JP2021049351A - Ｖｅｇｆ拮抗薬を収容したプレフィルドプラスチックシリンジ - Google Patents

Abstract

【課題】ＶＥＧＦ拮抗薬を投与するためのシリンジを提供する。【解決手段】プレフィルドシリンジ、このシリンジを含むキット、及び眼疾患の治療においてＶＥＧＦ拮抗薬を投与するための該シリンジの使用に関する。プレフィルドシリンジはＶＥＧＦ拮抗薬を収容し、かつシリコーン不使用のプラスチックバレルを備えている。【選択図】なし

Description

本発明は、ＶＥＧＦ拮抗薬を収容し、かつシリコーン不使用（シリコーンフリー）のプラスチックバレルを備えたプレフィルドシリンジ（薬剤充填済み注射器）、このシリンジを含むキット、及び眼疾患の治療においてＶＥＧＦ拮抗薬を投与するための該シリンジの使用に関する。

加齢黄斑変性症及び糖尿病性黄斑浮腫のような眼疾患は、眼内の血管の無制限な成長によって引き起こされる。従って、これら及び同様の疾患を治療する１つの選択肢は、眼内における血管新生を抑制することである。ＶＥＧＦは、血管新生を刺激する大きな因子であるので、ＶＥＧＦは血管新生を下方制御するための興味を引く標的である。

アイリーア（Ｅｙｌｅａ）（登録商標）の名称で販売されているアフリベルセプトは、ヒトＩｇＧｌ免疫グロブリンのＦｃ部に融合されたヒトＶＥＧＦ受容体１及び２の細胞外ドメインからのＶＥＧＦ結合部からなる組換え融合タンパク質である。アフリベルセプトは滲出型黄斑変性の治療に承認されている。ルセンティス（Ｌｕｃｅｎｔｉｓ）（登録商標）の名称で販売されているラニビズマブは、ＶＥＧＦに対するヒト化マウスモノクローナル抗体のＦａｂフラグメントであり、加齢黄斑変性症及び糖尿病性黄斑浮腫のような眼疾患の治療に承認された。加えて、眼疾患の治療について、ＶＥＧＦに対する完全長抗体ベバシズマブ（アバスチン（登録商標））の適応外使用は一般的である。ラニビズマブ及びベバシズマブは、血管新生性加齢黄斑変性症の治療において同様の有効性プロファイルを有すると思われるが、稀な有害事象はベバシズマブにおいてより頻繁に生じるように思われる（非特許文献１）。

ベバシズマブ及びラニビズマブの双方はガラスバイアルで提供され、それらの薬剤は、通常、眼に注射する直前にシリンジ（注射器）によって前記ガラスバイアルから取り出される。これらの抗体の市販のバイアルの全量を使用するために、いくつかの企業は、前記バイアルを無菌条件下で、すぐに使用できるプラスチックシリンジに詰め直すことにより、１本のガラスバイアルから２本以上のシリンジをとることを可能にしている。しかしながら、詰め直されたシリンジ内において、シリコーンオイルの微小滴及びタンパク質凝集物が観察された（非特許文献２）。そのようなシリコーンオイル汚染物質及びタンパク質凝集物は、ベバシズマブ又はラニビズマブによって治療された患者に見られる眼内圧の上昇の原因となることがある（非特許文献３及び４）。

特許文献１は、シリンジのシリコーン含有量が低い、ＶＥＧＦ拮抗薬を収容したプレフィルドシリンジを開示している。この文書の開示全体はガラスシリンジの使用に焦点を当てており、従って、そのシリンジ内には低量のシリコーンが存在するはずであることを教示している。

さらに、最近、プレフィルドラニビズマブシリンジが欧州医薬品庁（Ｅｕｒｏｐｅａｎ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ Ａｇｅｎｃｙ：ＥＭＡ）によって承認された。そのシリンジバレルは、シリコーンオイルの水中エマルジョンによって噴霧被覆され、続いて熱固定された（いわゆる「焼き付けシリコーン」）ホウケイ酸ガラスからなる（非特許文献５及び６）
プレフィルドシリンジは、バイアル及び別々に提供されるシリンジと比較して、利便性、値ごろ感、精度、無菌状態及び安全性の向上のような多くの利点を有する。プレフィルドシリンジの使用により、より高い投与量精度、バイアルから薬剤を吸い出す間に起こり得る針刺し事故の可能性の低減、薬剤を再構成したり、かつ／又は薬剤をシリンジに吸い込んだりする必要があることによる投薬過誤を低減する予め計量された投与量、及び薬剤の無駄を最小限にすることによりコストの削減を助けるシリンジの過剰充填の低減がもたらされる。

しかしながら、承認されたラニビズマブプレフィルドシリンジのようなガラスシリンジは破損し易く、プラスチックシリンジに比べて比較的大きな重量を有する。
さらに、ガラスシリンジは、ガラスバレル内におけるストッパーの正しい動作を可能し、それにより効率的で正確な薬物送達を可能にするために、シリコーンによって処理される必要がある。ＶＥＧＦ拮抗薬の硝子体内投与後に硝子体腔内においてシリコーンオイル滴が生じることが分かっており、該シリコーンオイルは注射に用いられたニードル（注射針）及びシリンジから由来するという仮説が提示された（非特許文献７）
加えて、ステーキド−イン ニードル（ｓｔａｋｅｄ−ｉｎ ｎｅｅｄｌｅ）をガラスシリンジに取り付けるのに必要な接着剤は、不純物又はタンパク質の酸化の増大につながり得る（非特許文献８及び９）。

最後に、ガラスプレフィラブルシリンジの製造中に、通常、タングステンピンが用いられる。プレフィルドシリンジ内に見られる可溶性タングステンは、タンパク質の凝集及びタンパク質の酸化を招くことが示されている（非特許文献１０及び１１）。

ガラスプレフィルドシリンジに関する問題は、過去にいくつかの製品回収に至ったことがある。
いくつかの非ガラスプレフィルドシリンジが記載されている。特許文献２はポリカーボネートシリンジを開示しているが、シリンジバレルがシリコーンによって被覆されているかどうか、及びシリンジが眼内投与に適しているかどうかは明らかではない。特許文献３は、シリコーンで被覆されたガラスシリンジにおいてよりも、潤滑剤を有さない環状オレフィンポリマーシリンジにおける方が、可視粒子の形成が少ないことを開示している。しかしながら、このシリンジを眼科用途に用いることができるかどうかは明らかではない。

従って、薬剤を眼に安全に送達することができ、ガラスシリンジの使用における上記の不都合を回避することができるが、その内部で薬剤が保管期間中に安定している非ガラスシリンジが依然として必要とされている。

ジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ）及びシャルマー（Ｓｈａｒｍａ）、２０１３年、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ、第２４巻、第３号、第２０５〜１２頁） リウ（Ｌｉｕ）ら、２０１１年、Ｉｎｖｅｓｔ． Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ． Ｖｉｓ． Ｓｃｉ．、第５２巻、第２号、第１０２３〜１０３４頁 カフーク（Ｋａｈｏｏｋ）ら、２００９年、Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ Ｓｕｒｇ． Ｌａｓｅｒｓ Ｉｍａｇｉｎｇ、第４０巻、第２９３〜２９５頁 グッド（Ｇｏｏｄ）ら、２０１１年、Ｂｒ． Ｊ． Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．、第９５巻、第８号、第１１１１〜１１１４頁 ２０１４年３月２０〜２３日に開催された５ｔｈ Ｗｏｒｌｄ Ｃｏｎｇｒｅｓｓ ｏｎ Ｃｏｎｔｒｏｖｅｒｓｉｅｓ ｉｎ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙにおけるクルナス（Ｃｌｕｎａｓ）らによるポスター発表 ｔｈｅ ＡＲＶＯ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ２０１４におけるミショー（Ｍｉｃｈａｕｄ）らのポスター発表 バクリ（Ｂａｋｒｉ）及びエクダヴィ（Ｅｋｄａｗｉ）、２００８年、Ｒｅｔｉｎａ、第２８巻、第 ９９６〜１００１頁 ２０１１年１１月７〜１１日にバゼル（Ｂａｓｅｌ）で開催されたｔｈｅ ２０１１ ＰＤＡ Ｅｕｒｏｐｅ Ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｅ ｏｆ Ｐｒｅ−Ｆｉｌｌｅｄ Ｓｙｒｉｎｇｅｓ ａｎｄ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ Ｄｅｖｉｃｅｓにおけるアドラー（Ａｄｌｅｒ）の発表 ２０１１年６月２２〜２３日にベテスダ（Ｂｅｔｈｅｓｄａ）で開催されたｔｈｅ ＰＤＡ Ｓｉｎｇｌｅ Ｕｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｗｏｒｋｓｈｏｐにおけるマルコビッチ（Ｍａｒｋｏｖｉｃ）の発表 リウ（Ｌｉｕ）ら（２０１０年）、ＰＤＡ Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ． Ｔｅｃｈｎｏｌ．、第６４巻、第１号、第１１〜１９頁 ザイドル（Ｓｅｉｄｌ）ら（２０１２年）、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．、第２９巻、第１４５４〜１４６７頁）

オーストラリア特許第ＡＵ２０１２１０１６７７Ａ４号 国際公開第ＷＯ２０１１／１１７８７８Ａ１号 国際公開第ＷＯ２００９／０９９６４１Ａ２号

プラスチックシリンジは、タンパク質の修飾をもたらし得る酸素のような気体に対してガラスシリンジよりも透過性が高いことを想定していたが（例えば、ディーリック（Ｄｉｅｒｉｃｋ）及びヨシノ、２０１５年、ＯｎＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙ、第５５号、第１０〜１６頁を参照されたい）、本発明者らは、驚いたことに、抗ＶＥＧＦ抗体溶液が、シリコーン不使用のプラスチックシリンジバレルを備えたプレフィルドシリンジに充填された場合、保管中に安定している、すなわち抗体が有意に改質されず、かつ有意に凝集しないことを見出した。従って、前記シリンジを酸素吸収材と共に梱包する必要がない。さらに、本発明のプレフィルドシリンジは相当量の粒子を含有しない。最後に、本発明のプレフィルドシリンジからの溶液の注射に必要とされる力は、ガラスシリンジからの注射に必要とされる力と同等である。

よって、本発明のプレフィルドシリンジは、上記で検討したガラスシリンジの不都合を克服し、ＶＥＧＦ拮抗薬の眼への投与に用いられ得る。

従って、本発明は、ＶＥＧＦ拮抗薬の液体製剤を収容し、かつシリンジバレルを備えたプレフィルドシリンジを提供し、前記シリンジバレルはプラスチックから製造されており、かつシリコーン不使用である。

好適な実施形態において、前記ＶＥＧＦ拮抗薬は、抗ＶＥＧＦ抗体、又はそのような抗体の抗原結合フラグメント、又は可溶性ＶＥＧＦ受容体融合タンパク質であり、より好適には、前記抗ＶＥＧＦ拮抗薬は、ラニビズマブ又はアフリベルセプトである。

好適には、拮抗薬濃度は１〜１００ｍｇ／ｍＬである。
本発明の一態様において、前記プレフィルドシリンジは、１０μｍ以上の直径を有する粒子を液体製剤１ｍＬ当たり５０個未満含有する。

本発明の別の態様において、前記プレフィルドシリンジは、２５μｍ以上の直径を有する粒子を液体製剤１ｍＬ当たり５個未満含有する。
本発明のさらに別の態様において、前記プレフィルドシリンジは１０Ｎ以下の滑動力を有する。

好適な実施形態において、前記プレフィルドシリンジは、シリコーン不使用のストッパーをさらに備える。
好適には、前記シリンジバレルは、シクロオレフィンポリマー又はシクロオレフィンコポリマーから製造されている。

好適な実施形態において、前記シリンジバレルは、シリコーンコーティング以外の内側コーティングを備える。
また好適には、前記プレフィルドシリンジはステーキドニードル（ｓｔａｋｅｄ ｎｅｅｄｌｅ）を備える。

本発明はまた、本発明に従った１つ以上のプレフィルドシリンジを含むキットを提供する。好適には、前記キットはブリスターパックである。
前記プレフィルドシリンジは、眼疾患を有する患者、好適には、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）による視力障害、網膜静脈閉塞（網膜分枝静脈閉塞又は網膜中心静脈閉塞）に付随して起こる黄斑浮腫による視力障害、糖尿病性黄斑浮腫を有する患者における糖尿病網膜症、又は病的近視に付随して起こる脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）による視力障害のうちから選択される眼疾患を有する患者に対するＶＥＧＦ拮抗薬の投与に用いられ得る。

好適には、３０〜１００μＬの量の液体製剤が患者に投与される。

表１に列記したシリンジにおいて５分間（ａ）、２週間（ｂ）、４週間（ｃ）にわたるニードルからストッパーまでの回転後、並びに５回の凍結／解凍サイクル後（ｄ）の１０μｍ以上の直径を有する粒子の数を示す図であって、シリンジ１０は５分後及び２週間後の分析では測定されなかったことを示す図。 表１に列記したシリンジにおいて５分間（ａ）、２週間（ｂ）、４週間（ｃ）にわたるニードルからストッパーまでの回転後、並びに５回の凍結／解凍サイクル後（ｄ）の２５μｍ以上の直径を有する粒子の数を示す図であって、シリンジ１０は５分後及び２週間後の分析では測定されなかったことを示す図。 ５分間（ａ）、２週間（ｂ）、及び４週間（ｃ）にわたるニードルからストッパーまでの回転後、並びに５回の凍結／解凍サイクル後（ｄ）の表１に列記したシリンジの内容物のＲＰ−ＨＰＬＣ分析によって測定された親水性種のパーセンテージを示す図であって、シリンジ１０は５分後及び２週間後の分析では測定されなかったことを示す図。 ５分間（ａ）、２週間（ｂ）、及び４週間（ｃ）にわたるニードルからストッパーまでの回転後、並びに５回の凍結／解凍サイクル後（ｄ）の表１に列記したシリンジの内容物のＲＰ−ＨＰＬＣ分析によって測定された疎水性種のパーセンテージを示す図であって、シリンジ１０は５分後及び２週間後の分析では測定されなかったことを示す図。 ５分間（ａ）、２週間（ｂ）、及び４週間（ｃ）にわたるニードルからストッパーまでの回転後、並びに５回の凍結／解凍サイクル後（ｄ）の表１に列記したシリンジの内容物の陽イオン交換クロマトグラフィによって測定された酸性バリアントのパーセンテージを示す図であって、シリンジ１０は５分後及び２週間後の分析では測定されなかったことを示す図。 ５分間（ａ）、２週間（ｂ）、及び４週間（ｃ）にわたるニードルからストッパーまでの回転後、並びに５回の凍結／解凍サイクル後（ｄ）の表１に列記したシリンジの内容物の陽イオン交換クロマトグラフィによって測定された塩基性バリアントのパーセンテージを示す図であって、シリンジ１０は５分後及び２週間後の分析では測定されなかったことを示す図。 表１に列記したシリンジの内容物の５分間（ａ）、２週間（ｂ）、４週間（ｃ）にわたるニードルからストッパーまでの回転後、並びに５回の凍結／解凍サイクル後（ｄ）のサイズ排除クロマトグラフィによるタンパク質の凝集の分析を示す図であって、シリンジ１０は５分後及び２週間後の分析では測定されなかったことを示す図。

