JP2020059730A - 糖尿病網膜症を予防または治療するための方法 - Google Patents
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Abstract
Description
ミノゲンとフィブリンはより高い親和力を有し、さらにより高い速度でPAsによって活性化されることができる。この二つの形式のプラスミノゲンのArg560−Val561ペプチド結合はuPAまたはtPAによって切断され、これによりジスルフィド結合によって接続された二重鎖プロテアーゼプラスミンが形成される(非特許文献10)。プラスミノゲンのアミノ基末端は五つの同由来トリサイクルを含み、即ちいわゆるkringleであり、カルボキシル末端部分はプロテアーゼドメインを含む。一部のkringleはプラスミノゲンとフィブリン及びその阻害剤α2−APの特異性相互作用を介在するリシン結合部位を有する。最新的に、38kDaのプラスミノゲンはフラグメントであり、kringle1−4を含み、血管生成の効果的な阻害剤である。このフラグメントはアンギオスタチンと命名され、いくつかのプロテアーゼがプラスミノゲンを加水分解することによって生成される。
る。具体的には、前記低下は先天的、継発的、及び/または局所的なものである。
なくとも80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%または99%の配列同一性を有し、且つ依然としてプラスミノゲン活性を有する。一つの実施形態において、前記プラスミノゲンはプラスミノゲン活性フラグメントを含有し、且つ依然としてプラスミノゲン活性を有するタンパク質である。一つの実施形態において、前記プラスミノゲンはGlu−プラスミノゲン、Lys−プラスミノゲン、ミニプラスミノゲン、マイクロプラスミノゲン、δ−プラスミノゲンまたはそれらの任意の組み合わせから選ばれるものである。一つの実施形態において、前記プラスミノゲンは、体表、静脈内、筋肉内、皮下、吸入、椎管内または直腸投与、局所注射による投与、及び/または角膜における遺伝子銃による局所投与、結膜下注射、前房内注射、点眼剤による角膜上投与、側頭縁から前室への注射、基質内注射、電気パルスと組み合わせた角膜投与、角膜内注射、網膜下注射、硝子体内注射及び眼内注射により全身または局所にて投与される。一つの実施形態において、前記プラスミノゲンは一種類または複数種類の他の薬物、前記他の薬物は抗糖尿病薬、抗心脳血管疾患薬、抗血栓薬、抗高血圧薬、高脂血症治療薬、抗感染薬物及びその他の併発疾患を治療するための通常の薬物と組み合わせて投与できる。
01−2000mg/kg、0.001−800mg/kg、0.01−600mg/kg、0.1−400mg/kg、1−200mg/kg、1−100mg/kg、10−100mg/kg(体重一キロあたりで計算)または0.0001−2000mg/cm2、0.001−800mg/cm2、0.01−600mg/cm2、0.1−400mg/cm2、1−200mg/cm2、1−100mg/cm2、10−100mg/cm2(体表面積平方センチメートルあたりで計算)の用量で投与し、好ましくは少なくとも一回繰り返し、好ましくは毎日投与する。局所投与の場合、前記用量はさらに状況に応じてさらに調整できる。
とも80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%または99%の配列同一性を有し、且つ依然としてプラスミノゲン活性を有する。一つの実施形態において、プラスミノゲンは配列2、6、8、10または12に基づいて、1−100、1−90、1−80、1−70、1−60、1−50、1−45、1−40、1−35、1−30、1−25、1−20、1−15、1−10、1−5、1−4、1−3、1−2、1個のアミノ酸を追加、削除及び/または置換したもので、且つ依然としてプラスミノゲン活性を有するタンパク質である。