JP2018532015A - 油組成物および製造方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、ポリ不飽和脂肪酸に富む油組成物；濃縮油組成物を含有する組成物；ならびに濃縮油組成物の製造および使用方法に関する。油は好ましくは微生物油またはマリンオイルである。【選択図】なし

Description

発明の詳細な説明

［関連出願の相互参照］
本出願は、２０１５年１０月５日出願の米国仮特許出願第６２／２３７，３２０号の出願日の優先権を主張するものであり、その出願の開示は、その全内容を参照により本明細書に本明細書によって援用される。

［発明の分野］
ポリ不飽和脂肪酸に富む油組成物；油組成物を含有する組成物；ならびに油組成物の製造および使用方法が本明細書に開示される。油は好ましくは、微生物油またはマリンオイルである。

［発明の背景］
脂肪酸は、炭素鎖の長さおよび飽和特性に基づいて分類される。脂肪酸は、鎖中に存在する炭素の数に基づいて短鎖、中鎖、または長鎖脂肪酸と称され、二重もしくは三重結合が炭素原子間に存在しない場合には飽和脂肪酸と称され、二重もしくは三重結合が存在する場合には不飽和脂肪酸と称される。不飽和長鎖脂肪酸は、たった１個の二重もしくは三重結合が存在する場合にはモノ不飽和であり、２個以上の二重もしくは三重結合が存在する場合にはポリ不飽和である。

ポリ不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）は、脂肪酸のメチル末端からの第１二重結合の位置に基づいて分類され；オメガ−３（ｎ−３）脂肪酸は、メチル末端から数えて３番目の炭素で第１二重結合を含有し、一方、オメガ−６（ｎ−６）脂肪酸は、６番目の炭素で第１二重結合を含有する。例えば、ドコサヘキサエン酸（「ＤＨＡ」）は、２２個の炭素の鎖長および６個の二重結合を持ったオメガ−３の長鎖ポリ不飽和脂肪酸（ＬＣ−ＰＵＦＡ）であり、多くの場合「２２：６ ｎ−３」と称される。他のオメガ−３ ＬＣ−ＰＵＦＡは、「２０：５ ｎ−３」と称される、エイコサペンタエン酸（「ＥＰＡ」）、および「２２：５ ｎ−３」と称される、オメガ−３ ドコサペンタエン酸（「ＤＰＡ ｎ−３」）を含む。オメガ−６ ＬＣ−ＰＵＦＡは、「２０：４ ｎ−６」と称される、アラキドン酸（「ＡＲＡ」）、および「２２：５ ｎ−６」と称される、オメガ−６ ドコサペンタエン酸（「ＤＰＡ ｎ−６」）を含む。

オメガ−３脂肪酸は、細胞膜におけるそれらの存在により細胞生理に影響を及ぼす生物学的に重要な分子であり、生物学的に活性な化合物の生成および遺伝子発現を調整し、生合成基質として機能する。Ｒｏｃｈｅ，Ｈ．Ｍ．，Ｐｒｏｃ．Ｎｕｔｒ．Ｓｏｃ．５８：３９７−４０１（１９９９）。ＤＨＡは、例えば、ヒト大脳皮質における脂質を作る脂肪酸のおおよそ１５〜２０％、網膜における脂質を作る脂肪酸の３０〜６０％を占め、睾丸および精液に濃縮され、母乳の重要な成分である。Ｂｅｒｇｅ，Ｊ．Ｐ．、およびＢａｒｎａｔｈａｎ，Ｇ．Ａｄｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｅｎｇ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．９６：４９−１２５（２００５）。ＤＨＡは、脳におけるオメガ−３脂肪酸の９７％まで、および網膜におけるオメガ−３脂肪酸の９３％までを占める。さらに、ＤＨＡは、胎児および幼児成長の両方ならびに成人における認知機能の維持のために必須である。同上。オメガ−３脂肪酸はヒト身体において新たに合成されないので、これらの脂肪酸は、栄養源に由来しなければならない。しかし、オメガ−３脂肪酸源は、産生されるＬＣ−ＰＵＦＡの同一性および量の点で変わり得る。したがって、望ましいＬＣ−ＰＵＦＡプロフィールの豊富な量のＬＣ−ＰＵＦＡを有するオメガ−３脂肪酸源の、およびより高い濃度のＬＣ−ＰＵＦＡを含有する油の必要性が継続的に存在する。以前の濃縮方法は、所望の濃度レベルを達成するために多数のステップを必要とし、多くの場合所望のＬＣ−ＰＵＦＡ含有量またはプロフィールを得られないと同時に非効率的なプロセスをもたらすことが示されている。他の公知の方法は、費用がかかり、時間がかかる。さらに、以前の濃縮方法は、所望のＬＣ−ＰＵＦＡ含有量およびプロフィールを提供する１つの連続プロセスでの分離および濃縮の方法を提供していない。本発明者らは、ＬＣ−ＰＵＦＡのより高い濃度を有する望ましいＬＣ−ＰＵＦＡプロフィールを生み出すためのポリ不飽和脂肪酸を含む油の分離および濃縮の方法であって、以前の方法よりも費用がかからず、時間がかからない方法を意外にも見いだした。

［発明の概要］
本発明は、エステル画分を含む油であって、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約７０重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、エステル画分中の脂肪酸の約０．５重量％〜約５重量％がドコサペンタエン酸 ｎ−３（ＤＰＡ ｎ−３）である油を指向する。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約５重量％未満がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）である。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約０．１重量％〜約５重量％がＥＰＡである。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約２重量％〜約８重量％がＤＰＡ ｎ−６である。いくつかの実施形態においては、エステル画分は、油の少なくとも約７０重量％を構成する。

本発明は、エステル画分を含む油であって、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約７０重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、エステル画分中の脂肪酸の約３重量％〜約１３重量％がドコサペンタエン酸 ｎ−３（ＤＰＡ ｎ−３）およびドコサペンタエン酸 ｎ−６（ＤＰＡ ｎ−６）である油を指向する。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約１重量％〜約５重量％がＤＰＡ ｎ−３である。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約２重量％〜約８重量％がＤＰＡ ｎ−６である。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約５重量％未満がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）である。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約０．１重量％〜約５重量％がＥＰＡである。いくつかの実施形態においては、エステル画分は、油の少なくとも約７０重量％を構成する。

本発明はまた、エステル画分を含む油であって、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約７０重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、エステル画分中のＤＨＡの量は、エステル画分中の総オメガ−３脂肪酸少なくとも約６５重量％である油を指向する。一実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約８重量％がＥＰＡである。いくつかの実施形態においては、エステル画分中のＥＰＡの量は、エステル画分中の総オメガ−３脂肪酸の少なくとも約２重量％である。

本発明はまた、エステル画分を含む油であって、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約２０重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約２０重量％がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）である油を指向する。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約０．１重量％〜約５重量％がＤＰＡ ｎ−３である。

本発明はまた、エステル画分を含む油であって、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約３０重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約３０重量％がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）である油を指向する。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約０．１重量％〜約５重量％がＤＰＡ ｎ−３である。

本発明はまた、エステル画分を含む油であって、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約６５重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約１５重量％がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）である油を指向する。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約０．１重量％〜約５重量％がＤＰＡ ｎ−３である。

本発明はまた、エステル画分を含む油であって、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約５０重量％がドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約２５重量％がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）である油を指向する。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約０．１重量％〜約５重量％がＤＰＡ ｎ−３である。

本発明はまた、ポリ不飽和脂肪酸のエステルを含む油の分離および濃縮方法であって、この方法が、油を少なくとも１つの蒸留ステップにかける工程を含み、ここで、第１蒸留ステップが油を少なくとも１つの装置に供給する工程と、低沸点化合物を留出物中に除去するための条件に油をさらす工程とを含む方法を指向する。

いくつかの実施形態においては、油は、微生物油またはマリンオイルである。

いくつかの実施形態においては、油は、微生物から産生される微生物油である。いくつかの実施形態においては、微生物は、微細藻類、バクテリア、真菌類および原生生物を含む群から選択される。

本発明は、本発明の油を含む食物、栄養補助食品、または医薬品組成物を指向する。

［発明の詳細な説明］
本発明の特徴および利点は、以下の詳細な説明を読めば当業者によってより容易に理解され得る。明確にする理由で、別個の実施形態との関連で上におよび下に記載される本発明のある種の特徴がそれらの副次的組み合わせを形成するために組み合わせられてもよいことは十分理解されるべきである。

本明細書において特定される実施形態は、例示的であり、非限定的であることを意図する。

本明細書においておよび後に続く特許請求の範囲において、次の意味を有すると定義されるものとする、多数の用語に言及される：
本発明の説明との関連で（とりわけ後に続く特許請求の範囲との関連で）用語「ア（ａ）」および「アン（ａｎ）」および「ザ（ｔｈｅ）」および類似の指示対象の使用は、特に本明細書で指示されないかまたは文脈によって明らかに矛盾しない限り、単数形および複数形を両方とも包含すると解釈されるべきである。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」は、特に記載のない限り、制約のない用語（すなわち、意味「を含むが、それらに限定されない」）として解釈されるべきである。本明細書での値の範囲の列挙は、特に本明細書で明記しない限り、その範囲内に入る各別個の値に個別に言及する簡単な方法として役立つことを意図するにすぎず、各別個の値は、あたかもそれが本明細書において個別に列挙されているかのように、本明細書に組み込まれる。

ポリ不飽和脂肪酸を含む濃縮油組成物；濃縮油組成物を含有する組成物；ならびに濃縮油組成物の製造および使用方法が本明細書に開示される。

ポリ不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）は、脂肪酸のメチル末端からの第１二重結合の位置に基づいて分類され；オメガ−３（ｎ−３）脂肪酸は、メチル末端から数えて３番目の炭素で第１二重結合を含有し、一方、オメガ−６（ｎ−６）脂肪酸は、６番目の炭素で第１二重結合を含有する。例えば、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）は、２２個炭素の鎖長および６個の二重結合を持ったオメガ−３長鎖ポリ不飽和脂肪酸（ＬＣ−ＰＵＦＡ）であり、多くの場合「２２：６ｎ−３」と称される。一実施形態においては、ＰＵＦＡは、オメガ−３脂肪酸、オメガ−６脂肪酸、およびそれらの混合物から選択される。別の実施形態においては、ＰＵＦＡは、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、アラキドン酸（ＡＲＡ）、ガンマ−リノレン酸（ＧＬＡ）、ジホモ−ガンマ−リノレン酸（ＤＧＬＡ）、ステアリドン酸（ＳＤＡ）、およびそれらの混合物から選択される。別の実施形態においては、ＰＵＦＡは、ＤＨＡ、ＤＰＡ、ＥＰＡ、およびそれらの混合物から選択される。別の実施形態においては、ＰＵＦＡはＤＨＡである。さらなる実施形態においては、ＰＵＦＡはＤＰＡである。その上さらなる実施形態においては、ＰＵＦＡはＥＰＡである。

いくつかの実施形態においては、油は、１種以上のＰＵＦＡを含む。いくつかの実施形態においては、油は、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％のＰＵＦＡを含む。好ましい実施形態においては、ＰＵＦＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＰＵＦＡの重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＰＵＦＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

一実施形態においては、油は、少なくとも約７０重量％、少なくとも約７５重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９１、少なくとも約９２重量％、少なくとも約９３重量％、少なくとも約９４重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９６重量％、少なくとも約９７重量％、少なくとも約９８重量％または少なくとも約９９重量％のＤＨＡを含む。好ましい実施形態においては、ＤＨＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＤＨＡの重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＤＨＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約３％〜約１３％、約４％〜約１２％、約５％〜約１１％、約６％〜約１０％、または約７％〜約９％のＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６を含む。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６はエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６の重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６の重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約０．５％〜約５％、約１％〜約５％、または約３％〜約４％のＤＰＡ ｎ−３を含む。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３はエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３の重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３の重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約２％〜約８％、約３％〜約７％、または約４％〜約６％のＤＰＡ ｎ−６を含む。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−６はエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−６の重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−６の重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のＥＰＡを含む。好ましい実施形態においては、ＥＰＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＥＰＡの重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＥＰＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約０．１％〜約５％、約０．５％〜約３％、または約１％〜約２％のＥＰＡを含む。好ましい実施形態においては、ＥＰＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＥＰＡの重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＥＰＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のＡＲＡを含む。好ましい実施形態においては、ＡＲＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＡＲＡの重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＡＲＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のＧＬＡを含む。好ましい実施形態においては、ＧＬＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＧＬＡの重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＧＬＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のＤＧＬＡを含む。好ましい実施形態においては、ＤＧＬＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＤＧＬＡの重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＤＧＬＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のＳＤＡを含む。好ましい実施形態においては、ＳＤＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＳＤＡの重量％は油の重量％である。好ましい実施形態においては、ＳＤＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満の、２２個よりも大きい炭素を有するポリ不飽和脂肪酸（非常に長鎖のＰＵＦＡ）を含む。いくつかの実施形態においては、非常に長鎖のＰＵＦＡは、７，１０，１３，１６，１９，２２，２５ オクタコサオクタエン酸（Ｃ２８：８）である。好ましい実施形態においては、油は、０％の７，１０，１３，１６，１９，２２，２５ オクタコサオクタエン酸（Ｃ２８：８）を含む。好ましい実施形態においては、非常に長鎖のＰＵＦＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、非常に長鎖のＰＵＦＡの重量％は油の重量％である。好ましい実施形態においては、非常に長鎖のＰＵＦＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

一実施形態においては、油は、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％または少なくとも約９９％のＥＰＡを含む。好ましい実施形態においては、ＥＰＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＥＰＡの重量％は油の重量％である。好ましい実施形態においては、ＥＰＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のＤＨＡを含む。好ましい実施形態においては、ＤＨＡはエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＤＨＡの重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＤＨＡの重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６を含む。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６はエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６の重量％は油の重量％である。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６の重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のＤＰＡ ｎ−３を含む。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３はエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３の重量％は油の重量％である。より好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−３の重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のＤＰＡ ｎ−６を含む。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−６はエステル形態にある。より好ましい実施形態においては、エステルはエチルエステルである。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−６の重量％は油の重量％である。好ましい実施形態においては、ＤＰＡ ｎ−６の重量％はエステル画分中の脂肪酸の重量％である。

いくつかの実施形態においては、油はエステル画分を含み、ここで、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約５０重量％、少なくとも約５５重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約６５重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約７５重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９１重量％、少なくとも約９２重量％、少なくとも約９３重量％、少なくとも約９４重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９６重量％、少なくとも約９７重量％、少なくとも約９８重量％、または少なくとも約９９重量％は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）であり、エステル画分中のＤＨＡの量は、エステル画分中の総オメガ−３脂肪酸の少なくとも約６５重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約７５重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％である。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約８重量％、少なくとも約１０重量％、少なくとも約１５重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約３５重量％、少なくとも約４０重量％はＥＰＡである。いくつかの実施形態においては、エステル画分中のＥＰＡの量は、エステル画分中の総オメガ−３脂肪酸の少なくとも約２重量％、少なくとも約３重量％、少なくとも約４重量％、少なくとも約５重量％、少なくとも約１０重量％、少なくとも約１５重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約２５重量％である。

いくつかの実施形態においては、油は、油の少なくとも約５０重量％、少なくとも約５５重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約６５重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約７５重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９１重量％、少なくとも約９２重量％、少なくとも約９３重量％、少なくとも約９４重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９６重量％、少なくとも約９７重量％、少なくとも約９８重量％、または少なくとも約９９重量％のエステル画分を含む。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約７０重量％、少なくとも約７５重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９１重量％、少なくとも約９２重量％、少なくとも約９３重量％、少なくとも約９４重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９６重量％、少なくとも約９７重量％、少なくとも約９８重量％または少なくとも約９９重量％はＤＨＡである。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の約０．５重量％〜約５重量％、約１重量％〜約５重量％、または約３重量％〜約４重量％はＤＰＡ ｎ−３である。

いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸の少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９１重量％、少なくとも約９２重量％、少なくとも約９３重量％、少なくとも約９４重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９６重量％、少なくとも約９７重量％、少なくとも約９８重量％または少なくとも約９９重量％は、ＤＨＡおよびＤＰＡ ｎ−３である。

いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡ含有量は、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡおよびＤＰＡ ｎ−３含有量の量の少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９１重量％、少なくとも約９２重量％、少なくとも約９３重量％、少なくとも約９４重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９６重量％、少なくとも約９７重量％、少なくとも約９８重量％または少なくとも約９９重量％である。

いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＤＰＡ ｎ−３含有量は、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡおよびＤＰＡ ｎ−３含有量の約０．５％〜約５％、約１％〜約５％、または約３％〜約４％である。

いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡ、ＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６含有量は、エステル画分中の脂肪酸の総量の少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％または少なくとも約９９％である。

いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡ含有量は、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡ、ＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６含有量の少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％または少なくとも約９９％である。

好ましい実施形態においては、エステル画分はエチルエステルである。

一実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡおよびＥＰＡ含有量は、エステル画分中の脂肪酸の総量の少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％または少なくとも約９９％である。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡ含有量は、エステル画分中の脂肪酸の総量の少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９１重量％、少なくとも約９２重量％、少なくとも約９３重量％、少なくとも約９４重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９６重量％、少なくとも約９７重量％、少なくとも約９８重量％または少なくとも約９９重量％の量である。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＥＰＡ含有量は、エステル画分中の脂肪酸の総量の約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満である。好ましい実施形態においては、エステル画分はエチルエステルである。

一実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡおよびＥＰＡ含有量は、エステル画分中の脂肪酸の総量の少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％または少なくとも約９９％である。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＥＰＡ含有量は、脂肪酸の総量の少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９１重量％、少なくとも約９２重量％、少なくとも約９３重量％、少なくとも約９４重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９６重量％、少なくとも約９７重量％、少なくとも約９８重量％または少なくとも約９９重量％である。いくつかの実施形態においては、エステル画分中の脂肪酸のＤＨＡ含有量は、エステル画分中の脂肪酸の総量の約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２．５％未満、約２％未満、約２％未満、約１．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満である。好ましい実施形態においては、エステル画分はエチルエステルである。

いくつかの実施形態においては、油の総異性体値は、５％未満、４．５％未満、４％未満、３．５％未満、３％未満、２．５％未満、２％未満、１．５％未満、１％未満、０．５％未満、０．１％未満、または０％である。

いくつかの実施形態においては、油のＥＰＡ異性体値は、５％未満、４．５％未満、４％未満、３．５％未満、３％未満、２．５％未満、２％未満、１．５％未満、１％未満、０．５％未満、０．１％未満、または０％である。

いくつかの実施形態においては、油のＤＨＡ異性体値は、５％未満、４．５％未満、４％未満、３．５％未満、３％未満、２．５％未満、２％未満、１．５％未満、１％未満、０．５％未満、０．１％未満、または０％である。

いくつかの実施形態においては、油の１グラム当たりの油中のＤＨＡの量は、約１００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約９００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約８００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、または０〜約１００ｍｇである。

いくつかの実施形態においては、油の１グラム当たりの油中のＥＰＡの量は、約１００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約９００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約８００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、または０〜約１００ｍｇである。

いくつかの実施形態においては、油は、微生物油またはマリンオイルである。

微生物によって産生されるまたは微生物細胞から得られる油は、「微生物油」と言われる。藻類および／または真菌類によって産生される油は、それぞれ、藻類油および／または真菌類油と言われる。

本明細書で用いるところでは、「微生物」は、藻類、バクテリア、真菌類、原生生物、酵母、およびそれらの組み合わせなどの生物、例えば、単細胞生物を言う。微生物は、黄金色藻類（例えば、ストラメノパイル（Ｓｔｒａｍｅｎｏｐｉｌｅｓ）界の微生物）；緑藻類；珪藻；渦鞭毛藻（例えば、例えばクリプテコジニウム・コーニー（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ ｃｏｈｎｉｉ）つまりＣ．コーニー（Ｃ．Ｃｏｈｎｉｉ）などの属クリプテコジニウム（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ）のメンバーを含む目ジノフィセアエ（Ｄｉｎｏｐｈｙｃｅａｅ）の微生物）；目トラウストキトリアレス（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉａｌｅｓ）の微細藻類；酵母（アスコマイセテス（Ａｓｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）またはバシジオマイセテス（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅｓ））；ならびに属ムコール（Ｍｕｃｏｒ）、モルティエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）およびモルティエラ・セクト・スクムケリ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｓｅｃｔ ｓｃｈｍｕｃｋｅｒｉ）を含むが、それらに限定されない、モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）、およびピシウム・インシジオスム（Ｐｙｔｈｉｕｍ ｉｎｓｉｄｉｏｓｕｍ）を含むが、それらに限定されないピシウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）の真菌類を含むが、それらに限定されない。

一実施形態においては、微生物は、属モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）、属クリプテコジニウム（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ）、属トラウストキトリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、およびそれらの混合物からである。さらなる実施形態においては、微生物は、クリプテコジニウム・コーニー（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ Ｃｏｈｎｉｉ）からである。さらなる実施形態においては、微生物は、モルティエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）からである。さらにさらなる実施形態においては、微生物は、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ．）からである。その上さらにさらなる実施形態においては、微生物は、クリプテコジニウム・コーニー（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ Ｃｏｈｎｉｉ）、モルティエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ．）、およびそれらの混合物から選択される。

さらにさらなる実施形態においては、微生物は、属モルティエラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）、属コニジオボラス（Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌｕｓ）、属ピシウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）、属フィトフトラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）、属ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、属クラドスポリウム（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）、属ムコール（Ｍｕｃｏｒ）、属フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、属アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、属ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）、属エントモフトラ（Ｅｎｔｏｍｏｐｈｔｈｏｒａ）、属エキノスポランギウム（Ｅｃｈｉｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ）、および属サプロレグニア（Ｓａｐｒｏｌｅｇｎｉａ）に属する微生物を含むが、それらに限定されない。

さらにさらなる実施形態においては、微生物は、属トラウストキトリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）（種は、アルジメンタレ（ａｒｕｄｉｍｅｎｔａｌｅ）、アウレウム（ａｕｒｅｕｍ）、ベンチコラ（ｂｅｎｔｈｉｃｏｌａ）、グロボスム（ｇｌｏｂｏｓｕｍ）、キネイ（ｋｉｎｎｅｉ）、モチブム（ｍｏｔｉｖｕｍ）、マルチルジメンタル（ｍｕｌｔｉｒｕｄｉｍｅｎｔａｌｅ）、パキデルマム（ｐａｃｈｙｄｅｒｍｕｍ）、プロリフェルム（ｐｒｏｌｉｆｅｒｕｍ）、ロゼウム（ｒｏｓｅｕｍ）、ストリアツム（ｓｔｒｉａｔｕｍ）を含む）；属シゾキトリウム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）（種は、アグレガツム（ａｇｇｒｅｇａｔｕｍ）、リムナセウム（ｌｉｍｎａｃｅｕｍ）、マングロベイ（ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）、ミヌツム（ｍｉｎｕｔｕｍ）、オクトスポルム（ｏｃｔｏｓｐｏｒｕｍ）を含む）；属ウルケニア（Ｕｌｋｅｎｉａ）（種は、アモエボイデア（ａｍｏｅｂｏｉｄｅａ）、ケルグエレンシス（ｋｅｒｇｕｅｌｅｎｓｉｓ）、ミヌタ（ｍｉｎｕｔａ）、プロフンダ（ｐｒｏｆｕｎｄａ）、ラジアテ（ｒａｄｉａｔｅ）、サイレンス（ｓａｉｌｅｎｓ）、サルカリアナ（ｓａｒｋａｒｉａｎａ）、シゾキトロップス（ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｏｐｓ）、ビスルゲンシス（ｖｉｓｕｒｇｅｎｓｉｓ）、ヨルケンシス（ｙｏｒｋｅｎｓｉｓ）を含む）；属オーランチアコキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉａｃｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）；属オブロンギチトリウム（Ｏｂｌｏｎｇｉｃｈｙｔｒｉｕｍ）；属シコイドチトリウム（Ｓｉｃｙｏｉｄｏｃｈｙｔｉｕｍ）；属パリエンティチトリウム（Ｐａｒｉｅｎｔｉｃｈｙｔｒｉｕｍ）；属ボトリオキトリウム（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）；およびそれらの組み合わせを含むが、それらに限定されない、目トラウストキトリアレス（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉａｌｅｓ）の微細藻類からである。ウルケニア（Ｕｌｋｅｎｉａ）内に記載された種は、属シゾキトリウム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）のメンバーであると考えられるであろう。別の実施形態においては、微生物は、目トラウストキトリアレス（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉａｌｅｓ）からである。その上別の実施形態においては、微生物は、トラウストキトリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）からである。さらにさらなる実施形態においては、微生物は、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ．）からである。

ある種の実施形態においては、油は、マリンオイルを含むことができる。好適な魚油の例は、大西洋魚油、太平洋魚油、もしくは地中海魚油、またはそれらの任意の混合物もしくは組み合わせを含むが、それらに限定されない。より具体的な例では、好適な魚油は、それらの任意の混合物もしくは組み合わせを含めて、タラ（ｐｏｌｌａｃｋ）油、カツオ油、マイワシ油、テラピア油、マグロ油、シーバス油、ハリバ油、スペアフィッシュオイル、バラクーダ油、タラ（ｃｏｄ）油、メンハーデン油、イワシ油、アンチョビ油、カペリン油、ニシン油、サバ油、サケ科魚油、マグロ油、および鮫油であり得るが、それらに限定されない。本明細書での使用に好適な他のマリンオイルは、それらの任意の混合物もしくは組み合わせを含めて、イカ油、コウイカ油、タコ油、オキアミ油、アザラシ油、鯨油を含むが、それらに限定されない。

いくつかの実施形態においては、本明細書に記載されるような脂肪酸は、脂肪酸エステルまたはエステルであり得る。いくつかの実施形態においては、脂肪酸エステルは、オメガ−３脂肪酸、オメガ−６脂肪酸、およびそれらの組み合わせのエステルを含む。いくつかの実施形態においては、脂肪酸エステルは、ＤＨＡエステル、ＥＰＡエステル、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態においては、本明細書に記載されるような油またはその画分は、脂肪酸エステルを含む油またはその画分を生成するためにエステル化される。用語「エステル」は、脂肪酸分子のカルボン酸基の水素の別の置換基での置き換えを意味する。エステルの例としては、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ｔ−ブチル、ベンジル、ニトロベンジル、メトキシベンジル、ベンズヒドリル、およびトリクロロエチルが挙げられる。いくつかの実施形態においては、エステルは、カルボン酸保護エステル基、アラルキル（例えば、ベンジル、フェネチル）のエステル、低級アルケニル（例えば、アリル、２−ブテニル）のエステル、低級アルコキシ−低級アルキル（例えば、メトキシメチル、２−メトキシエチル、２−エトキシエチル）のエステル、低級アルカノイル−低級アルキル（例えば、アセトキシメチル、ピバロイルオキシメチル、１−ピバロイルオキシエチル）のエステル、低級アルコキシカルボニル−低級アルキル（例えば、メトキシカルボニルメチル、イソプロポキシカルボニルメチル）のエステル、カルボキシ−低級アルキル（例えば、カルボキシメチル）のエステル、低級アルコキシカルボニルオキシ−低級アルキル（例えば、１−（エトキシカルボニルオキシ）エチル、１−（シクロヘキシルオキシカルボニルオキシ）エチル）のエステル、カルバモイルオキシ−低級アルキル（例えば、カルボモイルオキシメチル）のエステルなどである。いくつかの実施形態においては、加えられる置換基は、線状もしくは環式炭化水素基、例えば、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、またはＣ１〜Ｃ６アリールエステルである。いくつかの実施形態においては、エステルは、アルキルエステル、例えば、メチルエステル、エチルエステルまたはプロピルエステルである。いくつかの実施形態においては、エステル置換基は、脂肪酸が精製または半精製状態にある場合に遊離脂肪酸分子に付加される。

脂肪酸エステル、特にポリ不飽和脂肪酸エステルは、当業者に公知である方法で製造することができる。

例えば、脂肪酸、特にポリ不飽和脂肪酸を含有するトリ−アシルグリセリド、ジ−アシルグリセリド、および／またはモノ−アシルグリセリドは、エステルを生成するために酸または塩基の存在下でアルコールと反応させることができる。米国特許出願第１２／１６３，５５５号明細書、米国特許出願供与前（Ｐｒｅ−Ｇｒａｎｔ）公開第２００９／００２３８０８号明細書として公開されたものの開示は、その全体を本明細書に参照により援用される。

アルコールは、例えば、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルアルコール、例えば、エタノール、メタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、イソ−ブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、ｎ−ペンタノール、およびｎ−ヘキサノールを含むことができる。アルコールは、単独あるいは共溶媒と一緒のどちらかで、反応溶媒および共溶媒として使用することができる。アルコールの量は、あたかも明確に全部書き出されているかのようにそれらの間のすべての値および部分的な範囲を含めて、反応混合物の２５重量％〜５０重量％の範囲であることができる。例えば、反応混合物中のアルコールの量は、反応混合物の３０重量％、３５重量％、４０重量％または４５重量％であり得る。

塩基は、例えば、金属アルコキシドであり得る。金属アルコキシドは、ナトリウムエトキシド、ナトリウムメトキシド、ナトリウムｎ−プロポキシド、ナトリウムイソ−プロポキシド、ナトリウムｎ−ブトキシド、ナトリウムイソ−ブトキシド、ナトリウムｓｅｃ−ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、ナトリウムｎ−ペントキシド、ナトリウムｎ−ヘキソキシド、リチウムエトキシド、リチウムメトキシド、リチウムｎ−プロポキシド、リチウムイソ−プロポキシド、リチウムｎ−ブトキシド、リチウムイソ−ブトキシド、リチウムｓｅｃ−ブトキシド、リチウムｔｅｒｔ−ブトキシド、リチウムｎ−ペントキシド、リチウムｎ−ヘキソキシド、カリウムエトキシド、カリウムメトキシド、カリウムｎ−プロポキシド、カリウムイソ−プロポキシド、カリウムｎ−ブトキシド、カリウムイソ−ブトキシド、カリウムｓｅｃ−ブトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、カリウムｎ−ペントキシド、および／またはカリウムｎ−ヘキソキシドを含む。

いくつかの状況においては、塩基は、ナトリウム金属、カリウム金属、またはリチウム金属をアルコール溶液に添加することによって製造することができる。

いくつかの状況においては、塩基は、水素化リチウム、水素化ナトリウム、または水素化カリウムなどの、金属水素化物をアルコール溶液に添加することによって製造することができる。

塩基対油の比は、重量ベースで、あたかも明確に全部書き出されているかのようにそれらの間のすべての値および部分的な範囲を含めて、１：１〜１０００：１である。例えば、塩基対油の比は、重量対重量ベースで、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、２０：１、３０：１、４０：１、５０：１、６０：１、７０：１、８０：１、９０：１、１００：１、２００：１、３００：１、４００：１、５００：１、６００：１、７００：１、８００：１、または９００：１であり得る。

エステル化反応は、あたかも明確に全部書き出されているかのようにそれらの間のすべての値および部分的な範囲を含めて、１０℃〜１００℃の範囲の温度で行うことができる。例えば、エステル化反応は、２０℃、３０℃、４０℃、５０℃、６０℃、７０℃、８０℃、または９０℃で行うことができる。

エステル化反応は、大気に開放して、または窒素もしくはアルゴンなどの不活性雰囲気下で行うことができる。

脂肪酸エステルのワーク−アップおよび単離は、当業者に公知の方法で、例えば、有機溶剤および／または水での抽出によって行うことができる。有機溶剤は、例えば、ペンタン、ヘキサン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、またはこれらの組み合わせであり得る。水は、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、塩化アンモニウムおよび／または希鉱酸などの他の物質を任意選択的に含有することができる。

いくつかの実施形態においては、油は、油中のエステル画分の少なくとも一部をトリグリセリド画分に転化するためにエステル交換される。エステル交換、特にポリ不飽和脂肪酸エステルのエステル交換は、当業者に公知である方法で行うことができる。

本発明においては、任意の濃縮、反応、および／または精製技術は、ポリ不飽和脂肪酸、それらのエステル、それらの塩、それらのアルデヒドおよび／またはそれらのアルコールに富む微生物油を製造するために任意の他の濃縮、反応、および／または精製と組み合わせることができる。富化技術は、任意の順におよび組み合わせで用いることができる。

いくつかの実施形態においては、本発明は、本発明の油を含む食物、栄養補助食品、または医薬品組成物である。医薬品組成物は、薬学的に許容されるキャリアを含有することができる。

いくつかの実施形態においては、本組成物は食品である。食品は、非ヒト動物またはヒト消費用の任意の食物であり、固体および液体組成物を両方とも含む。食品は、動物またはヒト食物への添加物であり得る。食物は、一般食品；ミルク、飲料、治療用ドリンク、および健康ドリンクを含む、液体製品；機能性食品；栄養補助食品；栄養補給食品；早産児用の調製粉乳を含む、幼児用調製粉乳；妊婦または看護婦用の食物；成人用の食物；高齢者食物；ならびに動物用食物を含むが、それらに限定されない。

いくつかの実施形態においては、本組成物は動物飼料である。「動物」は、動物界に属する非ヒト生物を含み、限定なしに、水生動物および陸生動物を含む。用語「動物飼料」または「動物食物」は、魚；商業魚；観賞魚；稚魚；二枚貝；軟体動物；甲殻類；貝；エビ；稚エビ；アルテミア；ワムシ；ブラインシュリンプ；フィルター・フィーダー；両性類；爬虫類；哺乳類；家庭動物；家畜；動物園の動物；スポーツ動物；種畜；競走用動物；ショー動物；愛蔵動物；希少または絶滅寸前の動物；コンパニオン・アニマル；イヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、またはウマなどのペット動物；サル（例えば、オマキザル、赤毛猿、アフリカミドリザル、パタス、カニクイザル、およびミドリザル）、類人猿、オランウータン、ヒヒ、テナガザル、およびチンパンジーなどの霊長類；イヌおよびオオカミなどのイヌ科イヌ属動物；ネコ、ライオン、およびトラなどの、猫科の動物；ウマ、ロバ、およびシマウマなどのウマ科の動物；乳牛、畜牛、ブタ、およびヒツジなどの食用動物；シカおよびキリンなどの有蹄動物；またはマウス、ラット、ハムスターおよびモルモットなどの齧歯動物など用にかかわらず、非ヒト動物用を意図される任意の食物を言う。動物飼料は、水産養殖飼料、ペット飼料を含む家畜飼料、動物学上の動物の飼料、使役動物飼料、家畜飼料、およびそれらの組み合わせを含むが、それらに限定されない。

いくつかの実施形態においては、本組成物は、肉、卵、またはミルクがヒト消費用にそれに由来する任意の動物などの、その肉または産物がヒトによって消費される任意の動物用の飼料または飼料栄養補助品である。そのような動物に給餌された場合に、ＬＣ−ＰＵＦＡなどの栄養物は、そのような動物の肉、ミルク、卵または他の産物中へ組み込まれてこれらの栄養物の含有量を高めることができる。

本発明はまた、油を生成するためのポリ不飽和脂肪酸のエステルを含む油の分離および濃縮方法を指向する。

いくつかの実施形態においては、本方法は、油を少なくとも１つの蒸留ステップにかける工程を含み、ここで、第１蒸留ステップは油を少なくとも１つの装置に供給する工程と、低沸点化合物を留出物中に除去するための条件に油をさらす工程とを含む。好ましい実施形態においては、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の少なくとも一部は、留出物中に除去される。いくつかの実施形態においては、ＥＰＡの少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％は、第１蒸留ステップの留出物中にある。

いくつかの実施形態においては、１つの長鎖ポリ不飽和酸（ＬＣ−ＰＵＦＡ）の少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％は、第２蒸留ステップにおいて第２ＬＣ−ＰＵＦＡから分離される。好ましい実施形態においては、１つのＬＣ−ＰＵＦＡはＥＰＡである、好ましい実施形態においては、第２ＬＣ−ＰＵＦＡはＤＨＡである。さらに好ましい実施形態においては、１つのＬＣ−ＰＵＦＡはＥＰＡであり、第２ＬＣ−ＰＵＦＡはＤＨＡである。

いくつかの実施形態においては、１つの長鎖ポリ不飽和酸（ＬＣ−ＰＵＦＡ）の少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％は、第３蒸留ステップにおいて第２ＬＣ−ＰＵＦＡから分離される。好ましい実施形態においては、１つのＬＣ−ＰＵＦＡはＥＰＡである。好ましい実施形態においては、第２ＬＣ−ＰＵＦＡはＤＨＡである。さらに好ましい実施形態においては、１つのＬＣ−ＰＵＦＡはＥＰＡであり、第２ＬＣ−ＰＵＦＡはＤＨＡである。

いくつかの実施形態においては、本方法は、ショートパス蒸留、分留、流下薄膜型エバポレーター、薄膜エバポレーター、またはそれらの組み合わせを含む。好ましい実施形態においては、本方法は分留を含む。

いくつかの実施形態においては、装置は分留塔である。

いくつかの実施形態においては、塔は、精留セクションを含む。いくつかの実施形態においては、塔は、少なくとも約３〜４、少なくとも約４〜５、少なくとも約５〜６、少なくとも約６〜７、少なくとも約７〜８、少なくとも約８〜９、少なくとも約９〜１０、少なくとも約１０〜１１、少なくとも約１１〜１２、または少なくとも約１２〜１３の理論段数を有する、少なくとも約１メートル、少なくとも約２メートル、または少なくとも約３メートルの構造化充填物を有する。

いくつかの実施形態においては、塔は、真空に取り付けられる。いくつかの実施形態においては、塔頂での圧力は、約４ミリバール未満、約３．５ミリバール未満、約３ミリバール未満、約２．５ミリバール未満、約２ミリバール未満、または約１．５ミリバール未満である。いくつかの実施形態においては、塔の圧力降下は、約１０ミリバール未満、約９ミリバール未満、約８ミリバール未満、約７ミリバール未満、約６ミリバール未満、約５ミリバール未満、約４ミリバール未満、または約３ミリバール未満である。

いくつかの実施形態においては、装置は、分留塔またはショートパス蒸留である。いくつかの実施形態においては、分留塔は、薄膜エバポレーターに取り付けられる。１つ以上の蒸留ステップを含むいくつかの実施形態においては、各蒸留ステップの装置は、同じ装置であってもよいし、直列にあってもよい。

いくつかの実施形態においては、少なくとも１つの装置への油の供給は、中間塔供給を含む。いくつかの実施形態においては、少なくとも１つの装置への油の供給は、エバポレーター供給を含む。

好ましい実施形態においては、第１蒸留ステップにかけられる油は、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、または少なくとも約８０重量％の量で残留物エンドおよび留出物エンドで分離される。好ましい実施形態においては、残留物エンドで集められる油は、少なくとも約１０重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、または少なくとも約９０重量％のＥＰＡおよびＤＨＡを含む。好ましい実施形態においては、留出物エンドで集められる油は、少なくとも約１０重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、または少なくとも約９０重量％の２０個未満の炭素を有するポリ不飽和脂肪酸を含む。

好ましい実施形態においては、第２蒸留ステップにかけられる油は、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、または少なくとも約８０重量％の量で残留物エンドおよび留出物エンドで分離される。好ましい実施形態においては、残留物エンドで集められる油は、少なくとも約１０重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、または少なくとも約９０重量％のＥＰＡを含む。好ましい実施形態においては、留出物エンドで集められる油は、少なくとも約１０重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、または少なくとも約９０重量％のＤＨＡを含む。

好ましい実施形態においては、第３蒸留ステップにかけられる油は、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、または少なくとも約８０重量％の量で残留物エンドおよび留出物エンドで分離される。好ましい実施形態においては、残留物エンドで集められる油は、少なくとも約１０重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、または少なくとも約９０重量％のＥＰＡを含む。好ましい実施形態においては、留出物エンドで集められる油は、少なくとも約１０重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、または少なくとも約９０重量％のＤＨＡを含む。

いくつかの実施形態においては、少なくとも１つの蒸留ステップは、温度が、約２７５℃未満、約２５０℃未満、約２２５℃未満、約２００℃未満、約１９０℃未満、約１８０℃未満、約１７０℃未満、約１００℃〜約２５０℃、約１２５℃〜約２２５℃、約１５０℃〜約２００℃、または約１６０℃〜約１９０℃である加熱工程を含む。

いくつかの実施形態においては、還流比は、約５未満、約４．５未満、約４未満、約３．５未満、約３未満、約２．５未満、約２未満、約１．５未満、約１未満、または約０．５未満である。

本発明はまた、本明細書に開示される方法のいずれかによって製造される油を指向する。

［実施例］
以下の実施例は、開示される主題による方法および結果を例示するために以下に記述される。これらの実施例は、本明細書に開示される主題のすべての態様を包含することを意図せず、むしろ代表的な方法および結果を例示することを意図する。これらの実施例は、当業者に明らかである等価物および変形を排除することを意図しない。

分析方法：脂肪酸組成の測定は、ヨーロッパ薬局方方法２．０４．２９に従って水素炎イオン化検出器を備えたガスクロマトグラフ（ＧＤ／ＦＩＤ）を用いて行った。

［実施例１］
粗油を、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ．）の発酵によって産生した。表１は、出発油の脂肪酸プロフィールを示す。

エステル交換：出発油をトリグリセリドからエチルエステルに転化するために、１リットの丸底フラスコに、４００ｇの乾燥した、粗油と、エタノール（１２０ｇ）に溶解したナトリウムエトキシド（３．２ｇ）の溶液とを装入した。混合物を、Ｎ_２雰囲気下で攪拌しながら７５℃に加熱し、次にこの温度で１時間維持した。反応混合物を３０℃に放冷し、分液漏斗に移し、底部のグリセロール層を流し出した。上方の油層を次に、きれいな１Ｌの丸底フラスコに移し、エタノール（１２．０ｇ）中のナトリウムエトキシド（０．３２ｇ）の溶液を添加した。混合物を再び、Ｎ_２雰囲気下で攪拌しながら７５℃に加熱し、次にこの温度で１時間維持した。エタノールを、ロータリーエバポレーターを用いて除去し、残留物を、水性洗浄部分のｐＨがもはや塩基性でなくなるまでクエン酸溶液（１％ｗ／ｗ）で洗浄し、水で洗浄し、真空下で乾燥させた。

分析方法：オリゴマーおよび脂質クラスの測定は、屈折率検出を備えたサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ／ＲＩ）を用いて行った。ポリマーベースのＴｏｓａｈａａｓ ＴＳＫ−ＧＥＬを、ゲル浸透クロマトグラフィーのために使用した。装置は、２つのＴＳＫ−ＧＥＬカラム＋ガードカラムで組み立て、０．６００ｍＬ／分の流量でのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）で平衡させた。油試料を１５ｍｇ／ｍＬの濃度でＴＨＦに溶解させ、１０．０μＬの注入量でクロマトグラフへ注入した。表２は、エステル交換後の出発油の脂質クラスプロフィールを示す。

精製および濃縮、トライアル１：油を、１２０℃〜１８０℃の温度範囲およびおおよそ２０ミリトルの減圧を用いるショートパス蒸留装置の３回通過によって分別した。第１パスに関しては、出発油をショートパス蒸留装置に通した。留出物（試料１Ｄ）は、１１０ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび３２２ｍｇ／ｇのＤＨＡを含有し、残留物（試料１Ｒ）は、７０ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７５９ｍｇ／ｇのＤＨＡを含有した。第２パスに関しては、第１パスからの残留物をショートパス蒸留装置に供給し、留出物（試料２Ｄ）中の７２ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７８９ｍｇ／ｇのＤＨＡをもたらした。残留物（試料２Ｒ）は、粘度のためにサンプリングできなかった。第３パスに関しては、第２パスからの留出物をショートパス蒸留装置に供給し、留出物（試料３Ｄ）中の１２６ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７１５ｍｇ／ｇのＤＨＡならびに残留物（試料３Ｒ）中の４３ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび８１１ｍｇ／ｇのＤＨＡ残留物をもたらした。結果を表３に示す。

精製および濃縮、トライアル２：油を、１２０℃〜１８０℃の温度範囲およびおおよそ２０ミリトルの減圧を用いるショートパス蒸留装置の４回通過によって分別した。第１パスに関しては、出発油をショートパス蒸留装置に通した。留出物（試料１Ｄ）は、６９ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび１５４ｍｇ／ｇのＤＨＡを含有し、残留物（試料１Ｒ）は、９４ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび６４１ｍｇ／ｇのＤＨＡを含有した。第２パスに関しては、第１パスからの残留物をショートパス蒸留装置に供給し、留出物（試料２Ｄ）中の１３１ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび３７３ｍｇ／ｇのＤＨＡならびに残留物（試料２Ｒ）中の８４ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７１７ｍｇ／ｇのＤＨＡをもたらした。第３パスに関しては、第２パスからの残留物をショートパス蒸留装置に供給し、留出物（試料３Ｄ）中の８６ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７４２ｍｇ／ｇのＤＨＡをもたらした。残留物（試料３Ｒ）は、粘度のためにサンプリングできなかった。第４パスに関しては、第３パスからの留出物をショートパス蒸留装置に供給し、留出物（試料４Ｄ）中の１１７ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７２２ｍｇ／ｇのＤＨＡならびに残留物（試料４Ｒ）中の２６ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７８５ｍｇ／ｇのＤＨＡをもたらした。結果を表４に示す。

精製および濃縮、トライアル３：トライアル１および２におけるとは異なる出発油を、この実施例のために使用した。粗油を、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ．）の発酵によって産生し、上記と同じエステル交換法にかけた。この油を、１２０℃〜１８０℃の温度範囲およびおおよそ２０ミリトルの減圧を用いるショートパス蒸留装置の３回通過によって分別した。第１パスに関しては、出発油をショートパス蒸留装置に通した。留出物（試料１Ｄ）は、１１２ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび３３２ｍｇ／ｇのＤＨＡを含有し、残留物（試料１Ｒ）は、６０ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７３３ｍｇ／ｇのＤＨＡを含有した。第２パスに関しては、第１パスからの残留物をショートパス蒸留装置に供給し、留出物（試料２Ｄ）中の７６ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７６６ｍｇ／ｇのＤＨＡをもたらした。残留物（試料２Ｒ）は、粘度のためにサンプリングできなかった。第３パスに関しては、第２パスからの留出物をショートパス蒸留装置に供給し、留出物（試料３Ｄ）中の９６ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび７８６ｍｇ／ｇのＤＨＡならびに残留物（試料３Ｒ）中の２２ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび８０５ｍｇ／ｇのＤＨＡ残留物をもたらした。結果を表５に示す。

［実施例２］
粗油を、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ）の発酵によって産生した。

エステル交換：１リットの丸底フラスコに、４００ｇの乾燥し、濾過した粗油と、エタノール（１２０ｇ）に溶解したナトリウムエトキシド（３．２ｇ）の溶液とを装入した。混合物を、Ｎ_２雰囲気下で攪拌しながら７５℃に加熱し、次にこの温度で１時間維持した。反応混合物を３０℃に放冷し、分液漏斗に移し、底部のグリセロール層を流し出した。上方の油層を次に、きれいな１Ｌの丸底フラスコに移し、エタノール（１２．０ｇ）中のナトリウムエトキシド（０．３２ｇ）の溶液を添加した。混合物を再び、Ｎ_２雰囲気下で攪拌しながら７５℃に加熱し、次にこの温度で１時間維持した。エタノールを、ロータリーエバポレーターを用いて除去し、水性洗浄部分のｐＨがもはや塩基性でなくなるまでクエン酸溶液（１％ｗ／ｗ）で洗浄し、水で洗浄し、真空下で乾燥させた。

精製および濃縮：油を、２．３ミリバールの塔の圧力降下で２１０℃を超えない温度で分別した。重質留分を、０．０１ミリバールの圧力および１４０℃の温度でのショートパス蒸留を用いてさらに精製した。ＤＨＡ濃縮物を、２２５ｍｇの量および８９０ｍｇ／ｇの純度で単離した。

［実施例３］
粗魚油を、分離および濃縮プロセスにかけた。

エステル交換：ナトリウムエトキシドを触媒として使用する、精製マリンオイルとエチルアルコールとの間のエステル交換反応を用いてマリンオイルエチルエステルを生成した。エタノールおよびナトリウムエトキシドを、加熱された精製マリンオイルに添加した。グリセロールをマリンオイルから分離した。エタノールおよびナトリウムエトキシドを次に再びマリンオイル（グリセロールの除去後の）に添加した。形成されたエチルエスエルマリンオイルを、さらなるグリセロール除去のために遠心分離した。ナトリウムエトキシドを、９％クエン酸溶液をマリンオイルの５重量％添加することによって中和した。酸洗層をエチルエステルマリンオイルから分離し、水を添加し、乳化システムマリンオイルを乾燥させた。

実施例４〜９に使用されるエチルエステルマリンオイルは、この実施例３におけるように調製した。

［実施例４］
粗魚油を分離および濃縮プロセスにかけた。ショートパス蒸留（ＳＰＤ）が続く精留塔を備えた流下薄膜型エバポレーターを評価した。塔は、おおよそ３〜４の理論段数を有するおおよそ１メートルの充填物を含有した。エチルエステルマリンオイルを、２０５℃の温度でのリサイクル流れによって供給した。濃縮結果を表７に示す。異性体結果を表８に示す。

分析方法：異性体および関連不純物は、ガスクロマトグラフィーを用いて測定した。約２５ｍｇの試料を量り、２５ｍｌのヘキサンに溶解させた。銀イオンＳＰＥカートリッジをマニホールド上に取り付け；カートリッジを４ｍＬのアセトンで順化させ、４ｍＬのヘキサンと平衡させた。１ｍＬの試料溶液をカートリッジにロードし、プルスルーした。カートリッジを６ｍＬのアセトンで洗浄した。新たな１５ｍＬ試験管へ、試料を２ｍＬのアセトン／アセトニトリル（３：２）でカートリッジからリンスした。試験管をマニホールドから取り出し、窒素流れ下に溶剤を吹き飛ばした。１ｍＬのヘキサンを試験管に添加した。溶液をＧＣバイアルに移した。ヘリウムを１ｍＬ／分で使用するＡｇｉｌｅｎｔ ＤＢ Ｗａｘ ３０ｍ×０．２５ｍｍ×０．２５μｍカラムを用いた。注入量は１μＬであり、検出器は２６０℃でのＦＩＤであった。グラジエントは、１．０分間１００℃、２１０℃まで２０／分でランプであり、４０分間保持した。

［実施例５］
粗魚油を分離および濃縮プロセスにかけた。ショートパス蒸留が続く精留塔を備えた流下薄膜型エバポレーターを評価した。塔は、おおよそ２メートルの充填物を含有し、中間塔（ｍｉｄ−ｃｏｌｕｍｎ）液体分配器を有した。マリンオイルを、１７０℃の温度でのリサイクル流れによって供給した。濃縮結果を表９に示す。異性体結果を表１０に示す。

［実施例６］
粗魚油を分離および濃縮プロセスにかけた。ショートパス蒸留が続く直列の２つの塔（それぞれ、精留塔を備えた流下薄膜型エバポレーター）を評価した。実施例４における塔残留物試料を、実施例４におけると同じ条件下でおおよそ２メートルの充填物および中間塔液体分配器を有する精留塔を備えた第２流下薄膜型エバポレーターに供給した。濃縮結果を表１１に示す。異性体結果を表１２に示す。

［実施例７］
粗魚油を分離および濃縮プロセスにかけた。ショートパス蒸留（ＳＰＤ）が続く外部凝縮器を備えた分留塔を評価した。外部凝縮器は、薄膜エバポレーターであった。塔に、中間塔供給でおおよそ８〜９の分離理論段数を有する、３メートルの充填物を詰め込んだ。濃縮結果を表１３に示す。異性体結果を表１４に示す。

［実施例８］
粗魚油を分離および濃縮プロセスにかけた。ショートパス蒸留（ＳＰＤ）が続く外部凝縮器を備えた分留塔を評価した。外部凝縮器は、薄膜エバポレーターであった。塔に、エバポレーター供給でおおよそ８〜９の分離理論段数を有する、３メートルの充填物を詰め込んだ。濃縮結果を表１５に示す。異性体結果を表１６に示す。

［実施例９］
粗魚油を分離および濃縮プロセスにかけた。ショートパス蒸留（ＳＰＤ）が続く外部凝縮器を備えた第２分留塔が続く外部凝縮器を備えた分留塔を評価した。外部凝縮器は、薄膜エバポレーターであった。両塔に、中間塔供給でおおよそ８〜９の分離理論段数を有する、２メートルの充填物を詰め込んだ。濃縮結果を表１７に示す。異性体結果を表１８に示す。

［実施例１０］
様々な濃度の粗魚油を分離および濃縮プロセスにかけた。表１９〜２１にリストされる出発油濃度は、使用される魚のタイプに基づく代表的な濃度値である（例えば、２２：０８は、おおよそ２０％のＥＰＡおよび８％のＤＨＡを含有する魚である）。ショートパス蒸留（ＳＰＤ）が続く外部凝縮器を備えた第２分留塔が続く外部凝縮器を備えた分留塔を評価した。外部凝縮器は、薄膜エバポレーターであった。第１塔を通過した後、残留物中のＥＰＡおよびＤＨＡ濃度を測定した（表１９）。残留物を第２塔に通し、留出物中のＥＰＡおよびＤＨＡ濃度を測定した（表２０）。第２塔からの残留物をショートパス蒸留塔に通し、残留物中のＥＰＡおよびＤＨＡ濃度を測定した（表２１）。

［実施例１１］
１４．９重量％のＥＰＡおよび１０．１重量％のＤＨＡのＥＰＡ：ＤＨＡプロフィールを有する粗魚油を分離および濃縮プロセスにかけた。ショートパス蒸留（ＳＰＤ）が続く外部凝縮器を備えた第２分留塔が続く外部凝縮器を備えた分留塔を評価した。外部凝縮器は、薄膜エバポレーターであった。第１塔に通した後、留出物および残留物中のＥＰＡおよびＤＨＡ濃度を測定した（表２２）。残留物を第２塔に通し、留出物および残留物中のＥＰＡおよびＤＨＡ濃度を測定した（表２３）。第２塔からの残留物をショートパス蒸留塔に通し、留出物および残留物中のＥＰＡおよびＤＨＡ濃度を測定した（表２４）。各試料のＥＰＡおよびＤＨＡ濃度は、処理中に異なる時間間隔で測定した。

［実施例１２］
粗魚油を分離および濃縮プロセスにかけた。ショートパス蒸留（ＳＰＤ）が続く外部凝縮器を備えた第２分留塔が続く外部凝縮器を備えた分留塔を評価した。外部凝縮器は、薄膜エバポレーターであった。異性体のレベルをこれらの試料において測定した。結果を表２５に示す。

［実施例１３］
粗油を、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ）の発酵によって産生した。油を、ポリ不飽和脂肪酸のエチルエステルを生成するためのエステル交換ステップにかけた。

精製および濃縮：ショートパス蒸留塔が続く外部凝縮器を備えた分留塔を評価した。外部凝縮器は、薄膜エバポレーターであった。出発油の脂肪酸プロフィールを表２６に示す。生成した油の脂肪酸プロフィールを表２７に示す。

［実施例１４］
粗油を、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ）の発酵によって産生した。油を、ポリ不飽和脂肪酸のエチルエステルを生成するためのエステル交換ステップにかけた。

精製および濃縮：油を、分留塔の第１通過によって分別した。留出物（試料１Ｄ）は、２２２ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび２１８ｍｇ／ｇのＤＨＡを含有した。残留物（試料１Ｒ）は、１７５ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび６１１ｍｇ／ｇのＤＨＡを含有した。この第１パスからの留出物を、分留塔の第２通過によって分別した。これからの留出物（試料３Ｄ）は、７７ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび３４ｍｇ／ｇのＤＨＡであり、これからの残留物（試料３Ｒ）は、２９１ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび３３１ｍｇ／ｇのＤＨＡであった。第１パスからの残留物を、分留塔の第２通過によって分別した。これからの留出物（試料２Ｄ）は、１８１ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび６２４ｍｇ／ｇのＤＨＡであり、これからの残留物は、粘度のためにサンプリングできなかった。試料２Ｄをショートパス蒸留装置に通した。これからの留出物（試料４Ｄ）は、２５６ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび５５９ｍｇ／ｇのＤＨＡであり、残留物（試料４Ｒ）は、１０５ｍｇ／ｇのＥＰＡおよび６９７ｍｇ／ｇのＤＨＡであった。分留塔および／またはショートパス蒸留装置のすべての通過は、１１０℃〜１８０℃の温度範囲およびおおよそ２０〜２５ミリトルの減圧を用いた。結果を表２８に示す。

［実施例１５］
粗油を、クリプテコジニウム・コーニー（Ｃｒｙｐｔｏｃｈｏｄｉｎｉｕｍ ｃｏｈｎｉｉ）の発酵によって産生した。油を、ポリ不飽和脂肪酸のエチルエステルを生成するためのエステル交換ステップにかけた。

精製および濃縮：ショートパス蒸留が続く外部凝縮器を備えた分留塔を評価した。外部凝縮器は、薄膜エバポレーターであった。出発油の脂肪酸プロフィールを表２９に示す。２つのトライアルを完了した。生成した油の脂肪酸プロフィールを表３０および３１に示す。

本明細書に引用される、刊行物、特許出願、および特許を含む、すべての参考文献は、あたかも各参考文献が参照により援用されることが個別におよび具体的に示されており、そして本明細書にその全体を記述されているかのように同じ程度まで参照により本明細書によって援用される。

本発明の好ましい実施形態は、本発明を実施するための本発明者らに公知の最良モードを含めて、本明細書に記載されている。それらの好ましい実施形態の変形は、前述の説明を読むと当業者に明らかになり得る。本発明者らは、熟練者が必要に応じてそのような変形を用いることを期待し、本発明者らは、本発明が本明細書に具体的に記載されるものとは別な方法で実施されることを意図する。したがって、本発明は、適用法令によって許可されるような本明細書に添付された特許請求の範囲に列挙される主題のすべての修正および等価物を包含する。さらに、そのすべての可能な変形における上記の要素のいかなる組み合わせも、特に本明細書に指示されないかまたは特に文脈によって明らかに矛盾しない限り本発明によって包含される。

Claims (78)

1. ポリ不飽和脂肪酸のエステルを含む油の分離および濃縮方法であって、前記方法が、前記油を少なくとも１つの蒸留ステップにかける工程を含み、ここで、第１蒸留ステップが前記油を少なくとも１つの装置に供給する工程と、低沸点化合物を留出物中に除去するための条件に前記油をさらす工程とを含む方法。
2. 第２蒸留ステップが、１つの長鎖ポリ不飽和脂肪酸（ＬＣ−ＰＵＦＡ）の少なくとも一部を第２ＬＣ−ＰＵＦＡの少なくとも一部から分離するための条件に前記油をさらす工程を含む請求項１に記載の方法。
3. 第３蒸留ステップが、１つの長鎖ポリ不飽和脂肪酸（ＬＣ−ＰＵＦＡ）の少なくとも追加部分を第２ＬＣ−ＰＵＦＡから分離するための条件に前記油をさらす工程を含む、請求項２に記載の方法。
4. 前記１つのＬＣ−ＰＵＦＡがエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）である請求項２または３に記載の方法。
5. 前記第２ＬＣ−ＰＵＦＡがドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）である請求項２〜４のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記蒸留ステップが、ショートパス蒸留、分留、流下薄膜型エバポレーター、薄膜エバポレーター、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
7. 前記第１蒸留ステップにおける前記装置がショートパス蒸留塔である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記第１蒸留ステップにおける前記装置が精留塔である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
9. 第２蒸留ステップにおける前記装置が、ショートパス蒸留塔または精留塔を含む、請求項２〜８のいずれか一項に記載の方法。
10. エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の少なくとも一部が、前記第１蒸留ステップの留出物中に除去される請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
11. 少なくとも５％のＥＰＡが前記留出物中に除去される請求項１０に記載の方法。
12. 少なくとも１０％のＥＰＡが前記留出物中に除去される請求項１１に記載の方法。
13. 少なくとも１つのＬＣ−ＰＵＦＡが、少なくとも約５０％の量で第２ＬＣ−ＰＵＦＡから分離される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 少なくとも１つのＬＣ−ＰＵＦＡの重量％が、出発油中の重量％と比べて少なくとも約２０重量％だけ前記油中で増加する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
15. 前記油が少なくとも約７０％の所望のＰＵＦＡを含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
16. 前記油が少なくとも約８０％の所望のＰＵＦＡを含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
17. 前記油が少なくとも約９０％の所望のＰＵＦＡを含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
18. 前記ＬＣ−ＰＵＦＡが、オメガ−３脂肪酸、オメガ−６脂肪酸、およびそれらの組み合わせである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
19. 前記ＬＣ−ＰＵＦＡが、アラキドン酸（ＡＲＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、およびそれらの組み合わせである、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
20. 前記油が微生物油またはマリンオイルである、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記油が微生物油である、請求項２０に記載の方法。
22. 前記油が微生物によって産生され、前記微生物が、微細藻類、バクテリア、真菌類および原生生物を含む群から選択される、請求項２１に記載の方法。
23. 前記微生物が微細藻類である、請求項２２に記載の方法。
24. 前記微細藻類が属クリプテコジニウム（Ｃｒｙｐｔｏｃｈｏｄｉｎｉｕｍ）のものである、請求項２３に記載の方法。
25. 前記微細藻類が種クリプテコジニウム・コーニー（Ｃｒｙｐｔｏｃｈｏｄｉｎｉｕｍ ｃｏｈｎｉｉ）のものである、請求項２４に記載の方法。
26. 前記微細藻類が属トラウストキトリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）のものである、請求項２３に記載の方法。
27. 前記微細藻類が種シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ．）のものである、請求項２６に記載の方法。
28. 前記微生物が真菌類である、請求項２２に記載の方法。
29. 前記微生物が属モルティエラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）のものである、請求項２８に記載の方法。
30. 前記微生物が種モルティエラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）のものである、請求項２９に記載の方法。
31. 前記油が１重量％以下の異性体値を有する、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
32. 前記油が遺伝子組み換え生物によって産生される、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の方法。
33. 前記油をエステル交換して前記油中の前記エステル画分の少なくとも一部をトリグリセリド画分に転化する工程をさらに含む、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の方法。
34. 請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法によって製造される油。
35. エステル画分を含む油であって、前記エステル画分中の前記脂肪酸の少なくとも約７０重量％がＤＨＡであり、前記エステル画分中の前記脂肪酸の約０．５重量％〜約５重量％がＤＰＡ ｎ−３である油。
36. 前記エステル画分中の前記脂肪酸の約５重量％未満がＥＰＡである、請求項３５に記載の油。
37. 前記エステル画分中の前記脂肪酸の約０．１重量％〜約５重量％がＥＰＡである、請求項３６に記載の油。
38. エステル画分を含む油であって、前記エステル画分中の前記脂肪酸の少なくとも約７０重量％がＤＨＡであり、前記エステル画分中の前記脂肪酸の約３重量％〜約１３重量％がＤＰＡ ｎ−３およびＤＰＡ ｎ−６である油。
39. 前記エステル画分中の前記脂肪酸の約１重量％〜約５重量％がＤＰＡ ｎ−３である、請求項３８に記載の油。
40. 前記エステル画分中の前記脂肪酸の約２重量％〜約８重量％がＤＰＡ ｎ−６である、請求項３８または請求項３９に記載の油。
41. 前記エステル画分中の前記脂肪酸の約５重量％未満がＥＰＡである、請求項３８〜４０のいずれか一項に記載の油。
42. 前記エステル画分中の前記脂肪酸の約０．１重量％〜約５重量％がＥＰＡである、請求項４１に記載の油。
43. 前記エステル画分が前記油の少なくとも約７０％を構成する、請求項３８〜４２のいずれか一項に記載の油。
44. エステル画分を含む油であって、前記エステル画分の前記ＤＨＡ含有量が少なくとも約７０重量％であり、ＤＨＡの量が前記エステル画分中の総オメガ−３脂肪酸の少なくとも約６５重量％である油。
45. 前記エステル画分中の前記脂肪酸の少なくとも約８重量％がＥＰＡである、請求項４４に記載の油。
46. ＥＰＡの量が、前記エステル画分中の総オメガ−３脂肪酸の少なくとも約２重量％である、請求項４５に記載の油。
47. エステル画分を含む油であって、前記エステル画分中の前記脂肪酸の少なくとも約６５重量％がＤＨＡであり、前記エステル画分中の前記脂肪酸の少なくとも約１５重量％がＥＰＡである油。
48. 前記エステル画分中の前記脂肪酸の約０．１重量％〜約５重量％がＤＰＡ ｎ−３である、請求項４７に記載の油。
49. エステル画分を含む油であって、前記エステル画分中の前記脂肪酸の少なくとも約５０重量％がＤＨＡであり、前記エステル画分中の前記脂肪酸の少なくとも約３５重量％がＥＰＡである油。
50. 前記エステル画分中の前記脂肪酸の約０．１〜約５重量％がＤＰＡ ｎ−３である、請求項４９に記載の油。
51. 前記エステル画分が前記油の少なくとも約７０重量％を構成する、請求項４７〜５０のいずれか一項に記載の油。
52. エステル画分を含む油であって、前記エステル画分中の前記ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）含有量が脂肪酸の総量の少なくとも約９０重量％であり、前記エステル画分の前記ＥＰＡ含有量が脂肪酸の総量の約５％未満である油。
53. 前記エステル画分の前記ＥＰＡ含有量が約１重量％未満である、請求項５２に記載の油。
54. 前記エステル画分の前記ＥＰＡ含有量が約０．５重量％未満である、請求項５２または請求項５３に記載の油。
55. 前記エステル画分が前記油の少なくとも約７０重量％を構成する、請求項５２〜５４のいずれか一項に記載の油。
56. エステル画分を含む油であって、前記エステル画分の前記ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）含有量が脂肪酸の総量の少なくとも約９０重量％であり、前記エステル画分の前記ＤＨＡ含有量が脂肪酸の総量の約５重量％未満である油。
57. 前記エステル画分の前記ＤＨＡ含有量が約１重量％未満である、請求項５６に記載の油。
58. 前記エステル画分の前記ＤＨＡ含有量が約０．５重量％未満である、請求項５６または請求項５７に記載の油。
59. 前記エステル画分が前記油の少なくとも約７０重量％を構成する、請求項３５〜５８のいずれか一項に記載の油。
60. 前記油が微生物油またはマリンオイルである、請求項３５〜５９のいずれか一項に記載の油。
61. 前記油が微生物油である、請求項３５〜６０のいずれか一項に記載の油。
62. 前記油が微生物によって産生され、前記微生物が、微細藻類、バクテリア、真菌類および原生生物を含む群から選択される、請求項６１に記載の油。
63. 前記微生物が微細藻類である、請求項６２に記載の油。
64. 前記微細藻類が属クリプテコジニウム（Ｃｒｙｐｔｏｃｈｏｄｉｎｉｕｍ）のものである、請求項６３に記載の油。
65. 前記微細藻類が種クリプテコジニウム・コーニー（Ｃｒｙｐｔｏｃｈｏｄｉｎｉｕｍ ｃｏｈｎｉｉ）のものである、請求項６４に記載の油。
66. 前記微細藻類が属トラウストキトリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）のものである、請求項６３に記載の油。
67. 前記微細藻類が種シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｓｐ．）のものである、請求項６３に記載の油。
68. 前記微生物が真菌類である、請求項６２に記載の油。
69. 前記微生物が属モルティエラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）のものである、請求項６８に記載の油。
70. 前記微生物が種モルティエラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）のものである、請求項６９に記載の油。
71. 前記油が１重量％以下の異性体値を有する、請求項３５〜７０のいずれか一項に記載の油。
72. 前記油が、前記油中のエステル画分の少なくとも一部をトリグリセリド画分に転化するためにエステル交換される、請求項３５〜７１のいずれか一項に記載の油。
73. 前記油が遺伝子組み換え生物によって産生される、請求項３５〜７２のいずれか一項に記載の油。
74. 請求項１〜３２のいずれか一項に記載の方法によって製造される請求項３５〜７３のいずれか一項に記載の油。
75. 請求項３５〜７４のいずれか一項に記載の油を含む、非ヒトまたはヒト用の食品、化粧品または医薬品組成物。
76. 前記食品が、ミルク、飲料、治療用ドリンク、健康ドリンク、またはそれらの組み合わせである、請求項７５に記載の食品。
77. 前記食品が幼児用調製粉乳である、請求項７６に記載の食品。
78. 前記食品が栄養補助食品である、請求項７６に記載の食品。