以下において例示的に記載される本発明は、本願に具体的には開示されていない任意の１つ以上の要素又は１つ以上の限定事項を有さない状態で適切に実施されてもよい。
本発明は特定の実施形態に関して記載するが、本発明はそれらの実施形態に限定されるものではなく、特許請求の範囲によってのみ限定されるものとする。

本説明及び特許請求の範囲において「備える（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語が用いられる場合、該用語は他の要素を排除しない。本発明において、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」という用語は「備える」という用語の好適な実施形態であると見なされる。以下において、ある群が少なくとも特定数の実施形態を備えると定義される場合には、これはまた、好適には、これらの実施形態のみからなる群を開示すると理解されるべきである。

本発明において、「得られた（ｏｂｔａｉｎｅｄ）」という用語は、「得られる（ｏｂｔａｉｎａｂｌｅ）」という用語の好適な実施形態であると見なされる。
単数名詞に言及するときに不定冠詞又は定冠詞、例えば「ａ」、「ａｎ」、又は「ｔｈｅ」が用いられる場合、特段の断りがない限り、これはその名詞の複数形を含む。

「プレフィルドシリンジ」は、充填された状態で製造業者によって供給されるシリンジである。すなわち、計量された投与量の投与すべき薬剤が購入時に既にシリンジ内に存在しており、投与の準備ができている。具体的には、薬剤を含有する医薬組成物を、該組成物を収容するバイアルから、空のシリンジを用いることによって取り出す必要がない。本発明の意味におけるプレフィルドシリンジという用語は、その内容物が詰め直し過程においてバイアルから取り出されたものであるシリンジを意味しない。

本発明のプレフィルドシリンジに収容された薬剤、すなわちＶＥＧＦ拮抗薬、好適には、抗ＶＥＧＦ抗体は、２〜８℃の温度で、少なくとも６か月間、好適には少なくとも９か月間、より好適には少なくとも１年間、特に好適には少なくとも１８か月間、最適には約２年間にわたって安定している。本発明のプレフィルドシリンジに収容された薬剤、すなわち、ＶＥＧＦ拮抗薬、好適には抗ＶＥＧＦ抗体又はＶＥＧＦ受容体融合タンパク質、より好適にはラニビズマブ又はアフリベルセプトは、室温、すなわち２０℃〜２５℃の温度で、少なくとも２４時間、好適には少なくとも３日間又は１週間、より好適には少なくとも２週間又は３週間、最適には約４週間にわたって安定している。本発明のプレフィルドシリンジに収容された薬剤、すなわち、ＶＥＧＦ拮抗薬、好適には抗ＶＥＧＦ抗体又はＶＥＧＦ受容体融合タンパク質、より好適にはラニビズマブ又はアフリベルセプトは、約４０℃の温度で、少なくとも１時間又は２時間、好適には少なくとも４時間又は６時間、より好適には少なくとも１０時間又は１２時間、最適には少なくとも１８時間又は２４時間にわたって安定している。

前記シリンジ内における薬剤の安定性は、酸化種及び脱アミド種などの薬剤の修飾物を検出することができるイオン交換クロマトグラフィ、又は薬剤の凝集物を検出することができるサイズ排除クロマトグラフィによって測定することができる。そのような分析の説明は実施例の節に示す。

前記薬剤、すなわちＶＥＧＦ拮抗薬、好適には、抗ＶＥＧＦ抗体は、凝集物及び化学的に修飾された種を含むすべての不純物の合計が、未修飾の凝集していない薬剤の量に対して、２％未満、好適には１．５％未満、より好適には１．２％、最適には１％未満である場合に安定していると考えられる。

本発明のプレフィルドシリンジに収容された薬剤、すなわちＶＥＧＦ拮抗薬、好適には抗ＶＥＧＦ抗体又はＶＥＧＦ受容体融合タンパク質、より好適にはラニビズマブ又はアフリベルセプトは、２〜８℃の温度で、少なくとも６か月間、好適には少なくとも９か月間、より好適には少なくとも１年間、特に好適には少なくとも１８か月間、最適には約２年間にわたって保管された場合に、その生物学的活性を維持する。本発明のプレフィルドシリンジに収容された薬剤、すなわち、ＶＥＧＦ拮抗薬、好適には抗ＶＥＧＦ抗体又はＶＥＧＦ受容体融合タンパク質、より好適にはラニビズマブ又はアフリベルセプトは、室温、すなわち２０℃〜２５℃の温度及び６０％の相対湿度で、少なくとも１日間、好適には３日間又は１週間、より好適には２週間又は３週間、最適には１か月間にわたって保管された場合に、その生物学的活性を維持する。本発明のプレフィルドシリンジに収容された薬剤、すなわち、ＶＥＧＦ拮抗薬、好適には抗ＶＥＧＦ抗体又はＶＥＧＦ受容体融合タンパク質、より好適にはラニビズマブ又はアフリベルセプトは、約４０℃の温度及び７５％の相対湿度で、少なくとも１時間又は２時間、好適には少なくとも４時間又は６時間、より好適には少なくとも１０時間又は１２時間、最適には少なくとも１８時間又は２４時間にわたって保管された場合に、その生物学的活性を維持する。

前記ＶＥＧＦ拮抗薬、好適には抗ＶＥＧＦ抗体又はＶＥＧＦ受容体融合タンパク質、より好適にはラニビズマブ又はアフリベルセプトの生物学的活性は、ヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）及びＶＥＧＦと共に上述した条件下で保管された拮抗薬の異なる稀釈液をインキュベートし、前記拮抗薬の存在下における細胞のＶＥＧＦによって誘導された増殖を前記拮抗薬と共にインキュベートされていない細胞と比較して測定することによって、すなわち、プロメガ（Ｐｒｏｍｅｇａ）から入手可能なセルタイター−ブルー（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｂｌｕｅ）（登録商標）細胞生存性試験によって、測定することができる。ＶＥＧＦ拮抗薬はＶＥＧＦによって誘導される情報伝達を抑制するので、試料中に生物学的に活性なＶＥＧＦ拮抗薬が存在するならば、ＶＥＧＦによって誘導される増殖は低減されるであろう。

前記ＶＥＧＦ拮抗薬、好適には抗ＶＥＧＦ抗体、又はＶＥＧＦ受容体融合タンパク質、より好適にはラニビズマブ又はアフリベルセプトは、前記プレフィルドシリンジ内での保管後にその生物学的活性を維持し、そのため、ＶＥＧＦによって誘発される増殖はＨＵＶＥＣ中で抑制される。

