、30、50、80および100nMのL−フマル酸塩濃度が作られる。ブランク対照を含める。
10. 各標準に25μLのL−アルギニノコハク酸(11.7mM)、および20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤を添加する。ASLまたはArgH酵素活性試料内のL−フマル酸塩濃度をより正確に決定するために、ASL酵素試薬を標準に添加する。
11. 37℃で1.5時間後、チューブを13000rpmで1分間遠心分離して何らかのデブリをペレットにする。2つ組で、50μlの上清を96ウェル平底プレートのウェルに添加する。
12. マイクロプレート吸光度リーダを使用して2400nmの吸光度を読み取る。
13. HPLCまたはアルギニンELISAを製造業者の説明書により使用して、上記ステップ11でアルギニン産生も測定することができる。細胞上清濃度の測定のために、細胞溶解液の代わりに100ulの細胞上清を使用して、上記プロトコールを相応に改変することができる。
1. 5×106個の細胞/試料をペレットにする(十分な細胞がある場合、追加で基質なし対照のために5×106個の細胞をペレットにする)。
2. 20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤(0.1% Triton−Xは50mlチューブに入れて分子研究室にて4℃で保存する)中に再懸濁し、時々ボルテックス撹拌しながら氷上で20分間インキュベートする。
3. 試料を13,000rpmにて4℃で20分間遠心分離して、細胞デブリをペレットにする。
4. 20μlの細胞溶解液を新しいエッペンドルフ内に入れ、氷上に保つ。
5. 各試料のために新しいエッペンドルフを採用し、80μlのインドール溶液(0.005M)、400μlのDL−セリン溶液(0.2M)、100μlのピリドキサールリン酸溶液、20μlのグルタチオン(0.05M)、および120μlのリン酸塩緩衝液(0.5M、pH7.8)、260μlの水を添加する。
6. 次に、20ulの細胞溶解液を各チューブに添加する。酵素なし対照用に、細胞溶解液の代わりに20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤を添加する。
7. 基質なし対照を行う場合、Trp5基質を添加しない、すなわちインドールおよびセリン溶液を添加しない。その代わりにSDWで1000μlの最終体積に調整する。
8. 試料を37℃で1.5時間インキュベートする。Trp5酵素反応が起こる。
9. 4mM L−フマル酸塩溶液の1:4希釈を行うことによって1mMインドール溶液を作ることによってインドール標準を作る。エッペンドルフに10、20、30、50、80および100μlのインドール(1mM)を添加し、各標準を無菌蒸留水で1000μlに調整する。これにより、0、10、20、30、50、80および100nMのインドール濃度が作られる。ブランク対照を含める。各標準に20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤を添加する。
10. 37℃で1.5時間後、200μlの5% NaOHを添加する。4mlのトルエンを各チューブに添加し、遠心分離して溶液を2層に分離させる。
11. 別の試験チューブにトルエン層を1mlまでピペッティングする。4mlのエタノールおよび2mlのp−ジメチルアミノベンズアルデヒド溶液を添加する(36gを500mlのエタノール中に溶解する。180mlの濃Hclを添加する。冷めてから、エタノールで体積を1Lにするように調製する)。色変化を60分間起こさせる。
12. マイクロプレート吸光度リーダを使用して550nmの吸光度を読み取る。
13. HPLCまたはトリプトファンELISAを製造業者の説明書により使用して、上記ステップ10でトリプトファンの産生も測定することができる。細胞上清濃度の測定のために、細胞溶解液の代わりに100ulの細胞上清を使用して上記プロトコールを相応に改変することができる。
1. 5×106個の細胞/試料をペレットにする(十分な細胞がある場合、追加で基質なし対照用に5×106個の細胞をペレットにする)。
2. 20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤(0.1% Triton−Xは50mlチューブに入れて分子研究室にて4℃で保存する)中に再懸濁し、時々ボルテックス撹拌しながら氷上で20分間インキュベートする。
3. 試料を13,000rpmにて4℃で20分間遠心分離して、細胞デブリをペレットにする。
4. 20μlの細胞溶解液を新しいエッペンドルフ内に入れ、氷上に保つ。
5. 各試料のために新しいエッペンドルフを採用し、50□lのトリクロロ酢酸(30%)を細胞溶解液に添加する。ボルテックス撹拌し、10,000rpmで5分間遠心分離する。
6. 上清を集め、等体積のエールリッヒ試薬(100mgのP−ジメチルベンズアルデヒド、5mlの酢酸)に添加する。
7. 4mMキヌレニン溶液の1:4希釈を行うことにより1mMキヌレニン溶液を作ることによってキヌレニン標準を作る。エッペンドルフに10、20、30、50、80および100μlのキヌレニン(1mM)を添加し、各標準を無菌蒸留水で1000μlに調整する。これにより、0、10、20、30、50、80および100nMのキヌレニン濃度が作られる。ブランク対照を含める。各標準に20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤を添加する。
8. マイクロプレート吸光度リーダを使用して492nmの吸光度を読み取る。
9. HPLCまたはキヌレニンELISAを製造業者の説明書により使用して、上記ステップ4でキヌレニン産生も測定することができる。細胞上清濃度の測定のために、細胞溶解液の代わりに100ulの細胞上清を使用して上記プロトコールを相応に改変することができる。
1. 5×106個の細胞/試料をペレットにする(十分な細胞がある場合、追加で基質なし対照用に5×106個の細胞をペレットにする)。
2. 20μlの0.1% Triton−X+プロテアーゼ阻害剤(0.1% Triton−Xは50mlチューブに入れて分子研究室にて4℃で保存する)中に再懸濁し、時々ボルテックス撹拌しながら氷上で20分間インキュベートする。
3. 試料を13,000rpmにて4℃で20分間遠心分離して、細胞デブリをペレットにする。
4. 20μlの細胞溶解液を新しいエッペンドルフ内に入れ、氷上に保つ。
5. HPLCまたはポリアミンELISAを製造業者の説明書により使用して、ポリアミンの産生を測定する。細胞上清濃度の測定のために、細胞溶解液の代わりに100ulの細胞上清を使用して、上記プロトコールを相応に改変することができる。
配列番号1 例示的なASS−1酵素ドメインのアミノ酸配列
MSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAK
配列番号2 例示的なOTC酵素ドメインのアミノ酸配列
MLFNLRILLNNAAFRNGHNFMVRNFRCGQPLQNKVQLKGRDLLTLKNFTGEEIKYMLWLSADLKFRIKQKGEYLPLLQGKSLGMIFEKRSTRTRLSTETGLALLGGHPCFLTTQDIHLGVNESLTDTARVLSSMADAVLARVYKQSDLDTLAKEASIPIINGLSDLYHPIQILADYLTLQEHYSSLKGLTLSWIGDGNNILHSIMMSAAKFGMHLQAATPKGYEPDASVTKLAEQYAKENGTKLLLTNDPLEAAHGGNVLITDTWISMGQEEEKKKRLQAFQGYQVTMKTAKVAASDWTFLHCLPRKPEEVDDEVFYSPRSLVFPEAENRKWTIMAVMVSLLTDYSPQLQKPKF
配列番号3 例示的なGD2標的結合部分のアミノ酸配列
DILLTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHRNGNTYLHWYLQKPGQSPKLLIHKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCSQSTHVPPLTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPGSGGGGSGGEVKLQQSGPSLVEPGASVMISCKASGSSFTGYNMNWVRQNIGKSLEWIGAIDPYYGGTSYNQKFKGRATLTVDKSSSTAYMHLKSLTSEDSAVYYCVSGMEYWGQGTSVTVSSAKTTPPSVYGRVTVSS
配列番号4 例示的なCD33標的結合部分のアミノ酸配列
GSNIMLTQSPSSLAVSAGEKVTMSCKSSQSVFFSSSQKNYLAWYQQIPGQSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQSEDLAIYYCHQYLSSRTFGGGTKLEIKRGGGGSGGGGSSGGGSQVQLQQPGAEVVKPGASVKMSCKASGYTFTSYYIHWIKQTPGQGLEWVGVIYPGNDDISYNQKFKGKATLTADKSSTTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAREVRLRYFDVWGAGTTVTVSS
配列番号5 例示的なメソセリン標的結合部分のアミノ酸配列
MQVQLQQSGPELEKPGASVKISCKASGYSFTGYTMNWVKQSHGKSLEWIGLITPYNGASSYNQKFRGKATLTVDKSSSTAYMDLLSLTSEDSAVYFCARGGYDGRGFDYWGQGTTVTVSSGVGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYMHWYQQKSGTSPKRWIYDTSKLASGVPGRFSGSGSGNSYSLTISSVEAEDDATYYCQQWSGYPLTFGAGTKLEIK
配列番号6 例示的なEGFRVIII標的結合部分のアミノ酸配列
QVQLQQSGGGLVKPGASLKLSCVTSGFTFRKFGMSWVRQTSDKRLEWVASISTGGYNTYYSDNVKGRFTISRENAKNTLYLQMSSLKSEDTALYYCTRGYSSTSYAMDYWGQGTTVTVSSSGGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPASLSVATGEKVTIRCMTSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKFLISEGNTLRPGVPSRFSSSGTGTDFVFTIENTLSEDVGDY
配列番号7 例示的な4−1BB細胞内シグナル伝達領域のアミノ酸配列
KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL
配列番号8 例示的なOX−40細胞内シグナル伝達領域のアミノ酸配列
RDQRLPPDAHKPPGGGSFRTPIQEEQADAHSTLAKI
配列番号9 膜貫通ドメインを有する例示的なCD28細胞内シグナル伝達領域のアミノ酸配列
IEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS
配列番号10 例示的なICOS細胞内シグナル伝達領域のアミノ酸配列
CWLTKKKYS SSVHDPNGEY MFMRAVNTAK KSRLTDVTL
(完全長タンパク質の残基162〜199を含むICOSの細胞質部。モチーフYMFM(完全長タンパク質の残基180〜183)は、特に関連性があり、本発明のタンパク質における使用に適したICOS細胞内シグナル伝達領域中に保持されるべきである)
配列番号11 例示的なCD3 ζ細胞内シグナル伝達領域のアミノ酸配列
RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
配列番号12 本発明の例示的なタンパク質GD2 ASS+OTCのアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPDILLTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHRNGNTYLHWYLQKPGQSPKLLIHKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCSQSTHVPPLTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPGSGGGGSGGEVKLQQSGPSLVEPGASVMISCKASGSSFTGYNMNWVRQNIGKSLEWIGAIDPYYGGTSYNQKFKGRATLTVDKSSSTAYMHLKSLTSEDSAVYYCVSGMEYWGQGTSVTVSSAKTTPPSVYGRVTVSSAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKKDPKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAKGSGEGRGSLLTCGDVEENPGPMLFNLRILLNNAAFRNGHNFMVRNFRCGQPLQNKVQLKGRDLLTLKNFTGEEIKYMLWLSADLKFRIKQKGEYLPLLQGKSLGMIFEKRSTRTRLSTETGLALLGGHPCFLTTQDIHLGVNESLTDTARVLSSMADAVLARVYKQSDLDTLAKEASIPIINGLSDLYHPIQILADYLTLQEHYSSLKGLTLSWIGDGNNILHSIMMSAAKFGMHLQAATPKGYEPDASVTKLAEQYAKENGTKLLLTNDPLEAAHGGNVLITDTWISMGQEEEKKKRLQAFQGYQVTMKTAKVAASDWTFLHCLPRKPEEVDDEVFYSPRSLVFPEAENRKWTIMAVMVSLLTDYSPQLQKPKF
配列番号13 本発明の例示的なタンパク質GD2 ASS1のアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPDILLTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHRNGNTYLHWYLQKPGQSPKLLIHKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCSQSTHVPPLTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPGSGGGGSGGEVKLQQSGPSLVEPGASVMISCKASGSSFTGYNMNWVRQNIGKSLEWIGAIDPYYGGTSYNQKFKGRATLTVDKSSSTAYMHLKSLTSEDSAVYYCVSGMEYWGQGTSVTVSSAKTTPPSVYGRVTVSSAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKKDPKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAK
配列番号14 本発明の例示的なタンパク質GD2 OTCのアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPDILLTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHRNGNTYLHWYLQKPGQSPKLLIHKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCSQSTHVPPLTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPGSGGGGSGGEVKLQQSGPSLVEPGASVMISCKASGSSFTGYNMNWVRQNIGKSLEWIGAIDPYYGGTSYNQKFKGRATLTVDKSSSTAYMHLKSLTSEDSAVYYCVSGMEYWGQGTSVTVSSAKTTPPSVYGRVTVSSAEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKKDPKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMLFNLRILLNNAAFRNGHNFMVRNFRCGQPLQNKVQLKGRDLLTLKNFTGEEIKYMLWLSADLKFRIKQKGEYLPLLQGKSLGMIFEKRSTRTRLSTETGLALLGGHPCFLTTQDIHLGVNESLTDTARVLSSMADAVLARVYKQSDLDTLAKEASIPIINGLSDLYHPIQILADYLTLQEHYSSLKGLTLSWIGDGNNILHSIMMSAAKFGMHLQAATPKGYEPDASVTKLAEQYAKENGTKLLLTNDPLEAAHGGNVLITDTWISMGQEEEKKKRLQAFQGYQVTMKTAKVAASDWTFLHCLPRKPEEVDDEVFYSPRSLVFPEAENRKWTIMAVMVSLLTDYSPQLQKPKF
