JP2019527617A - ポリマーナノファイバーを含む官能化クロマトグラフィー媒体及びそれを製造する方法 - Google Patents
ポリマーナノファイバーを含む官能化クロマトグラフィー媒体及びそれを製造する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019527617A JP2019527617A JP2019501721A JP2019501721A JP2019527617A JP 2019527617 A JP2019527617 A JP 2019527617A JP 2019501721 A JP2019501721 A JP 2019501721A JP 2019501721 A JP2019501721 A JP 2019501721A JP 2019527617 A JP2019527617 A JP 2019527617A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- functionalized
- substrate
- chromatography
- polymer
- medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
- B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
- B01J20/265—Synthetic macromolecular compounds modified or post-treated polymers
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/20—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the conditioning of the sorbent material
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/22—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the construction of the column
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
- B01D15/3804—Affinity chromatography
- B01D15/3809—Affinity chromatography of the antigen-antibody type, e.g. protein A, G, L chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
- B01J20/28014—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their form
- B01J20/28023—Fibres or filaments
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
- B01J20/28014—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their form
- B01J20/28033—Membrane, sheet, cloth, pad, lamellar or mat
- B01J20/28038—Membranes or mats made from fibers or filaments
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
- B01J20/28014—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their form
- B01J20/28052—Several layers of identical or different sorbents stacked in a housing, e.g. in a column
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
- B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
- B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
- B01J20/289—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers bonded via a spacer
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/3085—Chemical treatments not covered by groups B01J20/3007 - B01J20/3078
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/3092—Packing of a container, e.g. packing a cartridge or column
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
- B01J20/3206—Organic carriers, supports or substrates
- B01J20/3208—Polymeric carriers, supports or substrates
- B01J20/321—Polymeric carriers, supports or substrates consisting of a polymer obtained by reactions involving only carbon to carbon unsaturated bonds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
- B01J20/3206—Organic carriers, supports or substrates
- B01J20/3208—Polymeric carriers, supports or substrates
- B01J20/3212—Polymeric carriers, supports or substrates consisting of a polymer obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
- B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
- B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
- B01J20/3219—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond involving a particular spacer or linking group, e.g. for attaching an active group
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
- B01J20/3225—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating involving a post-treatment of the coated or impregnated product
- B01J20/3227—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating involving a post-treatment of the coated or impregnated product by end-capping, i.e. with or after the introduction of functional or ligand groups
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
- B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
- B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3268—Macromolecular compounds
- B01J20/3272—Polymers obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3268—Macromolecular compounds
- B01J20/328—Polymers on the carrier being further modified
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3291—Characterised by the shape of the carrier, the coating or the obtained coated product
- B01J20/3293—Coatings on a core, the core being particle or fiber shaped, e.g. encapsulated particles, coated fibers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/32—Bonded phase chromatography
- B01D15/325—Reversed phase
- B01D15/327—Reversed phase with hydrophobic interaction
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction
- B01D15/361—Ion-exchange
- B01D15/362—Cation-exchange
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction
- B01D15/361—Ion-exchange
- B01D15/363—Anion-exchange
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
- B01D15/3847—Multimodal interactions
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
- B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
- B01J2220/52—Sorbents specially adapted for preparative chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
- B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
- B01J2220/54—Sorbents specially adapted for analytical or investigative chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
- B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
- B01J2220/58—Use in a single column
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
- B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
- B01J2220/60—Use in several different columns