プレフィルドシリンジの構成要素は当業者に知られており、基本的にシリンジバレルと、プランジャーとを備える。
前記シリンジバレルは既定量の液体組成物を収容しており、該液体組成物は、プランジャーがバレル内に押し込まれ、バレルに沿って移動すると、前記バレルの一端に配置された放出口を介してバレルから放出され得る。前記シリンジバレルは、典型的にはほぼ筒状形状を有する。前記放出口は、シリンジバレルの残部より小さな直径を有する通路が内部に延びる突出部を放出口端から備えてもよい。前記放出口は、例えば、ルアーロックタイプ接続によって、ニードル、又は密封装置のような他の付属品との接続に適合し得る。前記密封装置は、バレルを密封することができ、ニードルがシリンジに取り付けられるようにするために除去され得る。この密封は、フェッター ファーマ インターナショナル ゲーエムベーハー（Ｖｅｔｔｅｒ Ｐｈａｒｍａ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＧｍｂＨ）のＯＶＳ（商標）システムのような既知の密封装置の使用によって行うことができる。

本発明のプレフィルドシリンジでは、前記プレフィルドシリンジがステーキドニードルを備えて供給され、使用前に組み立てられる必要がないように、前記シリンジ放出口はニードルと堅固に接続されている。この場合、注射の前のシリンジの組み立て中におけるニードルによる怪我の危険性が低減される。ステーキドニードルは、ステーキドニードルをシリンジ内に成形することができるので、接着剤を使用することなく、本発明のプレフィルドプラスチックシリンジに取り付けることができる。対照的に、ガラスシリンジにニードルを取り付けるためには接着剤が必要とされ、不純物又はタンパク質の酸化の増大につながり得る（２０１１年１１月７〜１１日にバーゼル（Ｂａｓｅｌ）で開催された２０１１ ＰＤＡ Ｅｕｒｏｐｅ Ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｅ ｏｆ Ｐｒｅ−Ｆｉｌｌｅｄ Ｓｙｒｉｎｇｅｓ ａｎｄ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ Ｄｅｖｉｃｅｓにおけるアドラー（Ａｄｌｅｒ）らの発表；２０１１年６月２２〜２３日にベテスダ（Ｂｅｔｈｅｓｄａ）で開催されたＰＤＡ Ｓｉｎｇｌｅ Ｕｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｗｏｒｋｓｈｏｐにおけるマルコビッチの発表）。

硝子体内投与のためには、ニードルサイズは典型的には３０ゲージであるが、３１ゲージ、３２ゲージ、３３ゲージ、及び３４ゲージのニードルも用いられてもよい。前記プレフィルドシリンジは、注入後の針刺しの危険性をさらに回避するために、受動的なニードル安全ガードを装備していてもよい。

本発明のプレフィルドシリンジは、プラスチック材料から製造されるシリンジバレルを備える。好適には、前記プラスチック材料はシクロオレフィンポリマー及びシクロオレフィンコポリマーから選択される。

シクロオレフィンコポリマーは、８，９，１０−トリノルノルン−２−エン又は１，２，３，４，４ａ，５，８，８ａ−オクタヒドロ−１，４：５，８−ジメタノナフタレンのような環式モノマーのエタンとの連鎖共重合によって生成され得る。適当なコポリマーは、様々な等級で入手可能なトパス（Ｔｏｐａｓ）（商標）タイプのものである。

シクロオレフィンポリマーは、例えば、様々な環式モノマーの開環メタセシス重合、及びそれに続く水素化によって生成され得る。シクロオレフィンポリマー材料で形成された適当な市販の容器としては、ＣＺ（商標）樹脂、ゼオノア（Ｚｅｏｎｏｒ）（商標）及びゼオネックス（Ｚｅｏｎｅｘ）（商標）から製造された容器が挙げられる。

本発明によれば、前記シリンジバレルはシリコーン不使用である。シリコーン不使用とは、前記シリンジバレルの内面がシリコーンオイルで処理されていないことを意味する。従って、本発明のプレフィルドシリンジ内ではシリコーンオイルを検出することはできない。

シリコーン層の存在及び厚さは、シリンジバレル内のシリコーンオイルの量を測定するためにも用いることができるラップ アイディ レイヤー エクスプローラ（ｒａｐ．ＩＤ Ｌａｙｅｒ Ｅｘｐｌｏｒｅｒ）（登録商標）アプリケーションのような既知の方法によって測定することができる。前記シリンジバレル内のシリコーンオイルの量はまた、差分秤量法、及び適当な溶媒中に希釈した前記オイルの赤外分光法による定量化によって測定することもできる。

好適には、前記プレフィルドシリンジは未被覆である、すなわち、前記シクロオレフィンポリマー又はコポリマー材料は、その内部に収容された液体組成物と直接接触し、前記シリンジバレルは、そのシリンジを形成するプラスチック材料以外のいかなる材料も含有しない。

これに代わって、前記プレフィルドシリンジはシリコーンコーティング以外の内側コーティングを備えていてもよい。「内側コーティング」という用語は、薬液に接触するシリンジバレルの内側に対するコーティングを意味するものとする。そのような内側コーティングの例としては、変性エチレン−テトラフルオロエチレンコポリマーから製造されたフルオロカーボンフィルム（ウェスト ファーマシューティカル サービシーズ（Ｗｅｓｔ
Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ）から入手可能なフルロテック（Ｆｌｕｒｏｔｅｃ）（登録商標）フィルムとも称される）、及びアトモスフェリック プラズマ イモビリゼーション（Ａｔｍｏｓｐｈｅｒｉｃ Ｐｌａｓｍａ Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）（商標）プロセスによって架橋されたパーフルオロポリエーテルフィルム（トリボフィルム リサーチ（ＴｒｉｂｏＦｉｌｍ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）から入手可能であり、国際公開第ＷＯ２００５／０９４２１４Ａ２号に記載されているトリボグライド（ＴｒｉｂｏＧｌｉｄｅ）（登録商標）とも称される）が挙げられる。内側コーティングの別の例は、プラスチック表面に施された酸化ケイ素バリアコーティングである。前記シリコーン酸化物層に対して、さらなるコーティング層を施して、多層コーティングを生じさせてもよい。酸化ケイ素バリアコーティング及び任意でさらなるコーティング層によって被覆されたそのようなプラスチックシリンジは、ＳｉＯ_２から得ることができ、ＯＮｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｍａｇａｚｉｎｅ、第４５号、２０１３年１０月、及び同第４７号、２０１４年２月、並びに国際公開第ＷＯ２０１４／０５９０１２Ａ１号に記載されている。

前記プレフィルドシリンジはまた、前記シリンジが外側から内側にかけて３つの層、すなわち、周囲に接する外側プラスチック層と、外側プラスチック層及び内側プラスチック層以外の材料から形成された中間層と、外側層と同一又は別のプラスチック材料から形成され、かつ薬液に接する内側プラスチック層とを含むように、前記シリンジのプラスチック本体内に層を備えてもよい。前記シリンジが外側から内側にかけて以下の３つの層、すなわち、シクロオレフィンコポリマー−酸素吸収樹脂−シクロオレフィンコポリマーを備え得るように、前記中間層は酸素吸収樹脂を含有してもよい。そのようなシリンジは、オキシ−キャプト（Ｏｘｙ−Ｃａｐｔ）（商標）という名称で三菱ガス化学社によって販売されており、例えば国際公開第ＷＯ２０１４／１３６９１４Ａ１号に記載されている。

これに代わって、前記シリンジはまた、周囲に接するシリンジの外面上に、酸素バリアコーティングのようなコーティングを備えてもよい。
前記シリンジバレルはまた、タングステン不使用でもある。すなわち、前記シリンジバレルは、シリンジ製造工程においてタングステンを用いる必要がないので、いかなる微量のタングステンも含有しない。従って、タングステンによって誘発されるタンパク質の凝集の危険性がない。

一実施形態において、前記シリンジバレルは、前記シリンジバレル上に印刷された線のようなマークを備える。そのような線は、液体組成物を注射する人がストッパー又はプランジャーの（前面の先端のような）所定部分を前記マークと整合させることを可能にする。それにより、過剰な液体組成物及び潜在的な気泡がシリンジバレルから除去され、患者に対して正確な所定投与量を安全に投与することができる。

前記プランジャーを前記シリンジバレルの内側に沿って引いたり、押したりすることにより、前記シリンジが放出口を介して液体製剤を放出することが可能となる。
液体製剤に接する前記プランジャーの端部には、ストッパーが配置されている。前記ストッパー部分は、典型的には、天然ゴム又は合成ゴムのようなエラストマー材料から形成されており、前記エラストマー材料は前記シリンジバレルの内面に係合して、前記プランジャーに圧力がかけられたときに、前記シリンジからの液体製剤の放出を促進するシールを生じる。

前記ストッパーは、フルロテック（ＦｌｕｒｏＴｅｃ）（登録商標）バリアフィルムなどのフルオロポリマーフィルム、又はオムニフレックス（Ｏｍｎｉｆｌｅｘ）ストッパーなどのポリテトラフルオロエチレンのようなフィルムによって被覆されていてもよい。この種のコーティングは、薬剤と前記エラストマーとの間の有効なバリアとして機能し、すべての材料に伴う抽出物又は浸出物の可能性を低減する。加えて、前記コーティングは、製剤がプランジャーに吸着するか、又は吸収され得る逆過程の発生を低減する。前記ストッパーは好適にはシリコーン不使用である、すなわち、少なくとも薬液と接触する前記ストッパーの表面、より好適には、前記ストッパー全体は、シリコーンオイルによって被覆されていない。

前記シリンジは、０．３ｍＬ〜１．５ｍＬ、好適には０．５ｍＬ〜１．０ｍＬ、最適には０．５ｍＬ又は１．０ｍＬの公称最大充填量、すなわち前記シリンジによって最大限に吸い上げることができる量を有する。前記シリンジに充填される液体組成物の量は、約０．０５ｍＬ〜約１ｍＬ、好適には約０．１ｍＬ〜約０．５ｍＬ、より好適には０．１４ｍＬ〜０．３ｍＬ、最適には０．１５ｍＬ〜０．２ｍＬである。

当業者は、シリンジ及びニードル内の任意の死空間及びシリンジの注射の準備による損失を考慮するために、シリンジは、通常、患者に実際に投与される量よりも多い量で充填されることを分かっている。従って、患者に実際に投与される量は、０．０１ｍＬ〜１ｍＬ、好適には０．０２〜０．５ｍＬ、より好適には０．０２５〜０．５ｍＬ、さらにより好適には０．０３ｍＬ〜０．０５ｍＬ、及び最適には、患者に実際に投与される量は０．０５ｍＬである。

ラニビズマブは、典型的には６ｍｇ／ｍＬ又は１０ｍｇ／ｍＬのラニビズマブ濃度で０．０５ｍＬの量、又は１０ｍｇ／ｍＬのラニビズマブ濃度で０．０３ｍＬ又は０．０５ｍＬの量で投与されて、０．３ｍｇ又は０．５ｍｇの送達量をもたらす。アフリベルセプトについては、前記投与量は、典型的には４０ｍｇ／ｍＬのアフリベルセプト濃度で０．０５ｍＬであり、２ｍｇの送達量をもたらす。上記で検討したように、ベバシズマブは眼疾患の治療に適応外使用で用いられる。この場合、ベバシズマブの投与量は、２５ｍｇ／ｍＬのベバシズマブ濃度で０．０５ｍＬであり、１．２５ｍｇの送達量をもたらす。

従って、一実施形態において、前記シリンジは、０．１５ｍＬ〜０．２ｍＬの量の液体組成物によって充填され、０．０３ｍＬ〜０．０５ｍＬの液体組成物が患者に投与される。

「ＶＥＧＦ拮抗薬」という用語は、ＶＥＧＦと特異的に相互作用し、その生物学的活性、例えばその細胞分裂活性、血管形成活性及び／又は血管透過活性のうちの１つ以上を抑制する分子を指す。該用語は、抗ＶＥＧＦ抗体及びその抗原結合フラグメント、並びに非抗体ＶＥＧＦ拮抗薬の双方を含むものとする。

非抗体ＶＥＧＦ拮抗薬としては、アフリベルセプト、ペガプタニブ及び抗体ミメティックが挙げられる。好適には、前記非抗体ＶＥＧＦ拮抗薬はアフリベルセプトである。現在アイリーア（Ｅｙｌｅａ）（登録商標）という名称で販売されており、またＶＥＧＦトラップとしても知られているアフリベルセプトは、ヒトＶＥＧＦ受容体１及び２の細胞外ドメインの一部がヒトＩｇＧｌのＦｃ部に融合されている組換えヒト可溶性ＶＥＧＦ受容体融合タンパク質である（ホラッシュ（Ｈｏｌａｓｈ）ら、２００２年、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ 、第９９巻、第１７号、第１１３９３〜１１３９８頁；国際公開第ＷＯ００／７５３１９Ａ１）。前記アフリベルセプトは、滲出型加齢黄斑変性症、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）による視力障害、及び糖尿病性黄斑浮腫を有する患者における糖尿病網膜症の治療について販売認可を受けている。現在市販のアフリベルセプト調合物は、リン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ポリソルベート２０、ショ糖及び注射用蒸留水を含有しており、４０ｍｇ／ｍＬの濃度で供給されている。

現在マクジェン（Ｍａｃｕｇｅｎ）（登録商標）という名称で販売されているペガプタニブは、ペグ化された（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ）抗−血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）アプタマーである（ベル（Ｂｅｌｌ）ら、１９９９年、Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｃｅｌｌ Ｄｅｖ Ｂｉｏｌ Ａｎｉｍ．、第３５巻、第９号、第５３３〜４２頁）。ＶＥＧＦ拮抗薬である抗体ミメティックは、ＶＥＧＦに結合して、受容体へのその結合を阻害するアンキリン反復ドメインを含む、ＤＡＲＰｉｎ（登録商標）ＭＰ０１１２のような結合タンパク質を含む（国際公開第ＷＯ２０１０／０６０７４８号及び同第ＷＯ２０１１／１３５０６７号も参照されたい）。

