JP2019536461A5 - - Google Patents
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Claims (39)
- 組換え核酸を含むウイルスベクター粒子と、対象からの試料から得られたT細胞を含むインプット組成物とをインキュベーションする工程を含む、T細胞に形質導入するための方法であって、
インキュベーションする工程の前に、T細胞またはインプット組成物が、T細胞を活性化することが可能な少なくとも1種の剤の存在下でのインキュベーションを含むエクスビボ刺激に供されたことがなく、
方法が、該組換え核酸で形質導入されたT細胞を含むアウトプット組成物を産生する、
方法。 - 少なくとも1種の剤が、CD3結合分子、CD28結合分子、ならびに／または組換えIL-2、組換えIL-15、および組換えIL-7からなる群より選択される組換えサイトカインから選択される、請求項1記載の方法。
- 少なくとも1種の剤が、抗CD3抗体および／または抗CD28抗体を含む、請求項1または2記載の方法。
- アウトプット組成物の細胞または該方法によって形質導入された細胞を活性化または拡大する工程を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の方法。
- 活性化および／または拡大が、エクスビボまたはインビトロで実施される、請求項4記載の方法。
- 活性化および／または拡大が、抗原受容体により特異的に結合された抗原の存在下で起こりかつ／または導入遺伝子特異的である、請求項4または5記載の方法。
- インキュベーションの後に、アウトプット組成物中の細胞が、少なくとも1種の刺激剤の存在下でエクスビボでさらにインキュベートされず、任意で該少なくとも1種の刺激剤がCD3結合分子；CD28結合分子；組換えIL-2；組換えIL-15；および組換えIL-7からなり、かつ／またはアウトプット組成物中の細胞が、30℃よりも高い温度で24時間より長くさらにインキュベートされない、請求項4〜6のいずれか一項記載の方法。
- インキュベーションの後に、アウトプット組成物中の細胞が、T細胞を活性化、TCR複合体を経由するシグナルを誘導、および／またはT細胞増殖を誘導することが可能な少なくとも1種の刺激剤の存在下でインキュベートされる、請求項1〜7のいずれか一項記載の方法。
- 少なくとも1種の刺激剤が、CD3結合分子；CD28結合分子；組換えIL-2；組換えIL-15；および組換えIL-7からなる群より選択される、請求項8記載の方法。
- 少なくとも1種の刺激剤が、抗CD3抗体および／または抗CD28抗体を含む、請求項9記載の方法。
- インキュベーションする工程の直前に、
(a)T細胞の5％、10％、20％、30％、もしくは40％以下が、
活性化細胞である；HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40Lおよび4-1BBからなる群より選択される表面マーカーを発現する；IL-2、IFN-ガンマ、およびTNF-アルファからなる群より選択されるサイトカインの細胞内発現を含む；かつ／またはG1もしくはより後期の細胞周期である；かつ／または
(b)インプット組成物中のT細胞の10%以下が、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40L、および4-1BBからなる群より選択されるT細胞活性化マーカーを含む；かつ／または
(c)T細胞の5%、10％、20％、30％、または40％よりも多くが、低密度脂質受容体（LDL-R）を発現する、
請求項1〜10のいずれか一項記載の方法。 - インキュベーションする工程の前に、
T細胞が、15℃、18℃、22℃、もしくは25℃よりも高い、または約15℃、18℃、22℃、もしくは25℃よりも高い温度に、対象から試料を得た後1時間、2時間、4時間、6時間、8時間、12時間、または24時間よりも長い期間にわたり供されたことがなく；かつ／または
T細胞が、約37°±2℃よりも高い温度に対象から試料を得た後供されたことがない、請求項1〜11のいずれか一項記載の方法。 - 試料が、血液試料である；かつ／または
試料が、白血球除去試料である；かつ／または、
T細胞が、未分画T細胞である、富化もしくは単離されたCD3+ T細胞である、富化もしくは単離されたCD4+ T細胞である、または富化もしくは単離されたCD8+ T細胞である、
請求項1〜12のいずれか一項記載の方法。 - インプット組成物中のT細胞のパーセンテージが、T細胞の75%、80%、85%、90%、もしくは95%、または約75%、80%、85%、90%、もしくは95%よりも大きい、請求項1〜13のいずれか一項記載の方法。
- T細胞が、CD4+およびCD8+細胞を含む、請求項1〜14のいずれか一項記載の方法。
- CD4+細胞とCD8+細胞の比が、1：1、1：2、2：1、1：3、もしくは3：1、または約1：1、1：2、2：1、1：3、もしくは3：1である、請求項15記載の方法。
- インプット組成物が、N-アセチルシステイン（NAC）；血清、任意でヒト血清；組換えインターロイキン-2（IL-2）、組換えインターロイキン-15（IL-15）、および／または組換えインターロイキン-7（IL-7）を含む、請求項1〜16のいずれか一項記載の方法。
- インキュベーションする工程が、ウイルスベクター粒子をインプット組成物と一緒にスピン接種する（spinoculate）段階を含む、請求項1〜17のいずれか一項記載の方法。
- インプット組成物および／またはウイルスベクター粒子を形質導入アジュバントと接触させる工程を含む、請求項1〜18のいずれか一項記載の方法。
- 前記インキュベーションの少なくとも一部が、37℃±2℃または約37℃±2℃で実施される；かつ／または
前記インキュベーションの少なくとも一部が、スピン接種の後に実施される；かつ／または
前記インキュベーションの少なくとも一部が、2時間、4時間、12時間、18時間、24時間、30時間、36時間、48時間、60時間、もしくは72時間以下、または約2時間、4時間、12時間、18時間、24時間、30時間、36時間、48時間、60時間、もしくは72時間以下にわたり実施される、請求項1〜19のいずれか一項記載の方法。 - 前記インキュベーションの合計持続時間が、12時間、24時間、36時間、48時間または72時間以下である、請求項1〜20のいずれか一項記載の方法。
- インキュベーションする工程が、対象から試料を得た後1時間、3時間、6時間、12時間、18時間、もしくは24時間以内、または約1時間、3時間、6時間、12時間、18時間、もしくは24時間以内に開始される、請求項1〜21のいずれか一項記載の方法。
- インキュベーションする工程の前に、T細胞の5％、10％、20％、30％、もしくは40％以下が、活性化細胞である、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40Lおよび4-1BBからなる群より選択される表面マーカーを発現する；IL-2、IFN-ガンマ、TNF-アルファからなる群より選択されるサイトカインの細胞内発現を含む、G1もしくはより後期の細胞周期である、かつ／または増殖することが可能である、請求項1〜22のいずれか一項記載の方法。
- ウイルスベクター粒子が、レンチウイルスベクター粒子である、請求項1〜23のいずれか一項記載の方法。
- レンチウイルスベクター粒子が、HIV-1に由来する、請求項24記載の方法。
- ウイルスベクター粒子が、ウイルスエンベロープ糖タンパク質でシュードタイプ化されている、請求項1〜25のいずれか一項記載の方法。
- ウイルスエンベロープ糖タンパク質が、VSV-Gである、請求項26記載の方法。
- インプット組成物が、少なくとも50×106個、100×106個、もしくは200×106個、または少なくとも約50×106個、100×106個、もしくは200×106個、または約50×106個、100×106個、もしくは200×106個の細胞を含む、請求項1〜27のいずれか一項記載の方法。
- 組換え核酸が、抗原受容体をコードする、請求項1〜28のいずれか一項記載の方法。
- 抗原受容体が、トランスジェニックT細胞受容体（TCR）である、請求項29記載の方法。
- 抗原受容体が、キメラ抗原受容体（CAR）である、請求項29または30記載の方法。
- アウトプット組成物中のT細胞の少なくとも25%、少なくとも30％、少なくとも40％、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、または少なくとも80%に組換え核酸が形質導入されている、請求項1〜31のいずれか一項記載の方法。
- 請求項1〜32のいずれか一項記載の方法により産生される、遺伝子操作T細胞。
- 請求項33記載の遺伝子操作T細胞と、薬学的に許容される担体とを含む、アウトプット組成物。
- 疾患または状態を治療するための医薬の製造のための、請求項34記載のアウトプット組成物の使用。
- 疾患または状態を治療するための、請求項34記載のアウトプット組成物。
- 前記医薬が、形質導入T細胞のインビボ刺激および／または拡大を誘導または強化する1種または複数種の剤と併用するためのものである、請求項35記載の使用。
- 形質導入T細胞のインビボ刺激および／または拡大を誘導または強化する1種または複数種の剤と併用するための、請求項36記載のアウトプット組成物。
- 標的抗原と特異的に結合するキメラ抗原受容体（CAR）またはトランスジェニックT細胞受容体(TCR)を発現するように遺伝子操作された初代ヒトT細胞集団を含む組成物であって、
該集団が、複数の休止T細胞を含み；かつ
該複数の休止T細胞が、該組成物中の遺伝子操作細胞の少なくとも7.5％を構成する、
組成物。
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