JP2020521007A

JP2020521007A - 複素環誘導体化合物の製造方法、その化合物を含む組成物及びその化合物の水和物

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Publication number: JP2020521007A
Application number: JP2020516362A
Authority: JP
Inventors: ピョン・ドギュ; オ・ギョンジン
Original assignee: JW Pharmaceutical Corp
Current assignee: JW Pharmaceutical Corp
Priority date: 2017-05-25
Filing date: 2018-05-24
Publication date: 2020-07-16
Also published as: IL294127B1; CA3061301C; EP3632917B1; IL270789B2; EP3632917A4; TW201900652A; US20200207784A1; ZA201908433B; TWI837089B; EP3632917A1; IL270789B1; KR102307504B1; US11866448B2; MX2019013937A; CA3150710C; WO2018217050A1; IL294127A; JP2022126729A; NZ758513A; CA3061301A1

Abstract

本発明は、式（Ｉ）の複素環誘導体化合物の新規の製造方法；前記製造方法に使用される新規の中間体化合物；式（Ｉ）の化合物を２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で含み、１日１回経口投与される、高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患の治療又は予防用組成物；及び新規の式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物に関する。

Description

本発明は、下記式（Ｉ）
で示される複素環誘導体化合物の新規の製造方法；前記製造方法に使用される新規の中間体化合物；式（Ｉ）の化合物を２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で含み、１日１回経口投与される、高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患の治療又は予防用組成物；及び新規な式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物に関するものである。

高尿酸血症及び痛風の治療又は予防のために現在使用されている薬剤には、ヒト尿酸アニオントランスポーター１（ｈＵＲＡＴ１）の阻害活性を有する尿酸排出促進剤であるベンズブロマロン（Benzbromarone）、並びにプロベネシド（Probenecid）及びスルフィンピラゾン（Sulfinpyrazone）が使用されている。しかし、これらの薬物は、ＵＲＡＴ１に対して十分な活性を有していない。特に、ベンズブロマロンには副作用の面でいくつかの欠点が指摘されている。ベンズブロマロンは、シトクロムＰ４５０（ＣＹＰ４５０）タンパク質の中で２Ｃ９タンパク質に対する強い阻害機能を示しているため、薬物間相互作用を引き起こす可能性がある。反応性代謝体の形成は、グルタチオン（ＧＳＨ）付加物生成実験からも報告されている（非特許文献１）。

また、ベンズブロマロンは、肝毒性を示すことが報告されているベンジオダロン、ベンザロン及びアミオダロンの薬物構造に類似したベンゾフラン系骨格を有しているため、肝障害の誘発だけでなく、肝毒性の誘発による死亡例の発生率の問題もある。従って、この薬物を服用する予定の患者の肝機能は、投与前に検査する必要があり、投与中であっても、肝毒性が誘発されているかどうかについて一定期間（６カ月）確認することが療法で推奨されている。したがって、これらの問題を解決する薬物が医薬分野で必要とされている（非特許文献２、３、４、５）。

特許文献１に、下記式（Ｉ）
（Ｉ）
で示される複素環誘導体化合物が開示されており、前記化合物の具体的な例の中には、（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン-４−イル）−メタノン（化合物４）が開示されている。

前記特許文献１には、前記複素環誘導体化合物がヒト尿酸アニオントランスポーター１（ｈＵＲＡＴ１）活性の従来の阻害剤と比較して、強いｈＵＲＡＴ１阻害活性を示しているので、尿酸再吸収の阻害剤、特に、選択的阻害剤として有用であることが開示されている。また、シトクロムＰ４５０（ＣＹＰ４５０）で薬物間相互作用を示さず、有機アニオントランスポーター間の選択性を示し、溶解度と代謝安定性がより高く、有利な薬物動態を示しているので、高尿酸血症、急性痛風関節炎、慢性痛風関節炎、痛風結節、痛風腎症、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、及び血中内尿酸増加を伴う合併症として報告された高脂血症、虚血性心疾患、心筋梗塞、動脈硬化症、脳梗塞、脳血管疾患、糖尿病、高血圧などの治療又は予防において従来の薬物と比較して優れた効果を示すことが記載されている。

前記特許文献１は、前記複素環誘導体化合物を、オマキザルに３．７５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇで経口投与した実験を記載している。これらの用量をヒトに適用可能な用量値へ論理的に変換すると、約１５ｍｇ〜６０ｍｇになり、そのような高用量では副作用のリスクが相当になる。

また、前記複素環誘導体化合物の塩酸塩の場合、その吸湿性のために、湿式造粒法による経口投与用製剤の製剤化には限界があった。

一方、前記複素環誘導体化合物の合成方法として、前記特許文献１は、式（Ｉ）の複素環誘導体化合物を製造するための工程も開示している：（１）下記式（ＶＩＩ）の化合物をハロゲン化して、下記式（Ｘ）の化合物を得て、得られた式（Ｘ）の化合物を下記式（ＩＸ）の化合物と反応させて、下記式（ＶＩＩＩ）の化合物を得るか、或いは、下記式（ＶＩＩ）の化合物と下記式（ＩＸ）の化合物を光延反応させて、下記式（ＶＩＩＩ）の化合物を得る工程；（２）得られた式（ＶＩＩＩ）の化合物を環化して、式（ＩＶ）の化合物を得る工程；及び（３）得られた式（ＩＶ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物をペプチド結合反応させる工程。

しかし、前記製造方法の中間体として得られた前記式（ＩＶ）のオキサジン誘導体のうち、下記構造
を有する３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンは、液体で不安定であり、その分解は発ガン性又は突然変異誘発を引き起こす可能性の高い不純物が生成する問題がある。これらの不純物を精製する追加の工程が必要にあるため、前記製造方法は大量生産には適していない。

また、前記製造方法における前記式（ＩＩＩ）の化合物である下記式
を有する３，５−ジブロモ−４−メトキシ-ベンゾイルクロリドは、高価な出発物質である３，５−ジブロモ−４−メトキシ安息香酸から得られており、また、式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）のオキサジン誘導体を合成する工程には、遺伝子変異が生じる可能性があるため、その可能性を最小限に抑えることができる工程が必要とされる。

一方、特許文献２は、高尿酸血症、痛風などの治療に有効な下記式
のオキサジン誘導体化合物及びその合成方法を開示している。

国際公開第２００９／１４５４５６号米国特許出願公開第２００７−００１０６７０号

Dermot F. McGinnity et al., Drug Metabolism and Disposition, 33, p1700-1707 (2005) Hautekeete M. L., et al., Liver, 15, p25-29 (1995) Makoto Arai, et al., Journal of Gastroenterology and Hepatology 17, p625-626 (2002) Saitama Medical College Magazine, 30, p187-194 (2003) Priska Kaufmann, et al., HEPATOLOGY, 41, p925-935 (2005)