配列番号15 本発明の例示的なタンパク質メソセリンASS1+OTCのアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPMQVQLQQSGPELEKPGASVKISCKASGYSFTGYTMNWVKQSHGKSLEWIGLITPYNGASSYNQKFRGKATLTVDKSSSTAYMDLLSLTSEDSAVYFCARGGYDGRGFDYWGQGTTVTVSSGVGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYMHWYQQKSGTSPKRWIYDTSKLASGVPGRFSGSGSGNSYSLTISSVEAEDDATYYCQQWSGYPLTFGAGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAKGSGEGRGSLLTCGDVEENPGPMLFNLRILLNNAAFRNGHNFMVRNFRCGQPLQNKVQLKGRDLLTLKNFTGEEIKYMLWLSADLKFRIKQKGEYLPLLQGKSLGMIFEKRSTRTRLSTETGLALLGGHPCFLTTQDIHLGVNESLTDTARVLSSMADAVLARVYKQSDLDTLAKEASIPIINGLSDLYHPIQILADYLTLQEHYSSLKGLTLSWIGDGNNILHSIMMSAAKFGMHLQAATPKGYEPDASVTKLAEQYAKENGTKLLLTNDPLEAAHGGNVLITDTWISMGQEEEKKKRLQAFQGYQVTMKTAKVAASDWTFLHCLPRKPEEVDDEVFYSPRSLVFPEAENRKWTIMAVMVSLLTDYSPQLQKPKF
配列番号16 本発明の例示的なタンパク質メソセリンASSのアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPMQVQLQQSGPELEKPGASVKISCKASGYSFTGYTMNWVKQSHGKSLEWIGLITPYNGASSYNQKFRGKATLTVDKSSSTAYMDLLSLTSEDSAVYFCARGGYDGRGFDYWGQGTTVTVSSGVGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYMHWYQQKSGTSPKRWIYDTSKLASGVPGRFSGSGSGNSYSLTISSVEAEDDATYYCQQWSGYPLTFGAGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAK
配列番号17 本発明の例示的なタンパク質メソセリンOTCのアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPMQVQLQQSGPELEKPGASVKISCKASGYSFTGYTMNWVKQSHGKSLEWIGLITPYNGASSYNQKFRGKATLTVDKSSSTAYMDLLSLTSEDSAVYFCARGGYDGRGFDYWGQGTTVTVSSGVGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYMHWYQQKSGTSPKRWIYDTSKLASGVPGRFSGSGSGNSYSLTISSVEAEDDATYYCQQWSGYPLTFGAGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMLFNLRILLNNAAFRNGHNFMVRNFRCGQPLQNKVQLKGRDLLTLKNFTGEEIKYMLWLSADLKFRIKQKGEYLPLLQGKSLGMIFEKRSTRTRLSTETGLALLGGHPCFLTTQDIHLGVNESLTDTARVLSSMADAVLARVYKQSDLDTLAKEASIPIINGLSDLYHPIQILADYLTLQEHYSSLKGLTLSWIGDGNNILHSIMMSAAKFGMHLQAATPKGYEPDASVTKLAEQYAKENGTKLLLTNDPLEAAHGGNVLITDTWISMGQEEEKKKRLQAFQGYQVTMKTAKVAASDWTFLHCLPRKPEEVDDEVFYSPRSLVFPEAENRKWTIMAVMVSLLTDYSPQLQKPKF
配列番号18 本発明の例示的なタンパク質CD33 ASS+OTCのアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPGSNIMLTQSPSSLAVSAGEKVTMSCKSSQSVFFSSSQKNYLAWYQQIPGQSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQSEDLAIYYCHQYLSSRTFGGGTKLEIKRGGGGSGGGGSSGGGSQVQLQQPGAEVVKPGASVKMSCKASGYTFTSYYIHWIKQTPGQGLEWVGVIYPGNDDISYNQKFKGKATLTADKSSTTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAREVRLRYFDVWGAGTTVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAKGSGEGRGSLLTCGDVEENPGPMLFNLRILLNNAAFRNGHNFMVRNFRCGQPLQNKVQLKGRDLLTLKNFTGEEIKYMLWLSADLKFRIKQKGEYLPLLQGKSLGMIFEKRSTRTRLSTETGLALLGGHPCFLTTQDIHLGVNESLTDTARVLSSMADAVLARVYKQSDLDTLAKEASIPIINGLSDLYHPIQILADYLTLQEHYSSLKGLTLSWIGDGNNILHSIMMSAAKFGMHLQAATPKGYEPDASVTKLAEQYAKENGTKLLLTNDPLEAAHGGNVLITDTWISMGQEEEKKKRLQAFQGYQVTMKTAKVAASDWTFLHCLPRKPEEVDDEVFYSPRSLVFPEAENRKWTIMAVMVSLLTDYSPQLQKPKF
配列番号19 本発明の例示的なタンパク質CD33 ASS1のアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPGSNIMLTQSPSSLAVSAGEKVTMSCKSSQSVFFSSSQKNYLAWYQQIPGQSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQSEDLAIYYCHQYLSSRTFGGGTKLEIKRGGGGSGGGGSSGGGSQVQLQQPGAEVVKPGASVKMSCKASGYTFTSYYIHWIKQTPGQGLEWVGVIYPGNDDISYNQKFKGKATLTADKSSTTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAREVRLRYFDVWGAGTTVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAK
配列番号20 本発明の例示的なタンパク質CD33 OTCのアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPGSNIMLTQSPSSLAVSAGEKVTMSCKSSQSVFFSSSQKNYLAWYQQIPGQSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQSEDLAIYYCHQYLSSRTFGGGTKLEIKRGGGGSGGGGSSGGGSQVQLQQPGAEVVKPGASVKMSCKASGYTFTSYYIHWIKQTPGQGLEWVGVIYPGNDDISYNQKFKGKATLTADKSSTTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAREVRLRYFDVWGAGTTVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMLFNLRILLNNAAFRNGHNFMVRNFRCGQPLQNKVQLKGRDLLTLKNFTGEEIKYMLWLSADLKFRIKQKGEYLPLLQGKSLGMIFEKRSTRTRLSTETGLALLGGHPCFLTTQDIHLGVNESLTDTARVLSSMADAVLARVYKQSDLDTLAKEASIPIINGLSDLYHPIQILADYLTLQEHYSSLKGLTLSWIGDGNNILHSIMMSAAKFGMHLQAATPKGYEPDASVTKLAEQYAKENGTKLLLTNDPLEAAHGGNVLITDTWISMGQEEEKKKRLQAFQGYQVTMKTAKVAASDWTFLHCLPRKPEEVDDEVFYSPRSLVFPEAENRKWTIMAVMVSLLTDYSPQLQKPKF
配列番号21 本発明の例示的なタンパク質EGFR ASS1+OTCのアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQQSGGGLVKPGASLKLSCVTSGFTFRKFGMSWVRQTSDKRLEWVASISTGGYNTYYSDNVKGRFTISRENAKNTLYLQMSSLKSEDTALYYCTRGYSSTSYAMDYWGQGTTVTVSSSGGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPASLSVATGEKVTIRCMTSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKFLISEGNTLRGVPSRFSSSGTGTDFVFTIENTLSEDVGDYYCLQSFNVPLTFGDGTKLEKALEQKLISEEDLAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAKGSGEGRGSLLTCGDVEENPGPMLFNLRILLNNAAFRNGHNFMVRNFRCGQPLQNKVQLKGRDLLTLKNFTGEEIKYMLWLSADLKFRIKQKGEYLPLLQGKSLGMIFEKRSTRTRLSTETGLALLGGHPCFLTTQDIHLGVNESLTDTARVLSSMADAVLARVYKQSDLDTLAKEASIPIINGLSDLYHPIQILADYLTLQEHYSSLKGLTLSWIGDGNNILHSIMMSAAKFGMHLQAATPKGYEPDASVTKLAEQYAKENGTKLLLTNDPLEAAHGGNVLITDTWISMGQEEEKKKRLQAFQGYQVTMKTAKVAASDWTFLHCLPRKPEEVDDEVFYSPRSLVFPEAENRKWTIMAVMVSLLTDYSPQLQKPKF
配列番号22 本発明の例示的なタンパク質EGFR ASS1のアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQQSGGGLVKPGASLKLSCVTSGFTFRKFGMSWVRQTSDKRLEWVASISTGGYNTYYSDNVKGRFTISRENAKNTLYLQMSSLKSEDTALYYCTRGYSSTSYAMDYWGQGTTVTVSSSGGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPASLSVATGEKVTIRCMTSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKFLISEGNTLRGVPSRFSSSGTGTDFVFTIENTLSEDVGDYYCLQSFNVPLTFGDGTKLEKALEQKLISEEDLAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAK
配列番号23 本発明の例示的なタンパク質EGFR OTCのアミノ酸配列
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQQSGGGLVKPGASLKLSCVTSGFTFRKFGMSWVRQTSDKRLEWVASISTGGYNTYYSDNVKGRFTISRENAKNTLYLQMSSLKSEDTALYYCTRGYSSTSYAMDYWGQGTTVTVSSSGGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPASLSVATGEKVTIRCMTSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKFLISEGNTLRGVPSRFSSSGTGTDFVFTIENTLSEDVGDYYCLQSFNVPLTFGDGTKLEKALEQKLISEEDLAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMLFNLRILLNNAAFRNGHNFMVRNFRCGQPLQNKVQLKGRDLLTLKNFTGEEIKYMLWLSADLKFRIKQKGEYLPLLQGKSLGMIFEKRSTRTRLSTETGLALLGGHPCFLTTQDIHLGVNESLTDTARVLSSMADAVLARVYKQSDLDTLAKEASIPIINGLSDLYHPIQILADYLTLQEHYSSLKGLTLSWIGDGNNILHSIMMSAAKFGMHLQAATPKGYEPDASVTKLAEQYAKENGTKLLLTNDPLEAAHGGNVLITDTWISMGQEEEKKKRLQAFQGYQVTMKTAKVAASDWTFLHCLPRKPEEVDDEVFYSPRSLVFPEAENRKWTIMAVMVSLLTDYSPQLQKPKF
配列番号24 ASS1をコードするDNA配列
atgtccagcaaaggctccgtggttctggcctacagtggcggcctggacacctcgtgcatcctcgtgtggctgaaggaacaaggctatgacgtcattgcctatctggccaacattggccagaaggaagacttcgaggaagccaggaagaaggcactgaaActtggggccaaaaaggtgttcattgaggatgtcagcagggagtttgtggaggagttcatctggccggccatccagtccagcgcactgtatgaggaccgctacctcctgggcacctctcttgccaggccctgcatcgcccgcaaacaagtggaaatcgcccagcgggagggggccaagtatgtgtcccacggcgccacaggaaaggggaacgatcaggtccggtttgagctcagctgctactcactggccccccagataaaggtcattgctccctggaggatgcctgaattctacaaccggttcaagggccgcaatgacctgatggagtacgcaaagcaacacgggattcccatcccggtcactcccaagaacccgtggagcatggatgagaacctcatgcacatcagctacgaggctggaatcctggagaaccccaagaaccaagcgcctccaggtctctacacgaagacccaggacccagccaaagcccccaacacccctgacattctcgagatcgagttcaaaaaaggggtccctgtgaaggtgaccaacgtcaaggatggcaccacccaccagacctccttggagctcttcatgtacctgaacgaagtcgcgggcaagcatggcgtgggccgtattgacatcgtggagaaccgcttcattggaatgaagtcccgaggtatctacgagaccccagcaggcaccatcctttaccatgctcatttagacatcgaggccttcaccatggaccgggaagtgcgcaaaatcaaacaaggcctgggcttgaaatttgctgagctggtgtataccggtttctggcacagccctgagtgtgaatttgtccgccactgcatcgccaagtcccaggagcgagtggaagggaaagtgcaggtgtccgtcctcaagggccaggtgtacatcctcggccgggagtccccactgtctctctacaatgaggagctggtgagcatgaacgtgcagggtgattatgagccaactgatgccaccgggttcatcaacatcaattccctcaggctgaaggaatatcatcgtctccagagcaaggtcactgccaaa
配列番号25 OTCをコードするDNA配列
Atgctgtttaatctgaggatcctgttaaacaatgcagcttttagaaatggtcacaacttcatggttcgaaattttcggtgtggacaaccactacaaaataaagtgcagctgaagggccgtgaccttctcactctaaaaaactttaccggagaagaaattaaatatatgctatggctatcagcagatctgaaatttaggataaaacagaaaggagagtatttgcctttattgcaagggaagtccttaggcatgatttttgagaaaagaagtactcgaacaagattgtctacagaaacaggcttagcacttctgggaggacatccttgttttcttaccacacaagatattcatttgggtgtgaatgaaagtctcacggacacggcccgtgtattgtctagcatggcagatgcagtattggctcgagtgtataaacaatcagatttggacaccctggctaaagaagcatccatcccaattatcaatgggctgtcagatttgtaccatcctatccagatcctggctgattacctcacgctccaggaacactatagctctctgaaaggtcttaccctcagctggatcggggatgggaacaatatcctgcactccatcatgatgagcgcagcgaaattcggaatgcaccttcaggcagctactccaaagggttatgagccggatgctagtgtaaccaagttggcagagcagtatgccaaagagaatggtaccaagctgttgctgacaaatgatccattggaagcagcgcatggaggcaatgtattaattacagacacttggataagcatgggacaagaagaggagaagaaaaagcggctccaggctttccaaggttaccaggttacaatgaagactgctaaagttgctgcctctgactggacatttttacactgcttgcccagaaagccagaagaagtggatgatgaagtcttttattctcctcgatcactagtgttcccagaggcagaaaacagaaagtggacaatcatggctgtcatggtgtccctgctgacagattactcacctcagctccagaagcctaaattt
