JP2019156810A - Virus inactivator, norovirus inactivator, and hygiene material - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、ウイルス不活性化剤、ノロウイルス不活性化剤及び衛生資材に関する。 The present invention relates to a virus inactivating agent, a norovirus inactivating agent, and a sanitary material.
ウイルスには、エンベロープを有するエンベロープウイルス（例えば、インフルエンザウイルス）や、エンベロープを有さないノンエンベロープウイルス（例えば、ノロウイルス）が存在している。
これらのウイルスの中には、ヒトに感染するものもあり、感染予防のために従来からウイルス不活性化剤が用いられていた。
Viruses include envelope viruses having an envelope (for example, influenza virus) and non-enveloped viruses having no envelope (for example, norovirus).
Some of these viruses infect humans, and virus inactivating agents have been used for the prevention of infection.
近年、ノロウイルス（ヒトノロウイルス）による感染性胃腸炎あるいは食中毒の発生が一年を通じて多発しており、特に１１〜３月が発生のピークとなっている。ノロウイルスは、カリシウイルス科、ノロウイルス属に分類されるエンベロープを持たないＲＮＡウイルス（以下、「ノロウイルス等」と記載する）であり、アルコール（エタノール、イソプロパノール等）、熱、酸性（胃酸等）、又は、乾燥等に対して強い抵抗力を有する。潜伏期間は１〜２日であると考えられており、嘔気、嘔吐、下痢の主症状が出るが、腹痛、頭痛、発熱、悪寒、筋痛、咽頭痛、倦怠感等を伴うこともある。 In recent years, infectious gastroenteritis or food poisoning due to norovirus (human norovirus) has occurred frequently throughout the year, especially in the 11 to March period. Norovirus is an RNA virus (hereinafter referred to as “Norovirus etc.”) that does not have an envelope classified into the Caliciviridae and Norovirus genus, and alcohol (ethanol, isopropanol etc.), heat, acid (gastric acid etc.), or Has strong resistance to drying and the like. The incubation period is considered to be 1-2 days, and the main symptoms are nausea, vomiting, and diarrhea, but may also be accompanied by abdominal pain, headache, fever, chills, myalgia, sore throat, malaise, and the like.
ノロウイルス等の感染経路の一つとして経口感染が知られており、ノロウイルス等に汚染された食物や水等を経口摂取することにより感染が成立する。
そのため、飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場においては、食物や水等がノロウイルス等に汚染されないようにすることが求められている。
Oral infection is known as one of the infection routes of norovirus and the like, and infection is established by ingesting food or water contaminated with norovirus or the like.
Therefore, in places where food is cooked and processed, such as restaurants, school facilities, and factories, it is required to prevent food, water, and the like from being contaminated by norovirus.
ノロウイルス等による汚染を防ぐ手段として、食物、食器、調理台、調理器具等のノロウイルスを不活性化する方法がある。
ノロウイルス等を完全に不活性化させる方法としては、加熱処理が知られている。
しかし、飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場において、常に、食器、調理台、調理器具等を加熱処理することは現実的でなく、食物の種類によっては加熱処理により風味が損なわれてしまう場合がある。つまり、加熱処理は、飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場において、ノロウイルス等を不活性化する方法として適していなかった。
As a means for preventing contamination with norovirus or the like, there is a method for inactivating norovirus such as food, tableware, cooking tables, and cooking utensils.
Heat treatment is known as a method for completely inactivating norovirus and the like.
However, it is not practical to always heat-treat dishes, kitchen tables, utensils, etc. in places where food is cooked and processed, such as restaurants, lunch facilities, and factories, and depending on the type of food, the flavor is impaired by the heat treatment. There is a case where it is. That is, heat treatment has not been suitable as a method for inactivating norovirus and the like in food processing places such as restaurants, school lunch facilities, and factories.
また、ノロウイルス等を不活性化させる方法として、塩素系漂白剤（次亜塩素酸ナトリウム等）を用いる方法も知られている。しかし、塩素系漂白剤は、金属に対する腐食作用、皮膚等に対する刺激作用、衣類に対する漂白作用等がある。そのため、その使用が制限されるという欠点があり、特に、人体に対する安全性への配慮から作業者の手指、食器、調理台、調理器具等にこれらの薬剤類を用いることは適当とはいえず、まして食物に直接触れさせることも適当とはいえなかった。
そのため、人体に対し安全であり、ノロウイルス等を不活性化できる方法が望まれていた。
As a method for inactivating norovirus or the like, a method using a chlorine bleach (such as sodium hypochlorite) is also known. However, chlorine bleach has a corrosive action on metals, an irritating action on skin, etc., and a bleaching action on clothes. Therefore, there is a drawback that its use is limited. In particular, it is not appropriate to use these chemicals for workers' fingers, tableware, cooking tables, cooking utensils, etc. in consideration of safety to the human body. Moreover, it was not appropriate to let food come into direct contact.
Therefore, a method that is safe for the human body and can inactivate norovirus and the like has been desired.
ヒトノロウイルスは、培養細胞を用いても増殖させることができない。
そのため、ヒトノロウイルスの不活性化に対する各種消毒剤等の消毒効果の検証には、代替ウイルスとしてネコカリシウイルス（ＦＣＶ）やマウスノロウイルス（ＭＮＶ）が広く用いられている。ＦＣＶ及びＭＮＶは、形態的特徴やゲノムの構造から、ヒトノロウイルスに近縁なウイルスであることが明らかにされている。
Human norovirus cannot be propagated using cultured cells.
Therefore, feline calicivirus (FCV) and murine norovirus (MNV) are widely used as alternative viruses for verifying the disinfection effect of various disinfectants and the like for inactivation of human norovirus. FCV and MNV have been shown to be closely related to human norovirus based on their morphological characteristics and genome structure.
例えば、非特許文献１には、エタノールを主成分とした中性または酸性のウイルス不活性化剤を用いたＦＣＶ及びＭＮＶの不活性化試験が記載されている。 For example, Non-Patent Document 1 describes FCV and MNV inactivation tests using a neutral or acidic virus inactivating agent mainly composed of ethanol.
非特許文献１に記載されたウイルス不活性化剤は、実験室レベルでの試験において、ＦＣＶ及びＭＮＶにある程度効果を示す。
しかし、このようなウイルス不活性化剤を、実際に飲食店、給食施設、工場などで使用する場合、充分なウイルス不活性化効果を示せなかった。
The virus inactivating agent described in Non-Patent Document 1 has some effect on FCV and MNV in laboratory tests.
However, when such a virus inactivating agent is actually used in restaurants, meal facilities, factories, etc., a sufficient virus inactivating effect has not been shown.
このようにウイルス不活性化剤の効果が充分に発揮されない原因は、環境中の汚れ、特にタンパク質汚れであると考えられた。
環境中のタンパク質汚れは、ウイルスの周囲に付着することになる。ウイルスの周囲のタンパク質汚れは、ウイルスの保護膜のように働き、エタノール及びその他の不活性化成分がウイルスと接触することを阻害すると考えられる。
そのため、非特許文献１に記載されたようなウイルス不活性化剤は、その効果を充分に発揮できなくなると考えられる。
Thus, it was thought that the cause that the effect of the virus inactivating agent was not sufficiently exhibited was environmental dirt, particularly protein dirt.
