JP2018510886A

JP2018510886A - 難溶性薬物伝達用の溶解性マイクロニドル

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Publication number: JP2018510886A
Application number: JP2017552468A
Authority: JP
Inventors: ウ−スン・シム; スン−ファ・イ; ヨン−ミン・ファン; ジュン−ア・キム; ネ−ギュ・カン
Original assignee: エルジーハウスホールドアンドヘルスケアリミテッド
Priority date: 2015-04-06
Filing date: 2016-04-06
Publication date: 2018-04-19
Anticipated expiration: 2036-04-06
Also published as: PL3281626T3; HK1247556A1; KR101946617B1; EP3281626B1; KR20190014602A; EP3281626A4; CN107405313A; EP3281626A1; CN107405313B; KR20170125857A; US20180071208A1; JP6875289B2; KR102313517B1; US11000472B2

Abstract

本発明は、難溶性化合物を安定的に含浸し、皮膚内に効果的に伝達することで、優れた効果を発揮できる難溶性化合物の皮膚投与システムに関し、難溶性化合物を含むマイクロパーチクルが添加されたマイクロニドルであることを技術的特徴とする。また、本発明は、このようなマイクロニドルを用いることを特徴とする難溶性化合物の皮膚投与方法を提供する。

Description

本発明は、溶解性マイクロニドル、これを用いた難溶性化合物の皮膚投与方法、及び前記溶解性マイクロニドルの製造方法に関する。

本出願は、２０１５年４月６日出願の韓国特許出願第１０−２０１５−００４８４５４号、２０１５年１０月２９日出願の韓国特許出願第１０−２０１５−０１５１０２７号、２０１５年４月６日出願の韓国特許出願第１０−２０１５−００４８４８２号及び２０１５年１０月２９日出願の韓国特許出願第１０−２０１５−０１５１０４６号に基づく優先権を主張し、該当出願の明細書及び図面に開示された内容は、すべて本出願に援用される。

イソフラボンは、抗酸化、抗菌、抗癌、骨粗鬆症の抑制、脂肪代謝と血中コレステロールの減少などに優れた効果があると知られている。また、イソフラボンの皮膚のアンチエイジング効能も報告され、皮膚老化改善のための用途として用いるために多い研究が進みつつある。しかし、イソフラボンは難溶性物質であって、水、オイル、エタノールなどによく解けず、飲み物、食品、化粧品、美容製品へ効果的な濃度で製剤化しにくいという短所がある。

このような点を改善するための方法として、イソフラボンをシクロデキストリンで包接化してイソフラボンを可溶化する方法である特開１９９７−３０９９０２が提案された。しかし、シクロデキストリンを用いてもイソフラボンの溶解度が特別改善せず、かつ防腐剤と香料成分も包接してしまい、香りの発現と防腐力が劣るという問題点を有している。なお、特開２００１−００６６７８に開示されたプロピレングリコールで可溶化した技術を用いても化粧品剤形において効能を充分発揮できる程度の濃度に製剤化しにくい。

ゲニステイン（Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）またはダイゼイン（Ｄａｉｄｚｅｉｎ）などを含むイソフラボンのような難溶性生理活性成分は、水またはオイルに殆ど溶けず、比較的溶解度を向上させるジプロピレングリコール、ＰＥＧ−８のような溶媒を用いても、溶解が容易でなく、析出されやすいことから限界がある。

ペオノールは、東洋医学において伝統的に用いられてきたボタン（Ｐａｅｏｎｉａｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａ）から得られた有効成分の一つであって、抗酸化、抗菌、坑癌、抗炎、陣痛、鎮めなどに優れた効果があると知られている。ペオノールは、筋肉と皮膚組織の安定化に影響を与えるため、口腔、皮膚における抗刺激、抗炎効果のために用いられる。ペオノールは、天然ミントの香を有していることから口臭清涼剤として用いられるか、または歯痛の緩和のために歯磨きに含まれる。その他にも、ペオノールの皮膚角質細胞分化能力、皮膚障壁強化能力、皮膚保湿の増進、皮膚におけるメラニンの形成抑制及びアンチエイジング効能も報告されており、皮膚老化の改善のための用途として用いるために研究が盛んでいる。しかし、ペオノールは難溶性物質であって水によく解けず、飲み物、食品、化粧品、美容製品へ効果的な濃度に製剤化しにくいという不具合がある。

上述の問題を改善するために、最近は難溶性生理活性成分を微粒子（Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ）またはリポソーム（Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）内に包接して剤形内に添加し、その含量を増加させる努力が試しており、ペオノールをリポソームまたはナノスフェアで包接化することでペオノールの安定性、経皮透過効率及び含量を増加させようとする努力が行われている（ＺｈｏｎｇＹａｏＣａｉ，３５（５），８０３−８０７，２０１２，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，９，１８９７−１９０８，２０１４）。しかし、パーチクル及びリポソームの大きさが大きいため（数十〜数百ｎｍまたは数μｍ以上）、皮膚塗布だけでは皮膚内に直接吸収されにくい。

韓国特許出願第１０−２０１５−００４８４５４号韓国特許出願第１０−２０１５−０１５１０２７号韓国特許出願第１０−２０１５−００４８４８２号韓国特許出願第１０−２０１５−０１５１０４６号特開２００１−００６６７８

ＺｈｏｎｇＹａｏＣａｉ，３５（５），８０３−８０７，２０１２，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，９，１８９７−１９０８，２０１４

本発明は、上記問題点に鑑みてなされたものであり、ｐＨ７、２５℃の水における溶解度が１ｍｇ／ｍｌ以下である難溶性生理活性成分、特に、難溶性フェノール化合物を溶解性マイクロニドルに安定的に含浸させ、皮膚を通じて難溶性成分を効果的に伝達するシステム及びこのようなシステムの製造方法、このようなシステムを用いて難溶性成分を皮膚に投与する方法を提供することを目的とする。

上記の課題を達成するため、本発明は、ｐＨ７、２５℃の水における溶解度が１ｍｇ／ｍｌ以下である難溶性化合物が含有されたマイクロニドルを提供し、より望ましくは、前記マイクロニドルを形成する物質は皮膚内で溶解され、マイクロニドルの皮膚適用時、マイクロニドルが溶解または崩壊することで、マイクロニドルの内部に含まれていたマイクロパーチクルが迅速に皮膚内へ出て、内部に含まれたマイクロパーチクルからｐＨ７、２５℃の水における溶解度が１ｍｇ／ｍｌ以下である難溶性化合物を放出するようになる。

本発明における「難溶性」とは、ｐＨ７、２５℃の水における溶解度が１ｍｇ／ｍｌ以下、望ましくは０．５ｍｇ／ｍｌ以下のものを意味する。前記水のみならず、極性溶媒（エタノールなど）における溶解度が前記範囲である場合も含む。

前記難溶性化合物は、難溶性フェノール化合物及び／または難溶性イソフラボンを含み得る。

本発明に含まれ得る難溶性化合物としては難溶性フェノール化合物が挙げられ、例えば、ペオノール（ｐａｅｏｎｏｌ）、クリソファノール（ｃｈｒｙｓｏｐｈａｎｏｌ）、ミコフェノール酸（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｉｃａｃｉｄ）、テトラブチルエチリデンビスフェノール（ｔｅｔｒａｂｕｔｙｌｅｔｈｙｌｉｄｅｎｅｂｉｓｐｈｅｎｏｌ）またはこれらの誘導体より選択されたいずれか一種以上を含むことができ、望ましくは、ペオノールまたはこれらの誘導体を含み得る。

本発明に含まれ得る難溶性化合物としてはイソフラボンが挙げられ、例えば、グリシテイン（ｇｌｙｃｉｔｅｉｎ）、ククルビタシン（ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｉｎｓ）、クルビタシン（ｃｕｒｂｉｔａｃｉｎ）、プランゲニジン（ｐｒａｎｇｅｎｉｄｉｎ）、ゲニステイン（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）、ダイゼイン（ｄａｉｄｚｅｉｎ）またはこれらの混合物を含むことができる。

本発明者は、多様な投与システムを研究したが、いかなるシステムも上述の難溶性化合物のさまざまな問題点を同時に解決することはできなかった。本発明者は、鋭意研究の末、皮膚内溶解性のマイクロニドル内に、難溶性化合物を含むマイクロパーチクルを含浸させることで、難溶性化合物を効果的に皮膚内に伝達できるという驚くべき発明を完成した。難溶性成分の封入されたマイクロパーチクルを溶解性マイクロニドルに含浸させて皮膚に適用すれば、微細針が皮膚内の水分によって溶解しながら難溶性物質の封入されたマイクロパーチクルが皮膚内へ伝達される。それから、皮膚内へ伝達されたマイクロパーチクルから難溶性成分が放出することで効果的に皮膚内に伝達される。マイクロパーチクルから効果的に皮膚へ伝達された難溶性成分は、皮膚のしわを改善するのに卓越した効果を奏する。

上記の課題を達成するために、マイクロニドルは、皮膚内において溶解性でなければならず、溶解性マイクロニドルを形成するために、ヒアルロン酸（Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ）、カルボキシメチルセルロースナトリウム（Ｎａ−ＣＭＣ，Ｓｏｄｉｕｍｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ビニルピロリドン−ビニルアセテート共重合体、ポリビニルアルコール（Ｐｏｌｙｖｉｎｙｌａｌｃｏｈｏｌ）及びポリビニルピロリドン（Ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ）などの水溶性高分子；キシロース（Ｘｙｌｏｓｅ）、スクロース（Ｓｕｃｒｏｓｅ）、マルトース（Ｍａｌｔｏｓｅ）、ラクトース（Ｌａｃｔｏｓｅ）、トレハロース（Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ）などの糖類；またはこれらの混合物を用いることができる。特に、マイクロニドルの皮膚透過強度、皮膚内における溶解速度などを総合的に考慮すれば、ヒアルロン酸（Ｏｌｉｇｏ−Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ）、カルボキシメチルセルロースナトリウム（Ｎａ−ＣＭＣ，Ｓｏｄｉｕｍｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、及び糖類（ｓａｃｃｈａｒｉｄｅ）（より望ましくは、トレハロース（Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ））の混合物が望ましく、後述のグリセリン（Ｇｌｙｃｅｒｉｎｅ）まで混合したものがさらに望ましい。

望ましくは、本発明によるマイクロニドルは、難溶性化合物を含有するマイクロパーチクル及びマイクロニドルを形成する前述の成分に加え、可塑剤、界面活性剤、保存剤、抗炎剤などをさらに含むことができる。

前記可塑剤（ｐｌａｓｔｉｃｉｚｅｒ）としては、例えば、エチレングリコール（Ｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）、プロピレングリコール（Ｐｒｏｐｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）、ジプロピレングリコール（Ｄｉｐｒｏｐｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌｅ）、ブチレングリコール（Ｂｕｔｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）、グリセリン（Ｇｌｙｃｅｒｉｎｅ）などのポリオールを単独または混合して用いることができる。

本発明において、前記難溶性フェノール化合物とともにマイクロパーチクルを形成する物質は、マイクロニドルの製造過程において難溶性フェノール化合物が析出されないように安定して包接可能でなければならない。

このようなマイクロパーチクルを形成する物質としては、疎水性コアが形成できる高分子を用いることができ、このような高分子としては、ポリ（ラクタイド）、ポリ（グリコライド）、ポリ（ラクタイド−グリコライド）、ポリアンハイドライド、ポリオルトエステル、ポリエーテルエステル、ポリカプロラクトン、モノ−メトキシポリエチレングリコール−ポリカプロラクトン（ＭＰＥＧ−ＰＣＬ）、ポリエステルアミド、ポリ（ブチル酸）、ポリ（バレリアン酸）、ポリウレタン、またはこれらの共重合体のような生分解性高分子；及びポリアクリレート、エチレン−ビニルアセテート重合体、アクリル置換セルロースアセテート、非分解性ポリウレタン、ポリスチレン、ポリビニルクロライド、ポリビニルフルオライド、ポリ（ビニルイミダゾール）、クロロスルホネートポリオレフィン（ｃｈｌｏｒｏｓｕｌｐｈｏｎａｔｅｐｏｌｙｏｌｅｆｉｎｓ）、ポリエチレンオキサイド、またはこれらの共重合体のような非生分解性高分子を単独または混合して用いることができるが、本発明はこれらに限定されない。

難溶性化合物の安定した包接及び皮膚内における放出性などを総合的に考慮すれば、前記高分子としては、ポリ（ラクタイド）、ポリ（グリコライド）及びポリ（ラクタイド−グリコライド）のいずれか一つ以上と、モノ−メトキシポリエチレングリコール−ポリカプロラクトン（ＭＰＥＧ−ＰＣＬ）との混合物であることがさらに望ましい。

本発明において用いられる「難溶性化合物が封入されたマイクロパーチクル」とは、マイクロパーチクルの内部に難溶性化合物が位置している状態を意味し、難溶性化合物がマイクロパーチクルによって完全に囲まれた状態をいう。本明細書に記載の「封入」とは、「包接」という用語と同一な意味として使われ得る。

「含浸」とは、含まれている状態を意味し、マイクロニドルの内部に位置して外部環境と完全に遮断された状態のみならず、マイクロパーチクルの一部がマイクロニドルの表面に露出した状態も含み得る。「マイクロニドルに含浸」という意味は、マイクロニドルの内部に完全に含まれる状態のみならず、マイクロニドルを皮膚に処理する際、マイクロニドルとマイクロパーチクルとが共に投与できる状態でマイクロニドルに含まれる全ての形態を含む概念として理解できる。

このようなマイクロパーチクルは、本発明の目的を達成できれば、マトリクス（ｍａｔｒｉｘ）タイプであってもよく、リザーバー（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）タイプであってもよい。

本発明において使用可能なマイクロパーチクルとしては、本発明が属した分野における多様な公知の方法で製造できる。例えば、溶媒交換法（Ｓｏｌｖｅｎｔｅｘｃｈａｎｇｅｍｅｔｈｏｄ）、溶媒蒸発法（Ｓｏｌｖｅｎｔｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ）、メンブレン透過法（Ｍｅｍｂｒａｎｅｄｉａｌｙｓｉｓｍｅｔｈｏｄ）、噴霧乾燥法（Ｓｐｒａｙｄｒｙｉｎｇｍｅｔｈｏｄ）などを用いて本発明で使用可能なマイクロパーチクルが製造できる。例えば、非特許文献ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄＲｅｌｅａｓｅ７０（２００１）、１−２０及びＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍＴｅｃｈＲｅｓｅａｒｃｈ、３（２０１１）、１２４２−１２５４に記載の方法を用いることができる。望ましくは、通常の乳化及び溶媒蒸発法（ｅｍｕｌｓｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＳｏｌｖｅｎｔｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ）によって製造することができる。

望ましくは、本発明によるマイクロパーチクルの直径は、０．０１〜１０ μｍである。パーチクルのサイズが１０μｍ超過であれば、マイクロニドルへの含浸時、ニドルの強度が弱くなり皮膚透過が困難となる。本発明によるマイクロパーチクルの直径は、レーザー光散乱法（ＬＬＳ）によって測定され、例えば、Ｍａｌｖｅｒｎ社製のＺｅｔａｓｉｚｅｒ２０００^ＴＭを用いて測定できる。

望ましくは、本発明のマイクロパーチクルは、難溶性フェノール化合物をマイクロパーチクルの総重量に対し０．０１〜２０重量％を含み、より望ましくは０．１〜１０重量％を含み得る。また、本発明のマイクロニドルはこのようなマイクロパーチクルを、マイクロニドルの総重量に対し０．０５〜１０重量％を含むことが望ましく、さらに望ましくは、０．１〜５重量％を含むことができる。前記含量範囲内において、マイクロニドルの壊れが少なく、優れた皮膚透過率を有する。

本発明において使用可能な難溶性物質としては、ペオノール、クリソファノール、ミコフェノール酸、テトラブチルエチリデンビスフェノールまたはこれらの誘導体より選択されたいずれか一種以上を含むことができる。また他の実施例によれば、グリシテイン、ククルビタシン、クルビタシン、プランゲニジン、ゲニステイン、ダイゼインまたはこれらの混合物を、本発明の難溶性物質として用いることができる。

また、本発明は、前記マイクロニドルが付着している難溶性フィノール化合物の投与用（伝達用）マイクロニドルパッチ（ｐａｔｃｈ）システムを提供する。望ましくは、本発明の一実施例は、難溶性化合物の化粧学的皮膚投与方法を提供する。

また、本発明は、（Ｓ１）前述の高分子を用いて難溶性フェノール化合物が含有されたマイクロパーチクルを製造する段階と、（Ｓ２）皮膚内溶解性物質を用いて前記マイクロパーチクルを含むマイクロニドルを製造する段階と、を含む、難溶性フェノール化合物を安定的に包接して皮膚内に効果的に伝達し、優れた効果を奏し得る難溶性物質含有マイクロニドルの製造方法を提供する。

また、本発明は、本発明によるマイクロニドルを用いることを特徴とする難溶性フェノール物質の効果的な皮膚伝達を達成する皮膚投与方法を提供する。望ましくは、前記皮膚投与方法は、皮膚のしわを改善するための化粧学的皮膚投与方法を提供する。

本発明の一実施例によいて、本発明は、前記マイクロニドルを用いて、ｐＨ７、２５℃の水における溶解度が１ｍｇ／ｍｌ以下である難溶性フェノール化合物を安定的に含浸し、ｐＨ７、２５℃の水における溶解度が１ｍｇ／ｍｌ以下である難溶性フェノール化合物を皮膚内に効果的に伝達する難溶性フェノール化合物の皮膚投与方法を提供する。

本発明は、難溶性化合物を安定的に包接することができる。

本発明は、難溶性化合物を効果的に皮膚に伝達することができる。

本発明は、難溶性化合物を安定的に包接して皮膚に効果的に伝達することで、優れた皮膚のしわ減少効果が得られるマイクロニドルを提供する。

本発明は、このようなマイクロニドルを用いることを特徴とする難溶性物質の皮膚投与方法を提供する。

本明細書に添付される次の図面は、本発明の望ましい実施例を例示するものであり、発明の詳細な説明とともに本発明の技術的な思想をさらに理解させる役割をするため、本発明は図面に記載された事項だけに限定されて解釈されてはならない。

本発明によるマイクロニドルを製造する多くの方法の一例を示す図である。溶解性マイクロニドルは、溶液キャスト法（ｓｏｌｕｔｉｏｎｃａｓｔｉｎｇ）により製造することができ、溶液をモールドにキャストして真空及び遠心回転（ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ）により微細モールドに液を満たした後、乾燥させることで製造することができる。マイクロニドル構造体を形成する材料としては、通常の合成及び天然水溶性高分子を用いることができる。本発明によるマイクロニドルに含まれた難溶性化合物の放出挙動を評価するためのフランツ型拡散セル（Ｆｒａｎｚｄｉｆｆｕｓｉｏｎｃｅｌｌ）を示す。豚皮膚を載置したフランツ型拡散セルを用いて、豚皮膚及び受容体溶液（ａｃｃｅｐｔｏｒｓｏｌｕｔｉｏｎ）内にペオノールを含有したクリーム（Ｐ−クリーム）、ペオノール溶液が含浸されたマイクロニドル（Ｐ−ＳＭＮ）及びペオノールマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドル（Ｐ−ＭＰＭＮ）から放されたペオノールの総含量を示すことで、ペオノールの皮膚透過量を示すグラフである。豚皮膚を載置したフランツ型拡散セルを用して評価した、ペオノール溶液またはペオノールマイクロパーチクルを含むマイクロニドルからのペオノールの放出評価結果を示すグラフである。本発明によるペオノールを含むクリーム（Ｐ−クリーム）、ペオノール溶液が含浸されたマイクロニドル（Ｐ−Ｓマイクロニドル）及びペオノールマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドル（Ｐ−ＭＰマイクロニドル）を目じりのしわに長期間使用した後に現われるしわの改善程度を示す実験結果である。豚皮膚を載置したフランツ型拡散セルを用いて評価した、マイクロニドルからのゲニステインまたはダイゼインの放出評価結果を示すグラフである。本発明によるゲニステイン溶液が含浸されたマイクロニドル（Ｇ−Ｓマイクロニドル）及びゲニステインマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドル（Ｇ−ＭＰマイクロニドル）を目じりのしわに長期間使用した後に現われるしわの改善程度を示す実験結果である。

以下、本発明を具体的な実施例を挙げて説明する。しかし、本発明による実施例は多くの他の形態に変形されることができ、本発明の範囲が後述する実施例に限定されると解釈されてはならない。本発明の実施例は当業界で平均的な知識を有する者に本発明をより完全に説明するために提供されるものである。本明細書において、組成物の含量は特に言及しないかぎり、重量％で示した。

ペオノールマイクロパーチクルを含むマイクロニドルの製造
＜ペオノールクリームの製造＞
下記の表１のように、ペオノール０．０５％を含む水中油（ｏｉｌｉｎｗａｔｅｒ）の剤形を製造した。

＜ペオノールマイクロパーチクルの製造＞
メトキシポリ（エチレングリコール）−ｂ−ポリ（カプロラクトン）（ｍｅｔｈｏｘｙｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）−ｂ−ｐｏｌｙ（ｃａｐｒｏｌａｃｔｏｎｅ），ｍＰＥＧ−ＰＣＬ）二重ブロックコポリマーを用いて難溶性物質であるペオノールを包集した。先ず、ｍＰＥＧ−ＰＣＬ（５ｋ−５ｋ，５ｋ−１０ｋ１：１で混合）１０ｇを４０ｍＬのエタノールに溶かした溶液を、カプリリック／カプリックトリグリセリド２０ｇにペオノール２ｇを溶かした溶液と混合した。０．５％ポリビニルアルコール水溶液６０ｍＬに撹拌しながら前記溶液を徐々に添加した。エタノール溶媒を蒸発させるために一定時間撹拌しながら放置した後、残余エタノールをロータリーエバポレーター（ｒｏｔａｒｙｅｖａｐｏｒａｔｏｒ）を用いて除去することで、ペオノール含量が２％以上になるように溶液を製造した。製造された溶液をろ過して析出されたペオノールを除去した。

液体クロマトグラフィーで分析した結果、ペオノールの含量は２％と確認され、粒度分布計（ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ２０００^ＴＭ）で分析した結果、マイクロパーチクルの平均サイズは２１０ｎｍであった。

＜ペオノールまたはペオノールマイクロパーチクルが含有されたマイクロニドルの製造＞
下記の表２のように、ペオノール（溶液形態で添加される）含有マイクロニドル（Ｐ−ＳＭＮ）またはペオノールマイクロパーチクルが含有されたマイクロニドル（Ｐ−ＭＰＭＮ）を製造した。

具体的に、ペオノールが含浸された溶解性（ｓｏｌｕｂｌｅ）マイクロニドル（Ｐ−ＳＭＮ）は、次のように製造した。Ｏｌｉｇｏ−ＨＡ（Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ）、Ｎａ−ＣＭＣ及びトレハロースを精製水に溶解した後、グリセリン、ＨＣＯ−４０及びペオノール−ＴＧ（カプリリック／カプリックトリグリセリド）溶液を添加して溶液を製造した。製造したペオノール溶液をシリコーンマイクロニドルモールドにキャストした後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心回転して微細モールドに溶液を充填した。溶液の充填後、乾燥オーブン（７０℃）で３時間乾燥し、接着フィルムを用いてマイクロニドルをシリコーンモールドから型抜きした。

具体的に、ペオノールマイクロパーチクルが含浸された溶解性（ｓｏｌｕｂｌｅ）マイクロニドル（Ｐ−ＭＰＭＮ）は、次のように製造した。Ｏｌｉｇｏ−ＨＡ、Ｎａ−ＣＭＣ及びトレハロースを精製水に溶解した後、グリセリン、ＨＣＯ−４０及びペオノールマイクロパーチクル（ペオノール２％）を添加して溶液を製造した。製造した溶液をシリコーンマイクロニドルモールドにキャストした後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心回転して微細モールドに溶液を充填した。溶液の充填後、乾燥オーブン（７０℃）で３時間乾燥し、接着フィルムを用いてマイクロニドルをシリコーンモールドから型抜きした。

＜ペオノールの放出挙動＞
豚皮膚を載置したフランツ型拡散セルを用いて、上記で製造したクリーム及びマイクロニドルからのペオノールの放出を評価した（図２参照）。受容体溶液（ａｃｃｅｐｔｏｒｓｏｌｕｔｉｏｎ）としては、３０重量％のＤＰＧが含有されたＰＢＳ溶液を用いた。

即ち、フランツ型拡散セルを用いて、時間の経過による豚皮膚組織及び受容体溶液のペオノールの含量を液体クロマトグラフィーによって測定した。豚皮膚にペオノールクリームを塗るか、またはペオノールマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドルを付着し、時間の経過につれて皮膚内に透過したペオノールの総含量を確認した。その結果を図３に示した。図３に示したように、ペオノールを含むクリームは、皮膚を介して透過した量が約１０μｇであったが、マイクロニドルに含浸されたペオノール及びペオノールマイクロパーチクルは、ニドルによって皮膚に直接透過してその透過量が５０、６０μｇ以上となり、クリームに対して各々約５、６倍以上の高い皮膚透過量を示した。

また、皮膚透過量が高かった二つのマイクロニドルの場合、豚皮膚にあったペオノールが皮膚内に浸透する様相を確認するために、ペオノールまたはペオノールマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドルを付着し、マイクロニドルを豚皮膚内へ浸透させて溶かした後（付着時間：２時間、温度：３２℃）、マイクロニドルを除去した。マイクロニドルによってペオノールが吸収された豚皮膚をフランツ型拡散セルに入れ、ペオノールが時間の経過につれて豚皮膚から受容体溶液に放出される挙動を確認した。その結果を図４に示した。

図４に示したように、ペオノール溶液が含浸したマイクロニドルによって、ペオノールが浸透した豚皮膚は時間の経過につれて豚皮膚内のペオノールの含量が徐々に減少し、受容体溶液のペオノールの含量も徐々に増加するに対し、ペオノールマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドルによってペオノールが浸透した豚皮膚は、豚皮膚内のペオノールの含量が急激に減少し、受容体溶液においても急激に増加することを確認した。これは、ペオノール溶液が含浸されたマイクロニドルの場合、ペオノールが沈殿した結晶形態で存在することで皮膚内でペオノールが吸収されないためであり、これに対し、マイクロニドルにペオノールマイクロパーチクルが含浸された場合は、マイクロパーチクルからペオノールが無定形の状態で放出されて皮膚を透過するためである。

＜しわの改善効果＞
ペオノールクリーム、ペオノール溶液が含浸されたマイクロニドル（Ｐ−Ｓマイクロニドル）と、ペオノールマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドル（Ｐ−ＭＰマイクロニドル）と、を目じりのしわに１２週間毎日処理した後、しわの改善程度を評価した。しわの改善程度は、シリコーン模写板（ｓｉｌｉｃｏｎｅｒｅｐｌｉｃａ）及びしわの画像分析方法により確認した（Ｎ＝２０）。その結果を図５に示した。

ペオノールクリーム、ペオノール溶液が含浸されたマイクロニドルに比べ、ペオノールマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドルから各々３倍、２倍以上の優れた改善効果を奏し、これは、難溶性薬物であるペオノールがマイクロニドルによって皮膚内に浸透されたマイクロパーチクルから放出されることで、効果が高いことを確認した。

ゲニステインマイクロパーチクルを含むマイクロニドルの製造
＜ゲニステインマイクロパーチクルの製造＞
メトキシポリ（エチレングリコール）−ｂ−ポリ（カプロラクトン）二重ブロックコポリマーを用いて難溶性物質であるゲニステインを包集した。先ず、ｍＰＥＧ−ＰＣＬ（５ｋ−５ｋ，５ｋ−１０ｋ１：１で混合）１０ｇを４０ｍＬのエタノールに溶かした溶液を、ＰＥＧ４００２０ｇにゲニステイン２ｇを溶かした溶液と混合した。０．５％ポリビニルアルコール水溶液１００ｍＬに撹拌しながら前記溶液を徐々に添加した。エタノール溶媒を蒸発させるために一定時間撹拌しながら放置した後、残余エタノールをロータリーエバポレーターを用いて除去することで、ゲニステイン含量が２％になるように溶液を製造した。製造された溶液をろ過して析出されたゲニステインを除去した。

液体クロマトグラフィーで分析した結果、ゲニステインの含量は１．９％と確認され、粒度分布計（ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ２０００^ＴＭ）で分析した結果、マイクロパーチクルの平均サイズは１５０ｎｍであった。

＜ゲニステインまたはゲニステインマイクロパーチクルが含有されたマイクロニドルの製造＞
下記の表３のように、ゲニステイン（溶液形態で添加される）またはゲニステインマイクロパーチクルが含有されたマイクロニドルを製造した。

具体的に、ゲニステイン（Ｇ−ＳＭＮ）が含浸された溶解性マイクロニドルは、次のように製造した。Ｏｌｉｇｏ−ＨＡ、Ｎａ−ＣＭＣ及びトレハロースを精製水に溶解した後、グリセリン、ＨＣＯ−４０及びゲニステイン−ＤＰＧ溶液を添加して溶液を製造した。製造したゲニステイン溶液をシリコーンマイクロニドルモールドにキャストした後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心回転して微細モールドに溶液を充填した。溶液の充填後、乾燥オーブン（７０℃）で３時間乾燥し、接着フィルムを用いてマイクロニドルをシリコーンモールドから型抜きした。

具体的に、ゲニステインマイクロパーチクル（Ｇ−ＭＰＭＮ）が含浸された溶解性マイクロニドルは、次のように製造した。Ｏｌｉｇｏ−ＨＡ、Ｎａ−ＣＭＣ及びトレハロースを精製水に溶解した後、グリセリン、ＨＣＯ−４０及びゲニステインマイクロパーチクル（ゲニステイン２％）を添加して溶液を製造した。製造した溶液をシリコーンマイクロニドルモールドにキャストした後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心回転して微細モールドに溶液を充填した。溶液の充填後、乾燥オーブン（７０℃）で３時間乾燥し、接着フィルムを用いてマイクロニドルをシリコーンモールドから型抜きした。

＜ゲニステインの放出挙動＞
豚皮膚を載置したフランツ型拡散セルを用いて、上記で製造したマイクロニドルからのゲニステインの放出を評価した（図２参照）。受容体溶液としては、３０重量％のＤＰＧが含有されたＰＢＳ溶液を用いた。

即ち、フランツ型拡散セルを用いて、時間の経過による豚皮膚組織及び受容体溶液のゲニステインの含量を液体クロマトグラフィーによって測定した。豚皮膚にゲニステインまたはゲニステインマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドルを付着し、マイクロニドルを豚皮膚内へ浸透させて溶かした後（付着時間：２時間、温度：３２℃）、マイクロニドルを除去した。マイクロニドルによってゲニステインが吸収された豚皮膚をフランツ型拡散セルに入れ、ゲニステインが時間の経過につれて豚皮膚から受容体溶液に放出される挙動を確認した。その結果を図６に示した。

図６に示したように、ゲニステイン溶液が含浸したマイクロニドルによって、ゲニステインが浸透した豚皮膚は時間の経過につれて豚皮膚内のゲニステインの含量に変化がなく、受容体溶液のゲニステインの含量も殆ど検出されないことに対し、ゲニステインマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドルによってゲニステインが浸透した豚皮膚は、豚皮膚内のゲニステインの含量が徐々に減少し、受容体溶液においても徐々に増加することを確認した。これは、ゲニステイン溶液が含浸されたマイクロニドルの場合、ゲニステインが沈殿した結晶形態で存在することで皮膚内でゲニステインが吸収されないためであり、これに対し、マイクロニドルにゲニステインマイクロパーチクルが含浸された場合は、マイクロパーチクルからゲニステインが無定形の状態で放出されるためである。

＜しわの改善効果＞
ゲニステイン溶液が含浸されたマイクロニドル（Ｇ−Ｓマイクロニドル）と、ゲニステインマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドル（Ｇ−ＭＰマイクロニドル）と、を目じりのしわに１２週間毎日処理した後、しわの改善程度を評価した。しわの改善程度は、シリコーン模写板及びしわの画像分析方法により確認した（Ｎ＝２０）。その結果を図７に示した。

本発明によるゲニステイン溶液が含浸されたマイクロニドルに比べ、ゲニステインマイクロパーチクルが含浸されたマイクロニドルから３倍以上の優れた改善効果を奏し、これは、難溶性薬物であるゲニステインがマイクロニドルによって皮膚内に浸透されたマイクロパーチクルから放出されることで、効果が高いことを確認した。

本発明は、皮膚のしわ改善のための化粧品、薬学用途に用いることができる。

本発明のマイクロニドルは、優れた皮膚のしわ減少効果を奏する。

Claims

難溶性化合物が含有されたマイクロパーチクルを含むマイクロニドル。
前記難溶性化合物が、難溶性フェノール化合物または難溶性イソフラボンであることを特徴とする請求項１に記載のマイクロニドル。
前記難溶性化合物は、ｐＨ７、２５℃の水における溶解度が１ｍｇ／ｍｌ以下であることを特徴とする請求項１に記載のマイクロニドル。
前記難溶性フェノール化合物は、ペオノール、クリソファノール、ミコフェノール酸、テトラブチルエチリデンビスフェノールまたはこれらの誘導体より選択されたいずれか一種以上であることを特徴とする請求項２に記載のマイクロニドル。
前記難溶性フェノール化合物が、ペオノールまたはこれらの誘導体であることを特徴とする請求項４に記載のマイクロニドル。
前記難溶性イソフラボンが、グリシテイン、ククルビタシン、クルビタシン、プランゲニジン、ゲニステイン、ダイゼインまたはこれらの混合物であることを特徴とする請求項２に記載のマイクロニドル。
前記難溶性イソフラボンが、グリシテイン、ゲニステイン、ダイゼインまたはこれらの混合物であることを特徴とする請求項６に記載のマイクロニドル。
前記マイクロニドルを形成する物質が、皮膚内で溶解され、前記マイクロパーチクルが、疎水性コアを形成する高分子を含むことを特徴とする請求項１に記載のマイクロニドル。
前記マイクロニドルを形成する物質が、ヒアルロン酸、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ビニルピロリドン−ビニルアセテート共重合体、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、糖類またはこれらの混合物であることを特徴とする請求項８に記載のマイクロニドル。
前記マイクロニドルが、マイクロニドルを形成する物質に加え、可塑剤をさらに含むことを特徴とする請求項８に記載のマイクロニドル。
前記疎水性コアを形成する高分子が、ポリ（ラクタイド）、ポリ（グリコライド）、ポリ（ラクタイド−コ−グリコライド）、ポリアンハイドライド、ポリオルトエステル、ポリエーテルエステル、ポリカプロラクトン、モノ−メトキシポリエチレングリコール−ポリカプロラクトン（ＭＰＥＧ−ＰＣＬ）、ポリエステルアミド、ポリ（ブチル酸）、ポリ（バレリアン酸）、ポリウレタン、ポリアクリレート、エチレン−ビニルアセテート重合体、アクリル置換セルロースアセテート、非分解性ポリウレタン、ポリスチレン、ポリビニルクロライド、ポリビニルフルオライド、ポリ（ビニルイミダゾール）、クロロスルホネートポリオレフィン、ポリエチレンオキサイド、またはこれらの共重合体、またはこれらの混合物であることを特徴とする請求項８に記載のマイクロニドル。
前記疎水性コアを形成する高分子が、ポリ（ラクタイド）、ポリ（グリコライド）及びポリ（ラクタイド−コ−グリコライド）のうちいずれか一種以上と、モノ−メトキシポリエチレングリコール−ポリカプロラクトンとの混合物であることを特徴とする請求項８に記載のマイクロニドル。
前記マイクロパーチクルが、マトリクスタイプまたはリザーバータイプであることを特徴とする請求項１に記載のマイクロニドル。
前記マイクロパーチクルの直径が、０．０１〜１０μｍであることを特徴とする請求項１に記載のマイクロニドル。
（Ｓ１）疎水性コアを形成する高分子を用いて難溶性化合物が含有されたマイクロパーチクルを製造する段階と、
（Ｓ２）皮膚内溶解性物質を用いて前記マイクロパーチクルを含むマイクロニドルを製造する段階と、を含む、難溶性化合物含有マイクロニドルの製造方法。
前記難溶性化合物は、ｐＨ７、２５℃の水における溶解度が１ｍｇ／ｍｌ以下であることを特徴とする請求項１５に記載のマイクロニドルの製造方法。
前記難溶性化合物が、難溶性フェノール化合物であり、前記難溶性フェノール化合物が、ペオノール、クリソファノール、ミコフェノール酸、テトラブチルエチリデンビスフェノール、またはこれらの誘導体より選択されたいずれか一種以上であることを特徴とする請求項１５に記載のマイクロニドルの製造方法。
前記難溶性化合物が難溶性イソフラボンであり、前記難溶性イソフラボンは、グリシテイン、ククルビタシン、クルビタシン、プランゲニジン、ゲニステイン、ダイゼインまたはこれらの混合物であることを特徴とする請求項１５に記載のマイクロニドルの製造方法。
請求項１〜１４のうちいずれか一項に記載のマイクロニドルを用いてｐＨ７、２５℃の水における溶解度が１ｍｇ／ｍｌ以下である難溶性化合物を皮膚内に伝達して皮膚のしわを改善することを特徴とする、難溶性化合物の皮膚投与方法。
難溶性化合物の含有されたマイクロパーチクルを含むマイクロニドルの皮膚しわ改善用途。