配列番号26 GD2 scFvをコードするDNA配列
GATATTCTGCTCACACAGACCCCACTCTCCCTGCCCGTGTCACTCGGGGATCAGGCTAGCATTTCTTGCCGCTCATCTCAGTCTCTGGTCCACCGGAATGGGAACACATACCTCCATTGGTACCTCCAGAAACCTGGACAGAGCCCTAAACTGCTCATCCACAAAGTCTCAAATCGGTTCTCCGGCGTGCCCGATCGCTTTAGCGGATCCGGATCTGGGACCGACTTCACACTGAAAATCTCACGAGTGGAGGCTGAGGATCTCGGCGTCTACTTCTGTAGTCAGAGTACCCACGTCCCACCCCTCACCTTTGGCGCTGGAACAAAACTGGAGCTGAAACGAGCCGATGCTGCTCCTACCGTGTCCATCTTTCCTGGCTCCGGGGGAGGCGGGAGCGGAGGCGAAGTGAAACTCCAGCAGTCTGGCCCTTCTCTCGTGGAACCTGGCGCTTCTGTGATGATCTCCTGTAAGGCCTCTGGATCTTCCTTTACCGGCTACAACATGAACTGGGTCCGGCAGAACATTGGCAAATCCCTGGAATGGATTGGCGCCATCGATCCTTACTACGGCGGCACATCATACAATCAGAAATTCAAGGGGCGAGCAACACTCACTGTCGACAAATCTTCATCCACCGCCTACATGCACCTGAAATCTCTCACATCCGAGGATAGTGCTGTCTACTACTGTGTCTCTGGCATGGAATACTGGGGACAGGGAACTTCTGTCACCGTGTCTAGTGCCAAAACCACACCTCCCTCCGTGTACGGACGAGTCACTGTCTCATCT
配列番号27 CD33 scFvをコードするDNA配列
Ggatccaacatcatgctgacccagagccctagcagcctggccgtgtctgccggcgagaaagtgaccatgagctgcaagagcagccagagcgtgttcttcagcagctcccagaagaactacctagcctggtatcagcagatcccaggccagagccctaagctgctgatctactgggccagcaccagagaaagcggcgtgcccgatagattcaccggaagcggttctggcaccgacttcaccctgacaatcagcagcgtgcagagcgaggacctggccatctactactgccaccagtacctgagcagccggacctttggcggaggcaccaagctggaaatcaagagaggcggcggaggctcaggcggaggcggatctagtggcggaggatctcaggtgcagctgcagcagccaggcgccgaggtcgtgaaacctggcgcctctgtgaagatgtcctgcaaggccagcggctacaccttcaccagctactacatccactggatcaagcagacccctggacagggcctggaatgggtgggagtgatctaccccggcaacgacgacatcagctacaaccagaagttcaagggcaaggccaccctgaccgccgacaagtctagcaccaccgcctacatgcagctgtccagcctgaccagcgaggacagcgccgtgtactactgcgccagagaagtgcggctgcggtacttcgatgtgtggggagccggcaccaccgtgaccgtgtcatct
配列番号28 メソセリンscFvをコードするDNA配列
Atgcaggtacaactgcagcagtctgggcctgagctggagaagcctggcgcttcagtgaagatatcctgcaaggcttctggttactcattcactggctacaccatgaactgggtgaagcagagccatggaaagagccttgagtggattggacttattactccttacaatggtgcttctagctacaaccagaagttcaggggcaaggccacattaactgtagacaagtcatccagcacagcctacatggacctcctcagtctgacatctgaagactctgcagtctatttctgtgcaagggggggttacgacgggaggggttttgactactggggccaagggaccacggtcaccgtctcctcaggtgtaggcggttcaggcggcggtggctctggcggtggcggatcggacatcgagctcactcagtctccagcaatcatgtctgcatctccaggggagaaggtcaccatgacctgcagtgccagctcaagtgtaagttacatgcactggtaccagcagaagtcaggcacctcccccaaaagatggatttatgacacatccaaactggcttctggagtcccaggtcgcttcagtggcagtgggtctggaaactcttactctctcacaatcagcagcgtggaggctgaagatgatgcaacttattactgccagcagtggagtggttaccctctcacgttcggtgctgggacaaagttggaaataaaa
配列番号29 EGFRvIII scFvをコードするDNA配列
CaggtacaactccagcagtctgggggaggcttagtgaagcctggagcgtctctgaaactctcctgtgtaacctctggattcactttcagaaaatttggcatgtcttgggttcgccagactagtgacaagaggctggaatgggtcgcaTccattagtactggcggttataacacgtactattcagacaatgtaaagggccgattcaccatctccagagagaatgccaagaacaccctgtacctgcaaatgagtagtctgaagtctgaggacacggccttgtattactgtacaagaGgctattctagtacctcttatgctatggactactggggccaagggaccacggtcaccgtctcctcaagtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatcggacatcgagctcactcagtctccagcatccctgtccGtggctacaggagaaaaagtcactatcagatgcatgaccagcactgatattgatgatgatatgaactggtaccagcagaagccaggggaaccccctaagttccttatttcagaaggcaatactcttcggccgggagtcccatcccGattttccagcagtggcactggcacagattttgtttttacaattgaaaacacactctcggaagatgttggagattactactgtttgcaaagctttaacgtgcctcttacattcggtgatggcaccaagcttgaaaaagctctagagcagaaactgatctcggaagaagatctggcgaagccc
配列番号30 ASLをコードするDNA配列
GACGCCATCCCGGCCAGAAAAGCCCTGGCCAGTGGCGGGCGCGACACTATCCGTGCGGCCAGGCGGAGGTGAGTGCGCGGCGGCCGGATGGGCGGGACGGGCGTGGAGGACGCCGAGCACCGTGGCGCGCGCTCACGTCCGCGTCCCCAAGGGCTGCGCTCCCTCAAGCGCAGTGCCCAGAACTCGGAGCCAGCCCGGCCCGGGGGACCCTGCTGGCCAAGGAGGTCGTCAGTCCGGTCTTGTCTTCCAGACCCGGAGGACCGAAGCTTCCGGACGACGAGGAACCGCCCAACATGGCCTCGGAGGTGAGTGGGACCTCGGGGACTCCGGTCCTCCTAGCCTCCAAAGGAGAGAGTGGGGGCGCCAGACCTGCCTCGGGCCACCCTGCTGGGAATCGCCCTCCAGGAAGCAATTTTGAAAATTACCTAGGAAGCCTGCACCCCCAGCCCTCCCGGGCGCATCATCTGGAGCCCAGCAGTCACCTTTACCAGGACTCACCAGTATCCGCAGGCAGCCCTTGTGGCAAACCCACCAACCCACACTACTAGGGGTAGAGTGGCTCTGCCCTCACCTCACAGTGATGCCTGCCTGGCCAGGAAAAGTGGCTCCCAAGCCTTCAGCCTTCCAACTCTTCCTTCCTTCTTACCACGTGTCCTCCTGTCAGGTCCCACCCCACACCACATCCCTTCTCCTGCTAGAGCAATTGTCCCTGTTTATAGAATAAAGCTCAGCCCCTAAGTGTTCTTGTCCTTGACTGTGGCATGTGGAAAGAGCCAGGAAAAAGGGGACGTCGCCTCGTGGCTCCAGCAACCCTGGTGCCTGGTCCCTTCCTGTCTCACTGGACCCTGCCTCTTAGGGTCAGTGGCTCCTGGCCTCTCCTCCTGACCACTGAGATGCTGGATTCCCAGGCAGAGGTTTTCCTTCCTTGGGCCATAGTTGATTTATCTGGCAATGGGGGTAATAATAGCTGTCGGCCTCACTCTGTAAGGCACTAGATTATGAGGCCATTGCTTTGGACCCTTCAGGTGAGAGGGGCTGTTCGCCTGATGCTTGATGAAGGGAACTCCGGGAAGCAGGAGGTCTGGGTTCCAGGCCCTTTTGGCCTTCATTAGCTAGCAATTCACTTCCTCTTTCTCAATGCCCTGCAAGCTCAGTGCCCTGCAAGCTTCTGGGTCATGGCAGGGGGGTAGGGCCTGGACTTTGGAGCCAAACAGACTTGGTTTCTGTACCAGTCACTTGAGCCCTTTAAACCTCTTTCCTCATTTGTGAAATAGGGGTAATATTGCCCACCTCATAAAAGGCCGTAATAACATATGTGAAATCCCTAGCA
CAGGGCTGAGCAACAGTAGGTGCTCAATAAATGGTGGCTAACCACAACAATACTGATATTTCTACTTTGGGAGGCCGAGGCGGGAGGACTGCTGAAGCCCAGGAATTCCAGACCAGCCAGGGCAATGTAATGAGACCCTGTCTCTACAAAAAGATTTTGAAAATTACCCAGGTGTGGTGGCGTACACCTGTAGTCTCACAGGAGGCGGAGGCATGAGGATTGCTTGAGCCCAGGAGTTTGAGACTGCAGTGAGCATGATCTCACCACTGCACTCCAGCCCAGGCAACAGAGTGAGATCCAGTTTCAAAAAAATAAAAATAAAAAAACCTGGCAGGCATGGTGGCTCACACCTGTAATCCCAGCACTTTGGGAGGTCGAGGTGGGCAGATCACCTGAGGTCAGGAGTTTGAGACCAGCCTGGCCAACATGGTGAAACCCCGTCTCTACTAAAAATGCAAAAATTAGCTGGGTGTAGTGGTGGGTGCCTGTAGTCCCAGCTATTCGGGAGGCTGAGGCAGGAGAATCGCTTGAACTCGGGAGGCGGAGGTTGCAGTGAGCTGAGATCGCACCACTGCACTCCAGCCTGGGCGACAAAGCAAGACTCCACCTCAAAAAAAGAAAAAAAACCCACAAGTCCCAAAACCAAAACTGGTATTTCCCATGTACATTCGACCTTAACTGTTGCTCATTCAACCCAGCCCAACTCAGTGCCCCATCCCCTGGCCCTGAAGAGACCATTCTGGCCCAGATGTGTCCTGGCTTGGAGTAGCACCTTCTGCTACCACACTAGGCCTCCACTCTCCTCAGTGCCCAAGGGGAGGCACCTCACTCTGATCTCCCTGTGGGGTCCTCTTATGCCTGCCAGTAAGGATAGGAGTTTGGTTCTAGAGCAGAGTGGTCTGGCTTCCAACAAGCCCAGTGTTCTAGGTGACCTCAGGTTGCCCCAGGCCTTCCTGTAGGTTGGCACTAATTGGTTTGGCTGCAGCTCCACTTATTAAGTAGTTATTTTTATTACTAACAACCTAGGCAGGGTGGCCCAGGAGCCCGCTGGGGGAGGCGGTGCCAGGCTCCTGGCTGAGGGGCAGGCTGGCCCCAATTCTGACTGGCTGGCTCCAGTGATCAGGACCAGGGCCCCACGTGGTGCTTTGCTGGAGATCTAGGCTTGGTGGGGCAGCTGTGGGGTAAGGGGCAGGACCAGCTCAAAGATGGGGTGGGGGCGGAGGCTGCCTCTGCAGGGCAGAGTCCTTTGGCAGTCGGGACTGTTGGGCATAGAGGAGTCAGCTCACAGCTCAGGGCCAGAGCACTGGAGAGGTCTCTGGGGTGCATACAGGAACCAGGAGTGGAGCTGAAGCATGTCCTATCCCCTGCCAGCCCTCCCTTAGTAACAGCTGGCATTTCTCGAGTCCTTCCTGAGCACCAGGCACCGTGTTATGTATGCAATTTGCAAATATTATCTGATTAAATGCTCACAATAAGGCTATCAGAGAGGTACTATTATTATCCTTATCTTATTATTATTATTATTATTATTTTTAAGAAGGAGTCTTGCTCTGTCGCCCAAGCTGGAGTACAATGGCGCCATCTCTGCTCACCGCAACCTCTACCTCCAGGATTCAAGTGATTCTCCTGCTTCAGACTCCCAAGTGGCTGGGACTACAGCTTCCTGCCACCGCGCCTGGCTAATGTTTATATTTTTAGTACAGATGAGGTTTCACCATGTTGGCCAGGCTGATCTCGAACTCCTGACCTCAAGCGATCCACCTGCCTGGGCCTCCCAACCCTGAGGGTTTTTGTTTTTGTTTTTGTTTTGAGACAGAGTCTTGCTCTGTCGCCCAGGCTGGAGTGCAGTGGCACGATCTCAGCTCACTGCAAGCTCCGCCTCCCGGGTTCACGCCATTCTCCTGCCTCAGCCTCCCAAGTAGCTGGGACTACAGGCGCCCAACACCCCCATGCCTGGCTAATTTTTTTGTGTGTGTTTTCAGTAGAGACGGAGTTTCACCATGTTAGCCAGGATGGTCTCCATCTCCTGACCTCGTGATCTGCCCACCTCAGCCTCCCAAAGTGCTAGGATTATAGGTGTGAGCCACCACGCCCAGCCCCTGAGGTTTAATAATAGGTGCCAGGCCAGGTGGTTAATAGAAGTCTGGGGCATTGTAGGGGGACAGAGGAGGATATATGTCCCCATTGGCCATTGTAGACTCCCTTCCACAAAAAGGACGTCAGTGAAGTGACATGCCCACCTCTACCCCACCCTCCTCCCAGTCCTGGGCACTAGGGCTGCTCCCCAGGTGTTCTGTACCCCCTCCCCACTCTGTCCCATGCCCTGGCCTCTGCCCTCTTTCAAAACATAGATGTGGCTGGCGCCTAGGCTCATGCCTATAATCTCAGCACTTTGGGAAGCTGAGGCTGGAGGACAGCTTGAGCCCAGGAATTCAAGACCAGCCTGGGCAACATAGTGAGACCCTGTCTCTACCAATTATTTTATTTTATTTTATTTTGTTCATTTATTTATTTATTTTGAGACAGAGTTTTGCTCTGTCACCTAGGCTGGAGTGCAGTGGCGTGATCTTGGCTCACTGCAACCTCCGCCTCCCGGGTTCAAGCGATTCTCCTGCCTCAGCCTCCTAAGTAGCTGGAACTACAGGCGAGTGCCACCACGCCTGGCTAATTTTTGTATTTTTAGTAGAGACCAGGTTTCACCATGTTGACCAGGATGGTCTCTGTCTCCTGACCTCATGATCCACCCACCTTAGCCTTCCAAAATGCTGGGATTACAGGCATGAGCCACCACTCCCAGTCCTATAAAATTTTAAAAAAATGTCTGGGTGTGGTGGCGCATGCTTGTAGTCCCAACTATTGGGGAGGCTGAGGCAAGAGGATTGGTTGAGACCAGGAGTTTGAGGCTGCAGTGAGCTATGATGGTGCCACCGCACTCCAACCTGGGTAACAAAGTGAGACCCTGTGTCTAAAAAAGAATTTAAAGGCCGGGTGTGGTGGCTCACACCCGTAATCCCAGGACTTTGGGAGGCCGAGGTGGGCAGATCACGAGGTCAGATTAAGACCATCCTGGCTAACAAGGTGAAACCACGTCTCTACTGAAAAAAAAAAATACAAAAAATTAGCCAGGCATGGTGGTGGGCACCTGTAGTC
