JP2019509064A5 - - Google Patents

Claims (13)

1. 葉緑体における目的のタンパク質をコードするトランス遺伝子の翻訳を増加させる方法であって、
   ａ）前記目的のタンパク質をコードする核酸の天然配列を分析すること、及び前記配列中のコドンを高等植物の葉緑体のｐｓｂＡ遺伝子で優先的に使用されるコドンに置き換えること、及びリボソームプロファイリングを実施すること、及び翻訳中にリボソームストールを引き起こす任意のコドンを除去すること；
   ｂ）合成のコドン最適化配列を作製すること、及び前記配列を葉緑体形質転換ベクターにクローニングすることであって、前記合成配列が、前記葉緑体での発現に好適な５’及び３’調節エレメントに作動可能に連結されていること；
   ｃ）前記治療用タンパク質が発現する条件下で標的植物を前記ベクターで形質転換することであって、前記コドンの置換により、天然配列を用いて観察される発現レベルと比べて少なくとも２倍のタンパク質発現の増加が生じること
   を含む方法。
2. 前記目的のタンパク質を単離することを更に含む、請求項１に記載の方法。
3. 前記植物から葉を採取して凍結乾燥することを更に含み、前記凍結乾燥葉が前記目的のタンパク質を含む、請求項１に記載の方法。
4. 図４Ａに示される核酸によってコードされる合成ＶＰ１タンパク質。
5. 前記タンパク質が配列番号４を含む配列によってコードされる、請求項４に記載の合成ＶＰ１タンパク質。
6. 図１８Ａに示される核酸によってコードされる合成ムタナーゼ酵素。
7. 前記酵素が配列番号２５を含む配列によってコードされる、請求項６に記載の合成ムタナーゼ酵素。
8. ポリオウイルスに対して以前免疫されたことがある対象に全身及び粘膜免疫を生じさせる方法であって、請求項４又は５の何れか一項に記載の合成ＶＰ１タンパク質を含む凍結乾燥植物細胞をアジュバントの存在下で前記対象に経口的に投与することを含み、前記投与が前記対象における抗ＶＰ１−ＩｇＧ１力価及び抗ＶＰ−１−ＩｇＡ力価の産生を引き起こし、それにより前記ポリオウイルスに対する免疫がブーストされる、方法。
9. 前記投与が１〜４回実施される、請求項８に記載の方法。
10. 請求項６又は７の何れか一項に記載のムタナーゼを経口投与することを含む、それを必要としている対象にう蝕の形成を阻害する方法であって、前記ムタナーゼが前記対象のプラーク形成を阻害する、方法。
11. 前記ムタナーゼが抗菌ペプチドとの融合物として投与され、及びチューインガムとして製剤化される、請求項１０に記載の方法。
12. 請求項４〜７のいずれか一項に記載のタンパク質をコードするプラスチド形質転換ベクター。
13. 請求項１２に記載のベクターで形質転換された植物であって、食用である植物。