JP2019505228A5 - - Google Patents
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Claims (39)
- 熱プロファイルにおいて核酸を熱処理する装置であって、前記装置は、核酸を含む反応物質をそれぞれが収容する反応器を保持する反応器ホルダと、チューブ又はウェルプレート又はチップ又はカートリッジなどの任意の形態である反応器とを使用し、前記装置はまた、反応器温度センサと槽媒体とを使用し、前記装置は、
第1の槽及び第2の槽であって、槽内の槽媒体はそれぞれ、2つの異なる温度THIGH及びTLOWで維持可能である、第1の槽及び第2の槽と、
複数の熱サイクルで前記反応器を2つの前記槽内に配置し、
−所定の高い目標温度THTと、
−所定の低い目標温度TLTと
に交互に到達することを可能にする移送手段と
を含み、
さらに、前記装置は、
a)THTがTHIGHよりも低い、
b)TLTがTLOWよりも高い、及び
c)a)及びb)の条件、
からなる群からの少なくとも1つの条件によって規定された温度オフセット特性に適合し、
前記移送手段は、
熱サイクル中に前記反応器温度センサによって感知されたリアルタイム温度に基づいて動作可能な温度誘導作動制御手段(TeGMCM)と、
前記反応器が前記槽内に配置される時間周期に基づいて動作可能な時間誘導作動制御手段(TiGMCM)と
からなる群からの少なくとも1つのモードによって動作可能であり、
前記槽の何れかにおける槽媒体は、空気、液体、固体、粉末及びこれらの何れかの混合物を含む任意の相である、装置。 - TiGMCMは、時間周期に対してユーザーが較正することができる、請求項1に記載の装置。
- さらに第3の槽を含み、槽媒体は中間温度TMEDIUMで維持可能であり、前記移送手段は、前記反応器を前記第3の槽内に配置し、所定の中間目標温度TMTに到達することを可能にし、TMEDIUMはTMTと同じであるか、又はTMTからオフセットされている、請求項1に記載の装置。
- さらに第4の槽を含み、槽媒体は、熱サイクル前に反応器に対する追加プロセスを可能にするために温度TAPで維持可能であり、前記追加プロセスは、
e)逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT−PCR)、
f)ホットスタートプロセス及び
c)等温増幅反応
からなる群からの1つであり、
前記移送手段は、前記反応器を前記第4の槽内に配置し、追加プロセス目標温度TAPTに到達することを可能にし、TAPはTAPTと同じであるか、又はTAPからオフセットされている、請求項1に記載の装置。 - 前記第1の槽内の槽媒体は、100℃を超えて維持可能である、請求項1に記載の装置。
- 前記第2の槽内の槽媒体は、室温よりも低く維持可能である、請求項1に記載の装置。
- 前記移送手段は、前記反応器の過熱又は過冷却を不必要に引き起こす動作上の電気機械的遅れを相殺するために、前記反応器がTHTよりも低い第1のリフトオフ温度及びTLTよりも高い第2のリフトオフ温度に到達する場合に前記反応器の槽からのリフトオフを開始するようにユーザーが較正することができる、請求項1に記載の装置。
- 熱サイクルの間に任意の槽内の温度を変更する変更手段をさらに含む、請求項1に記載の装置。
- THTは、核酸の変性のために85〜99℃の領域にあり、TLTは、核酸上へのプライマー又はプローブのアニーリング又はプライマー伸長のために45〜75℃の領域にあり、前記第1及び第2の槽は、反応器を熱サイクルしてポリメラーゼ連鎖反応(PCR)の増幅又はプライマー伸長を達成するためのものである、請求項1に記載の装置。
- 熱プロファイルにおける温度安定化ステップのための第5の槽をさらに含む、請求項1に記載の装置。
- 前記温度安定化ステップは目標温度のうちの1つにおけるものである、請求項10に記載の装置。
- 前記反応器が槽の何れかの中又は槽の外側の空気中にある場合に核酸を分析するための、蛍光画像化手段又は電気化学的検出手段をさらに含む、請求項1に記載の装置。
- 槽媒体が40〜80℃の範囲内の一定温度で、かつ蛍光画像化を含む熱サイクルプロセスを通して維持可能な液体又は熱空気である第6の槽をさらに含み、前記槽媒体及び前記第6の槽の少なくとも一部は透明であり、光源からの照射光の透過及び前記反応器からの放出光の透過を可能にする、請求項1に記載の装置。
- THIGHとTHTとの間の第1のオフセットは、1〜400℃の範囲内にあり、TLOWとTLTとの間の第2のオフセットは、1〜100℃の範囲内にある、請求項9に記載の装置。
- 前記第1の槽内の槽媒体は、第2の液体に添加された第1の液体であり、前記第2の液体の沸点は前記第1の液体の沸点よりも高い、請求項1に記載の装置。
- 前記第1の液体と前記第2の液体との混合物の沸点は100℃よりも高い、請求項15に記載の装置。
- 前記槽上の槽カバーであって、前記反応器を槽内に配置することを許容するように開口し、前記反応器が槽から除去された後に閉じる、槽カバーをさらに含む、請求項1に記載の装置。
- 前記槽媒体の温度を監視する槽センサと、
熱サイクル中に前記反応器ホルダとともに移動して前記反応器の温度を監視することができる反応器温度センサと
をさらに含む、請求項1に記載の装置。 - 前記反応器温度センサを封入する物質を含む容器をさらに含み、前記容器及び前記物質は、前記反応器及び前記反応物質と同様の構成又は熱伝達特性を有する、請求項18に記載の装置。
- 前記反応器を受け入れて、熱サイクル後に融解曲線分析を行いながら徐々に加熱されることができる、第7の槽をさらに含む、請求項1に記載の装置。
- 熱プロファイルにおいて核酸を熱処理する方法であって、
核酸を含む反応物質をそれぞれが収容する反応器を保持する反応器ホルダと、チューブ又はウェルプレート又はチップ又はカートリッジなどの任意の形態である反応器とを使用するステップと、
第1の槽及び第2の槽を含む装置を使用するステップと、
前記第1の槽内の槽媒体を温度THIGHに、前記第2の槽内の槽媒体を温度TLOWに維持するステップと、
前記装置において移送手段を使用するステップであって、複数の熱サイクルで前記反応器を2つの槽内に配置し、
−所定の高い目標温度THTと、
−所定の低い目標温度TLTと
に交互に到達することを可能する、ステップと、
a)THTがTHIGHよりも低い、
b)TLTがTLOWよりも高い、及び
c)a)及びb)の条件、
からなる群からの少なくとも1つの条件によって規定された温度オフセット特性に適合させるステップと
を含み、
前記移送手段は、
熱サイクル中に反応器温度センサによって感知されたリアルタイム温度に基づいて動作可能な温度誘導作動制御手段(TeGMCM)と、
前記反応器が槽内に配置される時間に基づいて動作可能な時間誘導作動制御手段(TiGMCM)と
からなる群からの少なくとも1つのモードによって動作可能であり、
前記槽の何れかにおける槽媒体は、空気、液体、固体、粉末及びこれらの何れかの混合物を含む任意の相である、方法。 - 前記装置において第3の槽を中間温度TMEDIUMに維持するステップであって、前記移送手段は、前記反応器を前記第3の槽内に配置し、所定の中間目標温度TMTに到達することを可能にし、TMTはTMEDIUMと同じであるか、又はTMEDIUMからオフセットされている、ステップをさらに含む、請求項21に記載の方法。
- 熱サイクル前に反応器に対する追加プロセスを第4の槽において可能にするステップであって、槽媒体は、温度TAPで維持され、前記追加プロセスは、
g)逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT−PCR)、
h)ホットスタートプロセス及び
c)等温増幅反応
からなる群からの1つである、ステップと、
前記移送手段を使用するステップであって、前記反応器を前記第4の槽内に配置し、追加プロセス目標温度TAPTに到達することを可能にし、TAPはTAPTと同じであるか、又はTAPからオフセットされている、ステップと
をさらに含む、請求項21に記載の方法。 - 前記第1の槽内の槽媒体を100℃を超えて維持するステップをさらに含む、請求項21に記載の方法。
- 前記第2の槽内の槽媒体を室温よりも低く維持するステップをさらに含む、請求項21に記載の方法。
- 前記反応器の過熱又は過冷却を不必要に引き起こす動作上の電気機械的遅れを相殺するために、前記反応器がTHTよりも低い第1のリフトオフ温度及びTLTよりも高い第2のリフトオフ温度に到達する場合に前記反応器の槽からのリフトオフを開始するように、前記移送手段を較正するステップをさらに含む、請求項21に記載の方法。
- 熱サイクルの間に前記装置における変更手段によって任意の槽内の温度を変更するステップをさらに含む、請求項21から26の何れか1項に記載の方法。
- THTは、核酸の変性のために85〜99℃の領域にあり、TLTは、核酸上へのプライマー又はプローブのアニーリング又はプライマー伸長のために、45〜75℃の領域にあり、前記第1及び第2の槽は、反応器を熱サイクルしてポリメラーゼ連鎖反応(PCR)の増幅又はプライマー伸長を達成するためのものである、請求項21に記載の方法。
- 熱プロファイルにおける温度安定化ステップのために第5の槽を使用するステップをさらに含む、請求項21に記載の方法。
- 前記温度安定化ステップは目標温度のうちの1つにおけるものである、請求項29に記載の方法。
- 前記反応器が槽の何れかの中又は槽の外側の空気中にある場合に核酸を分析するために、前記装置において蛍光画像化又は電気化学的検出を行うステップをさらに含む、請求項21に記載の方法。
- 槽媒体が液体又は熱空気である、アニーリング及び伸長のための第6の槽を使用するステップと、
前記第6の槽において前記槽媒体を、40〜80℃の範囲内の一定温度で、かつ熱サイクルプロセスを通して維持するステップと、
前記一定温度で前記第6の槽を通して蛍光画像化を行うステップであって、前記槽媒体及び前記第6の槽の少なくとも一部は透明であり、光源からの照射光の透過及び前記反応器からの放出光の透過を可能にする、ステップと
をさらに含む、請求項21に記載の方法。 - THIGHとTHTとの間の第1のオフセットを1〜400℃の範囲内に設定するステップと、
TLOWとTLTとの間の第2のオフセットを1〜100℃の範囲内に設定するステップと
をさらに含む、請求項21に記載の方法。 - 前記第1の槽内の槽媒体において、第2の液体を第1の液体に添加するステップであって、前記第2の液体の沸点は前記第1の液体の沸点よりも高い、ステップをさらに含む、請求項21に記載の方法。
- 前記第1の液体と前記第2の液体との混合物の沸点は100℃よりも高い、請求項34に記載の方法。
- 前記槽上に槽カバーを使用するステップであって、前記カバーは、前記反応器を槽内に配置することを許容するように開口し、前記反応器が前記槽から除去された後に閉じる、ステップをさらに含む、請求項21に記載の方法。
- 熱サイクル中に反応器温度センサを前記反応器ホルダとともに移動するステップであって、前記反応器の温度を監視する、ステップをさらに含む、請求項21に記載の方法。
- 前記反応器温度センサを封入する物質を含む容器を使用するステップであって、前記容器及び前記物質は、前記反応器及び前記反応物質と同様の構成又は熱伝達特性を有する、ステップをさらに含む、請求項37に記載の方法。
- 前記反応器を受け入れるために前記装置において第7の槽を使用するステップと、
前記第7の槽を徐々に加熱しながら熱サイクル後に融解曲線分析を行うステップと
をさらに含む、請求項21に記載の方法。
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