「抗ＶＥＧＦ抗体」という用語は、ＶＥＧＦに特異的に結合し、その生物学的活性、例えば、その細胞分裂活性、血管形成活性、及び／又は血管透過活性のうちの１つ以上を阻害する抗体、又はＦａｂもしくはｓｃＦＶフラグメントのような抗体フラグメントを指す。抗ＶＥＧＦ抗体は、例えば、ＶＥＧＦの細胞レセプターへの結合を妨げることにより、ＶＥＧＦの細胞レセプターへの結合後に血管内皮細胞の活性化を妨げることにより、又はＶＥＧＦによって活性化された細胞を殺すことによって作用する。抗ＶＥＧＦ抗体は、例えば、抗体Ａ４．６．１、ベバシズマブ、ラニビズマブ、Ｇ６、Ｂ２０、２Ｃ３、並びに、例えば国際公開第ＷＯ９８／４５３３１号、米国特許出願公開第ＵＳ２００３／０１９０３１７号、米国特許第ＵＳ６，５８２，９５９号、米国特許第ＵＳ６，７０３，０２０号、国際公開第ＷＯ９８／４５３３２号、国際公開第ＷＯ９６／３００４６号、国際公開第ＷＯ９４／１０２０２号、国際公開第ＷＯ２００５／０４４８５３号、欧州特許第ＥＰ０６６６８６８Ｂ１号、国際公開第ＷＯ２００９／１５５７２４号、及びポプコフ（Ｐｏｐｋｏｖ）ら、２００４年、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈ．、第２８８巻、第１４９〜６４頁に記載されているような他のものを含む。本発明の医薬組成物中に存在する抗ＶＥＧＦ抗体又はその抗原結合フラグメントは、好適には、ラニビズマブ又はベバシズマブであり、最適には、ラニビズマブ又はその抗原結合フラグメントである。

「ラニビズマブ」は、国際公開第ＷＯ９８／４５３３１号及びチェン（Ｃｈｅｎ）ら、１９９９年、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、第２９３巻、第８６５〜８１頁のＳＥＱ ＩＤ番号１１５及び１１６に記載されているような、Ｙ０３１７の軽鎖及び重鎖可変ドメイン配列を有するＶＥＧＦ−Ａに対するヒト化モノクローナルＦａｂフラグメントである。ラニビズマブのＣＡＳ番号は３４７３９６−８２−１である。ラニビズマブは内皮細胞増殖及び血管新生を阻害し、血管新生性（滲出型）加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）の治療、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）による視力障害の治療、網膜静脈閉塞（網膜分枝静脈閉塞（ｂｒａｎｃｈ ＲＶＯ）又は網膜中心静脈閉塞（ｃｅｎｔｒａｌ ＲＶＯ））に付随して起こる黄斑浮腫による視力障害の治療、又は病的近視に付随して起こる脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）による視力障害の治療に対して承認されている。ラニビズマブは、ベバシズマブに関連し、ベバシズマブと同一の親マウス抗体に由来するが、親分子よりはるかに小さく、また親和性成熟されており、ＶＥＧＦ−Ａに対するより強力な結合を提供する。ラニビズマブは、例えば、国際公開第ＷＯ９８／４５３３１Ａ２号に記載されているように、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）において組換えにより生成される。現在市販のラニビズマブ調合物は、α，α−トレハロース二水和物、ヒスチジン塩酸塩一水和物、ヒスチジン、ポリソルベート２０及び注射用蒸留水を含有し、１０ｍｇ／ｍＬの濃度で供給されている。

「ベバシズマブ」は、ＶＥＧＦのすべてのイソ型を認識する完全長のヒト化マウスモノクローナル抗体であり、該抗体はラニビズマブの親抗体である。ベバシズマブのＣＡＳ番号は２１６９７４−７５−３である。ベバシズマブは血管新生を阻害し、現在、様々な癌型の治療に対して承認されている。しかしながら、ベバシズマブも加齢黄斑変性症のような眼疾患においては適応外使用で用いられている。現在市販のベバシズマブ調合物は、α，α−トレハロース二水和物、リン酸ナトリウム、ポリソルベート２０及び注射用蒸留水を含有し、２５ｍｇ／ｍＬの濃度を有する濃縮物として供給されている。

本発明のプレフィルドシリンジ内の抗体濃度は、典型的には、１〜１００ｍｇ／ｍＬであり、好適には２〜７５ｍｇ／ｍＬ、より好適には３〜５０ｍｇ／ｍＬ、さらに好適には５〜３０ｍｇ／ｍＬ、最適には６ｍｇ／ｍＬ又は１０ｍｇ／ｍＬである。本発明のプレフィルドシリンジ内にラニビズマブが収容されている場合、そのラニビズマブ濃度は１０ｍｇ／ｍＬである。

本発明のプレフィルドシリンジ内の液体組成物は低粒子含有量を有する。具体的には、前記液体組成物は、前記シリンジを４０℃で５分間、２週間、又は４週間にわたって回転させた後、又は毎分１℃で＋５℃から−２０℃の凍結解凍サイクルを３回行った後、又は５℃又は２５℃及び６０％の相対湿度において３か月間にわたってシリンジを保管した後に、１０μｍを超える大きさを有する粒子を５０個未満含有する。これに代わって、又はこれに加えて、前記液体組成物は、前記シリンジを４０℃で５分間、２週間、又は４週間にわたって回転させた後、又は毎分１℃で＋５℃から−２０℃の凍結解凍サイクルを３回行った後、又は５℃又は２５℃／６０％の相対湿度で３か月間にわたってシリンジを保管した後に、２５μｍを超える大きさを有する粒子を５個未満含有する。従って、前記プレフィルドシリンジは、これらの粒子サイズに関して、点眼剤に対する米国薬局方＜７８９＞の要件を満たしている。

本発明のプレフィルドシリンジは優れた滑動挙動をさらに有する。具体的には、ブレークルース力、すなわち、プランジャーの移動を開始するのに必要とされる力は、１０Ｎ未満又は９Ｎ未満であり、好適には８Ｎ未満又は７Ｎ未満であり、より好適には６Ｎ未満であり、最適には５Ｎ未満である。前記ブレークルース力は、シリンジが８週間のような長期間にわたって保管された場合に、著しく、すなわち１０％を超えて、変化しない。対照的に、シリコーンを含んでいるシリンジでは、前記ブレークルース力は保管によって少なくとも２倍に増大する。

さらに、滑動力、すなわち液体組成物を放出するためにシリンジバレルに沿ってプランジャーの移動を維持するのに必要とされる力は、１０Ｎ未満であり、好適には９Ｎ未満、より好適には８Ｎ未満、最適には７Ｎ未満である。特に好適な実施形態においては、前記ブレークルース力と滑動力との間に有意差がない。

本発明はまた、本発明の１つ以上のプレフィルドシリンジを含むキットを提供する。好適には、前記キットはブリスターパックを含む。「ブリスターパック」は、通常は熱成形プラスチックから製造された空洞部又はポケットと、厚紙の裏材又はアルミニウム箔又はプラスチックの蓋封止材とを有する。前記ブリスターパックは、その中に滅菌したシリンジを無菌状態下で包装する前に、無菌に滅菌され得る。従って、包装後の滅菌は必要とされない。前記キットは、前記プレフィルドシリンジがステーキド−イン ニードルを備えていない場合には、さらにニードルを含んでもよい。前記キットはさらに使用説明書を含んでもよい。

好適には、前記キットは、典型的にはブリスターパックのようなパッケージ内の酸素濃度を低下させるために用いられる酸素吸収材を含まない。酸素吸収材は、通常、高い親和性によってパッケージ内の酸素と反応することにより、そのパッケージの酸素含有量を低減する炭酸鉄又はアスコビル酸塩のような物質を含有する。

「眼内血管新生性疾患」は眼の血管新生を特徴とする疾患である。眼内血管新生性疾患の例としては、例えば、増殖性網膜症、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病その他の虚血関連網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、糖尿病性黄斑浮腫を有する患者における糖尿病網膜症、病的近視、フォンヒッペル−リンダウ病、眼のヒストプラスマ症、網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、網膜静脈分枝閉塞症（ＢＲＶＯ）、角膜血管新生及び網膜血管新生が挙げられる。「加齢黄斑変性症」という用語は、通常は高齢者が罹患するものであり、網膜の損傷により視野の中心（黄斑）において視力低下を生じる医学的状態を指す。

好適には、前記プレフィルドシリンジは、本願で定義されるようなＶＥＧＦ拮抗薬の硝子体内注射に使用するためのものである。
「硝子体内注射」という用語は、薬物を眼に直接注射する医薬組成物の投与を指す。より具体的には、前記薬物は、ヒト及び他の脊椎動物の眼球の水晶体と網膜との間の空間を充填する透明ゲルである硝子体液（硝子体又は単に硝子体とも称される）に注射される。

本発明を図面及び前述の記載において詳細に図示して説明してきたが、そのような図及び記載は、例証又は例示するものであり、限定するものではないと見なされるべきである。本発明は、開示した実施形態に限定されない。当業者は、図面、開示及び従属請求項の検討から、権利請求された発明を実施する際に、開示した実施形態に対する他の変更を理解し、実施することができる。

詳細な説明は、本質的に例示に過ぎず、用途及び使用法を限定するようには意図されない。以下の実施例は、本発明の範囲をそれらの実施例に限定することなく、本発明をさらに示す。当業者は本発明の記載に基づいて様々な変更及び修正をなすことができ、そのような変更及び修正も本発明に含まれる。

１．ラニビズマブを収容し、かつ異なる条件に供された様々なプラスチックシリンジ及びガラスシリンジにおける様々な大きさの粒度測定
１ｍｇ／ｍＬの抗体及びヒスチジン緩衝液、トレハロース二水和物、ポリソルベート２０を含有したｐＨ５．５の抗ＶＥＧＦ抗体ラニビズマブの溶液４００μＬを下記のシリンジに充填した。

表１からのシリンジを、４０°Ｃにおいて１サイクル／１０秒の速度で５分間、２週間、４週間にわたってニードルからストッパーまで回転させるか、又は５回の凍結／解凍サイクル（１℃／分で＋５から−２０℃まで）に供した。その後、光遮蔽（ｌｉｇｈｔ ｏｂｓｃｕｒａｔｉｏｎ）を、フローカム（ＦｌｏｗＣａｍ）（登録商標） ＰＶ ベンチトップシステム（米国メーン州所在のフルーイド イメージング インコーポレテッド）によって、システムソフトウェア（ビジュアルスプレッドシート（ＶｉｓｕａｌＳｐｒｅａｄｓｈｅｅｔ）ソフトウェア、 バージョン３．４．８）及び下記のパラメータを用いて測定した。

モード： オートイメージ
プライミング方法： マシン プライム
流量： ０．０４０ｍＬ／分
再校正： ０
停止理由： 試料体積が処理されたこと
吸引される試料体積： ０．２９００ｍＬ
処理される試料体積： ０．２８９３ｍＬ
撮像される液量： ０．１８２２ｍＬ
効率： ６３．０％
フレームレート： ２２．００ｆｐｓ
倍率： １０×
校正係数： ０．６９７９
シリンジサイズ： １．００ｍＬ
分析の結果を図１及び図２に示す。プレフィルドシリコーン不使用シクロオレフィンポリマーシリンジ１及び８は試験したすべての条件下で低い粒子レベルを有する。

さらに、表２に記載するシリンジを試験した。

シリンジ番号１１は、表１のシリンジ１と同一のバレルを有するが、ステーキドニードルの代わりにルアーコーンを装備している。
表２からのシリンジを、回転なしで、５°Ｃで３か月間、６か月間、及び１２か月間にわたってインキュベートし、２５℃／６０％の相対湿度で２週間、１か月間及び３か月にわたってインキュベートし、４０℃／７５％の相対湿度でインキュベートし、次いで表１からのシリンジについて上述したように分析した。

プレフィルドシリコーン不使用シクロオレフィンポリマーシリンジ１１は、試験したすべての条件下で、低い粒子レベルを有する。

２．ストレス条件に供した様々なプラスチックシリンジ及びガラスシリンジにおけるラニビズマブの安定性の測定
上記で表１に列記したシリンジを、表１のシリンジについて実施例１で記載したストレス条件に供した。さらに、上記で表２に列記したシリンジを、表２のシリンジについて実施例１に記載した条件に供した。

その後、試料を、親水性種及び疎水性種の存在についてはＲＰ−ＨＰＬＣによって、抗体の酸性バリアント（ａｃｉｄｉｃ ｖａｒｉａｎｔｓ）及び塩基性バリアント（ｂａｓｉｃ ｖａｒｉａｎｔｓ）の存在については陽イオン交換クロマトグラフィによって、凝集物の存在についてはサイズ排除クロマトグラフィによって、分析した。

ａ）Ｒｐ−ＨＰＬＣ分析
前記シリンジからのタンパク質試料をゾーバックス（ＺＯＲＢＡＸ）（登録商標） ３００ＳＢ−Ｃ１８、４．６×１００ｍｍ、３．５μｍのカラムに導入して、親水性不純物及び疎水性不純物を検出した。

前記タンパク質は、以下の表３に従って溶離液Ａ（水中に０．１％のトリフルオロ酢酸）及び溶離液Ｂ（７０％のアセトニトリル、２０％の１−プロパノール及び１０％の水中に０．１％のトリフルオロ酢酸）の勾配によって溶離した。

溶出した種（以下「溶出種」と記載）を検出し、溶出種の濃度対時間を示すグラフに表示した。溶出プロフィルは、未修飾タンパク質によるメインピークと、そのメインピークの前後に溶出するいくつかのさらなるピークを示し、それらのピークはそれぞれ前記タンパク質の親水性バリアント及び疎水性バリアントを表わす。すべてのピークの合計面積及び単一ピークの面積を求めた。図３及び図４は、表１のシリンジについて溶出種のピーク面積の合計に対する親水性種及び疎水性種のピーク面積のパーセンテージをそれぞれ示す。

ｂ）陽イオン交換分析
シリンジからのタンパク質試料をダイオネクス（Ｄｉｏｎｅｘ）のＢｉｏＬＣＰｒｏＰａｃ（登録商標）ＷＣＸ−１０、４．０×２５０ｍｍ、１０μｍカラムに導入して、タンパク質の酸性バリアント及び塩基性バリアントを検出した。

前記タンパク質を、以下の表４に従って、移動相Ａ（２０ｍＭのリン酸カリウム緩衝液、ｐＨ６．０）及び移動相Ｂ（２５０ｍＭのＫＣｌ、２０ｍＭのリン酸カリウム緩衝液、ｐＨ６．０）の勾配で溶離した。

溶出種を検出し、溶出種の濃度対時間を示すグラフに表示した。溶出プロフィルは、未修飾タンパク質によるメインピークと、そのメインピークの前後に溶出するいくつかのさらなるピークを示し、それらのピークは前記タンパク質の酸性バリアント及び塩基性バリアントをそれぞれ表わす。すべてのピークの合計面積及び単一ピークの面積を求めた。図５及び図６は、表１のシリンジについて溶出種のピーク面積の合計に対する酸性バリアント及び塩基性バリアントのピーク面積のパーセンテージをそれぞれ示す。

ｃ）サイズ排除クロマトグラフィ
前記シリンジからのタンパク質試料をワイエムシー−パック ジオール−２００（ＹＭＣ−Ｐａｃｋ Ｄｉｏｌ−２００）、５μｍ、２０ｎｍ（８．０×３００ｍｍ）カラムに導入して、該タンパク質の凝集物を検出した。

前記タンパク質は、０．１Ｍのリン酸カリウム及び０．２Ｍの塩化ナトリウムを用いて、定組成溶離によって溶離した。溶出種を検出して、溶出種の濃度対時間を示すグラフに表示した。溶出プロフィルは、凝集していないタンパク質によるメインピークと、タンパク質の凝集型を表すいくつかのさらなるタンパク質のピークとを示した。すべてのピークの面積を求めた。図７は、表１のシリンジについて溶出種のピーク面積の合計に対する凝集物のピーク面積のパーセンテージを示す。

図３〜図７に示した結果から、ラニビズマブの安定性は、試験した条件下において、本発明のプレフィルドプラスチックシリンジ（シリンジ１及び８）及びガラスシリンジにおいて同等であることは明らかである。

３．ラニビズマブを収容した様々なプラスチックシリンジ及びガラスシリンジにおける滑動力の測定
上記で表１に列記したシリンジ１、２、７、８及び９を、それらのストッパー移動力、すなわちブレークルース力、及び滑動力について試験した。この目的で、１０ｍｇ／ｍＬの濃度の抗ＶＥＧＦ抗体ラニビズマブ、並びに１０ｍＭのヒスチジン緩衝液、１０％（ｗ／ｖ）のトレハロース二水和物、０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０を含有したｐＨ５．５の溶液０．１６５ｍＬを上記シリンジに充填した。試験前に、３０Ｇ×０．５”のニードルをルアーコーンシリンジに取り付けた。該試験は、引張試験機（ＴＨ２７３０、トゥムラー（Ｔｈｕｅｍｌｅｒ））において、１０．９ｍｍの移動長に対して１９０ｍｍ／分のストッパー速度で実施した。

試験結果を下記の表５に示す。

プレフィルドシリコーン不使用シクロオレフィンポリマーシリンジ１及び８、すなわち本発明のシリンジは、シリコーンオイルで被覆されたシリンジ２及び１０の滑動挙動と同等であるか、又はそれよりも優れた滑動挙動を有する。

さらに、上記で表２に列記したシリンジを、それらのストッパー移動力、すなわちブレークルース力、及び滑動力について試験した。この目的で、ｐＨ５．５の１０ｍＭのヒスチジン緩衝液、１０％（ｗ／ｖ）のトレハロース二水和物、０．０１％のポリソルベート２０を含有する溶液０．１６５ｍＬを上記のシリンジに充填した。試験前に、３０Ｇ×０．５”のニードルをルアーコーンシリンジに取り付けた。該試験は、引張試験機（ＴＨ２７３０、トゥムラー）において、１０．９ｍｍの移動長に対して１９０ｍｍ／分のストッパー速度で実施した。

プレフィルドシリコーン不使用シクロオレフィンポリマーシリンジ１１、すなわち本発明のシリンジは、シリコーンオイルで被覆されたシリンジの滑動挙動と同等であるか、又はそれよりも優れた滑動挙動を有する。

４．ラニビズマブを収容し、かつ異なる条件に供された様々なプラスチックシリンジ及びガラスシリンジにおける様々なサイズの粒度測定
１ｍｇ／ｍＬの抗体及び１０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液、４０ｍＭの塩化ナトリウム、５％（ｗ／ｖ）のショ糖、０．０３％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０を含有した、ｐＨ６．２のＶＥＧＦ受容体融合タンパク質アフリベルセプトの溶液４００μＬを以下のシリンジに充填した。

表６からのシリンジを、４０°Ｃにおいて１サイクル／１０秒の速度で５分間、２週間、４週間にわたってニードルからストッパーまで回転させるか、又は５回の凍結／解凍サイクル（１℃／分で＋５から−２０℃）に供した。また前記シリンジを、５°Ｃで３か月間、６か月間、及び１２か月間にわたって、２５℃／６０％の相対湿度で２週間、１か月間、及び３か月間にわたって、４０℃／７５％の相対湿度で回転なしでインキュベートし、次に、表１からのシリンジについて上述したように分析した。

５．アフリベルセプトを収容した様々なプラスチックシリンジ及びガラスシリンジにおける滑動力の測定
上記で表６に列記したシリンジを、それらのストッパー移動力、すなわちブレークルース力、及び滑動力について試験した。この目的で、４０ｍｇ／ｍＬの濃度のＶＥＧＦ受容体融合タンパク質アフリベルセプトと、１０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液、４０ｍＭの塩化ナトリウム、５％（ｗ／ｖ）のショ糖、０．０３％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０を含有したｐＨ６．２の溶液０．１６５μＬを上記のシリンジに充填した。試験前に、３０Ｇ×０．５”のニードルをルアーコーンシリンジに取り付けた。該試験は、引張試験機（ＴＨ２７３０、トゥムラー）において、１０．９ｍｍの移動長に対して１９０ｍｍ／分のストッパー速度で実施した。

Claims (11)

1. ＶＥＧＦ拮抗薬であるアフリベルセプトの液体製剤を収容し、かつシリンジバレルを備えたプレフィルドシリンジにおいて、前記シリンジバレルはシクロオレフィンポリマーからなり、かつシリコーン不使用であり、前記プレフィルドシリンジは前記アフリベルセプトの液体製剤の硝子体内注射に使用され、前記プレフィルドシリンジは、０．５ｍＬ〜１．０ｍＬの公称最大充填量を有し、前記アフリベルセプトは４０ｍｇ／ｍｌの濃度で含有され、前記アフリベルセプトは２〜８℃の温度で、少なくとも６か月間安定となる、プレフィルドシリンジ。
2. １０μｍ以上の直径を有する粒子を前記液体製剤１ｍｌ当たり５０個未満含有する、請求項１に記載のプレフィルドシリンジ。
3. ２５μｍ以上の直径を有する粒子を前記液体製剤１ｍｌ当たり５個未満含有する、請求項１又は２に記載のプレフィルドシリンジ。
4. １０Ｎ以下の滑動力を有する、請求項１〜３のいずれか１項に記載のプレフィルドシリンジ。
5. シリコーン不使用のストッパーを備える、請求項１〜４のいずれか１項に記載のプレフィルドシリンジ。
6. 前記シリンジバレルは、シリコーンコーティング以外の内側コーティングを備える、請求項１〜５のいずれか１項に記載のプレフィルドシリンジ。
7. ステーキドニードルを備えた、請求項１〜６のいずれか１項に記載のプレフィルドシリンジ。
8. 請求項１〜７のいずれか１項に記載の１つ以上のプレフィルドシリンジを含むキット。
9. 眼疾患を有する患者に対するＶＥＧＦ拮抗薬の液体製剤の投与に使用するための請求項１〜７のいずれか１項に記載のプレフィルドシリンジ。
10. 前記眼疾患は、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）による視力障害、網膜静脈閉塞（網膜分枝静脈閉塞又は網膜中心静脈閉塞）に付随して起こる黄斑浮腫による視力障害、糖尿病性黄斑浮腫を有する患者における糖尿病網膜症、又は病的近視に付随して起こる脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）による視力障害のうちから選択される、請求項９に記載の使用のためのプレフィルドシリンジ。
11. ３０〜１００μＬの量の液体製剤が患者に投与される、請求項９又は１０に記載の使用のためのプレフィルドシリンジ。

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