JP2017512759A

JP2017512759A - 抗体、前記抗体を産生するハイブリドーマ、前記抗体を含む薬学的組成物及びその用途

Info

Publication number: JP2017512759A
Application number: JP2016554855A
Authority: JP
Inventors: ライ，ジァン−シュン; チェン，イ−ジュ; ワン，チェン−チ; ツァイ，ユィ−チェン; ユー，チェン−ダー，トニー
Original assignee: オービーアイファーマインコーポレイテッド
Priority date: 2014-04-10
Filing date: 2015-04-10
Publication date: 2017-05-25
Also published as: TWI697503B; RU2016138744A3; WO2015157629A2; US10815307B2; CN106456727B; ES2772817T3; US20180134799A1; IL276695A; RU2016138744A; IL246837B; KR101966408B1; TW201546092A; EP3662928A1; BR112016020009A2; AU2015243246A1; KR20160137984A; CA3104268A1; US9902779B2; TWI609886B; CN106456727A

Abstract

【課題】抗体、前記抗体を産生するハイブリドーマ、前記抗体を含む薬学的組成物及びその用途を提供する。【解決手段】本発明は、一つまたは複数の糖類抗原に結合する抗体またはその抗原結合部分を提供する。本発明は、薬学的組成物及び需要のある被験者の癌細胞を抑制する方法も開示する。薬学的組成物は、抗体またはその抗原結合部分と、少なくとも１個の薬学的に許容可能な担体とを含む。【選択図】なし

Description

（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１４年４月１０日に出願された米国特許仮出願第６１／９７７，８２４号、及び２０１４年９月３０日に出願された米国特許仮出願第６２／０５７，３８１号からの利益を主張し、これらの出願の内容全体を本明細書に組み込んで参考として援用される。

本発明は、腫瘍関連の糖類抗原に対する抗体に関し、少なくとも１個の腫瘍関連の糖類抗原またはその断片の特定部分あるいは変異体についての特定、及びこれらの抗体をコードする核酸、相補性核酸、担体、宿主細胞とその製造と使用方法を含み、それは、前記抗体を含有する治療薬剤及び薬学的組成物を含む。さらに、有効量の抗体を被験者に供給することにより、癌細胞を抑制するための方法を提供する。

幾つかの表面糖類が悪性腫瘍細胞上に発現される。例えば、ＧｌｏｂｏＨ（Ｆｕｃ α１→２Ｇａｌβ１→３ＧａｌＮＡｃβ１→３Ｇａｌ α１→４Ｇａｌβ１→４Ｇｌｃ）が既に種々の上皮癌において過発現されたことを示し、かつそれが乳癌と小細胞肺癌において腫瘍侵襲性と予後不良に関連している。先行研究に示すように、ＧｌｏｂｏＨ及び段階特異的胚抗原３（Ｓｔａｇｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃｅｍｂｒｙｏｎｉｃａｎｔｉｇｅｎ３，ＳＳＥＡ３，Ｇｂ５とも呼ばれる）が乳癌と乳癌幹細胞上に観察された（ＷＷＣｈａｎｇ氏ら、「乳癌幹細胞におけるＧｌｏｂｏＨとＳＳＥＡ３の発現、及びＧｌｏｂｏＨ合成におけるフコシルトランスフェラーゼ１と２の関与」（ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧｌｏｂｏＨａｎｄＳＳＥＡ３ｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｔｈｅｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｆｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ１ａｎｄ２ｉｎＧｌｏｂｏＨｓｙｎｔｈｅｓｉｓ），ＰＮＡＳ，１０５（３３）：１１６６７−１１６７２を参照）。

これらの発見は、腫瘍関連の糖類抗原の抗体についての発展の合理的な解釈を支持し、しかしながら、依然として癌の有効治療及び／または予防上についての需要が未だに満足できるレベルには達していなかった。本発明は、これらと他の需要を満足するために、腫瘍関連の糖類抗原に対する抗体を提供する。

米国特許仮出願第６１／９７７，８２４号明細書米国特許仮出願第６２／０５７，３８１号明細書米国特許第５，５８５，０８９号明細書米国特許第５，２２５，５３９号明細書米国特許第５，６９３，７６１号明細書米国特許第５，６９３，７６２号明細書欧州特許第５１９５９６号明細書国際特許公開第ＷＯ１９８７００２６７１号パンフレット国際特許公開第ＷＯ８６／０１５３３号パンフレット歐洲特許出願第１８４，１８７号明細書歐洲特許出願第１７１，４９６号明細書歐洲特許出願第１２５，０２３号明細書歐洲特許出願第１７３，４９４号明細書米国特許第４，８１６，５６７号明細書米国特許第８，２６８，９６９号明細書国際特許公開第ＷＯ９０／０３１８４号パンフレット国際特許公開第ＷＯ９６／１１７１１号パンフレット国際特許公開第ＷＯ００／４８６３０号パンフレット国際特許公開第ＷＯ９８／３６７７２号パンフレット国際特許公開第ＷＯ００／４１７２０号パンフレット国際特許公開第ＷＯ０６／１３４４２３号パンフレット国際特許公開第ＷＯ０７／０２６１９０号パンフレット米国特許第８，２３６，３１１号明細書米国特許第７，６２５，５５９号明細書米国特許第５，７７０，４２９号明細書米国特許公開第２００４／０１２６８２９号明細書米国特許公開第２００４／００８７６５１号

ＷＷＣｈａｎｇ氏ら、「乳癌幹細胞におけるＧｌｏｂｏＨとＳＳＥＡ３の発現、及びＧｌｏｂｏＨ合成におけるフコシルトランスフェラーゼ１と２の関与」（ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧｌｏｂｏＨａｎｄＳＳＥＡ３ｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｔｈｅｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｆｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ１ａｎｄ２ｉｎＧｌｏｂｏＨｓｙｎｔｈｅｓｉｓ），ＰＮＡＳ，１０５（３３）：１１６６７−１１６７２）Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，氏ら、（１９９１年）「免疫学的に興味のあるタンパク質の配列」（ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ），第５版，米国，保健福祉省（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅａｌｔｈａｎｄＨｕｍａｎＳｅｒｖｉｃｅｓ），ＮＩＨ出版Ｎｏ．９１−３２４２Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．氏ら、（１９８７年），分子生物学雑誌（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．），１９６：９０１−９１７Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，１９８５年，科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２２９：１２０２−１２０７Ｏｉ氏ら、１９８６年，生物技術雑誌（ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ），４：２１４Ｊｏｎｅｓ氏ら、１９８６年，自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），３２１：５５２−５２５Ｖｅｒｈｏｅｙａｎ氏ら、１９８８，科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２３９：１５３４Ｂｅｉｄｌｅｒ氏ら、１９８８年，免疫学雑誌（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１４１：４０５３−４０６０Ｍｏｒｒｉｓｏｎ氏ら、米国科学アカデミー紀要（ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉ），８１：６８５１−６８５５（１９８４年）Ｂｅｔｔｅｒ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），１９８８年，２４０：１０４１−１０４３Ｌｉｕ氏ら、米国科学アカデミー紀要（ＰＮＡＳ），１９８７年，８４：３４３９−３４４３Ｌｉｕ氏ら、免疫学雑誌（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１９８７年，１３９：３５２１−３５２６Ｓｕｎ氏ら、米国科学アカデミー紀要（ＰＮＡＳ），１９８７年，８４：２１４−２１８Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ氏ら、癌研究雑誌（Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．），１９８７年，４７：９９９−１００５Ｗｏｏｄ氏ら、自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），１９８５年，３１４：４４６−４４９Ｓｈａｗ氏ら、米国国立癌研究所雑誌（Ｊ．Ｎａｔｌ．ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔ．），１９８８年，８０：１５５３−１５５９Ｗａｒｄ氏ら、自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），３４１：５４４−５４６（１９８９年）Ｂｉｒｄ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），１９８８年，２４２：４２３−４２６Ｈｕｓｔｏｎ氏ら、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．），米国，１９８８年，８５：５８７９−５８８３Ｔｕｔｔ氏ら、１９９１年，免疫学雑誌（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１４７：６０−６９Ｋｕｆｅｒ氏ら、２００４年，生物技術趨勢（ＴｒｅｎｄｓＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．），２２：２３８−２４４Ｂｏｗｉｅ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２４７：１３０６−１３１０（１９９０年）Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２４４：１０８１−１０８５（１９８９年）Ａｕｓｕｂｅｌ（編著），「分子生物学の現行プロトコール」（ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ），ジョン・ワイリー・アンド・サンズ社（ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｉｎｃ．）（１９９４年）Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓ，Ｅ．Ｆ．Ｆｒｉｔｓｃｈ及びＪ．Ｓａｍｂｒｏｏｋ，「分子クローニング：実験マニュアル」（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ），コールド・スプリング・ハーバー研究所（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒｌａｂｏｒａｔｏｒｙ），コールド・スプリング・ハーバー出版社（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ），Ｎ．Ｙ．（１９８９年）Ｐｅａｒｓｏｎ，分子生物学方法雑誌（ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｌ．Ｂｉｏｌ．），２４３：３０７−３１（１９９４年）Ｇｏｎｎｅｔ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２５６：１４４３−４５（１９９２年）「分子生物学の現行プロトコール」（ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ），ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎ．Ｙ．，６．３．１−６．３．６，１９８９年Ｑｕｅｅｎ氏ら、米国科学アカデミー紀要（ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉ），米国，８６：１００２９−１００３３（１９８９年）「固相ペプチド合成：実践的なアプローチ」（ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ），Ｅ．ＡｔｈｅｒｔｏｎとＲ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ著，ＩＲＬがオックスフォード大学出版局（ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ）に出版（１９８９年）「分子生物学方法」（ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ），第３５巻：ペプチド合成プロトコール（ＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓＰｒｏｔｏｃｏｌｓ），（Ｍ．Ｗ．ＰｅｎｎｉｎｇｔｏｎとＢ．Ｍ．Ｄｕｎｎ編著），第７章「固相ペプチド合成」，第２版，Ｐｉｅｒｃｅケミカル社，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ（１９８４年）。Ｇ．ＢａｒａｎｙとＲ．Ｂ．Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，「ペプチド：解析、合成、生物学」（ＴｈｅＰｅｐｔｉｄｅｓ：Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂｉｏｌｏｇｙ），編者Ｅ．Ｇｒｏｓｓ與Ｊ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ，第１巻及び第２巻，学術出版社（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ），ＮｅｗＹｏｒｋ，（１９８０年），ｐ．３−２５４Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｋｙ，「ペプチド合成原則」（ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，ベルリン（１９８４年）Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎ，自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），２５６：４９５，１９７５年Ｈａｒｌｏｗ，Ｅ．及びＬａｎｅ，Ｄ．，「抗体：実験マニュアル」（Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ），コールド・スプリング・ハーバー研究所出版（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ），コールド・スプリング・ハーバー研究所，Ｎ．Ｙ．，１９８８年Ｓｊｏｌａｎｄｅｒ氏ら、（１９９８年），白血球生物学雑誌（Ｊ．ＬｅｕｋｏｃｙｔｅＢｉｏｌ．），６４：７１３Ｌｏｎｂｅｒｇ氏ら、自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），３６８（６４７４）：８５６−８５９，１９９４年Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．，「実験薬理学のハンドブック」（ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ），１１３：４９−１０１，１９９４年Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．及びＨｕｓｚａｒ，Ｄ．，免疫学国際評論（Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１３：６５−９３，１９９５Ｈａｒｄｉｎｇ，Ｆ．及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．，ニューヨーク科学アカデミー年報（Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．），７６４：５３６−５４６，１９９５年Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙ氏ら、「抗体−抗原相互作用」（Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ＡｎｔｉｇｅｎＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ）、「基礎免疫学」（ＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）に，Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．編著，ＲａｖｅｎＰｒｅｓｓ：ＮｅｗＹｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９８４年）Ｋｕｂｙ，Ｊａｎｉｓ，「免疫学」（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ），Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ及びＣｏｍｐａｎｙ：ＮｅｗＹｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９９２年）Ｂａｌａｓｓｉａｎｏ氏ら、（２００２年），分子医学国際雑誌（Ｉｎｔｅｒｎ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．），１０：７８５−７８８Ｔｈｏｒｎｅ，氏ら、（２００４年），神経科学雑誌（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），１２７：４８１−４９６Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ氏ら、（２００５年），腫瘍学報告（ＯｎｃｏｌｏｇｙＲｅｐｏｒｔｓ），１３：９４３−９４７ＤａＦｏｎｓｅｃａ氏ら、（２００８年），神経外科雑誌（ＳｕｒｇｉｃａｌＮｅｕｒｏｌｏｇｙ），７０：２５９２６７ＤａＦｏｎｓｅｃａ氏ら、（２００８年），実験免疫学と治療学文献（Ａｒｃｈ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｅｘｐ．），５６：２６７−２７６Ｈａｓｈｉｚｕｍｅ氏ら、（２００８年），神経腫瘍学雑誌（Ｎｅｕｒｏｎｃｏｌｏｇｙ），１０：１１２−１２０免疫学方法雑誌（Ｊ．ｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＭｅｔｈｏｄｓ），６５：５５６３，１９８３年「レミントンの製薬科学」（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ）の第２１版，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（"Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ"）Ｓｏｎｄｅｒｓｔｒｕｐ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，免疫病理学セミナー（Ｓｅｍ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．），２５：３５−４５，２００３年Ｎｉｋｕｌａ氏ら、吸入毒物学（Ｉｎｈａｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．）４（１２）：１２３−５３，２０００年

本発明は、抗体またはその抗原結合部分を提供し、それは、糖類抗原に結合する可変領域、これらの抗体の共役バージョン、コードまたは相補性核酸、担体、宿主細胞、組成物、薬剤、装置、遺伝形質転換動物、その関連の遺伝形質転換植物、及びその製造及び使用方法、本明細書で記述と起用されるようなもの、と本発明の属する分野の従来の組み合わせを含む。抗体またはその抗原結合部分は、約１０Ｅ−７Ｍまたはより小さい、約１０Ｅ−８Ｍまたはより小さい、約１０Ｅ−９Ｍまたはより小さい、約１０Ｅ−１０Ｍまたはより小さい、約１０Ｅ−１１Ｍまたはより小さい、あるいは約１０Ｅ−１２Ｍまたはより小さい解離定数（ＫＤ）を有してもよい。抗体またはその抗原結合部分は、ヒト化のものであってもよく、またはキメラのものであってもよい。

一実施例において、本発明は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供する。

別の実施例において、本発明は、ＳＥＱＩＤＮＯ：４に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供する。

さらに別の実施例において、本発明は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域と、ＳＥＱＩＤＮＯ：４に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域とを含む抗体またはその抗原結合部分を提供する。

第４実施例において、本発明は、重鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、前記重鎖領域は、３個の相補性決定領域（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎ（ｓ），ＣＤＲｓ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：５、６及び７に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。一例示的実施例において、重鎖は、さらにリーダー配列とかかるＣＤＲ１との間に介在するフレームワークを含み、それは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８７と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。別の実施例において、重鎖は、さらにかかるＣＤＲ２とＣＤＲ３との間に介在するフレームワークを含み、それは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８９と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。さらに別の例示的実施例において、重鎖は、さらにＳＥＱＩＤＮＯ：１１と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する重鎖のかかるＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークを含み、前記フレームワークは、位置９にあるグリシンを含有し、かつその抗体またはその抗原結合部分は、ＧｌｏｂｏＨのような糖類抗原に結合する。

第５実施例において、本発明は、軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、その軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：８、９及び１０に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。一例示的実施例において、軽鎖は、さらにリーダー配列とかかるＣＤＲ１との間に介在するフレームワークを含み、それは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８８と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。別の例示的実施例において、軽鎖は、さらに軽鎖のかかるＣＤＲ２とＣＤＲ３との間に介在するフレームワークを含み、それは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９０と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。さらに別の例示的実施例において、軽鎖は、さらにＳＥＱＩＤＮＯ：１２と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する軽鎖のかかるＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークを含み、前記フレームワークは、位置１２にあるプロリンを含有し、かつ抗体またはその抗原結合部分は、ＧｌｏｂｏＨに結合する。さらに別の例示的実施例において、軽鎖は、さらにＳＥＱＩＤＮＯ：１２と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する軽鎖のかかるＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークを含み、前記フレームワークは、位置１３にあるトリプトファンを含有し、かつ抗体またはその抗原結合部分は、ＧｌｏｂｏＨのような糖類抗原に結合する。

第６実施例において、本発明は、重鎖領域と軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、前記重鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：５、６及び７に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、かつその軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：８、９及び１０に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

いくつの実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、重鎖領域を含み、前記重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：５、６または７から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。他の実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、軽鎖領域を含み、その軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：８、９または１０から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。

本発明は、抗体またはその抗原結合部分についても、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域を含む。

本発明は、抗体またはその抗原結合部分に関しても、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域を含む。

本発明は、抗体またはその抗原結合部分に関しても、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域と、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域とを含む。

一例示的実施例において、重鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、その重鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５、１６及び１７に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。別の例示的実施例において、軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、その軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１８、１９及び２０に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

別の例示的実施例において、重鎖領域と軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、その重鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５、１６及び１７に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、かつその軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１８、１９及び２０に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

いくつの実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、重鎖領域を含み、その重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５、１６または１７から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。他の実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、軽鎖領域を含み、その軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１８、１９または２０から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。

本発明の一実施例に係る抗体またはその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域を含む。

本発明の別の実施例に係る抗体またはその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：２２に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域を含む。

本発明の別の実施例に係る抗体またはその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域と、ＳＥＱＩＤＮＯ：２２に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域とを含む。

一例示的実施例において、重鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、前記重鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２３、２４及び２５に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。別の例示的実施例において、軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、前記軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２６、２７及び２８に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

別の例示的実施例において、重鎖領域と軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、その重鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２３、２４及び２５に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、かつその軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２６、２７及び２８に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

いくつの実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、重鎖領域を含み、前記重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：２３、２４または２５から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。他の実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、軽鎖領域を含み、その軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：２６、２７または２８から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。

本発明は、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域を含む抗体またはその抗原結合部分も開示する。

本発明は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域を含む抗体またはその抗原結合部分も開示する。

本発明は、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域と、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域とを含む抗体またはその抗原結合部分も開示する。

一例示的実施例において、重鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、前記重鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：３１、３２及び３３に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。別の例示的実施例において、軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、前記軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：３４、３５及び３６に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

別の例示的実施例において、重鎖領域と軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、その重鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：３１、３２及び３３に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、かつその軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：３４、３５及び３６に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

いくつの実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、重鎖領域を含み、前記重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３１、３２または３３から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。他の実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、軽鎖領域を含み、その軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３４、３５または３６から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。

本発明の一実施例に係る抗体またはその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３７に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域を含む。

本発明の別の実施例に係る抗体またはその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域を含む。

本発明の別の実施例に提供される抗体またはその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３７に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域と、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域とを含む。

一例示的実施例において、重鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、前記重鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９、４０及び４１に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。別の例示的実施例において、軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を開示し、前記軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：４２、４３及び４４に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

別の例示的実施例において、重鎖領域と軽鎖領域を含む抗体またはその抗原結合部分を提供し、その重鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９、４０及び４１に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、かつその軽鎖領域は、３個のＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を含有し、それらは、それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：４２、４３及び４４に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

いくつの実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、重鎖領域を含み、前記重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９、４０または４１から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。他の実施例において、提供される抗体またはその抗原結合部分は、軽鎖領域を含み、その軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：４２、４３または４４から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含有する。

本発明は、本明細書で記述されるような抗体またはその抗原結合部分と、少なくとも１個の薬学的に許容可能な担体とを含む薬学的組成物を提供する。

本発明は、ＧｌｏｂｏＨ発現の癌細胞を抑制するための方法も提供し、その方法は、需要のある被験者に対し、本明細書で提供されるような抗体またはその抗原結合部分の有効量を投与することにより、そのＧｌｏｂｏＨ発現の癌細胞が抑制されることを含む。

本発明は、寄託番号ＰＴＡ−１２１１３８でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，ＡＴＣＣ）と寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０１で台湾財団法人食品工業発展研究所（ＦＩＲＤＩ）に寄託され、２Ｃ２と指定された、３Ｄ７（寄託番号ＰＴＡ−１２１３１０でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクションと寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０３で財団法人食品工業発展研究所に寄託され）と指定された、７Ａ１１（寄託番号ＰＴＡ−１２１３１１でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション及び寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０４で財団法人食品工業発展研究所に寄託され）と指定された、２Ｆ８（寄託番号ＰＴＡ−１２１１３７でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション及び寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０２で財団法人食品工業発展研究所に寄託され）と指定された、及び１Ｅ１（寄託番号ＰＴＡ−１２１３１２でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション及び寄託番号ＢＣＲＣ９６０５００で財団法人食品工業発展研究所に寄託され）と指定されたハイブリドーマクローン（ｃｌｏｎｅｓ）、及びそれによって産生される抗体と抗原結合部分も提供する。

ＰＢＳ、ＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍＡｂｓ、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂｓとＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂの、マウス中の膵腺癌（ＨＰＡＣ）体積に対する効果を示す線グラフである。正常食塩水とＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂｓの異なる用量の、マウス中の乳癌（ＭＣＦ７）体積に対する効果を示す線グラフである。図３Ａ〜図３Ｆは、それぞれＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ（図３Ａ）、ＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂ（図３Ｂ）、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ（図３Ｃ）、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｆ８ｍＡｂ（図３Ｄ）、ＧｌｏｂｏＨ−１Ｅ１ｍＡｂ（図３Ｅ）及びＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍＡｂ（図３Ｆ）と、種々の糖類抗原との結合親和性を示す棒グラフである。図３Ａ〜図３Ｆは、それぞれＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ（図３Ａ）、ＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂ（図３Ｂ）、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ（図３Ｃ）、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｆ８ｍＡｂ（図３Ｄ）、ＧｌｏｂｏＨ−１Ｅ１ｍＡｂ（図３Ｅ）及びＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍＡｂ（図３Ｆ）と、種々の糖類抗原との結合親和性を示す棒グラフである。図３Ａ〜図３Ｆは、それぞれＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ（図３Ａ）、ＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂ（図３Ｂ）、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ（図３Ｃ）、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｆ８ｍＡｂ（図３Ｄ）、ＧｌｏｂｏＨ−１Ｅ１ｍＡｂ（図３Ｅ）及びＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍＡｂ（図３Ｆ）と、種々の糖類抗原との結合親和性を示す棒グラフである。図３Ａ〜図３Ｆは、それぞれＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ（図３Ａ）、ＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂ（図３Ｂ）、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ（図３Ｃ）、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｆ８ｍＡｂ（図３Ｄ）、ＧｌｏｂｏＨ−１Ｅ１ｍＡｂ（図３Ｅ）及びＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍＡｂ（図３Ｆ）と、種々の糖類抗原との結合親和性を示す棒グラフである。図３Ａ〜図３Ｆは、それぞれＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ（図３Ａ）、ＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂ（図３Ｂ）、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ（図３Ｃ）、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｆ８ｍＡｂ（図３Ｄ）、ＧｌｏｂｏＨ−１Ｅ１ｍＡｂ（図３Ｅ）及びＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍＡｂ（図３Ｆ）と、種々の糖類抗原との結合親和性を示す棒グラフである。図３Ａ〜図３Ｆは、それぞれＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ（図３Ａ）、ＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂ（図３Ｂ）、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ（図３Ｃ）、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｆ８ｍＡｂ（図３Ｄ）、ＧｌｏｂｏＨ−１Ｅ１ｍＡｂ（図３Ｅ）及びＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍＡｂ（図３Ｆ）と、種々の糖類抗原との結合親和性を示す棒グラフである。

本明細書で使用されるな冠詞「１つ」は、冠詞の文法対象の１個または１個以上（即ち、少なくとも１個）をいい得る。実例を挙げると、「１つの構成要素」は、１個の構成要素または１個以上の構成要素を意味する。

本明細書で使用される「有効量」は、癌の症状と徴候の低減に十分であるワクチンまたは薬学的組成物の用量を指し、癌の症状と徴候は、例えば、体重軽減、痛み、及び臨床的にまたは種々の成像装置によって放射線学的に検出される触知可能な腫瘤を含む触知可能な腫瘤が挙げられる。用語「有効量」と「治療有効量」は、互換的に使用される。

用語「被験者」は、癌を有する脊椎動物又は癌治療の必要があると見なされる脊椎動物をいい得る。被験者としては、すべての温血動物（例えば、霊長類の動物、より好ましくはヒトなどのような哺乳動物）を含む。非ヒト霊長類の動物は、同様に被験者である。用語「被験者」は、飼い慣らされた動物（例えば、ネコ、イヌなど）、家畜（例えば、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジやヤギなど）及び実験動物（例えば、マウス、ウサギ、ラット、アレチネズミやモルモットなど）を含む。従って、獣医学的用途と医療用薬剤は、本明細書で企図される。

本明細書のすべての数値は、近似値であり、かつ「約」という単語によって修飾されている。

本発明は、癌細胞の治療または抑制に用いる薬学的組成物と方法を提供する。薬学的組成物は、糖類抗原を認識する抗体を含み、それは、マウスモノクローナル抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、または前述した任意の１つの抗原結合部分を含む。これらの抗体（またはその抗原結合部分）は、糖類抗原を中和することができ、及び／または癌細胞を抑制することができる。このため、本発明の抗体またはその抗原結合部分は、癌細胞の治療または抑制に使用される。

本発明の抗体は、重鎖または軽鎖、あるいはそのリガンド結合部分を含む少なくとも１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有する任意のタンパクまたはペプチドであり、それは、本明細書で記述されるように、２Ｃ２（寄託番号ＰＴＡ−１２１１３８でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクションと寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０１で財団法人食品工業発展研究所に寄託され）と指定されたハイブリドーマ、３Ｄ７（寄託番号ＰＴＡ−１２１３１０でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクションと寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０３で財団法人食品工業発展研究所に寄託され）と指定されたハイブリドーマ、７Ａ１１（寄託番号ＰＴＡ−１２１３１１でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション及び寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０４で財団法人食品工業発展研究所に寄託され）と指定されたハイブリドーマ、２Ｆ８（寄託番号ＰＴＡ−１２１１３７でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション及び寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０２で財団法人食品工業発展研究所に寄託され）と指定されたハイブリドーマ、または１Ｅ１（寄託番号ＰＴＡ−１２１３１２でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション及び寄託番号ＢＣＲＣ９６０５００で財団法人食品工業発展研究所に寄託され）と指定されたハイブリドーマによって産生される抗体から由来する。抗体は、抗体断片、抗体変異体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体及び組換え抗体などを含む。抗体は、マウス、ウサギまたはヒトに産生される。

本発明の抗体は、本発明の抗体によって産生されるキメラのまたはヒト化モノクローナル抗体も含む。

従って、本発明の抗癌抗体は、非齧歯類源の重鎖または軽鎖の可変領域、重鎖または軽鎖定常領域、フレームワーク領域、または任意のその部分の組み合わせを含み、好ましくはヒト源であり、それは、本発明の抗体に併合される。

本発明の抗体は、生体外、本来の位置及び／または生体内での少なくとも１個のＧｌｏｂｏ−Ｈ発現の癌細胞活性を、調節、減少、拮抗、軽減、緩和、ブロッキング、抑制、消滅及び／または干渉することができる。

用語「抗体」は、さらに抗体、消化断片、特異の部分とその変異体を包含することを意図し、それは、抗体模倣物を含むか、または模倣抗癌抗体またはその特異的断片あるいは部分の構造及び／または機能的抗体の部分（それは、単鎖抗体及び断片を含む）を含み、各個は、少なくとも１個の本発明の抗癌抗体から誘導するＣＤＲを含有する。機能的断片は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ発現の癌細胞に結合する抗原結合断片を含む。例えば、限定するわけではないが、Ｆａｂ（例えば、パパイン消化による）、Ｆａｂ’（例えば、ペプシン消化かつ部分の還元による）、Ｆ（ａｂ’）２（例えば、ペプシン消化による）、ｆａｃｂ（例えば、プラスミン消化による）、ｐＦｃ’（例えば、ペプシンまたはプラスミン消化による）、Ｆｄ（例えば、ペプシン消化、部分の還元及び再凝集による）、ＦｖまたはｓｃＦｖ（例えば、分子生物学的技術による）断片を含むＧｌｏｂｏ−Ｈ発現の癌細胞またはその部分に結合可能な抗体断片は、本発明により包含される（例えば、Ｃｏｌｌｉｇａｎ，免疫学（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）、同上を参照されたい）。

本明細書で使用されるような２Ｃ２は、ハイブリドーマクローンまたは相応のハイブリドーマクローンによって産生される抗体をいい得る。

抗体の抗原結合部分は、糖類抗原（例えば、ＧｌｏｂｏＨ、ＳＳＥＡ−３またはＳＳＥＡ−４）に特異的に結合する抗体の一部を含んでもよい。

本発明のヒト化抗体は、本来の結合能力を依然として維持しながら、前記抗体をより厳密にヒト抗体に類似させるために、非抗原結合領域（及び／または前記抗原結合領域）においてアミノ酸配列が改変された非ヒト種由来の抗体である。

ヒト化抗体は、抗原結合に直接関与しない可変領域の配列を、ヒト可変領域由来の等価配列と置換することで産生することができる。これらの方法には、重鎖または軽鎖の少なくとも１個の可変領域全体またはその一部をコードする核酸配列を単離、操作、及び発現させる工程を含む。このような核酸の原料は、当該技術分野における通常の知識を有する者にとって周知である。次に、ヒト化抗体、またはその断片をコードする組み換えＤＮＡは、適切な発現担体にクローニングすることができる。

抗体の軽鎖または重鎖の可変領域は、ＣＤＲと呼ばれる３個の高度変異領域で分断されたフレームワーク領域を含む。一実施例において、ヒト化抗体は、非ヒト種由来の１個の、２個のまたはすべてのＣＤＲ（ｓ）、及びヒト免疫グロブリン分子由来の１個の、２個のまたはすべて３個のフレームワーク領域を有する非ヒト種由来の抗体分子である。

本発明の１つの態様によれば、ＣＤＲｓとフレームワーク残基の位置が、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，氏ら、（１９９１年）「免疫学的に興味のあるタンパク質の配列」（ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ），第５版，米国，保健福祉省（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅａｌｔｈａｎｄＨｕｍａｎＳｅｒｖｉｃｅｓ），ＮＩＨ出版Ｎｏ．９１−３２４２に開示される方法によって測定される。本発明の別の態様によれば、抗体またはその抗原結合部分は、下記の構造を有してもよい。

リーダー配列−ＦＷ１−ＣＤＲ１−ＦＷ２−ＣＤＲ２−ＦＷ３−ＣＤＲ３−、
その中、フレームワーク領域ＦＷ１、ＦＷ２、ＦＷ３及びＣＤＲｓ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３）は、表１に開示するアミノ酸配列を有する。

本発明のヒト化抗体は、当該技術分野で周知の方法により製造することができる。例えば、非ヒト（例えば、齧歯類）抗体が得られたら、可変領域の配列を決定することができ、かつＣＤＲｓ及びフレームワーク残基の位置が測定される。Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．氏ら、（１９９１年）「免疫学的に興味のあるタンパク質之配列」，第５版，米国，保健福祉省，ＮＩＨ出版Ｎｏ．９１−３２４２。Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．氏ら、（１９８７年），分子生物学雑誌（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．），１９６：９０１−９１７に開示されるように、軽鎖及び重鎖の可変領域をコードするＤＮＡは、選択的に、相応の定常領域に接続することができ、かつ次に、適切な発現担体にサブクローニングすることができる。ＣＤＲ移植抗体分子は、ＣＤＲ移植またはＣＤＲ置換により産生することができる。免疫グロブリン鎖の個の、２個の、またはすべてのＣＤＲ（ｓ）を置換することができる。例えば、特定の抗体のすべてのＣＤＲｓが非ヒト動物（例えば、マウスの表１に示したＣＤＲｓなど）の少なくとも一部から由来するか、またはＣＤＲｓの一部のみを置換することもできる。所定の糖類抗原（例えば、ＧｌｏｂｏＨ）に抗体を結合させるために必要なＣＤＲｓを維持すればよい。Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，１９８５年，科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２２９：１２０２−１２０７。Ｏｉ氏ら、１９８６年，生物技術雑誌（ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ），４：２１４。米国特許第（ＰａｔｅｎｔＮｏｓ．）５，５８５，０８９号、第５，２２５，５３９号、第５，６９３，７６１号及び５，６９３，７６２号。ＥＰ５１９５９６。Ｊｏｎｅｓ氏ら、１９８６年，自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），３２１：５５２−５２５。Ｖｅｒｈｏｅｙａｎ氏ら、１９８８，科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２３９：１５３４。Ｂｅｉｄｌｅｒ氏ら、１９８８年，免疫学雑誌（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１４１：４０５３−４０６０。

ヒト、ウサギ、ヒツジ、イヌ、ネコ、雌ウシ、ウマ、ヤギ、ブタ、サル、エイプ、ゴリラ、チンパンジー、アヒル、ガチョウ、ニワトリ、両生類、爬虫類及び他の動物を含む少なくとも１種類の異なる種の配列によって置換された他の領域と、本明細書で開示されるような１個のまたは２個の可変領域を含む抗体またはその抗原結合部分も本発明に含まれる。

キメラ抗体とは、異なる部分が異なる動物種から由来する分子である。例えば、抗体には齧歯類ｍＡｂ由来の可変領域及びヒト免疫グロブリン定常領域が含まれる可能性がある。キメラ抗体は、組み換えＤＮＡ技術により産生することができる。Ｍｏｒｒｉｓｏｎ氏ら、米国科学アカデミー紀要（ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉ），８１：６８５１−６８５５（１９８４年）。例えば、齧歯類（または他の種）の抗体分子をコードする遺伝子は、制限酵素により消化して、前記齧歯類Ｆｃをコードする領域を除去し、かつヒトＦｃの定常領域をコードする遺伝子の等価部分を次に前記組み換えＤＮＡ分子に置換する。キメラ抗体は、齧歯類Ｖ領域をコードするＤＮＡを前記ヒト定常領域をコードするＤＮＡに接合する組み換えＤＮＡ技術により作成することもできる。Ｂｅｔｔｅｒ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），１９８８年，２４０：１０４１−１０４３。Ｌｉｕ氏ら、米国科学アカデミー紀要（ＰＮＡＳ），１９８７年，８４：３４３９−３４４３。Ｌｉｕ氏ら、免疫学雑誌（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１９８７年，１３９：３５２１−３５２６。Ｓｕｎ氏ら、米国科学アカデミー紀要（ＰＮＡＳ），１９８７年，８４：２１４−２１８。Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ氏ら、癌研究雑誌（Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．），１９８７年，４７：９９９−１００５。Ｗｏｏｄ氏ら、自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），１９８５年，３１４：４４６−４４９。Ｓｈａｗ氏ら、米国国立癌研究所雑誌（Ｊ．Ｎａｔｌ．ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔ．），１９８８年，８０：１５５３−１５５９。国際特許公開第ＷＯ１９８７００２６７１号及びＷＯ８６／０１５３３号。歐洲特許出願第１８４，１８７号、第１７１，４９６号、第１２５，０２３号及び第１７３，４９４号。米国特許第４，８１６，５６７号。

抗体は全長であってもよいか、または、限定するわけではないが、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）’、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、二価ｓｃＦｖ（ｂｉ−ｓｃＦｖ）、三価ｓｃＦｖ（ｔｒｉ−ｓｃＦｖ）、Ｆｄ、ｄＡｂ断片（例えば、Ｗａｒｄ氏ら、自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），３４１：５４４−５４６（１９８９年））、単離ＣＤＲ、二量体抗体、三量体抗体、四量体抗体、線形抗体、単鎖抗体分子、及び抗体断片から形成された多重特異的抗体を含む抗原結合部分を有する抗体の断片（または複数個の断）を含む可能性がある。組み換え法により抗体断片を付着することで産生した単鎖抗体、または合成リンカーも本発明に含まれる。Ｂｉｒｄ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），１９８８年，２４２：４２３−４２６。Ｈｕｓｔｏｎ氏ら、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．），米国，１９８８年，８５：５８７９−５８８３。

本発明の抗体またはその抗原結合部分は、一重特異的、二重特異的、または多重特異的とすることができる。多重特異的または二重特異的抗体またはその断片は、１個の標的糖類（例えば、ＧｌｏｂｏＨ）の異なるエピトープに対して特異的であるか、または１個以上の標的糖類に対して特異的抗原結合ドメイン（例えば、ＧｌｏｂｏＨ、ＳＳＥＡ−３とＳＳＥＡ−４に対して特異的抗原結合ドメイン）を含む可能性がある。一実施例において、多重特異的抗体またはその抗原結合部分が少なくとも２種類の異なる可変領域を含み、各可変領域は、別々の糖類抗原または同一の糖類抗原の異なるエピトープに特異的に結合することができる。Ｔｕｔｔ氏ら、１９９１年，免疫学雑誌（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１４７：６０−６９。Ｋｕｆｅｒ氏ら、２００４年，生物技術趨勢（ＴｒｅｎｄｓＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．），２２：２３８−２４４。本発明の抗体は別の機能的分子、例えば、別のペプチドまたはタンパク質に連結するか、または同時に発現させることができる。例えば、抗体またはその断片は、二重特異的または第二の結合特異性を有する多重特異的抗体を産生する別の抗体またはその断片などの、一つまたは複数の他の分子実体に（例えば、化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合性会合または他の方式により）機能的に結合させることができる。

すべての抗体アイソタイプが本発明に含まれ、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、ＩｇＭ、ＩｇＡ（ＩｇＡ１、ＩｇＡ２）、ＩｇＤ、またはＩｇＥを含む（すべての型とサブ型が本発明に含まれる）。抗体またはその抗原結合部分は哺乳類（例えば、マウス、ヒト）の抗体またはその抗原結合部分とすることができる。抗体の軽鎖はκまたはλ型とすることができる。

本発明の抗体またはその抗原結合部分の可変領域は、非ヒトまたはヒト原料由来のものである可能性がある。本発明の抗体またはその抗原結合部分のフレームワークは、ヒト、ヒト化、非ヒト（例えば、ヒトの抗原性を低下させるように修飾した齧歯類フレームワーク）、または合成フレームワーク（例えば、コンセンサスフレームワーク）とすることができる。

一実施例において、本発明の抗体またはその抗原結合部分は、少なくとも１個の重鎖の可変領域及び／または少なくとも１個の軽鎖の可変領域を含む。

本発明の抗体またはその抗原結合部分は、約１０Ｅ−７Ｍより小さい、約１０Ｅ−８Ｍより小さい、約１０Ｅ−９Ｍより小さい、約１０Ｅ−１０Ｍより小さい、約１０Ｅ−１１Ｍより小さい、あるいは約１０Ｅ−１２Ｍより小さい解離定数（ＫＤ）でＧｌｏｂｏＨに特異的に結合する。一実施例において、抗体またはその抗原結合部分は、１〜１０×１０Ｅ−９またはそれより小さい解離定数（ＫＤ）を有する。別の実施例において、Ｋｄは、表面プラズモン共鳴法により測定される。

抗体は、クローン２Ｃ２によって産生される抗体の可変重鎖領域と可変軽鎖領域と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源である可変重鎖領域と可変軽鎖領域を含み、なおかつ糖類抗原（例えば、ＧｌｏｂｏＨ）に結合することもできる。同源性は、アミノ酸またはヌクレオチド配列レベルで発現することが可能である。

いくつの実施例において、抗体またはその抗原結合部分について、例えば、ハイブリドーマ２Ｃ２、ハイブリドーマ３Ｄ７、ハイブリドーマ７Ａ１１、ハイブリドーマ２Ｆ８及びハイブリドーマ１Ｅ１によって産生される抗体の可変重鎖及び／または可変軽鎖を、表１に示す。

関連の実施例において、抗体またはその抗原結合部分は、例えば、ハイブリドーマ２Ｃ２、ハイブリドーマ３Ｄ７、ハイブリドーマ７Ａ１１、ハイブリドーマ２Ｆ８及びハイブリドーマ１Ｅ１によって産生される抗体の可変重鎖のＣＤＲｓ及び／または可変軽鎖のＣＤＲｓを含有する。これらのハイブリドーマクローンから由来する可変重鎖と可変軽鎖のＣＤＲｓと、フレームワークとを、表１に示す。

本発明は、特異的に糖類抗原に結合可能な本発明の抗体またはその抗原結合部分をコードする核酸も含む。一実施例において、糖類抗原はＧｌｏｂｏＨである。別の実施例において、糖類抗原はＳＳＥＡ−３である。さらに別の実施例において、糖類抗原はＳＳＥＡ−４である。核酸は、一細胞に発現されて本発明の抗体またはその抗原結合部分を産生する。

特定の実施例において、本発明の抗体またはその抗原結合部分は、下記のａ）〜ｅ）のいずれか１個と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する可変重鎖領域を含む。

ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３（ハイブリドーマ２Ｃ２）、
ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１３（ハイブリドーマ３Ｄ７）、
ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２１（ハイブリドーマ７Ａ１１）、
ｄ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２９（ハイブリドーマ２Ｆ８）、または
ｅ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３７（ハイブリドーマ１Ｅ１）。

特定の実施例において、本発明の抗体またはその抗原結合部分は、下記のａ）〜ｅ）のいずれか１個と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する可変軽鎖領域を含む。

ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：４（ハイブリドーマ２Ｃ２）、
ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１４（ハイブリドーマ３Ｄ７）、
ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２２（ハイブリドーマ７Ａ１１）、
ｄ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３０（ハイブリドーマ２Ｆ８）、または
ｅ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３８（ハイブリドーマ１Ｅ１）。

特定の実施例において、抗体またはその抗原結合部分の可変重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有し、かつ抗体またはその抗原結合部分の可変軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：４と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する。

特定の実施例において、抗体またはその抗原結合部分の可変重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有し、かつ抗体またはその抗原結合部分の可変軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する。

特定の実施例において、抗体またはその抗原結合部分の可変重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有し、かつ抗体またはその抗原結合部分の可変軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：２２と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する。

特定の実施例において、抗体またはその抗原結合部分の可変重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有し、かつ抗体またはその抗原結合部分の可変軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する。

特定の実施例において、抗体またはその抗原結合部分の可変重鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３７と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有し、かつ抗体またはその抗原結合部分の可変軽鎖領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する。

抗体またはその抗原結合部分の可変重鎖領域は、１個の、２個の、３個のまたはより多いＣＤＲ（ｓ）を含有してもよく、それらは、下記のａ）〜ｅ）のいずれか１個と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

ａ）ハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：５、６及び７）、
ｂ）ハイブリドーマ３Ｄ７によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５、１６及び１７）、
ｃ）ハイブリドーマ７Ａ１１によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：２３、２４及び２５）、
ｄ）ハイブリドーマ２Ｆ８によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３１、３２及び３３）、または
ｅ）ハイブリドーマ１Ｅ１によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮｏｓ：３９、４０及び４１）。

抗体またはその抗原結合部分の可変軽鎖領域は、１個の、２個の、３個のまたはより多いＣＤＲ（ｓ）を含有してもよく、それらは、下記のａ）〜ｅ）のいずれか１個と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

ａ）ハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：８、９及び１０）、
ｂ）ハイブリドーマ３Ｄ７によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１８、１９及び２０）、
ｃ）ハイブリドーマ７Ａ１１によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：２６、２７及び２８）、
ｄ）ハイブリドーマ２Ｆ８によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３４、３５及び３６）、または
ｅ）ハイブリドーマ１Ｅ１によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮｏｓ：４２、４３及び４４）。

抗体またはその抗原結合部分の可変重鎖領域は、１個の、２個の、３個のまたはより多いＣＤＲ（ｓ）を含有してもよく、それらは、ハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：５、６及び７）と、またはハイブリドーマ３Ｄ７によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５、１６及び１７）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、かつ抗体またはその抗原結合部分の可変軽鎖領域は、１個の、２個の、３個のまたはより多いＣＤＲ（ｓ）を含有してもよく、それらは、ハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：８、９及び１０）と、またはハイブリドーマ３Ｄ７によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１８、１９及び２０）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

一実施例において、抗体またはその抗原結合部分は、さらにＳＥＱＩＤＮＯ：８３（２Ｃ２抗体の重鎖フレームワーク１）と、またはＳＥＱＩＤＮＯ：８７（ヒト化２Ｃ２抗体の重鎖フレームワーク１、表１を参照）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるフレームワークを含み、そのフレームワークは、リーダー配列とハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲ１との間に介在する。別の実施例において、抗体またはその抗原結合部分は、さらにＳＥＱＩＤＮＯ：８４（２Ｃ２抗体の軽鎖フレームワーク１）と、またはＳＥＱＩＤＮＯ：８８（ヒト化２Ｃ２抗体の軽鎖フレームワーク１、表１を参照）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるフレームワークを含み、かつかかるフレームワークは、リーダー配列とハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲ１との間に介在する。

一実施例において、抗体またはその抗原結合部分は、さらにハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークを含み、そのフレームワークは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１（表１中の重鎖フレームワーク２）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源である。例示的実施例において、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する可変重鎖領域のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークは、位置９にあるグリシンを含有する。ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸の位置は、以下のように記述される。

別の実施例において、抗体またはその抗原結合部分は、さらにハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークを含み、そのフレームワークは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２（表１中の軽鎖フレームワーク２）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源である。一例示的実施例において、ハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークは、位置１２にあるプロリンを含有する。別の例示的実施例において、ハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークは、位置１３にあるトリプトファンを含有する。さらに別の例示的実施例において、ハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークは、位置１２にあるプロリンと位置１３にあるトリプトファンを含有する。ＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸の位置は、以下のように記述される。

一実施例において、抗体またはその抗原結合部分は、さらにＳＥＱＩＤＮＯ：８５（重鎖フレームワーク３）と、またはＳＥＱＩＤＮＯ：８９（ヒト化抗体の重鎖フレームワーク３、表１を参照）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるフレームワークを含み、前記フレームワークは、ハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲ２とＣＤＲ３との間に介在する。別の実施例において、抗体またはその抗原結合部分は、さらにＳＥＱＩＤＮＯ：８６（軽鎖フレームワーク３）と、またはＳＥＱＩＤＮＯ：９０（ヒト化抗体の軽鎖フレームワーク３、表１を参照）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるフレームワークを含み、かつかかるフレームワークは、ハイブリドーマ２Ｃ２によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲ２とＣＤＲ３との間に介在する。

抗体またはその抗原結合部分の可変重鎖領域は、１個の、２個の、３個のまたはより多いＣＤＲ（ｓ）を含有してもよく、それらは、ハイブリドーマ７Ａ１１によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：２３、２４及び２５）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、かつ抗体またはその抗原結合部分の可変軽鎖領域は、１個の、２個の、３個のまたはより多いＣＤＲ（ｓ）を含有してもよく、それらは、ハイブリドーマ７Ａ１１によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：２６、２７及び２８）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

抗体またはその抗原結合部分の可変重鎖領域は、１個の、２個の、３個のまたはより多いＣＤＲ（ｓ）を含有してもよく、それらは、ハイブリドーマ２Ｆ８によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３１、３２及び３３）と、またはハイブリドーマ１Ｅ１によって産生される抗体の可変重鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９、４０及び４１）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、かつ抗体またはその抗原結合部分の可変軽鎖領域は、１個の、２個の、３個のまたはより多いＣＤＲ（ｓ）を含有してもよく、それらは、ハイブリドーマ２Ｆ８によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３４、３５及び３６）と、またはハイブリドーマ１Ｅ１によって産生される抗体の可変軽鎖領域のＣＤＲｓ（ＳＥＱＩＤＮＯｓ：４２、４３及び４４）と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、約７０％、約７５％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％同源であるアミノ酸配列を有する。

特定の実施例において、表１中の可変領域に対応する可変領域は、配列変異を有する。例えば、重鎖の可変領域が挙げられ、その中に１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個または８個の残基、あるいは４０％より小さい、約３０％より小さい、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、約９％、約８％、約７％、約６％、約５％、約４％、約３％、約２％または約１％のアミノ酸残基が置換または除去されるが、実質的に同一の免疫特性を保有しており、それを糖類抗原に結合することを含むが、これに限定されない。

特定の実施例において、表１中のＣＤＲｓに相応するＣＤＲｓは、配列変異を有する。例えば、ＣＤＲｓが挙げられ、その中に１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個または８個の残基、あるいあはＣＤＲ中の２０％より小さい、３０％より小さい、または約４０％より小さい総残基が置換または除去され、それは糖類抗原に結合する抗体（またはその抗原結合部分）に存在することができる。

抗体またはその抗原結合部分は、ペプチドであってもよい。このようなペプチドは、ペプチドの変異体、類似体、オルソログ、ホモログ及び誘導体を含んでもよく、それは、例えば、糖類抗原の結合のような生物活性が表現される。ペプチドは、一つまたは複数のアミノ酸の類似体（それは、例えば、非天然存在のアミノ酸、非関連生物系においてのみ天然に存在するアミノ酸、哺乳類系由来の修飾アミノ酸などを含む）、置換結合（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄｌｉｎｋａｇｅｓ）を有するペプチド、及び当該技術分野における従来の他の修飾体を含んでもよい。

本発明の範疇にも入る抗体またはその抗原結合部分は、その中に特異的アミノ酸が既に置換、除去または添加された。例示的実施例において、これらの置換は、ペプチドの生物特性に対する実質的な効果、例えば、結合親和性を有しない。別の例示的実施例において、抗体は、フレームワーク領域におけるアミノ酸置換基を有してもよく、このようにして前記抗体の抗原に対する結合親和性を増大させる。さらに別の例示的実施例において、選定された受容体のフレームワーク残基の少数を相応する供与体アミノ酸で置換することができる。供与体フレームワークは、成熟または生殖系列のヒト抗体フレームワーク配列または相応の配列である可能性がある。表現型サイレントアミノ酸置換を行う方法に関するガイドラインは、Ｂｏｗｉｅ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２４７：１３０６−１３１０（１９９０年）、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２４４：１０８１−１０８５（１９８９年）、Ａｕｓｕｂｅｌ（編著），「分子生物学の現行プロトコール」（ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ），ジョン・ワイリー・アンド・サンズ社（ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｉｎｃ．）（１９９４年）、Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓ，Ｅ．Ｆ．Ｆｒｉｔｓｃｈ及びＪ．Ｓａｍｂｒｏｏｋ，「分子クローニング：実験マニュアル」（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ），コールド・スプリング・ハーバー研究所（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒｌａｂｏｒａｔｏｒｙ），コールド・スプリング・ハーバー出版社（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ），Ｎ．Ｙ．（１９８９年）、Ｐｅａｒｓｏｎ，分子生物学方法雑誌（ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｌ．Ｂｉｏｌ．），２４３：３０７−３１（１９９４年）、Ｇｏｎｎｅｔ氏ら、科学雑誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２５６：１４４３−４５（１９９２年）で提供されている。

抗体またはその抗原結合部分は、別の機能分子に誘導体化または連結することができる。例えば、抗体は、別の抗体、検出可能な試薬、細胞毒性試薬、医薬試薬、別の分子（ストレプトアビジンのコア領域またはポリヒスチジンタグなど）との媒介に関連するタンパクまたはペプチド、アミノ酸リンカー、シグナル配列、免疫原性担体、またはグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ−Ｓ−ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）、ヒスチジンタグ、及びブドウ球菌プロテインＡなどのタンパク質精製に有用なリガンドなどの、一つまたは複数の他の分子実体に、（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有相互作用などにより）機能的に結合することができる。１種類の誘導体化タンパク質は、（同じ種類または異なる種類の）２個のまたはより多いタンパク質を架橋することで産生される。適切な架橋剤には、適切なスペーサー（例えば、Ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ｍ−ｍａｌｅｉｍｉｄｏｂｅｎｚｏｙｌ−Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅｅｓｔｅｒ））またはホモ二官能性（例えば、ジスクシンイミジルスベレート（ｄｉｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌｓｕｂｅｒａｔｅ））により分かれた２つの異なる反応基群を有する、ヘテロ二官能性の架橋剤を含む。このようなリンカーは、Ｐｉｅｒｃｅケミカル社，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬから入手可能である。タンパク質を誘導体化（または標識）することのできる、有用な検出可能試薬には、蛍光化合物、種々の酵素、補欠分子族、発光材料、生物発光材料、及び放射性材料を含む。限定されない典型的な蛍光検出可能試薬には、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、及びフィコエリトリンを含む。タンパク質または抗体も、アルカリホスファターゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、アセチルコリンエステラーゼ、グルコースオキシダーゼなどの検出可能な酵素を用いて誘導体化することができる。タンパク質は、補欠分子族（例えば、ストレプトアビジン／ビオチン及び抗ビオチンタンパク／ビオチン）を用いて誘導体化することができる。

本発明の抗体またはその抗原結合部分の機能的に活性な変異体をコードする核酸分子も本発明に含まれる。これらの核酸分子は、中程度にストリンジェント、高度にストリンジェント、または非常に高度にストリンジェントな条件下、本発明の抗体またはその抗原結合部分のいずれか１個をコードする核酸とハイブリダイズすることができる。ハイブリダイゼーション反応を行うためのガイドラインは、この参照により本明細書に組み込まれる「分子生物学の現行プロトコール」（ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ），ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎ．Ｙ．，６．３．１−６．３．６，１９８９年に見ることができる。本明細書に言及されている特定のハイブリダイゼーション条件は、１）中程度にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件：約４５℃で６ＸＳＳＣ、続いて６０℃にて０．２ＸＳＳＣ、０．１％ＳＤＳで１回若しくはそれ以上洗浄、２）高度にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件：約４５℃で６ＸＳＳＣ、続いて６５℃にて０．２ＸＳＳＣ、０．１％ＳＤＳで１回若しくはそれ以上洗浄、及び３）非常に高度にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件：６５℃にて０．５Ｍリン酸ナトリウム、７％ＳＤＳ、続いて６５℃にて０．２ＸＳＳＣ、０．１％ＳＤＳで１回若しくはそれ以上洗浄、である。

本発明の抗体またはその抗原結合部分をコードする核酸は、適切な発現系で発現することのできる発現担体に導入後、発現された抗体またはその抗原結合部分を単離または精製する。選択的に、本発明の抗体またはその抗原結合部分をコードする核酸は、無細胞翻訳系で翻訳することができる。米国特許第４，８１６，５６７号。Ｑｕｅｅｎ氏ら、米国科学アカデミー紀要（ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉ），米国，８６：１００２９−１００３３（１９８９年）。

本発明の抗体またはその抗原結合部分は、所望の抗体の軽鎖及び重鎖（またはその一部）をコードするＤＮＡを用いて形質転換された宿主細胞によって産生することができる。抗体は、標準的な手法を用い、これらの培養上清液及び／または細胞から単離及び精製することができる。例えば、宿主細胞は、抗体の軽鎖、重鎖、またはその両方をコードするＤＮＡを用いて形質転換することができる。組み換えＤＮＡ技術を使用し、結合に必要のない軽鎖及び重鎖の一方または両方をコードするＤＮＡ、例えば定常領域の一部または全体を除去することもできる。

本発明の核酸は、例えば、細菌細胞（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ））、酵母細胞、植物細胞、昆虫細胞、及び哺乳類細胞などの原核及び真核細胞を含む、種々の適切な細胞で発現させることができる。当該分野では多数の哺乳類細胞株が知られており、かつアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）より入手可能な不死化細胞株を含む。細胞の限定されない実例には、限定するわけではないが、サル腎細胞（ＣＯＳ、例えば、ＣＯＳ−１、ＣＯＳ−７）、ＨＥＫ２９３細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ、例えば、ＢＨＫ２１）細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳ０細胞、ＰｅｒＣ６細胞、ＢＳＣ−１細胞、ヒト肝細胞癌細胞（例えば、ＨｅｐＧ２）、ＳＰ２／０細胞、ＨｅＬａ細胞、マディン−ダービー（Ｍａｄｉｎ−Ｄａｒｂｙ）ウシ腎細胞（ＭＤＢＫ）、骨髄腫細胞、及びリンパ腫細胞の親細胞、誘導体、及び／または遺伝子組み換え変異株を含む哺乳類由来または哺乳類に類似する特徴を持つすべての細胞株を含む。遺伝子組み換え変異体には、例えば、グリカンプロフィールを修飾した、及び／または部位特異的組込み部位を持つ誘導体を含む。

本発明は、本明細書で記述される核酸を包含するために用いる細胞も提供する。細胞は、例えば、２Ｃ２と指名されたハイブリドーマのようなハイブリドーマまたはトランスフェクタントであってもよい。

代わりに、本発明の抗体またはその抗原結合部分は、当該技術分野で周知の固相合成法により合成することができる。「固相ペプチド合成：実践的なアプローチ」（ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ），Ｅ．ＡｔｈｅｒｔｏｎとＲ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ著，ＩＲＬがオックスフォード大学出版局（ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ）に出版（１９８９年）。「分子生物学方法」（ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ），第３５巻：ペプチド合成プロトコール（ＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓＰｒｏｔｏｃｏｌｓ），（Ｍ．Ｗ．ＰｅｎｎｉｎｇｔｏｎとＢ．Ｍ．Ｄｕｎｎ編著），第７章。「固相ペプチド合成」，第２版，Ｐｉｅｒｃｅケミカル社，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ（１９８４年）。Ｇ．ＢａｒａｎｙとＲ．Ｂ．Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，「ペプチド：解析、合成、生物学」（ＴｈｅＰｅｐｔｉｄｅｓ：Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂｉｏｌｏｇｙ），編者Ｅ．Ｇｒｏｓｓ與Ｊ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ，第１巻及び第２巻，学術出版社（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ），ＮｅｗＹｏｒｋ，（１９８０年），ｐ．３−２５４。Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｋｙ，「ペプチド合成原則」（ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，ベルリン（１９８４年）。

本発明は、糖類抗原（例えば、ＧｌｏｂｏＨ）に特異的に結合する抗体またはその抗原結合部分を製造するための方法を提供する。例えば、非ヒト動物を、糖類抗原（例えば、ＧｌｏｂｏＨ）を含む組成物で免疫接種（ｉｓｉｍｍｕｎｉｚｅｄｗｉｔｈ）し、かつ次に特異的抗体を前記動物から単離する。前記方法は、さらに抗体の糖類抗原に対する結合を評価することを含んでもよい。

各種の糖類抗原の任意の１個、特にＧｌｏｂｏＨは、本発明の実践に使用される。糖類抗原の実例は、ＧｌｏｂｏＨ、段階特異的胚抗原３（ＳＳＥＡ−３）（Ｇｂ５とも呼ばれる）、段階特異的胚抗原４（ＳＳＥＡ−４）、Ｇｂ−４及びＧｂ−３などのＧｌｏｂｏ抗原、ｓＬｅ^ｘ、Ｌｅ^ｘ、ｓＬｅ^ａ、Ｌｅ^ａ及びＬｅ^ｙなどのルイス（Ｌｅｗｉｓ）抗原、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、ｓＴｎ（ｃ）及びＴｎ（ｃ）などの多糖抗原、トムゼン−フリーデンライヒ（Ｔｈｏｍｓｅｎ−Ｆｒｉｅｄｅｎｒｅｉｃｈ）抗原（ＴＦ（ｃ））、ＧＤ１、ＧＤ２、ＧＤ３、フコシルＧＭ１、ＧＭ１、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧＤ１α及びＧＭ２などのガングリオシド、６Ｇａｌ−ＨＳＯ３−ＳｉａＬｅｘ及び６ＧｌｕＮＡｃ−ＨＳＯ３−ＳｉａＬｅｘなどのスルファチド抗原（ｓｕｌｆｉｔｉｄｅａｎｔｉｇｅｎ）を含むが、これらに限定されない。他の糖類抗原は、α−ガラクトース、α−Ｍａｎ−６−リン酸塩（α−Ｍａｎ−６−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、α−Ｌ−ラムノース、α−ＧａｌＮＡｃ（Ｔｎ）、α−ＮｅｕＡｃ−ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ４−ｐ−ＮＨＣＯＯＣＨ２、Ｆｕｃα１−２Ｇａｌβ１−４ＧａｌＮＡｃβ（Ｈ第３型）、ＮｅｕＡｃα２−８ＮｅｕＡｃα、（ＮｅｕＡｃα２−８）２ポリシアル酸、ＮｅｕＡｃａ２−６Ｇａｌｂ、ＮｅｕＡｃｂ２−６Ｇａｌａ（ＳＴｎ）、Ｇａｌａ１−３Ｇａｌｂ１−４ＧｌａＮＡｃｂ（ＮｅｕＡｃａ２−８）３、ＧａｌＮＡｃαａ−３（Ｆｕｃα１−２）Ｇａｌβ（血液型Ａ型）、Ｇａｌα１−３（Ｆｕｃα１−２）Ｇａｌβ（血液型Ｂ型）、６Ｇａｌ−ＨＳＯ３−ＳｉａＬｅｘ、６ＧｌｕＮＡｃ−ＨＳＯ３−ＳｉａＬｅｘ及びα２−６シアル酸二分岐型Ｎ−グリカン（α２−６ｓｉａｌｙｌａｔｅｄｄｉａｎｔｅｎｎａｒｙＮ−ｇｌｙｃａｎｓ）を含むが、これに限定されない。

一実施例において、抗−ＧｌｏｂｏＨ抗体またはその抗原結合部分は、図３Ａと図３Ｂ中に図示するように、相互反応することができ、または高選択性を持つ他の糖類抗原に結合することができる。糖類抗原の限定されない実例は：ＳＳＥＡ−３、ＳＳＥＡ−４、Ｌｅｗｉｓ抗原である。

一実施例において、本発明は、糖類抗原（例えば、ＧｌｏｂｏＨ）に特異的に結合する抗体を発現するハイブリドーマを作成するための方法を提供する。前記方法は、下記の工程を含む。糖類抗原（例えば、ＧｌｏｂｏＨ）を含む組成物により動物に免疫性を与える工程と、前記動物から脾細胞を単離する工程と、脾細胞からハイブリドーマを産生する工程と、ＧｌｏｂｏＨに特異的に結合する抗体を産生するハイブリドーマを選択する工程とを含む。Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎ，自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），２５６：４９５，１９７５年。Ｈａｒｌｏｗ，Ｅ．及びＬａｎｅ，Ｄ．，「抗体：実験マニュアル」（Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ），コールド・スプリング・ハーバー研究所出版（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ），コールド・スプリング・ハーバー研究所，Ｎ．Ｙ．，１９８８年。

一実施例において、糖類抗原を皮下注射したマウスに免疫性を与えている。１回若しくはそれ以上の追加免疫を与えることも、与えないこともある。血漿中の抗体の力価は、例えばＥＬＩＳＡ（酵素免疫吸着測定法（ｅｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ））またはフローサイトメトリーによりモニターすることができる。抗糖類抗原抗体の力価が十分なマウスを融合に使用する。マウスを犠牲し、及び脾臓を摘除する３日前に、抗原で追加免疫を与えることも、与えないこともある。マウス脾細胞を単離し、かつＰＥＧを用いてマウス骨髄腫細胞株に融合する。次に、得られたハイブリドーマをスクリーニングして抗原特異的抗体を製剤する。細胞をプレートに被覆し、かつ次に選択的に培地中で培養する。次に、個々のウェルの上清液のヒト抗糖類抗原モノクローナル抗体をＥＬＩＳＡによりスクリーニングする。抗体を分泌するハイブリドーマを再度プレートに被覆し、もう一度スクリーニングし、かつ抗糖類抗原抗体がまだ陽性の場合は、限界希釈法によりサブクローニングすることができる。

アジュバントは、一つまたは複数の糖類抗原の免疫原性を増加させるために使用することができる。アジュバントの限定されない実例には、リン酸アルミニウム、水酸化アルミニウム、ＭＦ５９（４．３％ｗ／ｖスクアレン、０．５％ｗ／ｖポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）、０．５％ｗ／ｖソルビタントリオレアート（Ｓｐａｎ８５））、ＣｐＧ含有核酸、ＱＳ２１（サポニンアジュバント）、α−ガラクトシルセラミドまたはその合成類似体（例えば、Ｃ３４、米国特許第８，２６８，９６９号を参照）、ＭＰＬ（モノホスホリル脂質Ａ（ＭｏｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌＬｉｐｉｄＡ））、３ＤＭＰＬ（３−Ｏ−脱アシル化ＭＰＬ）、アクイラ（Ａｑｕｉｌｌａ）由来の抽出物、ＩＳＣＯＭＳ（例えば、Ｓｊｏｌａｎｄｅｒ氏ら、（１９９８年），白血球生物学雑誌（Ｊ．ＬｅｕｋｏｃｙｔｅＢｉｏｌ．），６４：７１３、国際特許公開第ＷＯ９０／０３１８４号、第ＷＯ９６／１１７１１号、第ＷＯ００／４８６３０号、第ＷＯ９８／３６７７２号、第ＷＯ００／４１７２０号、第ＷＯ０６／１３４４２３号及び第ＷＯ０７／０２６１９０号を参照）、ＬＴ／ＣＴ突然変異、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）微小粒子、ＱｕｉｌＡ、インターロイキン、フロイントアジュバント（Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ）、Ｎ−アセチル−ムラミル−Ｌ−スレオニル−Ｄ−イソグルタミン（ｔｈｒ−ＭＤＰ）、Ｎ−アセチル−ｎｏｒ−ムラニル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン（ＣＧＰ１１６３７、ｎｏｒ−ＭＤＰと呼ばれる）、Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−アラニン−２−（１’−２’−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロール−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミン（ＣＧＰ１９８３５Ａ、ＭＴＰ−ＰＥと呼ばれる）、及び細菌から抽出したモノホスホリル脂質Ａ、トレハロースジミコレート（ｔｒｅｈａｌｏｓｅｄｉｍｙｃｏｌａｔｅ）及び細胞壁骨格の３つの成分（ＭＰＬ＋ＴＤＭ＋ＣＷＳ）を２％のスクアレン／Ｔｗｅｅｎ８０乳化液中に含有するＲＩＢＩを含む。

免疫性を与える動物は、限定するわけではないが、ウサギ、マウス、ラット、ハムスター、ヤギ、ウマ、サル、ヒヒ、及びヒトなど、免疫原を投与した場合に再生可能な抗体を産生することのできるいかなる動物とすることもできる。１つの態様では、例えば、ヒト免疫グロブリン遺伝子セグメントを発現したマウスなど、宿主が遺伝形質転換的であり、かつヒト抗体を産生する。米国特許第８，２３６，３１１号、第７，６２５，５５９号及び第５，７７０，４２９号明細書は、それぞれの開示がこの参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。Ｌｏｎｂｅｒｇ氏ら、自然雑誌（Ｎａｔｕｒｅ），３６８（６４７４）：８５６−８５９，１９９４年。Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．，「実験薬理学のハンドブック」（ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ），１１３：４９−１０１，１９９４年。Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．及びＨｕｓｚａｒ，Ｄ．，免疫学国際評論（Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１３：６５−９３，１９９５。Ｈａｒｄｉｎｇ，Ｆ．及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．，ニューヨーク科学アカデミー年報（Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．），７６４：５３６−５４６，１９９５年。

宿主に免疫性を与え、かつ抗体が生成された後、それが目標抗原に対して特異性があるかを確認するために抗体を測定し、かつそれが他の抗原と任意の相互反応を示しているか否かを決定する。このような測定を行う１つの方法は、米国特許公開第２００４／０１２６８２９号に記述されているとおり、血清スクリーニングアッセイである。抗糖類抗原抗体は、種々の周知の技術により前記糖類に対する結合の特徴を決定することができる。例えば、ＥＬＩＳＡでは、マイクロタイタープレートをＰＢＳ中の毒素またはトキソイド抗原でコーティングし、かつ次にＰＢＳ中で希釈したウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）などの関係のないタンパク質でブロッキングする。毒素で免疫性を与えたマウスの血漿希釈液を各ウェルに加え、かつ培養する。マイクロタイタープレートを洗浄し、かつ次に酵素（例えば、アルカリホスファターゼ）に共役した二次抗体を培養する。洗浄後、マイクロタイタープレートを酵素基質（例えば、ＡＢＴＳ）を用いて現像し、かつ特定のＯＤで解析した。他の実施例において、選択したモノクローナル抗体が目標糖類抗原またはエピトープに結合するか否かを測定するために、抗体をビオチン化することができ、それは次にストレプトアビジンの標識プローブで検出することができる。抗糖類抗原抗体の反応性は、糖類を用いたウエスタンブロット法により検査することができる。

糖類抗原に結合する抗体のハイブリドーマを産生すし、次に、好ましくは高い親和性で糖類抗原に結合する抗体を産生するハイブリドーマをサブクローニングし、かつさらに特徴を決定することができる。各ハイブリドーマから（ＥＬＩＳＡにより）由来する親細胞の反応性を維持するクローンを１個選択し、細胞バンクの作成、かつ抗体の精製に使用することができる。

本発明の抗体または抗原結合断片、その変異体または誘導体は、抗原に対する結合親和性の点で記述または指定することもできる。糖類抗原に対する抗体の親和性は、任意の適切な方法を用い、実験的に測定することができる（例えば、Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙ氏ら、「抗体−抗原相互作用」（Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ＡｎｔｉｇｅｎＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ）、「基礎免疫学」（ＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）に，Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．編著，ＲａｖｅｎＰｒｅｓｓ：ＮｅｗＹｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９８４年）、Ｋｕｂｙ，Ｊａｎｉｓ，「免疫学」（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ），Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ及びＣｏｍｐａｎｙ：ＮｅｗＹｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９９２年）、及び本明細書で記述さる方法を参照）。特定の抗体−糖類抗原相互作用の親和性測定は、異なる条件下（例えば、塩濃度、ｐＨ）で測定した場合、変化する可能性がある。従って、親和性及び他の抗原結合パラメーター（例えば、Ｋ_Ｄ、Ｋａ、Ｋｄ）の測定は、好ましくは標準化された抗体及び抗原溶液、及び標準化された緩衝液を用いて行われる。

本発明の抗体またはその抗原結合部分は、生体外及び生体内での治療、予防、及び／または診断に有用性がある。例えば、これらの抗体は、例えば生体外または生体の外部で培地中の細胞に、または例えば生体内で被験者に投与し、癌疾患の処置、抑制、再発防止、及び／または診断を行うことができる。

例えば、抗体またはその抗原結合部分を、生体外または生体の外部で培地中の細胞に使用することができる。例えば、細胞を生体外の培地中で培養し、かつ抗ＧｌｏｂｏＨ抗体またはその断片に接触させることができる。生体内（例えば、治療用または予防用）プロトコールの一環として、前記方法を被験者内に存在する細胞に対して行うことができる。生体内実施例については、接触工程は、被験者内に有効であり、かつ抗体またはその一部の、被験者内の１個またはより多い癌細胞上で発現された糖類抗原（例えば、ＧｌｏｂｏＨ）に対する結合を許容するために有効な条件下、前記被験者に対して抗毒素抗体またはその一部を投与する工程を含む。

抗体またはその抗原結合部分は、単独で、または別の治療剤、例えば、第２のモノクローナル、ポリクローナル抗体またはその原結合部分あるいは化学治療剤と併用して投与することができる。組み合わせ産物は、２個の化合物の混合物またはそれらの共有結合であってもよい。１つの実例では、ＧｌｏｂｏＨに特異的に接合する抗体またはそれらの抗原結合部分は、ＶＥＧＦに特異的に結合する抗体（モノクローナルまたはポリクローナル）またはその抗原結合部分と併用する。別の実例では、第２の試剤が化学治療剤である（例えば、シクロフォスファミド、５−フルオロウラシルまたはアクチノマイシン−Ｄ）。抗体は、例えば、ジフテリア毒素及びサポニンアジュバントに共役したＧｌｏｂｏＨなどの癌ワクチンと併用して投与することができる。

（癌細胞を抑制するための方法）
本発明は、生体外、生体の外部、または生体内での細胞成長を抑制するための方法も提供し、癌細胞のような前記細胞を、本明細書で記述されるような抗体またはその抗原結合部分の有効量に接触させる。過剰増殖性の細胞または組織のような病理細胞または組織は、本発明の抗体またはその抗原結合部分の有効量を前記細胞または前記組織に接触させることにより処置される可能性がある。癌細胞のような細胞は、原発性癌細胞であり、またはアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）のような組織バンクから入手可能な培養細胞であってもよい。病理学的細胞は、ＧｌｏｂｏＨが発現している癌、神経膠腫、髄膜腫、下垂体性腺腫、または全身性癌、肺癌、前立腺癌、乳癌、血液生成癌または卵巣癌によるＣＮＳ転移癌の細胞である可能性がある。あ細胞は、脊髄動物、好ましくは哺乳類、より好ましくはヒトから由来することができる。米国特許公開第２００４／００８７６５１号。Ｂａｌａｓｓｉａｎｏ氏ら、（２００２年），分子医学国際雑誌（Ｉｎｔｅｒｎ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．），１０：７８５−７８８。Ｔｈｏｒｎｅ，氏ら、（２００４年），神経科学雑誌（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），１２７：４８１−４９６。Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ氏ら、（２００５年），腫瘍学報告（ＯｎｃｏｌｏｇｙＲｅｐｏｒｔｓ），１３：９４３−９４７。ＤａＦｏｎｓｅｃａ氏ら、（２００８年），神経外科雑誌（ＳｕｒｇｉｃａｌＮｅｕｒｏｌｏｇｙ），７０：２５９２６７。ＤａＦｏｎｓｅｃａ氏ら、（２００８年），実験免疫学と治療学文献（Ａｒｃｈ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｅｘｐ．），５６：２６７−２７６。Ｈａｓｈｉｚｕｍｅ氏ら、（２００８年），神経腫瘍学雑誌（Ｎｅｕｒｏｎｃｏｌｏｇｙ），１０：１１２−１２０。一実施例において、癌疾患は、ＧｌｏｂｏＨが発現している癌である。別の実施例において、癌疾患は、ＳＳＥＡ−３が発現している癌である。さらに別の実施例において、癌疾患は、ＳＳＥＡ−４が発現している癌である。ＧｌｏｂｏＨが発現している癌、ＳＳＥＡ−３が発現している癌及びＳＳＥＡ−４が発現している癌は、乳癌、肺癌、前立腺癌、膵腺癌、胃癌、卵巣癌及び子宮内膜癌及び結腸癌、肝癌、鼻咽腔癌、皮膚癌、口腔癌、腎癌、脳癌、子宮頸癌及び膀胱癌を含むが、これに限定されない。

本発明の抗体またはその抗原結合部分の生体外の有効性は、当該分野で周知の方法を使用して測定することができる。例えば、抗体またはその抗原結合部分の細胞毒性は、ＭＴＴ［臭化３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウム］（３−（４，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ−２−ｙｌ）−２，５−ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ）細胞毒性分析により検討される可能性がある。ＭＴＴ分析は、青色のホルマザン産物（ｂｌｕｅｃｏｌｏｒｅｄｆｏｒｍａｚｏｎｐｒｏｄｕｃｔ）に代謝する代謝活性のある細胞による、ＭＴＴ、テトラゾリウム塩の取り込みの原理に基づくものであり、それは分光測定することができる。免疫学方法雑誌（Ｊ．ｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＭｅｔｈｏｄｓ），６５：５５６３，１９８３年。本発明の抗体またはその抗原結合部分の細胞毒性は、コロニー形成検定法により解析される可能性がある。ＧｌｏｂｏＨ抗原結合の機能的な検査法は、ＥＬＩＳＡにより行われる可能性がある。抗体またはその抗原結合部分による細胞周期時計は、標準的ヨウ化プロピジウム（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍｉｏｄｉｄｅ，ＰＩ）染色及びフローサイトメトリーにより解析される可能性がある。浸潤抑制は、ボイデンチャンバー（Ｂｏｙｄｅｎｃｈａｍｂｅｒ）により解析される可能性がある。この分析法では、再構成基底膜の１層となるマトリゲル（Ｍａｔｒｉｇｅｌ）は、走化性フィルタ上にコーティングされ、かつボイデンチャンバーにおいて細胞の移動に対する障壁として働く。浸潤能を持つ細胞のみが前記マトリゲル（Ｍａｔｒｉｇｅｌ）障壁を横断することができる。他の分析は、細胞生存能分析、アポトーシス分析及び形態的分析を含むが、これに限定されない。

検査は、齧歯類モデルを使用して生体内に行うこともできる。例えば、Ｂ．Ｔｅｉｃｈｅｒ，薬効測定のための腫瘍モデル（ＴｕｍｏｒＭｏｄｅｌｓｆｏｒＥｆｆｉｃａｃｙＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ），癌分子標的治療雑誌（ＭｏｌＣａｎｃｅｒＴｈｅｒ），２００６年、５：２４３５−２４４３を参照されたい。

（薬学的組成物）
一実施例において、本発明は、本明細書で記述される抗体またはその抗原結合部分と、薬学的に許容可能な担体とを含む薬学的組成物を提供する。別の実施例において、薬学的組成物は、本発明の抗体またはその抗原結合部分をコードする単離核酸と、薬学的に許容可能な担体とを含む。薬学的に許容可能な担体は、任意のそしてすべての生理学的に相容性の溶剤、分散媒、等張と吸収遅延剤及び類似体を含む。一実施例において、組成物は、被験者の癌細胞を効果的に抑制することができる。

本発明の薬学的組成物の投与経路は、静脈内、筋肉内、鼻内、皮膚的、経口、局所、皮下、皮内、経皮的、経真皮的、非経口、直腸、脊髄または表皮投与を含むが、これに限定されない。

本発明の薬学的組成物は、液体溶液または懸濁液の注射剤として、または注射前に液体担体に溶液または懸濁液に溶解するのに適した固体形態として製剤することができる。薬学的組成物は、固体形態に、乳化または持続放出のために使用されるリポソーム担体または他の粒子担体に被包された活性成分としても製剤することができる。例えば、薬学的組成物は、薬学的組成物の持続釈放を許容することのできる、油乳化剤、油中水型乳剤、水中油中水型乳剤、部位特異的乳剤、安定乳剤、粘着性乳剤、マイクロエマルション、ナノエマルション、リポソーム、微小粒子、ミクロスフェア、ナノスフェア、ナノ粒子、並びにエチレン酢酸ビニル共重合体及びＨｙｔｒｅｌ（登録商標）共重合体などの非吸収性不浸透性重合体、ヒドロゲルなどの膨潤性重合体、または吸収性縫合糸の作成に利用されるようなコラーゲン及び特定の重合体酸またはポリエステルなどの吸収性重合体などの種々の天然または合成重合体の形態とすることができる。

本発明の抗体またはその抗原結合部分は、哺乳類被験者に送達するための薬学的組成物に製剤化される。薬学的組成物は、単独で、及び／または薬学的に許容可能な担体、賦形剤または担体と混合して投与される。適切な担体は、例えば、水、塩水、右旋糖、グリセリン、エタノールなど、または類似体、及びその組み合わせである。このほか、担体は、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤、またはアジュバントなどの補助物質を少量含んでもよい。薬学的に許容可能な担体は、例えば、本発明の薬学的組成物の吸収またはクリアランス率を安定化、増加または減少するように作用する生理学的に許容可能な化合物を含有することができる。生理学的に許容可能な化合物は、例えば、グルコース、スクロースまたはポリグルコースなどの糖類、アスコルビン酸またはグルタチオンなどの抗酸化剤、キレート剤、低分子量タンパク質、洗浄剤、リポソーム担体、または賦形剤または他の安定化剤及び／または緩衝液を含んでもよい。他の生理学的に許容可能な化合物は、湿潤剤、乳化剤、分散剤または防腐剤を含む。例えば、「レミントンの製薬科学」（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ）の第２１版，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ”）を参照されたい。本発明の薬学的組成物は、薬学剤、細胞インターロイキン、または他の生物反応修飾体などの補助物質も含んでもよい。

このほか、薬学的組成物は、中性または塩の形態の薬学的組成物に製剤化される。薬学的に許容可能な塩は、酸付加塩（活性ポリペプチドの遊離アミノ基群を用いて形成）を含み、かつ例えば、塩酸またはリン酸などの無機酸、または酢酸、シュウ酸、酒石酸、マンデル酸などの有機酸を用いて形成される。遊離カルボキシル基群から形成される塩は、例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウムまたは水酸化鉄などの無機アルカリから、及びイソプロピルアミン、トリメチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどの有機アルカリから誘導することができる。

このような剤形を製剤する実際の方法は、当該技術分野における通常の知識を有する者にとって周知であるか、または容易に明らかであろう。例えば、「レミントンの製薬科学」，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，第２１版を参照されたい。

薬学的組成物は、前記被験者の年齢、体重、及び状態、使用される特定の組成物及び投与経路に適したスケジュール及び時間期間で単回の用量治療、または複数回の用量処置が投与され、前記薬学的組成物が予防または病気を治療する目的などで使用するか否かにかかわらない。例えば、一実施例において、本発明に従う薬学的組成物は、月１回、月２回、月３回、隔週１回（ｑｏｗ）、週１回（ｑｗ）、週２回（ｂｉｗ）、週３回（ｔｉｗ）、週４回、週５回、週６回、隔日１回（ｑｏｄ）、毎日（ｑｄ）、１日２回（ｑｉｄ）、または１日３回（ｔｉｄ）投与される。

本発明に従う抗体の投与期間、例えば、薬学的組成物が投与される時間間隔は、例えば、被験者の反応などの種々の変数のいずれか１個に依存して変動し得る。例えば、薬学的組成物は、約１または数秒〜１または数時間、１日〜約１週間、約２週間〜約４週間、約１ヵ月〜約２ヵ月、約２ヵ月〜約４ヵ月、約４ヵ月〜約６ヵ月、約６ヵ月〜約８ヵ月、約８ヵ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年、またはそれ以上の範囲の時間期間で投与される。

用量を容易に投与及び均一に投与するために、単位剤形で経口または非経口の医薬組成物が使用される。本明細書で使用される単位剤形は、治療されるべき被験者に関する単回の用量として都合のよい物理的に単離した単位を指し、各用量は、必要な医薬上の担体と関連する所望の治療効果を生じるように予め算出された所定量の活性化合物を含有する。

細胞培養アッセイ及び動物試験から得たデータを、動物に使用するための種々の用量を定めるために使用できる。一実施例において、このような化合物の用量は、毒性が殆どない、または全くないＥＤ_５０を含む種々の循環濃度範囲内にある。用量は、活用されている剤形及び利用されている投与経路に依存してこの範囲内で変動し得る。別の実施例において、治療上有効な用量は、最初に細胞培養アッセイから概算することができる。動物モデルにおいて、この用量は、細胞培養中で測定されるＩＣ_５０（即ち、症状の最大阻害の半分を達成する試験化合物の濃度）などを含む循環血漿濃度範囲を達成するように製剤化される。Ｓｏｎｄｅｒｓｔｒｕｐ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，免疫病理学セミナー（Ｓｅｍ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．），２５：３５−４５，２００３年。Ｎｉｋｕｌａ氏ら、吸入毒物学（Ｉｎｈａｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．）４（１２）：１２３−５３，２０００年。

本発明の抗体またはその抗原結合部分の治療または予防有効量の例示的非制限範囲は、体重１ｋｇあたり約０．００１〜約６０ｍｇ、体重１ｋｇあたり約０．０１〜約３０ｍｇ、体重１ｋｇあたり約０．０１〜約２５ｍｇ、体重１ｋｇあたり約０．５〜約２５ｍｇ、体重１ｋｇあたり約０．１〜約２０ｍｇ、体重１ｋｇあたり約１０〜約２０ｍｇ、体重１ｋｇあたり約０．７５〜約１０ｍｇ、体重１ｋｇあたり約１〜約１０ｍｇ、体重１ｋｇあたり約２〜約９ｍｇ、体重１ｋｇあたり約１〜約２ｍｇ、体重１ｋｇあたり約３〜約８ｍｇ、体重１ｋｇあたり約４〜約７ｍｇ、体重１ｋｇあたり約５〜約６ｍｇ、体重１ｋｇあたり約８〜約１３ｍｇ、体重１ｋｇあたり約８．３〜約１２．５ｍｇ、体重１ｋｇあたり約４〜約６ｍｇ、体重１ｋｇあたり約４．２〜約６．３ｍｇ、体重１ｋｇあたり約１．６〜約２．５ｍｇ、体重１ｋｇあたり約２〜約３ｍｇ、または体重１ｋｇあたり約１０ｍｇからの範囲である。

薬学的組成物は、本発明の抗体またはその抗原結合部分の有効量を含むように製剤化され、前記有効量は、治療される動物及び治療される状態に依存する。一実施例において、本発明の抗体またはその抗原結合部分は、約０．０１ｍｇ〜約１０ｇ、約０．１ｍｇ〜約９ｇ、約１ｍｇ〜約８ｇ、約２ｍｇ〜約７ｇ、約３ｍｇ〜約６ｇ、約１０ｍｇ〜約５ｇ、約２０ｍｇ〜約１ｇ、約５０ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約０．０１μｇ〜約１０ｇ、約０．０５μｇ〜約１．５ｍｇ、約１０μｇ〜約１ｍｇタンパク質、約３０μｇ〜約５００μｇ、約４０μｇ〜約３００μｇ、約０．１μｇ〜約２００μｇ、約０．１μｇ〜約５μｇ、約５μｇ〜約１０μｇ、約１０μｇ〜約２５μｇ、約２５μｇ〜約５０μｇ、約５０μｇ〜約１００μｇ、約１００μｇ〜約５００μｇ、約５００μｇ〜約１ｍｇ、約１ｍｇ〜約２ｍｇの範囲の用量で投与される。任意の特定の被験者についての特異的用量レベルは、治療を受けている特異的ペプチドの活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄速度、薬物併用、並びに特定の疾患の重症度を含む種々の要因に依存するものであり、かつ当該技術分野における通常の知識を有する者が過度な実験を経ずに容易に決定することができる。

本発明の抗体、その抗原結合部分、薬学的組成物及び方法は、例えば、ヒト、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、サル、エイプ、ゴリラ、チンパンジー、ウサギ、アヒル、ガチョウ、ニワトリ、両生類、爬虫類及び他の動物を含む、哺乳類及び非哺乳類などのすべての脊髄動物で使用することができる。

本発明を実施するための特定態様の実例は、記述目的のためにのみ提供したものであり、いかなる方式でも本発明の範疇を制限することを意図するものではない。

実例１ハイブリドーマ融合とスクリーニング
典型的なハイブリドーマ融合を行った。

マウスは、ＧｌｏｂｏＨ−ＫＬＨ（キーホールリンペットヘモシアニン（ＫｅｙｈｏｌｅＬｉｍｐｅｔＨｅｍｏｃｙａｎｉｎ））にサポニンアジュバントを共役した初回の免疫接種（ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ）を受け、かつ順次に第７日目、第１４日目及び第２４日目に追加免疫を与えた。第１０日目、第１７日目、第２１日目及び第２４日目にブリージング試験を行い、かつ抗ＧｌｏｂｏＨ抗体の力価を検査するために血清で試験した。５匹のマウスは、高い抗ＧｌｏｂｏＨＩｇＧ及び抗ＧｌｏｂｏＨＩｇＭの力価を産生することを発見し、かつハイブリドーマの生産のために使用された。マウスハイブリドーマ細胞は、マウス脾細胞と融合するために使用され、ケーラーとミルスタイン（ＫｏｈｌｅｒＧ．及びＭｉｌｓｔｅｉｎＣ，１９７５年）の技法に従い実施した。ハイブリドーマクローンの上清液を親和性ＥＬＩＳＡにより０．２μｇＧｌｏｂｏＨ−セラミド／ウェルでスクリーニングした。抗ＧｌｏｂｏＨＶＫ９ｍＡｂを陽性制御群とする。上清液を有する無希釈のハイブリドーマクローンのＯＤ＞２倍の背景値が選択されるた。前記５個のハイブリドーマクローンは、それぞれ１Ｅ１、２Ｃ２、２Ｆ８、３Ｄ７、７Ａ１１である。

実例２マウスモノクローナル抗体の動力学解析
動力学結合実験は、２５℃下、ＢｉａｃｏｒｅＴ１００（ジーイーヘルスケア（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ））を用いてシングルサイクルカイネティクス（ｓｉｎｇｌｅ−ｃｙｃｌｅｋｉｎｅｔｉｃｓ，ＳＣＫ）法とマルチサイクルカイネティクス（ｍｕｌｔｉ−ｃｙｃｌｅｋｉｎｅｔｉｃｓ，ＭＣＫ）法により実施した。

製造メーカーの指示に従い、ＧｌｏｂｏＨは、アミンカップリングにより固定化（ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ）された。ＧｌｏｂｏＨ−アミンは、固定緩衝液中（１０ｍＭの酢酸ナトリウム，ｐＨ４．５）に１５ｍｇ／ｍｌに希釈され、かつ２５℃にて５μｌ／分の流速を使用して固定された。

抗ＧｌｏｂｏＨ抗体（ＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍａｂ、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ及びＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ）は、電気泳動緩衝液中に２００ｎＭ（５０ｎＭ）に希釈された。２００μｌの２００ｎＭ（５０ｎＭ）溶液を２００μｌの電気泳動緩衝液と混合して１００ｎＭ（２５ｎＭ）溶液を得た。持続的に、下記の系列希釈：２００、１００、５０、２５及び１２．５ｎＭ（解析濃度：５０ｎＭ、２５ｎＭ、１２．５ｎＭ、６．２５ｎＭ、３．１２５ｎＭ）に希釈された。希釈サンプルは、ラック位置（ＲａｃｋＰｏｓｉｔｉｏｎｓ）上に配置されると共に、ＭＣＫ法とＳＣＫ法により測定された。ＭＣＫとＳＣＫに用いる配列のサンプルは、４２０秒の解離時間を取った。１０ｍＭグリシンｐＨ２．０／１．５（ｖ／ｖ＝１）溶液を４０秒間、表面に注射してその表面を再生した。ＳＣＫとＭＣＫデータを、ＢｉａｃｏｒｅＥｖｌｕａｔｉｏｎソフトウェア２．０を用いた１：１の結合モデルにフィッティングした。

抗体と抗原との間の結合強度の数値を記述するために使用された解離定数（Ｋ_Ｄ）と、抗体抗原複合物形成の結合速度であるｋｏｎ（１／Ｍｓ）と、抗体抗原複合物解離の解離速度であるｋｏｆｆ（１／ｓ）と、分析物反応の最大量であるＲｍａｘとを解析してその結果をまとめた。表４には、下記のハイブリドーマ：ＶＫ９、２Ｃ２及び３Ｄ７から由来する抗ＧｌｏｂｏＨ抗体の親和性と動力学データを示している。３Ｄ７抗体と２Ｃ２抗体は、ＶＫ９抗体に比べてより高い結合親和性を有する。

実例３抗ＧｌｏｂｏＨ抗体の親和性解析
下記の抗ＧｌｏｂｏＨ抗体は、ＥＣ_５０及び細胞結合の百分率について試験した。

ＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−１Ｅ１ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｆ８ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂ。

工程：ＥＣ５０についてのＥＬＩＳＡ親和性：
ウェルについては、０．２μｇのＧｌｏｂｏＨ−セラミドを氷上の各ウェルにコーティングした。ブロッキング後、６．２ｎｇ／ｍｌ〜５１２００ｎｇ／ｍｌにある試験抗体を前記ウェル内に添加した。室温下、１時間培養後の過量の抗体を、３回の洗浄により除去した。ヤギ抗−マウスＩｇＧ−ＨＲＰ（１：５３３）が添加された。発色現像は、４９０ｎｍでプレートリーダーにより定量化する。ＥＣ_５０は、Ｐｒｉｓｍ５．０ソフトウェアを用いて測定された。

細胞と抗体の結合の百分率についてのＦＡＣＳ：各試験管ごとに５０μｌのＦＡＣＳ緩衝液に対して２００，０００細胞の総数を加えて癌細胞株を準備した。指定された抗体を１μｇ／ｍｌの最終濃度に達するまで添加した。緩和振動後、試験管を氷上に配置し、かつ約１時間培養した。
ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄した後、抗マウスＩｇＧ−ＰＥをＦＡＣＳ緩衝液中に４μｇ／ｍｌの最終濃度に達するまで添加した。緩和振動後、試験管を氷上に配置して３０分間培養した。ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄した後、測定された細胞を２００μｌのＦＡＣＳ緩衝液中に再懸濁した。フローサイトメトリーを行った後、細胞結合の百分率は、ＷｉｎＭＤＩソフトウェアにより解析される。棒グラフにおいて、二次抗体の培養は、背景（Ｍ１）及び結合（Ｍ２）領域の規定のみに使用される。背景（Ｍ１）とする二次抗体の設置に基づいて、指定された抗体の結合領域（Ｍ２）の百分率が測定された。

乳癌細胞株（ＭＣＦ−７）、肺癌細胞株（ＬＬＣ１）及び膵腺癌細胞株（ＨＰＡＣ）において、ＧｌｏｂｏＨに結合する抗体は、蛍光活性化セルソーター（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅａｃｔｉｖａｔｅｄｃｅｌｌｓｏｒｔｉｎｇ，ＦＡＣＳ）を使用して分析評価された。

結果：表５には、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｆ８ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂ、及びＧｌｏｂｏＨ−１Ｅ１ｍＡｂのＥＣ_５０データをまとめた。その結果から、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｆ８ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ、及びＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂは、中和ＧｌｏｂｏＨ抗原において、ＧｌｏｂｏＨ−ＶＫ９ｍＡｂに比べてさらに有効であることが示されている。ＦＡＣＳ分析によれば、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ及びＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂは、乳癌細胞株において、ＧｌｏｂｏＨＶＫ９ｍＡｂに比べてＧｌｏｂｏＨ抗原に対してさらに高い結合親和性を有することが示されている。このほか、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂとＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂは、膵腺癌細胞株（ＨＰＡＣ）において、ＧｌｏｂｏＨＶＫ９ｍＡｂに比べてＧｌｏｂｏＨ抗原に対してさらに高い結合親和性を有する。このほか、ＧｌｏｂｏＨ−１Ｅ１ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−２Ｃ２ｍＡｂ、ＧｌｏｂｏＨ−３Ｄ７ｍＡｂ及びＧｌｏｂｏＨ−７Ａ１１ｍＡｂは、肺癌細胞株（ＬＬＣ１）において、ＧｌｏｂｏＨＶＫ９ｍＡｂに比べてＧｌｏｂｏＨ抗原に対してさらに高い結合親和性を有する。

実例４抗ＧｌｏｂｏＨ抗体の生体内抗腫瘍評価
ヒト膵腺癌（ＨＰＡＣ）を体重３３ｇのヌードマウスに異種移植して下記の６個の実験群ランダムに分けた。

腫瘍体積についてマウスを２９日間観察し、かつその結果を図１中に記録してまとめた。

結果：２９日目、腫瘍体積は、下記の順序に従って減少する：ＶＫ９＝３Ｄ７＜２Ｃ２群別。２Ｃ２群別における腫瘍体積は、制御群に比べて顕著に減少された（Ｐ＜０．０５）。

実例５抗ＧｌｏｂｏＨ抗体の生体内抗腫瘍評価
ヒト乳癌（ＭＣＦ７）を体重２７ｇのヌードマウスに異種移植して下記の５個の実験群にランダムに分けた。

腫瘍体積についてマウスを１８日間観察し、かつその結果を図２中に記録してまとめた。

結果：図２に示すように、１５日後、制御群に比べて腫瘍体積は、下記の群別に減少する：２Ｃ２（４ｍｇ／ｋｇ）＞２Ｃ２（０．４ｍｇ／ｋｇ）。８日目から、２Ｃ２（０．４ｍｇ／ｋｇ）における腫瘍体積は、制御群に比べて顕著に減少された（Ｐ＜０．０５）。

実例６抗ＧｌｏｂｏＨ抗体の相互反応
抗ＧｌｏｂｏＨ抗体（ＧｌｏｂｏＨ２Ｃ２、７Ａ１１、３Ｄ７、２Ｆ８、１Ｅ１ｍＡｂ及びＧｌｏｂｏＨＶＫ９）の生体外の相互評価を行った。

工程：ＧｌｙｃｏＤｘカートリッジ（ＧｌｙｃｏＤｘｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ）に６２０μＬの洗浄緩衝液、１００μＬの希釈した抗ＧｌｏｂｏＨ抗体、１００μＬのブロッキング緩衝液、１２０μＬの共役緩衝液、及び１２０μＬの基質緩衝液を加えた。カートリッジをＣＣＤリーダーで検出し、かつでデータをＥｘｃｅｌ試算表に出力してさらに解析した。

結果：図３Ａに示すように、ＧｌｏｂｏＨ２Ｃ２ｍＡｂは、ＧｌｏｂｏＨに結合し、かつＬｅｗｉｓ抗原（ｓＬｅ^ｘ及びｓＬｅ^ａ）とＳ１５−Ｓ２７抗原（表８の糖類抗原リストを参照）などの他の糖類抗原の相互反応が示されている。ＧｌｏｂｏＨ７Ａ１１ｍＡｂは、ＧｌｏｂｏＨに結合し、なおかつＬｅｗｉｓ抗原（ｓＬｅ^ｘ及びｓＬｅ^ａ）及びＳ１５−Ｓ１７、Ｓ１９−Ｓ２２抗原などの他の糖類抗原の相互反応が示されている（図３Ｂ参照）。ＧｌｏｂｏＨ３Ｄ７ｍＡｂは、ＧｌｏｂｏＨに結合し、かつＬｅｗｉｓ抗原（ｓＬｅ^ｘ、ｓＬｅ^ａ、及びＬｅ^ｙ）及びＳ１５−Ｓ２２抗原などの他の糖類抗原の相互反応が示されている（図３Ｃ参照）。ＧｌｏｂｏＨ２Ｆ８ｍＡｂは、ＧｌｏｂｏＨに結合し、なおかつＬｅｗｉｓ抗原（ｓＬｅ^ｘ及びｓＬｅ^ａ）及びＳ１５、Ｓ１７及びＳ２１抗原などの他の糖類抗原の相互反応が示されている（図３Ｄ参照）。ＧｌｏｂｏＨ１Ｅ１ｍＡｂは、ＧｌｏｂｏＨに結合し、かつＬｅｗｉｓ抗原（ｓＬｅ^ｘ）及びＳ１６、Ｓ１７とＳ２０−Ｓ２２抗原などの他の糖類抗原の相互反応が示されている（図３Ｅ参照）。それらに比べて、ＧｌｏｂｏＨＶＫ９ｍＡｂは、ＧｌｏｂｏＨのみに結合し、かつ他の糖類抗原の相互反応が示されていない（図３Ｆ参照）。

実例７抗ＧｌｏｂｏＨ抗体の結合親和性
下記の抗ＧｌｏｂｏＨヒト化抗体の生体外評価を行う。表９には、ハイブリドーマ２Ｃ２のヒト化抗体から由来する重鎖領域と軽鎖領域のアミノ酸配列を示している。

ＥＬＩＳＡ方法で測定した結合親和性の結果を表１０〜１３に示す。

これらの結果は、重鎖のＦＷ２における位置９のアミノ酸の置換（ＧからＡへ）により、抗体の結合親和性を０．４から０．１７まで低減させることが示されている。

これらの結果は、軽鎖のＦＷ２における位置１２のアミノ酸の置換（ＰからＬへ）により、結合親和性を０．３２〜０．５３から０．０７〜０．０８まで減少させることが示されており、かつ軽鎖のＦＷ２における位置１３のアミノ酸の置換（ＷからＬへ）により、結合親和性を０．３２〜０．５３から０．０８〜０．１２まで減少させることが示されている。

実際に、本発明の具体的な態様が既に叙述と描写されてきたが、このような態様は、単なる本発明の記述であって、添付の特許請求の範囲に従って解釈される本発明を制限しないとみなされるべきである。本明細書に引用したすべての参考文献及び特許出願は、それぞれ個別の参考文献または特許出願がすべての目的のためにこの引用によりその全体が組み込まれると特定かつ個別に指定されたかのように、この引用によりその全体がすべての目的のために本明細書に組み込まれる。上述の発明は、理解を明瞭にする目的のために記述及び例示の方式により一部詳細の記述を行ってきたが、この発明の教示を踏まえると、添付の特許請求の範囲の精神または範疇から離脱されることなく、いくつかの変更及び修飾を行うことができることは、当該技術分野における通常の知識を有する者には容易に明らかであろう。

（生物材料寄託）
寄託機関：財団法人食品工業発展研究所
寄託日付：民国１０４年３月６日（２０１５年３月６日）
寄託番号：ＢＣＲＣ９６０５００、ＢＣＲＣ９６０５０１、ＢＣＲＣ９６０５０２、ＢＣＲＣ９６０５０３、ＢＣＲＣ９６０５０４

Claims

ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域、ＳＥＱＩＤＮＯ：４に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域、または前記重鎖の可変領域及び前記軽鎖の可変領域の組み合わせを含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：５、６または７から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域（ＣＤＲ）のアミノ酸配列を含有する重鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯ：１１に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるフレームワークをさらに含み、前記フレームワークは、前記重鎖領域のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在することを特徴とする、請求項２に記載の抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：８、９または１０から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域のアミノ酸配列を含有する軽鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯ：１２に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるフレームワークをさらに含み、前記フレームワークは、前記軽鎖領域のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在することを特徴とする、請求項４に記載の抗体またはその抗原結合部分。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０１で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、２Ｃ２と指定されたハイブリドーマによって産生されることを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分の可変領域は、一つまたは複数の糖類抗原に結合可能であることを特徴とする、請求項１〜請求項６のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記一つまたは複数の糖類抗原は、ＧｌｏｂｏＨ、ｓＬｅ^ｘ、ｓＴｎ、Ｔｎ、ｓＬｅ^ａ、α−ＮｅｕＡｃ−ＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_４−ｐ−ＮＨＣＯＯＣＨ_２、Ｆｕｃα１−２Ｇａｌβ１−４ＧａｌＮＡｃβ、ＮｅｕＡｃａ２−６Ｇａｌｂ、Ｇａｌａ１−３Ｇａｌｂ１−４ＧｌａＮＡｃｂ、（ＮｅｕＡｃａ２−８）３、６Ｇａｌ−ＨＳＯ３−ＳｉａＬｅｘ、６ＧｌｕＮＡｃ−ＨＳＯ３−ＳｉａＬｅｘ、α２−６シアル酸二分岐型Ｎ−グリカンまたはポリシアル酸であることを特徴とする、請求項７に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分は、（ａ）全免疫グロブリン分子、（ｂ）ｓｃＦｖ、（ｃ）Ｆａｂ断片、（ｄ）Ｆ（ａｂ’）２、または（ｅ）ジスルフィド結合Ｆｖから選択されることを特徴とする、請求項１〜請求項６のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
請求項１〜請求項９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分と、
少なくとも１個の薬学的に許容可能な担体とを含むことを特徴とする、薬学的組成物。
少なくとも１個の追加治療剤をさらに含むことを特徴とする、請求項１０に記載の薬学的組成物。
請求項１〜請求項９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分を、癌細胞増殖を抑制する薬学的組成物の製剤に用いる用途であって、
前記薬学的組成物は、需要のある被験者の癌細胞増殖を抑制する有効量の前記抗体またはその抗原結合部分を含み、前記薬学的組成物は、癌細胞の増殖を抑制することを特徴とする、薬学的組成物の用途。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０１で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、２Ｃ２と指定されたハイブリドーマであることを特徴とする、ハイブリドーマ。
ＳＥＱＩＤＮＯ：１３に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域、または前記重鎖の可変領域及び前記軽鎖の可変領域の組み合わせを含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５、１６または１７から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域のアミノ酸配列を含有する重鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１８、１９または２０から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域のアミノ酸配列を含有する軽鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０３で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、３Ｄ７と指定されたハイブリドーマによって産生されることを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分の可変領域は、一つまたは複数の糖類抗原に結合可能であることを特徴とする、請求項１４〜請求項１７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記一つまたは複数の糖類抗原は、ＧｌｏｂｏＨ、ｓＬｅ^ｘ、ｓＴｎ、Ｔｎ、ｓＬｅ^ａ、Ｌｅ^ｙ、α−ＮｅｕＡｃ−ＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_４−ｐ−ＮＨＣＯＯＣＨ_２、Ｆｕｃα１−２Ｇａｌβ１−４ＧａｌＮＡｃβ、ＮｅｕＡｃａ２−６Ｇａｌｂ、Ｇａｌａ１−３Ｇａｌｂ１−４ＧｌａＮＡｃｂ、（ＮｅｕＡｃａ２−８）３またはポリシアル酸であることを特徴とする、請求項１８に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分は、（ａ）全免疫グロブリン分子、（ｂ）ｓｃＦｖ、（ｃ）Ｆａｂ断片、（ｄ）Ｆ（ａｂ’）２、または（ｅ）ジスルフィド結合Ｆｖから選択されることを特徴とする、請求項１４〜請求項１７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０３で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、３Ｄ７と指定されたハイブリドーマであることを特徴とする、ハイブリドーマ。
ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域、ＳＥＱＩＤＮＯ：２２に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域、または前記重鎖の可変領域及び前記軽鎖の可変領域の組み合わせを含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：２３、２４または２５から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域のアミノ酸配列を含有する重鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：２６、２７または２８から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域のアミノ酸配列を含有する軽鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０４で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、７Ａ１１と指定されたハイブリドーマによって産生されることを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分の可変領域は、一つまたは複数の糖類抗原に結合可能であることを特徴とする、請求項２２〜請求項２５のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記一つまたは複数の糖類抗原は、ＧｌｏｂｏＨ、ｓＬｅ^ｘ、ｓＴｎ、Ｔｎ、ｓＬｅ^ａ、α−ＮｅｕＡｃ−ＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_４−ｐ−ＮＨＣＯＯＣＨ_２、Ｆｕｃα１−２Ｇａｌβ１−４ＧａｌＮＡｃβ、ＮｅｕＡｃａ２−６Ｇａｌｂ、Ｇａｌａ１−３Ｇａｌｂ１−４ＧｌａＮＡｃｂまたは（ＮｅｕＡｃａ２−８）３であることを特徴とする、請求項２６に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分は、（ａ）全免疫グロブリン分子、（ｂ）ｓｃＦｖ、（ｃ）Ｆａｂ断片、（ｄ）Ｆ（ａｂ’）２、または（ｅ）ジスルフィド結合Ｆｖから選択されることを特徴とする、請求項２２〜請求項２５のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０４で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、７Ａ１１と指定されたハイブリドーマであることを特徴とする、ハイブリドーマ。
ＳＥＱＩＤＮＯ：２９に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域、または前記重鎖の可変領域及び前記軽鎖の可変領域の組み合わせを含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３１、３２または３３から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域のアミノ酸配列を含有する重鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３４、３５または３６から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域のアミノ酸配列を含有する軽鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０２で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、２Ｆ８と指定されたハイブリドーマによって産生されることを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分の可変領域は、一つまたは複数の糖類抗原に結合可能であることを特徴とする、請求項３０〜請求項３３のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記一つまたは複数の糖類抗原は、ＧｌｏｂｏＨ、ｓＬｅ^ｘ、Ｔｎ、ｓＬｅ^ａ、Ｆｕｃα１−２Ｇａｌβ１−４ＧａｌＮＡｃβまたはＧａｌａ１−３Ｇａｌｂ１−４ＧｌａＮＡｃｂであることを特徴とする、請求項３４に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分は、（ａ）全免疫グロブリン分子、（ｂ）ｓｃＦｖ、（ｃ）Ｆａｂ断片、（ｄ）Ｆ（ａｂ’）２、または（ｅ）ジスルフィド結合Ｆｖから選択されることを特徴とする、請求項３０〜請求項３３のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５０２で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、２Ｆ８と指定されたハイブリドーマであることを特徴とする、ハイブリドーマ。
ＳＥＱＩＤＮＯ：３７に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する重鎖の可変領域、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を含有する軽鎖の可変領域、または前記重鎖の可変領域及び前記軽鎖の可変領域の組み合わせを含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９、４０または４１から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域のアミノ酸配列を含有する重鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
ＳＥＱＩＤＮＯｓ：４２、４３または４４から選択されるアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源である相補性決定領域のアミノ酸配列を含有する軽鎖領域を含むことを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５００で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、１Ｅ１と指定されたハイブリドーマによって産生されることを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分の可変領域は、一つまたは複数の糖類抗原に結合可能であることを特徴とする、請求項３８〜請求項４１のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記一つまたは複数の糖類抗原は、ＧｌｏｂｏＨ、ｓＬｅ^ｘ、ｓＴｎ、α−ＮｅｕＡｃ−ＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_４−ｐ−ＮＨＣＯＯＣＨ_２、Ｆｕｃα１−２Ｇａｌβ１−４ＧａｌＮＡｃβ、Ｇａｌａ１−３Ｇａｌｂ１−４ＧｌａＮＡｃｂまたは（ＮｅｕＡｃａ２−８）３であることを特徴とする、請求項４２に記載の抗体またはその抗原結合部分。
前記抗体またはその抗原結合部分は、（ａ）全免疫グロブリン分子、（ｂ）ｓｃＦｖ、（ｃ）Ｆａｂ断片、（ｄ）Ｆ（ａｂ’）２、または（ｅ）ジスルフィド結合Ｆｖから選択されることを特徴とする、請求項３８〜請求項４１のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
寄託番号ＢＣＲＣ９６０５００で財団法人食品工業発展研究所に寄託され、１Ｅ１と指定されたハイブリドーマであることを特徴とする、ハイブリドーマ。
それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：８、９及び１０に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する３個の相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含有する軽鎖領域と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１２と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する軽鎖のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークとを含む抗体またはその抗原結合部分であって、
前記フレームワークは、位置１２にあるプロリン、位置１３にあるトリプトファン、またはそれらの組み合わせを含有し、前記抗体またはその抗原結合部分は、ＧｌｏｂｏＨに結合することを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：５、６及び７に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する３個の相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含有する重鎖領域と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１１と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する重鎖のＣＤＲ１とＣＤＲ２との間に介在するフレームワークとを含む抗体またはその抗原結合部分であって、
前記フレームワークは、位置９にあるグリシンを含有し、前記抗体またはその抗原結合部分は、ＧｌｏｂｏＨに結合することを特徴とする、抗体またはその抗原結合部分。
それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：８、９及び１０に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する３個の相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含有する軽鎖領域と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：８８と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、前記軽鎖のリーダー配列とＣＤＲ１との間に介在するフレームワークと、
ＳＥＱＩＤＮＯ：９０と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、前記軽鎖のＣＤＲ２とＣＤＲ３との間に介在するフレームワークとを含むことを特徴とする、ヒト化抗体またはその抗原結合部分。
それぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：５、６及び７に示すアミノ酸配列と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有する３個の相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含有する重鎖領域と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：８７と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、前記重鎖のリーダー配列とＣＤＲ１との間に介在するフレームワークと、
ＳＥＱＩＤＮＯ：８９と約８０％〜約１００％同源であるアミノ酸配列を有し、前記重鎖のＣＤＲ２とＣＤＲ３との間に介在するフレームワークとを含むことを特徴とする、ヒト化抗体またはその抗原結合部分。