JP2020530770A5 - - Google Patents
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- ヒト5T4に特異的に結合する5T4結合ドメインと、ヒト4−1BBに特異的に結合する4−1BB結合ドメインとを含む多特異性ポリペプチドであって、
前記5T4結合ドメインは、(i)HCDR1、HCDR2、およびHCDR3を含む免疫グロブリン重鎖可変領域(VH)と、(ii)LCDR1、LCDR2、およびLCDR3を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域(VL)と、を含み、
(a)前記HCDR1は配列番号30のアミノ酸配列を含み;
(b)前記HCDR2は配列番号32のアミノ酸配列を含み;
(c)前記HCDR3は配列番号34のアミノ酸配列を含み;
(d)前記LCDR1は配列番号42のアミノ酸配列を含み;
(e)前記LCDR2は配列番号10のアミノ酸配列を含み;
(f)前記LCDR3は配列番号36のアミノ酸配列を含み;
前記4−1BB結合ドメインは、(i)HCDR1、HCDR2、およびHCDR3を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、(ii)LCDR1、LCDR2、およびLCDR3を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域と、を含み、
(a)該HCDR1は配列番号2のアミノ酸配列を含み;
(b)該HCDR2は配列番号4のアミノ酸配列を含み;
(c)該HCDR3は配列番号6のアミノ酸配列を含み;
(d)該LCDR1は配列番号8のアミノ酸配列を含み;
(e)該LCDR2は配列番号10のアミノ酸配列を含み;
(f)該LCDR3は配列番号12のアミノ酸配列を含む、
前記多特異性ポリペプチド。 - 前記5T4結合ドメインが配列番号38および46からなる群から選択される配列に対し少なくとも90%、少なくとも95%、または少なくとも97%の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、又は
前記5T4結合ドメインが配列番号38および46からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、又は
前記5T4結合ドメインが配列番号44、48、および50からなる群から選択される配列に対し少なくとも90%、少なくとも95%、または少なくとも97%の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、又は
前記5T4結合ドメインが配列番号44、48、および50からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、
請求項1に記載の多特異性ポリペプチド。 - 前記4−1BB結合ドメインが、
配列番号14に対し少なくとも90%、少なくとも95%、または少なくとも97%の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、又は
前記4−1BB結合ドメインが配列番号14のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、及び/又は
配列番号16に対し少なくとも90%、少なくとも95%、または少なくとも97%の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、又は
配列番号16のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、
請求項1又は2に記載の多特異性ポリペプチド。 - 前記5T4結合ドメインの前記VH及び/又はVL領域は、フレームワーク領域中に1又は複数の突然変異を有し;及び/又は前記4−1BB結合ドメインの前記VH及び/又はVL領域は、フレームワーク領域中に1又は複数の突然変異を有し;
任意に、前記5T4結合ドメイン中の突然変異は、配列番号130又は170のフレームワーク領域と比較されるものであり、
任意に、前記突然変異は、安定化のためのジスルフィド結合を導入するものである、請求項1〜3のいずれか1項に記載の多特異性ポリペプチド。 - 前記5T4結合ドメインと前記4−1BB結合ドメインは、結合ドメインリンカー又は結合ドメインリンカーと免疫グロブリンFc領域によって結合され、該免疫グロブリンFc領域はヒンジ領域及び、配列番号158又は160に示されるアミノ酸配列を含む免疫グロブリン定常領域のような免疫グロブリン定常領域を含み:
任意に、前記多特異性ポリペプチドは、(i) 5T4結合ドメイン、(ii)ヒンジ領域、(iii)免疫グロブリン定常領域、(iv)結合ドメインリンカー、及び(v) 4−1BB結合ドメインを、アミノ末端からカルボキシル末端に向かってこの順で含み;又は(i) 4−1BB結合ドメイン、(ii)結合ドメインリンカー、(iii) 免疫グロブリン定常領域、(iv)ヒンジ領域、及び(v) 5T4結合ドメインを、アミノ末端からカルボキシル末端に向かってこの順で含む、請求項1〜4のいずれか1項に記載の多特異性ポリペプチド。 - 前記5T4結合ドメインが単鎖可変領域フラグメント(scFv)及び/又は前記4−1BB結合ドメインがscFvである、請求項1〜5のいずれか一項に記載の多特異性ポリペプチド。
- 前記scFvがリンカーポリペプチドを含み、任意に、前記リンカーポリペプチドが前記scFvの軽鎖可変領域と重鎖可変領域との間に存在し、及び/又は前記リンカーポリペプチドが、
Gly4Serリンカーを含むリンカーポリペプチド、
n=1〜5である式(Gly4Ser)nを含むリンカーポリペプチド、
配列番号85〜108から選択されるアミノ酸配列を含むリンカーポリペプチド、又は
配列番号98に記載のアミノ酸配列(GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS)を含む、請求項6に記載の多特異性ポリペプチド。 - 前記5T4結合ドメインscFvが、
配列番号118、120、122、124、126、128、130、132、134、および170からなる群から選択されるアミノ酸配列に対し少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、または少なくとも95%の同一性を有する配列、又は配列番号118、120、122、124、126、128、130、132、134、および170からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び/又は
前記4−1BB結合ドメインscFvが、配列番号110、112、114、および116からなる群から選択されるアミノ酸配列に対し少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、または少なくとも95%の同一性を有する配列、又は配列番号110、112、114、および116からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項6又は7に記載の多特異性ポリペプチド。 - 多特異性ポリペプチドのエフェクター細胞への結合が、エフェクター細胞の活性化を増強する、又は
多特異性ポリペプチドのエフェクター細胞への結合が、エフェクター細胞の活性化および/若しくはエフェクター細胞の増殖を増大させる、又は
多特異性ポリペプチドのエフェクター細胞および5T4発現細胞への結合が、エフェクター細胞依存的な、5T4発現細胞の溶解を増強する、請求項1〜8のいずれか一項に記載の多特異性ポリペプチド。 - 前記5T4結合ドメインの前記軽鎖可変領域および/若しくは前記重鎖可変領域がヒト型化されている、並びに/又は、記4−1BB結合ドメインの前記軽鎖可変領域および/または前記重鎖可変領域がヒト型化されている、請求項1〜9のいずれか一項に記載の多特異性ポリペプチド。
- 2個の同一のポリペプチドを含み、該2個のポリペプチドが請求項1〜10のいずれか1項に記載のポリペプチドである、ダイマー。
- 請求項1〜10のいずれか一項に記載のポリペプチドまたは請求項11に記載のダイマーと、薬剤的に許容できる担体、希釈剤、または賦形剤と、を含み;任意に、経口投与用単位剤形、静脈内投与用単位剤形、鼻腔内投与用単位剤形、坐剤用単位剤形、皮内投与用単位剤形、筋肉内投与用単位剤形、腹腔内投与用単位剤形、皮下投与用単位剤形、硬膜外投与用単位剤形、舌下投与用単位剤形、および脳内投与用単位剤形からなる群から選択される剤形に製剤化され;又は錠剤、丸剤、ペレット剤、カプセル剤、散剤、菓子錠剤、粒剤、水剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、徐放性製剤、エアゾール剤、および噴霧剤からなる群から選択される経口投与用単位剤形として製剤化された、医薬組成物。
- 請求項1〜10のいずれか1項に記載のポリペプチド又は請求項11記載のダイマー又は請求項12記載の医薬組成物を含む、対象における、5T4の発現を特徴とする障害の治療剤。
- 前記障害ががんであり、任意に、該がんが、乳がん、膵がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、中皮腫、慢性リンパ球性白血病(CLL)、マントル細胞白血病(mantle cell leukemia)(MCL)、急性リンパ芽球白血病(ALL)、メラノーマ、扁平上皮癌、副腎がん、膀胱がん、子宮頸がん、腎がん、胃がん、前立腺がん、甲状腺がん、肝臓がん、子宮がん、神経線維腫、肉腫、癌腫、または頭頚部がんである、請求項13に記載の治療剤。
- 請求項1〜10のいずれか1項に記載のポリペプチド又は請求項11記載のダイマーをコードする、単離された核酸分子であって、任意に、該核酸分子は、配列番号109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、171、および173からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子。
- 請求項15記載の単離された核酸分子を含み、任意に、該核酸分子が、宿主細胞における前記核酸セグメントの発現に好適な制御配列に作動可能なように連結されている、発現ベクター。
- 請求項16に記載の前記発現ベクターを含む、組換え宿主細胞。
- 5T4結合ドメインを含むポリペプチドを製造するための方法であって、請求項16に記載の発現ベクターを含む組換え宿主細胞を、前記核酸セグメントが発現される条件下で培養することで、前記5T4結合ドメインを含むポリペプチドを産生させることを含む、前記方法。
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