JP2017510274A5 - - Google Patents

Description

不完全に精製されたスクロースを含むｇｔｆ反応溶液（実施例２〜１２）は、白色の精製されたスクロースを含むｇｔｆ反応溶液（実施例１）と同一のレベルで、又は更にはより良好に実施し得ることを、表２のデータは概して示している。ほとんどの場合、不完全に精製されたスクロースを含む反応は、白色の精製されたスクロースを含む反応の速度とほぼ同等又は完全に同等である反応速度を有した。また、不完全に精製されたスクロースを含むいくつかの反応は、白色の精製されたスクロースを使用して観察されるものより大きいＤＰ_Ｗ及び／又は収率を有するグルカンを生成した（例えば、実施例２〜６）。
従って、複数の異なる種類の不完全に精製されたスクロースを使用して、ポリアルファ−１，３−グルカンを酵素的に生成することができる。

以上、本発明を要約すると下記のとおりである。
１．水と、スクロースと、少なくとも５０％のアルファ−１，３グリコシド結合及び少なくとも１００の重量平均重合度（ＤＰ_ｗ）を有する不溶性ポリアルファ−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素とを含む反応溶液であって、前記スクロースは、精製されていないか、又は部分的に精製され、前記反応溶液によるポリアルファ−１，３−グルカンの収率は、前記反応溶液において生成物に変換されたスクロースの重量の少なくとも７％である、反応溶液。
２．前記スクロースは甜菜に由来し、且つ、結晶化されていない、上記１に記載の反応溶液。
３．前記スクロースはサトウキビに由来し、且つ、（ｉ）結晶化されていないか、又は（ｉｉ）３つ以下の結晶化工程を使用して結晶化されている、上記１に記載の反応溶液。
４．前記スクロースは、１５０を超えるＩＣＵＭＳＡ値を有する、上記１に記載の反応溶液。
５．前記反応溶液の相対反応速度は、水と、白色の精製されたスクロースと、前記グルコシルトランスフェラーゼ酵素とを含む反応溶液の反応速度に対して少なくとも０．８であ
る、上記１に記載の反応溶液。
６．前記反応溶液によって生成された前記ポリアルファ−１，３−グルカンは、９３未満のＬ^＊値を有する、上記１に記載の反応溶液。
７．前記グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、配列番号４、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号２０、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、又は配列番号３４と少なくとも９０％相同性であるアミノ酸配列を含む、上記１に記載の反応溶液。
８．（ａ）少なくとも水、スクロース、及びグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させる工程であって、前記スクロースは、精製されていないか、又は部分的に精製され、これにより、少なくとも５０％のアルファ−１，３グリコシド結合及び少なくとも１００の重量平均重合度（ＤＰ_ｗ）を有するポリアルファ−１，３−グルカンが生成される、工程と、
ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成された前記ポリアルファ−１，３−グルカンを単離する工程と
を含む、不溶性ポリアルファ−１，３−グルカンを生成する方法であって、ポリアルファ−１，３−グルカンの収率は、工程（ａ）において生成物に変換されたスクロースの重量の少なくとも７％である、方法。
９．前記スクロースは甜菜に由来し、且つ、結晶化されていない、上記８に記載の方法。１０．前記スクロースはサトウキビに由来し、且つ、（ｉ）結晶化されていないか、又は（ｉｉ）３つ以下の結晶化工程を使用して結晶化されている、上記８に記載の方法。
１１．前記スクロースは、１５０を超えるＩＣＵＭＳＡ値を有する、上記８に記載の方法。
１２．工程（ａ）でポリアルファ−１，３−グルカンを生成する相対反応速度は、白色の精製されたスクロースが、前記精製されていないか、又は部分的に精製されたスクロースの代わりに使用される場合、工程（ａ）の反応速度に対して少なくとも０．８である、上記８に記載の方法。
１３．工程（ｂ）で単離された前記ポリアルファ−１，３−グルカンは、９３未満のＬ^＊値を有する、上記８に記載の方法。
１４．前記グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、配列番号４、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号２０、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、又は配列番号３４と少なくとも９０％相同性であるアミノ酸配列を含む、上記８に記載の方法。
１５．前記ポリアルファ−１，３−グルカンは、９３未満のＬ^＊値を有する、上記８に記載の方法によって生成される単離されたポリアルファ−１，３−グルカン。

Claims (3)

1. 水と、スクロースと、少なくとも５０％のアルファ−１，３グリコシド結合及び少なくとも１００の重量平均重合度（ＤＰ_ｗ）を有する不溶性ポリアルファ−１，３−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素とを含む反応溶液であって、前記スクロースは、精製されていないか、又は部分的に精製され、前記反応溶液によるポリアルファ−１，３−グルカンの収率は、前記反応溶液において生成物に変換されたスクロースの重量の少なくとも７％である、反応溶液。
2. （ａ）少なくとも水、スクロース、及びグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させる工程であって、前記スクロースは、精製されていないか、又は部分的に精製され、これ
   により、少なくとも５０％のアルファ−１，３グリコシド結合及び少なくとも１００の重量平均重合度（ＤＰ_ｗ）を有するポリアルファ−１，３−グルカンが生成される、工程と、
   ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成された前記ポリアルファ−１，３−グルカンを単離する工程と
   を含む、不溶性ポリアルファ−１，３−グルカンを生成する方法であって、ポリアルファ−１，３−グルカンの収率は、工程（ａ）において生成物に変換されたスクロースの重量の少なくとも７％である、方法。
3. 前記ポリアルファ−１，３−グルカンは、９３未満のＬ^＊値を有する、請求項２に記載の方法によって生成される単離されたポリアルファ−１，３−グルカン。