CCAGCTACTCAGGAGGCTGAGGCAGGAGAATGGCGTGAATCTGGGAGGTGGAGCTTGCAGTGAGCCAAGATCCTGCCACTGCACTCCAGCCTGGGTGACAAAGAGAGACTCCATCTCAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAGAATTAAAAAAGATTTTTTTAATGAACAAAACAGGCTCGGCACAGTGGCTCATGCCTGTAATCCCAAGCACTTCGGGATGCCAAGGTCAGGGGATCACCTGAGATCAGGAGTTCGAGACCAGCCTGACCAACATGGTGAAACCCCGTCTCTACTAAAAATATAAAACTCAGCCAGGTGTGGTGGCACACGCCTGAAATTCCAGCTACTCGGG
AGGCTGAGGCAGGAAAATTGGCTTGAAGCCGGGAGGTGGAGGTTGCAGTGAGCCGAGATCACGCCACTGCACTCCAGCCTAGGCAACAGAGTGAGACTCTATCTCAAAGAAAACGAACAAAACATAGATGCCTACATACCATTCCTCTGCCCTTGGCTCCTGGGGAGTAAGGGATCACCCAGTGACCTCCTAGAAGGCCAGTGACAATGGGGGGTGTCAGGGTGCTTTTCAGAGCCAAGGGAGTGGTAGGAATTGGGATCTTAGTCCAGCTCCAAGCTGTGAGGGAGAGAGTTGCAGGGCACTTAAGCTTGGTGGAGACCCTCAAGGCCTCTTTGCCTGTCCCTGCAGCAAAGGTTCTGGACACCAGAGCCAAGTCCAGAAGCCCTGGTGGAACAGGGGTGAAAAGCATAGGTTCTGACTTCAGACTGCTGGGCCGCAGCCCTGGCTATCCCACCCCAGGTGAGAGCAGGCTGCTCTGTGCCTCAGTTTCCCCATCTTCATAGTGGAATTGTATTGGTGCCTACCCAGAGGGTTGTGTCAACAATTAGGATGGCACCTAGCACCTTGGTCAGTGGTGGGAAAGGTTCCAGAAGTTCTGCTGTGGTCCCAGGGGTGTCTCAGGCCCTGCCATCATCTCCTTGGAGGGGTGCCATGTGGTGGGAAAGAACCCCAACTTCAAGGCCACACACAGTGGCTCATGCCTGTAATCCTAGCACTTTCAGAGGCCAAGATGGGAGGATCACCTGAGGTCAGGAGTTCAAGACCAGCCTGGCCAACATGGTGAAACCCCATCTCTACTAATGATACAAAAATTAGCTGGGTGTGGTGGCACGTGCCTGTAATCCCAGCTACTTGGGAGTCTGAGGCAGGAGAATCTCTTGAACCTGGGAGGCAGAGTTTGCAGTGAGCTGAGATGGCACCACTGTACTCCAGCCTGGCCGACAAAGTGAGACTCTGTCTCAAAAAAAAAAAAAAAGAACCCAAACTTTTGGTGTTCAGCCATGTTCCCATGCTCACTCCCAGGGTGGTGACTCTGGGAAGGTCTCAGCCTCCTTGTCTGCCCAGTTAGAATGATCTGATGCCCCTGCTACCATCAGACTTGATAAGTTTCCCAAAGACTCTTTGCAAGAAGCACTGTTCTGGAGGGTGGAGGAGAGACTAATTGTTCTTGCTCTCCTGGCCAGAGTGGGAAGCTTTGGGGTGGCCGGTTTGTGGGTGCAGTGGACCCCATCATGGAGAAGTTCAACGCGTCCATTGCCTACGACCGGCACCTTTGGGAGGTGGATGTTCAAGGCAGCAAAGCCTACAGCAGGGGCCTGGAGAAGGCAGGGCTCCTCACCAAGGCCGAGATGGACCAGATACTCCATGGCCTAGACAAGGTACTTGCCGTGGCCCAAGCCCCACCCAAGGCCCCTTCCCTGTGGCCCCAGGCTCCCACCAAATCCCTGAGCAAACAGTGCAGTGTTGCCCATCTGTGGTTTCACATTGAACTAATTATATACTCAAGTGCTGTTTAACTGTGTGCCTTGATGACTGCCTCTCTCCATCCTTTAATGACCCCTGTGGCCCACATGGCTCATGGGTAAAGGTGTGCTGGGCCTGAGATGCCCCCTCCCAGGGTGCGCTTCCAGGACTCAGCTCCTGGGCAGGGACAGTCAGTCACCAGGGATAGGGTGGGACCAAGGCAGGGGCTCTCTTGGCTGCTGATGCCTGCTCACCTGACCCCGGCATTGCTGCTACCCACTACAGGTGGCTGAGGAGTGGGCCCAGGGCACCTTCAAACTGAACTCCAATGATGAGGACATCCACACAGCCAATGAGCGCCGCCTGAAGGTACGACCCCTGGAGCCCCACCGCTTTCCTTGCCTCCCCTCTCCACCTTGCCCAGGGCCACTTTGAGCATTAGCACCATTCTGTTTACTTCGCCATTGGCAGACAGCATGTGAGACCTCAGGACATGAGCCAGGCACCCTGGCTCATGCCTATAATCCTAGCACTTTGGGAGGCTGAGGTGGGAGGATTGCTTGAGACCAGGAGTTCGAGACCAGCCTGGGCAACATAATGAGGTCCCACAGCTACAAAAATTAAAAAAAGAAAAGAAAAAAAGAACAGGCCTCAGCAGAAATGGCGAGAGATTTGGGGAGGACCCGGAGCCCTGGGGTATGGAGGTAGGTTGGCAGGGCTGATGAGGAAAACTGCCCTGCCTGGGTTGACTCCTCTGGGGGTATAGACCGTGACCCTGGGTCTCCCTTCACCTCCAGGAGCTCATTGGTGCAACGGCAGGGAAGCTGCACACGGGACGGAGCCGGAATGACCAGGTGCTTTAGCCCCTCCACCCCCTGCTCCGTGTTGTCCCAACCTTGAGGAGCCCAGGGGGCAGTTAGAGTTCTGCAGCGGTCCTGGCTCCTCAGGGAAGCAACACATCGGCCTCCCTGAGCACCATCTCCTCCTTGCACAGGTGGTCACAGACCTCAGGCTGTGGATGCGGCAGACCTGCTCCACGCTCTCGGGCCTCCTCTGGGAGCTCATTAGGACCATGGTGGATCGGGCAGAGGCGTGAGTCCTACAGGGACACCCAGGGGGCAGACAGAGGTGTGATGGAAGCCTGAACAGGAGACCTAGGGGGCAGGGGTGAACAGCGTGGGGGTGCCAGGCCCTGGGGGACAGGGGCATCCCAGAACTCCAGGATCGAGGCAGAGCAGCCAGGAGTGGGCCATTTCCTGCAGGCCCCAATACTCCCATGCCAGTCTAGCTCAGCAGGCAGAGAAGACTAACCCTTCGTGGGGCTGGGTGCGGTGGCTCACGCCTGTAATCTCAGCACTTTGGGAGGCCGAGGTGGGTGGATCACCTGAGGTCAGGAGTTCGAGACCAGCCTGGCCAACATGGGAAAACTCTGTCTCTACTAAAAATACAAAAATTAGGCAATGTGGTGGTGTGCGCCTGTAATCCCAGCTACTCGGGAGCCTGAGGCAGAAGAACTGCTTGAACCCGGGAGGAGGAGGTTGCAATGAGCCGAGATCGCGCCATTGCACTCCAGCCTGGGCTACAGAGCGAGACTCCTGTCTCAAAAAAAAAGAAAAAAAAAAAAGAAAACTCACCATTTGCAGATTTGAAGGCAGGAAGCTAAGCCAAGCACAGCTAGCTTGGCTGTGCCTGGAGCAGCCAGAGTCACTCCCCACACTGCCTGTCCCCCAGATCCCCCATCCTAAGCTTCGCCTCCCCATCCAGCCCATCTGGCAAAAGACAGAGCCAAAGGCTGCCTCCTGCTGGCCTCATTTCAGGCTTTGGCTTCTGGGACCTGGTGTCTTTGGGACTGGATTTGTTCCTTGCAGACCTGGACGAAGAGCTGCTGAGAAGTCTCCATGTGTTGTCAGAGACCCCTCCTCTTCCTCAACTCCCTGTGACCCCTGTTGTGCAGACTTGGGGGAAAACAAGGGCACAAGAATTGTCACCCAGCAGGTGGTGTGGGGCTGCTAGGAGGAACAGGGAGTGTCTGCTACTGAGTTCAGGGTTTCTTTAATTTTTTGTTGTTGTTGTTTGTTGTTGTTTTTTTTTTTTTGAGACAGGGTTTTGCTCTGTCACCTAGTCTGGAGTGTAGTGGCGCTATCTGAGCTAACTGCAAACTCTGCCTCCTGGGTTCAAGTGATTCTAGTGCCTCAGCCTCCCAAGTAGCTGAGATTACAGGTGTGCACCACCATGTCCAGCTAATTTTTGTATTTTTTTCAGTAGAGATGGGTTTTGCCATGTTGACCAGGCTGGTCTTGAACTCCTGAGCTCAGGTGATCTGCCCGCGTCGGCCTGCCAAAGTGCTAGGATTACACCCATAAGCCACTGCGCTCAGCTTAATTTTTAAATTTTTAACTTTTTAAATTGTCTTTAGAGATGAGATCCTGCTCTGTCACCTAGGCTGGAGTGCAATGGCTTGGTAATAGCTCACTGCAGTCTCAAACTCCTGGACTCAAATGATCCTCCCACCTCAGCTTTCTGAGTAGCTAGGACCACAGGTGTGCACCACCTGTGAGACAGAGTCTTGCTCTGTTGCCCAGGCTGGAGTGCAGTGGCGTGATCTCCACTCACTGCAACCTCTGCCTCCCAGGTTCACGCCATTCTCCTGCCTCAGCCTCCCGAGT
AGCTGGGAGTACAGGTGCCCACCACCACGCCCGGCTAATTTTTTGTATTTTTAGTAGAGACGGGGTTTCACCATGTTAGCCAGGATGGTCTCAATCTCCCGACCTCATGATCCACCCACCTCGGACTCTCAAAGTGCTGGGATTACAGGTGTGAGCCACCGTGCCCAGCCGCGAATTCTTTAAATTTTTTGTAGAAACAGGGTCTCACTATGTGGCTCAGGCTGGTCTCAAACTCCCGGCCTTAAGTGATCCTTCCCTCTTGGCCTCCCAAAGTGCTGGGATTAAAGACTTGAGCCACCGTGCCTGGCCTTGAGTACAGAATTTCTTCATGGGGTGATGAAAATGTTCTAAAATTGGTTGTGGTGATGGTTGTACAGTAAAGTGTAAACTTTAAATGAGTAAATTGTGAATGATATCTCAGTAAAGCTGGTTTATTTAAAACAACAGGCCAGGTGCTGTGGCTCACGCCTGTAATCCCAGCACTTTGGAAGGCTGAGGCGGGTGAATCACCTGAGGTCAAGAGTTCGAGACCAGCCTGGCCAACATGGTGAAACCCCATCTCTACTAAAAATACACAAAATTAGCTGGGTGTGATGGTGGGCACCTGTAGTCCCAGCTACTTGGGAGGCAGGAGAATCTCTTGGACCTGGGAGGTGGAGGTTGTAGTGAGCCGAGATCACGCCACTGCATTCCAGCCTGGGCAACAAGAGCGAAACTCTTTCTCAAAAACAACAACAACAAAAAAACAGGCCAGGTATGGTGGCTCATATCTGTAATCCCAGCCCTTTGGGAGGCCAAGGCAGGAGGACTGCCTGAAACCAGGAGTTTCAGACCACTCTGGGCAACATAGCAAGACCCCATCTTTTTTTTTTTTTTTGAGACGGAGTCTCGCTCTGTCGCCCAGGCTGAAGTGCAATGGTGCAATCTCAACTCACTGCAAGCTCTGCCTCCTGGGTTCATGCCATTCTCCTGCCTCAGCCCTCCTGAGTAGCTGGAACTACAGGCGCCCACCACTACGCCCGGCTAATTTTTTGTATTTTTAGTATAGATGGGGTTTCACCGTGTTAGCCAGGATGGTCTCGATCTCCTGACCTTGTGATCTGCCCGCCTCGGCCTCCCAAAGTGCTGGGATTACAGGCGTGAGTTACCGCGCCTGGCCACAAGACCCCATCTTTACAAAAAACTAAAAATTAGCTGGGCATGGTGGCATGTCCCTTTAGTCCCAGCTACTCAGGAGGCTGAGACAGGAGGATCGCTTGAGCCCAGGAGATCGAGGCAGCAGTGAGCTATGATCATGCCACTGCACTCCAGTCTGGGCAACAGAACGAGACCTTGTCTCTAAAAATAAAAACAAAACAAAACAACAAGAAAACAGGACCATCACTCACAGCACCTCTGCCTCTGCCCTGCCTACTTGAATGAGGTGCAGGGCATCTCACCTGCTCAGAGCAGCCCTTGAATGAGCCCCAGCTATTTCTAGGGTCCTCAAACGAAACCTCCCACGGCCAAGTCATACCCAACATGGGCCTCCTCCCCTATTCTGGCCCCTGCTCGGAGATGCTGAGTGACAGAGGCTGGACTTGGGGTGTTTCTGGCAAAGCCTCACTGCAGGAAGCCCCACAGCTCAGGCCCAGTCCTTGGTTCACACGGTCCCACTTCCAGCTTCTTTTGCCCTTAAGACTGATTTGTCCCTGGGAGATCACCAGATCCCTCATTCAGGTGGAGTGCTGCAGCGTGACACTTTTTCCAGGGGTGACCCAGGCCTGCAGGGTTCCAGTGTCACAGGCAGGCCTTGCATGAGCCTCCACCCGAGCTTCTGCTCCTCCTCTCCCACAGGGAACGTGATGTTCTCTTCCCGGGGTACACCCATTTGCAGAGGGCCCAGCCCATCCGCTGGAGCCACTGGATTCTGAGGTGAGCCAGGTGAGGTGCAGGGGCTGTGCTAGAGGGGAGGACCCCGGCTGCCCTGACCCTCCTGCCCCTGGCTTCCCACAGCCACGCCGTGGCACTGACCCGAGACTCTGAGCGGCTGCTGGAGGTGCGGAAGCGGATCAATGTCCTGCCCCTGGGGAGGTGGGTGAGGCTCCAGTGCCCCGAGGGCCTGGTGGGGGTGGCTGCTGCATAGCCTTAGGGATTGACAGAGCTGGGAAGTGCAGAGTGGGACAGAAAACCGCCTTATCTGCTCAGCGGGGGACTCTGCATGGAGCCCCAGCTCTCGCTAAGGTGACGACCAAGCCATTGAATGTGTCTGAGCAGGGCCAGAGCCCTCCAGCAAGGCTCCTGGCAAGCCCAGCCTGCTGCCCTCAGCCTGACATGTGGGAACATGTGTCAGGAGACAAGTGTCCTGCACCCAGGGTGACTTAGTGCTTGGGGACAAGTGTTTTGTGGACACTTGGGGACAAGTATTCTGTACCCAAGGAGACTGGGCCAGGGAAGAGGCTAAGCGCCAGGTGGTTGCCCTGGCAACCAGGACTTGGTTCTCTGTGTGTGCGTTCGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTCAGGGCTGCCTGCCAGGAGCCCTGGTCACCATGAATCCCTGTCCCTGCAGTGGGGCCATTGCAGGCAATCCCCTGGGTGTGGACCGAGAGCTGCTCCGAGCAGGTGAGACGTCCTGCCCCTCCTCCCCAGGGAGAATCACCCTCAGCACCCGCCAAGACCTGCAGACACACCTGAAACCAGAGGGCAGGGGCCTGTGGCTCCTGGTGAAACCTTCATTCATTGCCTATGGGCACTGAGGTCATCAAGTTCAGGGGTCACTCATGGCAGGGATGCCTGGTACTGAGAGACTCAGGGCTCCTGCCTCCCTCCTGGGACTGTGCAAAAGATCCCTCCCCCCAGCTGTTGCCCCACCCTGATCAGGGGAGGGGGCTGGGCAACCTAGTTGGGGGAGAGGGGGCCACTCCCTGTCCTCCAGCTTAGCCCTGCTTCCTCCCACCCCCCCAGAACTCAACTTTGGGGCCATCACTCTCAACAGCATGGATGCCACTAGTGAGCGGGACTTTGTGGGTGAGTCCTGGGGAGCCAGTCCCCTGCCCTGTGCCTCACTTTAGTCCTTCAGCCCAGCTTCTCTCCAGTTTCCTCCCACACCTCCACGGACAGGCTGGTTGTGGTGATATTGTACACTGAAGTATAAACCTTAAATGGGTAAAGTGGGTGGGGCATGGTGGTTCACCATGCCCAGCACTGGCCAACATGGTGAAACCCCATCTCTACTAAGAATACAAAATTTAGCTGGGTGTGTGGTGGCAGGTGCCTGTAATCCCAGCTACTCAGGAGTTCTGAGGCCAGAGAATCACTTGAACCCAGGAGGCGGAGGCTGCAGTGAGCCAAGATCACGCCAGTGCACTCCAGCCTGGGCAACAAGAGCGAAACTCCATCTCAAAAAATAAAATAAAATAAAATAAAAATAAATAGGCCAGGCATGGTGGCTCACGCCCGTAATCCTAGCACTTTGGGAGTCCGAGGCAGGTGGATCACATGAGGTCAGGAGTTTAAGACCAGCCTGGCCAACATGGTGAAACCCCATCTCTACTAAAAGCACAAAAATTAGCTGGGCATGGTGGTGCATGCCTGTAATCCCAGCTACTCGGGAGGCTAAGGAAGGAGATTCGCTGGAACCTGGGAGGTAGAGGTTGCAGTGAGCCAAGATTGTGCCACTGTACTCCAGCCTGTGCATTGGGAGCGAGACTCCATCTCAATAAATAAATAAATAAATAAATGGATAAATTGTATGTGAGTGATAACTCAGTAAAGCTGGTTTATTTAAAACAACAACAATAACAAAAAACACGCTAGGTGCAATGGCTTACGTTTGTAATCCTAGCACTTTGGGAGGCCAAAGCAGAAGGATTGCTTGAGCCCACAAGTTTCAGAACAGCTTGGGCGACATAGCACGACCCCATCTTTGCGAAAAATGAAAATTTAGCCGGGTCCCCCCACCGCCTAACCTCCTCCTGCCCCCTGTATGGTCAGGCTGGGTGGGGATGGGAGAGGCCTGGTGACTGGGAACCTTTTCTCCCAGCCGAGTTCCTGTTCTGGGCTTCGCTGTGCATGACCCATCTCAGCAGGATGGCCGAGGACCTCATCCTCTACTGCACCAAGGAATTCAGCTTCGTGCAGCTCTCAGATGCCTACAGGTAAGCCCTGAACTGCCACCTCCATCTGCCGCTGCCGGCCTCTGTATCCCCCGCCGCCCGCGGACGTGGCTGCCTTCCTCCCCGTCCCACCCCTCCGCCAGACCTGGCCATTGCGGCGCTGGACCAGCCAAGGGTCCAGCCCCTTCAGCGCCAGCACCTCTGTCCCCAGCACGGGAAGCAGCCTGATGCCCCAGAAGAAAAACCCCGACAGTTTGGAGCTGATCCGGAGCAAGGCTGGGCGTGTGTTTGGGCGGGTGAGCAAGGCAGGGGGAGGGGCGGGGCCTCTGGGCTGATGGTGGGTGGCCAGGGGGGCAGGATCCCGGGTCCAGCCCCTGTGCCTCCCTCTTCCCGCAGTGTGCCGGGCTCCTGATGACCCTCAAGGGACTTCCCAGCACCTACAACAAAGACTTACAGGTGCGAGGCCGGGGGAGGCCTGGCTAGTACGTGCCAGTTCTCAGGGCTCTGGCACACTCAGGCAGGGCCCCACCCCGGGATTGCCATACATCCTCCCATCCTGTGCACACAGCTCCATCCGTGGCTGCCCTTGAACTCTCTGCCCTTCCTTTGTTGGGGTATTGAGTGTTCTTCCCATGGAAGGCAGTGGGGATGCCTCAGTGGGGGGGTGGGGCTGTGGGGACCCTGGGTGCCAGGGGGCTGCTAGGCCCTCACCTCCTGCCATGTGCCTCCCAGGAGGACAAGGAAGCTGTGTTTGAAGTGTCAGACACTATGAGTGCCGTGCTCCAGGTGGCCACTGGCGTCATCTCTACGCTGCAGGCAAGACATCACCCCCCTGCTTCTCCTCCCCTAGGTCCCAGGCACTGGGGTGG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配列番号31 ODC1をコードするDNA配列
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CCACCAGCTCCGCGCGGGCCCGGGTTGGCCACCGCCGGGCCCCCGCCCCTCCCCCGGCGGTGTCCCGGCC
GGAACCGATCGTGGCTGGTTTGAGCTGGTGCGTCTCCATGGCGACCCGCCGGTGCTATAAGTAGGGAGCG
GCGTGCCGTGGGGCTTTGTCAGTCCCTCCTGTAGCCGCCGCCGCCGCCGCCCGCCGCCCCTCTGCCAGCA
GCTCCGGCGCCACCTCGGGCCGGCGTCTCCGGCGGGCGGGAGCCAGGCGCTGACGGGCGCGGCGGGGGCG
GCCGAGCGCTCCTGCGGCTGCGACTCAGGCTCCGGCGTCTGCGCTTCCCCATGGGGCTGGCCTGCGGCGC
CTGGGCGCTCTGAGGTGAGGGACTCCCCGGCCGCGGAGGAAGGGAGGGAGCGAGGGCGGGAGCCGGGGCG
GGCTGCGGGCCCCGGGCCCCGGGCACGTGTGCGGCGCGCCTCGCCGGCCTGCGGAGACACGTGGTCGCCG
AGCGGGCCACGACCTTGAGGCGCCGCTTCCTCCCGGCCCGGGGTTCTCCCGCGGCTGGATAAGGGTGATC
CGGGCGCCTCGTTCTGCCCCCGTCTTCACAGCTCGGGGCTGGAGGGGCCTAGGGGAGACCCACCCGGAGA
CCCTGCGGCCCCGCGCCGGCCTCTTTCCCAACCCTTCGGCGGCCGCGCGCTGGCCGGGGAGCCGTTGGGG
AGGCCCTGGCGGCCGCGCAGCAGGTGCAGGGGCGCAGAGCCCGGGCTCGCCTTGGTACAGACGAGCGGGC
CCCGGCCTTGGCGCCTTCAGTTTCCTTCCAGTTTTTATTTTCGCTGTGTCTACAGAGCAGATGACACCAA
TTTGGAAACCCGCGAGAGTGGGTAGAGCTAAGATAGTCTTGCTGTAGTAGCTGTGATATTAGATGCTCGG
CCATGACTTAGAGGTGTTTATTTAAGGACTGTGAATGACTCGGTGATTTCGGAAAAGCTTGGCTTAGATG
AACGGACATACACAGGGGAGACAGCCCTAAGGTTTGCAGAAAAGGCTGATTGTGCTGTTTGCGAAGTCGA
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GACTTTGTTTAAACATAAAATTGGGCAGACTTTAATTGATTTGTGAAATTTTTTTCAAAGTTTGTTTGAA
TTAGCCCCTATCTCTTCTAACATTATCCTCTTGTGCTAATTGATTGACCATTTTAAATAACTTAGCTGTT
ACAGAAAGACCGAAAGGTGTTCTTCAGTAAAATATATTCAAGTAAGTTACTTAAGTAACGCCTTAAAAGA
TACAGAAAAGCAAAAAAGTATTGGCGTATTAAAAAGAAATCAAAACTTTCCAAGTTTAGGCCTGAACATT
GCCTTAAAAATATTTAATAAGGCCTCAAATGACCCAGTCCGAGACTGCATGAGCCTATTTATTATTAAAT
TGTAAATATTCTTCATATAAACAAAAATATATAACCATGTCTGTAACAAAAATGGTTTTGCTAGCGTTGT
TACTCTCTTCCCTTCTCCGAGGGGTGATTTAGGCAACTTCGGAGGTTGACAATGCCAAGCAGTCACAATA
GATAGAGCTTTAAAGCAAATTCTATGCATGGGTTTGGATTTATGACAGGCCCGTCACCCTGGGCCTGTCA
TAGTACCCCATGCCAGAGCAAACTGTGTCCCCGAACCATTGCCTGGCCTCTGTGCCCGTAGGCTGCTGGC
ACTGAAGTGGGTTGCACAGTGGAAAAGAAGAAAGCTCTACCTGGCAGAAATTTTTAAAGGTTAAAATAAA
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AATTCCAGAACCCCGACTTCCCACCCGAAGTAGAGGAACAGGATGCCAGCACCCTGCCTGTGTCTTGTGC
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ACGCTACTCAAGAGTGCCCCTCAGCTGCTGAACAAGCATTTGTAGCTTGTACAATGGCAGAATGGGCCAA
AAGCTTAGTGTTGTGACCTGTTTTTAAAATAAAGTATCTTGAAATAATTAGGCATTGGGACGTT
配列番号32 ArgGをコードするDNA配列
>NC_000913.3:3318637−3319980大腸菌(Escherichia coli)K−12株MG1655亜株、完全ゲノム
ATGACGACGATTCTCAAGCATCTCCCGGTAGGTCAACGTATTGGTATCGCTTTTTCTGGCGGTCTGGACA
CCAGTGCCGCACTGCTGTGGATGCGACAAAAGGGAGCGGTTCCTTATGCATATACTGCAAACCTGGGCCA
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ACAAAGGCCAGTAA
配列番号33 ArgHをコードするDNA配列
>NC_000913.3:4156850−4158223大腸菌K−12株MG1655亜株、完全ゲノム
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配列番号34 ArgFをコードするDNA配列
>NC_000913.3:c290305−289301大腸菌K−12株MG1655亜株、完全ゲノム
ATGTCCGATTTATACAAAAAACACTTTCTGAAACTGCTCGACTTTACCCCTGCACAGTTCACTTCTCTGCTGACCCTTGCCGCACAGCTCAAAGCCGATAAAAAAAATGGCAAGGAAGTACAGAAGCTTACCGGTAAAAACATCGCGCTCATCTTCGAAAAAGACTCGACTCGTACCCGTTGCTCTTTCGAAGTTGCCGCATTTGACCAGGGCGCGCGCGTTACCTATTTAGGGCCGAGCGGCAGCCAGATTGGGCATAAAGAGTCAATTAAGGACACCGCGCGGGTTCTCGGGCGGATGTATGACGGCATTCAGTATCGCGGTCACGGCCAGGAAGTGGTCGAAACGCT
GGCGCAGTATGCGGGCGTGCCGGTGTGGAACGGGCTGACCAACGAGTTCCACCCGACCCAGCTGCTGGCGGACCTGATGACCATGCAGGAGCACCTGCCGGGCAAGGCGTTTAACGAGATGACGCTGGTCTACGCGGGCGATGCGCGCAACAACATGGGCAACTCGATGCTGGAAGCGGCGGCGCTGACCGGGCTGGATCTGCGCCTGTTGGCCCCGAAAGCCTGCTGGCCGGAAGAGAGCCTGGTGGCGGAGTGCAGCGCGCTGGCGGAGAAGCACGGCGGGAAAATTACTCTGACGGAAGACGTGGCGGCAGGCGTTAAGGGCGCGGACTTTATCTATACCGACGTGTGGGTGTCGATGGGCGAGGCCAAAGAGAAGTGGGCAGAGCGGATTGCGCTGCTGCGCGGGTATCAGGTGAACGCGCAGATGATGGCGCTGACCGACAACCCGAACGTGAAGTTCCTGCACTGTCTGCCGGCGTTCCATGACGACCAGACTACGCTCGGCAAGCAGATGGCGAAGGAGTTCGATCTGCACGGCGGGATGGAGGTGACGGACGAGGTGTTTGAGTCGGCGGCGAGCATCGTGTTCGACCAGGCGGAAAACCGGATGCATACGATTAAGGCGGTGATGATGGCAACGCTTGGGGAGTGA
配列番号35 Trp5をコードするDNA配列
>NC_001139.9:c448535−446412出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)S288c染色体VII、完全配列
ATGTCAGAACAACTCAGACAAACATTTGCTAACGCTAAAAAAGAAAACAGGAACGCCTTGGTCACATTTATGACCGCAGGTTACCCAACAGTCAAAGACACTGTCCCTATTCTCAAGGGTTTCCAGGATGGTGGTGTAGATATCATCGAATTGGGTATGCCCTTCTCTGATCCAATTGCAGATGGTCCTACAATTCAATTATCTAATACTGTGGCTTTGCAAAACGGTGTTACCTTGCCTCAAACTCTAGAAATGGTCTCCCAAGCTAGAAATGAAGGTGTTACCGTACCCATAATCCTAATGGGTTACTATAACCCTATTCTAAACTACGGTGAAGAAAGATTTATTCAGGACGCTGCCAAGGCTGGTGCTAATGGTTTTATCATCGTCGATTTGCCACCAGAGGAGGCGTTGAAGGTCAGAAACTACATCAATGATAATGGTTTGAGCCTGATCCCACTAGTGGCTCCTTCTACCACCGACGAAAGATTGGAATTACTATCGCATATTGCCGATTCGTTTGTCTACGTTGTGTCTAGAATGGGTACTACTGGTGTTCAAAGTTCTGTGGCCAGTGATTTGGATGAACTCATCTCTAGAGTCAGAAAGTACACCAAGGATACTCCTTTGGCCGTTGGGTTTGGTGTCTCTACCAGAGAACATTTCCAATCAGTTGGTAGTGTTGCTGACGGTGTAGTGATTGGTTCCAAAATCGTCACATTATGTGGAGATGCTCCAGAGGGCAAAAGGTACGACGTTGCTAAGGAATATGTACAGGGAATTCTAAATGGTGCTAAGCATAAGGTTCTGTCCAAGGACGAATTCTTTGCCTTTCAAAAAGAGTCCTTGAAGTCCGCAAACGTTAAGAAGGAAATACTGGACGAATTTGATGAAAATCACAAGCACCCAATTAGATTTGGGGACTTTGGTGGTCAGTATGTCCCAGAAGCTCTTCATGCATGTCTAAGAGAGTTGGAAAAGGGTTTTGATGAAGCTGTCGCCGATCCCACATTCTGGGAAGACTTCAAATCCTTGTATTCTTATATTGGCCGTCCTTCTTCACTACACAAAGCTGAGAGATTAACTGAGCATTGTCAAGGTGCTCAAATCTGGTTGAAGAGAGAAGATCTTAACCACACGGGATCTCACAAGATCAACAATGCTTTAGCACAAGTTCTTCTAGCTAAAAGATTAGGCAAGAAGAACGTTATTGCTGAAACCGGTGCTGGTCAACACGGTGTTGCCACTGCCACTGCATGTGCTAAATTTGGCTTAACCTGTACTGTGTTCATGGGTGCAGAAGATGTTCGTCGCCAAGCTTTAAACGTCTTCAGAATGAGAATTCTCGGTGCTAAAGTAATTGCTGTTACTAATGGTACAAAGACTCTAAGAGACGCTACTTCAGAGGCATTCAGATTTTGGGTTACTAACTTGAAAACTACTTACTACGTCGTCGGTTCTGCCATTGGTCCTCACCCATATCCAACTTTGGTTAGAACTTTCCAAAGTGTCATTGGTAAAGAAACCAAGGAACAGTTTGCTGCCATGAACAATGGTAAATTACCTGACGCAGTTGTTGCATGTGTTGGGGGTGGTTCCAACTCTACAGGTATGTTTTCACCATTCGAGCATGATACTTCCGTTAAGTTATTGGGTGTGGAAGCCGGTGGTGATGGTGTAGATACAAAGTTCCACTCTGCTACTCTAACTGCCGGTAGACCTGGTGTCTTCCATGGTGTCAAGACTTATGTCTTGCAAGATAGTGATGGTCAAGTCCATGATACTCATTCTGTTTCTGCTGGGTTAGACTACCCAGGTGTCGGTCCAGAATTGGCATATTGGAAATCTACTGGCCGTGCTCAATTCATTGCAGCTACTGACGCTCAGGCTCTGCTTGGCTTTAAATTATTATCTCAATTAGAAGGTATTATTCCCGCTTTGGAATCTTCTCATGCTGTTTATGGCGCTTGCGAATTGGCTAAGACGATGAAGCCTGATCAACATTTGGTTATCAATATTTCTGGTAGAGGTGATAAAGATGTCCAAAGTGTCGCTGAAGTCTTGCCGAAATTAGGTCCAAAGATAGGTTGGGATTTGAGATTCGAAGAAGACCCATCTGCCTAA
配列番号36 IDOをコードするDNA配列
>NC_001139.9:c448535−446412出芽酵母S288c染色体VII、完全配列
>NC_001139.9:c448535−446412出芽酵母S288c染色体VII、完全配列
ATGTCAGAACAACTCAGACAAACATTTGCTAACGCTAAAAAAGAAAACAGGAACGCCTTGGTCACATTTATGACCGCAGGTTACCCAACAGTCAAAGACACTGTCCCTATTCTCAAGGGTTTCCAGGATGGTGGTGTAGATATCATCGAATTGGGTATGCCCTTCTCTGATCCAATTGCAGATGGTCCTACAATTCAATTATCTAATACTGTGGCTTTGCAAAACGGTGTTACCTTGCCTCAAACTCTAGAAATGGTCTCCCAAGCTAGAAATGAAGGTGTTACCGTACCCATAATCCTAATGGGTTACTATAACCCTATTCTAAACTACGGTGAAGAAAGATTTATTCAGGACGCTGCCAAGGCTGGTGCTAATGGTTTTATCATCGTCGATTTGCCACCAGAGGAGGCGTTGAAGGTCAGAAACTACATCAATGATAATGGTTTGAGCCTGATCCCACTAGTGGCTCCTTCTACCACCGACGAAAGATTGGAATTACTATCGCATATTGCCGATTCGTTTGTCTACGTTGTGTCTAGAATGGGTACTACTGGTGTTCAAAGTTCTGTGGCCAGTGATTTGGATGAACTCATCTCTAGAGTCAGAAAGTACACCAAGGATACTCCTTTGGCCGTTGGGTTTGGTGTCTCTACCAGAGAACATTTCCAATCAGTTGGTAGTGTTGCTGACGGTGTAGTGATTGGTTCCAAAATCGTCACATTATGTGGAGATGCTCCAGAGGGCAAAAGGTACGACGTTGCTAAGGAATATGTACAGGGAATTCTAAATGGTGCTAAGCATAAGGTTCTGTCCAAGGACGAATTCTTTGCCTTTCAAAAAGAGTCCTTGAAGTCCGCAAACGTTAAGAAGGAAATACTGGACGAATTTGATGAAAATCACAAGCACCCAA
TTAGATTTGGGGACTTTGGTGGTCAGTATGTCCCAGAAGCTCTTCATGCATGTCTAAGAGAGTTGGAAAAGGGTTTTGATGAAGCTGTCGCCGATCCCACATTCTGGGAAGACTTCAAATCCTTGTATTCTTATATTGGCCGTCCTTCTTCACTACACAAAGCTGAGAGATTAACTGAGCATTGTCAAGGTGCTCAAATCTGGTTGAAGAGAGAAGATCTTAACCACACGGGATCTCACAAGATCAACAATGCTTTAGCACAAGTTCTTCTAGCTAAAAGATTAGGCAAGAAGAACGTTATTGCTGAAACCGGTGCTGGTCAACACGGTGTTGCCACTGCCACTGCATGTGCTAAATTTGGCTTAACCTGTACTGTGTTCATGGGTGCAGAAGATGTTCGTCGCCAAGCTTTAAACGTCTTCAGAATGAGAATTCTCGGTGCTAAAGTAATTGCTGTTACTAATGGTACAAAGACTCTAAGAGACGCTACTTCAGAGGCATTCAGATTTTGGGTTACTAACTTGAAAACTACTTACTACGTCGTCGGTTCTGCCATTGGTCCTCACCCATATCCAACTTTGGTTAGAACTTTCCAAAGTGTCATTGGTAAAGAAACCAAGGAACAGTTTGCTGCCATGAACAATGGTAAATTACCTGACGCAGTTGTTGCATGTGTTGGGGGTGGTTCCAACTCTACAGGTATGTTTTCACCATTCGAGCATGATACTTCCGTTAAGTTATTGGGTGTGGAAGCCGGTGGTGATGGTGTAGATACAAAGTTCCACTCTGCTACTCTAACTGCCGGTAGACCTGGTGTCTTCCATGGTGTCAAGACTTATGTCTTGCAAGATAGTGATGGTCAAGTCCATGATACTCATTCTGTTTCTGCTGGGTTAGACTACCCAGGTGTCGGTCCAGAATTGGCATATTGGAAATCTACTGGCCGTGCTCAATTCATTGCAGCTACTGACGCTCAGGCTCTGCTTGGCTTTAAATTATTATCTCAATTAGAAGGTATTATTCCCGCTTTGGAATCTTCTCATGCTGTTTATGGCGCTTGCGAATTGGCTAAGACGATGAAGCCTGATCAACATTTGGTTATCAATATTTCTGGTAGAGGTGATAAAGATGTCCAAAGTGTCGCTGAAGTCTTGCCGAAATTAGGTCCAAAGATAGGTTGGGATTTGAGATTCGAAGAAGACCCATCTGCCTAA
配列番号37 MP71ベクターを有さない例示的なCAR GD2 ASS1+OTCをコードするDNA配列
ATGCCTCGCGGCTGGACAGCCCTGTGCCTGCTGTCTCTGCTGCCATCCGGCTTCATGAGCCTGGATAATAACGGCACAGCCACCCCAGAGCTGCCTACACAGGGCACCTTCAGCAATGTGTCCACAAACGTGAGCTATCAGGAGACCACAACCCCTTCTACCCTGGGATCCACAAGCCTGCACCCCGTGTCTCAGCACGGCAACGAAGCCACCACCAACATCACCGAGACCACAGTGAAGTTTACCTCCACCTCTGTGATTACCTCTGTGTACGGAAATACAAACTCCAGCGTGCAGTCTCAGACATCTGTGATCTCCACAGTGTTTACAACACCTGCCAATGTGTCCACCCCAGAGACAACCCTGAAGCCCAGCCTGTCTCCTGGAAATGTGTCCGATCTGTCTACCACCTCCACCAGCCTGGCCACCTCTCCCACCAAGCCCTATACCTCCTCTTCTCCCATCCTGAGCGATATCAAAGCCGAGATCAAATGCAGCGGGATTCGGGAAGTGAAACTGACACAGGGCATCTGCCTGGAACAGAATAAGACATCCAGCTGCGCCGAGTTTAAGAAAGATAGAGGAGAGGGACTGGCCAGGGTGCTGTGTGGCGAAGAGCAGGCCGACGCCGATGCCGGCGCCCAGGTGTGTTCCCTGCTGCTGGCCCAGTCTGAGGTGCGCCCCCAGTGCCTGCTGCTGGTGCTGGCCAATCGGACAGAAATTAGCAGCAAGCTGCAGCTGATGAAAAAACACCAGAGCGATCTGAAAAAGCTGGGCATCCTGGACTTTACCGAGCAGGACGTGGCCTCTCACCAGAGCTACAGCCAGAAAACACTGATCGCCCTGGTGACCAGCGGAGCCCTGCTGGCCGTGCTGGGCATCACCGGATATTTCCTGATGAATAGGCGCAGCTGGAGCCCCACCGGCGAACGGCTGGAGCTGGAGCCTGTCGACCGAGTGAAGCAGACCCTGAACTTTGATCTGCTGAAGCTGGCCGGCGACGTGGAGTCCAACCCCGGGCCAGGGAATATGGCCTTACCAGTGACCGCCTTGCTCCTGCCGCTGGCCTTGCTGCTCCACGCCGCCAGGCCGGATATTCTGCTCACACAGACCCCACTCTCCCTGCCCGTGTCACTCGGGGATCAGGCTAGCATTTCTTGCCGCTCATCTCAGTCTCTGGTCCACCGGAATGGGAACACATACCTCCATTGGTACCTCCAGAAACCTGGACAGAGCCCTAAACTGCTCATCCACAAAGTCTCAAATCGGTTCTCCGGCGTGCCCGATCGCTTTAGCGGATCCGGATCTGGGACCGACTTCACACTGAAAATCTCACGAGTGGAGGCTGAGGATCTCGGCGTCTACTTCTGTAGTCAGAGTACCCACGTCCCACCCCTCACCTTTGGCGCTGGAACAAAACTGGAGCTGAAACGAGCCGATGCTGCTCCTACCGTGTCCATCTTTCCTGGCTCCGGGGGAGGCGGGAGCGGAGGCGAAGTGAAACTCCAGCAGTCTGGCCCTTCTCTCGTGGAACCTGGCGCTTCTGTGATGATCTCCTGTAAGGCCTCTGGATCTTCCTTTACCGGCTACAACATGAACTGGGTCCGGCAGAACATTGGCAAATCCCTGGAATGGATTGGCGCCATCGATCCTTACTACGGCGGCACATCATACAATCAGAAATTCAAGGGGCGAGCAACACTCACTGTCGACAAATCTTCATCCACCGCCTACATGCACCTGAAATCTCTCACATCCGAGGATAGTGCTGTCTACTACTGTGTCTCTGGCATGGAATACTGGGGACAGGGAACTTCTGTCACCGTGTCTAGTGCCAAAACCACACCTCCCTCCGTGTACGGACGAGTCACTGTCTCATCTGCTGAACCAAAATCCTGTGACAAAACACACACATGCCCACCTTGTCCTGCCCCTGAACTGCTCGGCGGACCTTCCGTCTTTCTGTTTCCCCCCAAACCCAAGGATACACTCATGATTTCTAGGACCCCCGAAGTCACTTGTGTCGTGGTCGATGTGTCTCACGAGGATCCTGAAGTGAAATTCAACTGGTACGTGGACGGAGTCGAGGTCCACAATGCCAAAACAAAACCCCGGGAGGAACAGTACAATAGCACCTACCGAGTCGTGTCCGTGCTCACCGTCCTCCATCAGGATTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAAAGTGAGTAACAAGGCTCTCCCCGCTCCTATTGAAAAAACCATCTCAAAAGCAAAAGGCCAGCCTAGGGAGCCTCAGGTCTACACACTGCCACCCTCACGGGACGAACTCACCAAAAATCAGGTGTCCCTCACTTGCCTGGTGAAAGGCTTCTACCCTTCCGATATCGCTGTGGAATGGGAGTCAAATGGGCAGCCCGAAAACAACTACAAAACAACCCCCCCTGTGCTCGATTCCGATGGCTCTTTTTTCCTGTACTCCAAACTCACCGTGGACAAATCACGCTGGCAGCAGGGGAATGTCTTTTCTTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTCCACAATCATTACACCCAGAAATCCCTCTCACTCTCACCCGGCAAAAAGGACCCTAAAACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACACCGGCGCCCACCATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCTTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAAACGGGGCAGAAAGAAACTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTGAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACAAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCGGCAGCGGCGCCACCAACTTCAGCCTGCTGAAGCAGGCCGGCGACGTGGAGGAAAACCCTGGCCCCATGTCCAGCAAAGGCTCCGTGGTTCTGGCCTACAGTGGCGGCCTGGACACCTCGTGCATCCTCGTGTGGCTGAAGGAACAAGGCTATGACGTCATTGCCTATCTGGCCAACATTGGCCAGAAGGAAGACTTCGAGGAAGCCAGGAAGAAGGCACTGAAACTTGGGGCCAAAAAGGTGTTCATTGAGGATGTCAGCAGGGAGTTTGTGGAGGAGTTCATCTGGCCGGCCATCCAGTCCAGCGCACTGTATGAGGACCGCTACCTCCTGGGCACCTCTCTTGCCAGGCCCTGCATCGCCCGCAAACAAGTGGAAATCGCCCAGCGGGAGGGGGCCAAGTATGTGTCCCACGGCGCCACAGGAAAGGGGAACGATCAGGTCCGGTTTGAGCTCAGCTGCTACTCACTGGCCCCCCAGATAAAGGTCATTGCTCCCTGGAGGATGCCTGAATTCTACAACCGGTTCAAGGGCCGCAATGACCTGATGGAGTACGCAAAGCAACACGGGATTCCCATCCCGGTCACTCCCAAGAACCCGTGGAGCATGGATGAGAACCTCATGCACATCAGCTACGAGGCTGGAATCCTGGAGAACCCCAAGAACCAAGCGCCTCCAGGTCTCTACACGAAGACCCAGGACCCAGCCAAAGCCCCCAACACCCCTGACATTCTCGAGATCGAGTTCAAAAAAGGGGTCCCTGTGAAGGTGACCAACGTCAAGGATGGCACCACCCACCAGACCTCCTTGGAGCTCTTCATGTACCTGAACGAAGTCGCGGGCAAGCATGGCGTGGGCCGTATTGACATCGTGGAGAACCGCTTCATTGGAATGAAGTCCCGAGGTATCTACGAGACCCCAGCAGGCACCATCCTTTACCATGCTCATTTAGACATCGAGGCCTTCACCATGGACCGGGAAGTGCGCAAAATCAAACAAGGCCTGGGCTTGAAATTTGCTGAGCTGGTGTATACCGGTTTCTGGCACAGCCCTGAGTGTGAATTTGTCCGCCACTGCATCGCCAAGTCCCAGGAGCGAGTGGAAGGGAAAGTGCAGGTGTCCGTCCTCAAGGGCCAGGTGTACATCCTCGGCCGGGAGTCCCCACTGTCTCTCTACAATGAGGAGCTGGTGAGCATGAACGTGCAGGGTGATTATGAGCCAACTGATGCCACCGGGTTCATCAACATCAATTCCCTCAGGCTGAAGGAATATCATCGTCTCCAGAGCAAGGTCACTGCCAAAGGAAGCGGAGAGGGCAGAGGAAGTCTGCTAACATGCGGTGACGTCGAGGAGAATCCTGGACCTATGCTGTTTAATCTGAGGATCCTGTTAAACAATGCAGCTTTTAGAAATGGTCACAACTTCATGGTTCGAAATTTTCGGTGTGGACAACCACTACAAAATAAAGTGCAGCTGAAGGGCCGTGACCTTCTCACTCTAAAAAACTTTACCGGAGAAGAAATTAAATATATGCTATGGCTATCAGCAGATCTGAAATTTAGGATAAAACAGAAAGGAGAGTATTTGCCTTTATTGCAAGGGAAGTCCTTAGGCATGATTTTTGAGAAAAGAAGTACTCGAACAAGATTGTCTACAGAAACAGGCTTAGCACTTCTGGGAGGACATCCTTGTTTTCTTACCACACAAGATATTCATTTGGGTGTGAATGAAAGTCTCACGGACACGGCCCGTGTATTGTCTAGCATGGCAGATGCAGTATTGGCTCGAGTGTATAAACAATCAGATTTGGACACCCTGGCTAAAGAAGCATCCATCCCAATTATCAATGGGCTGTCAGATTTGTACCATCCTATCCAGATCCTGGCTGATTACCTCACGCTCCAGGAACACTATAGCTCTCTGAAAGGTCTTACCCTCAGCTGGATCGGGGATGGGAACAATATCCTGCACTCCATCATGATGAGCGCAGCGAAATTCGGAATGCACCTTCAGGCAGCTACTCCAAAGGGTTATGAGCCGGATGCTAGTGTAACCAAGTTGGCAGAGCAGTATGCCAAAGAGAATGGTACCAAGCTGTTGCTGACAAATGATCCATTGGAAGCAGCGCATGGAGGCAATGTATTAATTACAGACACTTGGATAAGCATGGGACAAGAAGAGGAGAAGAAAAAGCGGCTCCAGGCTTTCCAAGGTTACCAGGTTACAATGAAGACTGCTAAAGTTGCTGCCTCTGACTGGACATTTTTACACTGCTTGCCCAGAAAGCCAGAAGAAGTGGATGATGAAGTCTTTTATTCTCCTCGATCACTAGTGTTCCCAGAGGCAGAAAACAGAAAGTGGACAATCATGGCTGTCATGGTGTCCCTGCTGACAGATTACTCACCTCAGCTCCAGAAGCCTAAATTTTAA
配列番号38 MP71ベクターを有さないGD2 ASS1の例示的なCARをコードするDNA配列
ATGCCTCGCGGCTGGACAGCCCTGTGCCTGCTGTCTCTGCTGCCATCCGGCTTCATGAGCCTGGATAATAACGGCACAGCCACCCCAGAGCTGCCTACACAGGGCACCTTCAGCAATGTGTCCACAAACGTGAGCTATCAGGAGACCACAACCCCTTCTACCCTGGGATCCACAAGCCTGCACCCCGTGTCTCAGCACGGCAACGAAGCCACCACCAACATCACCGAGACCACAGTGAAGTTTACCTCCACCTCTGTGATTACCTCTGTGTACGGAAATACAAACTCCAGCGTGCAGTCTCAGACATCTGTGATCTCCACAGTGTTTACAACACCTGCCAATGTGTCCACCCCAGAGACAACCCTGAAGCCCAGCCTGTCTCCTGGAAATGTGTCCGATCTGTCTACCACCTCCACCAGCCTGGCCACCTCTCCCACCAAGCCCTATACCTCCTCTTCTCCCATCCTGAGCGATATCAAAGCCGAGATCAAATGCAGCGGGATTCGGGAAGTGAAACTGACACAGGGCATCTGCCTGGAACAGAATAAGACATCCAGCTGCGCCGAGTTTAAGAAAGATAGAGGAGAGGGACTGGCCAGGGTGCTGTGTGGCGAAGAGCAGGCCGACGCCGATGCCGGCGCCCAGGTGTGTTCCCTGCTGCTGGCCCAGTCTGAGGTGCGCCCCCAGTGCCTGCTGCTGGTGCTGGCCAATCGGACAGAAATTAGCAGCAAGCTGCAGCTGATGAAAAAACACCAGAGCGATCTGAAAAAGCTGGGCATCCTGGACTTTACCGAGCAGGACGTGGCCTCTCACCAGAGCTACAGCCAGAAAACACTGATCGCCCTGGTGACCAGCGGAGCCCTGCTGGCCGTGCTGGGCATCACCGGATATTTCCTGATGAATAGGCGCAGCTGGAGCCCCACCGGCGAACGGCTGGAGCTGGAGCCTGTCGACCGAGTGAAGCAGACCCTGAACTTTGATCTGCTGAAGCTGGCCGGCGACGTGGAGTCCAACCCCGGGCCAGGGAATATGGCCTTACCAGTGACCGCCTTGCTCCTGCCGCTGGCCTTGCTGCTCCACGCCGCCAGGCCGGATATTCTGCTCACACAGACCCCACTCTCCCTGCCCGTGTCACTCGGGGATCAGGCTAGCATTTCTTGCCGCTCATCTCAGTCTCTGGTCCACCGGAATGGGAACACATACCTCCATTGGTACCTCCAGAAACCTGGACAGAGCCCTAAACTGCTCATCCACAAAGTCTCAAATCGGTTCTCCGGCGTGCCCGATCGCTTTAGCGGATCCGGATCTGGGACCGACTTCACACTGAAAATCTCACGAGTGGAGGCTGAGGATCTCGGCGTCTACTTCTGTAGTCAGAGTACCCACGTCCCACCCCTCACCTTTGGCGCTGGAACAAAACTGGAGCTGAAACGAGCCGATGCTGCTCCTACCGTGTCCATCTTTCCTGGCTCCGGGGGAGGCGGGAGCGGAGGCGAAGTGAAACTCCAGCAGTCTGGCCCTTCTCTCGTGGAACCTGGCGCTTCTGTGATGATCTCCTGTAAGGCCTCTGGATCTTCCTTTACCGGCTACAACATGAACTGGGTCCGGCAGAACATTGGCAAATCCCTGGAATGGATTGGCGCCATCGATCCTTACTACGGCGGCACATCATACAATCAGAAATTCAAGGGGCGAGCAACACTCACTGTCGACAAATCTTCATCCACCGCCTACATGCACCTGAAATCTCTCACATCCGAGGATAGTGCTGTCTACTACTGTGTCTCTGGCATGGAATACTGGGGACAGGGAACTTCTGTCACCGTGTCTAGTGCCAAAACCACACCTCCCTCCGTGTACGGACGAGTCACTGTCTCATCTGCTGAACCAAAATCCTGTGACAAAACACACACATGCCCACCTTGTCCTGCCCCTGAACTGCTCGGCGGACCTTCCGTCTTTCTGTTTCCCCCCAAACCCAAGGATACACTCATGATTTCTAGGACCCCCGAAGTCACTTGTGTCGTGGTCGATGTGTCTCACGAGGATCCTGAAGTGAAATTCAACTGGTACGTGGACGGAGTCGAGGTCCACAATGCCAAAACAAAACCCCGGGAGGAACAGTACAATAGCACCTACCGAGTCGTGTCCGTGCTCACCGTCCTCCATCAGGATTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAAAGTGAGTAACAAGGCTCTCCCCGCTCCTATTGAAAAAACCATCTCAAAAGCAAAAGGCCAGCCTAGGGAGCCTCAGGTCTACACACTGCCACCCTCACGGGACGAACTCACCAAAAATCAGGTGTCCCTCACTTGCCTGGTGAAAGGCTTCTACCCTTCCGATATCGCTGTGGAATGGGAGTCAAATGGGCAGCCCGAAAACAACTACAAAACAACCCCCCCTGTGCTCGATTCCGATGGCTCTTTTTTCCTGTACTCCAAACTCACCGTGGACAAATCACGCTGGCAGCAGGGGAATGTCTTTTCTTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTCCACAATCATTACACCCAGAAATCCCTCTCACTCTCACCCGGCAAAAAGGACCCTAAAACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACACCGGCGCCCACCATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCTTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAAACGGGGCAGAAAGAAACTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTGAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACAAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCGGCAGCGGCGCCACCAACTTCAGCCTGCTGAAGCAGGCCGGCGACGTGGAGGAAAACCCTGGCCCCATGTCCAGCAAAGGCTCCGTGGTTCTGGCCTACAGTGGCGGCCTGGACACCTCGTGCATCCTCGTGTGGCTGAAGGAACAAGGCTATGACGTCATTGCCTATCTGGCCAACATTGGCCAGAAGGAAGACTTCGAGGAAGCCAGGAAGAAGGCACTGAAACTTGGGGCCAAAAAGGTGTTCATTGAGGATGTCAGCAGGGAGTTTGTGGAGGAGTTCATCTGGCCGGCCATCCAGTCCAGCGCACTGTATGAGGACCGCTACCTCCTGGGCACCTCTCTTGCCAGGCCCTGCATCGCCCGCAAACAAGTGGAAATCGCCCAGCGGGAGGGGGCCAAGTATGTGTCCCACGGCGCCACAGGAAAGGGGAACGATCAGGTCCGGTTTGAGCTCAGCTGCTACTCACTGGCCCCCCAGATAAAGGTCATTGCTCCCTGGAGGATGCCTGAATTCTACAACCGGTTCAAGGGCCGCAATGACCTGATGGAGTACGCAAAGCAACACGGGATTCCCATCCCGGTCACTCCCAAGAACCCGTGGAGCATGGATGAGAACCTCATGCACATCAGCTACGAGGCTGGAATCCTGGAGAACCCCAAGAACCAAGCGCCTCCAGGTCTCTACACGAAGACCCAGGACCCAGCCAAAGCCCCCAACACCCCTGACATTCTCGAGATCGAGTTCAAAAAAGGGGTCCCTGTGAAGGTGACCAACGTCAAGGATGGCACCACCCACCAGACCTCCTTGGAGCTCTTCATGTACCTGAACGAAGTCGCGGGCAAGCATGGCGTGGGCCGTATTGACATCGTGGAGAACCGCTTCATTGGAATGAAGTCCCGAGGTATCTACGAGACCCCAGCAGGCACCATCCTTTACCATGCTCATTTAGACATCGAGGCCTTCACCATGGACCGGGAAGTGCGCAAAATCAAACAAGGCCTGGGCTTGAAATTTGCTGAGCTGGTGTATACCGGTTTCTGGCACAGCCCTGAGTGTGAATTTGTCCGCCACTGCATCGCCAAGTCCCAGGAGCGAGTGGAAGGGAAAGTGCAGGTGTCCGTCCTCAAGGGCCAGGTGTACATCCTCGGCCGGGAGTCCCCACTGTCTCTCTACAATGAGGAGCTGGTGAGCATGAACGTGCAGGGTGATTATGAGCCAACTGATGCCACCGGGTTCATCAACATCAATTCCCTCAGGCTGAAGGAATATCATCGTCTCCAGAGCAAGGTCACTGCCAAATAA
配列番号39 MP71ベクターを有さないGD2 OTCの例示的なCARをコードするDNA配列
ATGCCTCGCGGCTGGACAGCCCTGTGCCTGCTGTCTCTGCTGCCATCCGGCTTCATGAGCCTGGATAATAACGGCACAGCCACCCCAGAGCTGCCTACACAGGGCACCTTCAGCAATGTGTCCACAAACGTGAGCTATCAGGAGACCACAACCCCTTCTACCCTGGGATCCACAAGCCTGCACCCCGTGTCTCAGCACGGCAACGAAGCCACCACCAACATCACCGAGACCACAGTGAAGTTTACCTCCACCTCTGTGATTACCTCTGTGTACGGAAATACAAACTCCAGCGTGCAGTCTCAGACATCTGTGATCTCCACAGTGTTTACAACACCTGCCAATGTGTCCACCCCAGAGACAACCCTGAAGCCCAGCCTGTCTCCTGGAAATGTGTCCGATCTGTCTACCACCTCCACCAGCCTGGCCACCTCTCCCACCAAGCCCTATACCTCCTCTTCTCCCATCCTGAGCGATATCAAAGCCGAGATCAAATGCAGCGGGATTCGGGAAGTGAAACTGACACAGGGCATCTGCCTGGAACAGAATAAGACATCCAGCTGCGCCGAGTTTAAGAAAGATAGAGGAGAGGGACTGGCCAGGGTGCTGTGTGGCGAAGAGCAGGCCGACGCCGATGCCGGCGCCCAGGTGTGTTCCCTGCTGCTGGCCCAGTCTGAGGTGCGCCCCCAGTGCCTGCTGCTGGTGCTGGCCAATCGGACAGAAATTAGCAGCAAGCTGCAGCTGATGAAAAAACACCAGAGCGATCTGAAAAAGCTGGGCATCCTGGACTTTACCGAGCAGGACGTGGCCTCTCACCAGAGCTACAGCCAGAAAACACTGATCGCCCTGGTGACCAGCGGAGCCCTGCTGGCCGTGCTGGGCATCACCGGATATTTCCTGATGAATAGGCGCAGCTGGAGCCCCACCGGCGAACGGCTGGAGCTGGAGCCTGTCGACCGAGTGAAGCAGACCCTGAACTTTGATCTGCTGAAGCTGGCCGGCGACGTGGAGTCCAACCCCGGGCCAGGGAATATGGCCTTACCAGTGACCGCCTTGCTCCTGCCGCTGGCCTTGCTGCTCCACGCCGCCAGGCCGGATATTCTGCTCACACAGACCCCACTCTCCCTGCCCGTGTCACTCGGGGATCAGGCTAGCATTTCTTGCCGCTCATCTCAGTCTCTGGTCCACCGGAATGGGAACACATACCTCCATTGGTACCTCCAGAAACCTGGACAGAGCCCTAAACTGCTCATCCACAAAGTCTCAAATCGGTTCTCCGGCGTGCCCGATCGCTTTAGCGGATCCGGATCTGGGACCGACTTCACACTGAAAATCTCACGAGTGGAGGCTGAGGATCTCGGCGTCTACTTCTGTAGTCAGAGTACCCACGTCCCACCCCTCACCTTTGGCGCTGGAACAAAACTGGAGCTGAAACGAGCCGATGCTGCTCCTACCGTGTCCATCTTTCCTGGCTCCGGGGGAGGCGGGAGCGGAGGCGAAGTGAAACTCCAGCAGTCTGGCCCTTCTCTCGTGGAACCTGGCGCTTCTGTGATGATCTCCTGTAAGGCCTCTGGATCTTCCTTTACCGGCTACAACATGAACTGGGTCCGGCAGAACATTGGCAAATCCCTGGAATGGATTGGCGCCATCGATCCTTACTACGGCGGCACATCATACAATCAGAAATTCAAGGGGCGAGCAACACTCACTGTCGACAAATCTTCATCCACCGCCTACATGCACCTGAAATCTCTCACATCCGAGGATAGTGCTGTCTACTACTGTGTCTCTGGCATGGAATACTGGGGACAGGGAACTTCTGTCACCGTGTCTAGTGCCAAAACCACACCTCCCTCCGTGTACGGACGAGTCACTGTCTCATCTGCTGAACCAAAATCCTGTGACAAAACACACACATGCCCACCTTGTCCTGCCCCTGAACTGCTCGGCGGACCTTCCGTCTTTCTGTTTCCCCCCAAACCCAAGGATACACTCATGATTTCTAGGACCCCCGAAGTCACTTGTGTCGTGGTCGATGTGTCTCACGAGGATCCTGAAGTGAAATTCAACTGGTACGTGGACGGAGTCGAGGTCCACAATGCCAAAACAAAACCCCGGGAGGAACAGTACAATAGCACCTACCGAGTCGTGTCCGTGCTCACCGTCCTCCATCAGGATTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAAAGTGAGTAACAAGGCTCTCCCCGCTCCTATTGAAAAAACCATCTCAAAAGCAAAAGGCCAGCCTAGGGAGCCTCAGGTCTACACACTGCCACCCTCACGGGACGAACTCACCAAAAATCAGGTGTCCCTCACTTGCCTGGTGAAAGGCTTCTACCCTTCCGATATCGCTGTGGAATGGGAGTCAAATGGGCAGCCCGAAAACAACTACAAAACAACCCCCCCTGTGCTCGATTCCGATGGCTCTTTTTTCCTGTACTCCAAACTCACCGTGGACAAATCACGCTGGCAGCAGGGGAATGTCTTTTCTTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTCCACAATCATTACACCCAGAAATCCCTCTCACTCTCACCCGGCAAAAAGGACCCTAAAACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACACCGGCGCCCACCATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATTTTTGGGTGCTGGTGGTGGTTGGTGGAGTCCTGGCTTGCTATAGCTTGCTAGTAACAGTGGCCTTTATTATTTTCTGGGTGAGGAGTAAGAGGAGCAGGCTCCTGCACAGTGACTACATGAACATGACTCCCCGCCGCCCCGGGCCCACCCGCAAGCATTACCAGCCCTATGCCCCACCTCGCGACTTCGCAGCCTATCGCTCCAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACAAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCGGCAGCGGCGCCACCAACTTCAGCCTGCTGAAGCAGGCCGGCGACGTGGAGGAAAACCCTGGCCCCATGCTGTTTAATCTGAGGATCCTGTTAAACAATGCAGCTTTTAGAAATGGTCACAACTTCATGGTTCGAAATTTTCGGTGTGGACAACCACTACAAAATAAAGTGCAGCTGAAGGGCCGTGACCTTCTCACTCTAAAAAACTTTACCGGAGAAGAAATTAAATATATGCTATGGCTATCAGCAGATCTGAAATTTAGGATAAAACAGAAAGGAGAGTATTTGCCTTTATTGCAAGGGAAGTCCTTAGGCATGATTTTTGAGAAAAGAAGTACTCGAACAAGATTGTCTACAGAAACAGGCTTAGCACTTCTGGGAGGACATCCTTGTTTTCTTACCACACAAGATATTCATTTGGGTGTGAATGAAAGTCTCACGGACACGGCCCGTGTATTGTCTAGCATGGCAGATGCAGTATTGGCTCGAGTGTATAAACAATCAGATTTGGACACCCTGGCTAAAGAAGCATCCATCCCAATTATCAATGGGCTGTCAGATTTGTACCATCCTATCCAGATCCTGGCTGATTACCTCACGCTCCAGGAACACTATAGCTCTCTGAAAGGTCTTACCCTCAGCTGGATCGGGGATGGGAACAATATCCTGCACTCCATCATGATGAGCGCAGCGAAATTCGGAATGCACCTTCAGGCAGCTACTCCAAAGGGTTATGAGCCGGATGCTAGTGTAACCAAGTTGGCAGAGCAGTATGCCAAAGAGAATGGTACCAAGCTGTTGCTGACAAATGATCCATTGGAAGCAGCGCATGGAGGCAATGTATTAATTACAGACACTTGGATAAGCATGGGACAAGAAGAGGAGAAGAAAAAGCGGCTCCAGGCTTTCCAAGGTTACCAGGTTACAATGAAGACTGCTAAAGTTGCTGCCTCTGACTGGACATTTTTACACTGCTTGCCCAGAAAGCCAGAAGAAGTGGATGATGAAGTCTTTTATTCTCCTCGATCACTAGTGTTCCCAGAGGCAGAAAACAGAAAGTGGACAATCATGGCTGTCATGGTGTCCCTGCTGACAGATTACTCACCTCAGCTCCAGAAGCCTAAATTTTAA
配列番号40 代替的なCD3z
AGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGCAGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAA
配列番号41 代替的なEGFRvIII標的結合部分(MR1抗体に由来するEGFRvIII scFv配列)をコードするDNA
atggactggatttggcgcatccttttccttgtcggcgctgctaccggcgcgcattctcaggtacaactccagcagtctgggggaggcttagtgaagcctggagcgtctctgaaactctcctgtgtaacctctggattcactttcagaaaatttggcatgtcttgggttcgccagactagtgacaagaggctggaatgggtcgcatccattagtactggcggttataacacgtactattcagacaatgtaaagggccgattcaccatctccagagagaatgccaagaacaccctgtacctgcaaatgagtagtctgaagtctgaggacacggccttgtattactgtacaagaggctattctagtacctcttatgctatggactactggggccaagggaccacggtcaccgtctcctcaagtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatcggacatcgagctcactcagtctccagcatccctgtccgtggctacaggagaaaaagtcactatcagatgcatgaccagcactgatattgatgatgatatgaactggtaccagcagaagccaggggaaccccctaagttccttatttcagaaggcaatactcttcggccgggagtcccatcccgattttccagcagtggcactggcacagattttgtttttacaattgaaaacacactctcggaagatgttggagattactactgtttgcaaagctttaacgtgcctcttacattcggtgatggcaccaagcttgaaaaagctcta
配列番号42 ASS−1ドメインを含むEGFRvIIIの例示的なCARのアミノ酸配列(配列番号41によってコードされる代替的なEGFRvIII標的結合部分を採用)
MPRGWTALCLLSLLPSGFMSLDNNGTATPELPTQGTFSNVSTNVSYQETTTPSTLGSTSLHPVSQHGNEATTNITETTVKFTSTSVITSVYGNTNSSVQSQTSVISTVFTTPANVSTPETTLKPSLSPGNVSDLSTTSTSLATSPTKPYTSSSPILSDIKAEIKCSGIREVKLTQGICLEQNKTSSCAEFKKDRGEGLARVLCGEEQADADAGAQVCSLLLAQSEVRPQCLLLVLANRTEISSKLQLMKKHQSDLKKLGILDFTEQDVASHQSYSQKTLIALVTSGALLAVLGITGYFLMNRRSWSPTGERLELEPVDRVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGPGNMALPVTALLLPLALLLHAARPMDWIWRILFLVGAATGAHSQVQLQQSGGGLVKPGASLKLSCVTSGFTFRKFGMSWVRQTSDKRLEWVASISTGGYNTYYSDNVKGRFTISRENAKNTLYLQMSSLKSEDTALYYCTRGYSSTSYAMDYWGQGTTVTVSSSGGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPASLSVATGEKVTIRCMTSTDIDDDMNWYQQKPGEPPKFLISEGNTLRPGVPSRFSSSGTGTDFVFTIENTLSEDVGDYYCLQSFNVPLTFGDGTKLEKALTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMSSKGSVVLAYSGGLDTSCILVWLKEQGYDVIAYLANIGQKEDFEEARKKALKLGAKKVFIEDVSREFVEEFIWPAIQSSALYEDRYLLGTSLARPCIARKQVEIAQREGAKYVSHGATGKGNDQVRFELSCYSLAPQIKVIAPWRMPEFYNRFKGRNDLMEYAKQHGIPIPVTPKNPWSMDENLMHISYEAGILENPKNQAPPGLYTKTQDPAKAPNTPDILEIEFKKGVPVKVTNVKDGTTHQTSLELFMYLNEVAGKHGVGRIDIVENRFIGMKSRGIYETPAGTILYHAHLDIEAFTMDREVRKIKQGLGLKFAELVYTGFWHSPECEFVRHCIAKSQERVEGKVQVSVLKGQVYILGRESPLSLYNEELVSMNVQGDYEPTDATGFININSLRLKEYHRLQSKVTAK
配列番号43 OTCドメインを含むEGFRvIIIの例示的なCARのアミノ酸配列(配列番号41によってコードされる代替的なEGFRvIII標的結合部分を採用)
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配列番号44 ASS−1ドメインおよびOTCドメインを含むEGFRvIIIの例示的なCARのアミノ酸配列(配列番号41によってコードされる代替的なEGFRvIII標的結合部分を採用)
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Claims (51)
- 標的結合部分と、細胞内シグナル伝達領域と、アルギニンまたはアルギニン前駆体の合成を促進するドメインとを含む融合標的結合タンパク質。
- アルギニンまたはアルギニン前駆体の合成を促進する前記ドメインが、酵素ドメインを含む、請求項1に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記酵素ドメインが、ASS−1ドメイン、OTCドメイン、ASLドメイン、OCD1ドメイン、ArgGドメイン、ArgHドメイン、およびArgFドメインからなる群から選択される、請求項2に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記ASS−1ドメインが、配列番号1のアミノ酸配列を含む、請求項3に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記OTCドメインが、配列番号2のアミノ酸配列を含む、請求項3または請求項4に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記ASLドメインが、配列番号30によってコードされるアミノ酸配列を含む、請求項3から5のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記ODC1ドメインが、配列番号31によってコードされるアミノ酸配列を含む、請求項3から6のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記ArgGドメインが、配列番号32によってコードされるアミノ酸配列を含む、請求項3から7のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記ArgHドメインが、配列番号33によってコードされるアミノ酸配列を含む、請求項3から8のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記ArgFドメインが、配列番号34によってコードされるアミノ酸配列を含む、請求項3から9のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 標的結合部分と、細胞内シグナル伝達領域と、トリプトファンまたはトリプトファン前駆体の合成を促進するドメインとを含む融合標的結合タンパク質。
- トリプトファンまたはトリプトファン前駆体の合成を促進する前記ドメインが、酵素ドメインを含む、請求項11に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記酵素ドメインが、TRP5ドメインおよびIDOドメインからなる群から選択される、請求項11または請求項12に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記TRP5ドメインが、配列番号35によってコードされるアミノ酸配列を含む、請求項13に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記IDOドメインが、配列番号36によってコードされるアミノ酸配列を含む、請求項13または請求項14に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記標的結合部分が、GD2標的結合部分、CD33標的結合部分、メソセリン標的結合部分、およびEGFRvIII標的結合部分からなる群から選択される、前記請求項のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記GD2標的結合部分が、配列番号3のアミノ酸配列を含む、請求項16に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記CD33標的結合部分が、配列番号4のアミノ酸配列を含む、請求項16に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記メソセリン標的結合部分が、配列番号5のアミノ酸配列を含む、請求項16に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記EGFRvIII標的結合部分が、配列番号6のアミノ酸配列を含む、請求項16に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記細胞内シグナル伝達領域が、4−1BBシグナル伝達領域、OX−40シグナル伝達領域、CD28シグナル伝達領域、ICOSシグナル伝達領域、およびCD3 ζシグナル伝達領域からなる群から選択される領域を含む、前記請求項のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記細胞内シグナル伝達領域が、4−1BBシグナル伝達領域を含む、請求項21に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記4−1BB細胞内シグナル伝達領域が、配列番号7のアミノ酸配列を含む、請求項21または請求項22に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記細胞内シグナル伝達領域が、CD3 ζドメインを含む、請求項24から23のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 前記CD3 ζドメインが、配列番号11または配列番号40のアミノ酸配列を含む、請求項24に記載の融合標的結合タンパク質。
- 4−1BBドメインおよびCD3 ζドメインの両方を含む、請求項21から25のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 配列番号12〜23からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、前記請求項のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- 医薬としての使用のための、前記請求項のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質。
- がんの予防または治療における使用のための、請求項28に記載の使用のための融合標的結合タンパク質。
- 標的結合部分と、細胞内シグナル伝達領域と、アルギニンまたはアルギニン前駆体の合成を促進するドメインとを含む融合標的結合タンパク質を含む細胞。
- 前記融合標的結合タンパク質が、請求項1から10、または16から27のいずれか1項に記載される融合標的結合タンパク質である、、請求項30に記載の細胞。
- 標的結合部分と、細胞内シグナル伝達領域と、トリプトファンまたはトリプトファン前駆体の合成を促進するドメインとを含む融合標的結合タンパク質を含む細胞。
- 前記融合標的結合タンパク質が、請求項11から27のいずれか1項に記載される融合標的結合タンパク質である、請求項32に記載の細胞。
- 医薬としての使用のための、請求項30から33のいずれか1項に記載の細胞。
- がんの予防または治療における使用のための、請求項34に記載の使用のための細胞。
- 標的結合部分と、細胞内シグナル伝達領域と、アルギニンまたはアルギニン前駆体の合成を促進するドメインとを含む融合標的結合タンパク質をコードする核酸。
- 前記融合標的結合タンパク質が、請求項1から10、または16から27のいずれか1項に記載される融合標的結合タンパク質である、請求項36に記載の核酸。
- 配列番号38、配列番号39、または配列番号37のDNA配列を含む、請求項36または請求項37に記載の核酸。
- 標的結合部分と、細胞内シグナル伝達領域と、トリプトファンまたはトリプトファン前駆体の合成を促進するドメインとを含む融合標的結合タンパク質をコードする核酸。
- 前記融合標的結合タンパク質が、請求項11から27のいずれか1項に記載される融合標的結合タンパク質である、請求項39に記載の核酸。
- 医薬としての使用のための、請求項36から40のいずれか1項に記載の核酸。
- がんの予防または治療における使用のための、請求項41に記載の使用のための核酸。
- 請求項1から30のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質、および/または請求項30から35のいずれか1項に記載の細胞、および/または請求項36から42のいずれか1項に記載の核酸を含む医薬組成物。
- 医薬としての使用のための、請求項43に記載の医薬組成物。
- がんの予防または治療における使用のための、請求項44に記載の使用のための医薬組成物。
- それを必要とする対象における状態を治療する方法であって、前記対象に請求項1から29のいずれか1項に記載の融合標的結合タンパク質を提供することを含む方法。
- 前記融合標的結合タンパク質が、請求項37から43のいずれか1項に記載の核酸配列の細胞発現によって提供される、請求項45に記載の方法。
- それを必要とする対象における状態を治療する方法であって、前記対象に請求項30から35のいずれか1項に記載の細胞を提供することを含む方法。
- それを必要とする対象における状態を治療する方法であって、前記対象に請求項36から42のいずれか1項に記載の核酸を提供することを含む方法。
- がんの治療における、請求項46から49のいずれか1項に記載の方法。
- ウイルス感染症の治療における、請求項46から50のいずれか1項に記載の方法。
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