JP2019082446A - バイオアッセイのための検出剤及びそれを用いたシグナルの増幅方法 - Google Patents
バイオアッセイのための検出剤及びそれを用いたシグナルの増幅方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019082446A JP2019082446A JP2017210952A JP2017210952A JP2019082446A JP 2019082446 A JP2019082446 A JP 2019082446A JP 2017210952 A JP2017210952 A JP 2017210952A JP 2017210952 A JP2017210952 A JP 2017210952A JP 2019082446 A JP2019082446 A JP 2019082446A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- substance
- measured
- binding partner
- detection agent
- reporter
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 147
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 96
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 title 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 320
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 190
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 112
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims abstract description 98
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims abstract description 98
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims abstract description 97
- 239000013076 target substance Substances 0.000 claims abstract description 50
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 128
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 94
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 94
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 93
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 91
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 76
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 claims description 71
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 51
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 51
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 36
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 34
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 claims description 29
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 22
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 claims description 21
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims description 15
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 claims description 15
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 10
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 8
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 claims description 6
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 49
- 239000002131 composite material Substances 0.000 abstract 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 48
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 31
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 26
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 26
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 22
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 12
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 12
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 10
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 10
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 10
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 9
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 9
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 9
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- -1 antibody Proteins 0.000 description 7
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 7
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 7
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 7
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 7
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 7
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 7
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 6
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 6
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N beta-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N 0.000 description 5
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 5
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 5
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 4
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 4
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 4
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 4
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 4
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 3
- 238000002796 luminescence method Methods 0.000 description 3
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000696 magnetic material Substances 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 3
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 3
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HUDPLKWXRLNSPC-UHFFFAOYSA-N 4-aminophthalhydrazide Chemical compound O=C1NNC(=O)C=2C1=CC(N)=CC=2 HUDPLKWXRLNSPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XQXPVVBIMDBYFF-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxyphenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XQXPVVBIMDBYFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010000239 Aequorin Proteins 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 2
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N Iron oxide Chemical compound [Fe]=O UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 2
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 2
- 102000013394 Troponin I Human genes 0.000 description 2
- 108010065729 Troponin I Proteins 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000002795 fluorescence method Methods 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 2
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 208000010753 nasal discharge Diseases 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 2
- WCYJXDMUQGVQQS-UHFFFAOYSA-N pyridine;ruthenium Chemical class [Ru].C1=CC=NC=C1 WCYJXDMUQGVQQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- WGTODYJZXSJIAG-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine chloride Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O WGTODYJZXSJIAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 229910000859 α-Fe Inorganic materials 0.000 description 2
- ZIOCTOWDUYBVCA-ZOWZHXDVSA-N (3r,4s,5r,6r)-6-(hydroxymethyl)-3-[3-(3'-methoxyspiro[adamantane-2,4'-dioxetane]-3'-yl)phenyl]oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound O1OC2(C3CC4CC(C3)CC2C4)C1(OC)C(C=1)=CC=CC=1[C@]1(O)C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O ZIOCTOWDUYBVCA-ZOWZHXDVSA-N 0.000 description 1
- BCHIXGBGRHLSBE-UHFFFAOYSA-N (4-methyl-2-oxochromen-7-yl) dihydrogen phosphate Chemical compound C1=C(OP(O)(O)=O)C=CC2=C1OC(=O)C=C2C BCHIXGBGRHLSBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]ethanone Chemical compound C1CN(CC2=NNN=C21)CC(=O)N3CCN(CC3)C4=CN=C(N=C4)NCC5=CC(=CC=C5)OC(F)(F)F LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KUWPCJHYPSUOFW-YBXAARCKSA-N 2-nitrophenyl beta-D-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O KUWPCJHYPSUOFW-YBXAARCKSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RMXVNDUWESWVKI-UHFFFAOYSA-N 3-(1-adamantyl)dioxetane Chemical class C1OOC1C1(C2)CC(C3)CC2CC3C1 RMXVNDUWESWVKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YUDPTGPSBJVHCN-DZQJYWQESA-N 4-methylumbelliferyl beta-D-galactoside Chemical compound C1=CC=2C(C)=CC(=O)OC=2C=C1O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O YUDPTGPSBJVHCN-DZQJYWQESA-N 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N Dioxetane Chemical class C1COO1 BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229910003771 Gold(I) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical group ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102100036859 Troponin I, cardiac muscle Human genes 0.000 description 1
- 101710128251 Troponin I, cardiac muscle Proteins 0.000 description 1
- XYIPYISRNJUPBA-UHFFFAOYSA-N [3-(3'-methoxyspiro[adamantane-2,4'-dioxetane]-3'-yl)phenyl] dihydrogen phosphate Chemical compound O1OC2(C3CC4CC(C3)CC2C4)C1(OC)C1=CC=CC(OP(O)(O)=O)=C1 XYIPYISRNJUPBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical class C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 125000005073 adamantyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)* 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000956 alloy Substances 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000009141 biological interaction Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012767 chemiluminescent enzyme immunoassay Methods 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical class 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000000959 ear middle Anatomy 0.000 description 1
- 230000005518 electrochemistry Effects 0.000 description 1
- 231100000507 endocrine disrupting Toxicity 0.000 description 1
- 238000003891 environmental analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 230000005294 ferromagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 150000002343 gold Chemical class 0.000 description 1
- FDWREHZXQUYJFJ-UHFFFAOYSA-M gold monochloride Chemical compound [Cl-].[Au+] FDWREHZXQUYJFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910052595 hematite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011019 hematite Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- PCKPVGOLPKLUHR-UHFFFAOYSA-N indoxyl Chemical group C1=CC=C2C(O)=CNC2=C1 PCKPVGOLPKLUHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- LIKBJVNGSGBSGK-UHFFFAOYSA-N iron(3+);oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[Fe+3].[Fe+3] LIKBJVNGSGBSGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N iron(II,III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]O[Fe]=O SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000608 laser ablation Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 108010026228 mRNA guanylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000005415 magnetization Effects 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002082 metal nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000009149 molecular binding Effects 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000011146 organic particle Substances 0.000 description 1
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000011242 organic-inorganic particle Substances 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 150000003303 ruthenium Chemical class 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 210000001138 tear Anatomy 0.000 description 1
- JGVWCANSWKRBCS-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine thiocyanate Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=C(SC#N)C=C1C(O)=O JGVWCANSWKRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/551—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being inorganic
- G01N33/553—Metal or metal coated
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/585—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with a particulate label, e.g. coloured latex
- G01N33/587—Nanoparticles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/581—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with enzyme label (including co-enzymes, co-factors, enzyme inhibitors or substrates)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N37/00—Details not covered by any other group of this subclass
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y30/00—Nanotechnology for materials or surface science, e.g. nanocomposites
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y40/00—Manufacture or treatment of nanostructures
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Description
(1)対象物質を測定するための方法であって、
(i)測定対象物質、並びに測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤を含有する複合体を形成させること、及び
(ii)複合体に含まれるレポーター物質からのシグナルを測定すること、
を含有してなり、
第一の結合パートナーは、検出剤中で金ナノ粒子に直接に固定化されたものである、方法。
(2)複合体が、さらに、固体支持体に固定化された、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナーを含有する、前記(1)に記載の方法。
(3)複合体が、固体支持体に固定化された測定対象物質を含有する、前記(1)に記載の方法。
(4)前記(i)は、測定対象物質を含む液体試料と、測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤とを接触させ、測定対象物質と検出剤とを含有する複合体を形成させる工程である、
前記(1)に記載の方法。
(5)前記工程(i)は、前記接触と同時又は接触後に、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナーが予め固定化された固体支持体と接触させる工程をさらに含有するものであり、
前記(ii)は、固体支持体上に形成された複合体に含まれるレポーター物質からのシグナルを測定する工程である、
前記(4)に記載の方法。
(6)前記工程(i)は、測定対象物質が予め固定化された固体支持体を含有する反応系内で実施される工程であり、
前記(ii)は、固体支持体上に形成された複合体に含まれるレポーター物質からのシグナルを測定する工程である、
前記(4)に記載の方法。
(7)前記(i)は、測定対象物質を含む液体試料と、測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤と、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナーが予め固定化された固体支持体とを少なくとも使用する工程であって、
第二の結合パートナーが予め固定化された固体支持体と、測定対象物質を含む液体試料とを接触させ、次いで測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤を接触させることにより測定対象物質と検出剤とを含有する複合体を形成させる工程であり、
前記(ii)は、固体支持体上に形成された複合体に含まれるレポーター物質からのシグナルを測定する工程である、
前記(1)に記載の方法。
(8)固体支持体が、マイクロプレート、磁性粒子、多孔性膜及びマイクロ流体チップからなる群より選ばれる、前記(2)、(3)、及び(5)〜(7)の何れかに記載の方法。
(9)固体支持体が、磁性粒子である、前記(8)に記載の方法。
(10)磁性粒子の平均粒子径が、0.3〜3μmである、前記(9)に記載の方法。
(11)金ナノ粒子の平均粒子径が、20〜150nmである、前記(1)〜(10)の何れかに記載の方法。
(12)結合パートナーが、抗原又は抗体若しくはその抗原結合性断片である、前記(1)〜(11)の何れかに記載の方法。
(13)結合パートナーが、抗体又はその抗原結合性断片である、前記(12)に記載の方法。
(14)レポーター物質が、ラジオアイソトープ、酵素、蛍光物質及び発光物質からなる群より選ばれる、前記(1)〜(13)の何れかに記載の方法。
(15)レポーター物質が、電気化学的に活性な発光物質、又は電気化学活性物質を反応生成物として生じる酵素である、前記(1)〜(13)の何れかに記載の方法。
(16)液体試料が生体液である、前記(4)〜(15)の何れかに記載の方法。
(17)測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤であって、
第一の結合パートナーは、金ナノ粒子に直接に固定化されたものであり、
レポーター物質は、第一の結合パートナー又は金ナノ粒子に直接に固定化されたものであり、
レポーター物質は、第一の結合パートナーに結合した測定対象物質の量に相関した強度のシグナルを発生できるものである、
対象物質を測定するための検出剤。
(18)金ナノ粒子の平均粒子径が、20〜150nmである、前記(17)に記載の検出剤。
(19)結合パートナーが、抗原又は抗体若しくはその抗原結合性断片である、前記(17)又は(18)に記載の検出剤。
(20)結合パートナーが、抗体又はその抗原結合性断片である、前記(19)に記載の検出剤。
(21)レポーター物質が、ラジオアイソトープ、酵素、蛍光物質及び発光物質からなる群より選ばれる、前記(17)〜(20)の何れかに記載の検出剤。
(22)レポーター物質が、電気化学的に活性な発光物質、又は電気化学活性物質を反応生成物として生じる酵素である、前記(17)〜(20)の何れかに記載の検出剤。
(23)レポーター物質は、第一の結合パートナーに直接に固定化されたものである、前記(17)〜(22)の何れかに記載の検出剤。
(24)対象物質を測定するためのキットであって、
前記(17)〜(23)の何れかに記載の検出剤、及び複合体形成部を備えた固体支持体からなるデバイスを含有し、
デバイスの複合体形成部は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化されたものである、キット。
(25)対象物質を測定するためのキットであって、
前記(17)〜(23)の何れかに記載の検出剤と、複合体形成剤保持部及び複合体捕捉部を備えた固体支持体からなるデバイスとを含有するものであり、
デバイスの複合体形成剤保持部は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化された磁性粒子からなる複合体形成剤を含有し、
デバイスの複合体捕捉部は、磁場が適用されることにより複合体形成剤を捕捉する機構を備えたものである、キット。
(26)対象物質を測定するためのキットであって、
前記(17)〜(23)の何れかに記載の検出剤、複合体形成剤、及び複合体捕捉部を備えた固相支持体からなるデバイスを含有するものであり、
複合体形成剤は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化された磁性粒子からなるものであり、
デバイスの複合体捕捉部は、磁場が適用されることにより複合体形成剤を捕捉する機構を備えたものである、キット。
(27)固体支持体が、マイクロプレート、磁性粒子、多孔性膜及びマイクロ流体チップからなる群より選ばれる、前記(24)に記載のキット。
(28)固体支持体が、マイクロ流体チップである、前記(25)又は(26)に記載のキット。
(29)磁性粒子の平均粒子径が、0.3〜3μmである、前記(25)〜(28)の何れかに記載のキット。
(30)前記(24)〜(29)の何れかに記載のキット、及び前記キットに含まれるデバイスを着脱可能なデバイス装着部と前記キットに含まれる検出剤のレポーター物質から発生したシグナルを測定することができるシグナル検出部とを備えた測定装置を含有してなる、免疫測定システム。
(31)対象物質を測定するためのデバイスであって、
検出剤保持部、及び複合体形成部を備えた固体支持体からなり、
検出剤保持部は、前記(17)〜(23)の何れかに記載の検出剤を含有し、
複合体形成部は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化されたものである、デバイス。
(32)対象物質を測定するためのデバイスであって、
検出剤保持部、複合体形成剤保持部、及び複合体捕捉部を備えた固体支持体からなり、
検出剤保持部は、前記(17)〜(23)の何れかに記載の検出剤を含有し、
複合体形成剤保持部は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化された磁性粒子からなる複合体形成剤を含有し、
複合体捕捉部は、磁場が適用されることにより複合体形成剤を捕捉する機構を備えたものである、デバイス。
(33)固体支持体が、多孔性膜又はマイクロ流体チップである、前記(31)に記載のデバイス。
(34)固体支持体が、マイクロ流体チップである、前記(32)に記載のデバイス。
(35)磁性粒子の平均粒子径が、0.3〜3μmである、前記(32)又は(34)に記載のデバイス。
(36)前記(31)〜(35)の何れかに記載のデバイス、及び前記デバイスを着脱可能なデバイス装着部と前記デバイスの検出剤保持部に含まれる検出剤のレポーター物質から発生したシグナルを検出することができるシグナル検出部を備えた測定装置を含有してなる、免疫測定システム。
従来の標識免疫測定法では、例えば酵素標識抗体が抗原に結合することにより抗原に結合できる酵素の数は一般に1個程度に制限されており、抗原に結合した酵素からのシグナルを増幅し測定の感度を高めることには限界があった。しかし、本発明では、測定対象物質を特異的に認識する結合パートナーを、複数のレポーター物質とともに金ナノ粒子上に固定化した検出剤を提供することにより、測定対象物質に間接的に結合するレポーター物質の数を著しく増加させることができ、測定対象物質の量に相関するレポーター物質からのシグナル強度を顕著に増幅することが可能となる。
また、本発明の検出剤は、第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化された固体支持体とともに用いることで、競合法又は非競合法のいずれの反応形式による測定方法でも高い感度を得ることができる。
さらに、本発明の検出剤は、免疫測定法で汎用される固体支持体のいずれと組み合わせても高い感度で対象物質を測定することができるが、特に磁性粒子等の粒子形状の固体支持体との組み合わせにおいて極めて高感度な測定を達成することができる。
本発明の抗体として抗原結合性断片を用いる場合には、公知の方法により、前記のように作製された抗体を酵素消化することにより得ることができる。パパインによる分解でFabが得られ、ペプシンによる処理でF(ab’)2が得られ、F(ab’)2を還元処理することによりFab’が得られる。或いは、遺伝子操作により、抗体の重鎖可変部(VH)と軽鎖可変部(VL)を可動性に富むリンカーペプチドで連結することによりscFvを作製することができる。
さらに、レポーター物質としての酵素は、前記のサイクリング法と組み合わせることにより反応生成物を再利用することが可能となり、反応生成物からのシグナルをより一層増強することができる。例えば、酵素としてALPを用いこれに基質であるNADPを作用させ生じたNAD+を、サイクリング法によりNADHを経てNAD+に再変換させることができる。このサイクリング法による循環反応を、酸化還元反応によりフォルマザン色素を生成させる反応と組み合わせることで、フォルマザン色素の生成が増幅され、比色法ながらも非常に高い感度でALPの酵素活性を測定することができ、ごく微量の測定対象物質であってもその濃度を決定することが可能となる。
本発明の方法において、特に高感度、高精度が求められる場合には、金コロイドの例で言えば、コロイドの粒子の形状を同じ形のもの、例えば真球状にしたものを多くするとか、コロイド粒子の粒径を均一にするということ、例えば、40nm、80nm、または120nmというような、特定な粒径の一点に集中させるという、いわゆる粒度分布曲線を狭くした(粒度分布の幅が狭い)コロイドにするという工夫をすることも可能である。粒子径の分散の程度は、多分散指数(PDI)によって評価することができ、PDI値として0.1以下、より好ましくは0.07以下、さらに好ましくは0.05以下となることを指標として、粒度分布の幅が狭い粒子群を公知の手法によって調製することができる。平均粒子径は、通常、動的光散乱法により測定することができる。例えば金ナノ粒子の場合、粒子が分散された金コロイド液の粒度分布を動的光散乱法粒度分布計で測定した後の平均粒径を求めることで測定できる。粒子の形状は特に限定されるものではなく、球、シェル、ロッド、ライス、ピラミッド、プリズム、スター、プレートなどの種々の形状であってもよいが、粒子の表面に立体障害なく測定対象物質と結合できるように数多くの第一の結合パートナーを固定化できる点で、特に球状の金ナノ粒子が好ましい。
マイクロ流体チップで形成されたデバイスの更なる態様としては、複合体捕捉部のみを有するデバイスが挙げられ、このデバイスを複合体形成剤と組み合わせてキットとして提供することができる。上記のように、本発明の検出剤は、更なる構成要素としてキットに含めることもできるし、デバイスに検出剤保持部を設けそこに保持させることもできる。
マイクロ流体チップは、当技術分野で公知の方法によって製造することができ、例えば、ガラスやプラスチックの小片に、混合部や反応部を有する流路、1又は複数のインレット、廃液貯蔵部を作製することで製造できる。インレットは測定対象物質を含む液体試料の注入に用いられるが、必要に応じて、洗浄液及び/又は酵素の基質溶液を流路に注入するためのインレットを別に設けてもよい。
動的光散乱法によって測定した平均粒子径が20nm、40nm、60nm、80nm、100nm及び150nmのいずれかである金ナノ粒子を含む金コロイド溶液(金濃度(ICP)約65〜68ppm、田中貴金属工業株式会社製)を材料として使用した。粒子径の分散の程度を示すPDI値は、金ナノ粒子の平均粒子径が20nm、40nm、60nm、80nm、100nm及び150nmのものについて、それぞれ0.080、0.056、0.061、0.034、0.022、0.020であった。それぞれの金コロイド溶液9mLに100mMトリス緩衝液(pH8.5)1mLを加えて混和した。さらに、溶媒としてリン緩衝液(pH7.0)を用いた1.0mg/mLのアルカリホスファターゼ(ALP)標識抗心筋トロポニンI抗体の溶液0.05mLを加え混和し、5℃で5分間反応させた。ここに10%牛血清アルブミン(BSA)を含有する蒸留水0.1mLを加えて混和し、5℃で5分間反応させた。12,000gで5分間遠沈し、上清を取り除いて、1%BSAを含有するリン酸緩衝生理食塩水(PBS)を10mL加え、超音波洗浄器を用いて完全に分散させた。再び12,000gで5分間遠沈し、上清を取り除いて、1%BSAを含有するPBSを1mL加え、超音波洗浄器を用いて完全に分散させた。
(1)cTnIを固定化したマイクロプレートの作製
96ウェルマイクロプレート(Nunc社製)に、溶媒として炭酸緩衝液(pH9.5)を用いた0.01mg/mL濃度の抗cTnI抗体溶液を0.1mLずつ分注し、5℃で一夜静置した。溶液を吸引除去した後、PBSで3回洗浄した。1%BSAを含むPBSを各ウェルに300μL分注し、37℃で1時間静置した。溶液を吸引除去した後、0.05%(v/v) Tween20を含むPBS(PBS-T)で3回洗浄した。
溶媒としてリン緩衝液(pH7.0)を用いて希釈した濃度0ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、又は100ng/mLのcTnI溶液、及び実施例1で作製した平均粒子径が80nmの金コロイド溶液をそれぞれ各ウェルに10μLずつ分注し、室温で5分間反応させた。溶液を吸引除去した後、PBS-Tで3回洗浄した。ALPの基質溶液であるBluePhos(KPL社製)を各ウェルに100μLずつ分注した。10分後に各ウェルの上清を市販のプレートリーダーで600nmでの吸光度について測定した。
結果を以下の表1及び2に示す。表1は、それぞれの抗原濃度に対応する600nmでの吸光度を表す。表2は、抗原濃度が0ng/mLのときの吸光度をノイズ(N)とし、抗原濃度が1ng/mL、10ng/mL、及び100ng/mLのときの吸光度をシグナル(S)とした場合の、S/N比を表す。
(1)抗cTnI抗体を固定化した磁性粒子の作製
固形分濃度が10mg/mLである、平均粒子径が1.5μmで表面がトシル基で化学修飾された磁性粒子(商品名MagnosphereTM MS160/Tosyl、JSR株式会社製)の粒子分散液2mLをマイクロチューブに取り、磁石で粒子を集め、上清を取り除いた。100mMホウ酸緩衝液(pH9.5)2mLを加えて混和した。溶媒としてリン緩衝液(pH7.0)を用いて希釈した20μgの抗cTnI抗体を含む抗体溶液を加え混和し、さらに3M硫酸アンモニウムを含有する100mMホウ酸緩衝液(pH9.5)1mLを加えて混和した。ローテーターで穏やかに転倒混和しながら、室温で24時間反応させた。10%牛血清アルブミン(BSA)を含有する蒸留水0.02mLを加えて混和し、ローテーターで穏やかに転倒混和しながら、室温で6時間以上反応させた。磁石で粒子を集め、上清を取り除いた。そこにPBS-Tを5mL加えて混和し、磁石で粒子を集め、上清を取り除くといった洗浄操作を3回繰り返した。洗浄後の磁性粒子に1%BSAを含有するPBSを10mL加えて混和し、粒子を分散させた。
96ウェルマイクロプレートに、濃度0ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mLのcTnI溶液、上記(1)で作製した磁性粒子分散液、及び実施例1で作製した平均粒子径が80nmの金コロイド溶液をそれぞれ各ウェルに10μLずつ分注し、室温で5分間反応させた。96ウェルマイクロプレート用の磁石プレートで粒子を集め、上清を取り除いた後、PBS-Tで3回洗浄した。ALPの基質溶液であるBluePhos(KPL社製)を各ウェルに100μLずつ分注した。10分後に各ウェルの上清を市販のプレートリーダーで600nmでの吸光度について測定した。
結果を以下の表1及び2に示す。
実施例2のマイクロプレートを用いたcTnIの測定において、実施例1で作製したALP標識抗体が固定化された金コロイド溶液を用いる代わりに、金ナノ粒子に固定化されていないALP標識抗体を用いた。ALP標識抗体の濃度は、実施例2で用いられた金コロイド溶液(OD550=6.0)に含まれる金ナノ粒子に固定化されたALP標識抗体の濃度と同じになるように調製し、各ウェルに10μLずつ分注し反応させた。
結果を以下の表1及び2に示す。
実施例3の磁性粒子を用いたcTnIの測定において、実施例1で作製したALP標識抗体が固定化された金コロイド溶液を用いる代わりに、金ナノ粒子に固定化されていないALP標識抗体を用いた。ALP標識抗体の濃度は、実施例3で用いられた金コロイド溶液(OD550=6.0)に含まれる金ナノ粒子に固定化されたALP標識抗体の濃度と同じになるように調製し、各ウェルに10μLずつ分注して反応させた。
結果を以下の表1及び2に示す。
実施例3の磁性粒子を用いたcTnIの測定において、実施例1で作製したALP標識抗体が固定化された金コロイド溶液を用いる代わりに、ALP標識抗体が固定化されたラテックス粒子の懸濁液を用いた。ラテックス粒子には、平均粒子径が75nm(Merck社製)のものと1μm(Polysciences社製)のものを用いた。ラテックス粒子へのALP標識抗cTnI抗体の固定化は、実施例1に記載される金ナノ粒子への固定化方法に準じて、受動的な吸着により行った。ラテックス粒子の懸濁液の濃度は、ラテックス粒子に固定化されたALP標識抗体の濃度が実施例3で用いられた金コロイド溶液(OD550=6.0)に含まれる金ナノ粒子に固定化されたALP標識抗体の濃度と同じになるように調製して、各ウェルに10μLずつ分注して反応させた。
結果を以下の表3及び4に示す。表3は、それぞれの抗原濃度に対応する600nmでの吸光度を表す。表4は、抗原濃度が0ng/mLのときの吸光度をノイズ(N)とし、抗原濃度が1ng/mL、10ng/mL、及び100ng/mLのときの吸光度をシグナル(S)とした場合の、S/N比を表す。
実施例1で作製した平均粒子径が20nm、40nm、60nm、80nm、100nm及び150nmの金コロイド溶液を用いて、実施例3と同様に、磁性粒子を用いてcTnIの測定を行った。
結果を以下の表5及び6に示す。表5は、それぞれの抗原濃度に対応する600nmでの吸光度を表す。表6は、抗原濃度が0ng/mLのときの吸光度をノイズ(N)とし、抗原濃度が1ng/mL、10ng/mL、及び100ng/mLのときの吸光度をシグナル(S)とした場合の、S/N比を表す。
実施例3(1)の抗cTnI抗体を固定化した磁性粒子の作製に記載される方法に準じて、平均粒子径が3μmで表面がトシル基で化学修飾された磁性粒子(商品名MagnosphereTM MS300/Tosyl、JSR株式会社製)の粒子分散液を用いて、表面に抗cTnI抗体が固定化された磁性粒子を作製した。さらに、平均粒子径が0.3μm又は2.6μmであり、表面にストレプトトアビジンが固定化され生物学的に修飾された磁性粒子(商品名Estapor、Merck社製)の粒子分散液とビオチン標識された抗cTnI抗体を用いて、表面に抗cTnI抗体が固定化された磁性粒子を作製した。
これらの磁性粒子を用いて、実施例3(2)のcTnIの測定に記載される方法に準じて、実施例1で作製した平均粒子径が80nmの金コロイド溶液を用いてcTnIの測定を行った。
結果を以下の表7及び8に示す。表7は、それぞれの抗原濃度に対応する600nmでの吸光度を表す。表8は、抗原濃度が0ng/mLのときの吸光度をノイズ(N)とし、抗原濃度が1ng/mL、10ng/mL、及び100ng/mLのときの吸光度をシグナル(S)とした場合の、S/N比を表す。
Claims (36)
- 対象物質を測定するための方法であって、
(i)測定対象物質、並びに測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤を含有する複合体を形成させること、及び
(ii)複合体に含まれるレポーター物質からのシグナルを測定すること、
を含有してなり、
第一の結合パートナーは、検出剤中で金ナノ粒子に直接に固定化されたものである、方法。 - 複合体が、さらに、固体支持体に固定化された、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナーを含有する、請求項1に記載の方法。
- 複合体が、固体支持体に固定化された測定対象物質を含有する、請求項1に記載の方法。
- 前記(i)は、測定対象物質を含む液体試料と、測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤とを接触させ、測定対象物質と検出剤とを含有する複合体を形成させる工程である、
請求項1に記載の方法。 - 前記工程(i)は、前記接触と同時又は接触後に、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナーが予め固定化された固体支持体と接触させる工程をさらに含有するものであり、
前記(ii)は、固体支持体上に形成された複合体に含まれるレポーター物質からのシグナルを測定する工程である、
請求項4に記載の方法。 - 前記工程(i)は、測定対象物質が予め固定化された固体支持体を含有する反応系内で実施される工程であり、
前記(ii)は、固体支持体上に形成された複合体に含まれるレポーター物質からのシグナルを測定する工程である、
請求項4に記載の方法。 - 前記(i)は、測定対象物質を含む液体試料と、測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤と、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナーが予め固定化された固体支持体とを少なくとも使用する工程であって、
第二の結合パートナーが予め固定化された固体支持体と、測定対象物質を含む液体試料とを接触させ、次いで測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤を接触させることにより測定対象物質と検出剤とを含有する複合体を形成させる工程であり、
前記(ii)は、固体支持体上に形成された複合体に含まれるレポーター物質からのシグナルを測定する工程である、
請求項1に記載の方法。 - 固体支持体が、マイクロプレート、磁性粒子、多孔性膜及びマイクロ流体チップからなる群より選ばれる、請求項2、3及び5〜7の何れか一項に記載の方法。
- 固体支持体が、磁性粒子である、請求項8に記載の方法。
- 磁性粒子の平均粒子径が、0.3〜3μmである、請求項9に記載の方法。
- 金ナノ粒子の平均粒子径が、20〜150nmである、請求項1〜10の何れか一項に記載の方法。
- 結合パートナーが、抗原又は抗体若しくはその抗原結合性断片である、請求項1〜11の何れか一項に記載の方法。
- 結合パートナーが、抗体又はその抗原結合性断片である、請求項12に記載の方法。
- レポーター物質が、ラジオアイソトープ、酵素、蛍光物質及び発光物質からなる群より選ばれる、請求項1〜13の何れか一項に記載の方法。
- レポーター物質が、電気化学的に活性な発光物質、又は電気化学活性物質を反応生成物として生じる酵素である、請求項1〜13の何れか一項に記載の方法。
- 液体試料が生体液である、請求項4〜15の何れか一項に記載の方法。
- 測定対象物質を特異的に認識する第一の結合パートナー、複数のレポーター物質及び金ナノ粒子からなる検出剤であって、
第一の結合パートナーは、金ナノ粒子に直接に固定化されたものであり、
レポーター物質は、第一の結合パートナー又は金ナノ粒子に直接に固定化されたものであり、
レポーター物質は、第一の結合パートナーに結合した測定対象物質の量に相関した強度のシグナルを発生できるものである、
対象物質を測定するための検出剤。 - 金ナノ粒子の平均粒子径が、20〜150nmである、請求項17に記載の検出剤。
- 結合パートナーが、抗原又は抗体若しくはその抗原結合性断片である、請求項17又は18に記載の検出剤。
- 結合パートナーが、抗体又はその抗原結合性断片である、請求項19に記載の検出剤。
- レポーター物質が、ラジオアイソトープ、酵素、蛍光物質及び発光物質からなる群より選ばれる、請求項17〜20の何れか一項に記載の検出剤。
- レポーター物質が、電気化学的に活性な発光物質、又は電気化学活性物質を反応生成物として生じる酵素である、請求項17〜20の何れか一項に記載の検出剤。
- レポーター物質は、第一の結合パートナーに直接に固定化されたものである、請求項17〜22の何れか一項に記載の検出剤。
- 対象物質を測定するためのキットであって、
請求項17〜23の何れか一項に記載の検出剤、及び複合体形成部を備えた固体支持体からなるデバイスを含有し、
デバイスの複合体形成部は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化されたものである、キット。 - 対象物質を測定するためのキットであって、
請求項17〜23の何れか一項に記載の検出剤と、複合体形成剤保持部及び複合体捕捉部を備えた固体支持体からなるデバイスとを含有するものであり、
デバイスの複合体形成剤保持部は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化された磁性粒子からなる複合体形成剤を含有し、
デバイスの複合体捕捉部は、磁場が適用されることにより複合体形成剤を捕捉する機構を備えたものである、キット。 - 対象物質を測定するためのキットであって、
請求項17〜23の何れか一項に記載の検出剤、複合体形成剤、及び複合体捕捉部を備えた固相支持体からなるデバイスを含有するものであり、
複合体形成剤は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化された磁性粒子からなるものであり、
デバイスの複合体捕捉部は、磁場が適用されることにより複合体形成剤を捕捉する機構を備えたものである、キット。 - 固体支持体が、マイクロプレート、磁性粒子、多孔性膜及びマイクロ流体チップからなる群より選ばれる、請求項24に記載のキット。
- 固体支持体が、マイクロ流体チップである、請求項25又は26に記載のキット。
- 磁性粒子の平均粒子径が、0.3〜3μmである、請求項25〜28の何れか一項に記載のキット。
- 請求項24〜29の何れか一項に記載のキット、及び前記キットに含まれるデバイスを着脱可能なデバイス装着部と前記キットに含まれる検出剤のレポーター物質から発生したシグナルを測定することができるシグナル検出部とを備えた測定装置を含有してなる、免疫測定システム。
- 対象物質を測定するためのデバイスであって、
検出剤保持部、及び複合体形成部を備えた固体支持体からなり、
検出剤保持部は、請求項17〜23の何れか一項に記載の検出剤を含有し、
複合体形成部は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化されたものである、デバイス。 - 対象物質を測定するためのデバイスであって、
検出剤保持部、複合体形成剤保持部、及び複合体捕捉部を備えた固体支持体からなり、
検出剤保持部は、請求項17〜23の何れか一項に記載の検出剤を含有し、
複合体形成剤保持部は、測定対象物質を特異的に認識する第二の結合パートナー又は測定対象物質が固定化された磁性粒子からなる複合体形成剤を含有し、
複合体捕捉部は、磁場が適用されることにより複合体形成剤を捕捉する機構を備えたものである、デバイス。 - 固体支持体が、多孔性膜又はマイクロ流体チップである、請求項31に記載のデバイス。
- 固体支持体が、マイクロ流体チップである、請求項32に記載のデバイス。
- 磁性粒子の平均粒子径が、0.3〜3μmである、請求項32又は34に記載のデバイス。
- 請求項31〜35の何れか一項に記載のデバイス、及び前記デバイスを着脱可能なデバイス装着部と前記デバイスの検出剤保持部に含まれる検出剤のレポーター物質から発生したシグナルを検出することができるシグナル検出部を備えた測定装置を含有してなる、免疫測定システム。
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017210952A JP7041491B2 (ja) | 2017-10-31 | 2017-10-31 | バイオアッセイのための検出剤及びそれを用いたシグナルの増幅方法 |
US16/760,081 US20200326338A1 (en) | 2017-10-31 | 2018-10-31 | Detection agent for bioassay and signal amplification method using same |
PCT/JP2018/040435 WO2019088142A1 (ja) | 2017-10-31 | 2018-10-31 | バイオアッセイのための検出剤及びそれを用いたシグナルの増幅方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017210952A JP7041491B2 (ja) | 2017-10-31 | 2017-10-31 | バイオアッセイのための検出剤及びそれを用いたシグナルの増幅方法 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019082446A true JP2019082446A (ja) | 2019-05-30 |
JP2019082446A5 JP2019082446A5 (ja) | 2020-09-10 |
JP7041491B2 JP7041491B2 (ja) | 2022-03-24 |
Family
ID=66331896
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017210952A Active JP7041491B2 (ja) | 2017-10-31 | 2017-10-31 | バイオアッセイのための検出剤及びそれを用いたシグナルの増幅方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20200326338A1 (ja) |
JP (1) | JP7041491B2 (ja) |
WO (1) | WO2019088142A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105517756B (zh) | 2014-07-11 | 2017-06-13 | 东芝机械株式会社 | 具备异物排出机构的工业机械 |
US20200278349A1 (en) * | 2019-02-28 | 2020-09-03 | University Of Utah Research Foundation | Biohazard analyzer |
CN116183909B (zh) * | 2023-05-04 | 2023-08-22 | 华南理工大学 | 基于聚集诱导发光微球及磁性分离技术的免疫检测方法 |
CN117310164B (zh) * | 2023-11-27 | 2024-02-27 | 山东康华生物医疗科技股份有限公司 | 一种丙型肝炎病毒核心抗原检测试纸条及试剂盒 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0772155A (ja) * | 1992-11-20 | 1995-03-17 | Mitsubishi Chem Corp | 抗原・抗体反応の測定方法 |
WO2012168991A1 (ja) * | 2011-06-06 | 2012-12-13 | パナソニック株式会社 | 抗原を検出する方法 |
WO2015060269A1 (ja) * | 2013-10-21 | 2015-04-30 | 国立大学法人大阪大学 | 被験物質の濃度測定方法および検出装置 |
WO2015112558A2 (en) * | 2014-01-21 | 2015-07-30 | Abaxis, Inc. | Peptides, devices, and methods for the detection of anaplasma antibodies |
JP2016011943A (ja) * | 2013-12-24 | 2016-01-21 | 株式会社リコー | 分析デバイス |
JP2016211967A (ja) * | 2015-05-08 | 2016-12-15 | プリマハム株式会社 | イムノクロマト法によるアレルゲンの検出方法 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5853703B2 (ja) * | 2010-02-02 | 2016-02-09 | コニカミノルタ株式会社 | アナライト検出プローブ、アナライト検出試薬およびこれを用いたアナライトの検出方法 |
JP2011242387A (ja) * | 2010-04-21 | 2011-12-01 | Osaka Prefecture Univ | 生物学的物質の捕獲又は分離用複合微粒子 |
GB201113992D0 (en) * | 2011-08-12 | 2011-09-28 | Molecular Vision Ltd | Device |
JP2013151454A (ja) * | 2012-01-25 | 2013-08-08 | Japan Atomic Energy Agency | タンパク質が固定化された金担体およびその製造法 |
-
2017
- 2017-10-31 JP JP2017210952A patent/JP7041491B2/ja active Active
-
2018
- 2018-10-31 WO PCT/JP2018/040435 patent/WO2019088142A1/ja active Application Filing
- 2018-10-31 US US16/760,081 patent/US20200326338A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0772155A (ja) * | 1992-11-20 | 1995-03-17 | Mitsubishi Chem Corp | 抗原・抗体反応の測定方法 |
WO2012168991A1 (ja) * | 2011-06-06 | 2012-12-13 | パナソニック株式会社 | 抗原を検出する方法 |
WO2015060269A1 (ja) * | 2013-10-21 | 2015-04-30 | 国立大学法人大阪大学 | 被験物質の濃度測定方法および検出装置 |
JP2016011943A (ja) * | 2013-12-24 | 2016-01-21 | 株式会社リコー | 分析デバイス |
WO2015112558A2 (en) * | 2014-01-21 | 2015-07-30 | Abaxis, Inc. | Peptides, devices, and methods for the detection of anaplasma antibodies |
JP2017505436A (ja) * | 2014-01-21 | 2017-02-16 | アバクシス, インコーポレイテッド | アナプラズマ抗体を検出するためのペプチド、器具、および方法 |
JP2016211967A (ja) * | 2015-05-08 | 2016-12-15 | プリマハム株式会社 | イムノクロマト法によるアレルゲンの検出方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
RONGJING CUI、外4名: "Horseradish peroxidase-functionalized gold nanoparticle label for amplified immunoanalysis based on", BIOSENS BIOELECTRON, vol. 23, no. 11, JPN6021029750, 15 June 2008 (2008-06-15), pages 1666 - 1673, XP022625054, ISSN: 0004560526, DOI: 10.1016/j.bios.2008.01.034 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP7041491B2 (ja) | 2022-03-24 |
WO2019088142A1 (ja) | 2019-05-09 |
US20200326338A1 (en) | 2020-10-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Gao et al. | Metal and metal oxide nanoparticles to enhance the performance of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) | |
RU2444736C2 (ru) | Детектирование молекул-мишеней в пробе | |
CN103443626B (zh) | 链霉亲和素结合磁性粒子及其制造方法 | |
WO2019088142A1 (ja) | バイオアッセイのための検出剤及びそれを用いたシグナルの増幅方法 | |
Aydin et al. | Advances in immunosensor technology | |
US20150104810A1 (en) | Lateral flow strip assay with immobilized conjugate | |
EA017380B1 (ru) | Определение антигенов, расположенных на эритроцитах, и антиэритроцитарных антител | |
WO2010137532A1 (ja) | 検出対象の検出方法及び定量方法 | |
US20080268481A1 (en) | Sensitive Magnetic Catch Assay By Building a Strong Binding Couple | |
JP2013231739A (ja) | 飽和アッセイ | |
JP2013213803A (ja) | クロマトグラフキット及びクロマトグラフ方法 | |
Ha et al. | Recent developments in innovative magnetic nanoparticles-based immunoassays: from improvement of conventional immunoassays to diagnosis of COVID-19 | |
CN109164255A (zh) | 一种超灵敏检测小分子物质的方法 | |
JP5006459B1 (ja) | 標識用複合粒子 | |
JP2021529940A (ja) | 側方流動アッセイのシグナルを増幅させるシステム、装置および方法 | |
KR102064961B1 (ko) | 자성 나노입자 및 이를 이용한 측방유동 분석에서의 신호 증폭 방법 | |
US20160341723A1 (en) | Au nanoparticles encapsulated in nanocompoites and applications thereof in rapid detection of an analyte | |
JP5104622B2 (ja) | 磁性粒子を用いた測定対象物質の濃度測定法 | |
Nan et al. | Lateral flow immunoassay for proteins | |
KR101612094B1 (ko) | 표적-특이적 프로브와 표지물질-항체 복합체를 포함하는 바이오마커 탐지용 조성물 및 이의 이용방법 | |
Thepwiwatjit et al. | Rubpy dye-doped silica nanoparticles as signal reporter in a dot fluorescence immunoassay strip | |
Althomali et al. | Applications of magnetic nanomaterials in the fabrication of lateral flow assays toward increasing performance of food safety analysis: Recent advances | |
US20220308047A1 (en) | Probes comprising metal nanoparticles, magnetic nanoparticles and target-specific fluorophores or binding sites | |
Zhang et al. | Development of a Novel Sensor System Based on Magnetic Microspheres to Detect Cardiac Troponin T | |
JP2010002393A (ja) | 標的物質の検出方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200727 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200727 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210121 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210319 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210802 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211001 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220214 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220311 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7041491 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |