JP2021095383A

JP2021095383A - 植物病害の防除剤及び植物の栽培方法

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Publication number: JP2021095383A
Application number: JP2019229588A
Authority: JP
Inventors: アリアンナ森; Mori Arianna; 尚秀浦田; Naohide URATA; 俊二鈴木; Shunji Suzuki; 是直青木; Yoshinao Aoki; 増俊野尻; Masutoshi Nojiri
Original assignee: Kaneka Corp; CBC Co Ltd
Current assignee: Kaneka Corp; CBC Co Ltd
Priority date: 2019-12-19
Filing date: 2019-12-19
Publication date: 2021-06-24
Anticipated expiration: 2039-12-19
Also published as: EP4079158A4; WO2021125272A1; EP4079158A1; JP7492823B2

Abstract

【課題】本発明は、べと病、疫病等の卵菌類の感染による植物病害の防除剤を提供する。【解決手段】本発明は、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を有効成分として含有する、卵菌類に属する微生物の感染による植物病害の防除剤に関する。本発明はまた、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を有効成分として含有する、ブドウべと病の防除剤に関する。【選択図】図１

Description

本発明は、環状ジペプチドを有効成分として含有する、卵菌類に属する微生物の感染による植物病害の防除剤に関する。
本発明はまた、植物に環状ジペプチドを施用することを含む、植物の栽培方法に関する。

卵菌類、ウイルス、細菌、真菌等の様々な微生物が植物に感染して植物病害を引き起こすことが知られている。このなかでも卵菌類微生物は野菜、果樹、花卉等様々な植物に感染してべと病、疫病、ピシウム病等の植物病害を引き起こし甚大な被害をもたらすことが知られている。

ブドウべと病は、ブドウにプラズモパーラ・ビティコーラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ）が感染して生じる病害である。ブドウべと病の伝統的な防除剤としてボルドー液と呼ばれる銅剤が知られている。しかしボルドー液は、土壌への銅の蓄積が問題となる。

環境に対する安全性の高い、卵菌類による植物病害の防除剤として、微生物自体や、微生物が生産し得る成分を活性成分として含む防除剤が開発されている。

特許文献１では、２分子のアミノ酸が環状に結合した２，５−ジケトピペラジン誘導体（環状ジペプチド）のうち特定の構造を有するものが、植物の軟腐病、立枯病、疫病、つる割病、斑点病、モザイク病等に対して防除作用を有することが記載されている。特許文献２では２，５−ジケトピペラジン誘導体（環状ジペプチド）の具体例として８０種の化合物が開示されている。
特許文献３では、所定のバチルス属細菌が生産する環状ペプチド系化合物が防かび剤として有効であることが開示されている。

特許文献４では、真菌の１種であるアルテルナリア・アルテナタ（植物病理学的には、アルタナリア・アルタナータ）が生産する環状ジペプチドであるシクロ（Ｌ−Ｐｈｅ−トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−Ｐｒｏ）、シクロ（Ｌ−Ｌｅｕ−トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−Ｐｒｏ）及びシクロ（Ｌ−Ａｌａ−トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−Ｐｒｏ）がブドウべと病菌プラズモパーラ・ビティコーラの防除に有効であることが開示されている。

非特許文献１ではシュードモナス・エルギノーサが生産する環状ジペプチドであるシクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｖａｌ）、シクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｐｈｅ）、シクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｔｙｒ）がオーキシン様活性を有していることが開示されている。

非特許文献２では海洋性のバシルス属細菌が生産する環状ジペプチドであるシクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｖａｌ）、シクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｔｙｒ）、シクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｐｈｅ）がアスベルギルス・ニガーに対する防除作用を有していることが開示されている。

非特許文献３では、バシルス属細菌が生産する環状ジペプチドであるシクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｌｅｕ）、シクロ（Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｌｅｕ）、シクロ（Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｔｙｒ）がアスベルギルス・フラブス等に対する防除作用を有していることが開示されている。

非特許文献４では、バシルスＫＮ０７株が生産する環状ジペプチドであるシクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｔｙｒ）が大腸菌等に対する防除作用を有していることが開示されている。

非特許文献５及び６では、リゾバクター・カプシシＡＺ７８株が生産する環状ジペプチドであるシクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｔｙｒ）がブドウのべと病菌プラズモパーラ・ビティコーラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ）及びジャガイモ等の疫病菌フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓ）に対する防除作用を有していることが開示されている。