一つの実施形態において、プラスミノゲンはプラスミノゲン活性フラグメントを含有し、且つ依然としてプラスミノゲン活性を有するタンパク質である。一つの実施形態において、プラスミノゲンはGlu−プラスミノゲン、Lys−プラスミノゲン、ミニプラスミノゲン、マイクロプラスミノゲン、δ−プラスミノゲンまたはそれらの任意の組み合わせから選ばれるものである。一つの実施形態において、プラスミノゲンは以下から選ばれる保存的な置換バリアントである:Glu−プラスミノゲン、Lys−プラスミノゲン、ミニプラスミノゲン、δ−プラスミノゲンまたはマイクロプラスミノゲン。一つの実施形態において、プラスミノゲンはヒト天然プラスミノゲンであり、例えば配列2が示すプラスミノゲンのオルソログであり、例えば、霊長類動物またはげっ歯類動物に由来するプラスミノゲンのオルソログであり、例えばゴリラ、アカゲザル、マウス、ウシ、ウマ、イヌに由来するプラスミノゲンのオルソログである。もっとも好ましくは、本発明のプラスミノゲンのアミノ酸配列は配列2、6、8、10または12に示される通りである。
2、0.001−800mg/cm2、0.01−600mg/cm2、0.1−400mg/cm2、1−200mg/cm2、1−100mg/cm2、10−100mg/cm2(体表面積平方センチメートルあたりで計算)の用量で投与し、好ましくは少なくとも一回繰り返し、好ましくは毎日投与する。局所投与の場合、前記用量はさらに状況に応じてさらに調整することができる。
くとも一回繰り返し、好ましくは毎日投与する。局所投与の場合、前記用量はさらに状況に応じてさらに調整することができる。
変、糖尿病性神経病変、糖尿病網膜症、糖尿病性皮膚病変である。
「糖尿病」は遺伝的要素、免疫機能の乱れ、微生物感染及びその毒素、フリーラジカル毒素、精神要素などの各種病気誘発因子が生体に作用することによってもたらされる、イ
ンスリン減退、インスリン抵抗などによって引き起こされる糖、タンパク質、脂肪、水及び電解質等の一連の代謝の乱れが生じる症候群であり、臨床的には高血糖を主な特徴とする。
る通りである。体内において、さらにGlu−プラスミノゲンの第76−77位のアミノ酸の位置で加水分解することにより形成されたLys−プラスミノゲンが存在し、例えば配列6に示されるものであり、該アミノ酸配列をコードするcDNA配列は配列5が示す通りである。Δ−プラスミノゲン(δ−plasminogen)はフルサイズのプラスミノゲンにKringle2−Kringle5構造の欠損が生じているフラグメントであり、Kringle1及びセリンプロテアーゼドメインのみしか含有せず(非特許文献18,19)、δ−プラスミノゲンのアミノ酸配列(配列8)を報告している文献があり(非特許文献19)、該アミノ酸配列をコードするcDNA配列は例えば配列7に示す通りである。ミニプラスミノゲン(Mini−plasminogen)はKringle5及びセリンプロテアーゼドメインからなり、残基Val443−Asn791(シグナルペプチドGlu−プラスミノゲン配列を含まないGlu残基を開始アミノ酸とする)について文献が報告しており(非特許文献20)、そのアミノ酸配列は配列10に示される通りであり、該アミノ酸配列をコードするcDNA配列は配列9が示す通りである。しかしマイクロプラスミノゲン(Micro−plasminogen)はセリンプロテアーゼドメインのみ含有し、そのアミノ酸配列は残基Ala543−Asn791(シグナルペプチドを含まないGlu−プラスミノゲン配列のGlu残基は開始アミノ酸である)と文献が報告し(非特許文献21)、特許文献CN102154253Aはそれが残基Lys531−Asn791を含むと開示し(シグナルペプチドを含まないGlu−プラスミノゲン配列のGlu残基を開始アミノ酸とする)、本特許の配列は特許文献CN102154253Aを参照でき、そのアミノ酸配列は配列12に示される通りであり、該アミノ酸配列をコードするcDNA配列は配列11に示される通りである。
