JP2019122346A - 菌根性茸類の種菌調製方法及び接種方法 - Google Patents
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宿主植物・種菌複合体を製作する際に使用する透水膜がセロハンシートの方法である。
本発明の菌根性茸類の種菌調製方法は、図1に示すように、(1)混合工程、(2)培地準備工程、(3)培養工程、(4)取出分離工程を含む方法である。そこで、図1に基づいて、これらの工程について以下に説明する。
混合工程は、菌根性茸類の菌糸体破砕物1と担体2との混合物3を調製する工程である。ここで、菌根性茸類とは、生きた樹木の根と共生関係を保ちながら生育する茸類のことである。具体的には、アミタケ、ハツタケ、コウタケ、アイシメジ、ホンシメジ、マツタケ、バカマツタケなどが挙げられる。
培地準備工程は、調製用容器4中に、多孔質膜5によって覆われた固体栄養培地6を製作する工程である。ここで、調製用容器4は菌根性茸類の菌糸体の培養に使用できる公知の容器であれば特に限定することなく使用できる。具体的には、プラスチック製の使い捨て容器等が挙げられるが、これに限定されるわけではない。
培養工程は、(1)混合工程で調製した混合物3を、(2)培地準備工程で製作した多孔質膜5の上に配置して、培養する工程である。混合物3を多孔質膜5の上に配置する方法としては、公知の方法、例えば、混合物3を滅菌した薬匙等で配置する方法が挙げられる。配置される混合物3の量は、調製用容器4に収納される範囲であれば特に限定する必要はないが、一般的に、混合物3に加える菌糸体破砕物1の量が多ければ多いほど、培養時間を短縮できる。
取出分離工程は、混合物3が成長してなる種菌10を調製用容器4から取出して固体栄養培地6と分離する工程である。具体的には、(a)調製用容器4の蓋を開けて、固体栄養6と調製用容器4の横壁と間にスパティラ等を差し込んで切り出し、両者が合体した状態で取出したのち、多孔質膜5を使用して両者を分離する方法、(b)調製用容器4を破壊して、種菌10と固体栄養培地6とが合体した状態で取出し、多孔質膜5を使用して両者を分離する方法、(c)調製用容器4の蓋を開けて容器の開口部を下に向け、開口部を板などに打ち付けてその振動により、両者が合体した状態で取出したのち、多孔質膜5を使用して両者を分離する方法、(d)調製用容器4の蓋を開けて、多孔質膜5の対向する辺や角をピンセットなどで引っ張って、種菌10だけを取出す方法等が挙げられる。このように、種菌10と固体栄養培地6とは多孔質膜5によって分離されているため、両者は容易に分離できる。
本発明の菌根性茸類の接種方法としては、公知の菌根性茸類の接種方法であれば特に限定することなく使用できる。具体的には、(a)種菌をゲルなどに包埋して、これをアカマツ、コナラ、クヌギ等の宿主植物の生根の成長部分に配置する方法、(b)種菌と微細粒子からなる鉱物質とを順次充填した容器に、宿主植物の根の先端を挿入する方法、(c)殺菌剤を含んだ培養液をバーミキュライト等の支持体に添加した培地で種菌をさらに培養して、雑菌に強い種菌を作り、これを宿主植物の根に接種する方法、(d)宿主植物の取り木苗に種菌を付着させ、これを土壌に植え付ける方法、(e)宿主植物の取り木苗と種菌とを透水膜で密着させて複合体を製作し、この複合体を土壌に植え付ける方法等が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。これらのうち、発明者らの研究から、菌根の成長性や接種作業の生産性の高さ等が確認されている(e)について、図2に基づいて、以下に説明する。
準備工程は、図2(1)に示すように、種菌10、取り木苗(宿主植物)11、透水膜12を準備する工程である。ここで、種菌10は本発明の種菌の調製方法によって調製されたものである。また、透水膜12は、前記多孔質膜5に加えて、和紙や木綿布など、生分解性で透水性があり、林地の土壌と物理的に遮断できる素材であれば特に限定することなく使用できる。中でも、生分解性を有し、安価であることからセロハンシートが好ましい。
被覆工程は、取り木苗11の下部にある根部と種菌10とを接触させ、透水膜12でこれらを覆ったのち、透水膜12の上下端を取り木苗11に巻きつけて密着させ、苗木・種菌複合体(宿主植物・種菌複合体)20を製作する工程である。
接種工程は、移植ゴテなどを使用する公知の方法によって、苗木・種菌複合体20を林地、植木鉢などの接種場所に植え込む工程である。接種場所は、苗木以外にも共生できるように、他の宿主植物が生育している林地などが好ましい。なお、接種に際して、苗木の根の周りに抗ウイルス剤、抗菌剤、動物忌避剤、栄養分等を合わせて撒いてもよく、苗木の葉や幹にこれらを散布してもよい。
林地接種用種菌のもとになる菌糸体は、次のようにして調製した。まず、奈良県森林技術センターで保有しているバカマツタケ菌株を、20〜22℃、相対湿度約60%の培養室で、固体栄養培地に接種して伸長させた。菌糸が伸長した固体栄養培地の一部を切り出して、約4ヶ月間液体培地で同様に培養した。この培養液を撹拌機(ペンシルミキサー(登録商標)、アズワン株式会社)で約30〜60秒間破砕し、破砕液10mlを新しい液体培地に植え継ぎ、同様にして液体培養した。植え継ぎして約1ヶ月後に菌糸の成長が肉眼で確認できた。3〜6ヶ月後に植え継ぎ、これを種菌調製用の菌糸体として使用した。
前記1で調製した菌糸体を使用して、林地接種用種菌を調製した。具体的には、以下の手順で調製した。
前記1で使用した固体栄養培地70mlを、底面60×60mm、上面65×65mm、高さ95mmのポリカーボネート製角型容器に分注して、121℃で15分間滅菌した。培地が固形化したのち、滅菌したセロハンシート(多孔質膜)をピンセットで固体培地の上面に敷いて、調製用容器を製作した。なお、比較のため、セロハンシートを敷かない調製用容器も製作した。また、バーミキュライト細粒70g及び蒸留水160mlを1Lのガラスビーカーに入れ、その上部をアルミ箔で覆ったのち、121℃で60分間滅菌して室温まで冷し、無菌の担体を調製した。
前記1で調製した菌糸体を、撹拌機で約30〜60秒間破砕して菌糸体破砕液を調製した。液体培地を含む菌糸体破砕液と無菌の担体とを滅菌した薬匙で均一になるよう混合し、(1)で製作した調製用容器に取り分けた。この際、混合物の厚さが1cm程度になるように取り分けたので、8つの調製用容器を使用した。
混合物を含む調製用容器を20〜22℃、相対湿度約60%の培養室で培養すると、菌糸体は約1ヶ月後に担体内で成長し始め、約2ヶ月後に担体全体を覆った。さらに、3ヶ月又は4ヶ月後まで培養して、これを林地接種用種菌とした。林地接種用種菌の外観を図3に示す。また、林地接種用種菌と固体培地はセロハンシートで仕切られているため、林地接種用種菌と固体培地は、図4に示すように、容易に分離できた。なお、セロハンシートによる仕切りがない場合、種菌と寒天培地が固着し、両者を容易に分離できなかった。
約4ヶ月間培養した林地接種用種菌と、別途用意したウバメガシの取り木苗とを使用して、4月に奈良県内にあるコナラ林で林地接種し、その効果を調べた。具体的には、以下の手順で調べた。
約3ヶ月間培養した林地接種用種菌と、別途用意したウバメガシの取り木苗とを使用して、11月に奈良県内にあるコナラ林で林地接種し、その効果を調べた。具体的には、以下の手順で調べた。
2 滅菌した担体
3 混合物
4 調製用容器
5 セロハンシート(多孔質膜)
6 固体栄養培地
10 種菌
11 取り木苗(宿主植物)
12 セロハンシート(透水膜)
20 苗木・種菌複合体(宿主植物・種菌複合体)
Claims (6)
- (1)菌根性茸類の菌糸体破砕物と、菌根性茸類の菌糸体の成長に必要な栄養分を含まない無菌の担体との混合物を調製する工程と、
(2)栄養分を含む固体栄養培地を、栄養分と水分は透過するが菌糸体及び担体は透過しない多孔質膜で覆う工程と、
(3)混合物を多孔質膜上に配置して、菌根性茸類の菌糸体を培養して種菌を得る工程と、
(4)種菌と固体栄養培地とを多孔質膜の上下で分離する工程と、
を含む菌根性茸類の種菌調製方法。 - 菌根性茸類が、バカマツタケである請求項1に記載の菌根性茸類の種菌調製方法。
- 多孔質膜が、セロハンシートである請求項1に記載の菌根性茸類の種菌調製方法。
- 請求項1から請求項3の何れかに記載の方法で調製された菌根性茸類の種菌を使用する菌根性茸類の接種方法。
- (1)請求項1から請求項3の何れかに記載の方法で調製された菌根性茸類の種菌と、宿主植物とを準備する工程と、
(2)菌根性茸類の種菌と宿主植物の根部とを接触させ、これらを透水膜で覆って密着させ、宿主植物・種菌複合体を製作する工程と、
(3)宿主植物・種菌複合体を接種場所に接種する工程と、
を含む請求項4に記載の菌根性茸類の接種方法。 - 宿主植物・種菌複合体を製作する際に使用する透水膜が、セロハンシートである請求項5に記載の菌根性茸類の接種方法。
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CN112772285A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-05-11 | 嘉兴职业技术学院 | 一种大球盖菇培养料及其栽培大球盖菇的方法 |
CN113207545A (zh) * | 2021-04-21 | 2021-08-06 | 湄潭县众志菌业有限公司 | 一种仿野生栽培香菇方法 |
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