JP2017511349A - パーソナルケア組成物用アロエベラ抽出物 - Google Patents

Abstract

本発明は、皮膚細胞のタイトジャンクションを増強するアロエベラの抽出物の特定の画分に関する。本発明は、より具体的には、皮膚、口腔、及び毛髪のケア組成物におけるかかる画分の使用に関する。本発明のアロエベラの抽出物は、６０重量％〜９５重量％の２ｋＤａ〜３ｋＤａの範囲の分子量を有する多糖と、５重量％未満のポリフェノールとを含み、該多糖がトリフルオロ酢酸によって加水分解される。

Description

本発明は、皮膚細胞のタイトジャンクションを増強するアロエベラの抽出物の特定の画分に関する。本発明は、より具体的には、皮膚、口腔、及び毛髪のケア組成物におけるかかる画分の使用に関する。

総体的に健康でいるために人々は、自分たち及びペットの身体の外部表面を大切にしようとする。人々が気にする特定の皮膚に関連する問題は、感染症のない良好な皮膚の健康、良好な皮膚の調子、及び適切な加湿が挙げられる。口腔は、良い状態に保つため人々が積極的なケアを行う別の外部表面である。人々は、歯肉及び歯を含む口腔が、虫歯、歯石、歯肉炎、齲蝕、及び口臭症としても知られる口臭、並びに歯垢といった問題がないことを好む。毛髪及び頭皮のケアも大事である。一般的に人々は、抜け毛が最小限の、豊かで長い髪の毛を持つことを好む。フケは、真菌微生物が関与する日常的に起こる頭皮の問題である。

皮膚、口腔及び頭皮を含む上記表面の衛生は全て、一般的に、感染のない状態にしておくことによって達成される。感染に取り組む一つの方法は、感染が生じた後に抗菌剤で表面を治療することである。別のアプローチは、疾患の広がりを最小にするため、あらゆる侵入する微生物を殺傷又は不活性化するように表面で最小量の抗菌剤が活性化している状態を保つことである。所望の表面の生得的な免疫を改善するアプローチである、更に別のアプローチが本発明者らによって調査された。

本発明者らは、アロエベラ抽出物の特定の画分が、皮膚細胞の細胞内タイトジャンクションを増強することにより、皮膚の加湿を高め、皮膚感染の機会を減少させることを見出した。また、本発明は、歯肉の改善された健康に対する口腔ケア組成物において、及び毛髪線維の強度の改善用ヘアケア組成物において、また抗フケ剤としてかかる画分を使用することに関する。

特許文献１（Ｄｏｈａｎ Ｄａｖｉｄ Ｍａｒｃｅｌ，２００９）は、ヒト又は動物における口腔、皮膚、又は粘膜への適用に対する天然抽出物に基づく組成物を開示する。該組成物は、追加の成分を含んでもよい少なくとも３つの本来天然の（植物、動物又は鉱物の）生物学的活性な化合物を含み、ゲル、練り歯磨き、（歯科用）超音波機器用の灌注溶液、洗口剤、又は口腔（好ましくは歯肉、頬及び舌下の粘膜）組織に対するトローチ剤若しくはチュアブル剤、又はゲル、クリーム、アプリケータースティック、又は組織表面（皮膚、粘膜）に対するリンス溶液を用いて適用される。

特許文献２（ＵＮＩＧＥＮ ＩＮＣ，２００２）は、アロエから生物学的に活性な多糖を調製及び単離する方法を開示する。これは、該発明の方法によって生成された多糖の活性化混合物（ここでは「Ｉｍｍｕｎｏ−１０」と呼ぶ）含む。また、引用される技術分野は、免疫賦活剤、免疫調節剤、及び創傷治癒剤としての多糖の使用を含む。得られた免疫調節性の複合体はより高い活性を有し、従来のアルコール沈殿スキームを使用して単離された巨大な糖よりも安定である。

特許文献３（Ｙｕｎｎａｎ，２００７）は、アロエ多糖の分別抽出方法を開示し、該方法は、濃縮アロエ生成物に８倍〜１０倍の９５％アルコールを添加する工程、それを置いておき、混合した後沈殿させ、その後濾過する工程、及びアロエの粗多糖を収集する工程を含む。その後、水を添加し、混合して多糖を溶解した後、最初に分子カットオフが２０００００〜４０００の限外濾過膜に徐々に通し、ナノフィルター膜に通して種々の分子量のアロエ多糖を得るため濃縮する。この公報は、本発明と比較してより高分子量の画分のアロエ画分を開示し、したがって本発明の利点は得られないであろう。

フランス特許第２９３２３８６号 米国特許第６４３６６７９号 中国特許第１９４８３４６号

本発明の目的は、ヒト又は動物の身体の局所表面に増強された免疫を提供する活性物質を調製することである。

本発明は、２ｋＤａ〜３ｋＤａの範囲の分子量を有する６０重量％〜９５重量％の多糖と、５重量％未満のポリフェノールとを含み、該多糖がトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）によって加水分解される、アロエベラの抽出物に関する。

本発明の好ましい態様は、０．１重量％〜１０重量％の本発明のアロエベラ抽出物、及び化粧学的に許容可能な基剤を含むパーソナルケア組成物に関する。

本発明の更に別の好ましい態様は、本発明の組成物を塗布する工程を含む、ヒト又は動物の身体の外部表面に増強された免疫を提供する方法に関する。

これらの及び他の態様、特徴、並びに利点は、以下の詳細な説明及び添付の特許請求の範囲を読むことにより当業者に明らかとなるであろう。疑義を回避するため、本発明の或る一つの態様のいかなる特徴も本発明のあらゆる他の態様において利用され得る。「含む、含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」の文言は、「含む、含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」を意味することが意図されるが、必ずしも「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」又は「で構成される（ｃｏｍｐｏｓｅｄ ｏｆ）」を意味することを意図するものではない。言い換えれば、列挙される工程又は選択肢は、網羅的である必要はない。以下の説明に提示される例は、本発明を明確にする意図であって、それらの例自体に本発明を限定することを意図するものではないことに留意されたい。同様に、全てのパーセンテージは、別段の指示がない限り重量／重量パーセンテージである。操作例及び比較例以外、又は別段の明確な指示がない限り、本明細書において材料の量若しくは反応条件、材料及び／又は使用の物理的特性を示す全ての数字は、「約」の文言によって修飾されると理解される。別段の明示のない限り、「ｘ〜ｙ」の形式で表現される数値範囲は、ｘ及びｙを含むと理解される。特定の特性に関して複数の好ましい範囲が「ｘ〜ｙ」の形式で記載される場合、異なる終点を組み合せる全ての範囲もまた考慮されることが理解される。

抽出物は、画分及び抽出材料の誘導体を含む植物起源から抽出された材料を意味する。抽出物は、通常、好適な溶媒、例えば水によって抽出された場合、最初は液体の形態である。しかしながら、その後、液体形態の抽出物から溶媒を分離することによって、抽出物は固体形態に調製され得る。

本明細書で使用される「パーソナルケア組成物」は、ヒト又は動物の身体の外部表面（好ましくはヒトの身体であって、皮膚、頭皮、毛髪及び口腔を含む）に対する局所適用のための組成物を含むことを意味する。かかる組成物は、一般的には、洗い流さない又は洗い流すものに分類される場合があり、また免疫、外観、洗浄、臭気コントロール、保湿又は総合的な審美を改善するためヒト身体に塗布される任意の製品を含む。洗い流さない製品であることが好ましい。本発明のスキンケア用組成物は、液体、ローション、クリーム、ゲル、又はトナー（ｔｏｎｅｒ）の形態であってもよく、器具又はフェイスマスク、パッド、若しくはパッチを用いて塗布されてもよい。上記組成物は、クリーム、ローション、又はゲルの形態であることが好ましい。本明細書で使用される「皮膚」は、顔及び身体（例えば、首、胸、背中、腕、腋窩、手、足、及び臀部）の皮膚を含むことを意味する。

また、本発明の組成物は、毛髪及び頭皮への塗布とも関連する。頭皮又は毛髪へのかかる塗布のための製品は、一般的には毛髪線維に対して強度を提供する利益、及び抗フケの利益を提供する。ヘアケア組成物は、ヘアオイル、ヘアケアジェル及びクリームの形態、また、シャンプー及びコンディショナー等の洗い流す製品の形態で提供される。

また、本発明の組成物は、口腔ケアに対する利益でもある。練り歯磨き、歯磨き粉、洗口剤等の多くの口腔ケア製品は、洗い流すタイプであり、これらの種類の製品に加えて、本発明は歯及び歯肉のケア用に洗い流さないゲル、クリーム及び軟膏の形態で製剤化され得る。

本発明はアロエベラの抽出物に関する。

アロエ・バルバデンシス・ミラー（Ａｌｏｅ ｂａｒｂａｄｅｎｓｉｓ Ｍｉｌｌｅｒ）としても知られるアロエベラは、ユリ科に属し、数百の種を含む。アロエは栽培においてのみ見られ、天然の集団を有しない。アロエは、約６０ｃｍ〜１００ｃｍの高さまで成長する、茎がないか又は非常に茎の短い多肉植物である。葉は分厚く、多肉質で、緑色から灰色がかった緑色である。アロエベラと関連する多くの健康上の利益は、葉のゲルに含有される多糖に起因する。化学分析は、アロエゲルが幾つかのブドウ糖及び他の糖を有するマンノースポリマーを含有し、それらのうち最も重要なものはアセマンナンであることを明らかにする。これら以外に、糖タンパク質、酵素、アミノ酸、ビタミン、及びミネラル等の他の成分が生じることが知られている。アロエベラからの抽出物は化粧品及び代替医療の産業において幅広く使用され、若返り又は癒しの特性を有するとして市販されている。

本発明の抽出物の調製に対しては、アロエベラの葉が特に好ましい。

本発明における使用に有用なアロエベラ抽出物は、（ｉ）６０重量％〜９５重量％の２ｋＤａ〜３ｋＤａの範囲の分子量を有する多糖と、５％未満のポリフェノールとを含み、該多糖はトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）によって加水分解される。一般的に入手可能なアロエベラの水性抽出物は、３０重量％〜６０重量％の１０ｋＤ未満の分子量を有する多糖、及び１０重量％〜２０重量％のポリフェノールを含む。本発明者らは、この抽出物を製造して、低分子量の多糖及び更に少量のポリフェノールを有する特定の画分を調製した。本発明の抽出物は、２重量％未満のポリフェノールを含むことが好ましい。本発明者らは、トリフルオロ酢酸によってこの画分を更に選択的に加水分解して、実質的にほとんどの側鎖単糖を除去し、より一層有効な活性物質を調製した。本発明の目的に有用な選択的な多糖は、ポリマー骨格

を含むことが好ましい。

好ましい態様として、上記抽出物の多糖画分は、３０％超の上のポリマー骨格を有する多糖を含む。本発明者らは、この画分が本発明の目的でタイトジャンクションを増強するのに非常に有効であることを見出した。

更に、本発明の好ましい態様として、
（ｉ）アロエベラを水で抽出する工程、
（ｉｉ）上記抽出物を１０ＫＤカットオフフィルターに通して低分子量画分を得る工程、
（ｉｉｉ）エタノールの添加によって上記低分子量画分中の上記多糖を沈殿させる工程、
（ｉｖ）トリフルオロ酢酸で上記多糖を加水分解する工程、
（ｖ）上記過剰な酸を除去する工程、及び
（ｖｉ）エタノールを使用して上記加水分解された多糖を沈殿させる工程、及び
（ｖｉｉ）上記沈殿物を乾燥して抽出物を得る工程、
を含む方法を使用して得ることができるアロエベラの抽出物が提供される。

トリフルオロ酢酸は、蒸発処理を使用して上記混合物から除去されることが好ましい。

理論に束縛されることを望むものではないが、本発明者らは、本発明の利益は、細胞内タイトジャンクション（ＴＪ）を増強することによって起こると考える。上皮におけるＴＪの存在は、これがバリアとして作用し、病原体及び外来物質がヒト体内に入ることを阻止することを可能とする。ＴＪは膜貫通タンパク質及び細胞質タンパク質で構成される多タンパク質複合体である。ＴＪバリアは病原体によって妨害され、病原体はＴＪを除去して宿主組織へと入り込むための種々の戦略を進化させた。病原体の感染によるＴＪの喪失の主な影響は、腸における下痢のような疾患、口腔における歯肉炎に見ることができる。口、腸、皮膚の組織の健康及び衛生は、ＴＪの安定性に依存する。本発明者らは、ＴＪと相互作用しこれらの安定性及び堅固さを増強して上に言及される利益を提供する、アロエベラ抽出物の特定の画分を調製した。

本発明の好ましい態様によれば、（ｉ）０．１重量％〜１０重量％の本発明の抽出物と、（ｉｉ）化粧学的に許容可能な基剤とを含むパーソナルケア組成物が提供される。

上記組成物は、０．１重量％〜５重量％の抽出物を含むことが好ましい。化粧学的に許容可能な基剤は、皮膚、口腔、毛髪又は頭皮のケアのための製品を提供するものである。

化粧学的に許容可能な基剤は、特に、クリーム又はローションとして調製される場合、脂肪酸（また脂肪酸の石鹸であってもよい）を含むことが好ましい。脂肪酸が存在する場合、該組成物の１重量％〜２５重量％、好ましくは３重量％〜２０重量％で含まれることが好ましい。石鹸が含まれる場合、石鹸は好ましくは０．１％〜１０％、より好ましくは０．１％〜３％で添加される。本発明の組成物における使用に対する脂肪酸のうち、Ｃ_１２〜Ｃ_２０の脂肪酸が特に好ましい。更により好ましい脂肪酸は、Ｃ_１４〜Ｃ_１８の脂肪酸である。クリームでは、脂肪酸は実質的にステアリン酸とパルミチン酸の混合物であることが好ましい。クリーム基剤中の石鹸は、ナトリウム塩又はカリウム塩等の脂肪酸のアルカリ金属塩を含む。石鹸は、脂肪酸混合物のカリウム塩であることが好ましい。バニシングクリーム基剤中の脂肪酸は、実質的に（一般的に約９０％〜９５％）ステアリン酸とパルミチン酸の混合物であるヒストリック酸（ｈｙｓｔｒｉｃ ａｃｉｄ）を使用して調製されることが多い。そのため、上記組成物を調製するためヒストリック酸及びその石鹸を包含することは、本発明の範囲に含まれる。化粧学的に許容可能な基剤は、通常、該組成物の１０重量％〜９９．９重量％、好ましくは５０重量％〜９９重量％である。化粧学的に許容可能な基剤は水を含むことが好ましい。水は、該組成物の３５重量％〜９０重量％、より好ましくは５０重量％〜８５重量％、更に好ましくは５０重量％〜８０重量％で含まれることが好ましい。

皮膚又は頭皮のケア組成物がゲルとして調製される場合、ゲルは、主に５０％〜９９％の多量の水を含み、この水は１又は複数のポリマーによって増粘される。天然又は合成に由来するポリマーを使用してもよい。合成起源のものである場合、ポリアクリレートポリマーが好ましい。

また、本発明による皮膚又は頭皮のケア組成物は、他の希釈剤を含んでもよい。希釈剤は、該組成物中に存在する他の材料に対して分散剤又は担体として作用することから、組成物が皮膚に塗布された場合にそれらの分散を促進する。水以外の希釈剤として、液体又は固体の軟化剤、溶媒、湿潤剤、増粘剤、及び粉末が挙げられる。

本発明の組成物は、幅広い他の任意の成分を含むことができる。その全体が参照により本明細書で援用されるＴｈｅ ＣＴＦＡ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９２は、本発明の組成物における使用に適した、スキンケア産業において一般的に使用される幅広い非限定的な化粧学的及び薬学的な成分を記載する。

例として、抗酸化剤、結合剤、生物学的添加物、緩衝剤、着色剤、増粘剤、ポリマー、収斂剤、芳香剤、湿潤剤、乳白剤、コンディショナー、剥離剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、天然抽出物、エッセンシャルオイル、皮膚感覚剤（ｓｋｉｎ ｓｅｎｓａｔｅｓ）、皮膚平滑剤（ｓｋｉｎ ｓｏｏｔｈｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、及び皮膚治癒剤（ｓｋｉｎ ｈｅａｌｉｎｇ ａｇｅｎｔ）が挙げられる。

上記組成物が口腔ケア用途を対象とする場合、化粧学的に許容可能な基剤は経口的に許容可能な基剤である。経口的に許容可能な基剤は、水、炭酸カルシウム、シリカ、又は経口的に許容可能な界面活性剤から選択される。好ましい経口的に許容可能な基剤は、水と界面活性剤の混合物である。好ましい経口的に許容可能な界面活性剤は、アルカリ金属硫酸アルキル、又はベタインである。経口的に許容可能な基剤は、経口ケア組成物が提供される形式に依存する。また、本発明の組成物に含まれる経口的に許容可能な基剤の量は、基剤が含まれる場合の種類に依存し、一般的には該組成物の０．０５重量％〜９９．９重量％、好ましくは１重量％〜９０重量％、更に好ましくは５重量％〜７０重量％の幅広い範囲である。本発明の組成物それ自体の好適な形式は、消毒用洗口剤、練り歯磨き又は歯磨き粉、好ましくは練り歯磨き又は歯磨き粉である。

洗口剤
上記組成物が消毒用洗口剤として製剤化される場合、経口的に許容可能な基剤は、水と界面活性剤の混合物である。本発明の消毒用洗口剤組成物は、該組成物の好ましくは０．０５重量％〜１０重量％、より好ましくは０．０５重量％〜８重量％、最も好ましくは０．５重量％〜５重量％の界面活性剤を含む。界面活性剤は、好ましくはカチオン性、アニオン性、又は双性の群、より好ましくはカチオン性の群である。アニオン界面活性剤が存在する場合、アルキルスルホン酸、脂肪酸、又はアルキルエーテル硫酸塩のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩から選択されることが好ましい。双性イオン界面活性剤が存在する場合、ベタイン、スルホベタイン、ヒドロキシルスルホベタイン、又はアミノカルボキシレートから選択されることが好ましい。カチオン界面活性剤が存在する場合、塩化ベンザルコニウム、塩化アルキルピリジニウム、又は第４級アンモニウムジェミニ型界面活性剤である。

練り歯磨き
本発明の組成物は、練り歯磨きの形式で提供されてもよい。該組成物が練り歯磨きである場合、経口的に許容可能な基剤は、炭酸カルシウム又は研磨用シリカであってもよい研磨剤である。炭酸カルシウムが研磨剤である場合、練り歯磨きは不透明なペースト形式である。研磨用シリカを使用する場合、練り歯磨きは通常、透明なゲル形式で提供される。また、練り歯磨きは、該組成物の２重量％〜１５重量％の界面活性剤を含むことが好ましい。好ましい界面活性剤は、本質的にアニオン性又は両性である。アニオン界面活性剤は、好ましくはアルカリ金属の硫酸アルキル、より好ましくはラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）である。また、アニオン界面活性剤の混合物を採用してもよい。両性界面活性剤は、好ましくはベタイン、より好ましくはアルキルアミドプロピルベタイン（アルキル基が直鎖Ｃ１０〜Ｃ１８の鎖である）、最も好ましくはコカミドプロピルベタイン（ＣＡＰＢ）である。また、両性界面活性剤の混合物を採用してもよい。口腔ケア用途における好適な界面活性剤の濃度は、一般的には、組成物総重量の約２重量％〜約１５％、好ましくは約２．２重量％〜約１０重量％、より好ましくは約２．５重量％〜約５重量％である。

不透明な練り歯磨き
炭酸カルシウムが研磨剤である場合、通常、該組成物の１５重量％〜７０重量％、より好ましくは３０重量％〜６０重量％で存在する。

炭酸カルシウムに加えて、研磨作用の増強のため不透明な練り歯磨き中に研磨用シリカを含んでもよい。研磨用シリカは、４％〜１５％、好ましくは６％〜１２％、更に好ましくは７％〜１０％で含まれてもよい。代替的には、パーライトを該組成物の０．０１重量％〜２重量％、好ましくは０．１重量％〜０．８重量％、更に好ましくは０．３重量％〜０．７重量％含んでもよい。

これらの練り歯磨き中の水は、一般的には、上記組成物の１５重量％〜４０重量％、好ましくは２０重量％〜３０重量％含まれる。

好ましい組成物は、湿潤剤、例えば、キシリトール、グリセロール、又はソルビトールを含む。グリセロール及びソルビトールが特に好ましい。該組成物は、０．１重量％〜２０重量％の湿潤剤を含むことが好ましい。より好ましい組成物は、１重量％〜１５重量％の湿潤剤を含み、更に好ましい組成物は５重量％〜１３重量％の湿潤剤を含む。

ゲル練り歯磨き
ゲル練り歯磨きを調製するための好ましい組成物は、研磨用シリカを含む。研磨用シリカは、１．４１〜１．４７、好ましくは１．４３５〜１．４４５の範囲の低い屈折率、より好ましくは重量平均粒子径５μｍ１５μｍ、ＢＥＴ（窒素）表面積１０ｍ^２／ｇ〜１００ｍ^２／ｇ、及び約７０〜１５０ｃｍ^３／１００ｇの吸油量を有することが好ましい。該組成物中のこれらのシリカの量は、一般的には２重量％〜６０重量％、通常２重量％〜２０重量％、より好ましくは５重量％〜１２重量％の範囲である。

また、増粘シリカをゲル練り歯磨きに組み込んでもよい。増粘シリカは、通常、該組成物の４重量％〜１２重量％、好ましくは５重量％〜１０重量％組み込まれる。これらの練り歯磨き中の水は、一般的には、該組成物の８重量％〜１４重量％、好ましくは８重量％〜１０重量％含まれる。これらの水の量は、他の成分、例えばソルビトールの水溶液から該組成物に組み込まれる水を除く。

また、任意の種類の練り歯磨き（不透明又はゲルタイプ）に対する組成物は、虫歯予防剤、結合剤、増粘剤、香料、安定化剤、ポリマー、ビタミン、緩衝剤及び抗歯石剤を含んでもよい。

本発明の更に別の態様によれば、本発明の組成物を塗布する工程を含むヒト又は動物の身体の外部表面に対して増強した免疫を提供する方法が提供される。増強された免疫とは、従来のアロエベラの水性抽出物によって提供されるものよりも優れた免疫を意味する。

本発明の更に別の態様によれば、ヒト又は動物の身体の外部表面に対して増強した免疫を提供するため、０．１％〜１０％の本発明の抽出物と、化粧学的に許容可能な基剤とを含むパーソナルケア組成物を提供する。

本発明の更に別の態様によれば、ヒト又は動物の身体の外部表面に対して増強した免疫を与えるための上記抽出物の使用を提供する。

本発明の更に別の態様によれば、本発明のパーソナルケア組成物の調製における本発明の抽出物の使用を提供する。

上記使用は、治療的ではないことが好ましい。

ここで、以下の非限定的な実施例を活用して本発明を説明する。

［実施例］
実施例Ａ〜Ｄ、及び実施例１、２：細胞内タイトジャンクションの増強における様々なアロエベラ画分の効能
様々なアロエベラ画分を以下に記載されるように調製した。

アロエ画分の調製：
噴霧乾燥したアロエベラ葉ゲルの粉末（水性抽出物）を商業的な供給元から得た。その後、これを水に溶解した。１０ＫＤ未満の画分をサイズ排除及び遠心分離によって調製した。その後、この画分を濃縮して容量を減少し（およそ５ｍｌから１ｍｌへ）、５倍容量のエタノールを該溶液に添加して多糖を沈殿させた。その後、溶液を完全に沈殿するまで３０分置いた。該溶液を遠心分離して沈殿物を収集した。沈殿物をエタノールで繰り返し洗浄（３回）した後、乾燥してアロエ多糖画分（Ｆ１）を得た。

トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を使用して（２．５ｍｌの２Ｍ ＴＦＡ中１ｇのＦ１）還流条件下で２時間に亘り、Ｆ１画分を加水分解した。加水分解後、乾燥するまで溶液を濃縮した。トルエン／メタノールを添加して繰り返し取り除くことによってＴＦＡを完全に除去した。

乾燥した材料に１．５ｍｌの水を添加して、材料を完全に溶解した。５倍容量のエタノールを添加して、部分的に加水分解された多糖を沈殿させた。遠心分離によってこの溶液から多糖を分離し、エタノールで繰り返し洗浄した後、乾燥して、画分Ｆ２と示す、最も好ましい画分を得た。

実施例−Ａ：いかなる処理もしていない細胞を示す、「対照」試料。

実施例−Ｂ：水に溶解した５００μｇ／ｍｌの濃度のアロエベラゲル粉末の水性抽出物で細胞を処理した。

実施例−Ｃ：水に溶解した５００μｇ／ｍｌの濃度の１０ＫＤ未満の画分のアロエベラゲル粉末で細胞を処理した。

実施例−Ｄ：５００μｇ／ｍｌの濃度の画分Ｆ１（上に記載される手順で調製した）で細胞を処理した。この画分の分子量はおよそ２ＫＤａであった。

実施例−１：上に記載される５００μｇ／ｍｌの濃度の画分Ｆ２で細胞を処理した。この画分の分子量はおよそ２ＫＤａである。この画分中の多糖の％を測定したところ約９１％であった。この画分中のポリフェノール含有量は２％未満であった。

以下の手順を使用して、上の試料を、それらの細胞内タイトジャンクションを増強する能力について分析した。

ＴＥＥＲの測定：
ＴＥＥＲは、経上皮電気抵抗を表す。これは、タイトジャンクションバリアの安定性を測定する。手順は以下の通りである。

１．Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ細胞培養インサート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、カタログ番号：ＰＩＨＴ１２Ｒ４８）を２４ウェルプレートに入れた。

２．５００μｌの培地をウェル内であるがインサートの外側の空間に分配した。

３．ＫＧＭ（ＬＯＮＺＡ、カタログ番号：ＣＣ３１１１）中のケラチノサイト（ＬＯＮＺＡ、カタログ番号１９２９０７）をトリプシン処理し、再懸濁した。８０，０００細胞／ウェル（５００μｌの培地中）をインサートに播種し、５％ＣＯ_２中３７℃でインキュベートした。

４．１日目、各ウェルにおいて経上皮電気抵抗を測定した（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ製のＭｉｌｌｉｃｅｌｌ ＥＲＳ−２ Ｖｏｌｔｏｈｍｍｅｔｅｒを使用）。

５．ウェルからの使用済み培地を新しいＫＧＭ／活性物質（チャンバー内２００μｌ及びチャンバー外８００μｌ）で置き換え、５％ＣＯ_２中３７℃でインキュベートした。

６．工程４〜工程５を５日目まで繰り返した。

７．次亜塩素酸ナトリウム（細胞の安全処分の一部として）を添加することにより本実験を終了した。

表中のデータは、５日目のＴＥＥＲを示し、これは５日の終わりのバリア安定性と相関する。

ＴＥＥＲ値を使用して測定される効能に対するデータを表１に要約する。

表１のデータは、本発明によるアロエベラ画分（実施例−１）が、様々な他の画分と比較して改善された免疫の指標である、非常に増強されたタイトジャンクション増強を提供することを示す。

別の一連の実験を行って、以下に開示される他の画分と本発明の画分の利益を識別した。

実施例Ｅ：細胞を、セルラーゼによって加水分解した５００μｇ／ｍｌの濃度のＦ１画分（上に記載される）で細胞を処理した。この目的のため、上に記載されるものと同じ濃度でＴＦＡをセルラーゼ（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｃ１１８４）で置き換えた。

実施例Ｆ：先の欄で記載される１０ＫＤ未満の画分を除去した後に得られた（１０ＫＤ超の画分）５００μｇ／ｍｌの濃度のアロエベラゲル水性抽出物で細胞を処理した。

実施例２：上に記載される５００μｇ／ｍｌの濃度の画分Ｆ２で細胞を処理した。この画分の分子量はおよそ２ＫＤａである。この画分中の多糖％を測定したところ約９１％であった。この画分中のポリフェノール含有量は２％未満であった。

実験のプロトコル及びＴＥＥＲ値の測定は上記と同じである。

これらの実験の結果を以下の表２に要約する。

上の表より、本発明によるアロエベラ画分（ＴＦＡで加水分解された多糖を含む、実施例２）は、実施例Ｅ、Ｆ、及びＧと比較した場合により増強されたタイトジャンクションの増強を提供することが明らかである。

Claims (8)

1. （ｉ）６０重量％〜９５重量％の２ｋＤａ〜３ｋＤａの範囲の分子量を有する加水分解された多糖と、
   （ｉｉ）５重量％未満のポリフェノールと、
   を含むアロエベラの抽出物であって、
   前記多糖がトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）によって加水分解される、アロエベラの抽出物。
2. ２重量％未満のポリフェノールを含む、請求項１に記載の抽出物。
3. 前記多糖の３０重量％超がポリマー骨格
   

   

   を含む、請求項１又は２に記載の抽出物。
4. （ｉ）アロエベラを水で抽出する工程、
   （ｉｉ）前記抽出物を１０ＫＤカットオフフィルターに通して低分子量画分を得る工程、
   （ｉｉｉ）エタノールの添加によって前記低分子量画分中の前記多糖を沈殿させる工程、
   （ｉｖ）トリフルオロ酢酸で前記多糖を加水分解する工程、
   （ｖ）前記過剰な酸を除去する工程、及び
   （ｖｉ）エタノールを使用して前記加水分解された多糖を沈殿させる工程、及び
   （ｖｉｉ）前記沈殿物を乾燥して抽出物を得る工程、
   を含む方法を使用して得ることができる、請求項１〜３のいずれか一項に記載のアロエベラの抽出物。
5. アロエベラの葉を使用する、請求項４に記載の抽出物。
6. （ｉ）０．１重量％〜１０重量％の請求項１〜５のいずれか一項に記載の抽出物と、
   （ｉｉ）化粧学的に許容可能な基剤
   とを含む、パーソナルケア組成物。
7. 請求項６に記載の組成物を塗布する工程を含むヒト又は動物の身体の外部表面に対して増強された免疫を提供する方法。
8. ヒト又は動物の身体の外部表面に増強された免疫を付与する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の抽出物の使用。