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
- B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
- B01J2220/62—In a cartridge
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/22—Affinity chromatography or related techniques based upon selective absorption processes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
(i)1つ以上のポリマーナノファイバーから作製された基体を提供すること、
(ii)前記基体から1つ以上の中性ポリマー鎖をグラフト化すること、及び
(iii)前記グラフト化生成物を、クロマトグラフィー媒体として工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させることを含み、
ここで、工程(ii)が、複数の式
式中、R1、R2、R3、R4及びR5は同一又は異なってもよく、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシから選択され、但しR1、R2、R3、R4又はR5の少なくとも1つは水素ではない。
−本発明のプロセスによって入手可能な官能化されたクロマトグラフィー媒体。
本発明の官能化された高分子クロマトグラフィー媒体は、ポリマーナノファイバー基体から形成される。各基体は、1つ以上のポリマーナノファイバーから形成される。
しかしながら、本発明の特定の好ましい実施形態では、基体の提供は、グラフト化工程に先立って、任意に不織布シート中のポリマーナノファイバーの物理的な修飾を含む。具体的には、物理的な修飾は、ポリマーナノファイバー/不織布シートを加熱及び/又は加圧すること、好ましくはポリマーナノファイバー/不織布シートを加熱及び加圧することを含み得る。これらの工程は、材料の構造安定性を改善する。また、加圧及び加熱の条件は、得られる材料の厚さ及び/又は空隙率を変更するため変化され得る。
本発明の方法は、工程(i)出提供された基体から1つ以上の中性ポリマー鎖をグラフト化することを含むグラフト化工程(工程(ii))を含む。
ここで、R1、R2、R3、R4及びR5は、同一又は異なってもよく、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシから選択され、但しR1、R2、R3、R4又はR5の少なくとも1つは水素ではない。したがって、典型的には、1種類のみのポリマーが基体にグラフト化される。しかしながら、他の実施形態では、2種類以上のポリマーが基体にグラフト化されてもよい。
R1は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである;
R2は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである;
R3は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである;
R4は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである;及び
R5は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである。
(i)1つ以上の酢酸セルロースファイバーで形成された基体を提供し、酢酸セルロースを処理してセルロースへと変換すること、
(ii)得られたセルロース基体から1つ以上の中性ポリマー鎖をグラフト化すること、及び
(iii)上記グラフト化生成物を、クロマトグラフィー媒体として工程(ii)の上記生成物を官能化する試薬と接触させること、を含む。
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)上記基体を、両方の酢酸セルロースがセルロースに変換される条件に供すること、その後、1つ以上の中性ポリマー鎖を得られたセルロース基体にグラフト化すること、及び
(iii)上記グラフト化生成物を、クロマトグラフィー媒体として工程(ii)の上記生成物を官能化する試薬と接触させること、を含む。
上に言及されるように、グラフト化工程(ii)は、グリシドール重合として既知の重合の方法を使用して、そこからポリマーを成長させ得る、1つ以上の官能基を有する基体を、式
但し、R1、R2、R3、R4又はR5の少なくとも1つは水素ではない。したがって、ポリマー鎖の成長は、グリシドール重合を使用して実行される。
R1は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである;
R2は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである;
R3は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである;
R4は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである;及び
R5は、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシ、好ましくはH、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル又はエチルである。
(i)1つ以上のポリマーナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)基体から1つ以上の中性ポリマー鎖をグラフト化すること、及び
(iii)グラフト化生成物を、クロマトグラフィー媒体として工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含み、
ここで、ポリマー鎖を成長させることは、グリシドール及び/又は式(I)のグリシドール誘導体、好ましくはグリシドールを、基体上に存在する1つ以上の官能基から重合することを含む。
(i)1つ以上のポリマーナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)基体から1つ以上の中性ポリマー鎖をグラフト化すること、及び
(iii)グラフト化生成物を、クロマトグラフィー媒体として工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含み、
ここで、1つ以上のポリマー鎖は、1つ以上のポリグリセロール鎖である。
本発明の方法は、例えば、1つ以上のリガンドをグラフト化生成物に導入することによって、クロマトグラフィー媒体としてその生成物を官能化する、グラフト化生成物の官能化工程(工程(iii))を含む。この工程は、グラフト化生成物を、1つ以上のリガンドをグラフト化生成物に導入することによってクロマトグラフィー媒体としてグラフト化生成物を官能化する試薬と接触させることを含む。
(a)グラフト化生成物を、最初に、ジビニルスルホン、アリルグリシジルエーテル及びそれらの組み合わせからなる群から選択される試薬と接触させ;
(b)工程(a)の生成物を、任意に、ハロヒドリン形成試薬又はエポキシド形成試薬、好ましくはハロヒドリン形成試薬で処理し;
(c)工程(b)の生成物をプロテインAと接触させる。
(a)グラフト化生成物を、ジビニルスルホン、アリルグリシジルエーテル及びそれらの組み合わせからなる群から選択される試薬と接触させ;
(b)工程(a)の生成物を、任意にハロヒドリン形成試薬又はエポキシド形成試薬、好ましくはハロヒドリン形成試薬で処理し;及び
(c)工程(b)の生成物をプロテインAと接触させる。
本発明の方法の生成物は、官能化されたクロマトグラフィー媒体、すなわち、それからグラフト化され、その後官能化されて、グラフト化生成物上に1つ以上のリガンド基を導入することによって1つ以上のクロマトグラフィー法における使用に対して適したものとする、ポリマーを有するクロマトグラフィー媒体である。
−クロマトグラフィー法は陽イオン交換法であり、試薬は、1つ以上のカルボキシレート、スルホネート又はホスホネートの部分を含む1つ以上の帯電した基でクロマトグラフィー媒体を官能化する;又は
−クロマトグラフィー法は陽イオン交換法であり、試薬は、1つ以上の第四級アミノ又はジエチルアミンの部分を含む1つ以上の帯電した基でクロマトグラフィー媒体を官能化する;
−クロマトグラフィー法は親和性捕捉クロマトグラフィー法であり、試薬は、1つ以上のタンパク質、ペプチド、抗体若しくはそのフラグメント、色素、ヒスチジン基又は金属陽イオンを含む基でクロマトグラフィー媒体を官能化する;
−クロマトグラフィー法は疎水性相互作用クロマトグラフィー法であり、試薬は、1つ以上のプロピル基、ブチル基、フェニル基又はオクチル基でクロマトグラフィー媒体を官能化する;又は
−クロマトグラフィー法はミックスモードクロマトグラフィー法であり、試薬は、1つ以上のMEP基、オクチルアミン基、N−ベンジルメチルエタノールアミン基又はN−ベンゾイルホモシステイン基でクロマトグラフィー媒体を官能化する。
上で検討されるように、本発明は、ポリマーナノファイバー基体から官能化された高分子クロマトグラフィー媒体を作製する二段階法を提供し、二段階は(i)ポリマーグラフト化工程、及び(ii)官能化工程である。
1)グラフト化された材料の試料を湿らせた濾紙に入れ、ブフナー濾過用漏斗に置き、水が試料を通って洗浄することを確実にするため真空を印加しながら超純水で洗浄すること:
2)試料を60℃のオーブンで一定質量まで乾燥させ、試料の質量を特定すること。
4)上記管を密閉し、水浴で1時間に亘って加熱しながら(60℃)混合物を撹拌すること;
5)上記管とその内容物を室温まで冷却し、混合物を滴定カップに移し、イソ−プロピルアルコールで80mLにする前に10mLの超純水H2Oで注意深くクエンチすること;
6)混合物を室温にて30分間撹拌した後、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド(メタノール中0.481M溶液)で滴定して存在するヒドロキシル基の絶対濃度を特定すること。
1)ブフナー濾過用漏斗上で50mgの材料を100mLの0.1M HCl溶液で洗浄した後、更に100mLの0.01M HCl溶液で洗浄すること;
2)小さく裂く前に一定質量まで75℃のオーブンで材料を乾燥させ、小さなマグネチックスターラーバーを備える50mLの遠心管に入れること;
3)15mLの脱イオン水を、およそ1mL(乳頭ピペットによって添加される)の混合物を黄色に変色させるクロム酸カリウム溶液と共に添加すること;
4)0.1Mの硝酸銀で滴定する前に、混合物を20分間激しく撹拌し)、滴定のエンドポイントを透明な黄色から褐色がかった色に変色することによって識別すること;
5)トリメチルアンモニウムクロリド含有量(μmol/g)エンドポイント/滴定で使用されるナノファイバー材料のグラム数に達するように添加された硝酸銀のマイクロモル数として計算すること。
1)官能化された材料の乾燥試料を0.1M HCL及び0.01M HClで洗浄すること;
2)オーブンで材料を乾燥し、計量すること:
3)pH7に達するように添加されなければならないNaOHの量によって、材料のモル濃度を決定すること;
4)pH7に達するように添加されたNaOHのマイクロモルの数/滴定で使用されるナノファイバー材料グラム数として、スルホン酸(S)含有量(μmol/g)を計算すること。
より好ましくは、官能化された高分子クロマトグラフィー媒体に対する圧力低下は、10mMのTrisを毎分5メンブレン体積〜40メンブレン体積の流量で、0.1mm〜5mmの厚さの材料に通す場合に0.5MPa未満である。
1)充填材料を(陰イオン交換物質に対して、充填材料はpH8まで10mM Tris中の1mg/mLのBSAであった。陽イオン交換材料に対して、充填材料は、酢酸ナトリウムpH4.7 10mM中の1mg/mLリゾチームであった)AKTA Pureシステム(GE Healthcare)のホルダ内に含まれる、官能化された材料に通す。
上で検討されるように、本発明者らは、グラフト化工程(ii)と官能化工程(iii)の関係を徹底的に調査したところ、互いからこれらの工程を分離することによって高度に最適化された材料が生産され得ることを見出した。
(i)本明細書に定義されるように、1つ以上のポリマーナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)本明細書に定義されるように、1つ以上の中性ポリマー鎖を基体からグラフト化すること、及び
(iii)本明細書に定義されるように、グラフト化生成物を、工程(ii)の生成物を、本明細書に定義されるように、クロマトグラフィー媒体として官能化する試薬と接触させること、を含み、
ここで、グラフト化工程(ii)が、式
式中、R1、R2、R3、R4及びR5は、同一又は異なってもよく、
H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシから選択され、
但し、R1、R2、R3、R4又はR5の少なくとも1つは水素ではなく、
官能化されたポリマークロマトグラフィー材料のDBCを増加させる効果を有する。
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供し、酢酸セルロースを処理してセルロースに変換すること、
(ii)本明細書に定義されるように、得られたセルロース基体から1つ以上の中性ポリマー鎖をグラフト化すること、及び
(iii)本明細書に定義されるように、グラフト化生成物を、本明細書に定義されるように、クロマトグラフィー媒体として工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させることを含み、
ここで、グラフト化工程(ii)は、式
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)上記基体を、両方の酢酸セルロースがセルロースに変換される条件に供すること、その後、1つ以上の中性ポリマー鎖を得られたセルロース基体にグラフト化すること、並びに
(iii)本明細書に定義されるように、グラフト化生成物を、本明細書に定義されるように、クロマトグラフィー媒体として工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させることを含み、
ここで、グラフト化工程(ii)は、式
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供し、酢酸セルロースを処理してセルロースに変換すること、
(ii)式
(iii)本明細書に定義されるように、グラフト化生成物を、工程(ii)の生成物を、本明細書に定義されるように、クロマトグラフィー媒体として官能化する試薬と接触させること、
を含む。
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)上記基体を、両方の酢酸セルロースがセルロースに変換される条件に供すること、その後、式
(iii)グラフト化生成物を、クロマトグラフィー媒体として工程(ii)の生成物を官能化する、本明細書に定義される試薬と接触させること、を含む。
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供し、酢酸セルロースを処理してそれをセルロースに変換することを含み、
(ii)式
(iii)グラフト化生成物を、イオン交換又は親和性クロマトグラフィー法における使用に適したクロマトグラフィー媒体として、工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含む。
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)基体を、両方の酢酸セルロースがセルロースに変換され、その後に、式
(iii)グラフト化生成物を、イオン交換又は親和性クロマトグラフィー法における使用に適したクロマトグラフィー媒体として、工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含む。
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供し、酢酸セルロースを処理してそれをセルロースに変換すること、
(ii)式
(iii)グラフト化生成物を、イオン交換又は親和性クロマトグラフィー法における使用に適したクロマトグラフィー媒体として工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含み、試薬は、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリド(GMAC)、1,4−ブタンスルホン、クロロ酢酸ナトリウム、NaIO4に続いてプロテインA、ジビニルスルホンに続いてプロテインA、アリルグリシジルエーテルに続いて第1にハロヒドリン形成試薬(例えばN−ブロモスクシンアミド)、その後プロテインA、又はアリルグリシジルエーテルに続いて第1にエポキシド形成試薬、その後プロテインAである。
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)基体を、両方の酢酸セルロースがセルロースに変換され、その後に、式
(iii)グラフト化生成物を、イオン交換又は親和性クロマトグラフィー法における使用に適したクロマトグラフィー媒体として、工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含み、
試薬は、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリド(GMAC)、1,4−ブタンスルホン、クロロ酢酸ナトリウム、NaIO4に続いてプロテインA、ジビニルスルホンに続いてプロテインA、アリルグリシジルエーテルに続いて第1にハロヒドリン形成試薬(例えばN−ブロモスクシンアミド)、その後プロテインA、又はアリルグリシジルエーテルに続いて第1にエポキシド形成試薬、その後プロテインAである。
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供し、酢酸セルロースを処理してそれをセルロースに変換すること、
(ii)式
(iii)グラフト化生成物を、イオン交換又は親和性クロマトグラフィー法における使用に適したクロマトグラフィー媒体として工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含み、
試薬は、ジビニルスルホンに続いてプロテインA、アリルグリシジルエーテルに続いて第1にハロヒドリン形成試薬(例えばN−ブロモスクシンアミド)、その後プロテインA、又はアリルグリシジルエーテルに続いて第1にエポキシド形成試薬、その後プロテインAである。
(i)1つ以上の酢酸セルロースナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)基体を、両方の酢酸セルロースがセルロースに変換され、その後に、式
(iii)グラフト化生成物を、イオン交換又は親和性クロマトグラフィー法における使用に適したクロマトグラフィー媒体として工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含み、
試薬は、ジビニルスルホンに続いてプロテインA、アリルグリシジルエーテルに続いて第1にハロヒドリン形成試薬(例えばN−ブロモスクシンアミド)、その後プロテインA、又はアリルグリシジルエーテルに続いて第1にエポキシド形成試薬、その後プロテインAである。
また、本発明は、クロマトグラフィーカートリッジを提供する。本発明のクロマトグラフィーカートリッジは、本発明の1つ以上の官能化されたクロマトグラフィー媒体を含む。代替的には、本発明のクロマトグラフィーカートリッジは、本発明の方法を行って、そのようにして得られた生成物をカートリッジに組み込むことにより取得可能である。
また、本発明は、クロマトグラフィー、特に本明細書に定義されるクロマトグラフィー法における本発明の官能化されたクロマトグラフィー媒体、又は本発明のクロマトグラフィーカートリッジの使用を提供する。
以下の実施例は本発明を説明する。
別段の指示がないかぎり、全ての化学物質をFisher Scientific、Sigma−Aldrich、FluoroChem、Repligen及びVWR等の会社から得た、又はそれらから入手可能である。
洗浄プロトコルA
反応媒体を、等体積脱イオン水で置き換え、1時間循環させた。すすぎの手順をもう一度繰り返した。最後に、材料を反応槽から取り出す前に、等体積の水性エタノール(2:1−H2O:EtOH)で処理した。
反応媒体を、等体積の脱イオン水で置き換え、1時間循環させた。この時間の後、洗浄媒体を0.01M HClで置き換え、1時間循環させ、その上、0.001M HClで置き換え、1時間循環させた。最後に、上記媒体をH2O:EtOHの2:1混合物で置き換え、1時間循環させた。次いで、誘導体化されたナノファイバーを反応容器から取り出した。
反応媒体を、等体積の温かい(60℃)脱イオン水:アセトンの1:1混合物で置き換え、30分間循環させた。洗浄手順を更に2回繰り返した。最後に、上記媒体をH2O:EtOHの2:1混合物で置き換え、1時間循環させた。次いで、誘導体化されたナノファイバーを反応容器から取り出した。
2Lの超純水を、ナノファイバー材料を通してくみ出した。
反応媒体を、等体積の1:1−脱イオン水:EtOHで置き換え、1時間循環させた。洗浄手順を更に2回繰り返した。最後に、上記媒体をH2O:EtOHの2:1混合物で置き換え、1時間循環させた。次いで、誘導体化されたナノファイバーを反応容器から取り出した。最後に、上記媒体をH2O:EtOHの2:1混合物で置き換え、1時間循環させた。次いで、誘導体化されたナノファイバーを反応容器から取り出した。
反応媒体を超純度の脱イオン水で置き換えたナノファイバー材料を、30分間清潔な水中で穏やかに撹拌した。この時間の後、洗浄媒体を置き換え、洗浄サイクルを繰り返した。
反応媒体を注ぎ出し、流出液のpHが中性又は弱酸性になるまでビーカーに水を補充した。
反応媒体を等体積の脱イオン水:アセトンの1:1混合物で置き換え、それを1時間循環させた。この時間の後、洗浄溶液をリフレッシュさせ、勢いよく撹拌しながら更に1時間、ファイバーを洗浄した。この処理を、脱イオン水で更に1時間洗浄する前に、更に3回繰り返した。次いで、誘導体化されたハロヒドリンナノファイバーを反応槽から取り出したところ、次の工程で使える状態であった。
調製例1
相対分子質量29,000g/molを有する酢酸セルロースの溶液を、300nm〜600nmの範囲の直径を有するファイバーをもたらす電界紡糸に先立って、一般的な溶媒に溶解した。ナノファイバー製造に対する最適化された条件は、例えば、O.Hardick,et al,J.Mater.Sci.46(2011)3890に見ることができ、その全体が参照することにより本明細書の一部をなす。およそ20g/m2の材料のシートを積層し、加熱と加圧を組み合わせた処理に供した。
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
10mlのH2O及び0.45mL(1.650mmol)の1,1,4,7,10,10−ヘキサメチルトリエチルテトラアミンに溶解させた、CuBr2(0.3g、1.343mmol)。
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
工程(iii)からの材料を6ウェルプレートに添加した。各ウェルに、プロテインA溶液(rSPA、脱イオン水中、プロテインA50mg/ml)を2mL添加した。そのプレートを、1時間に亘りオービタルシェーカーで穏やかに振盪させた。この時間の後、上清液を除去し、還元緩衝液Aで置き換え(1ウェル当たり2.5ml、0.0603gのNa2CO3(0.569mmol)及び0.337gのNaHCO3(4.012mmol)を100mLの脱イオン水に添加して作製される炭酸バッファー10mLに0.0762gのNaCNBH3を添加して作製した)、更に15分間振盪させた。この時間の後、プロテインAがカップリングされた材料をプロトコルDに従って洗浄した。
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
工程(i):再生セルロース(RC)への酢酸セルロース(CA)のけん化
工程(i):再生セルロース(RC)への酢酸セルロース(CA)のけん化
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
CAナノファイバー材料(11×80mm×50mm)を取得し、それを1Lの脱イオン水に懸濁することによって、CAナノファイバー材料のグリシドールの重合及びけん化を達成した。更に1Lの脱イオン水でリフレッシュする前に、溶媒を3時間循環させた。この処理を4回繰り返した後に、ナノファイバー材料を350mLの1M KOHに懸濁した。変動する量のグリシドール(100mL)を注意深く添加する前に反応媒体を60分間循環させ、ここでは1回分として25%のグリシドールを添加し、残部を90分間に亘って滴下した。反応媒体を室温で4時間循環させ、材料を洗浄プロトコルBに従ってその後洗浄した。
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
ナノファイバー材料を以下に概説されるスキームに従って誘導体化した:
実施例9−動的結合容量の決定
充填材料を、AKTA Pureシステム(GE Healthcare)のホルダ内に含まれる、選択され官能化されたナノファイバーディスクに通した。上記材料を、ホルダアウトレットがUVフローセルによって特定されるその充填材料の10%を超えた後の濃度まで、毎分流量(mV/分)当たりの所定のメンブレン体積の下で充填した。システム及びホルダ装置におけるデッドボリュームを考慮して、10%ブレイクスルーでディスクに充填されたタンパク質の総量を、Unicornソフトウェア(GE Healthcare)におけるクロマトグラムの分析によって決定した。
選択され官能化されたナノファイバー材料に対する圧力低下(ΔP)を、AKTA Pureシステム(GE Healthcare)を使用して決定した。10mM Tris(pH8)のバッファーをホルダに含まれる官能化されたナノファイバーディスクに通した。デルタカラム圧力(ΔP)が0.5MPaと等しい流量を記録した。
実施例11−本発明による別々のグラフト化工程の追加による電荷密度とトリメチルアンモニウム官能化の関係
材料が陰イオン交換体として作用することを可能にするトリメチルアンモニウム官能性をもたらすため、参照例3に従って材料を製造し、試験した。これらを、実施例1に従ってもたらされ分析された、本発明のグラフト化材料と比較した。
材料が陰イオン交換体として作用することを可能にするトリメチルアンモニウム官能性をもたらすため、参照例3に従って材料を製造し、試験した。結果を図2に示す。
実施例11で分析したのと同じ材料に対する動的結合容量(DBC)を、実施例9の方法を使用して決定した。
材料が陰イオン交換体として作用することを可能にするトリメチルアンモニウム官能性をもたらすため、参照例3に従って材料を製造し、試験した。これらの材料の動的結合容量を実施例9に従って決定した。
材料が陽イオン交換材料として作用することを可能とするため、本発明の材料にS官能性を与え、実施例2に従って分析した。
実施例2に従って製造された材料に対する動的結合容量(DBC)を、実施例9の方法を使用して決定した。結果を図9に示す。
材料が実施例3に従って陽イオン交換材料として作用することを可能とするため、本発明の材料にカルボキシメチル(CM)官能性を与えた。本発明に関連するこれらの材料に対する動的結合容量(DBC)を、実施例9の方法を使用して決定した。結果を図10に示す。
材料が参照例1に従って陰イオン交換メンブレンとして作用することを可能とするため、本発明による材料にジメチルアミノ基官能性を与えた。本発明のこれらの材料に対する動的結合容量(DBC)を、実施例9の方法を使用して決定した。
実施例11において分析されたのと同じ材料の流れ抵抗を、実施例10の方法を使用して決定した。
参照例4に従って産生された材料の試料を取り除き、豊富な量の水(ブフナー漏斗を使用して)で洗浄した後、一定質量まで乾燥した。次いで、試料を50mL遠心分離管に計量し、断片化した。10mLちょうどのp−トルエンスルホニルイソシアネート(アセトニトリル500mL中、p−トルエンスルホニルイソシアネート20mL)をチューブに添加した。遠心分離管に小さな撹拌棒を追加し、次いで、密閉して60℃の水浴に入れ、60分間撹拌した。この時間の後、試料を20mlのH2Oで希釈し、更に10分間撹拌した。次いで、40mLのイソプロパノールを添加し、自動滴定装置(CA OH滴定の方法を使用する)で0.481M Bu4NOHを使用して滴定する前に、更に10分間試料を撹拌した。
OHV=((VEP2−VEP1*f*c(TBAH)*MA))/ms
OHV:KOH/g試料中の試料のヒドロキシ価
VEP1:mL単位の第1の当量点までの滴定液消費量
VEP2:mL単位の第2の当量点までの滴定液消費量
C(TBOAH):mol/L単位のテトラブチルアンモニウムクロリドの濃度
F:単位のない補正係数(滴定濃度)
Ma:KOHの分子量;ここでは56.11g/mol
Ms:g単位の試料サイズ
参照例5に従って産生された材料の分析は、この特定の基体及びグラフト化方法について、グリシドール試薬の量を変動させることにより、6000μmol/g余りの−OH基密度を有する材料をもたらすことを示す。これを図13に示す。
材料を参照例4に従って異なる量のグリシドールで処理し、各材料(及びグラフト化されていないRC材料に対して)の流れ抵抗を実施例10で述べられるアッセイを使用して測定した。結果を図12に示す。
本発明の多くの材料に対する、容量(DBC)及び生産性の値を特定した。得られた結果を表1に示す。
様々な商業的に入手可能な多孔質ビーズ材料に対する結合容量、滞留時間及び生産性の値を、製造業者から得た。得られた結果を表2に示す。
A)Capto Q及びウシ血清アルブミン(BSA)、及びB)Q Sepharose Fast Flow9に対して、滞留時間の関数として動的結合容量を決定した。得られた結果を図1に示す。これは、2分未満の滞留時間は、これらの大規模多孔質ビーズカラムおいて可能ではないことを示す。
1 2016年3月30日にアクセス:
https://www.gelifesciences.com/gehcls_images/GELS/Related%20Content/Files/1335359522418/litdoc11002576_20120514181545.PDF
2 50mMTris−HClバッファーpH8.0中、ベッド高さ10cmのTricorn5/100カラムにおいて600cm/時、滞留時間1分で測定される10%ブレイクスルーにおける動的結合容
3 2016年3月30日にアクセス:
https://www.gelifesciences.com/gehcls_images/GELS/Related%20Content/Files/1335359522418/litdoc11002576_20120514181545.PDF
4 30mM、pH6.8のリン酸ナトリウムバッファー中、ベッド高さ10cmのTricorn(商標)5/100カラムにおいて600cm/時、滞留時間1分で測定される10%ブレイクスルーにおける動的結合容量
5 2016年3月30日にアクセス:http://www.gelifesciences.com/webapp/wcs/stores/servlet/catalog/en/GELifeSciences−uk/products/AlternativeProductStructure_17372/17543801
6 ベッド高さ20cmのカラムにおける500cm/時の移動相速度における前端分析による10%ブレイクスルーでの判定。
7 2016年3月30日にアクセス:http://www.gelifesciences.com/webapp/wcs/stores/servlet/catalog/en/GELifeSciences−uk/products/AlternativeProductStructure_17372/17547401
8 ベッド高さ10cmのカラムにおける100cm/時の移動相速度における前端分析による10%ブレイクスルーでの判定。
9 2016年3月30日にアクセス
https://www.gelifesciences.com/gehcls_images/GELS/Related%20Content/Files/1335359522418/litdoc11002576_20120514181545.PDF
比較例3
結合容量、滞留時間及び生産性の値を、様々な商業的に入手可能なメンブレン及びモノリス材料について、製造業者のデータから特定した。得られた結果を表3に示す。
10 2016年3月30日にアクセス::https://www.sartorius.co.uk/fileadmin/fm−dam/sartorius_media/Bioprocess−Solutions/Purification_Technologies/Membrane_Chromatography/Data_Sheets/Data_Sartobind−75−plus−150ml_SL−2086−e.pdf
11 厚さ8mmの150mLメンブレンを通る0.75L/分の推奨流量
12 2016年3月30日にアクセス
https://www.gelifesciences.com/gehcls_images/GELS/Related%20Content/Files/1335359522418/litdoc11002576_20120514181545.PDF
13 厚さ8mmの150mLメンブレンを通る0.75L/分の推奨流量
14 2016年3月30日にアクセス:https://www.sartorius.co.uk/en/product/product−detail/93prap06hb−12−a/
15 2mLのベッドボリューム、10mg/単位〜15mg/単位
16 5ml/分〜10ml/分、ベッドボリューム2mL
17 ベッドボリューム8mL、容量が16mL/分を示した流量
18 2016年3月30日にアクセス http://www.biaseparations.com/interactions/category/30−ion−exchange/product/download/file_id−2008
19 2016年3月30日にアクセス http://www.biaseparations.com/interactions/category/30−ion−exchange/product/download/file_id−2024
20 ベッドボリューム8mL、容量が16mL/分を示した流量
21 2016年3月30日にアクセス http://www.biaseparations.com/interactions/category/29−affinity/product/download/file_id−1970
22 ベッドボリューム8mL、容量が8mL/分を示した流量
本発明の更に一般的な態様
1.官能化された高分子クロマトグラフィー媒体を作製する方法であって、
(i)1つ以上のポリマーナノファイバーから形成された基体を提供すること、
(ii)上記基体から1つ以上の中性のポリマー鎖をグラフト化すること、及び
(iii)1つ以上の帯電した基を前記グラフト化生成物に導入することによって、上記グラフト化生成物を、クロマトグラフィー媒体として上記工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させることを含む、官能化された高分子クロマトグラフィー媒体を作製する方法。
−上記クロマトグラフィー法が陽イオン交換法であり、前記試薬が1つ以上のカルボキシレート、スルホネート若しくはホスホネートの部分を含む1つ以上の帯電した基によって上記クロマトグラフィー媒体を官能化する;又は
−上記クロマトグラフィー法が陰イオン交換法であり、上記試薬が1つ以上の第四級アミノ若しくはジエチルアミンの部分を含む1つ以上の帯電した基によって上記クロマトグラフィー媒体を官能化する、態様16に記載の方法。
(i)1つ以上のセルロースナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)式
(iii)上記グラフト化生成物を、イオン交換クロマトグラフィー法における使用に対して適したクロマトグラフィー媒体として上記工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含む、態様1乃至態様20のいずれか一つに記載の方法。
27.移動相中の上記1つ以上の生体分子を、1分以下の時間に亘って上記官能化されたクロマトグラフィー媒体と接触させる、態様26に記載の方法。
(i)1つ以上のポリマーナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)上記基体から1つ以上の中性ポリマー鎖をグラフト化すること、及び
(iii)上記グラフト化生成物を、クロマトグラフィー媒体として上記工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含む官能化された高分子クロマトグラフィー媒体を作製する方法。
−上記クロマトグラフィー法が陰イオン交換法であり、上記試薬が1つ以上の第四級アミノ若しくはジエチルアミンの部分を含む1つ以上の帯電した基によって上記クロマトグラフィー媒体を官能化する;
−上記クロマトグラフィー法が親和性捕捉クロマトグラフィー法であり、上記試薬がタンパク質、ペプチド、抗体若しくはそのフラグメント、色素、ヒスチジン基若しくは金属陽イオンを含む基の1つ以上によって上記クロマトグラフィー媒体を官能化する;
−上記クロマトグラフィー法が疎水性相互作用クロマトグラフィー法であり、上記試薬がプロピル基、ブチル基、フェニル基若しくはオクチル基の1つ以上によって上記クロマトグラフィー媒体を官能化する;
又は
−上記クロマトグラフィー法がミックスモードクロマトグラフィー法であり、上記試薬がMEP、オクチルアミン基、N−ベンジルメチルエタノールアミン基若しくはN−ベンゾイルホモシステイン基の1つ以上によって、上記クロマトグラフィー媒体を官能化する、態様44に記載の方法。
(i)1つ以上のセルロースナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)式
(iii)上記グラフト化生成物を、イオン交換、親和性捕捉、疎水的相互作用及びミックスモード法からなる群から選択されるクロマトグラフィー法における使用に適したクロマトグラフィー媒体として、上記工程(ii)の生成物を官能化する試薬と接触させること、を含む、態様28乃至態様49のいずれか一つに記載の方法。
(a)上記グラフト化生成物をアリルグリシジルエーテルと接触させる;
(b)上記工程(a)の生成物を、ハロヒドリン形成試薬で処理する;及び
(c)前記工程(b)の生成物をプロテインAと接触させる、態様28から態様50のいずれか一つに記載の方法。
[実施態様1]
官能化された高分子クロマトグラフィー媒体を作製する方法であって、
(i)1以上のポリマーナノファイバーから形成された基体を提供すること、
(ii)基体から1以上の中性のポリマー鎖をグラフト化すること、及び
(iii)前記グラフト化生成物と、クロマトグラフィー媒体として前記工程(ii)の生成物を官能化する試薬とを接触させることを含み、
ここで、工程(ii)は、式
式中、R1、R2、R3、R4及びR5は同一又は異なってもよく、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシから選択され、但しR1、R2、R3、R4又はR5の少なくとも1つは水素ではない、
官能化された高分子クロマトグラフィー媒体を作製する方法。
[実施態様2]
前記工程(ii)が、式
[実施態様3]
前記ポリマーナノファイバーが、セルロース、酢酸セルロース、ポリスルホン、ポリアミド、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリアクリロニトリル、ポリスチレン、ポリエチレンオキシド及びそれらの混合物、好ましくは前記ポリマーがセルロース、酢酸セルロース及びそれらの混合物からなる群から選択される、実施態様1又は2に記載の方法。
[実施態様4]
工程(ii)で導入される前記ポリマーの量が、グラフト化生成物の500μmol/g〜60,000μmol/gである、実施態様1乃至3のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様5]
前記グラフト化生成物を試薬と接触させる工程が、グラフト化生成物への1つ以上のリガンド基を導入し、それがクロマトグラフィー媒体としての使用に適した1つ以上のリガンド基を含む前記官能化生成物を与える、実施態様1乃至4のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様6]
前記工程(iii)の生成物における前記リガンド基の密度が、クロマトグラフィー媒体の100μmol/g〜2,500μmol/gである、実施態様5に記載の方法。
[実施態様7]
前記官能化された高分子クロマトグラフィー媒体上の圧力低下が、液相を0.05mm〜10mmの厚さの媒体に毎分1メンブレン体積〜640メンブレン体積の流量で通過させる場合、2MPa未満である、実施態様1乃至6のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様8]
前記官能化された高分子クロマトグラフィー媒体の生産性が、50mg/mL/分〜75000mg/mL/分である、実施態様1乃至7のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様9]
前記官能化された高分子クロマトグラフィー媒体の生産性が、200mg/ml/分超である、実施態様1乃至8のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様10]
前記グラフト化工程(ii)が、前記官能化された高分子クロマトグラフィー媒体の動的結合容量(DBC)を増加させる効果を有する、実施態様1乃至9のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様11]
前記基体が、工程(i)〜工程(ii)の間に処理されて1つ以上の官能基が導入される、又は前記基体が工程(i)〜工程(ii)の間に処理されて前記基体上任意の官能基が脱保護若しくは活性化される、又は前記基体が工程(i)〜(ii)の間に処理されて、前記基体上の前記官能基の数/密度が増加される、実施態様1乃至10のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様12]
前記グラフト化工程(ii)が、更に同じ工程において、1つ以上の官能基を導入する、又は前記基体上の任意の官能基を脱保護若しくは活性化する、又は前記基体上の官能基の数/密度を増加させる条件下で実行される、実施態様1乃至10のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様13]
前記グラフト化工程(ii)が、水又は水:エタノール中、好ましくは水中で、水性アルカリ、好ましくはNaOH又はKOHの存在下で達成される、実施態様12に記載の方法。
[実施態様14]
前記1つ以上の官能基が、ナノファイバー基体上に存在するヒドロキシル基を含む、実施態様1乃至13のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様15]
官能化工程(iii)において、官能化試薬が、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリド(GMAC)、1,4−ブタンスルホン、クロロ酢酸ナトリウム、NaIO4に続いてプロテインA、ジビニルスルホンに続いてプロテインA、アリルグリシジルエーテルに続いて第1にハロヒドリン形成試薬、好ましくはN−ブロモスクシンアミド、その後プロテインA、アリルグリシジルエーテルに続いて第1にエポキシド形成試薬、その後プロテインA、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、実施態様1乃至14のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様16]
前記ポリマーの1つ以上が分岐鎖である、実施態様10乃至15のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様17]
工程(iii)において、前記試薬が、結果として生じる官能化されたクロマトグラフィー媒体が、イオン交換、親和性捕捉、疎水的相互作用及びミックスモード法からなる群から選択されるクロマトグラフィー法における使用に適したものとなるように、前記グラフト化生成物を官能化する、実施態様1乃至16のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様18]
実施態様17に記載の方法であって、
−前記クロマトグラフィー法がカチオン交換法であり、前記試薬が1つ以上のカルボキシレート、スルホネート若しくはホスホネートの部分を含む1つ以上の帯電した基によって前記クロマトグラフィー媒体を官能化する;
−前記クロマトグラフィー法が陰イオン交換法であり、前記試薬が1つ以上の第四級アミノ若しくはジエチルアミンの部分を含む1つ以上の帯電した基によってクロマトグラフィー媒体を官能化する;
−前記クロマトグラフィー法が親和性捕捉クロマトグラフィー法であり、前記試薬がタンパク質、ペプチド、抗体若しくはそのフラグメント、色素、ヒスチジン基若しくは金属陽イオンを含む基の1つ以上によってクロマトグラフィー媒体を官能化する;
−前記クロマトグラフィー法が疎水性相互作用クロマトグラフィー法であり、前記試薬がプロピル基、ブチル基、フェニル基若しくはオクチル基の1つ以上によってクロマトグラフィー媒体を官能化する;又は
−前記クロマトグラフィー法がミックスモードクロマトグラフィー法であり、前記試薬がMEP、オクチルアミン基、N−ベンジルメチルエタノールアミン基若しくはN−ベンゾイルホモシステイン基の1つ以上によってクロマトグラフィー媒体を官能化する、実施態様17に記載の方法。
[実施態様19]
工程(iii)において、前記試薬が、1つ以上のプロテインA分子によって前記グラフト化生成物を官能化する、実施態様1乃至18のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様20]
工程(iii)が、クロマトグラフィー媒体として、工程(ii)の生成物を共に官能化する複数の工程を含む、実施態様1乃至19のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様21]
工程(iii)において:
(a)前記グラフト化生成物を、ジビニルスルホン、アリルグリシジルエーテル及びそれらの組み合わせから選択される群から選択される試薬と接触させ;
(b)前記工程(a)の生成物を、ハロヒドリン形成試薬によって任意に処理し;及び
(c)前記工程(b)の生成物をプロテインAと接触させる、実施態様20に記載の方法。
[実施態様22]
前記基体が、メンブレンの形態である、実施態様1乃至21のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様23]
前記ナノファイバーが10nm〜1000nmの平均径を有する、実施態様1乃至22のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様24]
(i)1つ以上のセルロースナノファイバーで形成された基体を提供すること、
(ii)式
(iii)前記グラフト化生成物を、イオン交換、親和性捕捉、疎水的相互作用及びミックスモード法からなる群から選択されるクロマトグラフィー法における使用に適したクロマトグラフィー媒体として、工程(ii)の前記生成物を官能化する試薬と接触させることを含み、
式中、R1、R2、R3、R4及びR5は同一又は異なってもよく、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシから選選択され、但し、R1、R2、R3、R4又はR5の少なくとも1つが水素ではない、
実施態様1乃至23のいずれか1項に記載の方法。
[実施態様25]
工程(ii)が、式
[実施態様26]
実施態様1乃至25のいずれか1項に記載の方法によって入手可能な、官能化されたクロマトグラフィー媒体。
[実施態様27]
クロマトグラフィーカートリッジを作製する方法であって、実施態様1乃至25のいずれか1項に記載の方法を実施すること、及びそのようにしてられた生成物をカートリッジに組み込むこと、を含むクロマトグラフィーカートリッジを作製する方法。
[実施態様28]
(a)実施態様27に記載の方法によって入手可能である、又は(b)実施態様26による1つ以上の官能化されたクロマトグラフィー媒体を含む、クロマトグラフィーカートリッジ。
[実施態様29]
クロマトグラフィーにおける、実施態様26に記載の官能化されたクロマトグラフィー媒体又は実施態様28に記載のクロマトグラフィーカートリッジの使用。
[実施態様30]
移動相から1つ以上の生体分子を単離する方法であって、移動相中の1つ以上の生体分子と、実施態様26に記載の官能化されたクロマトグラフィー媒体又は実施態様28に記載のクロマトグラフィーカートリッジとを接触させることを含む、移動相から1つ以上の生体分子を単離する方法。
[実施態様31]
移動相中の1つ以上の前記生体分子が、1分以下の時間に亘って、前記官能化されたクロマトグラフィー媒体と接触される、実施態様30に記載の方法。
[実施態様32]
前記1つ以上の生体分子が、1つ以上のモノクローナル抗体、又はプロテインA結合に対する親和性を有する部位を示すように操作されたタンパク質であり、前記官能化されたクロマトグラフィー媒体が少なくとも1つのプロテインAリガンド基を持つ、実施態様30又は31に記載の方法。
Claims (13)
- 官能化された高分子クロマトグラフィー媒体を作製する方法であって、
(i)1以上のポリマーナノファイバーから形成された基体を提供すること、
(ii)基体から1以上の中性のポリマー鎖をグラフト化すること、及び
(iii)前記グラフト化生成物と、クロマトグラフィー媒体として前記工程(ii)の生成物を官能化する試薬とを接触させることを含み、
ここで、工程(ii)は、式
式中、R1、R2、R3、R4及びR5は同一又は異なってもよく、H、ハロ、C1〜C4アルキル又はC1〜C4アルコキシから選択され、但しR1、R2、R3、R4又はR5の少なくとも1つは水素ではなく、
任意に、前記工程(ii)が、式
官能化された高分子クロマトグラフィー媒体を作製する方法。 - 請求項1に記載の方法であって:
a)前記ポリマーナノファイバーが、セルロース、酢酸セルロース、ポリスルホン、ポリアミド、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリアクリロニトリル、ポリスチレン、ポリエチレンオキシド及びその混合物からなる群から選択されるポリマーを含み、好ましくは前記ポリマーが、セルロース、酢酸セルロース及びその混合物からなる群から選択され;
b)前記ナノファイバー基体上に存在する1つ以上の官能基がヒドロキシル基を含み;
c)前記ポリマー鎖の1つ以上が分岐鎖であり;
d)前記基体がメンブレンの形態であり;及び/又は
e)前記ナノファイバーが10nm〜1000nmの平均径を有する、請求項1に記載の方法。 - 前記グラフト化生成物を試薬と接触させる工程が、グラフト化生成物への1つ以上のリガンド基を導入し、それがクロマトグラフィー媒体としての使用に適した1つ以上のリガンド基を含む前記官能化生成物を与え、任意に、前記工程(iii)の生成物における前記リガンド基の密度が、クロマトグラフィー媒体の100μmol/g〜2,500μmol/gである、請求項1又は2に記載の方法。
- a)液相を毎分1メンブレン体積〜640メンブレン体積の流量で0.05mm〜10mmの厚さの媒体の通過させる場合、官能化された高分子クロマトグラフィー媒体に対する圧力低下が2MPa未満であり;
b)前記官能化された高分子クロマトグラフィー媒体の生産性が50mg/mL/分〜75,000mg/mL/分であり;
c)前記官能化された高分子クロマトグラフィー媒体の生産性が200mg/mL/分超であり;
d)前記グラフト化工程(ii)が、官能化された高分子クロマトグラフィー媒体の動的結合容量(DBC)を増加させる効果を有し;及び/又は
e)工程(ii)で導入された前記ポリマーの量が、グラフト化生成物の500μmol/g〜60,000μmol/gである、
請求項1乃至3のいずれか1項に記載の方法。 - 前記基体が、工程(i)〜工程(ii)の間に処理されて1つ以上の官能基が導入される、又は前記基体が工程(i)〜工程(ii)の間に処理されて前記基体上任意の官能基が脱保護若しくは活性化される、又は前記基体が工程(i)〜(ii)の間に処理されて、前記基体上の前記官能基の数/密度が増加される、請求項1乃至4のいずれか1項に記載の方法。
- 前記グラフト化工程(ii)が、更に同じ工程において、1つ以上の官能基を導入する、又は前記基体上の任意の官能基を脱保護若しくは活性化する、又は前記基体上の官能基の数/密度を増加させる条件下で実行され、任意に、前記グラフト化工程(ii)が、水又は水:エタノール中、好ましくは水中で、水性アルカリ、好ましくはNaOH又はKOHの存在下で達成される、請求項1乃至4のいずれか1項に記載の方法。
- 官能化工程(iii)において、官能化試薬が、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリド(GMAC)、1,4−ブタンスルホン、クロロ酢酸ナトリウム、NaIO4に続いてプロテインA、アリルグリシジルエーテルに続いて第1にハロヒドリン形成試薬、好ましくはN−ブロモスクシンアミド、その後プロテインA、アリルグリシジルエーテルに続いて第1にエポキシド形成試薬、その後プロテインA、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項1乃至6のいずれか1項に記載の方法。
- 工程(iii)において、前記試薬が、結果として生じる官能化されたクロマトグラフィー媒体が、イオン交換、親和性捕捉、疎水的相互作用及びミックスモード法からなる群から選択されるクロマトグラフィー法における使用に適したものとなるように、前記グラフト化生成物を官能化する、請求項1乃至7のいずれか1項に記載の方法。
- 工程(iii)において、前記試薬が、1つ以上のプロテインA分子によって前記グラフト化生成物を官能化する、請求項1乃至8のいずれか1項に記載の方法。
- 工程(iii)が、クロマトグラフィー媒体として、工程(ii)の生成物を共に官能化する複数の工程を含み、任意に、工程(iii)において:
(a)前記グラフト化生成物を、ジビニルスルホン、アリルグリシジルエーテル及びそれらの組み合わせから選択される群から選択される試薬と接触させ;
(b)前記工程(a)の生成物を、ハロヒドリン形成試薬によって任意に処理し;及び
(c)前記工程(b)の生成物をプロテインAと接触させる、請求項1乃至9のいずれか1項に記載の方法。 - 請求項1乃至10のいずれか1項に記載の方法によって入手可能な、官能化されたクロマトグラフィー媒体。
- 移動相から1つ以上の生体分子を単離する方法であって、移動相中の1つ以上の生体分子と、請求項11に記載の官能化されたクロマトグラフィー媒体とを接触させることを含み、任意に、移動相中の1つ以上の前記生体分子が、1分以下の期間に亘って、前記官能化されたクロマトグラフィー媒体と接触される、移動相から1つ以上の生体分子を単離する方法。
- 前記1つ以上の生体分子が、1つ以上のモノクローナル抗体、又はプロテインA結合に対する親和性を有する部位を示すように操作されたタンパク質であり、前記官能化されたクロマトグラフィー媒体が少なくとも1つのプロテインAリガンド基を持つ、請求項12に記載の方法。
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB1612252.5A GB201612252D0 (en) | 2016-07-14 | 2016-07-14 | New composition and new process |
GBGB1612249.1A GB201612249D0 (en) | 2016-07-14 | 2016-07-14 | New compositionand new process |
GB1612252.5 | 2016-07-14 | ||
GB1612249.1 | 2016-07-14 | ||
GB1709996.1 | 2017-06-22 | ||
GBGB1709996.1A GB201709996D0 (en) | 2017-06-22 | 2017-06-22 | Improved composition and process |
PCT/GB2017/052085 WO2018011600A1 (en) | 2016-07-14 | 2017-07-14 | Functionalised chromatography medium comprising polymer nanofibres and process of preparation thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019527617A true JP2019527617A (ja) | 2019-10-03 |
JP7055538B2 JP7055538B2 (ja) | 2022-04-18 |
Family
ID=59381589
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019501721A Active JP7055538B2 (ja) | 2016-07-14 | 2017-07-14 | ポリマーナノファイバーを含む官能化クロマトグラフィー媒体及びそれを製造する方法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11097252B2 (ja) |
EP (2) | EP3484613B1 (ja) |
JP (1) | JP7055538B2 (ja) |
CN (3) | CN109414680B (ja) |
SG (1) | SG11201811783YA (ja) |
WO (1) | WO2018011600A1 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021510348A (ja) * | 2018-01-11 | 2021-04-22 | ピュリディファイ リミテッド | クロマトグラフィー媒体及びそれらの生成方法 |
JPWO2021215539A1 (ja) * | 2020-04-24 | 2021-10-28 |
Families Citing this family (39)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9950282B2 (en) | 2012-03-15 | 2018-04-24 | Flodesign Sonics, Inc. | Electronic configuration and control for acoustic standing wave generation |
US10967298B2 (en) | 2012-03-15 | 2021-04-06 | Flodesign Sonics, Inc. | Driver and control for variable impedence load |
US9458450B2 (en) | 2012-03-15 | 2016-10-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustophoretic separation technology using multi-dimensional standing waves |
US10704021B2 (en) | 2012-03-15 | 2020-07-07 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic perfusion devices |
WO2015105955A1 (en) | 2014-01-08 | 2015-07-16 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustophoresis device with dual acoustophoretic chamber |
US11021699B2 (en) | 2015-04-29 | 2021-06-01 | FioDesign Sonics, Inc. | Separation using angled acoustic waves |
US11708572B2 (en) | 2015-04-29 | 2023-07-25 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic cell separation techniques and processes |
US11377651B2 (en) | 2016-10-19 | 2022-07-05 | Flodesign Sonics, Inc. | Cell therapy processes utilizing acoustophoresis |
US11474085B2 (en) | 2015-07-28 | 2022-10-18 | Flodesign Sonics, Inc. | Expanded bed affinity selection |
US11459540B2 (en) | 2015-07-28 | 2022-10-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Expanded bed affinity selection |
US11214789B2 (en) | 2016-05-03 | 2022-01-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Concentration and washing of particles with acoustics |
US11085035B2 (en) | 2016-05-03 | 2021-08-10 | Flodesign Sonics, Inc. | Therapeutic cell washing, concentration, and separation utilizing acoustophoresis |
EP3484613B1 (en) * | 2016-07-14 | 2021-02-24 | Puridify Ltd. | Functionalised chromatography medium comprising polymer nanofibres and process of preparation thereof |
CN110494543A (zh) | 2016-10-19 | 2019-11-22 | 弗洛设计声能学公司 | 通过声学的亲和细胞提取 |
JP2021507561A (ja) | 2017-12-14 | 2021-02-22 | フロデザイン ソニックス, インク.Flodesign Sonics, Inc. | 音響トランスデューサドライバ及びコントローラ |
CN108409900B (zh) * | 2018-03-16 | 2020-06-02 | 大连理工大学 | 两性离子聚合物的乙烯基砜衍生物、其制备方法及应用 |
GB201902743D0 (en) | 2019-02-28 | 2019-04-17 | Ge Healthcare Bio Sciences Ab | Improvements in and relating to optimizing the operation of a chromatography system |
KR20210143767A (ko) | 2019-03-27 | 2021-11-29 | 씨티바 스웨덴 에이비 | 생체분자의 분리 방법 |
GB201904522D0 (en) * | 2019-04-01 | 2019-05-15 | Puridify Ltd | A chromatography system |
EP3721998A1 (de) * | 2019-04-10 | 2020-10-14 | Philipps-Universität Marburg | Verfahren zur erzeugung einer hydrophilen oberfläche auf ps/dvb copolymerpartikeln |
CN113795319A (zh) | 2019-05-15 | 2021-12-14 | 纯化迪发有限公司 | 色谱装置 |
US20230117190A1 (en) | 2020-04-09 | 2023-04-20 | Puridify Limited | A chromatography device |
GB202006231D0 (en) * | 2020-04-28 | 2020-06-10 | Puridify Ltd | Seperation matrix and metod for seperation |
GB202006310D0 (en) | 2020-04-29 | 2020-06-10 | Puridify Ltd | Preparative chromatography system and method for chromatography separations |
GB202101114D0 (en) | 2021-01-27 | 2021-03-10 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | PROCESS FOR mRNA PURIFICATION |
GB202110014D0 (en) | 2021-07-12 | 2021-08-25 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | A method for separating adeno-associated virus capsids, compositions obtained by said method and uses thereof |
GB202113626D0 (en) | 2021-09-24 | 2021-11-10 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | FC binding polypeptides |
CN113908589B (zh) * | 2021-10-08 | 2022-09-27 | 天津工业大学 | 一种表面印迹抗体的疏水电荷诱导模式膜层析介质及其制备方法 |
CN114002208B (zh) * | 2021-10-26 | 2022-12-02 | 清华大学 | 一种基于纸基传感器和手机小程序的便携式比色检测重金属离子的方法 |
WO2023080869A1 (en) * | 2021-11-05 | 2023-05-11 | Eczacibaşi Monrol Nükleer Ürünler Sanayi̇ Ve Ti̇caret Anoni̇m Şi̇rketi̇ | Pressure-assisted separation column |
GB202202713D0 (en) * | 2022-02-28 | 2022-04-13 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | Method of preparing a functionalised chromatography medium |
GB202202777D0 (en) | 2022-03-01 | 2022-04-13 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | A method for separating supercoiled plasmid DNA |
GB202203478D0 (en) | 2022-03-14 | 2022-04-27 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | Vh3 binding polypeptides |
GB202206123D0 (en) | 2022-04-27 | 2022-06-08 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | A pre-screening method and a method for separating adeno-associated virus capsids |
WO2023247468A2 (en) | 2022-06-22 | 2023-12-28 | Puridify Limited | Kappa light chain-binding convection matrix |
WO2024022894A1 (en) | 2022-07-25 | 2024-02-01 | Cytiva Bioprocess R&D Ab | A process and chromatography material for chromatography recovery of nucleic acid molecules |
GB202214280D0 (en) | 2022-09-29 | 2022-11-16 | Cytiva Vioprocess R&D Ab | Chromatography ligand and chromatography material, and uses thereof |
GB202215814D0 (en) | 2022-10-26 | 2022-12-07 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | A chromatography device, system, and use thereof for analytic separation |
CN116764607B (zh) * | 2023-08-25 | 2023-10-24 | 成都中核高通同位素股份有限公司 | 改性吸附树脂及其在分离钙钪的应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004003542A1 (en) * | 2002-06-28 | 2004-01-08 | Amersham Biosciences Ab | Surface-modified base matrices |
WO2015052465A1 (en) * | 2013-10-09 | 2015-04-16 | Ucl Business Plc | Chromatography medium |
JP2015527596A (ja) * | 2012-09-11 | 2015-09-17 | ダイオネックス コーポレイション | グリシドール官能化陰イオン交換固定相 |
JP2016507234A (ja) * | 2013-01-31 | 2016-03-10 | イー・エム・デイー・ミリポア・コーポレイシヨン | ワクチンおよびウイルスの精製のためのクロマトグラフィー媒体 |
WO2017018524A1 (ja) * | 2015-07-30 | 2017-02-02 | 国立大学法人熊本大学 | エンドトキシン吸着剤 |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4663163A (en) * | 1983-02-14 | 1987-05-05 | Hou Kenneth C | Modified polysaccharide supports |
SE9503925D0 (sv) | 1995-11-07 | 1995-11-07 | Pharmacia Biotech Ab | Separationsmedium för IgG |
CN1195225C (zh) * | 2001-03-23 | 2005-03-30 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种用醋酸纤维丝制备金属螯合亲和色谱介质的方法 |
WO2004026931A2 (en) * | 2002-09-18 | 2004-04-01 | Emembrane, Inc. | Functionalized materials and methods of using same |
SE0400916D0 (sv) * | 2004-04-05 | 2004-04-05 | Amersham Biosciences Ab | Polymeric ligands |
MY144940A (en) * | 2005-01-25 | 2011-11-30 | Avantor Performance Mat Inc | Chromatographic media |
SE529259C2 (sv) * | 2005-08-31 | 2007-06-12 | Ge Healthcare Bio Sciences Ab | Tillverkning av kromarografimatriser, en kromarografimatris, en vätskekromatografikolonn, prcess för att isolera målföreningar och användning av en kromarografimatris för vätskekromatografi |
CN101288844B (zh) * | 2007-04-20 | 2011-04-20 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种固定化金属的亲和色谱固定相及其制备方法 |
JP5396933B2 (ja) * | 2009-03-11 | 2014-01-22 | 東ソー株式会社 | 液体クロマトグラフィー用充填剤、及び生体高分子の分離精製方法 |
JP5631271B2 (ja) * | 2010-07-28 | 2014-11-26 | ローム アンド ハース カンパニーRohm And Haas Company | 改良されたクロマトグラフィー媒体の製造方法および使用方法 |
KR20130028939A (ko) * | 2010-07-29 | 2013-03-20 | 이엠디 밀리포어 코포레이션 | 크로마토그래피 매질 성능을 개선하기 위한 그라프팅 방법 |
KR101997543B1 (ko) | 2010-07-30 | 2019-07-09 | 이엠디 밀리포어 코포레이션 | 크로마토그래피 매질 및 방법 |
KR102017649B1 (ko) * | 2011-05-03 | 2019-09-03 | 아반토 퍼포먼스 머티리얼즈, 엘엘씨 | 알릴아민에 기반한, 단백질 정제용 신규한 크로마토그래피 매체 및 이의 유도체 |
ES2868093T3 (es) * | 2012-09-17 | 2021-10-21 | Grace W R & Co | Medio y dispositivos de cromatografía |
EP2914377A1 (en) * | 2012-11-01 | 2015-09-09 | Merck Patent GmbH | Surface modification of porous base supports |
CN105001376A (zh) * | 2015-06-23 | 2015-10-28 | 天津大学 | 原子转移自由基聚合制备高容量蛋白质层析介质的方法 |
CN105597716A (zh) * | 2016-01-14 | 2016-05-25 | 杭州飞山浩科技有限公司 | 一种阴离子交换色谱固定相的制备方法 |
CN105727911A (zh) * | 2016-03-10 | 2016-07-06 | 天津大学 | 甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝二乙胺修饰琼脂糖凝胶色谱介质及制备方法与应用 |
EP3484613B1 (en) | 2016-07-14 | 2021-02-24 | Puridify Ltd. | Functionalised chromatography medium comprising polymer nanofibres and process of preparation thereof |
GB201800448D0 (en) | 2018-01-11 | 2018-02-28 | Puridify Ltd | Chromatography media and methods for producing them |
-
2017
- 2017-07-14 EP EP17742288.8A patent/EP3484613B1/en active Active
- 2017-07-14 JP JP2019501721A patent/JP7055538B2/ja active Active
- 2017-07-14 SG SG11201811783YA patent/SG11201811783YA/en unknown
- 2017-07-14 WO PCT/GB2017/052085 patent/WO2018011600A1/en unknown
- 2017-07-14 CN CN201780043591.2A patent/CN109414680B/zh active Active
- 2017-07-14 EP EP21155004.1A patent/EP3834926A1/en active Pending
- 2017-07-14 CN CN202210432662.0A patent/CN114700057A/zh active Pending
- 2017-07-14 US US16/315,088 patent/US11097252B2/en active Active
- 2017-07-14 CN CN202210432682.8A patent/CN114749162A/zh active Pending
-
2021
- 2021-07-15 US US17/376,567 patent/US20210346866A1/en active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004003542A1 (en) * | 2002-06-28 | 2004-01-08 | Amersham Biosciences Ab | Surface-modified base matrices |
JP2015527596A (ja) * | 2012-09-11 | 2015-09-17 | ダイオネックス コーポレイション | グリシドール官能化陰イオン交換固定相 |
JP2016507234A (ja) * | 2013-01-31 | 2016-03-10 | イー・エム・デイー・ミリポア・コーポレイシヨン | ワクチンおよびウイルスの精製のためのクロマトグラフィー媒体 |
WO2015052465A1 (en) * | 2013-10-09 | 2015-04-16 | Ucl Business Plc | Chromatography medium |
WO2017018524A1 (ja) * | 2015-07-30 | 2017-02-02 | 国立大学法人熊本大学 | エンドトキシン吸着剤 |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021510348A (ja) * | 2018-01-11 | 2021-04-22 | ピュリディファイ リミテッド | クロマトグラフィー媒体及びそれらの生成方法 |
JP7350412B2 (ja) | 2018-01-11 | 2023-09-26 | ピュリディファイ リミテッド | クロマトグラフィー媒体及びそれらの生成方法 |
US11931719B2 (en) | 2018-01-11 | 2024-03-19 | Puridify Ltd. | Chromatography media and methods for producing them |
JPWO2021215539A1 (ja) * | 2020-04-24 | 2021-10-28 | ||
WO2021215539A1 (ja) * | 2020-04-24 | 2021-10-28 | 東洋紡株式会社 | イオン交換膜 |
JP7384278B2 (ja) | 2020-04-24 | 2023-11-21 | 東洋紡株式会社 | セルロース系イオン交換膜及びその製造方法、エキソソーム精製用のデバイス、並びにエキソソームの精製方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3484613B1 (en) | 2021-02-24 |
CN114700057A (zh) | 2022-07-05 |
SG11201811783YA (en) | 2019-01-30 |
CN109414680A (zh) | 2019-03-01 |
CN109414680B (zh) | 2022-04-19 |
EP3484613A1 (en) | 2019-05-22 |
JP7055538B2 (ja) | 2022-04-18 |
US20190308169A1 (en) | 2019-10-10 |
EP3834926A1 (en) | 2021-06-16 |
WO2018011600A1 (en) | 2018-01-18 |
CN114749162A (zh) | 2022-07-15 |
US20210346866A1 (en) | 2021-11-11 |
US11097252B2 (en) | 2021-08-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2019527617A (ja) | ポリマーナノファイバーを含む官能化クロマトグラフィー媒体及びそれを製造する方法 | |
KR102662078B1 (ko) | 크로마토그래피 매질 및 그를 제조하는 방법 | |
US20210162370A1 (en) | Chromatography Medium | |
KR102132157B1 (ko) | 다공성 기재 지지체의 표면 개질 | |
JP2014522479A (ja) | タンパク質精製用のアリルアミンおよびアリルアミン誘導体に基づく新規なクロマトグラフ媒体 | |
JP2007531891A (ja) | 分離マトリックスの製造方法 | |
JP5826180B2 (ja) | 分離マトリックス | |
Du | Peptide immobilized monolith containing tentacle-type functionalized polymer chains for high-capacity binding of immunoglobulin G | |
JP2023523351A (ja) | 分離マトリックス及び分離の方法 | |
JP2013103189A (ja) | タンパク質吸着材の処理方法、タンパク質吸着材のタンパク質吸着能の回復方法、及びタンパク質吸着材の製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20190523 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190527 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20190527 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190703 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200708 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20210421 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210531 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210811 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211108 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220208 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220307 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220331 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7055538 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |