JP2020524662A - バチルス・コアグランスmtcc 5856から単離された細胞外代謝物のアンチエイジング能 - Google Patents
バチルス・コアグランスmtcc 5856から単離された細胞外代謝物のアンチエイジング能 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020524662A JP2020524662A JP2019567239A JP2019567239A JP2020524662A JP 2020524662 A JP2020524662 A JP 2020524662A JP 2019567239 A JP2019567239 A JP 2019567239A JP 2019567239 A JP2019567239 A JP 2019567239A JP 2020524662 A JP2020524662 A JP 2020524662A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bacillus coagulans
- fibroblasts
- skin
- effective concentration
- partially purified
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
- A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
- A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Birds (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
本発明は、2017年6月6日出願の米国仮特許出願第62516083号および2017年6月6日出願の第62516077号の非仮出願である。
先行技術文献
年齢を経ると共に、ヒト皮膚は、加齢の徴候を可視的に露わにする、皺、たるみ、および弛緩の増加を含む多くの変化を受ける。ホルモン、皮膚関連ミクロフローラ、皮膚pH、角質層の脂質含量の低減、活性酸素種(ROS)消去能の減少、メタロプテイナーゼ活性の増大、乾燥、弛緩、縮緬皺、および皮膚の委縮のような皮膚加齢に影響する多くの内的および外的因子が存在する。上記の因子の中でも、多くは自然のものであり、改変することができない。早期の皮膚加齢を引き起こし、また美しい皮膚加齢を導くように影響を及ぼすことできる他のいくつかの因子が存在する。
1. Sharma D, Kober MM and Bowe WP, Anti-Aging Effects of Probiotics, J Drugs Dermatol. 2016 Jan; 15(1):9-12
2. Benedetta Cinque, Paola Palumbo, Cristina La Torre, Esterina Melchiorre, Daniele Corridoni, Gianfranca Miconi, Luisa Di Marzio, Maria Grazia Cifone and Maurizio Giuliani, Probiotics in Aging Skin, Textbook of Aging Skin, pp.1315-1327
3. Probiotics Provide Anti Aging Defense, LIFE EXTENSION MAGAZINE, October 2015
http://www.lifeextension.com/Magazine/2015/10/Probiotics-Provide-Anti-Aging-Defense/Page-01, accessed 24 May 2018.
本発明の別の目的は、バチルス・コアグランスMTCC5856の細胞外代謝調製物を含有する組成物の抗糖化活性を開示することである。
生物学的材料の寄託
本出願において言及する、受託番号MTCC5856を有する生物学的材料であるバチルス・コアグランスの寄託は、2013年9月19日にMicrobial Type Culture Collection & Gene Bank(MTCC)、CSIR−Institute of Microbial Technology、Sector 39−A、Chandigarh−160036、Indiaにおいてなされている。
本発明は、バチルス・コアグランスMTCC5856から単離された部分精製細胞外代謝物の皮膚加齢を防ぐ能力を開示する。より詳細には、本発明は、バチルス・コアグランスMTCC5856から単離された細胞外代謝物の、ヒト皮膚線維芽細胞における、抗コラゲナーゼ、抗エラスターゼ、抗糖化活性、ならびにTGF−β、上皮増殖因子、およびヒアルロン酸の発現の増強を開示する。