activator,PA)の介在下において、開放性のコンフォメーションを有する活性プラスミンとなる。活性を有するプラスミンはさらにフィブリン凝塊をフィブリン加水分解生成物及びD−二量体に加水分解して、これにより血栓を溶解させる。そのうちプラスミノゲンのPapドメインはプラスミノゲンを非活性閉鎖コンフォメーションに維持する重要な決定クラスターであり、しかしKRドメインは受容体及び基質上のリシン残基と結合できるものである。プラスミノゲン活性化剤としての酵素は、既に複数種類知られ、以下を含む:組織プラスミノゲン活性化剤(tPA)、ウロキナーゼプラスミノゲン活性化剤(uPA)、カリクレイン及び凝結因子XII(ハーゲマン因子)などである。
ラスミノゲン活性化剤の活性に対する測定(t−PAA)、血漿組織プラスミノゲン活性化剤抗原に対する測定(t−PAAg)、血漿組織プラスミノゲン活性に対する測定(plgA)、血漿組織プラスミノゲン抗原に対する測定(plgAg)、血漿組織プラスミノゲン活性化剤の阻害物活性に対する測定、血漿組織プラスミノゲン活性化剤の阻害物抗原に対する測定、血漿プラスミン−抗プラスミン複合物に対する測定(PAP)。最もよく見られる測定方法は発色基質法である:測定対象の血漿中にストレプトキナーゼ(SK)と発光基質を添加し、測定対象の血漿中のPLGはSKの作用下においてPLMとなり、後者は発光基質に作用し、その後に分光光度計で測定し、吸光度の増加はプラスミノゲンの活性と正比例関係となる。この他にも免疫化学法、ゲル電気泳動法、免疫比濁法、放射免疫拡散法などを用いて血液中のフィブリンプラスミノゲン活性に対して測定を行う。
種性と同種性由来のリーダー配列(N端メチオニン残基を有するか有しない)を含む融合物;等々である。
分数X/Y×100
プラスミノゲンは自然界から分離及び精製され、さらに治療の用途に用いられるものであり、さらには標準的な化学ペプチド合成技術によって合成することができる。化学的手
法によりポリペプチドを合成する際、液相または固相で合成を行うことができる。固相ポリペプチド合成(SPPS)(配列のC末端アミノ酸を不溶性支持体に附着させ、順番に配列中の残りのアミノ酸を添加する)はプラスミノゲンの化学的合成に適したものである。各種形式のSPPS、例えばFmoc及びBocは、プラスミノゲンの合成に用いることができる。固相合成に用いられる技術は以下に記載されている:Barany及びSolid−Phase Peptide Synthesis;3−284ページ、The
Peptides:Analysis,Synthesis,Biology.第二巻:Special Methods in Peptide Synthesis,Part A.,Merrifield,tら J.Am.Chem.Soc.,85:2149−2156(1963);Stewartら,Solid Phase Peptide Synthesis,2nd ed.Pierce Chem.Co.,Rockford,Ill.(1984);及びGanesan A.2006Mini Rev.Med Chem.6:3−10及びCamarero JAら 2005Protein Pept Lett.12:723−8。簡単に言えば、その上にペプチド鎖の機能性ユニットにより不溶性の多孔ビーズを処理する。カップリング/脱保護の繰り返し循環後に、附着した固相の遊離N末端アミンと単一のN保護を受けているアミノ酸ユニットをカップリングさせる。それから、該ユニットを脱保護し、他のアミノ酸と接続する新しいN末端アミンを露出させる。ペプチドを固相上に固定したままにし、それからそれを切除する。
り、そのうちの適切な担体は必要に応じて発現制御配列(例えばプロモーター)、複製開始点、終止配列など含む。典型的なプロモーターは3−ホスホグリセリン酸キナーゼ及びその他の糖分解酵素を含む。誘導型酵母はエタノール脱水素酵素、イソ細胞色素C、及び麦芽糖とガラクトースの利用のための酵素のプロモーターによって起動される。