非特許文献７では、バシルス・アミロクエファシエンスＱ−４２６株が生産する環状ジペプチドであるシクロ（Ａｌａ−Ｖａｌ）、シクロ（Ｐｒｏ−Ｖａｌ）、シクロ（Ｐｒｏ−Ｌｅｕ）、シクロ（Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）がカンジダ・アルビカンスに対する防除作用を有していることが開示されている。

特開２００５−２８９９４３号公報特表２０１３−５３１６８８号公報特開平５−５１３９７号公報国際公開ＷＯ２００８／００７２５１

PNAS 108,(17),7253-7258 (2011年) Chem. Pharm. Bull. 59,(1), 106-108 (2011年) Journal of Applied Microbiology 113, 914-924 (2012年) Biosci. Biotechnol. Biochem., 77, (7), 1449-1454(2013年) Chemistry of Heterocyclic compounds., 50, (2), 290-295 (2014年) Journal of Applied Microbiology 117,1168-1180 (2014年) Annals of Biological Sciences 5, (1), 47-53 (2017年)

上記のように微生物自体又は環状ジペプチド等の微生物由来成分により植物病害を防除する技術は従来から開発されている。しかしながら、卵菌類の感染による植物病害の防除剤として市場の需要に十分に応えることができるものはこれまでに提供されていない。
そこで本発明の一以上の実施形態は、べと病、疫病等の、卵菌類の感染による植物病害の防除剤を提供することを目的とする。

本発明は以下の発明を包含する。

（１）シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を有効成分として含有する、卵菌類に属する微生物の感染による植物病害の防除剤。
（２）前記植物病害が、べと病又は疫病である、（１）に記載の植物病害の防除剤。
（３）前記植物病害が、ブドウべと病である、（２）に記載の植物病害の防除剤。
（４）前記微生物が、プラズモパーラ・ビティコーラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ）又はフィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓ）である、（１）〜（３）のいずれか１項に記載の植物病害の防除剤。
（５）シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を有効成分として含有する、ブドウべと病の防除剤。
（６）植物に、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、
を含む、卵菌類に属する微生物の感染による植物病害の防除方法。
（７）ブドウに、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、
を含む、ブドウべと病の防除方法。
（８）植物に、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、及び
施用後の前記植物を生育させること
を含む植物の栽培方法。
（９）ブドウに、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、及び
施用後の前記ブドウを生育させること
を含むブドウの栽培方法。

シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上は、卵菌類に属する微生物の感染による植物病害を防除する活性が高い。
シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上は、ブドウべと病を防除する活性が高い。

実施例１において、環状ジペプチドを含まないべと病菌胞子懸濁液（コントロール）、及び、環状ジペプチド濃度４μＭ又は０．４μＭを含むべと病菌胞子懸濁液を接種後１０日目のリーフディスクの写真を示す。

＜活性成分＞
シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）は次式

で表される環状ジペプチドの一種である。シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）は、シクロ（Ｌ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｐｈｅ）又はｃＬＦと表すこともできる。
シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）は次式

で表される環状ジペプチドの一種である。シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）は、シクロ（Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｖａｌ）又はｃＰＶと表すこともできる。

本発明においてシクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）又はシクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）の塩としては、農業用途において許容される塩であれば特に限定されない。

本発明に用いられる、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上、並びに、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上（以下「活性成分」と称する）は、それぞれ、化学的に合成されたものであってもよいし、微生物、植物等の天然物に由来するものであってもよい。活性成分は、それぞれ、純度の高い合成品又は天然物からの精製品であってもよいし、活性成分を含有する微生物自体、該微生物の破砕物、該微生物の抽出物、該微生物の抽出物の粗精製物、植物自体、該植物の破砕物、該植物の抽出物、該植物の抽出物の粗精製物等の形態であってもよい。活性成分を含む微生物又は植物としては、活性成分を生産する能力を元来有する微生物又は植物であってもよいし、活性成分を生産する能力が、遺伝子組み換え技術等の手段により付与された微生物又は植物であってもよい。

＜活性成分を含む組成物＞
前記活性成分は、前記活性成分の１以上と他の成分とが組み合わされた組成物として植物に施用されてもよい。

他の成分としては、植物に有益な他の有用成分や、製剤化に必要な成分が挙げられる。植物に有益な他の有用成分としては、他の環状ペプチドや、肥料成分等が挙げられる。製剤化に必要な成分としては、担体、液体媒体、展着剤、界面活性剤、増粘剤、酸化防止剤等が挙げられる。

前記活性成分を含む組成物の形態としては、液体組成物であってもよいし、固体組成物であってもよい。

前記活性成分の１以上を含む組成物の製造方法は特に限定されず、各成分を適当な手段で混合することで製造することができ、固体組成物であれば必要に応じて粉砕、造粒、乾燥等の操作をして、液体組成物であれば必要に応じて撹拌、分散等の操作をして製造することができる。

前記活性成分の１以上を含む組成物は、対象植物の葉、茎、果実、花等の地上部又は根圏への施用に適した組成物であることができるが、好ましくは地上部への施用に適した組成物であり、より好ましくは対象植物の葉への施用に適した形状の組成物である。前記活性成分の１以上を含む、対象植物の葉への施用に適した組成物は、対象植物の葉面に直接噴霧又は塗布できる液体組成物；水、水溶性溶媒（メタノール、エタノール等）、これらのうち２種以上の混合溶媒等の溶媒により希釈してから施用される液体組成物；水、水溶性溶媒（メタノール、エタノール等）、これらのうち２種以上の混合溶媒等の溶媒により溶解又は分散してから施用される粉末、顆粒等の固体組成物；対象植物の葉面に直接散布される粉末（粉剤）等の固体組成物；クレー、タルク、土壌等の固形物により希釈してから施用される粉末（粉剤）等の固体組成物のような任意の形状であることができ、保存安定性を考慮すると固体組成物の形態が好ましい。

植物に施用される、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を含む組成物中での、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩の含有量は特に限定されないが、組成物全量あたりのシクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩の合計量として、通常は０．００００１重量％〜９９重量％、好ましくは０．０５重量％〜５０重量％が例示できる。

植物に施用される、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を含む組成物中での、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩の含有量は特に限定されないが、組成物全量あたりのシクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩の合計量として、通常は０．００００１重量％〜９９重量％、好ましくは０．０５重量％〜５０重量％が例示できる。

＜植物病害＞
本発明の一実施形態は、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を有効成分として含有する、卵菌類に属する微生物の感染による植物病害の防除剤に関する。
ここで卵菌類に属する微生物としては、べと病菌又は疫病菌が挙げられる。
べと病菌又は疫病菌と、それが感染する対象植物との具体的な組み合わせを以下に例示する。

（べと病の対象植物、原因となるべと病菌）
（野菜）
キュウリ、メロン、スイカ、カボチャのべと病菌シュードペロノスポーラ・キュベンシス（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｃｕｂｅｎｓｉｓ）、ダイコン、ハクサイ、キャベツ、カブのべと病菌ペロノスポーラ・ブラシケ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｂｒａｓｓｉｃａｅ）、タマネギ、ネギのべと病菌ペロノスポーラ・デストラクター（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｄｅｓｔｒｕｃｔｏｒ）、ホウレンソウのべと病菌ペロノスポーラ・スピナシエ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｓｐｉｎａｃｉａｅ）、シュンギクのベト病菌ペロノスポーラ・クリサンセミ−コロナリー（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｃｈｒｉｓａｎｔｈｅｍｉ−ｃｏｒｏｎａｒｉｉ）、レタスのべと病菌ブレミア・ラクツケ（Ｂｒｅｍｉａｌａｃｔｕｃａｅ）、セリ科植物のべと病菌プラズモパーラ・ニベア（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｎｉｖｅａ）。

（果樹）
ブドウのべと病菌プラズモパーラ・ビティコーラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ）。

（豆類と特用作物）
エンドウのべと病菌ペロノスポーラ・ピシ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｐｉｓｉ）、ソラマメのべと病菌ペロノスポーラ・ビシエ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｖｉｃｉａｅ）、テンサイのべと病菌ペロノスポーラ・シャクチー（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｓｃｈａｃｈｔｉｉ）、ナタネのべと病菌ペロノスポーラ・ブラシケ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｂｒａｓｓｉｃａｅ）、ホップのべと病菌（シュードペロノスポーラ・フムリ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｈｕｍｕｌｉ）、タバコのべと病菌ペロノスポーラ・タバシナ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｔａｂａｃｉｎａ）。

（花卉類）
バラのべと病菌ペロノスポーラ・スパルサ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｓｐａｒｓａ）、キクのべと病菌ペロノスポーラ・ダニカ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｄａｎｉｃａ）。

（疫病の対象植物、原因となる疫病菌）
トマト、ジャガイモの疫病菌フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓ）、トマト、キュウリの灰色疫病菌であり、且つトウガラシ、ピーマン、カボチャの疫病菌であるフィトフトラ・キャプシシ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｃａｐｓｉｃｉ）、メロン、キュウリ、イチゴ、ゴマ、カーネーション、ガーベラ、ユリ類の疫病菌であるフィトフトラ・ニコチアネ・バラエティー・パラジティカ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｎｉｃｏｔｉａｎａｅｖａｒ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ）、ダイズの茎疫病菌フィトフトラ・メガスペルマ・バラエティー・ソジャエ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｍｅｇａｓｐｅｒｍａｖａｒ．ｓｏｊａｅ）、アズキの茎疫病菌フィトフトラ・ビグネ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｖｉｇｎａｅ）、ソラマメ、タマネギ、ネギの疫病菌であるフィトフトラ・ニコチアネ・バラエティー・ニコチアネ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｎｉｃｏｔｉａｎａｅｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ）、キク、チューリップの疫病菌であるフィトフトラ・カクトラム（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｃａｃｔｏｒｕｍ）、スイカ疫病菌フィトフトラ・ドレクスレリ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｄｒｅｃｈｓｌｅｒｉ）、キュウリの疫病菌フィトフトラ・メロニス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｍｅｌｏｎｉｓ）、ホウレンソウ疫病菌フィトフトラ・エスピー（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｓｐ．）。

シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を有効成分として含む防除剤は、特に好ましくは、ブドウにおける、プラズモパーラ・ビティコーラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ）の感染により引き起こされるべと病、及び、トマト又はジャガイモにおける、フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓ）の感染により引き起こされる疫病の防除に特に適している。

対象となるブドウの品種は特に限定されないが、例えば、カベルネ・ソーヴィニヨン、メルロー、テンプラニーリョ、ピノ・ノワール、シラー、マスカット・ベリーＡ、巨峰、ピオーネ。デラウェア、クローン２１、クリムゾン・シードレス、フレームシードレス、レッドグローブ等が例示できる。

本発明の他の一実施形態は、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を有効成分として含有する、ブドウべと病の防除剤に関する。この実施形態に係る防除剤は、ブドウにおける、プラズモパーラ・ビティコーラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ）の感染により引き起こされるべと病の防除に適している。

＜植物病害の防除方法、植物の栽培方法＞
本発明の更に別の一実施形態は、
植物に、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、
を含む、卵菌類に属する微生物の感染による植物病害の防除方法に関する。

本発明の更に別の一実施形態は、
植物に、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、及び
施用後の前記植物を生育させること
を含む植物の栽培方法に関する。

施用を受ける植物は、上記の植物病害を防除することが望まれる植物であり、好ましくは上記の植物である。
シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上は、それを含む組成物の形態で植物に施用されてもよい。

対象植物への前記成分の施用は、対象植物の葉、茎、果実、花等の地上部への施用であってもよいし、根圏への施用であってもよいし、それらの組み合わせであってもよい。

シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上の、植物への施用量としては、植物の種類や防除時の慣行散布液量に応じて適宜調節できるが、通常は、１回の施用量として、０．５ｇ／ｈａ〜２０００ｇ／ｈａ、好ましくは、１０ｇ／ｈａ〜５００ｇ／ｈａが例示できる。

シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上の、ブドウへの施用回数は１回であってもよいし複数回であってもよいが、好ましくは複数回、例えば２〜１０回、特に３〜５回である。

施用後の植物を生育させる工程は、土壌中での生育等の、通常の生育方法で行えばよい。

本発明の更に別の一実施形態は、
ブドウに、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、
を含む、ブドウべと病の防除方法に関する。

本発明の更に別の一実施形態は、
ブドウに、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、及び
施用後の前記ブドウを生育させること
を含むブドウの栽培方法に関する。

シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上は、それを含む組成物の形態でブドウに施用されてもよい。

対象となるブドウへの前記成分の施用は、ブドウの葉、茎、果実、花等の地上部への施用であってもよいし、根圏への施用であってもよいし、それらの組み合わせであってもよいが、好ましくは地上部への施用であり、特に好ましくは葉への施用である。

シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上の、ブドウへの施用量としては、植物の種類や防除時の慣行散布液量に応じて適宜調節でき、特に限定されないが、例えば、１回の施用量として、１ｇ／ｈａ〜４０００ｇ／ｈａ、好ましくは、１０ｇ／ｈａ〜１０００ｇ／ｈａが例示できる。

シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上の、ブドウへの施用回数は１回であってもよいし複数回であってもよいが、好ましくは複数回、例えば２〜１０回、特に３〜５回である。

施用後のブドウを生育させる工程は、土壌中での生育等の、通常の生育方法で行えばよい。

以下の実施例、比較例の実験において環状ジペプチドを以下の通り略記する。
シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）：ｃＬＦ
シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）：ｃＰＶ、
シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−チロシル）：ｃＰＹ

＜実施例１：リーフディスク試験＞
ブドウ（品種甲州）の葉を生長点から４〜７枚目の間で採集した。直径１．５ｃｍのコルクボーラーで採集した葉をくりぬきリーフディスクにした。作製したリーフディスクを、ぬらしたペーパータオルを敷いたシャーレに裏面を上に向けて並べた。事前に培養しておいたブドウべと病菌Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ（山梨大学ブドウ圃場から分離した株を継代したもの）の胞子を筆で集め、胞子懸濁液をつくった。胞子懸濁液を血球計算盤にて５×１０^３ｓｐｏｒｅｓ／ｍｌに調製した。あらかじめ終濃度（４μＭ、０．４μＭ、０μＭ）の１０倍に調製した環状ジペプチド（ｃＬＦ、ｃＰＶ、ｃＰＹ）溶液を胞子懸濁液で希釈して、環状ジペプチドが終濃度（４μＭ、０．４μＭ、０μＭ）となるように調製した。

環状ジペプチドを上記の各濃度で含む調製した胞子懸濁液をリーフディスクに１０μｌずつ４カ所に接種した（胞子数は約５０ｓｐｏｒｅｓ／カ所）。接種したリーフディスクを、１６時間光照射／８時間暗黒条件で２２℃になるように設定したインキュベータにて培養し、接種から１０日目に取り出し、下記の指標を用いて病斑面積を点数化した。病班面積がリーフディスクの３分の２以上を５点、２分の１以上３分の２未満を４点、３分の１以上２分の１未満を３点、６分の１以上３分の１未満を２点、６分の１未満を１点、なしを０点とした。評価をそれぞれの濃度でＮ＝３で実施し平均値を算出した。

その結果、コントロール（環状ジペプチド濃度０μＭ）＝４．３点であったのに対して、環状ジペプチド濃度４μＭではｃＬＦ＝０点、ｃＰＶ＝０点、ｃＰＹ＝１．３点、環状ジペプチド濃度０．４μＭではｃＬＦ＝０．３点、ｃＰＶ＝０．７点、ｃＰＹ＝２．０点であった。図１に接種後１０日目の各リーフディスクの写真を示す。

以上の結果より、べと病菌に対する抗菌作用が既に報告されているｃＰＹよりも、ｃＬＦ及びｃＰＶのほうが、より低濃度で、べと病菌に対する抗菌作用を発揮することが分かった。

＜実施例２：ポット試験＞
ブドウ（品種甲州）の苗木１８本（ポット栽培）を用意し、生長点から５枚の葉が生えるまで２５℃、１６時間光照射／８時間暗黒条件で培養した。ｃＬＦ水溶液を３種類（４０μＭ、４μＭ、０．４μＭ）、ｃＰＶを２種類（１４７μＭ、１４．７μＭ）の濃度で用意し、コントロールには水道水を用いた。各濃度のｃＬＦ水溶液、ｃＰＶ水溶液及び水道水（コントロール）はそれぞれ１０ｍｌ用意し、展着剤としてアプローチＢＩを１０μｌずつ添加した。各溶液を３本ずつ苗木に噴霧し、４時間２５℃で風乾させた。その後、事前に用意しておいたブドウべと病菌Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ（山梨大学ブドウ圃場から分離した株を継代したもの）胞子懸濁液（１×１０^４ｓｐｏｅｒｓ／ｍｌ）を苗木１本あたり５ｍｌずつ接種した。接種後、湿度を保つために半透明のビニール袋で苗木を覆った。２５℃、暗所に１６時間置いたのち、２５℃、１６時間光照射／８時間暗黒条件で１０日間培養した。１０日後、ブドウべと病菌の病斑数および病斑面積を測定した。病斑面積は下記指標で点数化した。病班面積が葉の２分の１以上を５点、３分の１以上２分の１未満を４点、４分の１以上３分の１未満を３点、８分の１以上４分の１未満を２点、８分の１未満を１点、なしを０点とした。評価はｃＬＦ、ｃＰＶ、コントロールでそれぞれ３本の苗木（１本当たり５枚の葉を対象）を対象として実施し、葉１枚あたりの平均値を算出した。

その結果、葉１枚当たりの病班数は、コントロール（水道水）では２４．９であったのに対して、ｃＬＦ４０μＭ施用では１．８、ｃＬＦ４μＭ施用では５．０、ｃＬＦ０．４μＭ施用では１０．５、ｃＰＶ１４７μＭ施用では２．９、ｃＰＶ１４．７μＭ施用では３．１であった。

病班面積の評価点は、コントロール（水道水）では３．５点であったのに対して、ｃＬＦ４０μＭ施用では０．７点、ｃＬＦ４μＭ施用では１．２点、ｃＬＦ０．４μＭ施用では１．７点、ｃＰＶ１４７μＭ施用では０．８点、ｃＰＶ１４．７μＭ施用では０．６点であった。
以上の結果より、より実際の圃場状況に近い苗木ポット試験においても、ｃＬＦ、ｃＰＶがべと病菌に対する抗菌作用を発揮することが分かった。

＜実施例３：ジャガイモ疫病、圃場試験＞
３月２７日にジャガイモ（品種デジマ）の種芋植え付けを行った。処理区画は１区３．６ｍ^２に１６株、これを３連設けた。その後、通常通り栽培し、５月１６日（開花初期）に、環状ジペプチドの１回目の散布を実施した。散布方法は以下の通り。ｃＬＦ水溶液を３種類（１００μＭ、４０μＭ、４μＭ）の濃度で用意し、コントロールには水道水を用いた。各濃度のｃＬＦ水溶液、水道水（コントロール）には展着剤としてアプローチＢＩを０．１％ずつ添加した。各溶液を噴霧器を用いて１０アール当たり２２０リットルの割合で散布した。

１回目の散布後、５月２３日、６月３日、６月１２日、６月２１日に同じ手順による散布を実施した。なお、疫病の自然発生が遅かったために、６月１６日にジャガイモ疫病菌Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓの胞子懸濁液を１株あたり４ｍｌ噴霧接種し、６月２１日に疫病菌の初発が確認された。７月２日に病害調査を行った。

発病程度を、以下で定義する基準に基づき評価点で表した。
０：無発病
１：４分の１程度の葉に発病が認められる
２：ほぼ２分の１の葉に発病、時には１部の葉が枯死
３：ほとんどの葉（４分の３程度）が発病、枯死葉がかなり多い
４：葉はほとんど枯死（４分の３以上）、時には茎部にも枯死が認められる

発病葉率を、次式により算出した。
発病株数／調査株数

発病度を、次式により算出した。
［０×（発病程度０の株数）＋１×（発病程度１の株数）＋２×（発病程度２の株数）＋３×（発病程度３の株数）＋４×（発病程度４の株数）］／（全調査株数×４）×１００

防除価を、次式により算出した。
１００−（処理区の発病度／コントロール区の発病度）×１００

病害調査の結果を下記の表に示す。

Claims

シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を有効成分として含有する、卵菌類に属する微生物の感染による植物病害の防除剤。
前記植物病害が、べと病又は疫病である、請求項１に記載の植物病害の防除剤。
前記植物病害が、ブドウべと病である、請求項２に記載の植物病害の防除剤。
前記微生物が、プラズモパーラ・ビティコーラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ）又はフィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓ）である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の植物病害の防除剤。
シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を有効成分として含有する、ブドウべと病の防除剤。
植物に、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、
を含む、卵菌類に属する微生物の感染による植物病害の防除方法。
ブドウに、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、
を含む、ブドウべと病の防除方法。
植物に、シクロ（Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、及び
施用後の前記植物を生育させること
を含む植物の栽培方法。
ブドウに、シクロ（Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル）及びその塩から選択される１以上を施用すること、及び
施用後の前記ブドウを生育させること
を含むブドウの栽培方法。