別の好ましい実施形態では、本発明は、皮膚線維芽細胞においてエラスターゼ活性を阻害する方法であって、バチルス・コアグランスMTCC5856由来の有効濃度の細胞外代謝調製物と前記線維芽細胞を接触させて、前記線維芽細胞においてエラスターゼ阻害作用をもたらすステップを含む方法に関する。別の関連する実施形態では、部分精製細胞外代謝調製物の有効濃度は、総組成物の0.01%v/v〜2.0%v/vである。別の関連する実施形態では、バチルス・コアグランスの株は、バチルス・コアグランスMTCC5856である。
別の好ましい実施形態では、本発明は、ヒト皮膚線維芽細胞においてTGF−β、上皮増殖因子およびヒアルロン酸の発現を増強する方法であって、バチルス・コアグランスMTCC5856由来の有効濃度の細胞外代謝調製物と前記線維芽細胞を接触させて、アンチエイジング作用に関連する遺伝子の発現の増加をもたらすステップを含む方法に関する。
最も好ましい実施形態を表明する詳細で説明的な例は、以下に含まれる。
(実施例1)
抗コラゲナーゼ活性
細胞外代謝物の単離
バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝物は、US9596861に概要を述べるステップに従って単離した。製品は、LACTOSPORIN(登録商標)(INCI:バチルス発酵濾過抽出液)の商標でSabinsa Corporation、米国から市販されている。
コラゲナーゼは、コラーゲンおよび細胞外マトリクス(ECM)の他の構成成分を分解する、マトリクスメタロプロテアーゼの1つである。ECMは、足場として作用して皮膚構造を安定化させ、また、皮膚細胞の増殖および代謝機能に役立つ。コラーゲンが減少すると、皺および皮膚のたるみが生じる。コラゲナーゼ阻害アッセイの原理は、基質DQ(商標)ゼラチンが、蛍光化合物であるフルオレセインと共役することに基づいている。DQ(商標)ゼラチンにおいて、蛍光は、消光する。DQ(商標)ゼラチンは、コラゲナーゼにより効率的に分解されて、測定可能な蛍光化合物を生じる。蛍光の増加は、酵素活性に比例する。抗コラゲナーゼ化合物の存在下では、蛍光の量は、一定濃度の酵素および基質において減少し得る。
装置−BMG FLUOstar Optima(蛍光マイクロプレートリーダー)
試薬:リン酸緩衝液(pH7.4)
コラゲナーゼ酵素アッセイキット(Enzchek(登録商標)コラゲナーゼ、ゼラチナーゼアッセイキット、Invitrogen、米国)
マイクロタイタープレート−96ウェルマイクロタイタープレート(黒)−Corning、米国
アッセイは、96ウェルの黒色マイクロタイタープレートで行った。クロストリジウム・ヒストリチクム(Clostridium histolyticum)由来のタイプIVを、基質としてDQゼラチンとともにアッセイに使用した。様々な濃度のLACTOSPORIN(登録商標)(80μl)をゼラチン基質20μl(12.5μg/ml)で事前にインキュベートした。コラゲナーゼ酵素溶液100μl(最終濃度−0.4U/ml)を加え、30分後に蛍光強度をEm:485nmおよびEx:520nmで測定した。対照(緩衝液)の酵素活性を記録した。
(B−BC)−(T−C)
阻害率%=--------------------------×100
(B−BC)
B−酵素存在下における蛍光
BC−酵素活性の非存在下における蛍光
T−阻害物質存在下における酵素活性の蛍光
TC−阻害物質単独の蛍光
結果
細胞外代謝物は、IC50(酵素活性の50%阻害)が1.8%の用量依存性の抗コラゲナーゼ活性を示たであった(図1)。結果は、バチルス・コアグランスMTCC5856から単離された細胞外代謝物が、皮膚の細胞外マトリクスを保存して皺の形成および皮膚のたるみを防ぎ、これにより皮膚加齢を防ぐことができることを明らかにした。
抗エラスターゼ活性
細胞外代謝物の単離
バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝物は、US9596861に概要を述べるステップに従って単離した。製品は、LACTOSPORIN(登録商標)(INCI:バチルス発酵濾過抽出液)の商品名でSabinsa Corporation、米国から市販されている。
エラスターゼは、エラスチンおよび細胞外マトリクスの他の成分を分解する、マトリクスメタロプロテアーゼの1つであり、ともに正常な皮膚の発達に重要である。この酵素が阻害物質により調節されない場合、タンパク質は、皮膚の皺、早期加齢および発癌をもたらす。Enz Chekエラスターゼアッセイキットによる抗エラスターゼアッセイにより、産物のエラスターゼ阻害活性を判定する。アッセイは、Enz Chekエラスターゼアッセイキットを使用して行った。基質は、DQエラスチン可溶性ウシ頸部靭帯である。DQエラスチンは、BODIPY FL色素で標識する。無蛍光基質は、エラスターゼにより分解されて、強い蛍光を発する断片を生じ得、阻害物質の存在下では、蛍光強度は弱められる。蛍光強度をマイクロプレートリーダーで測定した(485nmで発光および520nmで励起)。
装置−BMG FLUOstar Optima(蛍光マイクロプレートリーダー)
