JP2016510998A5

JP2016510998A5 -

Info

Publication number: JP2016510998A5
Application number: JP2016501146A
Authority: JP
Filing date: 2014-03-11
Publication date: 2017-04-13
Anticipated expiration: 2034-03-11

Description

本明細書中で記載される実施形態および態様のいずれもが、他に指示がない限り、文脈から別段明らかでない限り、互いに共同して使用され得る。他の実施形態は、続く詳細な記載を精査して当業者に明らかになる。以下の詳細な記載は、特許請求される本発明を制限しない、本発明の種々の実施形態の代表例を含む。添付の図面は、本明細書の一部を構成し、記載と一緒に、実施形態を例証するためのみに働き、本発明を制限しない。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
内在性Ｈ−２Ｄ遺伝子座にキメラヒト／マウスＭＨＣＩポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むマウスであって、
前記キメラポリペプチドは、ヒトＨＬＡ−Ｂ２７ポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメイン、およびα３ドメイン、マウスＨ−２Ｄポリペプチドの膜貫通ドメイン、ならびにマウスＨ−２Ｄポリペプチドの細胞質ドメインを含み、
前記マウスは、前記キメラポリペプチドを発現する、
マウス。
（項目２）
前記マウスは、内在性Ｈ−２Ｄ遺伝子座からマウスＨ−２Ｄポリペプチドの機能的な細胞外ドメインを発現しない、請求項１に記載のマウス。
（項目３）
前記内在性Ｈ−２Ｄ遺伝子座は、マウスＨ−２Ｄポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメイン、およびα３ドメインをコードする内在性ヌクレオチド配列を欠く、請求項１に記載のマウス。
（項目４）
前記ヌクレオチド配列は、内在性マウスＨ−２Ｄリーダーヌクレオチド配列を含む、請求項１に記載のマウス。
（項目５）
前記ヌクレオチド配列は、内在性マウス調節エレメントに作動可能に連結している、請求項１に記載のマウス。
（項目６）
前記ヌクレオチド配列は、ヒトＨＬＡ−Ｂ２７ α１エクソン、ヒトＨＬＡ−Ｂ２７ α１−α２イントロン、ヒトＨＬＡ−Ｂ２７ α２エクソン、ヒトＨＬＡ−Ｂ２７ α２−α３イントロン、およびヒトＨＬＡ−Ｂ２７ α３エクソンを含む、請求項１に記載のマウス。
（項目７）
内在性β２ミクログロブリン遺伝子座にヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドをコードするヌクレオチド配列をさらに含み、前記ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドを発現する、請求項１から６のいずれか一項に記載のマウス。
（項目８）
前記マウスは、内在性β２ミクログロブリン遺伝子座から機能的な内在性β２ミクログロブリンを発現しない、請求項７に記載のマウス。
（項目９）
前記ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列は、内在性マウスβ２ミクログロブリン調節エレメントに作動可能に連結している、請求項８に記載のマウス。
（項目１０）
前記ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列は、ヒトβ２ミクログロブリン遺伝子のエクソン２〜エクソン４に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項７に記載のマウス。
（項目１１）
前記ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列は、ヒトβ２ミクログロブリン遺伝子のエクソン２、エクソン３、およびエクソン４に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項７に記載のマウス。
（項目１２）
内在性ＭＨＣＩ遺伝子座に、２つまたはそれ超のキメラヒト／非ヒトＭＨＣＩポリペプチドをコードする２つまたはそれ超のヌクレオチド配列を含む非ヒト動物であって、
前記キメラポリペプチドは、ヒトＭＨＣＩポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメイン、およびα３ドメイン、非ヒトＭＨＣＩポリペプチドの膜貫通ドメイン、ならびに非ヒトＭＨＣＩポリペプチドの細胞質ドメインを含み、
前記動物は、前記２つまたはそれ超のキメラヒト／非ヒトＭＨＣＩポリペプチドを発現する、
非ヒト動物。
（項目１３）
前記動物は、げっ歯動物である、請求項１２に記載の動物。
（項目１４）
前記げっ歯動物は、マウスまたはラットである、請求項１３に記載の動物。
（項目１５）
前記げっ歯動物はマウスであり、前記非ヒトＭＨＣＩポリペプチドは、マウスＨ−２Ｄポリペプチド、マウスＨ−２Ｋポリペプチド、またはマウスＨ−２Ｌポリペプチドである、請求項１４に記載の動物。
（項目１６）
前記動物は、機能的な内在性ＭＨＣＩポリペプチドを発現しない、請求項１２に記載の非ヒト動物。
（項目１７）
内在性ＭＨＣＩ遺伝子座に、キメラＨＬＡ−Ａ２／Ｈ−２Ｋポリペプチドをコードするヌクレオチド配列およびキメラＨＬＡ−Ｂ２７／Ｈ−２Ｄポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むマウスであって、