必要とする純度のプラスミノゲンと選択可能な薬用担体、賦形剤、または安定剤(Remington’s Pharmaceutical Sciences,第16版,Osol,A.ed.(1980))を混合して凍結乾燥製剤または水溶液を形成して治療用の配合剤を得る。許容可能な担体、賦形剤、安定剤は所要の用量及び濃度下において被験者に対して毒性がなく、さらに例えばリン酸塩、クエン酸塩及びその他の有機酸などの緩衝剤を含む。抗酸化剤はアスコルビン酸和メチオニンを含む;防腐剤(例えばベンジルジメチルステアリルアンモニウムクロリド水和物;塩化ヘキサメチレンジアミン;塩化ベンザルコニウム(benzalkonium chloride)、ベンゼトニウムクロリド;フェノール、ブタノールまたはベンジルエタノール;アルキルパラヒドロキシ安息香酸エステル、例えばメチルまたはプロピルのパラヒドロキシ安息香酸エステル;ピロカテコール;レソルシノール;シクロヘキサノール;3−ペンチルエタノール;m−クレゾール);低分子量ポリペプチド(少なくとも10個の残基を有するもの);タンパク質例えば血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン;親水性重合体、例えばポリゼニールピロリドン;アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン酸、ヒスチジン、アルギニンまたはリシンである;単糖、二糖及びその他の炭水化物はブドウ糖、マンノース、またはデキストリンを含む;キレート剤は例えばEDTAである;糖類は例えばショ糖、マンニトール、フコースまたはソルビトールである;塩形成イオン、例えばナトリウム;金属複合体(例えば亜鉛−タンパク複合体);及び/または非イオン界面活性剤、例えばTWEENTM、PLURONICSTMまたはポリエチレングリコール(PEG)である。好ましくは凍結乾燥された抗−VEGF抗体配合剤であり、WO 97/04801に記載されているとおりであり、本明細書において参考とされるものである。
異なる方式、例えば静脈内、腹膜内、皮下、頭蓋骨内、髄腔内、動脈内(例えば頸動脈)、筋肉内、鼻内、体表または皮内投与または脊髄または脳内輸送により本発明の薬物組成物の投与を実現できる。エアロゾル製剤例えば鼻噴霧製剤は活性剤を含有する精製した水性またはその他の溶液及び防腐剤と等張剤を含有する。眼内に投与する場合はこのような製剤を眼結膜と許容し得るpH及び等張状態に調整する必要がある。
。胃腸外媒介物は塩化ナトリウム溶液、リンガーデキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、または固定油である。静脈内媒介物は液体及び栄養補充物、電気分解補充物などを含む。されには防腐剤及びその他の添加剤、例えば抗微生物製剤、抗酸化剤、キレート剤、不活性ガスなども存在してもよい。
本発明の一つの実施形態はプラスミノゲン/プラスミンを用いて被験者を治療した後、治療効力及び治療安全性に対して判断を行うことに係る。そのうち前記治療効力を判断する方法は以下を含むが、これらに限られない:1)被験者の視力の矯正、本発明中のプラスミノゲンを用いて被験者に対して治療を行った後、患者の視力が回復また改善されることが予期される。例えば、患者の視力、立体視覚、コントラスト感受度、暗さへの適応、色覚及び視野が回復または改善されることが予期される;2)電気生理学的検査:例えば網膜電図、眼電図、視覚誘発電位などを含む;3)眼底検査:直接、間接的な眼底鏡検査、三面鏡下における細隙灯検査、眼底蛍光血管造影、OCTなどを含む;4)視神経検査、被験者の神経病変、眼外筋麻痺、調節障害及び視神経萎縮などの検査を含み、被験者が本発明のプラスミノゲン治療を受けた後、視神経機能が修復または改善されることが予期される;5)屈折異常、血糖の上昇は房水の浸透圧低下を引き起こし、房水が硝子体内に浸透し、硝子体の屈折度が変化して近視となり、血糖が低下する際に房水の浸透圧が上昇し、硝子体内の水分が外に浸透し、相対的な遠視を形成し、被験者は本発明のプラスミノゲン治療を受けた後に、視神経機能が回復または改善されることが予期される;6)眼圧検査、被験者は本発明のプラスミノゲン治療を受けた後に眼圧が正常に回復または改善され、例えば10〜21mmHg間になることが予期される。また、本発明はさらにプラスミノゲンを用いて被験者に対して治療を行う過程中及び過程後において、薬物の不良反応に対してモニタリング及び評価を行うことに係る。
本発明の一つの実施形態は製品または薬物キットに係るものであり、糖尿病によって引き起こされる網膜病変及びその関連疾患の治療に用いられる本発明のプラスミノゲンを含有する。前記製品は好ましくは一つの容器、ラベルまたはパンフレットを含む。適切な容器はボトル、小瓶、注射器などである。容器は各種材料例えばガラスまたはプラスチックから作られることができる。前記容器は組成物を含有し、前記組成物は本発明の疾患または症状を有効に治療し且つ無菌の入口を有する(例えば前記容器は静脈輸液用パックまたは小瓶であり、皮下注射針によって貫通される栓を含む)。前記組成物中の少なくとも一種類の活性化剤がプラスミノゲン/プラスミンである。前記容器上にあるまたは添付され
ているラベルは前記組成物を本発明の前記糖尿病によって引き起こされる網膜病変及びその関連疾患の治療に用いられると説明するものである。前記製品はさらに薬用緩衝液を含有する第二容器を含み、前記薬用緩衝液は例えばリン酸塩緩衝の食塩水、リンガー溶液及びブドウ糖溶液である。さらには商業及び使用者の角度から見ると必要とされるその他の物質、即ちその他の緩衝液、希釈剤、濾過物、針及び注射器を含むことができる。また、前記製品は使用説明を有するパンフレットを含み、これは例えば前記組成物の使用者にプラスミノゲン組成物及び疾患の治療に伴うその他の薬物を患者に投与することを指示するものである。
1、実験動物
C57BLKS由来のdb/db糖尿病マウスを使用し、C57BLKS由来のdb/+ヘテロ接合体マウスを健常コントロール(対照)とし、それは南京生物医薬研究所から購入されたものである。db/dbマウスの10周齢以上で血糖レベルが15mMより高いマウスを実験に用いて、対照グループとしては同齢の血糖レベルが7.8mM未満のdb/+ヘテロ接合体マウスを使用する。動物は中国国家基準に満たす実験動物使用環境に適合した環境で飼育されたものである。
選出されたマウスをランダムに2つのグループに分け、即ちdb/dbモデルグループ(モデルグループ)及びdb/dbプラスミノゲン治療グループ(治療グループ)とする。選出されたdb/dbマウスは24−25週齢に網膜病変が生じ、それから尾部からの静脈注射方式によりプラスミノゲンを投与し、投与量は約2mg/0.2mL/匹/日であり、実験周期は31日間であり、プラスミノゲンを投与する当日を実験の1日目と記録する。プラスミノゲンを投与する前日と実験後の毎週においてすべてのグループの動物に対して関連の測定を行う。
文献(非特許文献22〜24)の報道を参照して、網膜血管を準備する。具体的なステップは以下である:マウスの眼球を摘出してからすぐに4%パラホルムアルデヒドPBS緩衝液中で終夜固定させる。眼球から網膜を分離させた後に室温条件下において水で終夜洗い流し、それから37℃条件下において3%パンクレアチン(Invitrogen,Grand Island,NY)で2−3h消化する。組織を純水中に移し、解剖顕微鏡下において周囲附着組織上から網膜血管を分離させ、きれいなスライドガラス上に固定させ、自然に充分に乾燥させてからPAS溶液中で染色し、水で洗い流してから脱水して封入を行う。製造された網膜血管を顕微鏡下で観察する。PAS染色密度はImage−Pro Plus 6.0ソフトウエアを用いて分析が行われる。
マウスの眼球を摘出してから4%パラホルムアルデヒドPBS緩衝液中で24−48時間固定させ、固定した後の眼球はエタノールで段階的に脱水してからキシレンで透明にしてからパラフィンで包埋させる。それからパラフィン切片に対してHE染色を行い、顕微鏡下で網膜病変を観察する。
眼球に対して通常パラフィン切片を作り、脱パラフィンして再水和させてから、切片に対して高温修復を15min行う。過酸化水素水で15分間インキュベーションする。10%の正常ヒツジ血清液(Vectorlaboratories,Inc.,USA)を用いて1時間封止を行い、一次抗体を4℃で終夜インキュベーションし、TBSで洗い流し、二次抗体を滴加し、室温で1時間インキュベーションし、顕色させる。ヘマトキシリンで再度染色させ、段階的に透明になるまで脱水してから封入を行い、観察に備える。各眼球に対して2枚の構造が完全な網膜切片を取り、それぞれの切片に対してランダムに5つの視野を選択し、Image−Pro Plus 6.0画像処理ソフトウエアで各グループの染色エリアの平均光学密度値を分析する。
結果が示すように、溶媒PBS投与比較グループのマウスの網膜内は、各層構造が嵩高く、細胞の配列が不規則で、網膜神経節細胞及び内顆粒層細胞の配列が乱れ、網膜色素上皮細胞が増殖している(図2A);プラスミノゲン投与グループは溶媒PBS投与対照グ
ループを比較した場合、網膜内の各層細胞の配列が規則的で、且つ網膜OPL、ONL、PLの厚み及び全体の厚みにおいて、前者が後者より厚いことが観察されている(図2B)。これはプラスミノゲンを注射することで糖尿病マウスの網膜損傷の損傷を促進できることを示している。
和した後にさらに1回水洗いする。3%過酸化水素水で15分間インキュベーションし、2回水洗いし、毎回5分間である。10%の正常ヒツジ血清液(Vector laboratories,Inc.,USA)で1時間封止する;時間になった後に、ヒツジ血清液を廃棄し、PAPマーカーで組織を囲む。ウサギ抗マウスVEGF抗体(Abcam)4℃で終夜インキュベーションし、TBSで2回洗い、毎回5分間である。ヤギ抗ウサギIgG(HRP)抗体(Abcam)二次抗体を室温で1時間インキュベーションし、TBSで2回洗い、毎回5分間である。DABキット(Vector laboratories,Inc.,USA)で顕色させ、3回水洗いした後にヘマトキシリンで30秒複再染色して、流水で5分間流す。透明になるよう段階的に脱水してから封止させ、顕微鏡下で400倍にて切片を観察する。
和させた後にさらに1回水洗いする。3%過酸化水素水で15分間インキュベーションし、2回水洗いし、毎回5分間である。10%の正常ヒツジ血清液で1時間封止する;それからヒツジ血清液を廃棄し、PAPマーカーで組織を囲む。ウサギ抗マウスBcl−2抗体(Abcam)4℃で終夜インキュベーションし、TBSで2回洗い、毎回5分間である。ヤギ抗ウサギIgG(HRP)抗体(Abcam)二次抗体を室温で1時間インキュベーションし、TBSで2回洗い、毎回5分間である。DABキット(Vector laboratories,Inc.,USA)で顕色させ、3回水洗いした後にヘマトキシリンで30秒再染色して、流水で5分間流す。透明になるよう段階的に脱水してから封止させ、顕微鏡下で400倍にて切片を観察する。
キュベーションし、2回水洗いし、毎回5分間である。10%の正常ヒツジ血清液(Vector laboratories,Inc.,USA)で1時間封止する;時間になってから、ヒツジ血清液を廃棄し、PAPマーカーで組織を囲む。ウサギ抗マウスBcl−2抗体(Abcam)4℃で終夜インキュベーションし、TBSで2回洗い、毎回5分間である。ヤギ抗ウサギIgG(HRP)抗体(Abcam)二次抗体を室温で1時間インキュベーションし、TBSで2回洗い、毎回5分間である。DABキット(Vector laboratories,Inc.,USA)で顕色させ、3回水洗いした後にヘマトキシリンで30秒再染色して、流水で5分間流す。透明になるよう段階的に脱水してから封止させ、顕微鏡下で200倍下において切片を観察する。
が浅い。これはプラスミノゲンを注射することで糖尿病マウスの沈着フィブリンを減少させることができ、プラスミノゲンは糖尿病マウスの腎臓損傷に対して修復作用を有することを示している。
Sで2回洗う。DABキット(Vector laboratories,Inc.,USA)で顕色させ、3回水洗いした後にヘマトキシリンで30秒再染色して、流水で5分間洗い流す。透明になるよう段階的に脱水してから封止させ、切片を顕微鏡下で400倍にて観察する。
じ体積のPBSを投与する。投薬後の0、4、7、11、16日目に針注射器で一滴のアセトン液滴を押し出してさらにdb/dbマウスの足裏に接触させ、それが足裏全体を覆うようにする。左足から始め、3分間間隔で交互にその左右足を刺激し、全部で10回刺激し、その足を引っ込める反応の回数を統計する。反応パーセンテージ=足を引っ込めた回数/刺激回数×100のパーセンテージである。
Claims (11)
- 被験者に有効量投与されるプラスミノゲンを含む、被験者の糖尿病によって引き起こされる網膜病変の予防及び/または治療剤。
- 前記網膜病変は糖尿病によって引き起こされる網膜新生血管の形成、網膜炎症、網膜萎縮、網膜細胞アポトーシス、網膜組織構造損傷を含むことを特徴とする、請求項1に記載の剤。
- 前記プラスミノゲンは、配列2と少なくとも80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%または99%の配列同一性を有し、且つ依然としてプラスミノゲン活性を有することを特徴とする、請求項1または2に記載の剤。
- 前記プラスミノゲンは、配列14によって示されるプラスミノゲン活性フラグメントを含み、且つ依然としてプラスミノゲン活性を有するタンパク質であることを特徴とする、請求項1〜3のいずれかに記載の剤。
- 前記プラスミノゲンはGlu−プラスミノゲン、Lys−プラスミノゲン、ミニプラスミノゲン、マイクロプラスミノゲン、δ(delta)−プラスミノゲンまたはそれらの任意の組み合わせから選ばれるものであることを特徴とする、請求項1〜4のいずれかに記載の剤。
- 前記プラスミノゲンは、体表、静脈内、筋肉内、皮下、吸入、椎管内または直腸投与、局所注射による投与、及び/または角膜上における遺伝子銃による局所投与、結膜下注射、前房内注射、点眼剤による角膜上投与、側頭縁からの前室内への注射、基質内注射、電気パルスと組み合わせた角膜投与、角膜内注射、網膜下注射、硝子体内注射及び眼内注射により全身または局所にて投与されることを特徴とする、請求項1〜5のいずれかに記載の剤。
- 前記プラスミノゲンは一種類または複数種類の他の薬物と組み合わせて投与でき、前記他の薬物は抗糖尿病薬、抗心脳血管疾患薬、抗血栓薬、高血降下薬、高脂血症治療薬、抗感染薬及びその他の併発する疾患を治療するための通常の薬物であることを特徴とする、請求項1〜6のいずれかに記載の剤。
- 有効用量のプラスミノゲンを含有する容器、及び被験者の糖尿病によって引き起こされる網膜病変の予防及び/または治療における製品の投与を指導するプロトコルを含むことを特徴とする、被験者の糖尿病によって引き起こされる網膜病変を予防及び/または治療するための製品。
- さらに一種類または複数種類の他の薬物の容器を含む、請求項8に記載の製品。
- 前記他の薬物は抗糖尿病薬、抗心脳血管疾患薬、抗血栓薬、血圧降下薬、高脂血症治療薬、抗感染薬物及びその他の併発疾患を治療するための通常の薬物であることを特徴とする、請求項9に記載の製品。
- 前記プロトコルはさらに前記プラスミノゲンは前記他の薬物を投与する前、投与と同時、及び/または後に投与できることを説明するものであることを特徴とする、請求項9または10に記載の製品。
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