試薬:リン酸緩衝液(pH7.4)
コラゲナーゼ酵素アッセイキット(Enzchek(登録商標)コラゲナーゼ、ゼラチナーゼアッセイキット、Invitrogen、米国)
マイクロタイタープレート−96ウェルマイクロタイタープレート(黒)−Corning、米国
アッセイは、96ウェルの黒色マイクロタイタープレートで行った。ブタ膵臓由来のエラスターゼ酵素および基質としてのDQエラスチンをアッセイに使用した。様々な濃度のLACTOSPORIN(登録商標)(50μl)をエラスチン基質50μl(25μg/ml)で事前にインキュベートした。エラスターゼ酵素溶液100μl(最終濃度−0.1U/ml)を加え、30分後に蛍光強度をEm:485nmおよびEx:520nmで測定した。対照(緩衝液)の酵素活性を記録した。
(B−BC)−(T−C)
阻害率%=--------------------------×100
(B−BC)
B−酵素存在下における蛍光
BC−酵素活性の非存在下における蛍光
T−阻害物質存在下における酵素活性の蛍光
TC−阻害物質単独の蛍光
結論
細胞外代謝物は、IC50(酵素活性の50%阻害)が1.8%の用量依存性の抗エラスターゼ活性を示した(図2)。結果は、バチルス・コアグランスMTCC5856から単離された細胞外代謝物が、エラスターゼ酵素を阻害することにより、皮膚の細胞外マトリクスを保存して皺の形成および皮膚のたるみを防ぎ、これにより皮膚加齢を防ぐことができることを明らかにした。
抗糖化
細胞外代謝物の単離
バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝物は、US9596861に概要を述べるステップに従って単離した。製品は、LACTOSPORIN(登録商標)(INCI:バチルス発酵濾過抽出液)の商品名でSabinsa Corporation、米国から市販されている。
高度糖化最終産物(advanced glycation end product)(AGE)は、メイラード反応としても知られる、タンパク質のアミノ基(主にリシンとアルギニン)と還元糖のカルボニル基との間の非酵素的付加物形成により生成される。初期では、還元糖は、遊離のアミノ基と反応して、不安定なアルジミン化合物を形成し、これは分子内転位を受けて、アマドリ産物としても知られる安定な初期糖化産物を形成する。後期では、酸化、脱水および環化反応による糖化プロセスにより、AGEとしても知られる高度糖化最終産物が形成される。Nε−(カルボシキメチル)−リシン(CML)、ピラリン(pyrraline)、ペントシジンのようなAGEの種々の構造は、加齢、糖尿病、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病、および腎不全を含む、変性障害と関連することで知られる。皮膚加齢にも関係づけられるAGEは、老化も光加齢もした皮膚の両方を生じるUV照射の結果を蓄積する。
材料
リボース、ウシ血清アルブミン、96ウェルの黒色マイクロタイタープレート
リボース−BSA方法:様々な濃度の試料10μlをBSA(ウシ血清アルブミン、25mg/mlの原液)40μlに加え、Dリボース(150mg/mlの原液)50μlを黒色96ウェルマイクロプレートのウェル毎に加えて37℃で24時間インキュベートした。試料は、BSA単独に対照として採取する。形成されたAGE(高度糖化最終産物)を、ヴェスパーリシンは390/460nmのEx/Emにおいて、ペントシジンAGEは320/405nmのEx/Emにおいて、蛍光検出した。
バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝調製物によるAGEヴェスパーリシンおよびペントシジンの阻害率を表1に作表する。
結果
バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝調製物は、50%阻害が0.7%のヴェスパーリシン型高度糖化最終産物形成の顕著な阻害を示した。また、代謝物は、ペントシジン型AGE形成を2%の濃度で41.75%阻害することが見出され、バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝調製物が、種々の型の糖化最終産物を防ぐ能力を有し、したがって糖化の破壊作用から防御して、皮膚の治癒を高めるのに役立ち、これにより皮膚加齢を防ぐことができることを示した。
遺伝子発現
細胞外代謝物の単離
バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝物は、US9596861に概要を述べるステップに従って単離した。製品は、LACTOSPORIN(登録商標)(INCI:バチルス発酵濾過抽出液)の商品名でSabinsa Corporation、米国から市販されている。