Protein stains in the environment will adhere around the virus. It is thought that the protein soil around the virus acts like a protective film of the virus and inhibits ethanol and other inactivating components from coming into contact with the virus.
Therefore, it is considered that a virus inactivating agent as described in Non-Patent Document 1 cannot sufficiently exert its effect.
本発明は、上記問題点を鑑みてなされた発明であり、本発明の目的は、タンパク質汚れ存在下でも充分なウイルス不活性化作用を示すウイルス不活性化剤を提供することである。 The present invention has been made in view of the above problems, and an object of the present invention is to provide a virus inactivating agent that exhibits a sufficient virus inactivating action even in the presence of protein soil.
すなわち、本発明のウイルス不活性化剤は、水と、エタノールと、陽イオンと、陰イオンと、酸剤とを含む水溶液状のウイルス不活性化剤であって、上記酸剤は、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、リン酸、酒石酸、アジピン酸、コハク酸及びフィチン酸からなる群から選択される少なくとも１種であり、上記陽イオン及び上記陰イオンの種類は、Ｋ＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｆｅ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｃｕ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｋ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｋ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＳＣＮ−の組み合わせ、又は、Ｎａ＋及びＩ−の組み合わせであることを特徴とする。 That is, the virus inactivating agent of the present invention is an aqueous virus inactivating agent containing water, ethanol, a cation, an anion, and an acid agent, wherein the acid agent is citric acid. And at least one selected from the group consisting of malic acid, lactic acid, phosphoric acid, tartaric acid, adipic acid, succinic acid, and phytic acid, and the types of the cation and the anion are K + and SO 4 2- A combination of Fe 2+ and SO 4 2−, a combination of Cu 2+ and SO 4 2−, a combination of K + and Al 3+ and SO 4 2−, a combination of NH 4 + and Al 3+ and SO 4 2− , Na + and NO 3 - in combination, NH 4 + and NO 3 - in combination, Na + and NO 2 - in combination, K + and NO 2 - in combination, NH 4 +及NO 2 - combination of Na + and SCN - a combination of, or, Na + and I - characterized in that it is a combination of.
本発明のウイルス不活性化剤はエタノールを含む。
ウイルスにエタノールを接触させることにより、ウイルスを不活性化することができる。
The virus inactivating agent of the present invention contains ethanol.
The virus can be inactivated by contacting ethanol with the virus.
本発明のウイルス不活性化剤は、陽イオン及び陰イオンを含む。
また、陽イオン及び陰イオンの組み合わせは、Ｋ＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｆｅ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｃｕ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｋ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｋ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＳＣＮ−の組み合わせ、又は、Ｎａ＋及びＩ−の組み合わせである。
The virus inactivating agent of the present invention contains a cation and an anion.
Further, the combination of the cation and the anion includes a combination of K + and SO 4 2−, a combination of Fe 2+ and SO 4 2−, a combination of Cu 2+ and SO 4 2− , K + and Al 3+ and SO 4 2. − Combination, NH 4 + and Al 3+ and SO 4 2− , Na + and NO 3 − combination, NH 4 + and NO 3 − combination, Na + and NO 2 − combination, K + and NO A combination of 2 −, a combination of NH 4 + and NO 2 −, a combination of Na + and SCN − , or a combination of Na + and I − .
これらのイオンの組み合わせには、環境中のタンパク質汚れを塩析又は塩溶させることにより、タンパク質汚れをウイルスの周囲から分離させる作用があると考えられる。
ウイルスの周囲からタンパク質汚れが分離されると、エタノール及びその他の不活性化成分とウイルスとが直接接触する。そのため、ウイルスが不活性化されることになる。また、環境中にタンパク質汚れがない状態でも、陽イオン及び陰イオンがウイルスとエタノールやその他不活性化成分とが接触するのを促進し、ウイルス不活性化作用を増強させる。
It is considered that the combination of these ions has an action of separating the protein soil from the surroundings of the virus by salting out or dissolving the protein soil in the environment.
When protein soil is separated from the virus's surroundings, ethanol and other inactivating components come into direct contact with the virus. As a result, the virus is inactivated. In addition, even when there is no protein contamination in the environment, the cation and the anion promote the contact of the virus with ethanol and other inactivating components to enhance the virus inactivating action.
本発明のウイルス不活性化剤は、酸剤を含む。
また、酸剤は、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、リン酸、酒石酸、アジピン酸、コハク酸及びフィチン酸からなる群から選択される少なくとも１種である。
これら酸剤は、陽イオン、陰イオン及びエタノールを含むウイルス不活性化剤のウイルス不活性化作用を増強させる効果を示す。
The virus inactivating agent of the present invention contains an acid agent.
The acid agent is at least one selected from the group consisting of citric acid, malic acid, lactic acid, phosphoric acid, tartaric acid, adipic acid, succinic acid, and phytic acid.
These acid agents have an effect of enhancing the virus inactivating action of virus inactivating agents including cations, anions and ethanol.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記エタノールの質量濃度は、８．０５〜８５．７０重量％であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が８．０５重量％未満であると、エタノールの濃度が低いので、エタノールが含まれることによるウイルス不活性化作用が発揮されにくくなる。
ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が８５．７０重量％を超えると、ウイルス不活性化剤中のエタノールの濃度が高すぎ、引火しやすくなる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of the ethanol in the virus inactivating agent is desirably 8.05 to 85.70% by weight.
When the mass concentration of ethanol in the virus inactivating agent is less than 8.05% by weight, the concentration of ethanol is low, so that the virus inactivating action due to the inclusion of ethanol is hardly exhibited.
When the mass concentration of ethanol in the virus inactivating agent exceeds 85.70% by weight, the concentration of ethanol in the virus inactivating agent is too high, and it becomes easy to ignite.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記陽イオン及び上記陰イオンの合計質量濃度は、０．００１〜５．００重量％であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤中の陽イオン及び陰イオンの合計質量濃度が、０．００１重量％未満であると、ウイルス不活性化剤中のイオンの濃度が低すぎ、環境中のタンパク質汚れを充分に塩析又は塩溶させにくくなる。
ウイルス不活性化剤中の陽イオン及び陰イオンの合計質量濃度が、５．００重量％を超えると、イオンの濃度が高すぎ、これらのイオンが無機塩として析出しやすくなる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the total mass concentration of the cation and the anion in the virus inactivating agent is preferably 0.001 to 5.00% by weight.
When the total mass concentration of the cation and the anion in the virus inactivating agent is less than 0.001% by weight, the concentration of the ions in the virus inactivating agent is too low to sufficiently remove protein stains in the environment. It becomes difficult to salt out or dissolve.