式（Ｉ）の複素環誘導体化合物の従来の製造方法は、中間体として得られるオキサジン誘導体が分解して、発ガン性又は突然変異誘発を引き起こす可能性のある不純物が生成されるという問題、及び前記オキサジン誘導体と３，５−ジブロモ−４−メトキシ−ベンゾイルクロリドが合成して、遺伝的突然変異を誘発する毒性中間体が生成される問題がある。また、各工程で不純物を除去するために追加の精製工程が必要になるという欠点もあるので、製造方法が多くの工程を経る必要があり、それにより大量生産に適さなない。これらの問題を解決するために、本発明は、前記オキサジン誘導体の安定化した形態である、新規のオキサジン誘導体ＨＢｒ塩（ジヒドロブロミド、２ＨＢｒ）、及び毒性誘発物質を生成せず、インサイチュ反応が可能になり製造工程を削減し、大量生産に適した新規の安息香酸中間体を使用することを特徴とする、式（Ｉ）の複素環誘導体化合物の新規の製造方法を提供すること意図している。

また、本発明は、前記製造方法に使用される新規の中間体化合物を提供することを意図している。

さらに、本発明は、有効成分として、前記式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物を、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基に対して、２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で含み、１日１回経口投与される、高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患の治療又は予防で使用するための組成物を提供することを意図している。

さらに、本発明は、式（Ｉ）化合物の新規な塩酸塩１．５水和物（セスキ水和物）を提供することを意図している。

本発明、下記式（ＩＩＩ）で示される化合物を下記式（ＩＶ）で示される化合物とカップリング反応させる工程を含む、下記式（Ｉ）で示される化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物の製造方法を提供する：
（式中、Ｒは、水素又はｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）である）

本発明の一実施形態において、前記式（ＩＩＩ）の化合物は、下記式（ＩＩ）で示される化合物をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート及びピリジンと反応させる工程により得ることができる：

本発明の一実施形態において、前記式（Ｉ）の化合物の製造方法は、以下の工程を含むことができる：
（１）式（ＩＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物と反応させて、下記式（Ｖ）で示される化合物を得る工程；
（２）式（Ｖ）の化合物を酸の存在下でアルコールと反応させて、下記式（Ｉ）で示される化合物の塩を得る工程；及び
（３）式（Ｉ）の化合物の塩を最初に塩基と、次に酸と反応させる工程。

本発明の一実施形態において、前記工程（１）及び工程（２）は、インサイチュ反応として実施することができる。

本発明の一実施形態において、前記式（ＩＩ）の化合物から式（ＩＩＩ）の化合物を得る工程、及び前記工程（１）及び工程（２）はインサイチュ反応として実施することができる。

本発明の一実施形態において、前記式（ＩＶ）の化合物は、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンを酢酸中の臭素酸と反応させる工程により得ることができる。

また、本発明は、下記式（ＩＩＩ）
（式中、Ｒは、水素又はＢｏｃである）
で示される中間体化合物を提供する。

さらに、本発明は、下記式（ＩＶ）
で示される中間体化合物を提供する。

また、本発明は、有効成分として、前記式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物を、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基に対して、２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で含み、１日１回経口投与される、高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患の治療又は予防用医薬組成物を提供する。

さらに、本発明は、前記式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物を、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基に対して、２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で１日１回経口投与される、高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患の治療又は予防で使用するための使用を提供する。

また、本発明は、前記式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物を、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基に対して、２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で１日１回治療対象体に経口投与することを含む、前記治療対象体の高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患を治療又は予防する方法を提供する。

本発明の一実施形態において、前記式（Ｉ）の化合物の投与用量は、遊離塩基に対して、３ｍｇ〜８ｍｇであり得る。

本発明の一実施形態において、前記式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩又はこれの１．５水和物形態であり得る。

また、本発明は、式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物を提供する。

本発明の一実施形態において、前記式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物は、粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）分析において、以下の２θ位置に特徴的ピークを示す：
１１．４８±０．５°、２４．１１±０．５°、２４．７６±０．５°、２７．９９±０．５°、３１．４３±０．５°、３４．２０±０．５°

本発明の一実施形態において、前記式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物は、粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）分析において、以下の２θ位置に特徴的ピークをさらに示す：
６．８９±０．５°、１７．６１±０．５°、２１．４２±０．５°、２３．２７±０．５°

また、本発明は、前記式（Ｉ）の化合物を酢酸、塩酸水溶液及びアセトンと反応させて結晶を生成させる工程を含む、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物の製造方法を提供する。

さらに、本発明は、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物を含む、経口投与用に製剤化された医薬組成物を提供する。

本発明の一実施形態において、前記医薬組成物は錠剤形態であり得る。

本発明による式（Ｉ）の複素環誘導体化合物の製造方法は、オキサジン誘導体の代わりに、その安定化ＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）形態を使用することにより、発ガン性又は突然変異誘発を引き起こす可能性の高い不純物が生成される問題を解決した。本発明の製造方法は、３，５−ジブロモ−４−メトキシ−ベンゾイルクロリドの代わりに、新規の安息香酸中間体を使用することにより、遺伝的突然変異を誘発する毒性中間体が生成される別の問題を解決した。従って、本発明の方法は、各工程で不純物を除去するための追加の精製工程の必要性を排除し、インサイチュ反応による大量生産に適した長所を有する。

また、本発明による式（Ｉ）の化合物を２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で１日１回経口投与する投与レジメンは、高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患の治療又は予防において、顕著に優れた効果を示し、副作用発生の可能性を最小限に抑える。

さらに、従来の式（Ｉ）化合物の塩酸塩の場合、その吸湿性のために湿式造粒法により経口投与用製剤を製剤化する際に問題があったが、本発明による式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物は、この問題点を解決し、経口投与用製剤（特に、錠剤）に適した安定性を示す。

実施例１で製造した本発明の３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）のＮＭＲデータを示した図である。実施例１で製造した本発明の３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）の熱重量（ＴＧ）／示差熱分析（ＤＴＡ）結果を示した図である。実施例２で製造した本発明の式（Ｉ）の化合物のＮＭＲデータを示した図である。実施例３で製造した本発明の式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物の粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）分析結果を示した図である。３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン硫酸塩のＮＭＲデータを示した図である。３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン硫酸塩のＴＧ／ＤＴＡ結果を示した図である。３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン遊離塩基形態のＮＭＲデータを示した図である。３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン遊離塩基形態のＴＧ／ＤＴＡ結果を示した図である。式（Ｉ）化合物の塩酸塩非溶媒和物（ａ）及び本発明の式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物（ｂ）の粉末X線回折（ＸＲＤ）分析した結果を示した図である。式（Ｉ）化合物の塩酸塩非溶媒和物（ａ）及び本発明の式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物（ｂ）のＴＧ／ＤＴＡ結果を示した図である。式（Ｉ）化合物の塩酸塩非溶媒和物（ａ）及び本発明の式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物（ｂ）の水分吸着等温曲線（water sorption isotherm）を示した図である。本発明の式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物と同一化合物の塩酸塩非溶媒和物の溶解度を比較して示した図である。低用量（０．２５ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ）及び２ｍｇの用量にて本発明の式（Ｉ）の化合物を投与したときの、血中尿酸値が＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満に低下した患者の割合（％）（右バー）及び血中尿酸値が＜６．０ｍｇ／ｄＬ未満に低下した患者の割合（％）（左バー）を示した図である。投与レジメン範囲内の用量（３ｍｇ、５ｍｇ、７ｍｇ、１０ｍｇ）にて本発明の式（Ｉ）の化合物を投与したときの、血中尿酸値が＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満に低下した患者の割合（％）（右バー）及び血中尿酸値が＜６．０ｍｇ／ｄＬ未満に低下した患者の割合（％）（左バー）を示した図である。

以下、本発明をより具体的に説明する。

式（Ｉ）の化合物、その塩又は水和物の製造方法

本発明は、下記式（ＩＩＩ）で示される化合物を下記式（ＩＶ）示される化合物とカップリング反応させる工程を含む、式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物の製造方法に関する：
＜反応スキーム１＞
（式中、Ｒは、水素又はＢｏｃである）

具体的に、式（ＩＩＩ）の化合物に塩基を加え、式（ＩＶ）の化合物である３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）とカップリング反応させる。得られた中間体化合物を後処理して、式（Ｉ）の化合物である（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン又はその薬学的に許容される塩を得た。

本発明の一実施形態において、前記式（ＩＩＩ）の化合物は、下記式（ＩＩ）で示される化合物をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート及びピリジンと反応させる工程により得ることができる：
＜反応スキーム２＞

具体的に、反応器に溶媒を加え、次に式（ＩＩ）の３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシ安息香酸を加え、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートを加え、ピリジンを加え、反応させることにより式（ＩＩＩ）の化合物を得ることができる。

低コストの出発物質として用いられる式（ＩＩ）の化合物である３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシ安息香酸は、公知方法を参照することにより製造するか、又は商業的に試薬会社から購入することができる。

溶媒としては一般に反応に悪影響を及ぼさない通常のものを使用することができる。溶媒の好ましい例には、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、１，２−ジメトキシエタン、ジグリム（diglyme）などのエーテル系列溶媒；ベンゼン、トルエン、ヘキサン、キシレンなどの炭化水素系列溶媒；ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、１，２−ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素系列溶媒；メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコールなどのアルコール系列溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル、酢酸ブチルなどのエステル系列溶媒；アセトン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、アセトニトリルなどの極性溶媒が挙げられるが、これらに制限されない。前記から選ばれた２つの溶媒の混合溶媒も使用することができる。この反応にはテトラヒドロフランが好ましい。

具体的に、反応器にテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）を加え、式（ＩＩ）の化合物である３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシ安息香酸を加えた後、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートを加え、窒素雰囲気下でピリジンを加え、反応させることにより、式（ＩＩＩ）の化合物を得ることができる。このとき、反応は撹拌しながら２５〜３０℃の温度で約１〜３時間実施することができる。

得られた式（ＩＩＩ）の化合物は、新規の安息香酸中間体化合物である。従って、本発明は、下記式（ＩＩＩ）
（式中、Ｒは、水素又はＢｏｃである）
で示される化合物も含む。

本発明の式（Ｉ）の化合物の製造方法は、以下の工程を含むことができる：
（１）式（ＩＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物と反応させて、式（Ｖ）の化合物を得る工程；
（２）式（Ｖ）の化合物を酸の存在下でアルコールと反応させて、式（Ｉ）の化合物の塩を得る工程；及び
（３）式（Ｉ）の化合物の塩を最初に塩基と、次に酸と反応させる工程
＜反応スキーム３＞
（式中、Ｒは、水素又はＢｏｃである）

本発明の一実施形態において、前記工程（１）の前に、式（ＩＩ）の化合物をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート及びピリジンと反応させる工程をさらに含み得る。この場合、前記式（Ｉ）の化合物の製造方法は、下記反応スキームで示すことができる：
＜反応スキーム４＞
（式中、Ｒは、水素又はＢｏｃである）

「インサイチュ反応」とは、１つの反応器で連続的な化学反応を行うことを意味し、「ワンポット（one-pot）反応」とも称される。インサイチュ反応は非常に経済的であり、中間体化合物の分離工程及び精製工程なしで、次の反応をすぐに行うことができるため、大量生産に適している。

前記製造方法を以下で詳しく説明する。

工程（１）式（ＩＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物と反応させて、式（Ｖ）の化合物を得る工程

式（ＩＩＩ）の化合物に塩基を加え、式（ＩＶ）の化合物である３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）と反応させる。

反応に用いられる塩基の例には、トリエチルアミン、ピリジン、４−メチルアミノピリジン、４−メチルモルホリン、ピペラジン、Ｎ−メチルピペラジンなどの有機塩基系列；水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムなどの水酸化アルカリ金属系列；水素化ナトリウム、水素化カリウムなどの水素化アルカリ金属；炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウムなどの炭酸アルカリ金属系列；炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどの炭酸水素アルカリ金属；及びリン酸カリウムを挙げられる。この反応ではトリエチルアミンが好ましい。

具体的には、トリエチルアミンを反応液に加え、式（ＩＶ）の３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２HBr）を反応液に加え、反応液を２５〜３０℃の温度で約５〜７時間撹拌した。形成された塩（沈殿物）を除去した後、ろ液を収集し、次に２５〜３０℃の温度でろ液を濃縮して、式（Ｖ）の化合物であるｔｅｒｔ−ブチル−（２，６−ジブロモ−４−（１，２，３，４−テトラヒドロ−１，７−ナフチリジン−１−カルボニル）フェニル）カルボネートを得た。

工程（２）式（Ｖ）の化合物を酸の存在下でアルコールと反応させて、式（Ｉ）の化合物の塩を得る工程

式（Ｖ）の化合物であるｔｅｒｔ−ブチル−（２，６−ジブロモ−４−（１，２，３，４−テトラヒドロ−１，７−ナフチリジン−１−カルボニル）フェニル）カルボネートを含む反応器にアルコールを加え、混合物を酸の存在下で反応させて、（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）メタノンの塩を得た。

反応に用いられる酸の例には、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸などの無機酸、酒石酸、ギ酸、クエン酸、酢酸、トリクロロ酢酸又はトリフルオロ酢酸、グルコン酸、安息香酸、乳酸、フマル酸、マレイン酸などの有機カルボン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸又はナフタルスルホン酸などのスルホン酸などが挙げられる。この反応では塩酸が好ましい。

反応に用いられるアルコールの例には、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコールなどが挙げられ、この反応ではイソプロピルアルコールが好ましい。

より具体的には、式（Ｖ）の化合物であるｔｅｒｔ−ブチル−（２，６−ジブロモ−４−（１，２，３，４−テトラヒドロ−１，７−ナフチリジン−１−カルボニル）フェニル）カルボネートを含む２５〜３０℃の温度の反応器にイソプロピルアルコールを加え、濃塩酸を４５℃以下でゆっくり加え、反応液を２５〜３０℃まで冷却し、約１〜２時間撹拌した。イソプロピルアルコールを２５〜３０℃で反応液に加え、さらに約１時間撹拌した後、反応液を２０〜２５℃まで冷却した。得られた結晶をろ過し、乾燥して、（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）メタノン塩酸塩を得た。

工程（３）式（Ｉ）の化合物を最初に塩基と、次に酸と反応させて、式（Ｉ）の化合物を得る工程

水をきれいな反応器に加え、（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）メタノンの塩を反応器に加え、塩基及び酸を連続して反応させた。得られた結晶をろ過して、式（Ｉ）の化合物である（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノンを得た。

反応に用いられる塩基の例には、トリエチルアミン、ピリジン、４−メチルアミノピリジン、４−メチルモルホリン、ピペラジン、Ｎ−メチルピペラジンなどの有機塩基系列；水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムなどの水酸化アルカリ金属系列；水素化ナトリウム、水素化カリウムなどの水素化アルカリ金属又は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウムなどの炭酸アルカリ金属系列；炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどの炭酸水素アルカリ金属；及びリン酸カリウムを挙げられる。この反応では水酸化ナトリウムが好ましい。

より具体的には、水をきれいな反応器に加え、前記工程（２）で得た（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）メタノン塩酸塩を２５〜３０℃で反応器に加え、反応液を２５〜３０℃で約１５分間撹拌した。水酸化ナトリウム水溶液を２５〜３０℃でｐＨが１０．０に達するまでゆっくり加え、反応液をろ過し、ろ液を収集した。酢酸エチルを反応器に加え、撹拌して水層を分離して、塩酸水溶液を２０〜２５℃でｐＨが６．４〜６．７に達するまで加えた。得られた結晶をろ過して、式（Ｉ）の化合物である（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノンを得た。

上記で説明した式（Ｉ）の化合物の製造方法は、後記する実施例でより具体的に説明する。

式（ＩＶ）の化合物の製造方法

本発明の一実施形態において、前記式（ＩＶ）の化合物は、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンを酢酸中の臭素酸と反応させる工程を含む製造方法により製造することができる。

本発明の別の一実施形態において、前記式（ＩＶ）の化合物は、下記工程により製造することができる。
＜反応スキーム５＞

具体的に、前記製造方法は以下の通りである。
（１）４−ヒドロキシ−ニトロピリジンにホスホリルオキシクロリドを加えて、４−クロロ−３−ニトロピリジンを得る。
（２）４−クロロ−３−ニトロピリジンにグリコール酸メチル及び炭酸カリウムを加えて、メチル２−（（３−ニトロピリジン−４−イル）オキシ）アセテートを得る。
（３）メチル２−（（３−ニトロピリジン−４−イル）オキシ）アセテートに塩化アンモニウム（ＮＨ_４Ｃｌ）及び鉄（Ｆｅ）を加えて、２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オンを得る。
（４）２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オンに水素化アルミニウムリチウム（ＬｉＡｌＨ_４、ＬＡＨ）を加えて、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンを得る。
（５）３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンに酢酸中の臭素酸を加えて、最終的に式（ＩＶ）の化合物である３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）を得る。

従って、本発明は、下記式（ＩＶ）
で示される新規の中間体化合物も含む。

上記で説明した式（ＩＶ）の中間体化合物の製造方法は、後記する実施例でより具体的に説明する。

式（Ｉ）の化合物の使用

また、本発明は、有効成分として、前記式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物を、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基に対して、２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で含み、１日１回経口投与される、高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患の治療又は予防用医薬組成物に関する。

さらに、本発明は、前記式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物を、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基に対して、２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で１日１回経口投与して、高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患の治療又は予防のための使用に関する。

また、本発明は、前記式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物を、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基に対して、２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で１日１回治療対象体に経口投与することを含む、前記治療対象体の高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患を治療又は予防する方法に関する。

本発明の一実施形態において、前記医薬組成物、使用及び方法に有効成分として含まれる式（Ｉ）の化合物は、その薬学的に許容される塩や水和物形態であり得る。

このような薬学的に許容される塩には、薬学的に許容されるアニオンを含有する無毒性酸付加塩を形成する酸、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸などの無機酸、酒石酸、ギ酸、クエン酸、酢酸、トリクロロ酢酸又はトリフルオロ酢酸、グルコン酸、安息香酸、乳酸、フマル酸、マレイン酸などの有機カルボン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸又はナフタルスルホン酸などのスルホン酸などによって形成された酸付加塩が含まれており、さらにナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属との塩も含まれる。その他にも芳香族アミジン誘導体又はラクタム誘導体に関連する技術分野で公知であり、従来使用されている他の酸又は塩基との塩を含まれ得る。また、前記水和物形態には、半水和物、１水和物、１．５水和物、２水和物、３水和物などが含まれる。

具体的には、前記薬学的で許容される塩は塩酸塩であり得て、前記水和物は１．５水和物形態であり得る。

高尿酸血症（Hyperuricemia）は、血液中の異常に高いレベルの尿酸である。これは、腎臓での尿酸の排出不足又は肝臓での尿酸の過剰生産により、血中尿酸値が通常（男７〜８ｍｇ／ｄｌ、女６ｍｇ／ｄｌ）よりも高い状態と定義される。痛風（Gout）疾患は、尿酸の過剰生産又は尿酸の排出不足により、血中尿酸値が通常（男７〜８ｍｇ／ｄｌ、女６ｍｇ／ｄｌ）よりも著しく高い状態をいう。尿酸結晶は関節及び靭帯などの結合軟部組織に沈着する可能性があり、針状の尿酸結晶（Uric acid crystal）は関節周辺の筋肉を刺す可能性がある。次に、身体の免疫システムが尿酸結晶を攻撃し、これが関節の周囲に激しい痛みと腫れを引き起こす。このような発作性及び炎症性関節炎が痛風と称される。尿酸結晶は、主に足の親指の中足指節関節に沈着し、まれに腰椎にも沈着することが報告されている［Vervaeck M., et al., Clinical Neurology and Neurosurgery, 93, p233-236 (1991)］。

痛風は、関節炎以外にも、糖尿病、高血圧、心疾患、肥満、腎結石症、尿路結石症などの様々な代謝性疾患の合併症を引き起こす可能性があるため、非常に危険な要因である。痛風のピーク発生率は、主に４０歳代〜５０歳代の男性で観察され、閉経後の女性で増加している。また、肥満の人や非常に激しい運動をしている人では発症頻度が高くなっている。

痛風発作の発生率は、長年にわたって高尿酸血症にかかっている患者と密接に関連している。痛風発作の発生率は、体内の尿酸値が９ｍｇ／ｄｌ以上の場合４．９％、尿酸値が７．０〜８．９ｍｇ／ｄｌの場合０．５％、尿酸値が７．０ｍｇ／ｄｌ以下場合０．１％と報告されており、５年間の痛風発作の累積発生率は、体内の尿酸値が９ｍｇ／ｄｌ以上の患者で約２２％であった以上尿酸数値が高い患者で５年間痛風の累積発生率は約２２％であった。［Campion E. W. et al., Am. J. Med., 82, p421-426 (1987)］。

血中尿酸（UA）値を＜６．０ｍｇ／ｄＬ未満、より好ましくは＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満に下げることは、重度の痛風患者の治療にとって臨床的に重要である。式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物を、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基に対して、２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で１日１回経口投与する本発明による投与レジメンは、患者の血中尿酸値を＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満に下げるのに有意な効果がある。

具体的には、後記する実験例４から確認できるように、本発明の投与レジメンで３ｍｇ、５ｍｇ、７ｍｇ及び１０ｍｇを投与した場合、血中尿酸値が＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満に低下した患者数の百分率がそれぞれ、約２３％、約６４％、約８０％、約７３％であり、約２３％〜約８０％の範囲で観察された（図１４参照）。しかし、同じ化合物を０．２５ｍｇ、０．５ｍｇ及び１ｍｇ用量で投与した場合、血中尿酸値が＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満に低下した患者は全く観察できず、２ｍｇ用量の場合、約８％に過ぎなかった（図１３参照）。以上の実験結果から、本発明による投与レジメンの用量範囲の下限である２ｍｇを超える用量で有意な効果が生じることが分かった。

また、本発明による式（Ｉ）の化合物を２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で１日１回経口投与する投与レジメンは、ヒト尿酸アニオントランスポーター１（ｈＵＲＡＴ１）に対する強力な阻害活性を示し、高尿酸血症、例えば急性痛風関節炎、慢性痛風関節炎、痛風結節、痛風腎症などの痛風疾患；腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、並びに尿路結石症及び尿酸に関連する疾患、例えば高脂血症、虚血性心疾患、心筋梗塞、脳梗塞、脳血管疾患、糖尿病、高血圧などの治療又は予防に有用である。

本発明の一実施形態において、前記式（Ｉ）の化合物の投与用量は、１日１回経口投与で２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の範囲で患者の疾患、状態、年齢、体重及び投与形態に応じて変わり得る。具体的には、３ｍｇ〜８ｍｇの投与用量で１日１回、より具体的には３ｍｇ〜６ｍｇ投与用量で１日１回経口投与することができる。前記用量範囲は、有効成分である式（Ｉ）の化合物の遊離塩基形態に基づいており、式（Ｉ）の化合物を塩酸塩又はその１．５水和物形態で投与することができる。具体的には、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物形態で投与される場合、投与用量は２．３ｍｇ超〜１１．５ｍｇ以下であり得る。

投与用量が２ｍｇ以下では、前記疾患の治療に十分な効果が発揮できず、１０ｍｇの用量で最大の効果が示される。また、１０ｍｇを超える用量は尿酸濃度を低下させる効果を示すが、このような用量は治療過程で関節痛（Arthralgia）、関節腫脹（joint swelling）等を誘発し、患者に痛みを引き起こす可能性があり、その他の副作用の可能性もある。これらの副作用には、特に腎臓に致命的な疾患を引き起こす可能性のあるクレアチニン（creatinine）のレベルの増加が含まれる。後記する実験例５から確認できるように、本発明の投与レジメンの最大用量である１０ｍｇ用量を超える場合、関節痛、関節腫脹などの有害事例発生率及び尿中クレアチニンの濃度が増加するリスクが高くなることを推測することができる。

本発明による使用の対象は、動物、好ましくは哺乳類、最も好ましくはヒトである。

式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物

本発明はまた、式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物に関する。

本発明はまた、前記式（Ｉ）の化合物を酢酸、塩酸水溶液及びアセトンと反応させて、結晶を生成させる工程を含む式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物の製造方法を提供する。

具体的には、式（Ｉ）の化合物、（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノンを２５℃の反応器に加え、直ぐに同じ温度で酢酸を加え、反応器に水を加えた。塩酸水溶液を２５℃で反応器に加えた後、アセトンを反応液に加えて結晶を生成させた。得られた結晶をろ過して、真空乾燥して（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，３−ジヒドロ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物を得た。

上記で説明した式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物の製造方法は、後記する実施例でより具体的に説明される。

本発明の一実施形態において、前記式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物は、粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）分析において、以下の２θ位置に特徴的ピークを示す：
６．８９±０．５°、１０．８４±０．５°、１１．４８±０．５°、１３．７３±０．５°、１５．８５±０．５°、１７．６１±０．５°、１８．５１±０．５°、１９．９８±０．５°、２１．４２±０．５°、２２．９９±０．５°、２３．２７±０．５°、２４．１１±０．５°、２４．７６±０．５°、２７．３７±０．５°、２７．９９±０．５°、３１．４３±０．５°、３４．２０±０．５°

また、本発明は、前記式（Ｉ）の化合物塩酸塩１．５水和物を含む、経口投与用に製剤化された医薬組成物に関する。

本発明による医薬組成物は、有効成分として、有効量の式（Ｉ）化合物の塩酸塩１．５水和物を、薬学的に許容される担体、ビヒクル、結合剤、安定化剤及び／又は希釈剤と混合して製造され得る。本発明の医薬組成物は、当業者が容易に実施することができる方法に従って、薬学的に許容される担体及び／又は添加剤を含む製剤により、単位剤形として製造されてもよく、又は複数回投与容器に入れられて製造されてもよい。薬学的に許容される担体は、固体又は液体であり得て、添加剤、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、分散剤、吸着剤、界面活性剤、結合剤、防腐剤、崩壊剤、甘味剤、香味剤、流動化剤、放出調節剤、湿潤剤、安定化剤、懸濁化剤及び滑沢剤から選ばれる１種以上であり得る。また、薬学的に許容される担体は、生理食塩水、滅菌水、リンガー液、緩衝生理食塩水、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、エタノール及びこれらの混合物から選ばれ得る。

本発明による医薬組成物は、経口投与に適した医薬製剤の形態で製造することができる。前記医薬製剤は、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、シロップ剤又は懸濁液の形態で経口投与することができ、具体的に錠剤の形態であり得る。また、一実施形態において、前記医薬製剤は、活性成分をコーティングするか、又は胃での分解から保護するように製剤化され得る。

以下、実施例を通じて本発明をより詳細に説明する。しかし、以下の実施例は、一つ以上の実施形態を例示することのみ意図しており、本発明の範囲を限定することを意図しない。

実施例１
式（ＩＶ）の化合物である３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）の合成

（１）４−クロロ−３−ニトロピリジンの製造

５０ｇ（０．３５６ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ−ニトロピリジンを５０ｍＬ（１Ｔ）のＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）及び４５０ｍＬ（９Ｔ）の酢酸エチルに加えた。４２．５ｍＬのホスホリルオキシクロリド（ＰＯＣｌ_３、１．３ｅｑ）を加え、混合物を加熱し、７０〜８０℃で２時間還流した。反応完了後、反応液を４０℃まで冷却し、２００ｍＬの水を加えて反応を終了させた。分離した有機層を２００ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ_３）、２００ｍＬの塩水でそれぞれ洗浄し、収集した有機層を硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ_４）で乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮して、６０ｇの淡黄色の濃縮結晶として４−クロロ−３−ニトロピリジンを得た。

（２）メチル２−（（３−ニトロピリジン−４−イル）オキシ）アセテートの製造

前記工程（１）で得られた６０ｇ（０．３５６ｍｍｏｌ）の４−クロロ−３−ニトロピリジンを３００ｍＬ（５Ｔ）のＤＭＦに溶解させ、３６ｍＬ（１．３ｅｑ）のグリコール酸メチルと７４ｇ（１．５ｅｑ）の炭酸カリウム（Ｋ_２ＣＯ_３）粉末を加え、混合物を加熱し、７０〜８０℃で１〜２時間反応させた。反応完了後、室温まで冷却し、１５０ｍＬの１０％ＨＣｌを加えて溶解及び中和し、５００ｍＬの酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を１５０ｍＬの塩水で洗浄し、得られた有機層を減圧下濃縮し、真空乾燥して、６２ｇ（８２％）の薄茶色の固体としてメチル２−（（３−ニトロピリジン−４−イル）オキシ）アセテートを得た。

（３）２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オンの製造

前記工程（２）で得られた６２ｇ（０．２９１ｍｍｏｌ）のメチル２−（（３−ニトロピリジン−４−イル）オキシ）アセテートを４８０ｍＬのアセトニトリル（ＡＣＮ）と１２０ｍＬの水（Ｈ_２Ｏ）に溶解させ、１６ｇ（１．０ｅｑ）の塩化アンモニウム（ＮＨ_４Ｃｌ）と３３ｇ（２．０ｅｑ）の鉄（Ｆｅ）粉末を加え、混合物を加熱し、７０〜８０℃で２時間反応させた。反応完了後、室温まで冷却し、３０ｍＬの濃塩酸を加え、混合物を３０分間撹拌した。反応液をろ過して不溶物を除去した。得られた反応液を、固体が得られるまで濃縮した。濃縮物をメタノールに加え、撹拌及びろ過して、２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン塩酸塩を得た。水に溶解させ後、１０％水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）で中和（ｐＨ６〜７）し、得られた固体をろ過し、乾燥して、２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オンを得た。

¹H-NMR(300MHz, MeOD-d): δ = 8.06(m, 2H), 6.97(s, 1H), 4.72(s, 2H)

（４）３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンの製造

前記工程（３）で得られた３８ｇ（０．２５１ｍｍｏｌ）の２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オンを５７０ｍＬのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（１５Ｔ）に加え、反応液の温度を０℃まで冷却した。１５ｇ（１．５ｅｑ）の水素化アルミニウムリチウム（ＬｉＡｌＨ_４、ＬＡＨ）を数回加え、反応液を室温に加熱し、２時間撹拌した。反応完了後、０℃まで冷却し、４０ｍＬのＨ_２Ｏをゆっくり滴加し、混合物を１０分間撹拌した。８０ｍＬの５％−ＮａＯＨ溶液を滴加し、室温で３０分間撹拌した。反応液をろ過して、Ａｌ（ＯＨ）_３不溶物を除去した。ろ液を１０％−ＨＣｌで中和（ｐＨ７）し、酢酸エチルで抽出し、塩水で洗浄し、有機層を硫酸ナトリウム（Ｎａ_２ＳＯ_４）で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下濃縮して、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンを得た（３０ｇ、９０％）。

（５）３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）の製造

１００ｇ（０．６６６ｍｏｌ）の２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オンを５７０ｍＬのＴＨＦ（１５Ｔ）中で撹拌し、反応液の温度を０℃まで冷却した。３８ｇ（０．９９９ｍｏｌ、１．５ｅｑ）の水素化アルミニウムリチウム（ＬｉＡｌＨ_４、ＬＡＨ）を数回加え、反応液を室温に加熱し、２時間撹拌した。反応完了後、０℃まで冷却及びクエンチし、ろ過し、濃縮し、ＭＣ（塩化メチレン）と共に撹拌し、ろ過した。このとき用いられたＭＣは、２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オンの１０００ｍＬ（１０ｖ／ｗ）であった。３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン／ＭＣ溶液に、１．８当量（２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オンに対して、１．１９９ｍｍｏｌ）に相当する２９４ｇ（２１０ｍＬ）の３３％酢酸中の臭素酸（ｄ、１．４０ｇ／ｍＬ）を２０〜３０℃で２０〜３０分間滴加した。得られた結晶溶液を室温で１時間撹拌し、５〜１０℃まで冷却した後、３０分間さらに撹拌した。結晶液をろ過し、３００〜５００ｍＬのＭＣで洗浄し、室温で５時間真空乾燥して、９５％の収率で下記式（ＩＶ）の化合物である３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）を得た：

前記化合物のＮＭＲデータを図１に示し、熱重量分析（ＴＧ）／示差熱分析（ＤＴＡ）結果を図２に示した。

実施例２
式（Ｉ）の化合物である（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノンの合成

２５〜３０℃で反応器にテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）１Ｌを加え、３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシ安息香酸１３９ｇ（０．４７０ｍｏｌ）を加え、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート２７８ｇ（１．２７ｍｏｌ）を反応器に加えた。窒素雰囲気下でピリジン１２５ｇ（１．５８ｍｏｌ）を加え、反応液を２５〜３０℃で２時間撹拌して、３，５−ジブロモ−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ−安息香酸及び３，５−ジブロモ−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）安息香酸（ｔｅｒｔ−ブチルカルボニル）無水物を含有する反応液を得た。

前記反応液にトリエチルアミン１７０ｇ（１．６８ｍｏｌ）を２５〜３０℃の温度で加え、前記実施例１で製造した３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）１００ｇを反応液に加えた。反応液を２５〜３０℃の温度で６時間撹拌した。形成した塩を除去し、ろ液を収集し、２５〜３０℃の温度でろ液を濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル−（２，６−ジブロモ−４−（１，２，３，４−テトラヒドロ−１，７−ナフチリジン−１−カルボニル）フェニル）カルボネートを得た。

ｔｅｒｔ−ブチル−（２，６−ジブロモ−４−（１，２，３，４−テトラヒドロ−１，７−ナフチリジン−１−カルボニル）フェニル）カルボネートを含有する２５〜３０℃の温度の反応器に、イソプロピルアルコール５００ｍＬを加え、濃塩酸５００ｍＬを４５℃以下でゆっくり加えた。反応液を２５〜３０℃まで冷却し、１〜２時間撹拌した。イソプロピルアルコール３Ｌを２５〜３０℃で反応液に加え、１時間さらに撹拌した後、反応液を２０〜２５℃まで冷却した。得られた結晶をろ過し、乾燥して、（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）メタノン塩酸塩を得た。

水をきれいな反応器に加え、前記で得られた（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）メタノン塩酸塩を２５〜３０℃で反応器に加え、反応液を２５〜３０℃で１５分間撹拌した。４Ｎ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍＬを２５〜３０℃でｐＨが１０．０に達するまでゆっくり加え、反応液をろ過し、ろ液を収集した。酢酸エチルを反応器に加え、撹拌して水層を分離し、１０％塩酸水溶液を２０〜２５℃でｐＨが６．４〜６．７に達するまで加えた。得られた結晶をろ過して、式（Ｉ）の化合物である（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノンを得た（収率６０％、純度９８．０％以上）。前記化合物のＮＭＲデータを図３に示した。

実施例３
（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物の合成

前記実施例２で製造した（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン８３ｇを２５℃で反応器に加え、酢酸５８４ｍＬを同温度ですぐに加え、反応器に水８３ｍＬを加えた。２Ｍ塩酸水溶液１１１ｍＬを２５℃で反応器に加えた後、アセトン６８８ｍＬを反応液に加えて結晶を形成させ、得られた結晶をろ過し、１２時間真空乾燥して、（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，３−ジヒドロ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物を得た（収率９０％、純度９９．９％）。

得られた（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，３−ジヒドロ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物を粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）分析した結果を図４に示した。図４に示すように、（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，３−ジヒドロ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物は、以下の２θ位置に特徴的ピークを示した：

６．８９±０．５°、１０．８４±０．５°、１１．４８±０．５°、１３．７３±０．５°、１５．８５±０．５°、１７．６１±０．５°、１８．５１±０．５°、１９．９８±０．５°、２１．４２±０．５°、２２．９９±０．５°、２３．２７±０．５°、２４．１１±０．５°、２４．７６±０．５°、２７．３７±０．５°、２７．９９±０．５°、３１．４３±０．５°、３４．２０±０．５°

実験例１
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）の安定性

実施例１で製造した本発明の３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）及び同じ方法で製造した異なる塩の安定性比較実験を行った。３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンリン酸塩は固体形態ではなくゲル形態で得られた。３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン塩酸塩も半固体形態で不安定であった。固体形態で得られた物質は、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）と３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン硫酸塩であった。

下記表１に示すように、硫酸塩形態の場合、得られた物質の純度が３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン遊離塩基形態の純度よりも低くなっただけでなく、安定性実験で固体が再び液体に融解する現象が発生した。一方、ＨＢｒ塩形態の場合、純度が遊離塩基形態よりも改善されただけでなく、４週間の安定性実験でも開始時の純度と比較して顕著な変化は見られなかった。

また、前記ＨＢｒ塩形態、硫酸塩形態及び遊離塩基形態についてＮＭＲを測定し、熱重量分析（ＴＧ）及び示差熱分析（ＤＴＡ）を行った。

ＨＢｒ塩（２ＨＢｒ）のＮＭＲデータを図１に示し、熱重量（ＴＧ）／示差熱分析（ＤＴＡ）結果を図２に示した。

また、硫酸塩のＮＭＲデータを図５に示し、ＴＧ／ＤＴＡ結果を図６に示した。

また、遊離塩基のＮＭＲデータを図７に示し、ＴＧ／ＤＴＡ結果を図８に示した。

実験例２
（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物の安定性

実施例３で製造した本発明の（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物及び同じ化合物の塩酸塩非溶媒和物について粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）分析、ＴＧ／ＤＴＡ及び水分吸着等温曲線を測定し、その結果を図９〜１１に示した。

具体的に、前記非溶媒和物（ａ）及び１．５水和物（ｂ）の粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）分析した結果を図９に示した。

前記非溶媒和物（ａ）及び１．５水和物のＴＧ／ＤＡＴ（ｂ）の結果を図１０に示した。

前記非溶媒和物（ａ）及び１．５水和物（ｂ）の水分吸着等温曲線を図１１に示した。

また、前記１．５水和物と非溶媒和物の製造における物理的安定性（Physical Stability to Processing Factors）を比較し、その結果を下記表２に示した。

＊：乳鉢（mortar）を使用してサンプルを約２分間すりつぶした。
＊＊：３０％ｖ/ｗ溶媒を加えた後、乳鉢を使用してサンプルを約２分間造粒した。造粒したサンプルを密閉バイアルに約１時間保存した後、サンプルを５０℃で約３時間乾燥した。
＊＊＊：７ｍｍの厚板パンチを使用して２トンの圧力で５秒間サンプルを打錠した。
＊＊＊＊：粉末Ｘ線回折計を使用して結晶性を評価した。

前記表２に示すように、すりつぶし及び打錠における結晶性変化を比較した結果、１．５水和物は非溶媒和物より極めて安定であった。さらに、造粒における固体形態を比較した結果、非溶媒和物は、部分的に１．５水和物の形態に転移したが、１．５水和物は変化を示さなかった。従って、１．５水和物は非溶媒和物よりも優れた物理的安定性を示すことが分かった。

実験例３
（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物の溶解性

実施例３で製造した本発明の（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物及び同じ化合物の塩酸塩非溶媒和物の溶解度を比較した。媒質としてＦｅＳＳＩＦ（ｐＨ５．０）５０ｍＬを使用し、パドル速度を５０ｒｐｍにして、３７℃の操作条件で試験を行った。化合物１０ｍｇとラクトース１００ｍｇの物理的混合物を試料として使用して溶解度を測定した。その結果を図１２に示した。２４０分では、塩酸塩１．５水和物の溶解度は約１２５μｇ／ｍＬであったが、非溶媒和物の溶解度は約１１２．５μｇ／ｍＬに減少したことが分かった。

実験例４
（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノンの用量ごとの効果の比較実験

合計６０人の痛風患者を対象に、実施例３で製造した本発明の（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物を投与した。有効成分の（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン（式（Ｉ））として、０．２５ｍｇ（Ｎ＝１２）、０．５ｍｇ（Ｎ＝１２）、１ｍｇ（Ｎ＝１２）及び２ｍｇ（Ｎ＝１２）の前記化合物、並びにプラセボ（Ｎ＝１２）を１４日間経口投与し、血中尿酸値などの有効性及び安全性をプラセボと比較して評価した。

投与後１５日目に血中尿酸値を測定し、血中尿酸値が＜６．０ｍｇ／ｄＬ未満及び＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満を下回った患者の百分率を決定し、図１３に示した。図１３に示すように、０．２５ｍｇ、０．５ｍｇ及び１ｍｇの用量で投与した場合、血中尿酸値が＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満に低下した患者は観察されなかった。２ｍｇ用量の場合のみ、わずか約８％観察された。前記結果から、投与用量が２ｍｇ未満の用量は高尿酸血症、痛風などの疾患の治療に効果的でないことが分かった。

さらに、合計６８人の痛風患者に対して、本発明の（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物を投与した。有効成分の（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン（式（Ｉ））として、３ｍｇ（Ｎ＝１３）、５ｍｇ（Ｎ＝１４）、７ｍｇ（Ｎ＝１５）及び１０ｍｇ（Ｎ＝１５）の用量の前記化合物、並びにプラセボ（Ｎ＝１１）を１４日間経口投与し、血中尿酸値などの有効性及び安全性をプラセボと比較して評価した。

投与後１５日目に血中尿酸値を測定し、血中尿酸値が＜６．０ｍｇ／ｄＬ未満及び＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満を下回った患者数の百分率を決定し、図１４に示した。図１４に示すように、３ｍｇ、５ｍｇ、７ｍｇ及び１０ｍｇの用量で投与した場合、血中尿酸値が＜５．０ｍｇ／ｄＬ未満を下回った患者数の百分率はそれぞれ、約２３％、約６４％、約８０％、約７３％であり、約２３％〜約８０％の範囲であった。血中尿酸値が＜６．０ｍｇ／ｄＬ未満に低下した患者も、すべての実験用量で見られた。

前記実験結果から、本発明による投与レジメンの用量範囲の下限である２ｍｇを超える用量で有意な効果が生じることが分かった。

実験例５
（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノンの用量ごとの副作用の検討

合計７６人の痛風患者を対象に、実施例３で製造した本発明の（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン塩酸塩１．５水和物を投与した。有効成分の（３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル）（２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル）−メタノン（式（Ｉ））として、３ｍｇ（Ｎ＝１４）、５ｍｇ（Ｎ＝１５）、７ｍｇ（Ｎ＝１７）及び１０ｍｇ（Ｎ＝１７）の用量化合物、並びにプラセボ（Ｎ＝１３）を１４日間経口投与し、有害薬物反応を調べた。その結果、下記表３に示すように、前記投与レジメンは、関節痛、関節腫脹などの有害事象を示さないか、又はその発生率は極めて低かった。

また、同じ患者の尿中クレアチニン濃度を測定した。クレアチニンがベースラインと比較して０．３ｍｇ／ｄＬ以上又は１．５倍以上増加した例数を下記表４に示した。

前記表４に示すように、プラセボ群と５ｍｇ用量群では、共通して１例のみが観察されたが、最大用量である１０ｍｇ用量群では３例が観察された。前記結果から、用量が最大用量の１０ｍｇを超えると、尿中クレアチニン濃度が増加するリスクが高くなると推測できた。

Claims

下記式（ＩＩＩ）で示される化合物を、式（ＩＶ）で示される化合物とカップリング反応させる工程：
（式中、Ｒは、水素又はｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）である）
を含む、下記式（Ｉ）で示される化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物の製造方法。
式（ＩＩＩ）の化合物が、下記式（ＩＩ）で示される化合物をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート及びピリジンと反応させる工程：
により得られることを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
（１）式（ＩＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物と反応させて、下記式（Ｖ）で示される化合物を得る工程；
（２）式（Ｖ）の化合物を酸の存在下でアルコールと反応させて、下記式（Ｉ）で示される化合物の塩を得る工程；及び
（３）式（Ｉ）の化合物の塩を最初に塩基と、次に酸と反応させる工程：
を含むことを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
前記工程（１）及び工程（２）が、インサイチュ反応として実施されることを特徴とする請求項３に記載の製造方法。
式（ＩＩＩ）の化合物が、下記式（ＩＩ）で示される化合物をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート及びピリジンと反応させる工程：
によって得られ、
前記工程、工程（１）及び工程（２）がインサイチュ反応として実施されることを特徴とする請求項３に記載の製造方法。
式（ＩＶ）の化合物が、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］［１，４］オキサジンを酢酸中の臭素酸と反応させる工程により得られることを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
下記式（ＩＩＩ）
（式中、Ｒは、水素又はＢｏｃである）
で示される化合物。
下記式（ＩＶ）
で示される化合物。
有効成分として、下記式（Ｉ）
で示される化合物、その薬学的に許容される塩又はその水和物を、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基に対して、２ｍｇ超〜１０ｍｇ以下の投与用量で含み、１日１回経口投与される、高尿酸血症、痛風疾患、腎炎、慢性腎不全、腎結石症、尿毒症、尿路結石症、又は尿酸に関連する疾患の治療又は予防用医薬組成物。
投与用量が、３ｍｇ〜８ｍｇであることを特徴とする請求項９に記載の医薬組成物。
有効成分が、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩又はその１．５水和物であることを特徴とする請求項９に記載の医薬組成物。
請求項９に記載の式（Ｉ）で示される化合物の塩酸塩１．５水和物。
粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）分析において、下記：
１１．４８±０．５°、２４．１１±０．５°、２４．７６±０．５°、２７．９９±０．５°、３１．４３±０．５°、３４．２０±０．５°
の２θ位置に特徴的ピークを示すことを特徴とする請求項１２に記載の式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物。
下記
６．８９±０．５°、１７．６１±０．５°、２１．４２±０．５°、２３．２７±０．５°
の２θ位置で特徴的ピークをさらに示すことを特徴とする請求項１３に記載の式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物。
下記式（Ｉ）
で示される化合物を酢酸、塩酸水溶液及びアセトンと反応させて結晶を生成させる工程を含む、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物の製造方法。
請求項１２〜１４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物の塩酸塩１．５水和物を含む、経口投与用に製剤化された医薬組成物。
錠剤形態であることを特徴とする請求項１６に記載の医薬組成物。