皮膚線維芽細胞は、皮膚の構造的完全性のための重要な細胞構成成分である。細胞外マトリクスは、コラーゲン、エラスチンおよびヒアルロンを含有し、これらは皮膚の完全性を決定する。UDPグルコサミンおよびUDPグルクロン酸残基を増殖するHAポリマー鎖に加えるヒアルロナンシンターゼによりヒアルロナン(HA)を合成した。形質転換増殖因子(TGF)βは、ECM生合成において中心的役割を果たし、コラーゲンの合成と分解の両方を制御することによりコラーゲンホメオスタシスを調節する。上皮増殖因子は、細胞増殖を刺激し、コラーゲン合成を誘導する。
材料:ヒト皮膚線維芽細胞、6ウェルのマイクロタイタープレート、線維芽細胞増殖培地、トリゾール(Trizol)、合成キット、RT−PCR用SYBR green master mix
ヒト皮膚線維芽細胞を6ウェルのマイクロタイタープレート中、0.25%のバチルス・コアグランスMTCC5856由来細胞外代謝物の存在下で24時間培養した。無処理細胞を対照として使用した。インキュベーション時間の終了時に、細胞を溶解してRNAを抽出した。
RNA抽出
7日目の第2の増悪後に細胞を採取し、トリゾール法を使用して全RNAを抽出した。抽出したRNAをDNAseIで処理して、混入するDNAを除去し、フェノール:クロロホルム:イソアミルアルコール抽出物(24:25:1)を使用して再び抽出した。RNAの質は、260/280nmでの吸光度をNanodrop(Thermo)を使用して調べることにより判定した。
SuperScript III First−Strand Synthesis System(Life Technologies)を使用したcDNA合成のために全RNA 2μgを採取した。定量的RT−PCR解析を行って、Roche Light cycler 96においてSYBR Green master mix(Thermo Scientific)を使用して褐色脂肪特異的遺伝子の発現を判定した。βアクチンをハウスキーピング遺伝子として使用した。遺伝子の相対RNA存在量をハウスキーピングβアクチン遺伝子に対して正規化し、デルタ デルタCT(Log2により変換した倍率変化に等しい)として表した。表2は、発現試験に使用するプライマーの列挙を示す。
結果
バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝調製物は、ヒト皮膚線維芽細胞においてヒアルロン酸シンターゼ(2.14倍)、形質転換増殖因子(TGF)−β(1.8倍)および上皮増殖因子(2.94倍)の顕著な増強を示し、バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝調製物が、細胞外マトリクスの完全性の維持に関する遺伝子の発現を増加させる能力を有することを示した。細胞外マトリクス(ECM)は、構造をもたらし、皮膚細胞を支持し、引張強度および硬度を皮膚に付与し、したがって皮膚をより若々しく見せる。
バチルス・コアグランス由来の細胞外代謝調製物を含有する、皮膚加齢を防ぐための製剤。
バチルス・コアグランスMTCC5856由来の細胞外代謝物を含有する組成物は、医薬/薬用化粧品として許容される賦形剤、アジュバント、基剤、希釈剤、担体、調整剤、生物学的利用増強剤、酸化防止剤および保存剤と共に製剤化し、ならびに/またはアンチエイジング成分を含有する製剤に組み込み、クリーム剤、ゲル剤、ローション剤、散剤、セラム、オイル、懸濁剤、軟膏剤、石けん、スクラブ剤、エマルジョン剤、およびコンパクトの形態で局所的に投与することができる。
表3〜7は、バチルス・コアグランスMTCC5856由来の部分精製細胞外代謝調製物(バチルス発酵濾過抽出液)を含有するアンチエイジングスキンケア製剤の説明的な例を提供する。
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔1〕哺乳動物における皮膚加齢を防ぐ方法であって、バチルス・コアグランスから単離された部分精製細胞外代謝物を含有する有効濃度の組成物を前記哺乳動物に投与して、皮膚老化の徴候および症状の減少をもたらすステップを含む方法。
〔2〕皮膚加齢の徴候および症状が、皺、皮膚のたるみ、乾燥、斑状皮膚、および筋からなる群から選択される、前記〔1〕に記載の方法。
〔3〕組成物が、酵素コラゲナーゼおよびエラスターゼの活性を阻害し、糖化を阻害し、TGF−β、上皮増殖因子およびヒアルロン酸の発現を増強することにより皮膚加齢を防ぐ、前記〔1〕に記載の方法。
〔4〕バチルス・コアグランスの株が、バチルス・コアグランスMTCC5856である、前記〔1〕に記載の方法。
〔5〕部分精製細胞外代謝調製物の有効濃度が、総組成物の0.01%v/v〜2.0%v/vである、前記〔1〕に記載の方法。
〔6〕組成物が、医薬/薬用化粧品として許容される賦形剤、アジュバント、基剤、希釈剤、担体、調整剤、生物学的利用増強剤、酸化防止剤および保存剤と共に製剤化され、ならびに/またはアンチエイジング成分を含有する製剤に組み込まれ、クリーム剤、ゲル剤、ローション剤、散剤、セラム、オイル、懸濁剤、軟膏剤、石けん、スクラブ剤、エマルジョン剤、およびコンパクトの形態で局所的に投与される、前記〔1〕に記載の方法。
〔7〕哺乳動物が、好ましくはヒトである、前記〔1〕に記載の方法。
〔8〕皮膚線維芽細胞においてコラゲナーゼ活性を阻害する方法であって、バチルス・コアグランス由来の部分精製細胞外代謝調製物を含有する有効濃度の組成物と前記線維芽細胞を接触させて、前記線維芽細胞においてコラゲナーゼ阻害作用をもたらすステップを含む方法。
〔9〕部分精製細胞外代謝調製物の有効濃度が、総組成物の0.01%v/v〜2.0%v/vである、前記〔8〕に記載の方法。
〔10〕バチルス・コアグランスの株が、バチルス・コアグランスMTCC5856である、前記〔8〕に記載の方法。
〔11〕皮膚線維芽細胞においてエラスターゼ活性を阻害する方法であって、バチルス・コアグランスMTCC5856由来の有効濃度の細胞外代謝調製物と前記線維芽細胞を接触させて、前記線維芽細胞においてエラスターゼ阻害作用をもたらすステップを含む方法。
〔12〕部分精製細胞外代謝調製物の有効濃度が、総組成物の0.01%v/v〜2.0%v/vである、前記〔11〕に記載の方法。
〔13〕バチルス・コアグランスの株が、バチルス・コアグランスMTCC5856である、前記〔11〕に記載の方法。
〔14〕皮膚線維芽細胞において糖化を阻害する方法であって、バチルス・コアグランスMTCC5856由来の有効濃度の細胞外代謝調製物と前記線維芽細胞を接触させて、前記線維芽細胞において抗糖化作用をもたらすステップを含む方法。
〔15〕部分精製細胞外代謝調製物の有効濃度が、総組成物の0.01%v/v〜2.0%v/vである、前記〔14〕に記載の方法。
〔16〕バチルス・コアグランスの株が、バチルス・コアグランスMTCC5856である、前記〔14〕に記載の方法。
Claims (16)
- 哺乳動物における皮膚加齢を防ぐ方法であって、バチルス・コアグランスから単離された部分精製細胞外代謝物を含有する有効濃度の組成物を前記哺乳動物に投与して、皮膚老化の徴候および症状の減少をもたらすステップを含む方法。
- 皮膚加齢の徴候および症状が、皺、皮膚のたるみ、乾燥、斑状皮膚、および筋からなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
- 組成物が、酵素コラゲナーゼおよびエラスターゼの活性を阻害し、糖化を阻害し、TGF−β、上皮増殖因子およびヒアルロン酸の発現を増強することにより皮膚加齢を防ぐ、請求項1に記載の方法。
- バチルス・コアグランスの株が、バチルス・コアグランスMTCC5856である、請求項1に記載の方法。
- 部分精製細胞外代謝調製物の有効濃度が、総組成物の0.01%v/v〜2.0%v/vである、請求項1に記載の方法。
- 組成物が、医薬/薬用化粧品として許容される賦形剤、アジュバント、基剤、希釈剤、担体、調整剤、生物学的利用増強剤、酸化防止剤および保存剤と共に製剤化され、ならびに/またはアンチエイジング成分を含有する製剤に組み込まれ、クリーム剤、ゲル剤、ローション剤、散剤、セラム、オイル、懸濁剤、軟膏剤、石けん、スクラブ剤、エマルジョン剤、およびコンパクトの形態で局所的に投与される、請求項1に記載の方法。
- 哺乳動物が、好ましくはヒトである、請求項1に記載の方法。
- 皮膚線維芽細胞においてコラゲナーゼ活性を阻害する方法であって、バチルス・コアグランス由来の部分精製細胞外代謝調製物を含有する有効濃度の組成物と前記線維芽細胞を接触させて、前記線維芽細胞においてコラゲナーゼ阻害作用をもたらすステップを含む方法。
- 部分精製細胞外代謝調製物の有効濃度が、総組成物の0.01%v/v〜2.0%v/vである、請求項8に記載の方法。
- バチルス・コアグランスの株が、バチルス・コアグランスMTCC5856である、請求項8に記載の方法。
- 皮膚線維芽細胞においてエラスターゼ活性を阻害する方法であって、バチルス・コアグランスMTCC5856由来の有効濃度の細胞外代謝調製物と前記線維芽細胞を接触させて、前記線維芽細胞においてエラスターゼ阻害作用をもたらすステップを含む方法。
- 部分精製細胞外代謝調製物の有効濃度が、総組成物の0.01%v/v〜2.0%v/vである、請求項11に記載の方法。
- バチルス・コアグランスの株が、バチルス・コアグランスMTCC5856である、請求項11に記載の方法。
- 皮膚線維芽細胞において糖化を阻害する方法であって、バチルス・コアグランスMTCC5856由来の有効濃度の細胞外代謝調製物と前記線維芽細胞を接触させて、前記線維芽細胞において抗糖化作用をもたらすステップを含む方法。
- 部分精製細胞外代謝調製物の有効濃度が、総組成物の0.01%v/v〜2.0%v/vである、請求項14に記載の方法。
- バチルス・コアグランスの株が、バチルス・コアグランスMTCC5856である、請求項14に記載の方法。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201762516083P | 2017-06-06 | 2017-06-06 | |
US201762516077P | 2017-06-06 | 2017-06-06 | |
US62/516,077 | 2017-06-06 | ||
US62/516,083 | 2017-06-06 | ||
PCT/US2018/035800 WO2018226556A2 (en) | 2017-06-06 | 2018-06-04 | Anti-aging potential of extracellular metabolite isolated from bacillus coagulans mtcc 5856 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020524662A true JP2020524662A (ja) | 2020-08-20 |
JP7039626B2 JP7039626B2 (ja) | 2022-03-22 |
Family
ID=64459062
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019567239A Active JP7039626B2 (ja) | 2017-06-06 | 2018-06-04 | バチルス・コアグランスmtcc 5856から単離された細胞外代謝物のアンチエイジング能 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10966919B2 (ja) |
EP (1) | EP3634375B1 (ja) |
JP (1) | JP7039626B2 (ja) |
KR (1) | KR102288904B1 (ja) |
CN (1) | CN110996902A (ja) |
AU (1) | AU2018282252B2 (ja) |
CA (1) | CA3064939C (ja) |
WO (1) | WO2018226556A2 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6918988B2 (ja) * | 2017-06-06 | 2021-08-11 | サミ ラブズ リミテッド | Bacillus coagulans由来細胞外代謝産物のスキンケア用途 |
KR102412222B1 (ko) * | 2017-09-21 | 2022-06-23 | 새미-사빈사 그룹 리미티드 | 올레아놀산을 함유하는 트리펩타이드를 제조하는 공정 및 이의 치료적 적용 |
CN116064330B (zh) * | 2023-01-10 | 2024-05-03 | 北京工商大学 | 凝结芽孢杆菌及其应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20150044317A1 (en) * | 2012-02-28 | 2015-02-12 | Ganeden Biotech, Inc. | Topical Compositions for Reducing Visible Signs of Aging and Methods of Use Thereof |
JP2016523104A (ja) * | 2013-12-24 | 2016-08-08 | ムハンメド マジード | バチルス・コアグランスから部分精製された細胞外代謝産物の生成方法およびそれらの生物学的用途 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6645506B1 (en) * | 1997-04-18 | 2003-11-11 | Ganeden Biotech, Inc. | Topical compositions containing extracellular products of Pseudomonas lindbergii and Emu oil |
US20080038780A1 (en) * | 2006-02-15 | 2008-02-14 | Novozymes Biopolymer A/S | Production of low molecular weight hyaluronic acid |
WO2013130829A1 (en) * | 2012-02-28 | 2013-09-06 | Ganeden Biotech, Inc. | Cosmetic compositions |
KR20150060004A (ko) * | 2013-11-25 | 2015-06-03 | 주식회사 더마랩 | 항당화 및 항노화 활성이 우수한 캐럽콩추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화 화장료 조성물 |
-
2018
- 2018-06-04 US US15/996,791 patent/US10966919B2/en active Active
- 2018-06-04 CA CA3064939A patent/CA3064939C/en active Active
- 2018-06-04 CN CN201880051182.1A patent/CN110996902A/zh active Pending
- 2018-06-04 WO PCT/US2018/035800 patent/WO2018226556A2/en unknown
- 2018-06-04 AU AU2018282252A patent/AU2018282252B2/en active Active
- 2018-06-04 KR KR1020197038880A patent/KR102288904B1/ko active IP Right Grant
- 2018-06-04 EP EP18814429.9A patent/EP3634375B1/en active Active
- 2018-06-04 JP JP2019567239A patent/JP7039626B2/ja active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20150044317A1 (en) * | 2012-02-28 | 2015-02-12 | Ganeden Biotech, Inc. | Topical Compositions for Reducing Visible Signs of Aging and Methods of Use Thereof |
JP2016523104A (ja) * | 2013-12-24 | 2016-08-08 | ムハンメド マジード | バチルス・コアグランスから部分精製された細胞外代謝産物の生成方法およびそれらの生物学的用途 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
作用 哲也: "しわのメカニズム", ファルマシア, vol. 第44巻,第5号, JPN6021000287, 2008, pages 421 - 425, ISSN: 0004605605 * |
杉山 義宣: "皮膚の機能制御とスキンケア", 化学と生物, vol. 第46巻,第2号, JPN6021000286, 2008, pages 135 - 141, ISSN: 0004605604 * |
正木 仁: "抗老化素材のレビュー", 日本香粧品学会誌, vol. 第37巻,第1号, JPN6021000285, 2013, pages 11 - 16, ISSN: 0004605603 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3634375A2 (en) | 2020-04-15 |
EP3634375B1 (en) | 2024-03-13 |
US10966919B2 (en) | 2021-04-06 |
CN110996902A (zh) | 2020-04-10 |
AU2018282252B2 (en) | 2021-07-15 |
WO2018226556A3 (en) | 2019-01-17 |
CA3064939A1 (en) | 2018-12-13 |
WO2018226556A2 (en) | 2018-12-13 |
JP7039626B2 (ja) | 2022-03-22 |
EP3634375A4 (en) | 2021-03-17 |
KR20200014848A (ko) | 2020-02-11 |
US20180344628A1 (en) | 2018-12-06 |
KR102288904B1 (ko) | 2021-08-12 |
CA3064939C (en) | 2022-08-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7039626B2 (ja) | バチルス・コアグランスmtcc 5856から単離された細胞外代謝物のアンチエイジング能 | |
US11865203B2 (en) | Skin care applications of extracellular metabolites from Bacillus coagulans | |
JP6979518B2 (ja) | オレアノール酸を含有するトリペプチドを調製する方法およびその治療用途 | |
EP2200574B1 (en) | Novel use of panduratin derivatives or extract of kaempferia pandurata comprising the same | |
Loo et al. | Development on potential skin anti-aging agents of Cosmos caudatus Kunth via inhibition of collagenase, MMP-1 and MMP-3 activities | |
KR20110015171A (ko) | 연산호류 추출물 및 그것의 용도 | |
Pekmezci et al. | Proprietary herbal extract downregulates the gene expression of IL-1α in HaCaT Cells: Possible implications against nonscarring alopecia | |
JPH05306214A (ja) | 化粧料 | |
JP6666650B2 (ja) | 皮膚化粧料、頭髪化粧料および飲食品 | |
EP2987486A1 (en) | Mitochondria activator | |
EP3062636B1 (en) | Use of a vegetal extract for the prevention and treatment of hair loss | |
TWI789553B (zh) | 金針花萃取物用於製備提升骨骼肌基礎代謝率之組合物的用途 | |
KR20170052556A (ko) | 퓨코스테롤을 유효성분으로 포함하는 피부노화 개선용 및 피부 보습용 화장료 조성물 | |
Emami et al. | Anti-Melanogenic Activity of Different Extracts from Aerial Parts of Nepeta glomerulosa on Murine Melanoma B16F10 Cells: Anti-Melanogenic Activity of Nepeta glomeruloas on Murine Melanoma B16F10 Cells | |
Avila-Nava et al. | Chaya (Cnidoscolus aconitifolius (Mill.) IM Johnst) leaf extracts regulate mitochondrial bioenergetics and fatty acid oxidation in C2C12 myotubes and primary hepatocytes | |
JP6017259B2 (ja) | エンドセリン作用抑制剤 | |
WO2021084665A1 (ja) | 血小板由来成長因子(pdgf)-bb産生亢進剤、及びそれを含む幹細胞安定化剤、並びにそれらを含む皮膚抗老化剤 | |
JP2024013900A (ja) | グルタチオン産生促進剤、SPINK5 mRNA発現促進剤、KLK5 mRNA発現促進剤、KLK7 mRNA発現促進剤、角層剥離改善剤及び角層剥離正常化剤 | |
Zakaria et al. | Proliv Essence-3 (PE3): a nutricosmetic botanical blend as a dietary beverage for skin wellness and general health | |
KR20170058562A (ko) | Nrf-2 활성증진 감초 추출물의 제조방법, 및 이를 함유하는 화장료 조성물 | |
JP2020026408A (ja) | 皮膚老化防止剤及びエラスターゼ阻害活性剤 | |
KR20220143996A (ko) | 아이스플랜트 발효물과 캐리어 펩타이드를 포함하는 피부노화 개선용 화장료 조성물 | |
TW202313089A (zh) | 金針花萃取物用於製備提升抗醣化活性組成物的用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200115 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200115 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210112 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210407 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20210407 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211004 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211227 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220207 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220309 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7039626 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |