JP2019501631A5

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Publication number: JP2019501631A5
Application number: JP2018521289A
Authority: JP
Filing date: 2016-10-24
Publication date: 2019-12-05
Anticipated expiration: 2036-10-24

Claims

一本鎖融合ポリペプチドを含むGITR受容体アゴニストタンパク質であって、
(i)第1の可溶性GITRLドメイン、
(ii)第1のペプチドリンカー、
(iii)第2の可溶性GITRLドメイン、
(iv)第2のペプチドリンカー、並びに
(v)第3の可溶性GITRLドメイン、並びに
(vi)配列番号16及び19〜24からなる群から選択されるヒンジリンカー、並びに
(vii)抗体Fc断片を含み、
抗体Fc断片(vii)が配列番号13で示されるアミノ酸配列又は配列番号13のアミノ酸1〜217からなり、
抗体Fc断片(vii)がヒンジリンカー(vi)を介して第3のGITRLドメイン(v)のC末端に融合し、
可溶性GITRLドメイン(i)、(iii)及び(v)がストークを含まない、
GITR受容体アゴニストタンパク質。
ストークを含まない第2及び/又は第3の可溶性GITRLドメインが、アミノ酸配列変異を含む、請求項1に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質。
可溶性GITRLドメインのうちの少なくとも1つ、特に可溶性GITRLドメイン(iii)及び(v)のうちの少なくとも1つが、配列番号1のヒトGITRLのアミノ酸E52又はA54又はK55又はE56又はP57で開始するN末端配列を有する可溶性GITRLドメインであり、E52又はA54又はK55又はE56が中性アミノ酸、例えばSer又はGlyで置き換えられていてもよく、
好ましくは、可溶性GITRLドメインのうちの少なくとも1つ、特に可溶性GITRLドメイン(iii)及び(v)のうちの少なくとも1つが、
(a)E52〜P57及び
(b)(Gly/Ser)56〜P57
から選択されるN末端配列を有する可溶性GITRLドメインである、請求項1又は2に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質。
可溶性GITRLドメインが配列番号1のアミノ酸S177で終止し、及び/又は任意選択でE52、A54、K55、L65A、P66A、K68A、P77、N80、V82、E88、L90、Q91、N106、N120、N129、K121、D122、V144、L159、N161、N172、P173、Q174の位置に又は前記位置の2つ以上に変異を含み、
特に、少なくとも可溶性GITRLドメイン(iii)が、配列番号1のA170、P171又はQ174で終止する、C末端が短縮されたGITRLドメインであり、
例えば、可溶性GITRLドメイン(i)、(iii)及び(v)が配列番号1のヒトGITRLのアミノ酸E52〜S177からなる、請求項3に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質。
第1及び第2のペプチドリンカー(ii)及び(iv)が、独立に、グリコシル化されていてもよいアスパラギン残基を任意選択で含む、3〜8個のアミノ酸の長さ、特に3、4、5、6、7又は8個のアミノ酸の長さを有し、好ましくは、グリシン/セリンリンカーであり、
例えば、第1及び第2のペプチドリンカー(ii)及び(iv)が配列番号2のアミノ酸配列からなる、請求項1から4のいずれか一項に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質。
例えば配列番号17のN末端シグナルペプチドドメインを更に含む、並びに/又は、プロテアーゼ切断部位を含んでもよい、並びに/又は、認識/精製ドメイン、例えば配列番号18のStrep-tagを含み及び/若しくはこれに連結されていてもよいC末端要素を更に含む、請求項1から5のいずれか一項に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質。
配列番号15、配列番号25〜35及び配列番号49〜50のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項1から6のいずれか一項に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質。
それぞれが配列番号27、29、30、31、32、33、34、35、49又は50で示されるアミノ酸配列を有する2つのポリペプチドを含み、
特に、2つのポリペプチドが
a)配列番号27、29、30の406位、412位及び415位、又は
b)配列番号31の392位、398位及び401位、又は
c)配列番号32の391位、397位及び400位、又は
d)配列番号33の374位、380位及び383位、又は
e)配列番号34の397位、403位及び406位、又は
f)配列番号35の382位、388位及び391位、又は
g)配列番号49の394位、400位及び403位、又は
h)配列番号50の370位、376位及び379位
に形成された3つの鎖間ジスルフィド結合によって共有結合で連結されている、請求項1から7のいずれか一項に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質。
配列番号27、29、30のN132及びN266、又は配列番号31のN128及びN257、又は配列番号32のN128及びN258、又は配列番号33のN122及びN245、又は配列番号34のN129及びN260、又は配列番号35のN125及びN250、又は配列番号49のN128及びN258、又は配列番号50のN122のリストから選択される1つ又は複数のNグリコシル化アスパラギン残基を含む、請求項8に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質。
ポリペプチドが更に翻訳後修飾されており、特には、翻訳後修飾がN末端グルタミンのピログルタメートへの修飾を含む、請求項1から9のいずれか一項に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質。
好ましくは発現制御配列に作動可能に連結された、請求項1〜10のいずれか一項に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質をコードする核酸分子。
請求項11に記載の核酸分子を含む発現ベクター。
請求項11に記載の核酸分子又は請求項12に記載のベクターで形質転換された又はトランスフェクトされた細胞又は非ヒト生命体であって、細胞が例えば原核細胞又は真核細胞、好ましくは哺乳類細胞、又はより好ましくはヒト細胞若しくはチャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞である、細胞又は非ヒト生命体。
請求項1から10のいずれか一項に記載のGITR受容体アゴニストタンパク質、請求項11に記載の核酸分子、又は請求項12に記載のベクターを活性薬剤として含み、任意選択で、1つ又は複数の薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤及び/又はアジュバントを更に含む、医薬組成物又は診断用組成物。
治療、より詳細にはGITRLの機能不全によって引き起こされる、これに関連する、及び/又はこれに付随する障害、特に腫瘍等の増殖性障害、例えば固形又はリンパ腫瘍、感染症、炎症性疾患、代謝性疾患、自己免疫障害、例えばリウマトイド及び/又は関節炎疾患、退行性疾患、例えば多発性硬化症等の神経退行性疾患、アポトーシス関連疾患又は移植拒絶反応の予防及び/又は処置において用いるための、請求項14に記載の医薬組成物。