JP2020518276A5 - - Google Patents

Claims (6)

1. 遺伝子改変ヒトＴ細胞を産生する方法であって、前記方法は、
   （ａ）核酸分子を前記ヒトＴ細胞に導入すること、ここで、前記核酸分子は、
   （ｉ）キメラ抗原受容体をコードする核酸配列を含む第１の発現カセットと；
   （ｉｉ）ベータ２ミクログロブリンに対して阻害性であるＲＮＡ干渉分子をコードする核酸配列を含む第２の発現カセットと；
   （ｉｉｉ）５’相同性アームと；
   （ｉｖ）３’相同性アームと；を含み、前記５’相同性アーム及び前記３’相同性アームが、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）アルファ定常領域遺伝子内のヌクレアーゼ認識配列に隣接する染色体領域と相同性を有し、
   及び
   （ｂ）前記ヌクレアーゼ認識配列に対して特異性を有する操作されたヌクレアーゼをコードするｍＲＮＡを前記ヒトＴ細胞に導入すること、ここで、前記操作されたヌクレアーゼが前記細胞内で発現され；
   を含み、
   ここで、前記核酸分子が、ＡＡＶ６の血清型を有するアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを使用して前記ヒトＴ細胞に導入され、
   前記操作されたヌクレアーゼが、前記ヒトＴ細胞のゲノム中の前記ヌクレアーゼ認識配列に結合して切断し、切断部位を生成し、
   前記核酸分子が、相同組換えにより前記切断部位で前記ヒトＴ細胞のゲノムに挿入され、及び
   前記遺伝子改変ヒトＴ細胞でのベータ２ミクログロブリンの細胞表面発現が、細胞表面ベータ２ミクログロブリン発現を低下させるように遺伝子改変されていない対照細胞での細胞表面ベータ２ミクログロブリン発現と比較して、約９０％から約９５％低下している、遺伝子改変ヒトＴ細胞を産生する方法。
2. 前記操作されたヌクレアーゼが、操作されたメガヌクレアーゼ、ＴＡＬＥＮ、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ、コンパクトＴＡＬＥＮ、又はメガＴＡＬである、請求項１記載の方法。
3. 前記操作されたヌクレアーゼが、操作されたメガヌクレアーゼである、請求項１又は２に記載の方法。
4. 前記ヌクレアーゼ認識配列が配列番号１からなる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
5. 請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法により作製された、遺伝子改変ヒトＴ細胞。
6. 薬学的に許容可能な担体と、治療的有効量の請求項５に記載の前記遺伝子改変ヒトＴ細胞と、を含む、医薬組成物。