JP2018127443A - ヒト抗ｆｘｉｉｉ（ｆ１３、凝固第ｘｉｉｉ因子）−ａモノクローナル抗体 - Google Patents

ヒト抗ｆｘｉｉｉ（ｆ１３、凝固第ｘｉｉｉ因子）−ａモノクローナル抗体 Download PDF

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白帝 一瀬
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龍彦 小澤
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Abstract

【課題】血栓症の予防または治療薬の提供。【解決手段】ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片。【選択図】なし

Description

本発明は、ヒト抗FXIII（F13、凝固第XIII因子)-Aモノクローナル抗体およびその用途に関する。
FXIII（F13、凝固第XIII因子)（以下、FXIIIと称する）は、Aサブユニット二量体とBサブユニット二量体からなる異種四量体として血中を循環しており、トロンビンにより活性化されている。FXIIIは、血液凝固の最終段階で作用する因子であり、止血凝固系の最終段階でフィブリン間の架橋を促進し、安定化フィブリン塊を保ち、止血の完了維持と創傷治癒作用に働く（非特許文献１）。FXIIIをフィブリン安定化因子ともいう。
後天性自己免疫性出血病FXIII/13は、FXIIIに対する自己抗体が原因である。この疾患は被験体の血漿中のFXIIIに対する自己抗体の存在を検出することにより診断することができ、後天性自己免疫性出血病FXIII/13の診断キットとして、FXIIIに対する自己抗体の検出キットがある。
日本においては、今のところがんによる死亡者数と心筋梗塞、脳梗塞、肺梗塞などの血栓症による死亡者数はほぼ拮抗しているが、欧米では血栓症による死亡者数はがんの約３倍であり、日本においても、その状態に近づいていくものと思われる。血栓症を起こし易い傾向・素因は栓友病（thrombophilia）と呼ばれている。これはthrombo（血栓）＋philia（傾向）の造語である。血栓症も多因子疾患であるから複数の遺伝要因と環境要因が相まって発症するが、遺伝要因は世代を越えてほぼ不変であるから環境要因の変化が血栓症の頻度やそれによる死亡数の増加の主因である（非特許文献１）。
一瀬白帝、日本内科学雑誌、第９９巻、第８号、pp.1934-1943, (2010)
本発明は、血栓症の予防または治療薬、あるいは血漿中のFXIIIに対する自己抗体を検出するための免疫学的測定法キット中の自己抗体捕捉用抗原の反応性の管理用抗体として用いるFXIIIのAサブユニット（以下、FXIII-Aと称する）に対するヒト抗体の提供を目的とする。
本発明者らは、後天性自己免疫性出血病FXIII/13患者から採取したリンパ球から、先に本発明者らが開発したISAAC(ImmunoSpot Array Assay on a Chip)法によりヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を製造した。該ヒト抗体が血栓症の予防または治療に用い得ること、および血漿中のFXIIIに対する自己抗体を検出するための免疫学的測定法キット中の自己抗体捕捉用抗原の反応性の管理用抗体として用い得ることを見出し、本発明を完成させるに至った。
すなわち、本発明は以下のとおりである。
[１] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A01L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号６９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号７０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号７１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号７２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）RNDで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号７３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[２] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A11K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号７４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号７５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号７６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号７７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号７８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[３] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A26K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号１０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号１２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号１０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号１２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
（a）配列番号７９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号８０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号８１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号８２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）DASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号８３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[４] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A29K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号１４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号１６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号１４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号１６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号８４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号８５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号８６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号８７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）DASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号８８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[５] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A35K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号１８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号１８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号８９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号９０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号９１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号９２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号９３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[６] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A36K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号２２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片； 配列番号２２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号９４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号９５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号９６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号９７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）DASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号９８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[７] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A39K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号２６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号２６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
（a）配列番号９９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１００で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１０１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１０２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１０３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[８] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A43K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号３０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号３２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号３０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号３２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１０５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１０６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１０７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）WAYで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１０８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[９] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A51K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号３４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号３６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号３４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号３６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号１０９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１１０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１１１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１１２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）WAYで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１１３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１０] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A53L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号３８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号３８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１１４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１１５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１１６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１１７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１１８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１１] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A53K1、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号４２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号４２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号１１９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１２０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１２１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１２２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GAAで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１２３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１２] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A54K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号４６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号４６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号１２４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１２５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１２６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１２７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）WAYで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１２８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１３] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A60G1L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号５０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号５２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号５０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号５２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号１２９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１３０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１３１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１３２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１３３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１４] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A60G4L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号５４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号５６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号５４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号５６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号１３４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１３５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１３６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１３７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１３８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１５] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A69K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号５８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号６０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号５８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号６０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号１３９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１４０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１４１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１４２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１４３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１６] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A75K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号６２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号６４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号６２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号６４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号１４４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１４５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１４６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１４７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１４８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１７] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A78L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
配列番号６６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号６８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号６６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号６８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
（a）配列番号１４９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１５０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１５１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１５２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１５３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１８] 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A39G11K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片： 配列番号２６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
配列番号２６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または（a）配列番号９９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１００で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１０１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号７７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号７８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
[１９] ヒトFXIII-Aの全長アミノ酸配列の７９番目のアミノ酸から９８番目のアミノ酸からなるペプチド、５４０番目のアミノ酸から５５９番目のアミノ酸からなるペプチドおよび７１２番目のアミノ酸から７３１番目のアミノ酸からなるペプチドと結合する抗体。
[２０] モノクローナル抗体A11K、A26K、A36K、A53L、A53K1またはA69Kである、[１９]の抗体。
[２１] ヒトFXIII-Aの全長アミノ酸配列の７９番目のアミノ酸から９８番目のアミノ酸からなるペプチド、２９６番目のアミノ酸から３１３番目のアミノ酸からなるペプチド、５５６番目のアミノ酸から５７４番目のアミノ酸からなるペプチド、５９６番目のアミノ酸から６１５番目のアミノ酸からなるペプチドおよび７１２番目のアミノ酸から７３１番目のアミノ酸からなるペプチドと結合する抗体。
[２２] モノクローナル抗体A01L、A60G4LまたはA79Lである、[２１]の抗体。
[２３] [１]〜[２２]のいずれかの抗体のいずれかのH鎖またはL鎖を含んだシャッフル抗体。
[２４] [１]〜[２３]のいずれかのヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片を有効成分として含む、血栓症の予防または治療のための医薬組成物。
[２５] 血栓症としては、心筋梗塞、不安定狭心症、心房細動、脳卒中、腎障害、肺塞栓症、深部静脈血栓症、経皮経管冠動脈形成術、播種性血管内凝固症候群、敗血症、人工臓器、シャントまたはプロテーゼに関連する血栓症である、[２４]の医薬組成物。
[２６] [１]〜[２３]のいずれかのヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片からなる、血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに結合した自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットに用いる抗原捕捉用抗体の反応性管理用抗体、または陽性コントロール抗体。
[２７] 免疫学的測定法キットが、イムノクロマトグラフィーまたはELISAである、[２６]の免疫学的測定法キットに用いる抗原捕捉用抗体の反応性管理用抗体、または陽性コントロール抗体。
[２８] [１]〜[２３]のいずれかのヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片からなる、血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに対する遊離の自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットに用いる抗体捕捉用抗原の反応性管理用抗体、または陽性コントロール抗体。
[２９] 免疫学的測定法キットが、イムノクロマトグラフィーまたはELISAである、[２８]の免疫学的測定法キットに用いる抗体捕捉用抗原の反応性管理用抗体、または陽性コントロール抗体。
[３０] [１]〜[２３]のいずれかのヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片の、血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに結合した自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットにおける、抗原捕捉用抗体としての使用。
[３１] 免疫学的測定法キットが、イムノクロマトグラフィーまたはELISAである、[３０]の使用。
[３２] [１]〜[２３]のいずれかのヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片の、FXIII-Aタンパク質量を測定するための免疫学的測定法キットにおける、FXIII-Aタンパク質量測定用抗体としての使用。
[３３] 免疫学的測定法キットが、イムノクロマトグラフィーまたはELISAである、[３２]の使用。
本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体は、完全なヒト抗体であるので、ヒトに対して副作用を起こすことなく、血栓症の予防または治療に用いることができる。
さらに、本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体は、リコンビナント抗体であるため、同一の抗体を安定に作製することができるので、血漿中のFXIII-Aに対する自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キット中の自己もしくは同種抗体捕捉用抗原、または抗原捕捉用抗体の反応性の管理用抗体、または陽性コントロール抗体として安定に用いることができる。また、ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を抗原捕捉用抗体として抗FXIII-A抗体検出またはFXIII-Aタンパク質量測定に用いることができる。
ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の固相におけるFXIII-Aに対する反応性を示す図である。 ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の液相におけるFXIII-Aに対する反応性を示す図である。 ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の固相におけるnative FXIII-Aおよび変性FXIII-Aに対する反応性を示す図である ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の活性化FXIII-AおよびA2B2異種四量体に対する液相での反応性を示す図である。 血漿中でのα2-プラスミンインヒビターへのアミン取り込み活性に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である（その１）。 血漿中でのα2-プラスミンインヒビターへのアミン取り込み活性に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である（その２）。 血漿中でのα2-プラスミンインヒビターへのアミン取り込み活性に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である（その３）。 血漿中でのフィブリン架橋反応に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である（その１）。 血漿中でのフィブリン架橋反応に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である（その２）。 活性化FXIII-Aのアミン取り込み活性に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である。 血漿中でのFXIII-Aの活性化ペプチド切断に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である。 精製FXIII-Aのトロンビンによる活性化ペプチド切断に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である。 トロンビン依存性のA2B2異種四量体の解離に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である（その１）。 トロンビン依存性のA2B2異種四量体の解離に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である（その２）。 トロンビン依存性のA2B2異種四量体の解離に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である（その３）。 FXIIIのフィブリン塊への取り込みに対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響(フィブリン形成後にクロットを取り除いた上清中のFXIII-A（上図）およびFXIII-B（下図）残存量）を示す図である（その１）。 FXIIIのフィブリン塊への取り込みに対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響(フィブリン形成後にクロットを取り除いた上清中のFXIII-A（上図）およびFXIII-B（下図）残存量）を示す図である（その２）。 FXIIIのフィブリン塊への取り込みに対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響(フィブリン形成後にクロットを取り除いた上清中のFXIII-A（上図）およびFXIII-B（下図）残存量）を示す図である（その３）。 FXIIIのフィブリン塊への取り込みに対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響(フィブリン形成後にクロットを取り除いた上清中のFXIII-A（上図）およびFXIII-B（下図）残存量）を示す図である（その４）。 FXIIIのフィブリン塊への取り込みに対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響(フィブリン形成後にクロットを取り除いた上清中のFXIII-A（上図）およびFXIII-B（下図）残存量）を示す図である（その５）。 FXIIIのフィブリン塊への取り込みに対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響(フィブリンに取り込まれたFXIII-BおよびIgGのウエスタンブロット解析）を示す図である。 A2B2異種四量体形成に対するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の影響を示す図である。 ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体によるA2B2異種四量体からのFXIII-Aの乗っ取りを示す図である。 dissociationインヒビターとして機能するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の作用を示す図である。 assemblyインヒビターとして機能するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の作用を示す図である。 抗FXIII-A自己抗体検出イムノクロマトグラフィーのテスト結果を示す図である。 抗FXIII-A自己抗体検出イムノクロマトグラフィーのテスト結果をライン強度で示した図である。 希釈したモノクローナル抗体を健常者血漿と反応させた後に行った抗FXIII-A自己抗体検出イムノクロマトグラフィーの結果を示す図である。 各ヒトモノクローナル抗体とマウスモノクローナル抗体の競合阻害を示す図である。 ヒトモノクローナル抗体のエピトープ解析の結果を示す図である（その１）。 ヒトモノクローナル抗体のエピトープ解析の結果を示す図である（その２）。 ヒトモノクローナル抗体のエピトープ解析の結果を示す図である（その３）。 単離したヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の性質を示す図である。 ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体のF(ab')2mAbによる免疫沈降の競合阻害の結果を示す図である。 各種F(ab')2mAbによる免疫沈降の競合阻害の結果（相対強度）を示す図である。 ELISAによりFXIII-AペプチドとF(ab')2mAbの結合実験で用いたペプチドの全長FXIII-A上の位置（Ａ）、ELISAのプロトコール（Ｂ）、実験の原理（Ｃ）、およびFXIII-AペプチドとF(ab')2mAbの結合実験の結果（ＤからＦ）を示す図である。 rFXIII-Aによるペプチド・抗体結合の競合阻害実験で用いたペプチドの全長rFXIII-A上の位置（Ａ）、実験のプロトコール（Ｂ）、実験の原理（Ｃ）、およびrFXIII-Aによるペプチド・抗体結合の競合阻害実験の結果（ＤおよびＥ）を示す図である。 F(ab')2mAbと特異的に結合したFXIII-A上のペプチドの位置を立体的に示す図である。 抗FXIII-A mAb存在下でのプロテアーゼによるFXIII-Aの分解を調べる実験プロトコール（図２０−１Ａ）および原理（図２０−１Ｂ）を示す図である。 抗FXIII-A mAb非存在下（非特異的IgG存在下）で行ったプロテアーゼによるFXIII-Aの分解を調べる実験の結果を示す図である。 FXIII-Aの各切断断片の定量および保護された切断部位の検索において、陰性対照mAb (IgG)存在下での各々の切断断片のピーク面積を求めて、A69K mAb (IgG)存在下での各々の切断断片のピーク面積と比較した結果を示す図である。 FXIII-Aの各切断断片の定量および保護された切断部位の検索において、各切断部位について断片のピーク面積を積算した結果を示す図である。 FXIII-Aの各切断断片の定量および保護された切断部位の検索において、陰性対照mAb (IgG) 存在下でのピーク面積を1.0として相対値を算出した結果（A69K mAb(IgG)を示す図である。 FXIII-Aの各切断断片の定量および保護された切断部位の検索において、A69K mAb (IgG)とA79L mAb (IgG)で保護された切断部位（相対値0.1未満）を示す図である。 抗ヒトFXIII-A IgGにより、プロテアーゼによる切断から保護された部位を示す図である。 抗ヒトFXIII-A F(ab')2mAbにより、プロテアーゼによる切断から保護された部位を示す図である。 A69KのFXIII-A上の推定結合部位を示す図である。 A79LのFXIII-A上の推定結合部位を示す図である。
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明は、リコンビナント抗体であるヒト抗FXIII-A（FXIIIのAサブユニット）モノクローナル抗体とその用途である。
１．ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の作製法
ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体は、ISAAC(ImmunoSpot Array Assay on a Chip)法により作製した。
ISAAC法は、マイクロウェルアレイチップを用いて抗原特異的抗体分泌細胞（ASC）を迅速かつ網羅的にスクリーニングする方法である。該方法においては、抗体産生細胞が１個入る程度の大きさ（直径10〜15μm程度）のウェルを多数有するマイクロウェルアレイチップであって、ウェルの周辺のチップ表面を抗免疫グロブリン抗体（または抗体を得ようとする抗原）で被覆したマイクロウェルアレイチップを用いる。特定の抗原に対する抗体を産生する動物から抗体産生細胞を含む末梢血リンパ球を採取し、マイクロウェルアレイチップのウェルに細胞を１個ずつ播種する。培養液中にチップを浸し、分泌された抗体がウェルから前記被覆層に拡散する条件で培養することにより、抗体を産生分泌する細胞から分泌された抗体が、格納されたウェルの周囲の抗免疫グロブリン抗体（または抗原）に結合する。次いで、蛍光物質で標識した前記抗原（または抗原に対する抗体）をマイクロウェルアレイチップに添加する。標識した前記抗原（または抗原に対する抗体）がウェルの周囲の抗免疫グロブリン抗体（または抗原）に結合し、標識物質から発せられるシグナルにより、どのウェル内に抗原特異的抗体を産生分泌する細胞が格納されているかがわかる。この細胞を蛍光顕微鏡下でマイクロキャピラリーを用いて回収する。細胞から核酸を抽出し、RT-PCR等により抗体のcDNAを増幅し、抗体遺伝子をクローニングする。該遺伝子を用いて、所望の抗体をリコンビナント抗体として作製することができる。
本発明においては、FXIII-Aに対する自己抗体を有する自己免疫性出血病FXIII/13患者からリンパ球を採取し、前記のISAACにより、FXIII-Aに対するヒト抗体のcDNAを得ることができ、ヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体をリコンビナント抗体として作製することができる。
ISAAC法は、特開2009-34047号公報、特開2014-73100号公報、特開2014-162772号公報、Aishun Jin et al., Nature Medicine, Vol.15, No. 9, September 2009, pp.1088-1093,およびAishun Jin et al., Nature Protocols, Vol.6, No.5, 2011, pp.668-676の記載に従って行うことができる。
ISAAC法により、下記の１９種類のヒトモノクローナル抗体が得られた。
A01L、A26K、A29K、A35K、A36K、A11K、A39K、A43K、A51K、A53L、A54K、A11G39K、A39G11K、A53K1、A60G1L、A60G4L、A69K、A75K、及びA78L。
本発明のヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体は、抗体の重鎖をコードするDNAおよび軽鎖をコードするDNAを発現ベクターに挿入し、該ベクターを用いて宿主細胞を形質転換し、該宿主細胞を培養して産生させることができる。この際、上記の重鎖をコードするDNAおよび軽鎖をコードするDNAを同じ発現ベクターに挿入し、該ベクターを用いて宿主細胞を形質転換してもよいし、重鎖をコードするDNAと軽鎖をコードするDNAを別々のベクターに挿入し、２つのベクターを用いて宿主細胞を形質転換してもよい。この際、特定のアイソタイプの重鎖定常領域および軽鎖定常領域をコードするDNAを予め挿入したベクターに重鎖可変領域および軽鎖可変領域をコードするDNAを挿入してもよい。また、該ベクターは宿主細胞からの抗体の分泌を促進するシグナルペプチドをコードするDNAを含んでいてもよい。この場合、シグナルペプチドをコードするDNAと抗体をコードするDNAをインフレームで連結するようにする。抗体が産生される際にシグナルペプチドが除去されるので、抗体を成熟タンパク質として得ることができる。
上記の１９種類のヒトモノクローナル抗体のうち、A11G39KおよびA39G11Kはシャッフル抗体であり、H鎖とL鎖を本来の組合せとは異なる組合せで作製した抗体である。A11G39K抗体はA11K抗体のH鎖とA39K抗体のL鎖を組合せた抗体であり、A39G11K抗体はA39K抗体のH鎖とA11K抗体のL鎖を組合せた抗体である。例えば、A39G11K抗体はA39K抗体のH鎖をコードするDNAとA11K抗体のL鎖をコードするDNAを宿主細胞に導入することにより作製することができる。
本発明は、A01L、A11K、A26K、A29K、A35K、A36K、A39K、A43K、A51K、A53L、A53K1、A54K、A60G1L、A60G4L、A69K、A75K、及びA78Lの抗体のいずれかのH鎖またはL鎖を含んだシャッフル抗体も包含する。
２．本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体
本発明のヒト抗FXIIIモノクローナル抗体は、FXIIIインヒビターとして機能する抗体と機能しない抗体が存在する。FXIIIインヒビターとして機能する抗体は、dissociationインヒビターおよびassemblyインヒビターに分類される。ここで、インヒビターとはFXIIIの機能を阻害する抗体をいう。
これらの反応パターンは、固相化したFXIII-Aに対する反応性の強さおよび液相でのFXIII-Aに対する反応性の強さ、FXIII活性の阻害活性、活性化FXIIIのアミン取り込み活性の阻害活性、FXIIIの活性化の阻害活性、FXIIIのフィブリンへの取り込みの阻害活性、FXIIIのA2B2異種四量体形成阻害活性、FXIIIのA2B2異種四量体からのFXIII-Aの乗っ取り（取り上げ）活性を測定することにより分類することができる。各活性の測定方法は、実施例に詳述する。
dissociationインヒビターは活性化過程でのFXIII-AからFXIII-B サブユニット（以下、FXIII-Bと称する）の解離をブロックするインヒビターであり（図１０−１）、活性化ペプチド（AP）の切断は妨害しないもののFXIII-Bが離れないためにフィブリンγ鎖間を架橋することができず、FXIIIをクロットに留める抗体である。dissociationインヒビターは、活性化の最後の段階である活性型FXIII-AとFXIII-Bの解離を阻害し、活性化を阻害する。dissociation インヒビターをactivationインヒビターとも呼ぶ。
assemblyインヒビターはFXIIIのFXIII-Aに結合した場合、FXIII-AからFXIII-Bの解離を促すことで、適切なフィブリノーゲン-FXIII複合体を崩壊させ、トロンビンによるフィブリン形成時に同時進行するはずの活性化ペプチド（AP）切断が起こり難くなる抗体である（図１０−２）。assemblyインヒビターは、FXIII-AとFXIII-Bの結合（A2B2複合体形成）を阻害し、FXIII-Aの安定化を阻害する。これにより、FXIII-Aが減少してフィブリンクロットの安定化が阻害され、クロットの除去が促進される。
上記の１９種類の抗体のうち、A01L、A11K、A26K、A36K、A53L、A53K1、A60G4L、A69KおよびA79Lは液相でFXIII-Aを認識した。
上記の１９種類の抗体のうち、A11K、A26K、A36K、A53L、A53K1およびA69Kは、dissociationインヒビターに分類され、A01L、A60G4LおよびA78Lはassemblyインヒビターに分類される。その他の、A29K、A35K、A39K、A43K、A51K、A54K、A11G39K、A39G11K、A60G1LおよびA75Kは非インヒビターである。
dissociationインヒビターである６種類の抗体はカルシウム依存性解離反応を阻害する抗体であり、活性化阻害型抗体ともいう。また、assemblyインヒビターである３種類の抗体は、A2B2複合体形成を阻害する抗体であり、複合体形成阻害型抗体ともいう。図１４に各抗体の性質を示す。
１９種類のヒトモノクローナル抗体のうちA01L、A11K、A26K、A29K、A35K、A36K、A39K、A43K、A51K、A53L、A53K1、A54K、A60G1L、A60G4L、A69K、A75KおよびA78Lの１７種類のヒトモノクローナル抗体の重鎖可変領域のDNA配列およびアミノ酸配列、軽鎖可変領域のDNA配列およびアミノ酸配列、重鎖可変領域のCDR(相補性決定領域）（CDR1、CDR2およびCDR3）のアミノ酸配列、ならびに軽鎖可変領域のCDR(相補性決定領域）（CDR1、CDR2およびCDR3）のアミノ酸配列を示す。
１．A01L
重鎖(γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号１）
ATGGAGTTGGGGCTGTGCTGGGTTTTCCTTGTTGCTATTTTAGAAGGTGTCCAGTGTGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGTTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGGCTCTGGATTCACCTTCAGTAGTTATAGCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAGGGGCCTAGAATGGGTTGCATACATTAGTAGTAGTAGTGGCACCATATATTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCATCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAGCTCACTTTTTCTGCACATGAACAACGTGAGAGGCGAGGACACGGCTCTGTATTACTGTGCGAGAGATATTCGGGCAGCGCGCAAATTGAGCAGCAGCAGGTCCTATCCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号２）
MELGLCWVFLVAILEGVQCEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAGSGFTFSSYSMNWVRQAPGRGLEWVAYISSSSGTIYYADSVKGRFIISRDNAKSSLFLHMNNVRGEDTALYYCARDIRAARKLSSSRSYPWGQGTLVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号６９）
GFTF
ＣＤＲＨ２（配列番号７０）
ISSSSGTI
ＣＤＲＨ３（配列番号７１）
CARDIRAARKLSSSRSYPW

軽鎖（λ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号３）
ATGGCCGGCTTCCCTCTCCTCCTCACCCTCCTCACTCACTGTGCAGGGTCCTGGGCCCAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGAGACCCCCGGGCAGAGGATCAATATCTCTTGTTCTGGAAGCAACTCCAGCATCGGACTTGATTATGTATACTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAGCGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATGATCAGCGGCCCCCAGGGGTCCCTGAACGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCACAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTATTGTGCAACATGGGATGACAGTCTGAGTACTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGTTGACCGTCCTA

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号４）
MAGFPLLLTLLTHCAGSWAQSVLTQPPSASETPGQRINISCSGSNSSIGLDYVYWYQQLPGAAPKLLIYRNDQRPPGVPERFSGSKSGTTASLAISGLRSEDEADYYCATWDDSLSTWVFGGGTKLTVL

ＣＤＲＬ１（配列番号７２）
NSSIGLDY
ＣＤＲＬ２
RND
ＣＤＲＬ３（配列番号７３）
CATWDDSLSTWVF
２．A11K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号５）
ATGAAACATCTGTGGTTCTTCCTTCTCCTTGTGGCAGCTCCCAGATGGGTCCTGTCCCAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAATAATTATTACTGGAGCTGGATGCGGCAGCCTCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGGCGCCTCTATTACAGCGGGACCATCAACTACAACCCCTCCCTCAGGAGTCGAGCTATCATATCAGTTAACACATCCAAGAATCAATTTTCCCTGAGGCTGAGCTCTGTGACCGCTGCGGACACGGCCCGATATTACTGTGCGAGAGTCGCCTATTGTTATGCTTCGGGGAATTATGCAGTGGACTGCTTCGATACCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCATCGTCTCCTCAG
重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号６）
MKHLWFFLLLVAAPRWVLSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSINNYYWSWMRQPPGKGLEWIGRLYYSGTINYNPSLRSRAIISVNTSKNQFSLRLSSVTAADTARYYCARVAYCYASGNYAVDCFDTWGQGTLVIVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号７４）
GGSINNYY
ＣＤＲＨ２（配列番号７５）
LYYSGTI
ＣＤＲＨ３（配列番号７６）
CARVAYCYASGNYAVDCFDTW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号７）
ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTCCTGCTACTCTGGCTCCGAGGTGCCAAATGTGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTGGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAGAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAAGAGAGTTACAGTACTACCTGGTACACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGAGACCAAAC

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号８）
MDMRVPAQLLGLLLLWLRGAKCDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQESYSTTWYTFGQGTKLETK

ＣＤＲＬ１（配列番号７７）
QSISSY
ＣＤＲＬ２
AAS
ＣＤＲＬ３（配列番号７８）
CQESYSTTWYTF
３．A26K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号９）
ATGGATCTCATGTGCAAGAAAATGAAGCACCTGTGGTTCTTCCTCCTGCTGGTGGCGGCTCCCAGATGGGTCCTGTCCCAGGTGCACCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCCGGTGGCTCCATCAGCAGTACCACGTTCTCCTGGGGCTGGATTCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGAAGTATGTATTATAGTGGGGGCACCTACTACAACCCGTCCCTCAAGAGACGAGTCACCATCTCCGTAGACACGTCCAAGAATCTTGTCTCTCTGAAGCTGAGGTCTGTGACCGCCTCAGACACGGCTCTTTATTACTGTGCGAGACATGTTCCCGTGGGTCGGGGAATTCCCAGCACTTCCAAGTACTTCGACCCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１０）
MDLMCKKMKHLWFFLLLVAAPRWVLSQVHLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSTTFSWGWIRQPPGKGLEWIGSMYYSGGTYYNPSLKRRVTISVDTSKNLVSLKLRSVTASDTALYYCARHVPVGRGIPSTSKYFDPWGQGTLVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号７９）
GGSISS
ＣＤＲＨ２（配列番号８０）
MYYSGGT
ＣＤＲＨ３（配列番号８１）
CARHVPVGRGIPSTSKYFDPW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号１１）
ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGTTCCCAGGTTCCAGATGCGACATCCAGATGACCCAATCTCCATCTTCCGTGTCTGCGTCTGTCGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGACATTAGCAGGTGGTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAATGCCCCTAAGCTCCTGATTTATGATGCATCCACTTTGCAAACTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGGGGGTCTGGTACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAACCTGCACCCTGAAGATATCGCAACTTACTATTGTCAACAGGCTGATAGTTCCCCATTCCCTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAAG

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１２）
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQDISRWLAWYQQKPGNAPKLLIYDASTLQTGVPSRFSGGGSGTDFTLTISNLHPEDIATYYCQQADSSPFPFGPGTKVDIK

ＣＤＲＬ１（配列番号８２）
QDISRW
ＣＤＲＬ２
DAS
ＣＤＲＬ３（配列番号８３）
CQQADSSPFPF
４．A29K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号１３）
ATGAAACACCTGTGGTTCTTCCTCCTGCTGGTGGCAGCTCCCAGATGGGTCCTGTCCCACCTGCAGCTGCAGGAGTCCGGCTCAGGACTGGTGAAGCCTTCACAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTCTGGTGGCTCCATCACCAATGTTGGTTACTCCTGGAGCTGGATCCGGCAGCCACCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGATTGGGTACATCTCTTACAGTGGGAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACAGGCCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAGGTTGACCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCCAGAGGGGACCACCGGGGTGGTACGCCTTTGATTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１４）
MKHLWFFLLLVAAPRWVLSHLQLQESGSGLVKPSQTLSLTCAVSGGSITNVGYSWSWIRQPPGKGLEWIGYISYSGSTNYNPSLKSRVTISVDRPKNQFSLRLTSVTAADTAVYYCARGDHRGGTPLIDYWGQGTLVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号８４）
GGSITNV
ＣＤＲＨ２（配列番号８５）
ISYSGST
ＣＤＲＨ３（配列番号８６）
CARGDHRGGTPLIDYW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号１５）
ATGGAAGCCCCAGCTCAGCTTCTCTTCCTCCTGCTACTCTGGCTCCCAGATACCACCGGAGAAATTGTGTTGACACAGGCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGGTACATAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAAC

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１６）
MEAPAQLLFLLLLWLPDTTGEIVLTQAPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYIAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGGGTKVEIK

ＣＤＲＬ１（配列番号８７）
QSVSRY
ＣＤＲＬ２
DAS
ＣＤＲＬ３（配列番号８８）
CQQRSNWPLTF
５．A35K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号１７）
ATGGAGTTTGGGCTGAGCTGGGTTTTCCTCGTTGCTCTTTTAAGAGGTGTCCAGTGTCAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATGCTGTGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCATATGATGGAACTAATAAATACTACGCAGACTCCGTGAGGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGGCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGATCGGGTCGGATACAGGTATGGTTCCGGAAGGTACTACTACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１８）
MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYAVHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGTNKYYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMNRLRAEDTAVYYCARDRVGYRYGSGRYYYYGMDVWGQGTTVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号８９）
GFTFSSYA
ＣＤＲＨ２（配列番号９０）
ISYDGTNK
ＣＤＲＨ３（配列番号９１）
CARDRVGYRYGSGRYYYYGMDVW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号１９）
ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGTTCCCAGGTTCCAGATGCGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAATCACTATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGTTGGTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAATTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTACTATTGTCAACAGGCTAACAGTTTCCCATTCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAAC

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号２０）
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSASVGDRITITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPFTFGPGTKVDIK

ＣＤＲＬ１（配列番号９２）
QGISSW
ＣＤＲＬ２
AAS
ＣＤＲＬ３（配列番号９３）
CQQANSFPFTF
６．A36K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号２１）
ATGAAGCACCTGTGGTTCTTCCTCCTGCTGGTGGCGGCTCCCAGATGGGTCTTGTCCCAGCTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGACTCCATCAGCAGTGGTCATTACTCTTGGGGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAGCGGACTGGAGTGGATTGGGAGTATGTTTTATAGTGGGGGCACCTATTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATTTCCATGGACACGTCCAAGAATCACTTCTCCGTGAAGCTGAGGTCTGTGACCGCCGCAGAGACGGCTATTTATTACTGTGCGAGACAGGCTCCCATGCTTCGGGGAGTTCCCAGCCCTTATAATTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGAATCCTGGTCACCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号２２）
MKHLWFFLLLVAAPRWVLSQLQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGDSISSGHYSWGWIRQPPGSGLEWIGSMFYSGGTYYNPSLKSRVTISMDTSKNHFSVKLRSVTAAETAIYYCARQAPMLRGVPSPYNWFDPWGQGILVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号９４）
GDSISSGHYS
ＣＤＲＨ２（配列番号９５）
MFYSGGT
ＣＤＲＨ３（配列番号９６）
CARQAPMLRGVPSPYNWFDPW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号２３）
ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGTTCCCAGGTTCCAGATGCGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCATCTGTTGGCGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAATCAGGATATTAGTACCTGGTTAGCCTGGTATCAGCAGGAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTATGATGCATCCACTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCGACTTACTATTGTCAACAGGCGAACAATTTCCCATTCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAAC

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号２４）
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRANQDISTWLAWYQQEPGKAPKLLIYDASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANNFPFTFGPGTKVDIK

ＣＤＲＬ１（配列番号９７）
QDISTW
ＣＤＲＬ２
DAS
ＣＤＲＬ３（配列番号９８）
CQQANNFPFTF
７．A39K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号２５）
ATGGACTGGACCTGGAGGTTCCTCTTTGTGGTGGCAGCAGCTACAGGTGTCCAGTCCCAGGTCCAGCTGGTGCAATCTGGGGCTGAAGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAGGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATACTATCAACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAAGGATCATCCCTATTGTTGGTATAAAAAAGTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGGTTACCGCGGACGAATCCGCGACCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGATAAGAAACCTTTGGTTCGGGGAGTTTACTACTACTACGAGGGTATGGACGTCTGGGGCCAGGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCGG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号２６）
MDWTWRFLFVVAAATGVQSQVQLVQSGAEVKKPGSSVRVSCKASGGTFSSYTINWVRQAPGQGLEWMGRIIPIVGIKKYAQKFQGRVTVTADESATTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDKKPLVRGVYYYYEGMDVWGQGTTVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号９９）
GGTFSSYT
ＣＤＲＨ２（配列番号１００）
IIPIVGIK
ＣＤＲＨ３（配列番号１０１）
CARDKKPLVRGVYYYYEGMDVW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号２７）
ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGACATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTTCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGGTCATTAGCAATTATTTAGCCTGGTATCAGCAAAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCACTTTACAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACACCTTAATAATTACGCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAGC

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号２８）
MDMRVPAQLLGLLLLWLPGARCDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASQVISNYLAWYQQKPGKAPKLLIYAASTLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQHLNNYALTFGGGTKVEIK

ＣＤＲＬ１（配列番号１０２）
QVISNY
ＣＤＲＬ２
AAS
ＣＤＲＬ３（配列番号１０３）
CQHLNNYALTF
８．A43K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号２９）
ATGAAACACCTGTGGTTCTTCCTCCTCCTGGTGGCAGCTCCCAGATGGGTCCTGTCCCAGGTGCGGCTGCAGCAATGGGGCGCAGGAGTCTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGAGTCCTTCGGTAAATACTATTGGAGTTGGATCCGTCAGCCCCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGAGAAATCAATCATAGTGGAAACACCAACTACAATCCCTCCCTTGAGAGTCGAGTCGCCCTTTCAGTGGACAAGTCGAAGAATCAATTCTCCCTGAGGGTGCACTCTGTTATCGCCACGGACACGGCTGTCTATTTCTGTGCGAGGGGCCCGGGATTTTGTCGTGATGGTCGCTGCCCGCGCTACCTCTCGACCTTGTATTATTCCTCCCAACCTATGGACGTCTGGGGCCAAGGCACCACGGTCATCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号３０）
MKHLWFFLLLVAAPRWVLSQVRLQQWGAGVLKPSETLSLTCAVYGESFGKYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGNTNYNPSLESRVALSVDKSKNQFSLRVHSVIATDTAVYFCARGPGFCRDGRCPRYLSTLYYSSQPMDVWGQGTTVIVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号１０４）
GESFGKYY
ＣＤＲＨ２（配列番号１０５）
INHSGNT
ＣＤＲＨ３（配列番号１０６）
CARGPGFCRDGRCPRYLSTLYYSSQPMDVW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号３１）
ATGGTGTTGCAGACCCAGGTCTTCATTTCTCTGATGCTCTGGATCTCTGGTGCCTACGGGGACATCGTGATGACCCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTATACAGGTCCGACAATAAGAACTACTTAAGTTGGTTTCAGCAGAGACCAGGACAGGCTCCTAAGTTACTCTTTTACTGGGCTTATATCCGGGAATCCGGGGTCCCTGAGCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGACTTTACTCTCACCATCGACAGCCTGCAGACTGATGATGTGGCAGTTTATTATTGTCAGCAATACTATTCTGCTCCGTACACTTTTGGCCAGGGGACCAAGGTGGAGATCAAAC
軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号３２）
MVLQTQVFISLMLWISGAYGDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYRSDNKNYLSWFQQRPGQAPKLLFYWAYIRESGVPERFSGSGSGTDFTLTIDSLQTDDVAVYYCQQYYSAPYTFGQGTKVEIK

ＣＤＲＬ１（配列番号１０７）
QSVLYRSDNKNY
ＣＤＲＬ２
WAY
ＣＤＲＬ３（配列番号１０８）
CQQYYSAPYTF
９．A51K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号３３）
ATGGACCTCCTGCACAAGAATCTGAAACACCTGTGGTTCTTCCTCCTCCTGGTGGCAGCTCCCAGATGGGTCCTGTCCCAGGTGCGGCTGCAGCAATGGGGCGCAGGAGTCTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGAGTCCTTCGGCAAATATTATTGGAGTTGGATCCGCCAGCCCCTAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGAGAAATCAATCATAGTGGAAGTACCAACTACAATCCCGCCCTTGAGAGTCGAGTCGCCATTTCAGTAGACAAGTCGAAGAATCAAATCTCCCTGACGGTGCGCTCTGTCATCGCCACGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGGGGCCCGGGATTTTGTCGTGATGGTCGCTGCCCGCGCTACCTGTCGACCTTATATTATTCTTCACAACCTATGGACGTCTGGGGCCAAGGCACCACGGTCATCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号３４）
MDLLHKNLKHLWFFLLLVAAPRWVLSQVRLQQWGAGVLKPSETLSLTCAVYGESFGKYYWSWIRQPLGKGLEWIGEINHSGSTNYNPALESRVAISVDKSKNQISLTVRSVIATDTAVYYCARGPGFCRDGRCPRYLSTLYYSSQPMDVWGQGTTVIVSS
ＣＤＲＨ１（配列番号１０９）
GESFGKYY
ＣＤＲＨ２（配列番号１１０）
INHSGNT
ＣＤＲＨ３（配列番号１１１）
CARGPGFCRDGRCPRYLSTLYYSSQPMDVW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号３５）
ATGGTGTTGCAGACCCAGGTCTTCATTTCTCTGTTGCTCTGGATCTCTGGTGCCTACGGGGACATCGTGATGACCCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTATACAGGTCCGACAATAAGAACTACTTAAGTTGGTTCCAGCAGAGACCAGGACAGGCTCCTAAGTTACTCATTTACTGGGCTTATATGCGGGACTCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGACTTTACTCTCACCATCGACAGCCTGCAGACTGAAGATGTGGCAGTTTATTATTGTCAGCAATATTATAGTACTCCGTACACTTTTGGCCAGGGGACCAAGGTGGAGATCAAAC
軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号３６）
MVLQTQVFISLLLWISGAYGDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYRSDNKNYLSWFQQRPGQAPKLLIYWAYMRDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTIDSLQTEDVAVYYCQQYYSTPYTFGQGTKVEIK

ＣＤＲＬ１（配列番号１１２）
QSVLYRSDNKNY
ＣＤＲＬ２
WAY
ＣＤＲＬ３（配列番号１１３）
CQQYYSTPYTF
１０．A53L
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号３７）
ATGGAGTTTGGACTGAACTGGGTTCTCCTTGTTGCTATTTTAAAAGGTGTCCAGTGTGAAGTGCAGTTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCGTGGTTCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAAGAATTTTGGCATGCACTGGGTCCGTCAAGCTCCAGGGAAGGGTCTGGAGTGGGTCTCTCTTATTAGTGGAGATGGTGGTGACACATTCTATGAAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACAGCAAAAACTCCCTCTATCTACAAATAGACAGTCTGAAAATTGAGGACACCGCCTTATATTTCTGTGCAAAAGACATTTCGCCCGACCAAGGCGGGAGCACCAGTAACATTTATTACTTCGCTACAGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCTTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号３８）
MEFGLNWVLLVAILKGVQCEVQLVESGGGVVQPGGSLRLSCAASGFTFKNFGMHWVRQAPGKGLEWVSLISGDGGDTFYEDSVKGRFTISRDNSKNSLYLQIDSLKIEDTALYFCAKDISPDQGGSTSNIYYFATDVWGQGTTVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号１１４）
GFTFKNFG
ＣＤＲＨ２（配列番号１１５）
ISGDGGDT
ＣＤＲＨ３（配列番号１１６）
CAKDISPDQGGSTSNIYYFATDVW

軽鎖配列（λ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号３９）
ATGGCCAGCTTCCCTCTCCTCCTCACCCTCCTCACTCACTGTGCAGGGTCCTGGGCCCAGTCTGTGTTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCATCATCTCTTGTTCTGGAAGTAACTCCAATATCGGGCGTAATGCTGTAGGTTGGTACCAGCAGGTCCCAGGAAGGGCCCCCAAACTCCTCGTTTATGGTAATAATCGTCGGCCCTCAGGAGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCAGTCTGAGGATGAGGCTGACTATTACTGTGCAACTTGGGATGACAGCATGCGTGGTCATATGGTGTTCGGCGGAGGGACCACACTGACCGTCCTA

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号４０）
MASFPLLLTLLTHCAGSWAQSVLTQPPSASGTPGQRVIISCSGSNSNIGRNAVGWYQQVPGRAPKLLVYGNNRRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCATWDDSMRGHMVFGGGTTLTVL

ＣＤＲＬ１（配列番号１１７）
NSNIGRNA
ＣＤＲＬ２
GNN
ＣＤＲＬ３（配列番号１１８）
CATWDDSMRGHMVF
１１．A53K1
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号４１）
ATGGAGTTTGGACTGAACTGGGTTCTCCTTGTTGCTATTTTAAAAGGTGTCCAGTGTGAAGTGCAGTTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCGTGGTTCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAAGAATTTTGGCATGCACTGGGTCCGTCAAGCTCCAGGGAAGGGTCTGGAGTGGGTCTCTCTTATTAGTGGAGATGGTGGTGACACATTCTATGAAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACAGCAAAAACTCCCTCTATCTACAAATAGACAGTCTGAAAATTGAGGACACCGCCTTATATTTCTGTGCAAAAGACATTTCGCCCGACCAAGGCGGGAGCACCAGTAACATTTATTACTTCGCTACAGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCTTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号４２）
MEFGLNWVLLVAILKGVQCEVQLVESGGGVVQPGGSLRLSCAASGFTFKNFGMHWVRQAPGKGLEWVSLISGDGGDTFYEDSVKGRFTISRDNSKNSLYLQIDSLKIEDTALYFCAKDISPDQGGSTSNIYYFATDVWGQGTTVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号１１９）
GFTFKNFG
ＣＤＲＨ２（配列番号１２０）
ISGDGGDT
ＣＤＲＨ３（配列番号１２１）
CAKDISPDQGGSTSNIYYFATDVW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号４３）
ATGGAAACCCCAGCGCAGCTTCTCTTCCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGATAACACCGGAGAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGAGAAAGAGCCACCCTCTCCTGTAGGGCCAGCCAGACTATTAGGAGTACCTACTTAGCCTGGTATCAGCAAAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTTTGGTGCTGCCAGCAGGGCCGCTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAATGTATTACTGTCAGGAGTATGGTACCTCACCTCGGGTCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGACATCAAAC

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号４４）
METPAQLLFLLLLWLPDNTGEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQTIRSTYLAWYQQKPGQAPRLLIFGAASRAAGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAMYYCQEYGTSPRVTFGPGTKVDIK

ＣＤＲＬ１（配列番号１２２）
QTIRSTY
ＣＤＲＬ２
GAA
ＣＤＲＬ３（配列番号１２３）
CQEYGTSPRVTF
１２．A54K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号４５）
ATGGACCTCCTGCACAAGAATCTGAAACACCTGTGGTTCTTCCTCCTCCTGGTGGCAGCTCCCAGATGGGTCCTGTCCCAGGTGCGGCTGCAGCAATGGGGCGCAGGAGTCTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGAGTCCTTCGGCAAATATTATTGGAGTTGGATCCGCCAGCCCCTAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGAGAAATCAATCATAGTGGAAGTACCAACTACAATCCCGCCCTTGAGAGTCGAGTCGCCATTTCAGTAGACAAGTCGAAGAATCAAATCTCCCTGACGGTGCGCTCTGTCATCGCCACGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGGGGCCCGGGATTTTGTCGTGATGGTCGCTGCCCGCGCTACCTGTCGACCTTATATTATTCTTCACAACCTATGGACGTCTGGGGCCAAGGCACCACGGTCATCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号４６）
MDLLHKNLKHLWFFLLLVAAPRWVLSQVRLQQWGAGVLKPSETLSLTCAVYGESFGKYYWSWIRQPLGKGLEWIGEINHSGSTNYNPALESRVAISVDKSKNQISLTVRSVIATDTAVYYCARGPGFCRDGRCPRYLSTLYYSSQPMDVWGQGTTVIVSS
ＣＤＲＨ１（配列番号１２４）
GESFGKYY
ＣＤＲＨ２（配列番号１２５）
INHSGNT
ＣＤＲＨ３（配列番号１２６）
CARGPGFCRDGRCPRYLSTLYYSSQPMDVW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号４７）
ATGGTGTTGCAGACCCAGGTCTTCATTTCTCTGTTGCTCTGGATCTCTGGTGCCTACGGGGACATCGTGATGACCCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTATACAGGTCCGACAATAAGAACTACTTAAGTTGGTTCCAGCAGAGACCAGGACAGGCTCCTAAGTTACTCATTTACTGGGCTTATATCCGGGACTCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGACTTTACTCTCACCATCGACAGCCTGCAGACTGAAGATGTGGCAGTTTATTATTGTCAGCAATATTATACTACTCCGTACACTTTTGGCCAGGGGACCAAGGTGGAGATCAAAC
軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号４８）
MVLQTQVFISLLLWISGAYGDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYRSDNKNYLSWFQQRPGQAPKLLIYWAYIRDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTIDSLQTEDVAVYYCQQYYTTPYTFGQGTKVEIK

ＣＤＲＬ１（配列番号１２７）
QSVLYRSD
ＣＤＲＬ２
WAY
ＣＤＲＬ３（配列番号１２８）
CQQYYTTPYTF
１３．A60G1L
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号４９）
ATGAAACACCTGTGGTTCTTCCTCCTCCTGGTGGCAGCTCCCAGATGGGTCCTGTCCCAGGTGCGGCTGCAGCAATGGGGCGCAGGAGTCTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGAGTCCTTCGGTAAATACTATTGGAGTTGGATCCGTCAGCCCCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGAGAAATCAATCATAGTGGAAACACCAACTACAATCCCTCCCTTGAGAGTCGAGTCGCCCTTTCAGTGGACAAGTCGAAGAATCAATTCTCCCTGAGGGTGCACTCTGTTATCGCCACGGACACGGCTGTCTATTTCTGTGCGAGGGGCCCGGGATTTTGTCGTGATGGTCGCTGCCCGCGCTACCTCTCGACCTTGTATTATTCCTCCCAACCTATGGACGTCTGGGGCCAAGGCACCACGGTCATCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号５０）
MKHLWFFLLLVAAPRWVLSQVRLQQWGAGVLKPSETLSLTCAVYGESFGKYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGNTNYNPSLESRVALSVDKSKNQFSLRVHSVIATDTAVYFCARGPGFCRDGRCPRYLSTLYYSSQPMDVWGQGTTVIVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号１２９）
GESFGKYY
ＣＤＲＨ２（配列番号１３０）
INHSGNT
ＣＤＲＨ３（配列番号１３１）
CARGPGFCRDGRCPRYLSTLYYSSQPMDVW

軽鎖配列（λ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号５１）
ATGGCCAGCTTCCCTCTCCTCCTCACCCTCCTCACTCACTGTGCAGGGTCCTGGGCCCAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAGGTAAAACTGTAAAGTGGTACCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGCCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGTCCATCAGTGGGCTCCAGTCTGAAGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTATGTCTTCGGGACTGCGACCAAGGTCACCGTCCTA

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号５２）
MASFPLLLTLLTHCAGSWAQSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGGKTVKWYQQLPGTAPKLLIYGNNQRPSGVPDRFSASKSGTSASLSISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGYVFGTATKVTVL

ＣＤＲＬ１（配列番号１３２）
SSNIGGKT
ＣＤＲＬ２
GNN
ＣＤＲＬ３（配列番号１３３）
CAAWDDSLNGYVF
１４．A60G4L
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号５３）
ATGGAGTTGGGGCTGTGCTGGGTTTTCCTTGTTGCTATTTTAGAAGGTGTCCAGTGTGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGTTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGGCTCTGGATTCACCTTCAGTAGTTATAGCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAGGGGCCTAGAATGGGTTGCATACATTAGTAGTAGTAGTGGCACCATATATTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCATCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAGCTCACTTTTTCTGCACATGAACAACGTGAGAGGCGAGGACACGGCTCTGTATTACTGTGCGAGAGATATTCGGGCAGCGCGCAAATTGAGCAGCAGCAGGTCCTATCCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号５４）
MELGLCWVFLVAILEGVQCEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAGSGFTFSSYSMNWVRQAPGRGLEWVAYISSSSGTIYYADSVKGRFIISRDNAKSSLFLHMNNVRGEDTALYYCARDIRAARKLSSSRSYPWGQGTLVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号１３４）
GFTF
ＣＤＲＨ２（配列番号１３５）
ISSSSGTI
ＣＤＲＨ３（配列番号１３６）
CARDIRAARKLSSSRSYPW

軽鎖配列（λ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号５５）
ATGGCCAGCTTCCCTCTCCTCCTCACCCTCCTCACTCACTGTGCAGGGTCCTGGGCCCAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAGGTAAAACTGTAAAGTGGTACCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGCCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGTCCATCAGTGGGCTCCAGTCTGAAGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTATGTCTTCGGGACTGCGACCAAGGTCACCGTCCTA

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号５６）
MASFPLLLTLLTHCAGSWAQSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGGKTVKWYQQLPGTAPKLLIYGNNQRPSGVPDRFSASKSGTSASLSISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGYVFGTATKVTVL

ＣＤＲＬ１（配列番号１３７）
SSNIGGKT
ＣＤＲＬ２
GNN
ＣＤＲＬ３（配列番号１３８）
CAAWDDSLNGYVF
１５．A69K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号５７）
ATGGAACTGGGGCTCCGCTGGGTTTTCCTTGTTGGCTTTTTTGGAGGTGTCCAGTGTGAGGTTCAACTCATGGAGTCTGGAGGAGGCCTGGTCAAGCCGGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCATCTTCAGTAGATATAACATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCGGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAAAAGTAGTAGTCGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCGAAAATTCAGTATATCTGCAAATGCACAGCCTGAGAGTCGAGGACACGGCTGTTTATTATTGTGCGAGAGATCTTGGCTATGATAATCGTGGTTATGTCGTCGACTACTACTACGGGATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAC

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号５８）
MELGLRWVFLVGFFGGVQCEVQLMESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFIFSRYNMNWVRQAPGKGLEWVSSIKSSSRYIYYADSVKGRFTISRDNAENSVYLQMHSLRVEDTAVYYCARDLGYDNRGYVVDYYYGMDVWGQGTTVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号１３９）
GFIFSRYN
ＣＤＲＨ２（配列番号１４０）
IKSSSRYI
ＣＤＲＨ３（配列番号１４１）
CARDLGYDNRGYVVDYYYGMDVW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号５９）
ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGTTCCCAGGTTCCAGATGCGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCATATGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCGGGATATTAGCGGCTGGTTAGCCTGGTATCAGCACAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTCTGCTGCATCCACTTTGCAAAGTGGGATCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGAATCTGAGACAGATTTCACTCTCACCATCACCAACCTGCAGCCTGAAGATTTTGCGACTTACTATTGTCAACAGTCTGACAGTTTCCCTATCGCCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAAATTAGGC

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号６０）
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSAYVGDRVTITCRASRDISGWLAWYQHKPGKAPKLLISAASTLQSGIPSRFSGSESETDFTLTITNLQPEDFATYYCQQSDSFPIAFGQGTRLEIR

ＣＤＲＬ１（配列番号１４２）
RDISGW
ＣＤＲＬ２
AAS
ＣＤＲＬ３（配列番号１４３）
CQQSDSFPIAF
１６．A75K
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号６１）
ATGGAGTTTGGGCTGAGCTGGGTTTTCCTCGTTGCTCTTTTAAGAGGTGTCCAGTGTCAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGCCTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCAACTTCATTAGTTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGTCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCATATGATGGAAGTAAAAAATACTATGCAGACTTCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTTTCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGGCGACGACACGGCTGTGTTTTACTGTGCGAAAGATAGGGGTTTCTATGGTTCGGGGAGTTCTGACTACTACTACGTGATGGATGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCATCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号６２）
MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLSLSCAASGFNFISYGMHWVRQSPGKGLEWVAVISYDGSKKYYADFVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRGDDTAVFYCAKDRGFYGSGSSDYYYVMDVWGQGTTVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号１４４）
GFNFISYG
ＣＤＲＨ２（配列番号１４５）
ISYDGSKK
ＣＤＲＨ３（配列番号１４６）
CAKDRGFYGSGSSDYYYVMDVW

軽鎖配列（κ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号６３）
ATGGACATGAGAGTCCTCGCTCAGCTCCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGTTTCCCAGGTGCCAGATGTGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCACTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGCATTACCAATTATTTAGCCTGGTTTCAGCACAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGTCCCTGATCTATGCTGCCTCCACTTTGCACCGTGGGGTCTCATCAAAGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAACCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTATTGCCAACAATATAAAACTTACCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGACATTAAAC

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号６４）
MDMRVLAQLLGLLLLCFPGARCDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGITNYLAWFQHKPGKAPKSLIYAASTLHRGVSSKFSGSGSGTDFTLTISNLQPEDFATYYCQQYKTYPITFGQGTRLDIK

ＣＤＲＬ１（配列番号１４７）
QGITNY
ＣＤＲＬ２
AAS
ＣＤＲＬ３（配列番号１４８）
CQQYKTYPITF
１７．A78L
重鎖配列（γ鎖）
重鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号６５）
ATGGAGTTGGGACTGTGCTGGGTTTTCCTTGTTGCTATTTTAGACGGTGTCCAGTGTGAGGTGCAGTTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCGGGGGGGTCTCTGAGACTCTCTTGTGCAGCCTCTGGATTTATGTTCAGTACCTATAGCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAGGGGCCTGGAGTGGGTTGCATACATCAGCAGTAGCAGTGGGAGCATTTACTATGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACTATCTCCAGAGACAATGTCAAGAGCTCAGTGTCTCTGCGAATGAACAGCCTGAGGGCCGAGGACACGGCTATTTATTACTGTGCGAGAGACATGAGGGGACGAATGACGACGGAAGACAGGTCTCTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCCAGTCACCGTCTCCTCAG

重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号６６）
MELGLCWVFLVAILDGVQCEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFMFSTYSMNWVRQAPGRGLEWVAYISSSSGSIYYADSVKGRFTISRDNVKSSVSLRMNSLRAEDTAIYYCARDMRGRMTTEDRSLDYWGQGTPVTVSS

ＣＤＲＨ１（配列番号１４９）
GFMFSTYS
ＣＤＲＨ２（配列番号１５０）
ISSSSGSI
ＣＤＲＨ３（配列番号１５１）
CARDMRGRMTTEDRSLDYW

軽鎖配列（λ鎖）
軽鎖可変領域ＤＮＡ配列（配列番号６７）
ATGGCCTGGTCTCCTCTCCTCCTCACTCTCCTCGCTCACTGCACAGGGTCCTGGGCCCAGTCTGTGCTGACGCAGCCGCCCTCAGTGTCTGGGGCCCCAGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCACTGGGAGTAGCTCCAACATCGGGGCGCCTTATGATGTACACTGGTACCAGCAACTTCCAGGAACAGCCCCCAAACTCCTCATCTACGGTAACAACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCACTGGGCTCCAGGCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGCCAGTCATATGACAACAGCCTGAGTGGCCGGGTGTTCGGCGGGGGGACCAAACTGGCCGTTCTA

軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号６８）
MAWSPLLLTLLAHCTGSWAQSVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAPYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNNNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDNSLSGRVFGGGTKLAVL

ＣＤＲＬ１（配列番号１５２）
SSNIGAPYD
ＣＤＲＬ２
GNN
ＣＤＲＬ３（配列番号１５３）
CQSYDNSLSGRVF
本発明の１７種類のモノクローナル抗体は以下のとおりである。
A01L抗体
配列番号２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-A0への結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号６９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号７０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号７１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号７２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）RNDで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号７３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A11K抗体
配列番号６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-A0への結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号７４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号７５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号７６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号７７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号７８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するそのモノクローナル抗体の機能的断片。
A26K抗体
配列番号１０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号１２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号１０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号１２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号７９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号８０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号８１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号８２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）DASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号８３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A29K抗体
配列番号１４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号１６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号１４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号１６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号８４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号８５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号８６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号８７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）DASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号８８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A35K抗体
配列番号１８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号１８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号８９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号９０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号９１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号９２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号９３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A36K抗体
配列番号２２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号２２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。（a）配列番号９４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号９５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号９６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号９７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）DASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号９８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A39K抗体
配列番号２６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号２６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号９９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１００で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１０１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１０２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１０３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A43K抗体
配列番号３０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号３２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号３０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号３２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１０５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１０６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１０７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）WAYで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１０８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A51K抗体
配列番号３４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号３６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号３４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号３６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１０９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１１０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１１１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１１２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）WAYで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１１３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A53L抗体
配列番号３８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号３８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１１４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１１５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１１６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１１７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１１８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A53K1抗体
配列番号４２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号４２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１１９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１２０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１２１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１２２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GAAで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１２３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A54K抗体
配列番号４６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号４６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１２４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１２５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１２６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１２７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）WAYで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１２８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A60G1L抗体
配列番号５０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号５２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号５０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号５２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１２９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１３０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１３１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１３２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１３３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A60G4L抗体
配列番号５４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号５６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号５４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号５６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１３４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１３５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１３６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１３７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１３８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A69K抗体
配列番号５８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号６０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号５８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号６０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１３９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１４０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１４１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１４２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１４３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A75K抗体
配列番号６２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号６４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号６２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号６４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１４４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１４５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１４６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１４７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１４８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A78L抗体
配列番号６６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号６８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号６６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号６８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号１４９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１５０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１５１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１５２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１５３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A39G11K抗体
配列番号２６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号２６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号９９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号１００で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号１０１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号７７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号７８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
A11G39K抗体
配列番号６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
配列番号６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
（a）配列番号７４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
（b）配列番号７５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
（c）配列番号７６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
（d）配列番号１０２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
（e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
（f）配列番号１０３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
また、抗体のエピトープ解析により判明した、一部の抗体のFXIII-Aの認識反応部位は以下のとおりである。[ ]内は、アミノ酸の位置を示す。
A53K1抗体：主にFXIII-A [540-559]に反応
A75K抗体：主にFXIII-A [79-98], FXIII-A [158-177], FXIII-A [296-313], FXIII-A [540-559], FXIII-A [596-615],およびFXIII-A [712-731]に反応
A01L抗体：主にFXIII-A [79-98]と反応し、次いでFXIII-A [596-615], FXIII-A [712-731]と反応
A60G1L抗体：主にFXIII-A [79-98]と反応し、次いでFXIII-A [136-151], FXIII-A [296-313], FXIII-A [540-559], FXIII-A [712-731]と反応
A60G4L抗体：FXIII-A [79-98], FXIII-A [296-313], FXIII-A [540-559], [596-615], FXIII-A [712-731]と反応
A78L抗体：主にFXIII-A [79-98], FXIII-A [556-574], FXIII-A [712-731]と反応
各抗体のF(ab')2mAbを用いた免疫沈降のの競合阻害実験の結果より、A11K, A26K, A36K, A53L, A53K1, A69K (活性化阻害型抗体）のエピトープは各々共通あるいは近接していることが判明し、A01L, A60G4L, A79L(複合体形成阻害型抗体)のエピトープは各々共通あるいは近接していることが判明した。すなわち、A11K, A26K, A36K, A53L, A53K1, A69K (活性化阻害型抗体）は、ヒトFXIII-Aのペプチドである、FXIII-A [79-98]（ヒトFXIII-Aの全長アミノ酸配列の７９番目のアミノ酸から９８番目のアミノ酸からなるペプチド）、FXIII-A [540-559]およびFXIII-A [712-731]と特異的に結合する。A11K、A26K、A36K、A53L、A53K1およびA69K(活性化阻害型抗体）は、これらのペプチドに含まれるエピトープを認識するか、あるいは、FXIII-Aが立体構造をとったときに、これれのペプチドにより形成されるエピトープを認識する。また、A01L, A60G4L, A79L(複合体形成阻害型抗体)は、ヒトFXIII-Aのペプチドである、FXIII-A [79-98]、FXIII-A [296-313]、FXIII-A [556-574]、FXIII-A [596-615]、FXIII-A [712-731]と特異的に結合する。A01L、A60G4LおよびA79L(複合体形成阻害型抗体)は、これらのペプチドに含まれるエピトープを認識するか、あるいは、FXIII-Aが立体構造をとったときに、これれのペプチドにより形成されるエピトープを認識する。ヒトFXIII-Aの全長アミノ酸配列を配列番号５４に示す。
すなわち、本発明の抗体は、ヒトFXIII-Aの全長アミノ酸配列の７９番目のアミノ酸から９８番目のアミノ酸からなるペプチド、５４０番目のアミノ酸から５５９番目のアミノ酸からなるペプチドおよび７１２番目のアミノ酸から７３１番目のアミノ酸からなるペプチドの少なくとも１つもしくは２つに特異的に結合する抗体、あるいはこれら３つのペプチドのすべてに結合する抗体を含む。該抗体はA11K、A26K、A36K、A53L、A53K1およびA69K(活性化阻害型抗体）を含む。
さらに、本発明の抗体は、ヒトFXIII-Aの全長アミノ酸配列の７９番目のアミノ酸から９８番目のアミノ酸からなるペプチド、２９６番目のアミノ酸から３１３番目のアミノ酸からなるペプチド、５５６番目のアミノ酸から５７４番目のアミノ酸からなるペプチド、５９６番目のアミノ酸から６１５番目のアミノ酸からなるペプチドおよび７１２番目のアミノ酸から７３１番目のアミノ酸からなるペプチドの少なくとも１つ、２つ、３つもしくは４つに特異的に結合する抗体、あるいはこれら５つのペプチドのすべてに結合する抗体を含む。該抗体はA01L、A60G4LおよびA79L(複合体形成阻害型抗体)を含む。
A11K、A26K、A36K、A53L、A53K1およびA69K(活性化阻害型抗体）とA01L、A60G4LおよびA79L(複合体形成阻害型抗体)は、共通する数種類のペプチドを認識する一方で、A11K、A26K、A36K、A53L、A53K1およびA69K(活性化阻害型抗体）はβサンドウィッチおよびバレル2に、A01L、A60G4LおよびA79L(複合体形成阻害型抗体)はコアドメインおよびバレル１に立体的配向の異なる認識部位を示す。
上記の１９種類のモノクローナル抗体において、重鎖可変領域はそれぞれの配列番号で表わされるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域のみならず、該アミノ酸配列において、１若しくは数個、例えば、１〜１０個、好ましくは１〜５個、さらに好ましくは１若しくは２個、さらに好ましくは１個のアミノ酸が欠失、置換、付加されたアミノ酸配列からなり、抗体の重鎖可変領域の活性、すなわちヒトFXIII-Aへの結合活性を有するタンパク質からなる重鎖可変領域も含む。同様に、軽鎖可変領域はそれぞれの配列番号で表わされるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域のみならず、該アミノ酸配列において１若しくは数個、例えば、１〜１０個、好ましくは１〜５個、さらに好ましくは１若しくは２個、さらに好ましくは１個のアミノ酸が欠失、置換、付加されたアミノ酸配列からなり、抗体の軽鎖可変領域の活性、すなわちヒトFXIII-Aへの結合活性を有するタンパク質からなる軽鎖可変領域も含む。
このようなアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列として、それぞれの配列番号のアミノ酸配列と、BLAST（Basic Local Alignment Search Tool at the National Center for Biological Information（米国国立生物学情報センターの基本ローカルアラインメント検索ツール））等（例えば、デフォルトすなわち初期設定のパラメータ）を用いて計算したときに、少なくとも85％以上、好ましくは90％以上、さらに好ましくは95％以上、特に好ましくは97％以上、98％以上または99％以上の配列同一性を有しているものが挙げられる。
このようなアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列を有するタンパク質はそれぞれの配列番号のアミノ酸配列を有するタンパク質と実質的に同一である。
また、上記のそれぞれの配列番号で表される配列からなるDNA配列とBLAST（Basic Local Alignment Search Tool at the National Center for Biological Information（米国国立生物学情報センターの基本ローカルアラインメント検索ツール））等（例えば、デフォルトすなわち初期設定のパラメータ）を用いて計算したときに、少なくとも85％以上、好ましくは90％以上、さらに好ましくは95％以上、特に好ましくは97％以上の配列同一性を有している塩基配列からなるDNAであって、抗体の重鎖可変領域または軽鎖可変領域の活性、すなわちヒトFXIII-Aへの結合活性を有するタンパク質をコードするDNAも本発明の抗体の重鎖可変領域または軽鎖可変領域をコードするDNAに含まれる。
また、上記のそれぞれの配列番号で表される配列からなるDNAと相補的な配列からなるDNAとストリンジェントな条件下でハイブリダイズすることができるDNAであって抗体の重鎖可変領域または軽鎖可変領域の活性、すなわちヒトFXIII-Aへの結合活性を有するタンパク質をコードするDNAも本発明の重鎖可変領域または軽鎖可変領域をコードするDNAに含まれる。ここで、当業者ならば、ストリンジェントな条件を適宜決定することができる。
また、前記の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含むヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体は、上記の重鎖可変領域および重鎖定常領域並びに上記の軽鎖可変領域および軽鎖定常領域とから構成される。重鎖定常領域は、３個のドメインCH1、CH2およびCH3から構成されている。重鎖定常領域は、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgMまたはIgD定常領域であってもよいが、最も好適には、IgG1またはIgG4定常領域である。軽鎖定常領域は、１個のドメインCLで構成されている。軽鎖定常領域は、κまたはλ定常領域である。
抗体をコードするDNAは、重鎖可変領域をコードするDNAと重鎖定常領域をコードするDNAを連結し、さらに軽鎖可変領域をコードするDNAと軽鎖定常領域をコードするDNAを連結することにより重鎖をコードするDNAおよび軽鎖をコードするDNAとして得られる。
本発明の抗体は、抗体の機能的断片またはその修飾物も包含する。例えば、抗体の機能的断片は、抗体の断片であって抗原に特異的に結合し得る断片である。機能的断片としては、Fab、F（ab'）2、Fv、1個のFabと完全なFcを有するFab/c、Ｈ鎖若しくはＬ鎖のFvを適当なリンカーで連結させたシングルチェインFv（scFv）等が挙げられる。ポリヌクレオチドは、DNAもRNAも包含する。
３．本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の用途
（1）治療薬
本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体のうちdissociationインヒビターに分類されるモノクローナル抗体は、FXIIIの活性化を阻害し、assemblyインヒビターに分類されるモノクローナル抗体はFXIII-AがFXIII-Bと結合するのを防止し、FXIIIの活性を阻害し、フィブリンの架橋結合を阻害し、クロットが安定化するのを防止し、あるいはクロットの除去を促進することができる。また、ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体のうち非インヒビターに分類されるモノクローナル抗体もFXIII-Aに結合し、免疫複合体として除去を促進する。そのため、本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体は安定化血栓の形成を防止し、または血栓を早期に除去することができ、血栓症の予防または治療に用いることができる。
すなわち、本発明はヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を有効成分として含む、安定化血栓の形成を防止し、もしくは血栓を早期に除去するための、あるいは血栓症を予防もしくは治療するための医薬組成物を包含する。
本発明の１９種類のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体のいずれの抗体も血栓の形成を防止し、もしくは血栓を除去するための、あるいは血栓症を予防もしくは治療するための医薬組成物として用いることができる。この中でも、dissociationインヒビターに分類されるA11K、A26K、A36K、A53L、A53K1およびA69K抗体、ならびにassemblyインヒビターに分類されるA01L、A60G4LおよびA78L抗体が好ましい。
該医薬組成物は、ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体に加えて、製剤分野において通常用いられる担体、希釈剤、賦形剤を含む。たとえば、錠剤用の担体、賦形剤としては、乳糖、ステアリン酸マグネシウムなどが使用される。注射用の水性液としては、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液などが使用され、適当な溶解補助剤、例えばアルコール、プロピレングリコールなどのポリアルコール、非イオン界面活性剤などと併用しても良い。油性液としては、ゴマ油、大豆油などが使用され、溶解補助剤としては安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどを併用しても良い。本発明の医薬組成物は、種々の形態で投与することができ、それらの投与形態としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与、又は、注射剤、点滴剤、坐薬等による非経口投与を挙げることができる。
その投与量は、症状、年齢、体重などによって異なるが、通常、経口投与では、成人に対して、1日約0.01mg〜1000mgであり、これらを1回、又は数回に分けて投与することができる。また、非経口投与では、1回約0.01mg〜1000mgを皮下注射、筋肉注射又は静脈注射によって投与することができる。
抑制し得る血栓症としては、心筋梗塞、不安定狭心症、心房細動、脳卒中、腎障害、肺塞栓症、深部静脈血栓症、経皮経管冠動脈形成術、播種性血管内凝固症候群、敗血症、人工臓器、シャントまたはプロテーゼに関連する血栓症が挙げられる。
（２）血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに対する自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットに用いる抗原捕捉用抗体の反応性管理用抗体、または免疫学的測定法キットに用いる陽性コントロール抗体
本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体は、リコンビナント抗体として容易に作製することができ、血漿中のFXIIIまたはそのAサブユニットに対する自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットに用いる自己または同種抗体捕捉用抗原、または抗原捕捉用抗体の反応性を管理するための管理用抗体や免疫学的測定法キットに用いる陽性コントロール抗体として用いることができる。ここで、自己抗体とは自己のFXIIII-Aに対する抗体をいい、同種抗体とは非自己のFXIII-A、例えば血漿由来FXIII濃縮製剤中のFXIII-Aに対する抗体をいう。
免疫学的測定法キットは、FXIII-Aを固相化（塗布）した担体を用いるキットならば限定されず、担体として毛細管作用を有する多孔性薄膜（メンブレン）、マイクロタイタープレート、粒子状物質、試験管、樹脂平板など公知のものを用いるキットが挙げられるが、好ましくは、メンブレンを用いるイムノクロマトグラフィーやマイクロタイタープレートを用いるELISA法が挙げられる。
血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに対する自己または同種抗体には遊離型の自己または同種抗体とFXIII-Aと結合した結合型（自己または同種）抗体（FXIII-A免疫複合体）が存在する。
遊離型の自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットにおいては、FXIII-Aを担体に固相化し抗体捕捉用抗原として使用し、該担体に血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに対する自己または同種抗体を結合させ、自己または同種抗体に、例えば、発色酵素、蛍光色素、着色粒子等で標識した抗ヒト免疫グロブリン抗体を結合させ、蛍光や発色により自己または同種抗体を検出する（遊離型抗体検出法）。
担体に固相化したFXIII-Aは保存中に免疫活性が低下し、血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに対する自己または同種抗体の捕捉能力が低下する可能性があり、その場合は、血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに対する自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットの品質は低下してしまう。
本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体は、遊離型抗体検出法において、固相化する抗原としてのFXIII-Aの反応性を検定するための反応性管理用抗体として用いることができる。また、臨床現場で検体を検査する時に陽性コントロールとしても使用できる。遊離型抗体検出法においては、ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を単独で陽性コントロールとして用いることができる。
固相化したFXIII-Aの反応性を検定するためには、血漿中の遊離のFXIIIまたはFXIII-Aに対する自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットを用いて、検体として抗体陽性血漿検体の代りに、本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を用いてアッセイを行えばよい。
ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の濃度を段階的に変えてアッセイを行い、標準曲線を作成し、あらかじめ作成した標準曲線と比較し、アッセイの測定値が低下していなければ、担体に固相化したFXIII-Aの反応性は低下していないと判定することができ、同じ条件で保存していた同一ロットのキットは品質を保持していると結論することができる。
また、結合型の自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットにおいては、抗ヒトFXIII-A抗体を担体に固相化し抗原捕捉用抗体として使用し、該担体に血漿中のFXIII-Aと自己または同種抗体の結合体を結合させ、自己または同種抗体に、例えば、発色酵素、蛍光色素、着色粒子等で標識した抗ヒト免疫グロブリン抗体を結合させ、蛍光や発色により自己または同種抗体を検出する（結合型抗体検出法）。
本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体は、結合型抗体検出法において、固相化する抗ヒトFXIII-A抗体の反応性を検定するための反応性管理用抗体として用いることができる。また、臨床現場で検体を検査する時に陽性コントロールとしても使用できる。結合型抗体検出法においてはヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を（FXIII-A含有）健常血漿と混合し、FXIII-Aと自己抗体の免疫複合体を形成させて陽性コントロールとして用いることができる。
固相化した抗ヒトFXIII-A抗体の反応性を検定するためには、血漿中の自己または同種抗体と結合したFXIIIまたはFXIII-A免疫複合体を検出するための免疫学的測定法キットを用いて、検体として血漿検体の代りに、本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を用いてアッセイを行えばよい。
ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の濃度を段階的に変えてアッセイを行い、標準曲線を作成し、あらかじめ作成した標準曲線と比較し、アッセイの測定値が低下していなければ、担体に固相化した抗ヒトFXIII-A抗体の反応性は低下していないと判定することができ、同じ条件で保存していた同一ロットのキットは品質を保持していると結論することができる。
さらに、結合型抗体検出法においてはヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を固相化し、血漿中のFXIII-Aと自己または同種抗体の免疫複合体を捕捉するための抗体として用いることもできる。本発明は、ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を担体に固相化した免疫学的測定法キットを用いて、血漿中のFXIII-Aと自己または同種抗体の免疫複合体を検出する方法も包含する。
さらに、ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を固相化し、FXIII-Aタンパク質量測定用抗体として用いることもできる。本発明はヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体を担体に固相化した免疫学的測定法キットを用いて、FXIII-Aタンパク質量を測定する方法も包含する。
本発明を以下の実施例によって具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
以下の実施例において、％は、特に断らない場合はw/v％を示す。
ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の解析
本実施例で用いた材料は以下のとおりである。
組換え体FXIII-A (rFXIII-A)はZymogenetics (Seattle, WA, USA)より供与いただいた。
組換え体FXIII-B（rFXIII-B）はバキュロウイルス発現系で発現させ、精製した。
マウス抗FXIII-Aモノクローナル抗体（mAb）は G. Reed博士（Massachusetts General Hospital, Boston, MA, USA）から供与いただいた。
ペルオキシダーゼ（PO）標識抗ヒトIgGはMP Biomedicals社（Solon, OH, USA）より入手した。
ウサギ抗FXIII-A抗体はin-houseで作製し、rFXIII-Aを用いてアフィニティ精製した。
ウサギ抗FXIII-B抗血清はNordic Immunological Laboratories社（AX Eindhoven, The Netherlands）より購入した。
5-biotinamidopentylamine (BAPA)(EZ-link pentylamine-biotin, Cat. No. 21345)は Thermo Scientific社（Rockford, IL, USA）より購入した。
西洋わさび由来ペルオキシダーゼ(HRP)標識ストレプトアビジン（Cat. No. RPN1231）およびHRP標識抗ウサギIgG（Cat. No. NA934V）は、GE Healthcare社（Bioscience AB, Uppsala, Sweden）から購入した。
Tetramethylbinzidine (TMB)パーオキシダーゼEIA複合体基質キット（Cat. No. 1721067）は、Bio-Rad社（Hercules, CA, USA）より購入した。
Gly-Pro-Arg-Pro amide (GPRP, Cat. No. G5779)、ウシ血漿由来トロンビン（Cat. No. T4648）、ヘパリン（Cat. No. H3393）、N,N-dimethylcasein (Cat. No. C9801), monodansylcadaverine (MDC, Cat. No. D4008)は Sigma-Aldrich社（St. Louis, MO, USA）より購入した。
アンチトロンビンはCSL Behring社（東京、日本）より供与いただいた。
HRP化学発光基質（Cat. No. WBKLS0500）はメルクミリポア社（Billerica, MA, USA）より購入した。
[実施例１] ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の作製
ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の作成は、ISAAC法［Nature Protocols 6, 668-676 (2011)］を用いて行った。具体的には、１0μg/mLのFXIII-Aを4℃で一晩置くことで固相化した細胞チップに、自己免疫性出血病FXIII/13患者由来リンパ球からCD138陽性細胞を抗CD138抗体マイクロビーズ（ミルテニー）により濃縮し、得られた細胞播種し、３時間培養させた。その後リン酸食塩生理液（PBS）で洗浄後、1μg/mLのCy3標識の抗ヒトIgG抗体(ミリポア)を反応させ、FXIII特異的スポットを作成した。
また0.5μg/mLのCellTrace Oregon Green (Life Technologies)で細胞を蛍光ラベルした。その後蛍光顕微鏡(BX51WI,Olympus)下でスポットを観察し、該当細胞を１つずつ回収した。
抗体遺伝子の取得はJinらの方法［Nature Medicine 15, 1088-1092 (2009)］で行った。ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体は、A01L、A26K、A29K、A35K、A36K、A11K、A39K、A43K、A51K、A53L、A54K、A11G39K, A39G11K, A53K1、A60G1L、A60G4L、A69K、A75K、及びA78Lの１９種類得られた。
これらのうちA01L、A11K、A26K、A29K、A35K、A36K、A39K、A43K、A51K、A53L、A53K1、A54K、A60G1L、A60G4L、A69K、A75KおよびA78Lの全１７種類のヒトモノクローナル抗体の重鎖可変領域のDNA配列およびアミノ酸配列、軽鎖可変領域のDNA配列およびアミノ酸配列、重鎖可変領域のCDR(相補性決定領域）（CDRH1、CDRH2およびCDRH3）のアミノ酸配列、ならびに軽鎖可変領域のCDR(相補性決定領域）（CDRL1、CDRL2およびCDRL3）のアミノ酸配列を決定した（配列番号１〜１５３）。CDRL2はアミノ酸３個からなる配列であった。
抗体タンパク質は、Expi293F Expression System (サーモフィッシャー）を用いて産生させ、Protein G Sepharose 4 Fast Flow（GEヘルスケア）を用いて精製し、抗FXIII-A抗体を得た。
[実施例２] ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体の反応性の検討
[方法]
固相でのヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体（mAb）の反応性
1 mg/mLのrFXIII-Aを0.1% SDS, 0.1% Triton X-100, 150 mM NaCl, 20 mM Tris (pH 8.0)中で煮沸し、変性させた。50 mM Na2CO3で10μg/mLに希釈した未変性もしくは変性rFXIII-A 10μLを96穴EIAプレートに入れ、固相化した。2% 牛血清アルブミン（BSA）を含む20 mM Tris (pH 7.5), 150 mM NaCl (TBS)で10μg/mLに希釈したヒト抗FXIII-A mAb 0.1 mLをrFXIII-A固相化プレートに入れて、37℃で２時間インキュベートした。0.1% Tween 20を含むTBS (TBS-T) 0.15 mLで５回洗浄後、1% BSA-TBSで2,000倍希釈したPO標識抗ヒトIgG 0.1 mLを入れて１時間インキュベートした。0.15 mL TBS-Tで５回洗浄後、0.1 mL TMB基質液を入れて37℃で５分間発色した。50μLの0.3 M 硫酸を加えて反応停止後、450 nmの吸光度を測定した。
活性化FXIII-A (rFXIIIa)およびA2B2異種四量体（rA2B2）の調製
0.02% BSA-TBSで25μg/mLに調製したrFXIII-Aを5 mM CaCl2、10 U/mL トロンビンと37℃で15分間インキュベート後、20 U/mL アンチトロンビンと20 U/mL ヘパリンを加えて反応を停止し、rFXIIIa標品とした。rA2B2は、等量のrFXIII-AとrFXIII-Bを混合して調製した。
液相でのヒト抗FXIII-A mAbの反応性
FXIII-A換算で10μg/mLのrFXIII-A, rFXIIIa, rA2B2 5μLと、1 mg/mL ヒト抗FXIII-A mAb 5μLを混合し、37℃で１時間インキュベートした。2% BSA-TBSで100倍希釈した混合液0.1 mLをマウス抗FXIII-A mAbを固相化したプレートに入れて、37℃で１時間インキュベートした。TBS-T 0.15 mLで５回洗浄後、1% BSA-TBSで2,000倍希釈したPO標識抗ヒトIgG 0.1 mLを入れて１時間インキュベートした。0.15 mL TBS-Tで５回洗浄後、0.1 mL TMB基質液を入れて37℃で５分間発色した。50μLの0.3 M 硫酸を加えて反応停止後、450 nmの吸光度を測定した。
血漿内α2-PIへのアミン取り込み反応（PI-BAPA反応）
5μLの健常者血漿プール（n=17）に1, 2, 5μLのヒト抗FXIII-A mAbを混合し、37℃で１時間インキュベートした後、0.5μL 0.1 M BAPA（5-ビオチンアミドペンチルアミン（5-biotinamidopentylamine）（終濃度2 mM）、0.5μL 0.1 M dithiothreitol (DTT、終濃度 2 mM)、1.25μL 0.1 M CaCl2 （終濃度 5 mM）、2.5μL 11 mM GPRP (終濃度 1.1 mM)、0.25μL 1kU/mL トロンビン（終濃度 10 U/mL）を加え、TBSで全量25μLの反応液を調製した。37℃で５分間反応後、0.5 mLの 10 mM EDTAを含むTBSを添加して停止させた。PI-BAPA反応終了液10μLを、90μLの2%牛血清アルブミン（BSA）を含むTBSとともに抗α2-PI抗体塗布プレートに入れ、37℃で１時間インキュベートした。0.1% Tween 20を含むTBS (TBS-T) 0.15 mLで５回洗浄後、2% BSA-TBSで2,000倍に希釈したHRP標識ストレプトアビジン0.1 mLを入れて、室温で１時間インキュベートした。0.15 mL TBS-Tで５回洗浄後、0.1 mL TMB基質液と37℃で５分間反応させた。50μLの0.3 M 硫酸を入れて反応を停止後、450 nmの吸光度を測定した。
フィブリン架橋反応
25μLの健常者血漿プールと25μL ヒト抗FXIII-A mAbを混合し、37℃で１時間インキュベートした。混合液を15μLずつ分注し、10μLの20 U/mL トロンビン、20 mM CaCl2を含むTBSを加えて室温で1, 2, 5分間反応した。50 mM EDTA-TBS 0.1 mLを加えて反応を停止後、10,000xgで5分間遠心してフィブリンを回収した。1 mL TBSで洗浄後、40μLのUSTバッファー[8 M 尿素、1% SDS、50 mM Tris (pH 8.0)]にフィブリンを溶解し、さらに40μLのSDSサンプルバッファー[2% SDS, 0.125 M Tris (pH 6.8), 15% グリセロール、5% メルカプトエタノール、0.02% ブロムフェノールブルー]を加えて煮沸した。８μLのサンプルを、0.1% SDSを含む10% ポリアクリルアミドゲルにて電気泳動し、CBB染色した。
rFXIIIaのMDC取り込み反応（MDC assay）
25μg/mLのrFXIIIa 5μLにヒト抗FXIII-A mAb ５μLを混合し、37℃で１時間インキュベートした。50μLの0.4% N,N-dimethylcasein (終濃度 0.2%)、25μL 2 mM MDC (終濃度 0.5 mM)、0.2μL 1 M DTT（終濃度 2 mM）、0.5μL 1 M CaCl2 (終濃度 5 mM)、1μL 1kU/mL トロンビン（終濃度 10 U/mL）を加え、TBSで全量0.1 mLの反応液とした。37℃で30分間反応し、0.1 mL 10% トリクロロ酢酸を加えて反応を停止した。10,000xgで５分間遠心して沈殿を回収し、0.3 mLのエタノール・エーテル1:1混合液で３回洗浄後、0.3 mLの 8 M 尿素、1% SDS、50 mM Tris (pH 8.0)に溶解して、360 nmの励起光における520 nmの蛍光を測定した。
血漿中での活性化ペプチド（AP）の切断
健常者血漿プール2.5μLにヒト抗FXIII-A mAb 2.5μLを混合し、37℃で１時間インキュベートした。
10μLの20 U/mLトロンビン、20 mM CaCl2を含むTBSを加えて室温で1, 2, 5分間反応し、40μLのUSTバッファーを加えて反応を停止した。40μLのSDSサンプルバッファーを加えて煮沸し、８μLを８％ポリアクリルアミドゲル（0.1% SDS含む）に電気泳動した。分離したタンパク質をニトロセルロース膜に転写し、ウサギ抗FXIII-A抗体(2,000倍希釈液)と室温で一昼夜反応した。TBS-Tで３回洗浄後、HRP標識抗ウサギIgG（5,000倍希釈液）と１時間室温でインキュベートした。TBS-Tで３回洗浄後、HRP化学発光基質と５分間反応し、Light Capture (ATTO社、東京、日本)にて発光を検出した。
rFXIII-AのAP切断
10μg/mLのrFXIII-A 10μLに、1, 2, 5 μLのヒト抗FXIII-A mAbを混合して、37℃で１時間インキュベートした後、10μLの20 U/mL トロンビン、20 mM CaCl2を含むTBSを加えて37℃で15分間反応した。40μLのUSTバッファーを加えて反応を停止後、40μLのSDSサンプルバッファーを加えて煮沸し、８μLを８％ポリアクリルアミドゲル（0.1% SDS含む）に電気泳動した。分離したタンパク質をニトロセルロース膜に転写し、ウサギ抗FXIII-A抗体(2,000倍希釈液)と室温で一昼夜反応した。TBS-Tで３回洗浄後、HRP標識抗ウサギIgG（5,000倍希釈液）と１時間室温でインキュベートした。TBS-Tで３回洗浄後、HRP化学発光基質と５分間反応し、Light Captureにて発光を検出した。
トロンビン依存性A2B2の解離
１μg/mLのrA2B2 20μLに5μLのヒト抗FXIII-A mAbを混合して、37℃で１時間インキュベートした。TBS 175μL を加えて希釈し、50μLずつ分注した。1.25, 2.5, 5 U/mL トロンビンおよび20 mM CaCl2を含むTBS 50μLを加えて、37℃で20分間反応した。反応液10μLをマウス抗FXIII-A mAb固相化プレートに入れて37℃で１時間インキュベートした。0.15 mL TBS-Tで５回洗浄後、rFXIII-Aと結合したrFXIII-Bを検出するために、抗FXIII-B抗血清 2,000倍希釈液0.1 mLを入れて１時間インキュベートした。0.15 mL TBS-Tで５回洗浄後、HRP標識抗ウサギIgG 2,000倍希釈液0.1 mLを入れて１時間インキュベートした。0.15 mL TBS-Tで５回洗浄後、0.1 mL TMB基質液と37℃で５分間反応させた。50μLの0.3 M 硫酸を入れて反応を停止後、450 nmの吸光度を測定した。
FXIIIのフィブリンへの取り込み
フィブリン架橋反応後の上清に残ったFXIII-A、FXIII-BをELISAで測定した。上清を２％BSA-TBSで100倍希釈し、0.1 mLをマウス抗FXIII-A mAbもしくは抗FXIII-B抗体固相化プレートに入れて、37℃で１時間インキュベートした。0.15 mL TBS-Tで５回洗浄後、ウサギ抗FXIII-A抗体2,000倍希釈液もしくはビオチン化抗FXIII-B抗体200倍希釈液0.1 mLを入れて１時間インキュベートした。0.15 mL TBS-Tで５回洗浄後、HRP標識抗ウサギIgGもしくはHRP標識ストレプトアビジン2,000倍希釈液0.1 mLを入れて１時間インキュベートした。0.15 mL TBS-Tで５回洗浄後、0.1 mL TMB基質液と37℃で５分間反応させた。50μLの0.3 M 硫酸を入れて反応を停止後、450 nmの吸光度を測定した。
A2B2異種四量体形成
１μg/mLのrFXIII-A 5μLと5μLのヒト抗FXIII-A mAbを混合して37℃で１時間インキュベートした後、2μg/mLのrFXIII-B ５μLを加えてさらに30分間インキュベートした。85μLの2% BSA-TBSを加えた後、20μLをマウス抗FXIII-A mAb固相化プレートに入れて37℃で１時間インキュベートした。FXIII-Aに結合したFXIII-Bを、マウス抗FXIII-A mAb固相化プレートを用いてELISAにて測定した。
A2B2異種四量体からのFXIII-A乗っ取り
0.2μg/mLのrA2B2 95μLに5μLのヒト抗FXIII-A mAbを混合して、37℃で24時間インキュベートした. FXIII-Aに結合したFXIII-Bを、マウス抗FXIII-A mAb固相化プレートを用いてELISAにて測定した。
[結果]
ヒト抗FXIII-A mAbクローン間の反応性の比較
固相化したrFXIII-Aに対し、最も強い反応性を示したのはA01Lで、A78L、A75K, A60G4L, A53K1, A60G1Lの順に、反応性が認められた（図１−１）。一方、液相でrFXIII-Aと最も強く結合したのはA53K1で、固相ではほとんど反応性が認められなかったA26K, A36K, A11K, A53L, A69Kは、液相では高い結合性を示した（図１−２）。A01L, A78Lは液相でrFXIII-Aと中程度の反応性が認められ、A60G1L, A60G4L, A75Kは固相に比べその反応性は減弱であった。
FXIII-Aの変性による反応性の変化について固相で検討したところ、A01L, A53K1は変性により大きく結合が低下した（図１−３）。A60G1L, A60G4L, A78Lは変性・未変性で反応性に大きな違いは認められず、A75Kはむしろ変性により２倍程度に結合が高くなった。FXIII-Aと液相で反応性を示したクローンについて、いずれも活性化したFXIII-Aに対して大きく反応性が低下し、A2B2異種四量体に対しても反応性が弱まる傾向が認められた（図１−４）。
ヒト抗FXIII-A mAbクローンのFXIII活性への影響
血漿中のPI-BAPA反応（血漿中のα2-プラスミンインヒビターへのアミン（BAPA）の取り込み反応）に対して、A69Kが最も強い阻害を示し、液相でFXIII-Aと高い反応性を示したA26K, A36K, A11K, A53L, A53K1も強くPI-BAPA反応を阻害した（図２−１，２−２および２−３）。A29K、A78Lでは中程度のPI-BAPA抑制が認められた．PI-BAPA反応と同様に、A69Kはフィブリン架橋反応も強く阻害し、架橋の遅延はA26K, A36K, A11K, A53L, A53K1, A78Lで確認された（図３−１および３−２）。活性化FXIII (rFXIIIa)のアミン取り込み活性に対しては、A01LとA60G4L、A78Kに強い阻害が観察され、A35K, A53L, A53K1, A60G1L, A69Kにも中程度の阻害が認められた（図４）。
ヒト抗FXIII-A mAbクローンの活性化への影響
トロンビンによるFXIII-A N末端のAPの切断について、血漿中でのmAbでの影響を調べたところ、A78Kに最も強い阻害がみられ、A01L, A60G4Lにも強い抑制が、A26K, A36K, A11K, A53L, A53K1, A69Kでは中程度の阻害が観察された（図５−１）。これらのmAbクローンについて、精製rFXIII-Aとトロンビンのみでの反応（血漿外での反応）で検討したところ、いずれのクローンとも、AP切断を妨害しなかった（図５−２）。そこで、トロンビンとカルシウムに依存したFXIII-BのA2B2異種四量体（rA2B2）からの解離について検討したところ（図６−１、６−２および６−３）、A69Kによる強いFXIII-B解離の妨害が認められた（図６−３のA69K）。FXIII-Bの解離は、A26K, A36K, A11K, A53Lにも抑制傾向が見られた。
フィブリンはFXIII活性化の場であることから、FXIIIのフィブリン塊（クロット）への取り込みについて調べた。FXIII-Aのフィブリンへの取り込みは、A78Lで明白な妨害が認められ、A01L、A60G4Lにも弱いながら抑制傾向が見られた（図７−１、７−２、７−３、７−４、および７−５）。逆に、A26K、A36K, A11K, A53L, A53K1, A69Kでは、FXIII-AがFXIII-Bとともにフィブリンに留まる傾向が観察された。mAb (A69K)を伴ったFXIII-Bのフィブリンへの滞留はウエスタンブロット解析でも確認された（図７−６）。
ヒト抗FXIII-A mAbクローンのA2B2異種四量体への影響
症例血漿にみられるAa型FXIIIインヒビターの特徴として、A2B2異種四量体形成阻害とA2B2からのFXIII-Aの乗っ取りが挙げられる。そこで、rFXIII-AおよびrFXIII-Bを用いてA2B2異種四量体形成へのmAbの影響を検討したところ、A01L, A60G4L, A78Lにきわめて強い四量体形成阻害が観察され（図８）、また、これらのmAbクローンについて、rA2B2と24時間インキュベーションした場合に、FXIII-AからFXIII-Bを取り去る効果も確認された（図９）。
以上をまとめると、今回解析したmAbクローンは大きく３つのグループ（dissociation インヒビター、assemblyインヒビター、非インヒビター）に分けられる。A11K, A26K, A36K, A53L, A53K1, A69Kは、活性化過程でのFXIII-AからFXIII-Bの解離をブロックする dissociationインヒビターであり、APの切断は妨害しないもののFXIII-Bが離れないためにフィブリンγ鎖間を架橋することができず、FXIIIをクロットに留めるものである（図１０−１）。A01L, A60G4L, A78LはAssemblyインヒビターであり、A2B2に結合した場合FXIII-AからFXIII-Bの解離を促すことで、適切なフィブリノーゲン-FXIII複合体を崩壊させ、トロンビンによるフィブリン形成時に同時進行するはずのAP切断が起こり難くなるものである（図１０−２）。その他の、A29K、A35K、A39K、A43K、A51K、A54K、A11G39K、A39G11K、A60G1LおよびA75Kは非インヒビターである。
[実施例３] ヒト抗FXIII-A mAbの検出およびエピトープ解析
材料と方法
抗FXIII-A抗体検出イムノクロマトグラフィーによるヒト抗FXIII-A mAbの検出
19種類のヒト抗FXIII-A mAb（A01L, A26K, A29K, A35K, A36K, A11K, A39K, A43K, A51K, A53L, A54K, A11G39K, A39G11K, A53K1, A60G1L, A60G4L, A69K, A75K, A78L）を解析に用いた。2種類のマウスmAb(8C4C, 2H7F)をテストラインに、ヒトIgGをコントロールラインに塗布したストリップを使用した。ヒト抗FXIII-A mAb(183 ng/10 μL)を健常血漿(10μL)と37℃で2時間反応後、10倍希釈した検体(40μL)をストリップに展開した(5分)。洗浄(10分)後、5倍希釈した金コロイド感作抗ヒトIgGポリクローナル抗体(50μL)を展開した(10分)。ストリップのライン強度は自動濃度読み取り装置を用いて測定した。AH13症例の血漿を健常者血漿で2 BUに希釈した検体のライン強度を1 AUとしてテストライン吸光度を算出した。また、テストラインとコントロールラインのライン強度の比も算出した。
テストラインが検出されたモノクローナル抗体についてはさらに希釈（0.3〜18.3μg/mL）して、ライン強度を測定した。
ヒトモノクローナル抗体とマウスmAbの競合阻害の検討
2種類のマウスmAb(8C4C, 2H7F) 200 ngずつを4℃で一晩プレートにコートし、2%BSA/PBSでブロッキングした。血漿(50倍希釈)、あるいは組み換えFXIII-A (rFXIII-A, 50 ng)とヒトmAb(100 ng)を37℃1時間反応させた後、ブロッキング済みのプレート中で37℃1時間反応させた。抗ヒトIgGポリクローナル抗体(2,000倍希釈)と37℃1時間反応後、TMBで検出を行った。
FXIII-Aペプチドをコートしたプレ−トを用いたヒトmAbのエピトープ解析
FXIII-AペプチドはFXIII-Aの配列を基に以下37種合成した（Sigma Aldrich PEPscreen）。
[5-24]等の記載は、FXIII-Aのアミノ酸配列の５番目のアミノ酸から２４番目のアミノ酸からなるペプチドであることを示す。ヒトFXIII-Aの全長アミノ酸配列を配列番号１５４に示す。
1: FXIII-A [5-24], 2: FXIII-A [20-39], 3: FXIII-A [36-55], 4: FXIII-A [53-72], 5: FXIII-A [79-98], 6: FXIII-A [100-119], 7: FXIII-A [121-140], 8: FXIII-A [136-151], 9: FXIII-A [158-177], 10: FXIII-A [173-192], 11: FXIII-A [187-206], 12: FXIII-A [205-224], 13: FXIII-A [228-247], 14: FXIII-A [257-274], 15: FXIII-A [270-289], 16: FXIII-A [296-313], 17: FXIII-A [333-352], 18: FXIII-A [350-369], 19: FXIII-A [377-393], 20: FXIII-A [410-422], 21: FXIII-A [427-446], 22: FXIII-A [445-464], 23: FXIII-A [462-481], 24: FXIII-A [477-496], 25: FXIII-A [492-511], 26: FXIII-A [516-535], 27: FXIII-A [540-559], 28: FXIII-A [556-574], 29: FXIII-A [571-582], 30: FXIII-A [580-599], 31: FXIII-A [596-615], 32: FXIII-A [616-635], 33: FXIII-A [631-647], 34: FXIII-A [649-668], 35: FXIII-A [674-693], 36: FXIII-A [685-704], 37: FXIII-A [712-731]
FXIII-Aペプチドを4℃で一晩プレートにコートし、2%BSA/PBSでブロッキングした。次いで各種ヒトmAb(200 ng)を37℃1時間反応させた後、抗ヒトIgGポリクローナル抗体(1,000倍希釈)と37℃1時間反応後、TMBで検出を行った。
[結果]
抗FXIII-A抗体検出イムノクロマトグラフィーによる各種ヒト抗FXIII-A mAbの検出
今回作製した19種のヒト抗FXIII-A mAbがヒト抗FXIII-A抗体検出イムノクロマトグラフィーで検出されるか調べたところ、A26K, A36K, A11K, A53L, A53K1, A60G4L, A69Kの7種類でテストライン吸光度がカットオフ値の0.18超で検出された(図１１−１A〜D)。またテストラインとコントロールラインの強度比はA26K, A36K, A11K, A53L, A53K1, A69Kの6種類で0.5超だった(図１１−１A〜D、および１１−２A、B)。
A26K, A36K, A11K, A53L, A53K1, A69Kの6種類について希釈を行い、感度の検討を行った。A53Lは9.2μg/mLで飽和に達し、A26K, A36K, A11K, A53K1, A69Kの5種類は4.6μg/mLで飽和に達した(図１１−３AおよびB)。A36K, A53Lは2.3μg/mLまで検出可能で、A26Kは1.1μg/mL、A11K, A53K1, A69Kは0.6μg/mLまで検出可能だった(図１１−３A)。
ヒトmAbとマウスmAbの競合阻害の検討
イムノクロマトグラフィーの捕捉抗体に用いた2種類のマウスmAbとヒトmAbが競合阻害してテストラインが検出されなかった可能性があるため、液相のELISAでrFXIII‐Aと結合した9種類のヒトmAb(A01L, A26K, A36K, A11K, A53L, A53K1, A60G4L, A69K, A78G)とマウスmAbが競合阻害しないか検討した。その結果、rFXIII‐AはA60G4Lを除く、8種類のヒトmAb(A01L, A26K, A36K, A11K, A53L, A53K1, A60G4L, A69K, A78L)で検出された(図１２)。したがって、少なくともこの8種類に関しては、競合阻害は認められないと考えられる。しかし、血漿中のFXIII-Aの検出がA01LとA78Lで極端に低下していた(図１２)。
FXIII-Aペプチドをコートしたプレートを用いたヒトmAbのエピトープ
解析
固相のELISAでrFXIII‐Aと結合した6種類のヒトmAb(A01L, A53K1, A60G1L, A60G4L, A75K, A78L)について合成ペプチドとの反応性を調べた。陰性コントロールに用いたNPκ（NPK), NPλ（NPL)は合成ペプチドとほとんど反応しなかった(図１３−１Aおよび１３−２A)。一方、A53K1は主にFXIII-A [540-559]と反応した(図１３−１B)。A75Kは主にFXIII-A [79-98], FXIII-A [158-177], FXIII-A [296-313], FXIII-A [540-559], FXIII-A [596-615], FXIII-A [712-731]と反応した(図１３−１C)。A01Lは主にFXIII-A [79-98]と反応し、次いでFXIII-A [596-615], FXIII-A [712-731]と反応した(図１３−２B)。A60G1Lは主にFXIII-A [79-98]と反応し、次いでFXIII-A [136-151], FXIII-A [296-313], FXIII-A [540-559], FXIII-A [712-731]と反応した(図１３−２C)。A60G4LはFXIII-A [79-98], FXIII-A [296-313], FXIII-A [540-559], [596-615], FXIII-A [712-731]と反応した(図１３−３A)。A78Lは主にFXIII-A [79-98], FXIII-A [556-574], FXIII-A [712-731]と反応した(図１３−３B)。
[実施例４] ヒト抗FXIII-A mAb F(ab')2を用いたエピトープ解析
単離した１９種類のヒト抗FXIII-A単クロ−ン抗体の性質を比較すると、図１４に示すようにカルシウム依存性解離反応を阻害する抗体とA2B2複合体形成を阻害する抗体に大別された。
これらの内、特に強くFXIII-Aと反応したA11K, A26K, A36K, A53L, A53K1, A69K, A75K, A79LのF(ab')2断片（F(ab')2mAb)を作製し、更にエピトープ解析を行った。
１．ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体のF(ab')2mABによる免疫沈降の競合阻害
組換えヒトFXIII-A（rFXIIIA)１μgとヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体F(ab')2mAb５μgを混合し、37℃で１時間インキュベートした。次いで、ヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体(IgG)を添加し、37℃で１時間インキュベートし、その後、プロテインA（50%(v/v)）20μLを添加し、室温で１時間インキュベートし、SDS-PAGEに供した。
SDS-PAGEの結果を図１５に示す。図１５ＡおよびＢに競合阻害の原理を示す。図１５ＣにSDS-PAGE像を示す。また、F(ab')2mAb無添加(-)でのrFXIII-1のバンド強度を1.0として相対強度を算出した。図１５Ｄに相対強度を示す。
図に示すように、A11K, A26K, A36K, A53L, A53K1, A69K, A75K, A79LのF (ab')2断片は、A11K(IgG)を用いた免疫沈降反応を種々の程度に競合阻害した。
図１６に各種F(ab')2mAbによる免疫沈降の競合阻害の結果（相対強度）を示す。図１６に示すように、A11K, A26K, A36K, A53K1, A69KのF(ab')2断片は、A11K, A26K, A36K, A53L, A53K1, A69Kの各IgGとrFXIII-Aとの免疫沈降反応を強く阻害した。この結果は、A11K, A26K, A36K, A53L, A53K1, A69K (活性化阻害型抗体）のエピトープは各々共通あるいは近接する可能性があることを示す。
一方、A79LのF(ab')2mAbはA01L, A60G4L, A79L各IgGとrFXIII-Aとの免疫沈降反応を阻害した。この結果は、A01L, A60G4L, A79L(複合体形成阻害型抗体)のエピトープは各々共通あるいは近接する可能性があることを示す。
２．FXIII-AペプチドとF(ab')2mAbの結合
（１）FXIII-AペプチドとF(ab')2mAbの結合
A69Kを活性化（解離反応）阻害型抗体の代表、A79Lを複合体形成阻害型抗体の代表として選び、実施例３に示す37種類の合成FXIIIAペプチドとF(ab')2mAbとの結合をELISAにより確認した。図１７Ａに各ペプチドの全長FXIII-A上の位置、図１７ＢにELISAのプロトコール、図１７Ｃに測定原理を示す。図１８Ａの下の１〜３７の線がペプチドの位置を示す。図１７Ｄ〜Ｆに結合実験の結果を示す。図１７Ｄ〜Ｆに示すように、A69Kは5, 27, 37番ペプチドと、A79Lは5, 16, 27, 28, 31, 37番ペプチドと結合した。
（２）rFXIII-Aによるペプチド・抗体結合の競合阻害
ペプチド・抗体結合の特異性を検証するために、rFXIIIAを用いて競合阻害を調べた。図１８Ａに各ペプチドの全長FXIII-A上の位置、図１８Ｂに競合阻害実験のAのプロトコール、図１８Ｃに測定原理を示す。図１８Ａの下の１〜３７の線がペプチドの位置を示す。図１８ＤとＥに競合阻害実験の結果を示す。図１８ＤとＥに示すように、A69Kは5, 27, 37番ペプチドと、A79Lは5, 16, 28, 31, 37番ペプチドと特異的に結合していた。
図１９にF(ab')2mAbと特異的に結合したFXIII-A上のペプチドの位置を立体的に示す。図１９Ａは各ペプチドの全長FXIII-A上の位置を示し、図１９ＢはＡ６９が特異的に結合したペプチドの位置、図１９ＣはA79Lが特異的に結合したペプチドの位置を示す。図１９Ａの下の１〜３７の線がペプチドの位置を示す。
３．抗FXIII-A mAb存在下でのプロテアーゼによるFXIII-Aの分解 (Protection Assay)
抗FXIII-A mAbがプロテアーゼによるFXIIIAの分解を阻害するか否かを調べた。(Protection Assay)。実験のプロトコールを図２０−１Ａに示し、測定原理を図２０−１Ｂに示す。
（i） 最初に抗FXIII-A mAb存在下各々のプロテアーゼの切断断片のピーク面積を調べ、（ii） 次いで、切断部位について、各断片のピーク面積を積算し、（iii） 陰性対照mAb（IgG）存在下でのピーク面積を1.0として相対値を算出し、（iv） 相対値0.1未満の保護された切断部位を検索する。
図２０−２に、抗FXIII-A mAb非存在下（非特異的IgG存在下）で実験した結果を示す。図２０−２Ａは切断断片の平均ピーク面積を示し、図２０−２Ｂは切断部位および得られた断片の位置を示す。図２０−２Ｂの矢印がキモトリプシンによる切断部位（上の矢印）およびトリプシンによる切断部位（下の矢印）を示し、図２０−２Ｂの下の線は切断により得られた断片の位置を示す。上がキモトリプシンによる切断により得られた断片、下がトリプシンによる切断により得られた断片を示す。２０−２に示すように、キモトリプシン切断では35断片（切断部位48箇所）、トリプシン切断では21断片（切断部位 30箇所）が検出された。複数回測定で変動係数10未満の切断断片を選択した。
図２１〜２４に各切断断片の定量および保護された切断部位の検索の結果を示す。
（i） 図２１は、陰性対照mAb (IgG)存在下での各々の切断断片のピーク面積を求めて、A69K mAb (IgG)存在下での各々の切断断片のピーク面積と比較した結果を示す。
（ii） 図２２は、酵素による切断から保護された切断部位を検索する為に、各切断部位について断片のピーク面積を積算した結果を示す。
（iii） 図２３は、陰性対照mAb (IgG) 存在下でのピーク面積を1.0として相対値を算出した結果（A69K mAb(IgG)を示す。
（iv） 図２４は、保護された切断部位の検索の結果を示す。図２４においては、A69K mAb (IgG)とA79L mAb (IgG)で保護された切断部位（相対値0.1未満）を矢印で表示した。
図２５に、抗FXIII-A mAbにより、プロテアーゼによる切断から保護された部位を示す。図２５中、A69Kが結合して保護されたアミノ酸とA79Lが結合して保護されたアミノ酸をFXIIIAの立体構造中に表示した。
図２６に、A69KのF(ab')2が結合して保護されたアミノ酸とA79LのF(ab')2が結合して保護されたアミノ酸をFXIIIAの立体構造中に表示した。
４．A69KおよびA79Lの結合部位の推定
上記の結果より、A69KおよびA79Lの結合部位を推定した。図２７ＡにA69Kの結合部位の推定の結果を示す。図２８ＡにA79Lの結合部位の推定の結果を示す。
本発明のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体は、血栓症の予防または治療薬として用いることができる。
配列番号１〜１５３ 合成

Claims (33)

  1. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A01L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号６９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号７０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号７１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号７２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）RNDで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号７３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  2. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A11K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号７４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号７５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号７６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号７７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号７８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  3. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A26K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号１０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号１２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号１０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号１２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    （a）配列番号７９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号８０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号８１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号８２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）DASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号８３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  4. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A29K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号１４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号１６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号１４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号１６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号８４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号８５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号８６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号８７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）DASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号８８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  5. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A35K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号１８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号１８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号８９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号９０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号９１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号９２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号９３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  6. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A36K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号２２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片； 配列番号２２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗ヒトFXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号９４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号９５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号９６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号９７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）DASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号９８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  7. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A39K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号２６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号２８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号２６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号２８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    （a）配列番号９９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１００で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１０１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１０２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１０３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  8. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A43K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号３０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号３２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号３０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号３２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１０５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１０６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１０７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）WAYで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１０８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  9. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A51K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号３４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号３６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号３４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号３６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号１０９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１１０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１１１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１１２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）WAYで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１１３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  10. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A53L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号３８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
    配列番号３８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
    （a）配列番号１１４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１１５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１１６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１１７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１１８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  11. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A53K1、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号４２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号４２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号１１９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１２０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１２１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１２２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）GAAで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１２３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  12. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A54K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号４６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号４８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号４６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号４８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号１２４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１２５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１２６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１２７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）WAYで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１２８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  13. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A60G1L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号５０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号５２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号５０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号５２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号１２９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１３０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１３１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１３２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１３３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  14. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A60G4L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号５４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号５６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号５４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号５６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号１３４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１３５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１３６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１３７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１３８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  15. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A69K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号５８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号６０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号５８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号６０で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号１３９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１４０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１４１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１４２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１４３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  16. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A75K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号６２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号６４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号６２で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号６４で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号１４４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１４５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１４６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１４７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１４８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  17. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A78L、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号６６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号６８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号６６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号６８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または
    （a）配列番号１４９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１５０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１５１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号１５２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）GNNで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号１５３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  18. 以下のいずれかのヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体A39G11K、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合する前記ヒトモノクローナル抗体の機能的断片：
    配列番号２６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域および配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；
    配列番号２６で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの結合活性を有する重鎖可変領域、および配列番号８で表されるアミノ酸配列と90％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、ヒトFXIII-Aへの特異的結合活性を有する軽鎖可変領域を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片；または（a）配列番号９９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ１、
    （b）配列番号１００で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ２、
    （c）配列番号１０１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖ＣＤＲＨ３、
    （d）配列番号７７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ１、
    （e）AASで表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ２、および
    （f）配列番号７８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖ＣＤＲＬ３
    を含む、ヒトFXIII-Aに特異的に結合するモノクローナル抗体、またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片。
  19. ヒトFXIII-Aの全長アミノ酸配列の７９番目のアミノ酸から９８番目のアミノ酸からなるペプチド、５４０番目のアミノ酸から５５９番目のアミノ酸からなるペプチドおよび７１２番目のアミノ酸から７３１番目のアミノ酸からなるペプチドと結合する抗体。
  20. モノクローナル抗体A11K、A26K、A36K、A53L、A53K1またはA69Kである、請求項１９記載の抗体。
  21. ヒトFXIII-Aの全長アミノ酸配列の７９番目のアミノ酸から９８番目のアミノ酸からなるペプチド、２９６番目のアミノ酸から３１３番目のアミノ酸からなるペプチド、５５６番目のアミノ酸から５７４番目のアミノ酸からなるペプチド、５９６番目のアミノ酸から６１５番目のアミノ酸からなるペプチドおよび７１２番目のアミノ酸から７３１番目のアミノ酸からなるペプチドと結合する抗体。
  22. モノクローナル抗体A01L、A60G4LまたはA79Lである、請求項２１記載の抗体。
  23. 請求項１〜２２のいずれか1項に記載の抗体のいずれかのH鎖またはL鎖を含んだシャッフル抗体。
  24. 請求項１〜２３のいずれか１項に記載のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片を有効成分として含む、血栓症の予防または治療のための医薬組成物。
  25. 血栓症としては、心筋梗塞、不安定狭心症、心房細動、脳卒中、腎障害、肺塞栓症、深部静脈血栓症、経皮経管冠動脈形成術、播種性血管内凝固症候群、敗血症、人工臓器、シャントまたはプロテーゼに関連する血栓症である、請求項２４記載の医薬組成物。
  26. 請求項１〜２３のいずれか１項に記載のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片からなる、血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに結合した自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットに用いる抗原捕捉用抗体の反応性管理用抗体、または陽性コントロール抗体。
  27. 免疫学的測定法キットが、イムノクロマトグラフィーまたはELISAである、請求項２６記載の免疫学的測定法キットに用いる抗原捕捉用抗体の反応性管理用抗体、または陽性コントロール抗体。
  28. 請求項１〜２３のいずれか１項に記載のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片からなる、血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに対する遊離の自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットに用いる抗体捕捉用抗原の反応性管理用抗体、または陽性コントロール抗体。
  29. 免疫学的測定法キットが、イムノクロマトグラフィーまたはELISAである、請求項２８記載の免疫学的測定法キットに用いる抗体捕捉用抗原の反応性管理用抗体、または陽性コントロール抗体。
  30. 請求項１〜２３のいずれか１項に記載のヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片の、血漿中のFXIIIまたはFXIII-Aに結合した自己または同種抗体を検出するための免疫学的測定法キットにおける、抗原捕捉用抗体としての使用。
  31. 免疫学的測定法キットが、イムノクロマトグラフィーまたはELISAである、請求項３０記載の使用。
  32. 請求項１〜２３のいずれか１項に記載のいずれかのヒト抗FXIII-Aモノクローナル抗体またはヒトFXIII-Aに特異的に結合するその機能的断片の、FXIII-Aタンパク質量を測定するための免疫学的測定法キットにおける、FXIII-Aタンパク質量測定用抗体としての使用。
  33. 免疫学的測定法キットが、イムノクロマトグラフィーまたはELISAである、請求項３２記載の使用。
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