When the total mass concentration of the cation and the anion in the virus inactivating agent exceeds 5.00% by weight, the concentration of ions is too high, and these ions are likely to precipitate as inorganic salts.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記陽イオンのイオン当量は、０．０５〜１５００ｍＥｑ／Ｌであることが望ましい。
また、本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記陰イオンのイオン当量は、０．０５〜１５００ｍＥｑ／Ｌであることが望ましい。
陽イオン及び陰イオンのイオン当量が上記範囲内であると、環境中のタンパク質汚れを塩析又は塩溶させる効果が充分に発揮される。
In the virus inactivating agent of the present invention, the ion equivalent of the cation in the virus inactivating agent is desirably 0.05 to 1500 mEq / L.
In the virus inactivating agent of the present invention, the ion equivalent of the anion in the virus inactivating agent is preferably 0.05 to 1500 mEq / L.
When the ion equivalent of the cation and the anion is within the above range, the effect of salting out or salting out protein soil in the environment is sufficiently exhibited.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記酸剤の質量濃度は、０．０１〜５．００重量％であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤中の酸剤の質量濃度が、０．０１重量％未満であると、酸剤の濃度が低すぎ、エタノールのウイルス不活性化作用を充分に増強させにくくなる。
ウイルス不活性化剤中の酸剤の質量濃度が、５．００重量％を超えると、酸剤の濃度が高すぎ、ウイルス不活性化剤を噴霧等した際に、べとつきやすくなり、また、酸剤の析出が生じやすくなる。また、ｐＨが低くなりやすく身体に使用した際、又は、身体に付着した際に刺激性が現れる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent is preferably 0.01 to 5.00% by weight.
When the mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent is less than 0.01% by weight, the concentration of the acid agent is too low, and it becomes difficult to sufficiently enhance the virus inactivating action of ethanol.
If the mass concentration of the acid agent in the virus inactivator exceeds 5.00% by weight, the acid agent concentration is too high, and when the virus inactivator is sprayed, it becomes easy to stick, Precipitation of the agent is likely to occur. In addition, when used on the body, the pH tends to be low, or irritation appears when attached to the body.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤のｐＨは、２〜８であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤のｐＨが上記範囲である、すなわち、酸性から中性であると、安全にウイルス不活性化剤を使用することができる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the pH of the virus inactivating agent is preferably 2-8.
If the pH of the virus inactivating agent is in the above range, that is, it is acidic to neutral, the virus inactivating agent can be used safely.
本発明のノロウイルス不活性化剤は、上記本発明のウイルス不活性化剤からなることを特徴とする。
上記本発明のウイルス不活性化剤は、ノロウイルスに対して高いウイルス不活性化効果を示す。
The norovirus inactivating agent of the present invention comprises the above-described virus inactivating agent of the present invention.
The virus inactivating agent of the present invention exhibits a high virus inactivating effect against Norovirus.
本発明の衛生資材は、上記本発明のウイルス不活性化剤、又は、上記本発明のノロウイルス不活性化剤を含むことを特徴とする。
本発明のウイルス不活性化剤又はノロウイルス不活性化剤は、ウイルス不活性化作用を示すので、このようなウイルス不活性化剤を含む本発明の衛生資材を用いることにより、ウイルス感染を防ぐことができる。
The sanitary material of the present invention includes the virus inactivating agent of the present invention or the norovirus inactivating agent of the present invention.
Since the virus inactivating agent or norovirus inactivating agent of the present invention exhibits a virus inactivating action, the use of the sanitary material of the present invention containing such a virus inactivating agent prevents virus infection. Can do.
本発明のウイルス不活性化剤は、タンパク質汚れ存在下でも、タンパク質を塩析又は塩溶させて、エタノールをウイルスに接触させることができるので、充分なウイルス不活性化作用を示す。 The virus inactivating agent of the present invention exhibits a sufficient virus inactivating action because ethanol can be brought into contact with the virus by salting out or salting out the protein even in the presence of protein soil.
以下、本発明のウイルス不活性化剤について具体的な実施形態を示しながら説明する。しかしながら、本発明は、以下の実施形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を変更しない範囲において適宜変更して適用することができる。 Hereinafter, the virus inactivating agent of the present invention will be described with reference to specific embodiments. However, the present invention is not limited to the following embodiments, and can be applied with appropriate modifications without departing from the scope of the present invention.
本発明のウイルス不活性化剤は、水と、エタノールと、陽イオンと、陰イオンと、酸剤とを含む水溶液状のウイルス不活性化剤であって、上記酸剤は、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、リン酸、酒石酸、アジピン酸、コハク酸及びフィチン酸からなる群から選択される少なくとも１種であり、上記陽イオン及び上記陰イオンの種類は、Ｋ＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｆｅ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｃｕ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｋ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｋ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＳＣＮ−の組み合わせ、又は、Ｎａ＋及びＩ−の組み合わせであることを特徴とする。 The virus inactivating agent of the present invention is an aqueous virus inactivating agent containing water, ethanol, a cation, an anion, and an acid agent, and the acid agent includes citric acid, apple It is at least one selected from the group consisting of acid, lactic acid, phosphoric acid, tartaric acid, adipic acid, succinic acid and phytic acid, and the kind of the cation and the anion is a combination of K + and SO 4 2− , Fe 2+ and SO 4 2− , Cu 2+ and SO 4 2− , K + and Al 3+ and SO 4 2− , NH 4 + and Al 3+ and SO 4 2− , Na + and NO 3 - in combination, NH 4 + and NO 3 - in combination, Na + and NO 2 - combination of, K + and NO 2 - combination of, NH 4 + and NO 2 Combination, Na + and SCN of - a combination of, or, Na + and I - characterized in that it is a combination of.
本発明のウイルス不活性化剤は、エタノールを含む。
ウイルスにエタノールを接触させることにより、ウイルスを不活性化することができる。
The virus inactivating agent of the present invention contains ethanol.
The virus can be inactivated by contacting ethanol with the virus.
本発明のウイルス不活性化剤では、ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度は、８．０５〜８５．７０重量％であることが望ましく、２４．６９〜７４．７０重量％であることがより望ましく、３３．３８〜６０．００重量％であることがさらに望ましい。
ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が８．０５重量％未満であると、エタノールの濃度が低いので、エタノールが含まれることによるウイルス不活性化作用が発揮されにくくなる。
ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が８５．７０重量％を超えると、ウイルス不活性化剤中のエタノールの濃度が高すぎ、引火しやすくなる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of ethanol in the virus inactivating agent is preferably from 8.05 to 85.70% by weight, and from 24.69 to 74.70% by weight. Is more desirably 33.38 to 60.00% by weight.
When the mass concentration of ethanol in the virus inactivating agent is less than 8.05% by weight, the concentration of ethanol is low, so that the virus inactivating action due to the inclusion of ethanol is hardly exhibited.
When the mass concentration of ethanol in the virus inactivating agent exceeds 85.70% by weight, the concentration of ethanol in the virus inactivating agent is too high, and it becomes easy to ignite.
本発明のウイルス不活性化剤は、陽イオンと陰イオンとを含む。
また、陽イオン及び陰イオンの組み合わせは、Ｋ＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｆｅ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｃｕ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｋ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｋ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＳＣＮ−の組み合わせ、又は、Ｎａ＋及びＩ−の組み合わせである。
The virus inactivating agent of the present invention contains a cation and an anion.
Further, the combination of the cation and the anion includes a combination of K + and SO 4 2−, a combination of Fe 2+ and SO 4 2−, a combination of Cu 2+ and SO 4 2− , K + and Al 3+ and SO 4 2. − Combination, NH 4 + and Al 3+ and SO 4 2− , Na + and NO 3 − combination, NH 4 + and NO 3 − combination, Na + and NO 2 − combination, K + and NO A combination of 2 −, a combination of NH 4 + and NO 2 −, a combination of Na + and SCN − , or a combination of Na + and I − .
これらのイオンは、環境中のタンパク質汚れを塩析又は塩溶させることにより、タンパク質汚れをウイルスの周囲から分離させる作用があると考えられる。
ウイルスの周囲からタンパク質汚れが分離されると、エタノール及びその他の不活性化成分とウイルスとが直接接触する。そのため、エタノール及びその他の不活性化成分の作用によりウイルスが不活性化されることになる。また、環境中にタンパク質汚れがない状態でも、陽イオン及び陰イオンがウイルスとエタノール及びその他の不活性化成分とが接触するのを促進し、ウイルス不活性化作用を増強させる。
These ions are considered to have an action of separating the protein soil from the surroundings of the virus by salting out or dissolving the protein soil in the environment.
When protein soil is separated from the virus's surroundings, ethanol and other inactivating components come into direct contact with the virus. Therefore, the virus is inactivated by the action of ethanol and other inactivating components. In addition, even in the absence of protein contamination in the environment, the cation and anion promote the contact of the virus with ethanol and other inactivating components, thereby enhancing the virus inactivating action.
本発明のウイルス不活性化剤に上記陽イオン及び上記陰イオンを含ませる方法としては、ウイルス不活性化剤に無機塩を加える方法が挙げられる。
無機塩としては、硫酸カリウム、硫酸第一鉄、硫酸銅、硫酸アルミニウムカリウム、硫酸アルミニウムアンモニウム、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、亜硝酸ナトリウム、亜硝酸カリウム、亜硝酸アンモニウム、チオシアン酸ナトリウム、ヨウ化ナトリウムが挙げられる。
なお、本発明のウイルス不活性化剤は、これら無機塩を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
Examples of the method of adding the cation and the anion to the virus inactivating agent of the present invention include a method of adding an inorganic salt to the virus inactivating agent.
Examples of inorganic salts include potassium sulfate, ferrous sulfate, copper sulfate, potassium aluminum sulfate, aluminum ammonium sulfate, sodium nitrate, ammonium nitrate, sodium nitrite, potassium nitrite, ammonium nitrite, sodium thiocyanate, and sodium iodide.
In addition, the virus inactivating agent of the present invention may contain only one kind of these inorganic salts or may contain a plurality of kinds.
本発明のウイルス不活性化剤では、ウイルス不活性化剤中の陽イオン及び陰イオンの合計質量濃度は、０．００１〜５．００重量％であることが望ましく、０．０１〜３．００重量％であることがより望ましい。
ウイルス不活性化剤中の陽イオン及び陰イオンの合計質量濃度が、０．００１重量％未満であると、ウイルス不活性化剤中のイオンの濃度が低すぎ、タンパク質汚れを充分に塩析又は塩溶させにくくなる。
ウイルス不活性化剤中の陽イオン及び陰イオンの合計質量濃度が、５．００重量％を超えると、イオンの濃度が高すぎ、これらのイオンが無機塩として析出しやすくなる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the total mass concentration of the cation and the anion in the virus inactivating agent is preferably 0.001 to 5.00% by weight, and 0.01 to 3.00. It is more desirable that the amount be% by weight.
When the total mass concentration of the cation and the anion in the virus inactivating agent is less than 0.001% by weight, the concentration of the ions in the virus inactivating agent is too low, and the protein soil is sufficiently salted out or It becomes difficult to dissolve in salt.
When the total mass concentration of the cation and the anion in the virus inactivating agent exceeds 5.00% by weight, the concentration of ions is too high, and these ions are likely to precipitate as inorganic salts.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記陽イオンのイオン当量は、０．０５〜１５００ｍＥｑ／Ｌであることが望ましく、０．１〜１２００ｍＥｑ／Ｌであることがより望ましく、０．５〜２４０ｍＥｑ／Ｌであることがさらに望ましい。
また、本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記陰イオンのイオン当量は、０．０５〜１５００ｍＥｑ／Ｌであることが望ましく、０．１〜１２００ｍＥｑ／Ｌであることがより望ましく、０．５〜２４０ｍＥｑ／Ｌであることがさらに望ましい。
陽イオン及び陰イオンのイオン当量が上記範囲内であると、環境中のタンパク質汚れを塩析又は塩溶させる効果が充分に発揮される。
In the virus inactivating agent of the present invention, the ion equivalent of the cation in the virus inactivating agent is preferably 0.05 to 1500 mEq / L, and preferably 0.1 to 1200 mEq / L. More desirably, it is more desirably 0.5 to 240 mEq / L.
In the virus inactivating agent of the present invention, the ion equivalent of the anion in the virus inactivating agent is preferably 0.05 to 1500 mEq / L, and preferably 0.1 to 1200 mEq / L. It is more desirable that it is 0.5 to 240 mEq / L.
When the ion equivalent of the cation and the anion is within the above range, the effect of salting out or salting out protein soil in the environment is sufficiently exhibited.
本発明のウイルス不活性化剤は、酸剤を含む。
また、酸剤は、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、リン酸、酒石酸、アジピン酸、コハク酸及びフィチン酸からなる群から選択される少なくとも１種である。
これら酸剤は、陽イオン、陰イオン及びエタノールを含むウイルス不活性化剤のウイルス不活性化作用を増強させる効果を示す。
なお、本発明のウイルス不活性化剤は、これら酸剤を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
The virus inactivating agent of the present invention contains an acid agent.
The acid agent is at least one selected from the group consisting of citric acid, malic acid, lactic acid, phosphoric acid, tartaric acid, adipic acid, succinic acid, and phytic acid.
These acid agents have an effect of enhancing the virus inactivating action of virus inactivating agents including cations, anions and ethanol.
In addition, the virus inactivating agent of the present invention may contain only one kind of these acid agents or may contain a plurality of kinds.
本発明のウイルス不活性化剤では、ウイルス不活性化剤中の酸剤の質量濃度は、０．０１〜５．００重量％であることが望ましく、０．１０〜３．００重量％であることがより望ましい。
ウイルス不活性化剤中の酸剤の質量濃度が、０．０１重量％未満であると、酸剤の濃度が低すぎ、エタノールのウイルス不活性化作用を充分に増強させにくくなる。
ウイルス不活性化剤中の酸剤の質量濃度が、５．００重量％を超えると、酸剤の濃度が高すぎ、ウイルス不活性化剤を噴霧等した際に、べとつきやすくなり、また、酸剤の析出が生じやすくなる。また、ｐＨが低くなりやすく身体に使用した際、又は、身体に付着した際に刺激性が現れる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent is preferably 0.01 to 5.00% by weight, and preferably 0.10 to 3.00% by weight. It is more desirable.
When the mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent is less than 0.01% by weight, the concentration of the acid agent is too low, and it becomes difficult to sufficiently enhance the virus inactivating action of ethanol.
If the mass concentration of the acid agent in the virus inactivator exceeds 5.00% by weight, the acid agent concentration is too high, and when the virus inactivator is sprayed, it becomes easy to stick, Precipitation of the agent is likely to occur. In addition, when used on the body, the pH tends to be low, or irritation appears when attached to the body.
本発明のウイルス不活性化剤では、陽イオン及び陰イオンの合計と、酸剤との重量比が陽イオン及び陰イオンの合計：酸剤＝１：１〜１：５０００であることが望ましく、１：３〜１：５００であることがより望ましい。 In the virus inactivating agent of the present invention, the weight ratio of the sum of cations and anions to the acid agent is preferably the sum of cations and anions: acid agent = 1: 1 to 1: 5000, It is more desirable that it is 1: 3 to 1: 500.
本発明のウイルス不活性化剤では、ｐＨが、２〜８であることが望ましく、２〜６であることがより望ましい。
ウイルス不活性化剤のｐＨが上記範囲である、すなわち、酸性から中性であると、安全にウイルス不活性化剤を使用することができる。特に、ウイルス不活性化剤が酸性であると、ウイルス不活性化効果が向上する。
なお、ｐＨの調整は、本発明のウイルス不活性化剤に含まれる酸剤、陽イオン及び陰イオンの質量濃度を調整することにより行うことができる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the pH is desirably 2 to 8, and more desirably 2 to 6.
If the pH of the virus inactivating agent is in the above range, that is, it is acidic to neutral, the virus inactivating agent can be used safely. In particular, when the virus inactivating agent is acidic, the virus inactivating effect is improved.
The pH can be adjusted by adjusting the mass concentration of the acid agent, cation and anion contained in the virus inactivating agent of the present invention.
本発明のウイルス不活性化剤は、インフルエンザウイルス等のエンベロープウイルスや、ノロウイルス等のノンエンベロープウイルスに対してウイルス不活性化効果を示す。
特に、本発明のウイルス不活性化剤は、ノロウイルスに対して高いウイルス不活性化効果を示す。
そのため、本発明のウイルス不活性化剤は、ノロウイルス不活性剤として使用することが望ましい。
なお、本明細書において、「ノロウイルス不活性化剤」とは、ネコカリシウイルス、マウスノロウイルス及びヒトノロウイルスからなる群から選択される少なくとも１種のウイルスに対して使用されるウイルス不活性化剤を意味する。
The virus inactivating agent of the present invention exhibits a virus inactivating effect against envelope viruses such as influenza viruses and non-enveloped viruses such as noroviruses.
In particular, the virus inactivating agent of the present invention exhibits a high virus inactivating effect on Norovirus.
Therefore, it is desirable to use the virus inactivating agent of the present invention as a norovirus inactivating agent.
In the present specification, the “norovirus inactivating agent” refers to a virus inactivating agent used for at least one virus selected from the group consisting of feline calicivirus, mouse norovirus and human norovirus. means.
本発明のウイルス不活性化剤は、ネコカリシウイルスを試験ウイルスとした下記タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定において、作用時間１分におけるウイルス感染力価（対数）の値が、作用時間０分におけるウイルス感染力価（対数）の値より２．０以上小さいことが望ましく、４．０以上小さいことがより望ましい。
本発明のウイルス不活性化剤が、このようなウイルス不活性化作用を奏すると、カリシウイルス科ウイルスの感染を防止することができる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the virus infectivity titer (logarithm) at the action time of 1 minute is determined as the action time in the feline calicivirus infectivity titer measurement in the presence of the following protein stain using the feline calicivirus as the test virus. It is preferably 2.0 or more smaller than the virus infection titer (logarithm) value at 0 minute, and more preferably 4.0 or smaller.
When the virus inactivating agent of the present invention exerts such a virus inactivating action, infection with the caliciviridae virus can be prevented.
（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）
（１）ネコカリシウイルスを、ネコ腎由来株化細胞であるＣＲＦＫ細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ−９４）に感染させて細胞を培養する。
（２）次に、ネコカリシウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認する。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕する。
（３）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とする。
（４）ウイルス不活性化剤と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、ウイルス不活性化剤のウイルスに対する作用を停止させる。
この工程により得られた溶液をウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液とする。
（５）ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液をウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液とする。
（６）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地により１０倍段階希釈する。ＣＲＦＫ細胞を培養した９６ｗｅｌｌマイクロプレートの培地を捨て、段階希釈液を１００μＬずつ加える。
（７）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液及びウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＣＲＦＫ細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養する。
（８）培養したＣＲＦＫ細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量する。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とする。
(Measurement of feline calicivirus infection titer in the presence of protein stains)
(1) CRFK cells (ATCC CCL-94), a feline kidney-derived cell line, are infected with feline calicivirus, and the cells are cultured.
(2) Next, whether or not feline calicivirus is infected is confirmed by a cytopathic effect (CPE).
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells are disrupted by repeating freeze-thawing of the cultured cells.
(3) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) was dissolved in OPTI-MEM medium to prepare a 10% meat extract solution, and the supernatant of the cultured cell lysate after centrifugation, 10% meat extract, Are mixed at a ratio (volume) of 1: 1 to obtain a virus solution.
(4) The virus inactivating agent and the virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, the virus inactivating agent is diluted 100-fold with OPTI-MEM medium. Stop the action on viruses.
The solution obtained by this step is used as a virus inactivating agent 1-minute action virus solution.
(5) Immediately after the OPTI-MEM medium and the virus solution were mixed at a ratio (volume) of 9: 1, the resulting solution was diluted 100 times with the OPTI-MEM medium, and the resulting solution was 0 minutes in the virus inactivating agent. Use a working virus solution.
(6) The virus inactivating agent 0-minute action virus solution and the virus inactivating agent 1-minute action virus solution are each diluted 10-fold in an OPTI-MEM medium. Discard the medium of the 96-well microplate in which CRFK cells were cultured, and add 100 μL of serial dilutions.
(7) CRFK cells to which a serially diluted virus solution of virus inactivator 0-minute action virus solution and virus inactivator 1-minute action virus solution are added are cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 4 days. .
(8) The virus infection titer (logarithm) of each virus solution is quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using CPE of the cultured CRFK cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are independently carried out three times, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the virus inactivating agent 0-minute action virus solution is determined at an action time of 0 minutes. The virus infectivity titer, and the average value of the virus infectivity calculated using the virus inactivating agent 1-minute action virus solution is taken as the value of the virus infectivity titer at the action time of 1 minute.
本発明のウイルス不活性化剤は、マウスノロウイルスを試験ウイルスとした下記タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定において、作用時間１分におけるウイルス感染力価（対数）の値が、作用時間０分におけるウイルス感染力価（対数）の値より２．０以上小さいことが望ましく、４．０以上小さいことがより望ましい。
本発明のウイルス不活性化剤が、このようなウイルス不活性化作用を奏すると、カリシウイルス科ウイルスの感染を防止することができる。
The virus inactivating agent of the present invention has a virus infectivity titer (logarithm) value of 1 minute in action time 0 minutes in the measurement of mouse norovirus infection titer in the presence of the following protein stain using mouse norovirus as a test virus. It is preferably 2.0 or more smaller than the value of the virus infection titer (logarithm), and more preferably 4.0 or more.
When the virus inactivating agent of the present invention exerts such a virus inactivating action, infection with the caliciviridae virus can be prevented.
（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）
（１）マウスノロウイルスを、マウスのマクロファージ由来細胞株であるＲＡＷ ２６４．７細胞（ＡＴＣＣ ＴＩＢ−７１）に感染させて細胞を培養する。
（２）次に、マウスノロウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認する。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕する。
（３）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＤＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とする。
（４）ウイルス不活性化剤と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、ウイルス不活性化剤のウイルスに対する作用を停止させる。
この工程により得られた溶液をウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液とする。
（５）１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液をウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液とする。
（６）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液及びウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地により、１０倍段階希釈する。１ウェルにＲＡＷ ２６４．７細胞を５０μＬずつ分注した９６ｗｅｌｌマイクロプレートに、各段階希釈液を５０μＬずつ加える。
（７）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液及びウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＲＡＷ ２６４．７細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養する。
（８）培養したＲＡＷ ２６４．７細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量する。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とする。
(Measurement of mouse norovirus infection titer in the presence of protein stains)
(1) A mouse norovirus is infected with RAW 264.7 cells (ATCC TIB-71), which is a mouse macrophage-derived cell line, and the cells are cultured.
(2) Next, it is confirmed by cytopathic effect (CPE) whether mouse norovirus was infected.
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells are disrupted by repeating freeze-thawing of the cultured cells.
(3) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) is dissolved in DMEM medium to prepare a 10% meat extract solution, and the supernatant of the cultured cell lysate after centrifugation and 10% meat extract are 1 Mix at a ratio (volume) of 1 to make a virus solution.
(4) A virus inactivating agent and a virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, diluted with DMEM medium containing 10% fetal bovine serum 100 times. Stop the action of the inactivating agent on the virus.
The solution obtained by this step is used as a virus inactivating agent 1-minute action virus solution.
(5) Immediately after mixing the DMEM medium containing 10% fetal bovine serum and the virus solution at a ratio (volume) of 9: 1, the solution obtained by diluting 100 times with the DMEM medium containing 10% fetal bovine serum Is a virus inactivator 0 minute action virus solution.
(6) The virus inactivating agent 0-minute action virus solution and the virus inactivating agent 1-minute action virus solution are each diluted 10-fold in 10% fetal bovine serum-containing DMEM medium. 50 μL of each serial dilution is added to a 96-well microplate containing 50 μL of RAW 264.7 cells per well.
(7) RAW 264.7 cells to which a serially diluted virus solution of virus inactivator 0-minute action virus solution and virus inactivator 1-minute action virus solution were added under conditions of 37 ° C. and 5% CO 2 Incubate for days.
(8) The virus infection titer (logarithm) of each virus solution is quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using CPE of cultured RAW 264.7 cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are independently carried out three times, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the virus inactivating agent 0-minute action virus solution is determined at an action time of 0 minutes. The virus infectivity titer, and the average value of the virus infectivity calculated using the virus inactivating agent 1-minute action virus solution is taken as the value of the virus infectivity titer at the action time of 1 minute.
本発明のウイルス不活性化剤は、インフルエンザウイルスを試験ウイルスとした下記タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定において、作用時間１分におけるウイルス感染力価（対数）の値が、作用時間０分におけるウイルス感染力価（対数）の値より２．０以上小さいことが望ましく、４．０以上小さいことがより望ましい。
本発明のウイルス不活性化剤が、このようなウイルス不活性化作用を奏すると、インフルエンザウイルスの感染を防止することができる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the virus infectivity titer (logarithm) at an action time of 1 minute is 0 minutes at the action time in the measurement of the influenza virus infectivity titer in the presence of the following protein stain using the influenza virus as a test virus. It is preferably 2.0 or more smaller than the value of the virus infection titer (logarithm), and more preferably 4.0 or more.
When the virus inactivating agent of the present invention exerts such a virus inactivating action, infection with influenza virus can be prevented.
（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）
（１）インフルエンザウイルスを、イヌ腎臓尿細管上皮細胞由来株化細胞であるＭＤＣＫ細胞に感染させて細胞を培養する。
（２）次に、インフルエンザウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認する。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕する。
（３）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＥＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とする。
（４）ウイルス不活性化剤と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、２μｇ／ｍＬトリプシン（牛脾臓由来結晶）を含むＥＭＥＭ培地（以下、トリプシン含有ＥＭＥＭ培地）で１００倍希釈することにより、ウイルス不活性化剤のウイルスに対する作用を停止させる。
この工程により得られた溶液をウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液とする。
（５）トリプシン含有ＥＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、トリプシン含有ＥＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液をウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液とする。
（６）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、トリプシン含有ＥＭＥＭ培地により１０倍段階希釈する。ＭＤＣＫ細胞を培養した９６ｗｅｌｌマイクロプレートの培地を捨て、段階希釈液を１００μＬずつ加える。
（７）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液及びウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＭＤＣＫ細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養する。
（８）培養したＭＤＣＫ細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量する。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とする。
(Measurement of influenza virus infection titer in the presence of protein stains)
(1) Infect influenza virus with MDCK cells, which are canine kidney tubular epithelial cell-derived cell lines, and culture the cells.
(2) Next, whether or not influenza virus is infected is confirmed by a cytopathic effect (CPE).
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells are disrupted by repeating freeze-thawing of the cultured cells.
(3) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) is dissolved in an EMEM medium to prepare a 10% meat extract solution, and the supernatant of the cultured cell lysate after centrifugation and 10% meat extract are 1 Mix at a ratio (volume) of 1 to make a virus solution.
(4) A virus inactivating agent and a virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, an EMEM medium containing 2 μg / mL trypsin (crystals derived from bovine spleen) (hereinafter, By diluting 100 times with trypsin-containing EMEM medium), the action of the virus inactivating agent on the virus is stopped.
The solution obtained by this step is used as a virus inactivating agent 1-minute action virus solution.
(5) Immediately after mixing the trypsin-containing EMEM medium and the virus solution at a ratio (volume) of 9: 1, the solution obtained by diluting 100 times with the trypsin-containing EMEM medium was used for 0 minutes of the virus inactivating agent. Use a working virus solution.
(6) The virus inactivating agent 0-minute action virus solution and the virus inactivating agent 1-minute action virus solution are each diluted 10-fold in trypsin-containing EMEM medium. Discard the medium of the 96-well microplate in which the MDCK cells were cultured, and add 100 μL of serial dilution.
(7) MDCK cells to which a serially diluted virus solution of virus inactivator 0-minute action virus solution and virus inactivator 1-minute action virus solution are added are cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 4 days. .
(8) The virus infection titer (logarithm) of each virus solution is quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using CPE of cultured MDCK cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are independently carried out three times, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the virus inactivating agent 0-minute action virus solution is determined at an action time of 0 minutes. The virus infectivity titer, and the average value of the virus infectivity calculated using the virus inactivating agent 1-minute action virus solution is taken as the value of the virus infectivity titer at the action time of 1 minute.
本発明のウイルス不活性化剤は、上記陽イオン及び陰イオンの組み合わせに加え、さらに別の陽イオン及び／又は陰イオンを含んでいてもよい。
このような別の陽イオンとしては、Ｌｉ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋等があげられる。
また、別の陰イオンとしては、ＣＯ３ ２−、Ｈ２ＰＯ４ −、Ｆ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−等があげられる。
The virus inactivating agent of the present invention may further contain another cation and / or anion in addition to the combination of the above cation and anion.
Examples of such another cation include Li + , Ca 2+ and Mg 2+ .
Other anions include CO 3 2− , H 2 PO 4 − , F − , Cl − , Br − and the like.
本発明のウイルス不活性化剤は、さらに凝集剤を含んでいてもよい。
凝集剤としては、ポリグルタミン酸及びその塩等が挙げられる。
凝集剤は、環境中のタンパク質汚れを凝集させることができ、タンパク質汚れをウイルスの周囲から分離させることができる。
ウイルスの周囲からタンパク質汚れが分離されると、エタノールとウイルスとが直接接触する。そのため、エタノールの作用によりウイルスが不活性化されることになる。
The virus inactivating agent of the present invention may further contain an aggregating agent.
Examples of the flocculant include polyglutamic acid and a salt thereof.
The flocculant can agglomerate protein soils in the environment and separate the protein soils from the surroundings of the virus.
When protein soil is separated from the virus's surroundings, ethanol and virus come into direct contact. Therefore, the virus is inactivated by the action of ethanol.
本発明のウイルス不活性化剤は、さらにグリセリン脂肪酸エステル等を含んでいてもよい。
グリセリン脂肪酸エステルとしては、モノグリセリン脂肪酸エステルであってもよく、ポリグリセリン脂肪酸エステルであってもよい。例えば、モノグリセリンカプリル酸エステル、モノグリセリンカプリン酸エステル、モノグリセリンラウリン酸エステル、ジグリセリンカプリル酸エステル、ヘキサグリセリンラウリン酸エステル、デカグリセリンラウリン酸エステル等が挙げられる。
The virus inactivating agent of the present invention may further contain glycerin fatty acid ester and the like.
The glycerin fatty acid ester may be a monoglycerin fatty acid ester or a polyglycerin fatty acid ester. For example, monoglycerin caprylic acid ester, monoglycerin capric acid ester, monoglycerin lauric acid ester, diglycerin caprylic acid ester, hexaglycerin lauric acid ester, decaglycerin lauric acid ester and the like can be mentioned.
本発明のウイルス不活性化剤は、さらにウイルス不活性化作用を有する化合物を含んでいてもよい。
このような化合物としては、例えば、緑茶抽出物、紫茶抽出物、マキベリー抽出物、ブドウ抽出物、カンカニクジュヨウ抽出物、月見草種子抽出物、ウーロン茶抽出物、ピーナツ種皮抽出物、ビルベリー抽出物、ヒバマタ科の海藻から抽出された海藻抽出物等の天然物抽出物が挙げられる。
The virus inactivating agent of the present invention may further contain a compound having a virus inactivating action.
Such compounds include, for example, green tea extract, purple tea extract, maquiberry extract, grape extract, kankanikuyuyo extract, evening primrose seed extract, oolong tea extract, peanut seed coat extract, bilberry extract And natural product extracts such as seaweed extract extracted from the seaweed of Hibarataceae.
また、本発明のウイルス不活性化剤には、上記の成分以外に保湿剤、エモリエント剤、香料、色素、陽イオン界面活性剤、増粘剤、消炎剤等を含んでいてもよい。 In addition to the above components, the virus inactivating agent of the present invention may contain a moisturizer, emollient, fragrance, dye, cationic surfactant, thickener, anti-inflammatory agent, and the like.
次に、本発明のウイルス不活性化剤、及び、本発明のノロウイルス不活性化剤の用途を説明する。
本発明のウイルス不活性化剤、又は、本発明のノロウイルス不活性化剤は、手洗い液、中性洗剤、消臭剤に加えてもよい。
本発明のウイルス不活性化剤、又は、本発明のノロウイルス不活性化剤を含む手洗い液、中性洗剤、消臭剤等は、ポンプボトルやスプレーボトルに詰められていてもよい。
Next, the use of the virus inactivating agent of the present invention and the norovirus inactivating agent of the present invention will be described.
The virus inactivating agent of the present invention or the norovirus inactivating agent of the present invention may be added to a hand washing solution, a neutral detergent, and a deodorant.
The virus inactivating agent of the present invention or the hand washing solution, neutral detergent, deodorant and the like containing the norovirus inactivating agent of the present invention may be packed in a pump bottle or a spray bottle.
また衛生資材に用いてもよい。このような衛生資材は、本発明の衛生資材でもある。 Moreover, you may use for a sanitary material. Such a sanitary material is also the sanitary material of the present invention.
本発明の衛生資材は、上記本発明のウイルス不活性化剤、又は、上記本発明のノロウイルス不活性化剤を含むことを特徴とする。
本発明のウイルス不活性化剤は、ウイルス不活性化作用を奏するので、このようなウイルス不活性化剤を含む衛生資材を用いることにより、ウイルス感染を防ぐことができる。
The sanitary material of the present invention includes the virus inactivating agent of the present invention or the norovirus inactivating agent of the present invention.
Since the virus inactivating agent of the present invention exerts a virus inactivating action, viral infection can be prevented by using a sanitary material containing such a virus inactivating agent.
本発明の衛生資材は、特に限定されるものではないが、例えば、マスク、使い捨て手袋、使い捨て布巾、ティッシュペーパー、ウエットティッシュ等があげられる。 The sanitary material of the present invention is not particularly limited, and examples thereof include a mask, disposable gloves, disposable cloths, tissue paper, and wet tissue.
以下に本発明をより具体的に説明する実施例を示すが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。 Examples for more specifically explaining the present invention are shown below, but the present invention is not limited to these examples.
（実施例１）
エタノールが５７．２２重量％、クエン酸が１．００重量％、硫酸鉄が０．５０重量％となるようにこれら化合物と、水とを混合して実施例１に係るウイルス不活性化剤を作製した。
Example 1
The virus inactivating agent according to Example 1 was prepared by mixing these compounds with water such that ethanol was 57.22% by weight, citric acid was 1.00% by weight, and iron sulfate was 0.50% by weight. Produced.
（実施例２〜１４）及び（比較例１〜５）
ウイルス不活性化剤の材料の種類及び割合を表１に示すように変更した以外は、実施例１と同様に実施例２〜１４及び比較例１〜５に係るウイルス不活性化剤を作製した。
なお、表１中「％」は重量％を意味する。
(Examples 2 to 14) and (Comparative Examples 1 to 5)
Except having changed the kind and ratio of the material of a virus inactivation agent as shown in Table 1, the virus inactivation agent which concerns on Examples 2-14 and Comparative Examples 1-5 was produced similarly to Example 1. .
In Table 1, “%” means% by weight.
（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、各実施例及び各比較例に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）の方法に基づき、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は以下の通りである。結果を表１に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of feline calicivirus infection titer in the presence of protein stains)
As a virus inactivator, the virus inactivator according to each example and each comparative example was used, and the virus infection at an action time of 0 minutes was performed based on the above method (measurement of feline calicivirus infectious titer when protein soil was present) The difference between the titer value and the value of the virus infection titer at 1 minute of action time was calculated and evaluated. The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Table 1.
A: Decrease in infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer less than 2.0 (no effect)
（タンパク質汚れなし時ネコカリシウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、各実施例及び各比較例に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）の（３）工程において、１０％肉エキスを混合せず、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清をウイルス溶液とした以外は、上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）と同様にタンパク質汚れなし時ネコカリシウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１に示す。
(Measurement of feline calicivirus infection titer without protein stain)
As a virus inactivating agent, using the virus inactivating agent according to each example and each comparative example, in the step (3) of the above (determining feline calicivirus infectious titer when protein soil is present), 10% meat extract Feline calicivirus infectious titer without protein stain as above (measurement of feline calicivirus infectious titer when protein soil is present) except that the supernatant of the cultured cell disrupted solution after centrifugation is not mixed and used as a virus solution. Measurements were made.
The difference between the value of the virus infection titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the evaluation criteria described above (measurement of feline calicivirus infectious titer when protein soil is present). The results are shown in Table 1.
（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、各実施例及び各比較例に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）の方法に基づき、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は以下の通りである。結果を表１に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of mouse norovirus infection titer in the presence of protein stains)
Using the virus inactivating agent according to each example and each comparative example as a virus inactivating agent, based on the above method (measurement of mouse norovirus infectious titer in the presence of protein soil), the virus infectivity at 0 minutes of action time The difference between the value of the titer and the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Table 1.
A: Decrease in infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer less than 2.0 (no effect)
（タンパク質汚れなし時マウスノロウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、各実施例及び各比較例に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）の（３）工程において、１０％肉エキスを混合せず、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清をウイルス溶液とした以外は、上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）と同様にタンパク質汚れなし時マウスノロウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１に示す。
(Measurement of mouse norovirus infectious titer without protein stain)
As the virus inactivating agent, the virus inactivating agent according to each Example and each Comparative Example was used, and 10% meat extract was mixed in the step (3) of the above (Measurement of mouse norovirus infectivity titer in the presence of protein soil). Without any protein contamination, perform mouse norovirus infection titration in the same way as above (Measurement of mouse norovirus infectious titer in the presence of protein stain), except that the supernatant of the cultured cell disrupted solution after centrifugation was changed to a virus solution. It was.
The difference between the value of the virus infection titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the evaluation criteria described above (measurement of mouse norovirus infectious titer when protein soil is present). The results are shown in Table 1.
（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、各実施例及び各比較例に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）の方法に基づき、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は以下の通りである。結果を表１に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of influenza virus infection titer in the presence of protein stains)
Using the virus inactivating agent according to each example and each comparative example as a virus inactivating agent, based on the above method (measurement of influenza virus infection titer in the presence of protein soil), the virus infectivity at 0 minutes of action time The difference between the titer value and the value of the virus infectivity titer at 1 minute of action time was calculated and evaluated. The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Table 1.
A: Decrease in infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer less than 2.0 (no effect)
（タンパク質汚れなし時インフルエンザウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、各実施例及び各比較例に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）の（３）工程において、１０％肉エキスを混合せず、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清をウイルス溶液とした以外は、上記（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）と同様にタンパク質汚れなし時インフルエンザウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１に示す。
(Influenza virus infection titer measurement without protein contamination)
As the virus inactivating agent, the virus inactivating agent according to each Example and each Comparative Example was used, and 10% meat extract was mixed in the step (3) of the above (Measurement of influenza virus infection titer when protein soil was present). Without any protein contamination, the influenza virus infectivity titration was measured in the same manner as above (measurement of influenza virus infectivity titer when protein soil was present), except that the supernatant of the cultured cell disrupted solution after centrifugation was changed to a virus solution. It was.
The difference between the value of the virus infection titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the evaluation criteria described above (measurement of influenza virus infection titer when protein soil is present). The results are shown in Table 1.
表１に示すように、エタノール、所定の陽イオン及び陰イオン、並びに、酸剤を含む実施例１〜１４に係るウイルス不活性化剤は、タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定の評価、タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定の評価、及び、タンパク質汚れ存在時のインフルエンザウイルス感染力価測定の評価がいずれも優れていた。 As shown in Table 1, the virus inactivating agents according to Examples 1 to 14 containing ethanol, predetermined cations and anions, and acid agents were evaluated for feline calicivirus infectious titer measurement in the presence of protein stains. The evaluation of the mouse norovirus infection titer in the presence of protein soil and the evaluation of the influenza virus infection titer in the presence of protein soil were both excellent.
Claims (9)
前記酸剤は、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、リン酸、酒石酸、アジピン酸、コハク酸及びフィチン酸からなる群から選択される少なくとも１種であり、
前記陽イオン及び前記陰イオンの種類は、Ｋ＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｆｅ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｃｕ２＋及びＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｋ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＡｌ３＋並びにＳＯ４ ２−の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ３ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｋ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、ＮＨ４ ＋及びＮＯ２ −の組み合わせ、Ｎａ＋及びＳＣＮ−の組み合わせ、又は、Ｎａ＋及びＩ−の組み合わせであることを特徴とするウイルス不活性化剤。 An aqueous virus inactivating agent containing water, ethanol, a cation, an anion, and an acid agent,
The acid agent is at least one selected from the group consisting of citric acid, malic acid, lactic acid, phosphoric acid, tartaric acid, adipic acid, succinic acid and phytic acid,
The types of the cation and the anion include a combination of K + and SO 4 2−, a combination of Fe 2+ and SO 4 2−, a combination of Cu 2+ and SO 4 2− , K + and Al 3+ and SO 4 2. − Combination, NH 4 + and Al 3+ and SO 4 2− , Na + and NO 3 − combination, NH 4 + and NO 3 − combination, Na + and NO 2 − combination, K + and NO A virus inactivating agent, which is a combination of 2 −, a combination of NH 4 + and NO 2 −, a combination of Na + and SCN − , or a combination of Na + and I − .
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