前記マウスは、前記キメラＨＬＡ−Ａ２／Ｈ−２ＫおよびＨＬＡ−Ｂ２７／Ｈ−２Ｄポリペプチドを発現する、マウス。
（項目１８）
前記マウスは、機能的な内在性ＭＨＣＩポリペプチドを発現しない、請求項１７に記載のマウス。
（項目１９）
前記キメラＨＬＡ−Ａ２／Ｈ２Ｋポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列は、内在性Ｈ−２Ｋ遺伝子座に位置し、前記キメラＨＬＡ−Ｂ２７／Ｈ−２Ｄポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列は、内在性Ｈ−２Ｄ遺伝子座に位置する、請求項１７に記載のマウス。
（項目２０）
キメラヒト／非ヒトＭＨＣＩポリペプチドをコードするキメラＭＨＣＩ遺伝子座であって、
非ヒトＭＨＣＩポリペプチドの膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインをコードする第２のヌクレオチド配列に作動可能に連結したヒトＭＨＣＩポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメイン、およびα３ドメインをコードする第１のヌクレオチド配列
を含み、キメラヒト／非ヒトＭＨＣＩポリペプチドを発現する、遺伝子座。
（項目２１）
前記ＭＨＣＩ遺伝子座は、非ヒト動物のゲノム内の内在性ＭＨＣＩ位に位置する、請求項２０に記載の遺伝子座。
（項目２２）
前記ヒトＭＨＣＩポリペプチドは、ＨＬＡ−Ａ２またはＨＬＡ−Ｂ２７である、請求項２１に記載の遺伝子座。
（項目２３）
前記非ヒトＭＨＣＩポリペプチドはマウスＨ−２ＫポリペプチドまたはマウスＨ−２Ｄポリペプチドである、請求項２０に記載の遺伝子座。
（項目２４）
マウスの内在性Ｈ−２Ｄ遺伝子座を改変して、キメラヒト／マウスＭＨＣＩポリペプチドを発現させる方法であって、前記内在性Ｈ−２Ｄ遺伝子座において、マウスＨ−２Ｄポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメイン、およびα３ドメインをコードするヌクレオチド配列を、ヒトＨＬＡ−Ｂ２７ポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメイン、およびα３ドメインをコードするヌクレオチド配列で置き換える工程を含む、方法。
（項目２５）
前記マウスは、内在性Ｈ−２Ｄ遺伝子座から、マウスＨ−２Ｄポリペプチドの前記細胞外ドメインを発現しない、請求項２４に記載の方法。
（項目２６）
前記マウスは、前記ヒトＨＬＡ−Ｂ２７ポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメイン、およびα３ドメインを発現する、請求項２４に記載の方法。
（項目２７）
前記マウスは、マウスＨ−２Ｄポリペプチドの膜貫通ドメインおよび前記マウスＨ−２Ｄポリペプチドの細胞質ドメインを発現する、請求項２４に記載の方法。
（項目２８）
前記置き換えは、単一のＥＳ細胞において行われ、前記単一のＥＳ細胞は、マウス胚に導入されて、マウスを作製する、請求項２４に記載の方法。
（項目２９）
遺伝子改変されたマウスを作製する方法であって、
第１のマウスのＨ−２Ｄ遺伝子座を、キメラヒト／マウスＭＨＣＩポリペプチドを発現するように改変する工程であって、前記内在性マウスＨ−２Ｄ遺伝子座において、マウスＨ−２Ｄポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメイン、およびα３ドメインをコードするヌクレオチド配列を、ヒトＨＬＡ−Ｂ２７ポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメイン、およびα３ドメインをコードするヌクレオチド配列で置き換える工程を含む工程；
第２のマウスのβ２ミクログロブリン遺伝子座を、ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドを発現するように改変する工程であって、前記内在性マウスβ２ミクログロブリン遺伝子座において、マウスβ２ミクログロブリンポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を、ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドをコードするヌクレオチド配列で置き換える工程を含む工程；ならびに
前記第１のマウスおよび前記第２のマウスを交配して、そのゲノムに、キメラＨＬＡ−Ｂ２７／Ｈ−２Ｄポリペプチドをコードする第１のヌクレオチド配列、およびヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドをコードする第２のヌクレオチド配列を含む遺伝子改変されたマウスを生成する工程であって、前記遺伝子改変されたマウスは、前記キメラＨＬＡ−Ｂ２７／Ｈ−２Ｄポリペプチドおよび前記ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドを発現する工程
を含む、方法。
（項目３０）
前記第２のヌクレオチド配列は、ヒトβ２ミクログロブリン遺伝子のエクソン２、３、および４に示されるヌクレオチド配列およびマウスβ２ミクログロブリン遺伝子のエクソン１に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項２９に記載の方法。