JP2021155368A - Bacteriocidal/virus-inactivating composition - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、殺菌・ウイルス不活性化組成物に関する。 The present invention relates to a bactericidal / virus-inactivating composition.
黄色ブドウ球菌や、サルモネラ菌等の細菌は、食中毒を引き起こす原因菌として知られている。これらの細菌による食中毒を防ぐために、低級アルコールや四級アンモニウム化合物等の殺菌組成物を用いてこれらの細菌を殺菌することは従来より行われている。 Bacteria such as Staphylococcus aureus and Salmonella are known as causative bacteria that cause food poisoning. In order to prevent food poisoning caused by these bacteria, it has been conventionally practiced to kill these bacteria using a bactericidal composition such as a lower alcohol or a quaternary ammonium compound.
また、近年、ノロウイルス等のウイルスによる感染性胃腸炎あるいは食中毒の発生が一年を通じて多発しており、特に１１〜３月が発生のピークとなっている。特にノロウイルスは、カリシウイルス科、ノロウイルス属に分類されるエンベロープを持たないＲＮＡウイルス（以下、「ノロウイルス等」と記載する）であり、アルコール（エタノール、イソプロパノール等）、熱、酸性（胃酸等）、又は、乾燥等に対して強い抵抗力を有する。潜伏期間は１〜２日であると考えられており、嘔気、嘔吐、下痢の主症状が出るが、腹痛、頭痛、発熱、悪寒、筋痛、咽頭痛、倦怠感等を伴うこともある。 In recent years, infectious gastroenteritis or food poisoning caused by viruses such as norovirus has frequently occurred throughout the year, and the peak of the outbreak is from 11 to March. In particular, norovirus is an RNA virus having no envelope (hereinafter referred to as "norovirus, etc.") classified into Caliciviridae and Norovirus genus, and is alcohol (ethanol, isopropanol, etc.), heat, acidic (stomach acid, etc.), Alternatively, it has a strong resistance to drying and the like. The incubation period is thought to be 1 to 2 days, and the main symptoms of nausea, vomiting, and diarrhea appear, but may be accompanied by abdominal pain, headache, fever, chills, muscle pain, sore throat, and malaise.
細菌やウイルスによる食中毒を防ぐための組成物として、特許文献１には、以下の殺菌消毒剤が開示されている。
すなわち、特許文献１には、下記の（Ａ）〜（Ｃ）成分を、組成物全体に対し下記割合で含有するとともに、水を含有し、且つｐＨ（ＪＩＳ Ｚ−８８０２：２０１１「ｐＨ測定方法」）が２５℃で９．５以上であることを特徴とする殺菌消毒剤組成物が開示されている。
（Ａ）低級アルコール３５〜７５質量％、
（Ｂ）無機アルカリ性物質０．０５〜１０質量％、
（Ｃ）モノグリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステルから選ばれる少なくとも一種以上の非イオン界面活性剤０．０５〜５質量％。
Patent Document 1 discloses the following disinfectant as a composition for preventing food poisoning caused by bacteria and viruses.
That is, Patent Document 1 contains the following components (A) to (C) in the following ratio with respect to the entire composition, and also contains water and pH (JIS Z-8802: 2011 "pH measurement method". A bactericidal disinfectant composition characterized by having a pH of 9.5 or higher at 25 ° C. is disclosed.
(A) Lower alcohol 35-75% by mass,
(B) Inorganic alkaline substance 0.05 to 10% by mass,
(C) At least one nonionic surfactant selected from monoglycerin fatty acid ester, polyglycerin fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, and sucrose fatty acid ester 0.05 to 5% by mass.
特許文献１に記載の殺菌消毒剤組成物は、実験室では殺菌効果及び抗ウイルス効果（「ウイルス不活性化効果」とも記載する）を示す。
しかし、特許文献１に記載のような殺菌消毒剤組成物を、実際の調理場や食堂で使用する場合、環境中の水により殺菌消毒剤組成物が希釈され、充分な殺菌効果及び抗ウイルス効果が得られないという問題が生じることがある。また、環境中の汚れ（特に、タンパク質汚れ）により、殺菌効果及び抗ウイルス効果が低下するという問題が生じることがある。
The bactericidal disinfectant composition described in Patent Document 1 exhibits a bactericidal effect and an antiviral effect (also referred to as "virus inactivating effect") in the laboratory.
However, when the bactericidal disinfectant composition as described in Patent Document 1 is used in an actual kitchen or cafeteria, the bactericidal disinfectant composition is diluted with water in the environment, and a sufficient bactericidal effect and antiviral effect are obtained. May arise the problem of not being able to obtain. In addition, stains in the environment (particularly protein stains) may cause a problem that the bactericidal effect and the antiviral effect are lowered.
本発明は、上記問題点を解決するためになされた発明であり、本発明の目的は、環境中の水や汚れがあったとしても、充分な殺菌効果及び抗ウイルス効果を示す殺菌・ウイルス不活性化組成物を提供することである。 The present invention has been made to solve the above problems, and an object of the present invention is to have a bactericidal / virus-free effect that exhibits sufficient bactericidal and antiviral effects even if there is water or dirt in the environment. To provide an activating composition.
すなわち、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、１０．００ｗｔ％以上の低級アルコールと、カチオン界面活性剤と、アルカリ剤を含むことを特徴とする。 That is, the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention is characterized by containing 10.00 wt% or more of a lower alcohol, a cationic surfactant, and an alkaline agent.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、１０．００ｗｔ％以上の低級アルコール及びカチオン界面活性剤を含む。これらの化合物は、殺菌効果及び抗ウイルス効果を示す。
また、カチオン界面活性剤は少量でも殺菌効果を示すので、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物が環境中の水により希釈されたとしても殺菌効果が低下しにくい。
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention contains 10.00 wt% or more of a lower alcohol and a cationic surfactant. These compounds exhibit bactericidal and antiviral effects.
Further, since the cationic surfactant exhibits a bactericidal effect even in a small amount, the bactericidal effect is unlikely to decrease even if the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention is diluted with water in the environment.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、アルカリ剤を含む。
アルカリ剤は、低級アルコールと組み合わされることにより低級アルコールの抗ウイルス効果を向上させることができる。
また、アルカリ剤は、カチオン界面活性剤と組み合わされることによりカチオン界面活性剤の殺菌効果を向上させることができる。特に、カチオン界面活性剤はアルカリ性液下において成分の分解が少ないので、長期間安定してカチオン界面活性剤の殺菌効果を維持させることができる。
このようにアルカリ剤が存在すると、低級アルコール及びカチオン界面活性剤の効果を向上させることができるので、環境中の水や汚れがあったとしても、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は充分な殺菌効果及び抗ウイルス効果を示す。
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention contains an alkaline agent.
Alkaline agents can improve the antiviral effect of lower alcohols when combined with lower alcohols.
In addition, the alkaline agent can improve the bactericidal effect of the cationic surfactant by being combined with the cationic surfactant. In particular, since the cationic surfactant has less decomposition of its components under an alkaline solution, the bactericidal effect of the cationic surfactant can be stably maintained for a long period of time.
The presence of the alkaline agent in this way can improve the effects of the lower alcohol and the cationic surfactant, so that the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention can be used even if there is water or dirt in the environment. Shows sufficient bactericidal and antiviral effects.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、上記低級アルコールは、エタノール、イソプロピルアルコール及びプロパノールからなる群から選択される少なくとも１種であることが好ましい。
これらの低級アルコールは、優れた殺菌効果及び抗ウイルス効果を示す。
In the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention, the lower alcohol is preferably at least one selected from the group consisting of ethanol, isopropyl alcohol and propanol.
These lower alcohols exhibit excellent bactericidal and antiviral effects.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、上記カチオン界面活性剤は、四級アンモニウム化合物であることが好ましく、上記カチオン界面活性剤は、ジデシルジメチルアンモニウムクロライド、ジデシルジメチルアンモニウムメトサルフェート、ジオクチルジメチルアンモニウムクロライド、アルキルベンジルジメチルアンモニウムクロライド、セチルピリジニウムクロライド、ベンゼトニウムクロライドからなる群から選択される少なくとも１種を含むことが好ましい
これらのカチオン界面活性剤は、優れた殺菌効果を示す。
In the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention, the cationic surfactant is preferably a quaternary ammonium compound, and the cationic surfactant is didecyldimethylammonium chloride, didecyldimethylammonium metosulfate, etc. These cationic surfactants, which preferably contain at least one selected from the group consisting of dioctyldimethylammonium chloride, alkylbenzyldimethylammonium chloride, cetylpyridinium chloride, and benzethonium chloride, exhibit excellent bactericidal effects.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、上記アルカリ剤は、炭酸塩、リン酸塩、水酸化物、ケイ酸塩及び脂肪族アミンからなる群から選択される少なくとも１種を含むことが好ましい。また、上記アルカリ剤は、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、セスキ炭酸ナトリウム、炭酸アンモニウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素アンモニウム、過炭酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三ナトリウム、リン酸三カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、オルソケイ酸ナトリウム、オルソケイ酸カリウム、メタケイ酸ナトリウム、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、イソプロパノールアミンからなる群から選択される少なくとも１種を含むことがより好ましい。
これらのアルカリ剤は、低級アルコールの抗ウイルス効果を向上させることに適している。
In the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention, the alkaline agent may contain at least one selected from the group consisting of carbonates, phosphates, hydroxides, silicates and aliphatic amines. preferable. The alkaline agents include sodium carbonate, potassium carbonate, sodium sesquicarbonate, ammonium carbonate, sodium hydrogencarbonate, potassium hydrogencarbonate, ammonium hydrogencarbonate, sodium percarbonate, sodium dihydrogen phosphate, potassium dihydrogen phosphate, and phosphoric acid. Disodium hydrogen hydrogen, dipotassium hydrogen phosphate, trisodium phosphate, tripotassium phosphate, sodium hydroxide, potassium hydroxide, sodium orthosilicate, potassium orthosilicate, sodium metasilicate, monoethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, More preferably, it contains at least one selected from the group consisting of isopropanolamine.
These alkaline agents are suitable for improving the antiviral effect of lower alcohols.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、上記アルカリ剤は、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、セスキ炭酸ナトリウム、炭酸アンモニウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素アンモニウム及び過炭酸ナトリウムからなる群から選択される少なくとも１種の炭酸塩であり、上記炭酸塩の濃度は、０．０５〜１０．００ｗｔ％であることが好ましい。
これらの炭酸塩は、ウイルスにタンパク質が付着していたとしても、タンパク質汚れを塩析させることにより、タンパク質汚れをウイルスの周囲から分離させる作用があると考えられる。その結果、低級アルコールとウイルスとが直接接触することになり、ウイルスが不活性化されやすくなる。さらに、タンパク質汚れがない状態でも、炭酸塩がウイルスと低級アルコールやカチオン界面活性剤とが接触するのを促進し、抗ウイルス効果を増強させると考えられる。
上記炭酸塩の濃度が０．０５ｗｔ％未満であると、ウイルスの周囲からタンパク質汚れを分離させる効果が充分に発揮されなくなる。
上記炭酸塩の濃度が１０．００ｗｔ％を超えると、炭酸塩が析出しやすくなる。また、殺菌・ウイルス不活性化組成物を使用した箇所がべとついたり、跡残りしやすくなる。
In the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention, the alkaline agent comprises the group consisting of sodium carbonate, potassium carbonate, sodium sesquicarbonate, ammonium carbonate, sodium hydrogencarbonate, potassium hydrogencarbonate, ammonium hydrogencarbonate and sodium percarbonate. It is at least one carbonate selected, and the concentration of the carbonate is preferably 0.05 to 10.00 wt%.
It is considered that these carbonates have an effect of separating the protein stain from the surroundings of the virus by salting out the protein stain even if the protein is attached to the virus. As a result, the lower alcohol comes into direct contact with the virus, which facilitates the inactivation of the virus. Furthermore, it is considered that carbonate promotes contact between the virus and lower alcohols and cationic surfactants even in the absence of protein stains, thereby enhancing the antiviral effect.
If the concentration of the carbonate is less than 0.05 wt%, the effect of separating protein stains from the surroundings of the virus will not be sufficiently exhibited.
When the concentration of the carbonate exceeds 10.00 wt%, the carbonate is likely to be precipitated. In addition, the part where the bactericidal / virus-inactivating composition is used becomes sticky or easily leaves a mark.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、アルカリ剤を含む。
アルカリ剤は、低級アルコールと組み合わされることにより低級アルコールの抗ウイルス効果を向上させることができる。
また、アルカリ剤は、カチオン界面活性剤と組み合わされることによりカチオン界面活性剤の殺菌効果を向上させることができる。特に、カチオン界面活性剤はアルカリ性液下において成分の分解が少ないので、長期間安定してカチオン界面活性剤の殺菌効果を維持させることができる。
このようにアルカリ剤が存在すると、低級アルコール及びカチオン界面活性剤の効果を向上させることができるので、環境中の水や汚れがあったとしても、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は充分な殺菌効果及び抗ウイルス効果を示す。
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention contains an alkaline agent.
Alkaline agents can improve the antiviral effect of lower alcohols when combined with lower alcohols.
In addition, the alkaline agent can improve the bactericidal effect of the cationic surfactant by being combined with the cationic surfactant. In particular, since the cationic surfactant has less decomposition of its components under an alkaline solution, the bactericidal effect of the cationic surfactant can be stably maintained for a long period of time.
The presence of the alkaline agent in this way can improve the effects of the lower alcohol and the cationic surfactant, so that the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention can be used even if there is water or dirt in the environment. Shows sufficient bactericidal and antiviral effects.
以下、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物について具体的な実施形態を示しながら説明する。しかしながら、本発明は、以下の実施形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を変更しない範囲において適宜変更して適用することができる。 Hereinafter, the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention will be described while showing specific embodiments. However, the present invention is not limited to the following embodiments, and can be appropriately modified and applied without changing the gist of the present invention.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、１０．００ｗｔ％以上の低級アルコールと、カチオン界面活性剤と、アルカリ剤とを含むことを特徴とする。
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物の各構成について以下に説明する。
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention is characterized by containing 10.00 wt% or more of a lower alcohol, a cationic surfactant, and an alkaline agent.
Each composition of the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention will be described below.
（低級アルコール）
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、低級アルコールを含む。
低級アルコールを細菌に接触させたり、ウイルスに接触させることにより、殺菌及びウイルス不活性化を行うことができる。
(Lower alcohol)
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention contains a lower alcohol.
Sterilization and virus inactivation can be performed by contacting the lower alcohol with bacteria or with a virus.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、低級アルコールの濃度は１０．００ｗｔ％以上である。また、低級アルコールの濃度は、１５．００〜８５．７０ｗｔ％であることが好ましく、１８．５０〜７０．００ｗｔ％であることがより好ましい。
低級アルコールの濃度が１０．００ｗｔ％以上であると、優れた殺菌効果及び抗ウイルス効果を奏する。
なお、低級アルコールの濃度が８５．７０ｗｔ％を超える場合、低級アルコールの濃度が高すぎ引火しやすくなるので注意が必要になる。
In the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention, the concentration of lower alcohol is 10.00 wt% or more. The concentration of the lower alcohol is preferably 15.00 to 85.70 wt%, more preferably 18.50 to 70.00 wt%.
When the concentration of the lower alcohol is 10.00 wt% or more, an excellent bactericidal effect and antiviral effect are exhibited.
If the concentration of the lower alcohol exceeds 85.70 wt%, the concentration of the lower alcohol is too high and it becomes easy to catch fire, so caution is required.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、低級アルコールは特に限定されないが、エタノール、イソプロピルアルコール及びプロパノールからなる群から選択される少なくとも１種であることが好ましい。これらの中ではエタノールであることがより好ましい。
これらの低級アルコールは、優れた殺菌効果及び抗ウイルス効果を示す。
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、これらの低級アルコールは単独で含まれていてもよく、複数が含まれていてもよい。
In the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention, the lower alcohol is not particularly limited, but at least one selected from the group consisting of ethanol, isopropyl alcohol and propanol is preferable. Of these, ethanol is more preferable.
These lower alcohols exhibit excellent bactericidal and antiviral effects.
In the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention, these lower alcohols may be contained alone or in plurality.
（カチオン界面活性剤）
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、カチオン界面活性剤を含む。
カチオン界面活性剤を細菌に接触させたり、ウイルスに接触させることにより、殺菌及びウイルス不活性化を行うことができる。
特に、カチオン界面活性剤は少量でも殺菌効果を示すので、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物が環境中の水により希釈されたとしても殺菌効果が低下しにくい。
(Cationic surfactant)
The bactericidal / virus inactivating composition of the present invention contains a cationic surfactant.
Sterilization and virus inactivation can be performed by contacting the cationic surfactant with bacteria or with viruses.
In particular, since the cationic surfactant exhibits a bactericidal effect even in a small amount, the bactericidal effect is unlikely to decrease even if the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention is diluted with water in the environment.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、カチオン界面活性剤の濃度は、０．０５〜１０．００ｗｔ％であることが好ましく、０．１０〜５．００ｗｔ％であることがより好ましく、０．２０〜５．００ｗｔ％であることがさらに好ましい。
カチオン界面活性剤の濃度が０．０５ｗｔ％未満であると、カチオン界面活性剤による殺菌効果及び抗ウイルス効果が得られにくくなる。
カチオン界面活性剤の濃度が１０．００ｗｔ％を超えると、カチオン界面活性剤による殺菌効果及び抗ウイルス効果が得られにくくなる。
In the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention, the concentration of the cationic surfactant is preferably 0.05 to 10.00 wt%, more preferably 0.10 to 5.00 wt%. It is more preferably 0.20 to 5.00 wt%.
If the concentration of the cationic surfactant is less than 0.05 wt%, it becomes difficult to obtain the bactericidal effect and the antiviral effect of the cationic surfactant.
If the concentration of the cationic surfactant exceeds 10.00 wt%, it becomes difficult to obtain the bactericidal effect and the antiviral effect of the cationic surfactant.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、カチオン界面活性剤は、四級アンモニウム化合物であることが好ましく、ジデシルジメチルアンモニウムクロライド、ジデシルジメチルアンモニウムメトサルフェート、ジオクチルジメチルアンモニウムクロライド、アルキルベンジルジメチルアンモニウムクロライド、セチルピリジニウムクロライド、ベンゼトニウムクロライドからなる群から選択される少なくとも１種を含むことがより好ましい。
これらのカチオン界面活性剤の中では、ジデシルジメチルアンモニウムメトサルフェート、アルキルベンジルジメチルアンモニウムクロライド、セチルピリジニウムクロライドがさらに好ましい。
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、これらのカチオン界面活性剤は単独で含まれていてもよく、複数が含まれていてもよい。
In the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention, the cationic surfactant is preferably a quaternary ammonium compound, didecyldimethylammonium chloride, didecyldimethylammonium metosulfate, dioctyldimethylammonium chloride, alkylbenzyldimethyl. It is more preferable to contain at least one selected from the group consisting of ammonium chloride, cetylpyridinium chloride, and benzethonium chloride.
Among these cationic surfactants, didecyldimethylammonium metosulfate, alkylbenzyldimethylammonium chloride, and cetylpyridinium chloride are more preferable.
In the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention, these cationic surfactants may be contained alone or in plurality.
（アルカリ剤）
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、アルカリ剤を含む。
アルカリ剤は、低級アルコールと組み合わされることにより低級アルコールの抗ウイルス効果を向上させることができる。
また、アルカリ剤は、カチオン界面活性剤と組み合わされることによりカチオン界面活性剤の殺菌効果を向上させることができる。特に、カチオン界面活性剤はアルカリ性液下において成分の分解が少ないので、長期間安定してカチオン界面活性剤の殺菌効果を維持させることができる。
このようにアルカリ剤が存在すると、低級アルコール及びカチオン界面活性剤の効果を向上させることができるので、環境中の水や汚れがあったとしても、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は充分な殺菌効果及び抗ウイルス効果を示す。
(Alkaline agent)
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention contains an alkaline agent.
Alkaline agents can improve the antiviral effect of lower alcohols when combined with lower alcohols.
In addition, the alkaline agent can improve the bactericidal effect of the cationic surfactant by being combined with the cationic surfactant. In particular, since the cationic surfactant has less decomposition of its components under an alkaline solution, the bactericidal effect of the cationic surfactant can be stably maintained for a long period of time.
The presence of the alkaline agent in this way can improve the effects of the lower alcohol and the cationic surfactant, so that the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention can be used even if there is water or dirt in the environment. Shows sufficient bactericidal and antiviral effects.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、アルカリ剤は、炭酸塩、リン酸塩、水酸化物、ケイ酸塩及び脂肪族アミンからなる群から選択される少なくとも１種を含むことが好ましく、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、セスキ炭酸ナトリウム、炭酸アンモニウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素アンモニウム、過炭酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三ナトリウム、リン酸三カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、オルソケイ酸ナトリウム、オルソケイ酸カリウム、メタケイ酸ナトリウム、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、イソプロパノールアミンからなる群から選択される少なくとも１種を含むことがより好ましい。
これらのアルカリ剤は、低級アルコールの抗ウイルス効果を向上させることに適している。
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、これらのアルカリ剤は単独で含まれていてもよく、複数が含まれていてもよい。
In the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention, the alkaline agent preferably contains at least one selected from the group consisting of carbonates, phosphates, hydroxides, silicates and aliphatic amines. , Sodium carbonate, potassium carbonate, sesqui sodium carbonate, ammonium carbonate, sodium hydrogen carbonate, potassium hydrogen carbonate, ammonium hydrogen carbonate, sodium percarbonate, sodium dihydrogen phosphate, potassium dihydrogen phosphate, disodium hydrogen phosphate, phosphoric acid From the group consisting of dipotassium hydrogen hydrogen, trisodium phosphate, tripotassium phosphate, sodium hydroxide, potassium hydroxide, sodium orthosilicate, potassium orthosilicate, sodium metasilicate, monoethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, isopropanolamine It is more preferable to include at least one selected.
These alkaline agents are suitable for improving the antiviral effect of lower alcohols.
In the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention, these alkaline agents may be contained alone or in plurality.
これらのアルカリ剤の中では、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、セスキ炭酸ナトリウム、炭酸アンモニウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素アンモニウム及び過炭酸ナトリウムからなる群から選択される少なくとも１種の炭酸塩が好ましい。
これらの炭酸塩は、ウイルスにタンパク質が付着していたとしても、タンパク質汚れを塩析させることにより、タンパク質汚れをウイルスの周囲から分離させる作用があると考えられる。その結果、低級アルコールとウイルスとが直接接触することになり、ウイルスが不活性化されやすくなる。さらに、タンパク質汚れがない状態でも、炭酸塩がウイルスと低級アルコールやカチオン界面活性剤と接触するのを促進し、抗ウイルス効果を増強させると考えられる。
Among these alkaline agents, at least one carbonate selected from the group consisting of sodium carbonate, potassium carbonate, sodium sesquicarbonate, ammonium carbonate, sodium hydrogencarbonate, potassium hydrogencarbonate, ammonium hydrogencarbonate and sodium percarbonate is used. preferable.
It is considered that these carbonates have an effect of separating the protein stain from the surroundings of the virus by salting out the protein stain even if the protein is attached to the virus. As a result, the lower alcohol comes into direct contact with the virus, which facilitates the inactivation of the virus. Furthermore, it is thought that the carbonate promotes contact between the virus and the lower alcohol or the cationic surfactant even in the absence of protein stains, thereby enhancing the antiviral effect.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、アルカリ剤の濃度は、０．０５〜１０．００ｗｔ％であることが好ましく、０．１０〜５．００ｗｔ％であることがより好ましい。
アルカリ剤の濃度が０．０５ｗｔ％未満である場合、アルカリ剤の濃度が少ないので、低級アルコール及びカチオン界面活性剤の効果を向上させる効果が得られにくくなる。
アルカリ剤の濃度が１０．００ｗｔ％を超える場合、ｐＨが強アルカリ性になりやすく、また、保管中にアルカリ剤が析出しやすくなり、扱いにくくなる。
In the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention, the concentration of the alkaline agent is preferably 0.05 to 10.00 wt%, more preferably 0.10 to 5.00 wt%.
When the concentration of the alkaline agent is less than 0.05 wt%, the concentration of the alkaline agent is small, so that it is difficult to obtain the effect of improving the effects of the lower alcohol and the cationic surfactant.
When the concentration of the alkaline agent exceeds 10.00 wt%, the pH tends to be strongly alkaline, and the alkaline agent tends to precipitate during storage, which makes it difficult to handle.
特に、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物においてアルカリ剤が、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、セスキ炭酸ナトリウム、炭酸アンモニウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素アンモニウム及び過炭酸ナトリウムからなる群から選択される少なくとも１種の炭酸塩である場合、炭酸塩の濃度は、０．０５〜１０．００ｗｔ％であることが好ましく、０．１０〜５．００ｗｔ％であることがより好ましい。
炭酸塩の濃度が０．０５ｗｔ％未満であると、ウイルスの周囲からタンパク質汚れを分離させる効果が充分に発揮されなくなる。
炭酸塩の濃度が１０．０ｗｔ％を超えると、炭酸塩が析出しやすくなる。また、殺菌・ウイルス不活性化組成物を使用した箇所がべとついたり、跡残りしやすくなる。
In particular, in the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention, the alkaline agent consists of a group consisting of sodium carbonate, potassium carbonate, sodium sesquicarbonate, ammonium carbonate, sodium hydrogencarbonate, potassium hydrogencarbonate, ammonium hydrogencarbonate and sodium percarbonate. In the case of at least one carbonate selected, the concentration of the carbonate is preferably 0.05 to 10.00 wt%, more preferably 0.10 to 5.00 wt%.
If the concentration of carbonate is less than 0.05 wt%, the effect of separating protein stains from the surroundings of the virus will not be sufficiently exhibited.
When the concentration of carbonate exceeds 10.0 wt%, carbonate is likely to be precipitated. In addition, the part where the bactericidal / virus-inactivating composition is used becomes sticky or easily leaves a mark.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物のｐＨは、特に限定されないが、例えば、６〜１２であってもよい。
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、中性〜アルカリ性の範囲において、優れた殺菌効果及び抗ウイルス効果を示す。
なお、ｐＨの調整は、アルカリ剤及び後述するｐＨ調整剤の量を制御することにより調整することができる。
The pH of the sterilizing / virus-inactivating composition of the present invention is not particularly limited, but may be, for example, 6 to 12.
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention exhibits excellent bactericidal and antiviral effects in the neutral to alkaline range.
The pH can be adjusted by controlling the amounts of the alkaline agent and the pH adjuster described later.
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、さらに、キレート剤、酸剤、アミノ酸、無機塩等の成分を含んでいてもよい。 The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention may further contain components such as a chelating agent, an acid agent, an amino acid, and an inorganic salt.
キレート剤としては、ニトリロ三酢酸三ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸四ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム、メチルグリシン二酢酸ナトリウム、エチレンジアミンテトラメチレンホスホン酸ナトリウム、ホスホノブタントリカルボン酸ナトリウム等からなる群から選択される少なくとも１種であることが好ましい。
なお、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、これらキレート剤を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
The chelating agent is selected from the group consisting of trisodium nitrilotriacetic acid, tetrasodium ethylenediaminetetraacetate, disodium ethylenediaminetetraacetate, sodium methylglycine diacetate, sodium ethylenediaminetetramethylenephosphonate, sodium phosphonobutane tricarboxylate and the like. At least one is preferable.
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention may contain only one type of these chelating agents, or may contain a plurality of types.
酸剤としては、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、リン酸、酒石酸、フィチン酸、アジピン酸、グルコン酸、コハク酸及びこれらの塩からなる群から選択される少なくとも１種であることが好ましい。
酸剤を用いることにより、ウイルス不活性化組成物のｐＨを調整することができる。
なお、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、これら酸剤を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
The acid agent is preferably at least one selected from the group consisting of citric acid, malic acid, lactic acid, phosphoric acid, tartaric acid, phytic acid, adipic acid, gluconic acid, succinic acid and salts thereof.
The pH of the virus-inactivating composition can be adjusted by using an acid agent.
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention may contain only one type of these acid agents, or may contain a plurality of types.
アミノ酸としては、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、トレオニン（スレオニン）、システイン、メチオニン、プロリン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、ヒスチジン及びリシンからなる群から選択される少なくとも１種であることが好ましい。
これらのアミノ酸は、中性アミノ酸及び塩基性アミノ酸である。これらのアミノ酸を用いると、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物を中性〜弱アルカリ性に調整しやすくなる。なお、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物では、これらアミノ酸を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
The amino acids are at least selected from the group consisting of glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, serine, phenylalanine, tyrosine, tryptophan, threonine (threonine), cysteine, methionine, proline, glutamine, asparagine, arginine, histidine and lysine. It is preferably one kind.
These amino acids are neutral amino acids and basic amino acids. The use of these amino acids facilitates the adjustment of the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention to neutral to weakly alkaline. The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention may contain only one type of these amino acids, or may contain a plurality of types of these amino acids.
無機塩としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、塩化アンモニウム、臭化ナトリウム、臭化カリウム、臭化カルシウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸アンモニウム、硝酸カリウム、チオシアン酸カリウム、チオシアン酸アンモニウム等が挙げられる。
本発明の滅菌・ウイルス不活性化組成物がこれらの無機塩を含むと、ウイルスの周囲のタンパク質汚れを塩溶又は塩析させることができ、エタノールをウイルスに接触させやすくなる。その結果、ウイルス不活性化効果を向上させることができる。
なお、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、これらの無機塩を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
Inorganic salts include sodium chloride, potassium chloride, magnesium chloride, calcium chloride, ammonium chloride, sodium bromide, potassium bromide, calcium bromide, sodium sulfate, potassium sulfate, magnesium sulfate, ammonium sulfate, potassium nitrate, potassium thiocyanate, and thiocyanate. Examples thereof include ammonium acid.
When the sterilization / virus inactivating composition of the present invention contains these inorganic salts, protein stains around the virus can be salt-dissolved or salted out, and ethanol can be easily brought into contact with the virus. As a result, the virus inactivating effect can be improved.
The bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention may contain only one type of these inorganic salts, or may contain a plurality of types.
また、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物には、上記の成分以外に保湿剤、エモリエント剤、香料、色素、増粘剤、消炎剤等が含まれていてもよい。 In addition to the above components, the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention may contain a moisturizer, an emollient, a fragrance, a pigment, a thickener, an anti-inflammatory agent, and the like.
次に、本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物の用途を説明する。
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、手洗い液、中性洗剤、消臭剤に加えてもよい。
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物を含む手洗い液、中性洗剤、消臭剤等は、ポンプボトルやスプレーボトルに詰められていてもよい。
Next, the use of the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention will be described.
The bactericidal / virus inactivating composition of the present invention may be added to a hand-washing liquid, a neutral detergent, or a deodorant.
The hand-washing liquid, neutral detergent, deodorant and the like containing the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention may be packed in a pump bottle or a spray bottle.
また本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物を、衛生資材に用いてもよい。
本発明の殺菌・ウイルス不活性化組成物は、殺菌効果及び抗ウイルス効果を奏するので、このような殺菌・ウイルス不活性化組成物を含む衛生資材を用いることにより、感染症を防ぐことができる。
Further, the bactericidal / virus-inactivating composition of the present invention may be used as a sanitary material.
Since the bactericidal / virus inactivating composition of the present invention exerts a bactericidal effect and an antiviral effect, infectious diseases can be prevented by using a sanitary material containing such a bactericidal / virus inactivating composition. ..
衛生資材としては、特に限定されるものではないが、例えば、マスク、使い捨て手袋、使い捨て布巾、ティッシュペーパー、ウエットティッシュ等があげられる。 The sanitary material is not particularly limited, and examples thereof include masks, disposable gloves, disposable cloths, tissue paper, and wet tissues.
（実施例１〜２９）及び（比較例１〜８）
表１〜３に記載の配合により実施例１〜２９及び比較例１〜８に係る殺菌・ウイルス不活性化組成物を作製した。
(Examples 1 to 29) and (Comparative Examples 1 to 8)
The bactericidal / virus-inactivating compositions according to Examples 1 to 29 and Comparative Examples 1 to 8 were prepared according to the formulations shown in Tables 1 to 3.
（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）
（１）ネコカリシウイルスを、ネコ腎由来株化細胞であるＣＲＦＫ細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ−９４）に感染させて細胞を培養した。
（２）次に、ネコカリシウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認した。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕した。
（３）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とした。
（４）各実施例及び各比較例に係る殺菌・ウイルス不活性化組成物と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、各殺菌・ウイルス不活性化組成物のウイルスに対する作用を停止させた。
この工程により得られた溶液を殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液とする。
（５）ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液を殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液とした。
（６）殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液、殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地により１０倍段階希釈した。ＣＲＦＫ細胞を培養した９６ｗｅｌｌマイクロプレートの培地を捨て、段階希釈液を１００μＬずつ加えた。
（７）殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液及び殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＣＲＦＫ細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養した。
（８）培養したＣＲＦＫ細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量した。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とした。
評価基準は以下の通りである。結果を表１〜３に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of feline calicivirus infection titer in the presence of protein stains)
(1) Feline calicivirus was infected with CRFK cells (ATCC CCL-94), which are feline kidney-derived cell lines, and the cells were cultured.
(2) Next, it was confirmed by the cytopathic effect (CPE) whether or not the feline calicivirus was infected.
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells were disrupted by repeating freezing and thawing of the cultured cells.
(3) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) was dissolved in OPTI-MEM medium to prepare a 10% meat extract solution, and the supernatant of the cultured cell crushed solution after centrifugation and the 10% meat extract were used. Was mixed at a ratio (volume) of 1: 1 to prepare a virus solution.
(4) The sterilizing / virus inactivating composition according to each Example and each Comparative Example and a virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, in OPTI-MEM medium. By diluting 100 times, the action of each bactericidal / virus inactivating composition on the virus was stopped.
The solution obtained by this step is used as a 1-minute action virus solution of the sterilizing / virus-inactivating composition.
(5) Immediately after mixing the OPTI-MEM medium and the virus solution at a ratio (volume) of 9: 1, the obtained solution was diluted 100-fold with the OPTI-MEM medium to sterilize and inactivate the virus. The product was prepared as a 0-minute action virus solution.
(6) The sterilizing / virus inactivating composition 0-minute action virus solution and the sterilization / virus inactivating composition 1-minute action virus solution were each diluted 10-fold with OPTI-MEM medium. The medium of the 96-well microplate in which the CRFK cells were cultured was discarded, and 100 μL of the serial diluent was added.
(7) Sterilizing / virus inactivating composition 0-minute action CRFK cells to which a serially diluted solution of a bactericidal / virus-inactivating composition 1-minute action virus solution was added was added under the conditions of 37 ° C. and 5% CO2. It was cultured for 4 days.
(8) The virus infectious titer (logarithmic value) of each virus solution was quantified by TCID50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using the CPE of cultured CRFK cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are performed three times independently, and the average value of the virus infectious titer calculated using the bactericidal / virus inactivating composition 0-minute action virus solution is used as the action time. The virus infectivity titer was taken at 0 minutes, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the bactericidal / virus inactivating composition 1-minute action virus solution was taken as the value of the virus infectivity titer at the action time of 1 minute. ..
The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Tables 1-3.
A: Reduction of infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer below 2.0 (no effect)
（タンパク質汚れなしネコカリシウイルス感染力価測定）
各実施例及び各比較例に係る殺菌・ウイルス不活性化組成物を用い、上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）の（３）工程において、１０％肉エキスを混合せず、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清をウイルス溶液とした以外は、上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）と同様にタンパク質汚れなしネコカリシウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１〜３に示す。
(Measurement of feline calicivirus infection titer without protein stains)
Using the bactericidal / virus inactivating composition according to each Example and each Comparative Example, in step (3) of the above (measurement of feline calicivirus infection titer in the presence of protein stains), 10% meat extract was not mixed. The feline calicivirus infection titer without protein stain was measured in the same manner as in the above (measurement of feline calicivirus infection titer in the presence of protein stain) except that the supernatant of the cultured cell disruption solution after centrifugation was used as a virus solution.
The difference between the value of the virus infectious titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infectious titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the above evaluation criteria (measurement of feline calicivirus infection titer in the presence of protein stains). The results are shown in Tables 1-3.
（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）
（１）マウスノロウイルスを、マウスのマクロファージ由来細胞株であるＲＡＷ ２６４．７細胞（ＡＴＣＣ ＴＩＢ−７１）に感染させて細胞を培養した。
（２）次に、マウスノロウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認した。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕した。
（３）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＤＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とした。
（４）各実施例及び各比較例に係る殺菌・ウイルス不活性化組成物と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、各殺菌・ウイルス不活性化組成物のウイルスに対する作用を停止させた。
この工程により得られた溶液を殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液とした。
（５）１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液を殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液とした。
（６）殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液及び殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地により、１０倍段階希釈した。１ウェルにＲＡＷ ２６４．７細胞を５０μＬずつ分注した９６ｗｅｌｌマイクロプレートに、各段階希釈液を５０μＬずつ加えた。
（７）殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液及び殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＲＡＷ ２６４．７細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養した。
（８）培養したＲＡＷ ２６４．７細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量した。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とした。
評価基準は以下の通りである。結果を表１〜３に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of murine norovirus infection titer in the presence of protein stains)
(1) Mouse norovirus was infected with RAW 264.7 cells (ATCC TIB-71), which is a mouse macrophage-derived cell line, and the cells were cultured.
(2) Next, it was confirmed by the cytopathic effect (CPE) whether or not the mouse norovirus was infected.
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells were disrupted by repeating freezing and thawing of the cultured cells.
(3) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) is dissolved in DMEM medium to prepare a 10% meat extract solution, and the supernatant of the cultured cell crushed solution after centrifugation and the 10% meat extract are 1 The mixture was mixed at a ratio (volume) of 1 to prepare a virus solution.
(4) The bactericidal / virus inactivating composition according to each Example and each Comparative Example and a virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute has passed at room temperature, 10% bovine fetal serum. By diluting 100-fold with DMEM medium containing the medium, the action of each bactericidal / virus-inactivating composition on the virus was stopped.
The solution obtained by this step was used as a 1-minute action virus solution of the sterilizing / virus-inactivating composition.
(5) Immediately after mixing 10% fetal bovine serum-containing DMEM medium and virus solution at a ratio (volume) of 9: 1, the solution obtained by diluting 100-fold with 10% fetal bovine serum-containing DMEM medium. Was prepared as a 0-minute action virus solution of the sterilizing / virus inactivating composition.
(6) The sterilizing / virus inactivating composition 0-minute action virus solution and the sterilizing / virus inactivating composition 1-minute action virus solution were diluted 10-fold with DMEM medium containing 10% fetal bovine serum, respectively. 50 μL of each serial diluent was added to a 96-well microplate in which 50 μL of RAW 264.7 cells were dispensed into 1 well.
(7) Sterilizing / virus inactivating composition 0-minute action Virus solution and sterilizing / virus-inactivating composition 1-minute action RAW 264.7 cells to which a serially diluted solution of the virus solution was added were added at 37 ° C. and 5% CO. It was cultured under the condition of 2 for 4 days.
(8) The virus infectious titer (countermeasure) of each virus solution was quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using the CPE of cultured RAW 264.7 cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are performed three times independently, and the average value of the virus infectious titer calculated using the bactericidal / virus inactivating composition 0-minute action virus solution is used as the action time. The virus infectivity titer was taken at 0 minutes, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the bactericidal / virus inactivating composition 1-minute action virus solution was taken as the value of the virus infectivity titer at the action time of 1 minute. ..
The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Tables 1-3.
A: Reduction of infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer below 2.0 (no effect)
（タンパク質汚れなしマウスノロウイルス感染力価測定）
各実施例及び各比較例に係る殺菌・ウイルス不活性化組成物を用い、上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）の（３）工程において、１０％肉エキスを混合せず、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清をウイルス溶液とした以外は、上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）と同様にタンパク質汚れなしマウスノロウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１〜３に示す。
(Measurement of murine norovirus infection titer without protein stain)
Using the bactericidal / virus inactivating composition according to each Example and each Comparative Example, in the step (3) of the above (measurement of murine norovirus infection titer in the presence of protein stains), centrifuge without mixing 10% meat extract. The mouse norovirus infection titer without protein stain was measured in the same manner as in the above (measurement of murine norovirus infection titer in the presence of protein stain) except that the supernatant of the cultured cell disruption solution after separation was used as a virus solution.
The difference between the value of the virus infectious titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infectious titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the above evaluation criteria (measurement of murine norovirus infection titer in the presence of protein stains). The results are shown in Tables 1-3.
（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）
（１）インフルエンザウイルスを、イヌ腎臓尿細管上皮細胞由来株化細胞であるＭＤＣＫ細胞に感染させて細胞を培養した。
（２）次に、インフルエンザウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認した。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕した。
（３）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＥＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とした。
（４）各実施例及び各比較例に係る殺菌・ウイルス不活性化組成物と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、２μｇ／ｍＬトリプシン（牛脾臓由来結晶）を含むＥＭＥＭ培地（以下、トリプシン含有ＥＭＥＭ培地）で１００倍希釈することにより、各殺菌・ウイルス不活性化組成物のウイルスに対する作用を停止させた。
この工程により得られた溶液を殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液とした。
（５）トリプシン含有ＥＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、トリプシン含有ＥＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液を殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液とした。
（６）殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液、殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、トリプシン含有ＥＭＥＭ培地により１０倍段階希釈した。ＭＤＣＫ細胞を培養した９６ｗｅｌｌマイクロプレートの培地を捨て、段階希釈液を１００μＬずつ加えた。
（７）殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液及び殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＭＤＣＫ細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養した。
（８）培養したＭＤＣＫ細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量した。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、殺菌・ウイルス不活性化組成物０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、殺菌・ウイルス不活性化組成物１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とした。
評価基準は以下の通りである。結果を表１〜３に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of influenza virus infection titer in the presence of protein stains)
(1) Influenza virus was infected with MDCK cells, which are cell lines derived from canine renal tubular epithelial cells, and the cells were cultured.
(2) Next, it was confirmed by the cytopathic effect (CPE) whether or not the influenza virus was infected.
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells were disrupted by repeating freezing and thawing of the cultured cells.
(3) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) was dissolved in EMEM medium to prepare a 10% meat extract solution, and the supernatant of the cultured cell crushed solution after centrifugation and 10% meat extract were combined into 1 The mixture was mixed at a ratio (volume) of 1 to prepare a virus solution.
(4) The sterilizing / virus inactivating composition according to each Example and each Comparative Example and a virus solution were mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, 2 μg / mL trypsin (2 μg / mL trypsin) By diluting 100-fold with an EMEM medium containing (crystals derived from bovine spleen) (hereinafter, trypsin-containing EMEM medium), the action of each bactericidal / virus inactivating composition on the virus was stopped.
The solution obtained by this step was used as a 1-minute action virus solution of the sterilizing / virus-inactivating composition.
(5) Immediately after mixing the trypsin-containing EMEM medium and the virus solution at a ratio (volume) of 9: 1, the obtained solution was diluted 100-fold with the trypsin-containing EMEM medium to sterilize and inactivate the virus. The product was prepared as a 0-minute action virus solution.
(6) The sterilizing / virus inactivating composition 0-minute action virus solution and the sterilization / virus inactivating composition 1-minute action virus solution were each diluted 10-fold with a trypsin-containing EMEM medium. The medium of the 96-well microplate in which the MDCK cells were cultured was discarded, and 100 μL of the serial diluent was added.
(7) Sterilizing / virus inactivating composition 0-minute action A viral solution and a sterilizing / virus-inactivating composition 1-minute action MDCK cells to which a serially diluted solution of the virus solution was added were subjected to the conditions of 37 ° C. and 5% CO 2. Then, it was cultured for 4 days.
(8) Using the CPE of cultured MDCK cells as an index, the virus infectious titer (logarithmic value) of each virus solution was quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%).
(9) The above steps (1) to (8) are performed three times independently, and the average value of the virus infectious titer calculated using the bactericidal / virus inactivating composition 0-minute action virus solution is used as the action time. The virus infectivity titer was taken at 0 minutes, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the bactericidal / virus inactivating composition 1-minute action virus solution was taken as the value of the virus infectivity titer at the action time of 1 minute. ..
The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Tables 1-3.
A: Reduction of infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer below 2.0 (no effect)
（タンパク質汚れなしインフルエンザウイルス感染力価測定）
各実施例及び各比較例に係る殺菌・ウイルス不活性化組成物を用い、上記（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）の（３）工程において、１０％肉エキスを混合せず、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清をウイルス溶液とした以外は、上記（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）と同様にタンパク質汚れなしインフルエンザウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（タンパク質汚れ存在時インフルエンザウイルス感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１〜３に示す。
(Measurement of influenza virus infection titer without protein stain)
Using the sterilizing / virus inactivating composition according to each Example and each Comparative Example, in the step (3) of the above (measurement of influenza virus infection titer in the presence of protein stains), centrifuge without mixing 10% meat extract. The influenza virus infection titer without protein stain was measured in the same manner as in the above (measurement of influenza virus infection titer in the presence of protein stain) except that the supernatant of the cultured cell disruption solution after separation was used as a virus solution.
The difference between the value of the virus infectious titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infectious titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the above evaluation criteria (measurement of influenza virus infection titer in the presence of protein stains). The results are shown in Tables 1-3.
（殺菌効果の評価）
（１）大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＮＢＲＣ３９７２）及び黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲＣ１２７３２）を、それぞれ、普通ブイヨン培地に接種し、３５℃で２４時間培養し菌液とした。
(Evaluation of bactericidal effect)
(1) Escherichia coli NBRC3972 and Staphylococcus aureus NBRC12732 were each inoculated into a normal bouillon medium and cultured at 35 ° C. for 24 hours to prepare a bacterial solution.
（２）各実施例及び各比較例の殺菌・ウイルス不活性化組成物と菌液とを９９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、ＳＣＤＬＰ培地に１白金耳移植し、３５℃で４８時間培養後、菌の生死を判定した。 (2) The bactericidal / virus-inactivating composition of each Example and each Comparative Example and the bacterial solution were mixed at a ratio (volume) of 99: 1, and after 1 minute at room temperature, 1 platinum loop was transplanted to SCDLP medium. Then, after culturing at 35 ° C. for 48 hours, the survival of the bacterium was determined.
（３）ＳＣＤＬＰ培地に濁りが見られた場合、菌が死滅しなかったと判断し、濁りが見られない場合菌が死滅したと判断した。 (3) When the SCDLP medium was turbid, it was judged that the bacteria were not killed, and when no turbidity was observed, it was judged that the bacteria were killed.
また、１０倍に希釈した各実施例及び各比較例の殺菌・ウイルス不活性化組成物を用い上記（１）〜（３）と同様の操作を繰り返し、菌の生死を判定した。 Further, using the sterilizing / virus-inactivating compositions of each Example and each Comparative Example diluted 10-fold, the same operations as in (1) to (3) above were repeated, and the survival or death of the bacteria was determined.
結果を表１〜３に示す。評価基準は以下の通りである。
［大腸菌について］
〇：大腸菌が死滅した。
×：大腸菌が死滅しなかった。
［黄色ブドウ球菌について］
〇：黄色ブドウ球菌が死滅した。
×：黄色ブドウ球菌が死滅しなかった。
The results are shown in Tables 1-3. The evaluation criteria are as follows.
[About E. coli]
〇: Escherichia coli has died.
X: Escherichia coli was not killed.
[About Staphylococcus aureus]
〇: Staphylococcus aureus has died.
X: Staphylococcus aureus was not killed.
表１〜３より、実施例に係る殺菌・ウイルス不活性化組成物は優れた殺菌効果及び抗ウイルス効果を奏することが判明した。
特に、殺菌・ウイルス不活性化組成物が水により希釈されたとしても、充分な殺菌効果を奏することが判明した。
From Tables 1 to 3, it was found that the bactericidal / virus-inactivating compositions according to the examples exhibited excellent bactericidal and antiviral effects.
In particular, it has been found that even if the bactericidal / virus-inactivating composition is diluted with water, it exerts a sufficient bactericidal effect.
Claims (7)
カチオン界面活性剤と、
アルカリ剤を含むことを特徴とする殺菌・ウイルス不活性化組成物。 10.00 wt% or more of lower alcohol and
With cationic surfactant,
A bactericidal / virus-inactivating composition comprising an alkaline agent.
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| WO2023145559A1 (en) * | 2022-01-31 | 2023-08-03 | 花王株式会社 | Method for inactivating virus or bacterium |
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