JP2016105730A - 糖尿病の処置のためのマルチ・トランスジェニック・ブタ - Google Patents
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Abstract
Description
この本特許出願は、米国特許法§119の下、2009年8月14日に出願された、表題「Multi−Transgenic Pigs for Diabetes Treatment」の米国仮特許出願第61/234,150号(この完全な開示は、参考として本明細書に十分に援用される)に対する優先権を主張する。
本発明は、特に異種移植治療に有用な一定のドナー動物、組織、および細胞を提供する。詳細には、本発明は、機能的α1,3ガラクトシルトランスフェラーゼ(αGT)の一切の発現を欠き、かつ膵島異種移植のドナーに適した動物にする1つ以上の追加の導入遺伝子を発現するブタ動物、ならびにこのブタ動物に由来する組織および細胞を含む。このような動物に由来する組織および細胞を用いた糖尿病の処置および予防方法も提供する。
糖尿病
インスリンは、膵臓によって産生されるホルモンであり、糖を血流から体の細胞に輸送し、そこで糖が必須のエネルギー源となる。哺乳動物では、インスリンは、ランゲルハンス島(膵島)のβ細胞(ベータ細胞)内で膵臓で合成される。健常な成人ヒト膵臓には約100万の膵島(膵臓の全質量の約1〜2%)が存在し、膵臓のいたるところに分布している。
異種移植(異種のドナー由来の臓器、組織、および細胞の移植)は、ヒトドナー膵臓の不足に有効に対処することができる。異種移植は、(i)予測可能な緊急ベースではない供給;(ii)制御された環境での作製;および(iii)移植前の特徴付けおよび研究に利用可能という点でも有利である。
異種移植は、様々な方法で有利であるが、同種移植よりも複雑な免疫学的状況も発生させる。したがって、遺伝子改変による免疫障壁の対処に相当な努力が払われている(van der Windtら、Xenotransplantation、2007、Jul;14(4):288−97、CowanおよびD’Apice、Curr Opin
Organ Transplant、2008 Apr;13(2):178−83)。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される:
(項目1)
機能的α1,3ガラクトシルトランスフェラーゼの一切の発現を欠き(GTKO)、かつ少なくとも1つの導入遺伝子を膵臓組織で特異的に発現するトランスジェニック動物。
(項目2)
前記少なくとも1つの導入遺伝子が抗凝固因子である、項目1に記載のトランスジェニック動物。
(項目3)
前記抗凝固因子が、組織因子経路インヒビター(TFPI)である、項目2に記載のトランスジェニック動物。
(項目4)
前記抗凝固因子がCD39である、項目1に記載のトランスジェニック動物。
(項目5)
前記抗凝固因子が、ヒルジン、トロンボモジュリン、および内皮細胞プロテインC受容体(EPCR)からなる群より選択される、項目1に記載のトランスジェニック動物。
(項目6)
前記少なくとも1つの導入遺伝子が免疫調節物質である、項目1に記載のトランスジェニック動物。
(項目7)
前記免疫調節物質が免疫抑制剤である、項目6に記載のトランスジェニック動物。
(項目8)
前記免疫抑制剤がCTLA4である、項目7に記載のトランスジェニック動物。
(項目9)
前記少なくとも1つの導入遺伝子が細胞保護導入遺伝子である、項目1に記載のトランスジェニック動物。
(項目10)
前記細胞保護導入遺伝子が、A20、HO−1、FAT−1、および可溶性TNF−α受容体からなる群より選択される、項目9に記載のトランスジェニック動物。
(項目11)
項目1に記載の動物由来の組織。
(項目12)
項目1に記載の動物由来の細胞。
(項目13)
前記細胞が膵臓細胞である、項目12に記載の細胞。
(項目14)
前記細胞が膵島である、項目12に記載の細胞。
(項目15)
前記膵臓細胞がβ細胞である、項目13に記載の細胞。
(項目16)
前記細胞がカプセル化されている、項目12に記載の細胞。
(項目17)
前記動物が、少なくとも2つの導入遺伝子を膵臓組織で特異的に発現する、項目1に記載のトランスジェニック動物。
(項目18)
前記少なくとも2つの導入遺伝子が抗凝固因子である、項目17に記載のトランスジェニック動物。
(項目19)
前記抗凝固因子がTFPIおよびCD39である、項目17に記載のトランスジェニック動物。
(項目20)
前記動物が、少なくとも3つの導入遺伝子を膵臓組織で特異的に発現する、項目1に記載のトランスジェニック動物。
(項目21)
前記少なくとも3つの導入遺伝子が、TFPI、CD39、およびCTLA4である、項目20に記載のトランスジェニック動物。
(項目22)
糖尿病の処置または予防のための方法であって、該方法は、機能的α1,3ガラクトシルトランスフェラーゼの一切の発現を欠き(GTKO)、かつ少なくとも1つの導入遺伝子を膵臓組織で特異的に発現する動物に由来するブタ膵臓組織またはブタ膵臓細胞をそれを必要とする宿主に投与するステップを含む、方法。
(項目23)
前記宿主が霊長類である、項目22に記載の方法。
(項目24)
前記宿主がヒトである、項目22に記載の方法。
(項目25)
前記動物が、少なくとも1つの抗凝固因子を特異的に発現する、項目22に記載の方法。(項目26)
前記抗凝固因子が、TFPI、CD39、ヒルジン、トロンボモジュリン、およびEPCRからなる群より選択される、項目25に記載の方法。
(項目27)
前記抗凝固因子がTFPIである、項目25に記載の方法。
(項目28)
前記動物が、少なくとも1つの免疫調節物質を特異的に発現する、項目22に記載の方法。
(項目29)
前記免疫調節物質がCTLA4である、項目28に記載の方法。
(項目30)
前記動物が、少なくとも1つの細胞保護剤を特異的に発現する、項目22に記載の方法。
(項目31)
前記細胞が膵臓細胞である、項目22に記載の方法。
(項目32)
前記膵臓細胞が膵島である、項目31に記載の方法。
(項目33)
前記膵臓細胞がβ細胞である、項目31に記載の方法。
(項目34)
前記細胞がカプセル化されている、項目22に記載の方法。
(項目35)
前記細胞が、門脈内注入によって送達される、項目22に記載の方法。
(項目36)
処置後、前記宿主が、低減された外因性インスリンを必要とするか、または全く必要としない、項目22に記載の方法。
(項目37)
処置後、前記宿主が、低減されたインスリンを必要とする、項目36に記載の方法。
(項目38)
前記宿主が、約5%〜約25%少ないインスリンを必要とする、項目37に記載の方法。(項目39)
前記宿主が、約25%〜約50%少ないインスリンを必要とする、項目37に記載の方法。
(項目40)
前記宿主が、約50%〜約75%少ないインスリンを必要とする、項目37に記載の方法。
(項目41)
前記宿主が、約75%〜約100%少ないインスリンを必要とする、項目37に記載の方法。
(項目42)
処置後、前記宿主が、少なくとも3ヶ月間、正常血糖を維持し得る、項目22に記載の方法。
(項目43)
処置後、前記宿主が、少なくとも約6ヶ月間、正常血糖を維持し得る、項目22に記載の方法。
(項目44)
処置後、前記宿主が、少なくとも約12ヶ月間、正常血糖を維持し得る、項目22に記載の方法。
(項目45)
処置後、前記宿主が、最大3〜12ヶ月間の期間にわたって約70mg/dl〜約130mg/dlの空腹時血糖値を維持し得る、項目22に記載の方法。
(項目46)
前記期間が3〜6ヶ月間である、項目45に記載の方法。
(項目47)
処置後、前記宿主が、約8.0%未満の糖化ヘモグロビンレベルを有する、項目22に記載の方法。
(項目48)
処置後、前記宿主が、約6.5%未満の糖化ヘモグロビンレベルを有する、項目47に記載の方法。
(項目49)
処置後、前記宿主が、経静脈的グルコース負荷試験に合格する、項目22に記載の方法。
(項目50)
処置後、前記宿主が、アルギニン刺激試験に合格する、項目22に記載の方法。
(項目51)
処置後、ドナーC−ペプチドレベルが前記宿主で検出可能である、項目22に記載の方法。
(項目52)
前記ドナーC−ペプチドレベルが、約0.2ng/ml〜約1.0ng/mlである、項目51に記載の方法。
(項目53)
前記ドナーC−ペプチドレベルが、約0.21ng/ml〜約0.63ng/mlである、項目52に記載の方法。
(項目54)
処置後、前記宿主が、処置前と比較して、または移植を含む処置の他の方法に使用される用量と比較して、低減された免疫抑制治療を必要とするか、または全く必要としない、項目22に記載の方法。
J.Transplant、(2005)、5:2632−2639;Nyqvistら、Diabetes、(2005)、54:2287−2293)。一部の新生血管は、ドナー内皮細胞で裏打ちされ、他の血管は、ドナー細胞とレシピエント細胞のキメラとして再構成され得る(Brissovaら、Diabetes、(2004)、53:1318−1325)。ドナー内皮生細胞が存在しないと、血管再生が遅延して不完全となり、多くの膵島の虚血性障害および死滅が起こる。したがって、本発明は、GTKO遺伝的背景と膵島移植での改善された結果を目的とする他の導入遺伝子とをもつブタを含む。他の導入遺伝子を膵臓で特異的に発現するGTKOブタ由来の膵島は、ドナー内皮細胞、したがって膵島の有意な保護を提供する。
一実施形態では、少なくとも4つの遺伝子改変を有するブタ動物、組織、および細胞が提供される。このような遺伝子改変には、限定されるものではないが、ノックアウトおよびノックイン、ならびに再構成を含む遺伝子の付加および/または欠失が含まれ得る。特定の実施形態では、少なくとも4つの遺伝子改変を有するブタ動物、組織、および細胞が提供され、この遺伝子改変の少なくとも1つ、少なくとも2つ、少なくとも3つ、または4つが導入遺伝子であり、この導入遺伝子の少なくとも1つ、少なくとも2つ、少なくとも3つ、または4つが遍在的に発現される。特定の実施形態では、少なくとも4つの遺伝子改変を有するブタ動物、組織、および細胞が提供され、少なくとも1つの遺伝子改変がノックアウトである。
異種移植は、現在、深刻かつ十分に証明された拒絶反応の問題によって妨げられている。このプロセスは、異なる段階に分けることができ、第1の段階は、移植の数分以内に起こり、「超急性拒絶反応」(HAR)と呼ばれる。HARは、外来組織に結合する高力価の予め形成された天然抗体の遍在的な存在によって定義される。これらの天然抗体のドナー組織内皮上の標的エピトープへの結合は、HARにおける開始現象であると考えられている。レシピエントの血液でのドナー組織の灌流の数分以内に起こるこの結合の後、補体の活性化、血小板およびフィブリンの沈着が起こり、最終的にドナー臓器に間質浮腫および出血が起こり、これらのすべてが、レシピエントの組織の拒絶反応を引き起こす(Strahanら、(1996)、Frontiers in Bioscience 1、e34−41)。ヒトでのHARの主な経路は、ヒトおよびサルの抗体の約1%を占める天然の抗Gal抗体である。
上述したように、ヒトにおけるHARの主な経路は、ヒトおよびサルのIgG抗体の約1%を占める天然抗ガラクトースα1,3−ガラクトース(Gal)抗体である。旧世界ザル、類人猿、およびヒトを除いて、ほとんどの哺乳動物は、Galエピトープを含む糖タンパク質をそれらの細胞表面に有する(Galiliら、J.Biol.Chem.263:17755−17762、1988)。ヒト、類人猿、および旧世界ザルは、Galを発現しないが、Galエピトープを有する動物由来組織のヒトへの異種移植時に即時超急性反応を引き起こす自然発生の抗Gal抗体を大量に産生する(Sandrinら、Proc Natl Acad Sci、USA、1993、Dec 1;90(23):11391−5、1993;SandrinおよびMcKenzie編、Immunol Rev、1994、Oct;141:169−90)。
276、39310、(2000))が、トランスジェニックブタにおけるN−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼIIIのgalエピトープの発現を阻害する試みも同様に、galエピトープの数が一部減るだけであり、霊長類レシピエントにおける移植片の生存を有意に延長することができなかったことを報告した。
General Hospital Corporationによる国際公開第WO95/28412号、米国特許第6,153,428号、同第6,413,769号、および米国特許出願公開第2003/0014770号に、αGT遺伝子のcDNAに基づいたαGTネガティブブタ細胞の作製についての考察が記載されている。
免疫調節物質には、補体調節剤および免疫抑制剤が含まれる。
補体は、一連の血液タンパク質の総称であり、免疫系の重要なエフェクター機構である。補体の活性化および標的構造上へのその堆積は、直接的な補体媒介性細胞溶解を引き起こし得る、または炎症の強力な調節物質の産生ならびに免疫エフェクター細胞の動員および活性化による、間接的な細胞もしくは組織の破壊を引き起こし得る。組織傷害を媒介する補体活性化産物が、補体経路における様々な点で産生される。宿主組織における不適切な補体活性化は、多くの自己免疫疾患および炎症性疾患の病理に重要な役割を果たし、生体不適合性、例えば、術後の心肺炎症および移植片拒絶反応に関連した多くの疾患状態にも関与する。宿主細胞膜への補体の堆積は、細胞表面で発現される補体阻害タンパク質によって防止される。
「免疫抑制」導入遺伝子は、免疫応答を下方制御することができる。あらゆる種類の移植処置手順では、有効性と毒性との間のバランスが、臨床許容性の重要な因子である。膵島移植に関して、さらなる懸念は、現在の免疫抑制剤の多く、特に糖質コルチコイドまたはカルシニュリンインヒビター、例えば、タクロリムス(Tarcolimus)が、β細胞に損傷を与える、または末梢インスリン耐性を誘導することである(Zengら、Surgery、(1993)、113:98−102)。シロリムス、低用量タクロリムス(Tarcolimus)、およびIL−2受容体に対するモノクローナル抗体(mAb)を含むステロイドフリー免疫抑プロトコル(「エドモントンプロトコル」)が、1型糖尿病の患者の膵島移植のみの臨床に使用された(Shapiro,A.M.J.ら、(2000)、N.Eng.J.Med.、343:230−238)。「エドモントンプロトコル」を用いた近年の成功により、糖尿病の処置で膵島移植を使用する意欲が取り戻された。しかしながら、タクロリムスの毒性に関する懸念は、ヒトにおけるこの治療の適用を制限し得る。
mutant molecules」という名称の米国特許第5,730,403号に、同種膵島移植を保護するための可溶性CTLA4−IgおよびCTLA4突然変異分子の使用が記載されている。
使用できる他の免疫調節物質には、クラスIIトランス活性化因子(CIITA)およびその突然変異体、PDL1、PDL2、腫瘍壊死因子−α関連アポトーシス誘導リガンド(TRAIL)、Fasリガンド(FasL、CD95L)インテグリン関連タンパク質(CD47)、HLA−E、HLA−DP、HLA−DQ、またはHLA−DRが含まれる。
ヒト・ナチュラル・キラー(NK)細胞は、ex vivoでヒト血液によって灌流されたブタ臓器に浸潤し、ブタ細胞をin vitroで直接的に溶解し、かつヒト血清の存在下では抗体依存細胞媒介細胞傷害性によっても溶解するため、ブタのヒトへの異種移植の成功における潜在的なハードルとなる。NK細胞の自己反応性は、正常自己細胞上の抑制性NK受容体の主要組織適合複合体(MHC)クラスIリガンドの発現によって防止される。ほとんどの活性化ヒトNK細胞で発現される抑制性受容体CD94/NKG2Aは、ヒト白血球抗原(HLA)−Eに特異的に結合する。非古典的ヒトMHC分子HLA−Eは、CD94/NKG2Aを有するNK細胞の強力な抑制リガンドであり、古典的MHC分子とは異なり、同種T細胞応答を誘導しない。HLA−Eは、小胞体で構築され、HLA−E重鎖、β2−ミクログロブリン(β2m)、および一部のMHCクラスI分子のリーダー配列に由来するペプチドからなる安定三量体複合体として細胞表面に輸送される。HLA−Eの発現は、異種ヒトNK細胞傷害性対してある程度の保護を提供することが示された(Weissら、Transplantation、2009、Jan 15;87(1):35−43)。ブタ臓器におけるHLA−Eのトランスジェニック発現は、同種免疫反応のリスクを伴わずにブタ異種移植片のヒトNK細胞媒介性拒絶反応を実質的に緩和する可能性がある。加えて、他のHLA遺伝子を有するトランスジェニックブタは、ブタ臓器、組織、および細胞の「ヒト化」を目標とした作製に成功した(Huangら、Proteomics、2006、Nov;6(21):5815−25、また米国特許第6,639,122号を参照)。
膵島と血液の反応は、最初の48時間に膵島塊の80〜90%が消失をもたらす凝固の促進と血小板の消費によって特徴付けられ、補体溶解系の活性化、および膵島における組織因子の上方制御に関連することが示された(Johanssonら、Diabetes、2005、54:1755;Mobergら、Lancet、2002、360:1999−2000;Bermanら、Transplantion、2007、84:308−313)。既に、これらの抗凝固導入遺伝子は、臓器異種移植のためにブタ内皮でこれらの導入遺伝子を発現させることを目標として動物に導入された。本発明では、胎仔膵島および成体膵島の両方で直接遺伝子発現を導くことが知られているPdx−1遺伝子由来の膵島系譜特異的エンハンサー(Lomedico Pら、Cell、1979、18:545)を、ラットIns2遺伝子由来のプロモーター(Gerrish Kら、Mol.Endocrinol、2004、18(3):533)と組み合わせて利用して、得られるトランスジェニック動物の膵島で局所的および特異的に抗凝固因子の発現を駆動するベクターを構築した。
Transplant、2004;4:1958−1963)。結果として生じる内皮におけるTFPIの活性化依存性表示は、シクロスポリン処置ラットによるマウス心臓異種移植の血栓媒介性急性体液性拒絶反応を完全に抑制するのに十分であった。また、凝固の効果的な制御が慢性拒絶反応を防止し得るという提案も存在した。ヒルジン/CD4/P−セレクチン融合タンパク質を発現するトランスジェニックマウス心臓でも同様の結果が得られ、トロンビンの産生または活性の抑制が、このモデルの保護にとって鍵であることが示された。
本発明は、細胞保護導入遺伝子(「細胞保護剤」)を含む。細胞保護導入遺伝子は、抗アポトーシス剤、抗酸化剤、および抗炎症剤を含むと見なされる。以下に例を挙げる。
Investigation、1999;103:129−135)。抗炎症性、抗酸化性、および抗アポトーシス性を含むHO−1の細胞保護効果に関与する分子機序が、その反応産物によって媒介される。HO−1の発現は、異なる金属をもつプロトポルフィリンによってin vitroおよびin vivoで調節され得る。コバルトプロトポルフィリン(CoPP)および鉄プロトポルフィリン(FePP)は、HO−1の発現を上方制御することができる。対照的に、錫プロトポルフィリン(SnPP)および亜鉛プロトポルフィリン(ZnPP)は、タンパク質レベルでHO−1の活性を抑制する。最近、HO−1の発現が、マウスからラットへの心臓移植の拒絶反応を抑制し(Sato Kら、J.Immunol.、2001;166:4185−4194)、アポトーシスから膵島細胞を保護し、かつ移植後の膵島細胞のin vivoでの機能を改善する(Pileggi Aら、Diabetes、2001;50:1983−1991)ことが証明された。また、遺伝子導入によるHO−1の投与が、酸素過剰−誘導肺損傷から保護し(Otterbein L Eら、J Clin Invest、1999;103:1047−1054)、HO−1の上方制御が、虚血/再灌流傷害から遺伝的肥満のZuckerラットの肝臓を保護し(Amersi Fら、J Clin Invest、1999;104:1631−1639)、HO−1遺伝子の除去または発現が、シスプラチン誘導腎尿細管アポトーシスを調節する(Shiraishi Fら、Am J Physiol Renal Physiol、2000;278:F726−F736)ことも証明された。トランスジェニック動物モデルでは、HO−1の過剰発現が、肺の炎症および低酸素に対する血管反応を防止し(Minamino T etら、Proc.Natl.Acad.Sci.、USA、2001;98:8798−8803)、かつ虚血および再灌流障害から心臓を保護する(Yet S Fら、Cir Res、2001;89:168−173)ことが示された。HO−1導入遺伝子を有するブタが作製されたが、異種移植におけるこのブタの使用に関連した臨床効果が報告されなかった(米国特許第7,378,569号)。
遺伝子改変動物は、限定されるものではないが、選択育種、核導入、DNAの卵母細胞、精子、受精卵、もしくは割球への導入、または胚性幹細胞の使用を含む当業者に周知の任意の方法で作製することができる。
相同組換えは、内因性遺伝子における部位特異的改変を可能にするため、新規の変更をゲノムに加えることができる。相同組換えの第1のステップは、DNA鎖の交換であり、DNA2本鎖を相補的な配列を含む少なくとも1つのDNA鎖と対合させて、ヘテロ2本鎖DNAを含む中間組換え構造を形成する(例えば、Radding,C.M.、(1982)、Ann.Rev.Genet.、16:405;米国特許第4,888,274号を参照)。ヘテロ2本鎖DNAは、1本の相補鎖がDNA2本鎖に侵入している三重鎖形態を含む3本のDNA鎖(Hsiehら、(1990)、Genes and Development、4:1951;Raoら、(1991)、PNAS 88:2984))を含むいくつかの形態をとることができ、2本の相補的なDNA鎖がDNA2本鎖と対を形成すると、古典的Holliday組換え接合部またはカイ構造(Holliday,R.、(1964)、Genet.Res.5:282)が形成される、または二重Dループであり得る(「Diagnostic Applications of Double−D Loop Formation」、米国特許出願第07/755,462号、Sep.4、1991に出願)。形成されると、ヘテロ2本鎖構造は、鎖の切断と交換によって変化され得るため、侵入DNA鎖のすべてまたは一部が、レシピエントDNA2本鎖にスプライシングされ、レシピエントDNA2本鎖のセグメントが付加または置換される。別法では、ヘテロ2本鎖構造は、遺伝子変換となり、侵入鎖の配列が、鋳型として侵入鎖を用いたミスマッチ塩基の修復によってレシピエントDNA2本鎖に移入される(Genes、第3版、(1987)、Lewin,B.、John Wiley、New York、N.Y.;Lopezら、(1987)、Nucleic Acids Res.、15:5643)。切断と再結合の機序によるか、または遺伝子変換の機序(複数可)によるかにかかわらず、相同的に対合した接合部におけるヘテロ2本鎖DNAの形成が、あるDNA分子から別のDNA分子への遺伝子配列情報の伝達に役立ち得る。
一実施形態では、導入遺伝子配列をコードするDNAを、細胞の染色体にランダムに挿入することができる。ランダム組み込みは、当業者に周知のDNAを細胞に導入する任意の方法によって行うことができる。これには、限定されるものではないが、エレクトロポレーション、ソノポレーション、遺伝子銃の使用、リポトランスフェクション(lipotransfection)、リン酸カルシウムトランスフェクション、デンドリマーの使用、マイクロインジェクション、アデノウイルス、AAV、およびレトロウイルスベクターを含むウイルスベクターの使用、およびグループIIリボザイムが含まれ得る。一実施形態では、導入遺伝子をコードするDNAは、レポーター遺伝子の活性化によって導入遺伝子およびその発現産物の存在を検出できるようにレポーター遺伝子を含むようにデザインすることができる。当技術分野で周知の任意のレポーター遺伝子、例えば、上記のレポーター遺伝子を使用することができる。細胞培養物中で、レポーター遺伝子が活性化された細胞を選択することにより、導入遺伝子を含む細胞を選択することができる。他の実施形態では、導入遺伝子をコードするDNAは、エレクトロポレーションによって細胞に導入することができる。他の実施形態では、このDNAは、リポフェクション、感染、または形質転換によって細胞に導入することができる。一実施形態では、エレクトロポレーションおよび/またはリポフェクションを使用して、線維芽細胞をトランスフェクトすることができる。特定の実施形態では、トランスフェクト線維芽細胞を、核導入用の核ドナーとして使用して、当技術分野で周知の、以下に記載されるトランスジェニック動物を作製することができる。
核酸ターゲティング・ベクター・コンストラクトを、細胞での相同組換えを達成するためにデザインすることができる。一実施形態では、ターゲティングベクターは、「ポリ(A)トラップ」を用いてデザインされる。プロモータートラップとは異なり、ポリ(A)トラップベクターは、標的細胞(すなわち、線維芽細胞またはES細胞)で発現されない遺伝子を含む多様な遺伝子を捕捉する。ポリ(A)トラップベクターは、ポリAシグナル欠損選択マーカー遺伝子の発現を駆動する構成的プロモーターを含む。ポリAシグナルの置換は、下流エキソンにスプライシングされるようにデザインされたスプライシングドナー部位である。この戦略では、選択可能なマーカー遺伝子のmRNAを、内因性遺伝子の標的細胞での発現状態に関係なく、内因性遺伝子のポリAシグナルの捕捉時に安定させることができる。一実施形態では、ポリアデニル化のシグナルが欠損した選択マーカーを含むターゲティングベクターが構築される。
Cloning−−A Laboratory Manual、Cold Spring Harbor Laboratory、Cold Spring Harbor、N.Y.、第16章も参照されたい。選択マーカーの他の例として:抗生物質などの化合物に対して耐性を付与する遺伝子、選択された基質で増殖できるようにする遺伝子、検出可能なシグナル、例えば、発光を生成するタンパク質、例えば、緑色蛍光タンパク質、高度緑色蛍光タンパク質(eGFP)をコードする遺伝子が挙げられる。例えば、抗生物質耐性遺伝子、例えば、ネオマイシン耐性遺伝子(neo)(Southern,P.およびP.Berg、(1982)、J.Mol.Appl.Genet.、1:327−341);およびハイグロマイシン耐性遺伝子(hyg)(Nucleic Acids Research、11:6895−6911、(1983)、およびTe Rieleら、(1990)、Nature、348:649−651)を含む様々なこのようなマーカーが知られており、利用可能である。本発明の方法に有用な追加のレポーター遺伝子には、アセトヒドロキシ酸シンターゼ(AHAS)、アルカリンホスファターゼ(AP)、βガラクトシダーゼ(LacZ)、βグルクロニダーゼ(glucoronidase)(GUS)、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)、緑色蛍光タンパク質(GFP)、赤色蛍光タンパク質(RFP)、黄色蛍光タンパク質(YFP)、シアン蛍光タンパク質(CFP)、西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)、ルシフェラーゼ(Luc)、ノパリンシンターゼ(NOS)、オクトピンシンターゼ(OCS)、およびこれらの誘導体が含まれる。アンピシリン、ブレオマイシン、クロラムフェニコール、ゲンタマイシン、ハイグロマイシン、カナマイシン、リンコマイシン、ブラストサイジン、ゼオシン、メトトレキセート、フォスフィノスリシン、ピューロマイシン、およびテトラサイクリンに対する耐性を付与する複数の選択マーカーが利用可能である。レポーター遺伝子の抑制を決定する方法は、当技術分野で周知であり、この方法には、限定されるものではないが、蛍光定量法(例えば、蛍光分析法、蛍光活性化細胞分類(FACS)、蛍光顕微鏡検査法)、抗生物質耐性判定が含まれる。
本発明の動物を作製するために使用されるベクターコンストラクトは、例えば、配列に機能的に連結されるプロモーターを含む調節配列を含み得る。多数の適切なベクターおよびプロモーターが当業者に周知であり、市販されている。
ある場合には、トランスジェニック細胞は、細胞ゲノムへの標的導入遺伝子の挿入または組み込み(すなわち、相同組換えによる)の結果である遺伝子改変を有する。ある場合には、トランスジェニック細胞は、細胞ゲノムへの非標的(ランダム)組み込みの結果である遺伝子改変を有する。細胞は、適切な組み込みをもたらす細胞を同定するために適切に選択された培地で増殖させることができる。次いで、望ましい表現型を示す細胞を、限定解析、電気泳動法、サザン分析、ポリメラーゼ連鎖反応、または当技術分野で周知の別の技術によってさらに分析することができる。標的遺伝子部位における適切な挿入を示す断片を同定することにより、(または、ランダム組み込み技術が望ましい結果を生む非標的の例では)、相同組換え(または望ましい非標的組み込み事象)が起きて標的遺伝子が不活化または他の方法で改変された細胞を同定することができる。
Stem Cell、Siver、Martin、およびStrikland編(Cold Spring Harbor Lab.、Cold Spring Harbor、N.Y.、(pp.469−497));ならびにLinneyおよびDonerly、Cell、35:693−699、1983によって胚性幹細胞およびEC細胞の両方において活性であることが示された。
T cell co−stimulation signal 2(B7/CD28 interaction)」という名称の国際公開第WO99/57266号に記載されているような、シグナル2による共刺激が異種ドナー生物由来の可溶型のCTLA−4の臓器レシピエントへの投与などによって防止される化合物の発現が含まれ得る。
本明細書に記載される有蹄動物またはブタなどの操作されたトランスジェニック動物を、当技術分野で周知の任意の適切な技術を用いて作製することができる。これらの技術には、限定されるものではないが、マイクロインジェクション(例えば、前核の)、精子媒介遺伝子導入、卵子または接合子のエレクトロポレーション、および/または核移植術が含まれる。
M、Iwamura、S.Biol Reprod、(2002)、January;66(1):112−9、およびPetters R M、Wells K D.J Reprod Fertil Suppl.、1993;48:61−73を参照されたい。
Vitro”、L.Mastroianni,Jr.およびJ.D.Biggers編、Plenum Press、New York、N.Y.、page 323を参照されたい。ブタ胚導入は、当技術分野で周知の方法にしたがって行うことができる。参考のために、Youngsら、“Factors Influencing the Success of Embryo Transfer in the Pig,”、Theriogenology、(2002)、56:1311―1320を参照されたい。
膵臓は、脊椎動物の消化器系および内分泌系における腺器官である。膵臓は、インスリン、グルカゴン、およびソマトスタチンを含むいくつかの重要なホルモンを産生する内分泌腺、ならびに小腸に送られる消化酵素を含む膵液を分泌する外分泌腺の両方である。膵臓の大部分は、膵外分泌細胞および膵外分泌細胞に関連する管から構成されている。この外分泌組織の中には、ランゲルハンス島と呼ばれる約100万の細胞の小クラスターが埋め込まれている。ランゲルハンス島は、膵臓の内分泌細胞であり、インスリン、グルカゴン、およびいくつかの他のホルモンを分泌する。
ドナーブタは、限定されるものではないが、胎仔、新生仔、幼体、および成体を含む任意の発達段階であり得る。一部の実施形態では、膵島細胞は、成体ブタトランスジェニック動物から単離される。代替の実施形態では、膵島細胞は、胎仔または新生仔ブタトランスジェニック動物から単離される(例えば、Mandel、(1999)、J.Mol.Med.、77:155−60;Cardonaら、(2006)、Nat.Med.12:304−6を参照)。ドナーブタは、10歳未満、9歳未満、8歳未満、7歳未満、6歳未満、5歳未満、4歳未満、3歳未満、2歳未満、1歳未満であり得る。一実施形態では、膵島細胞は、6歳未満のトランスジェニックブタから単離される。別の実施形態では、膵島細胞は、3歳未満のトランスジェニックブタから単離される。ドナーブタは、0〜2歳、2〜4歳、4〜6歳、6〜8歳、または8〜10歳の任意の年齢であり得る。場合によっては、ドナーブタは、10歳を超えている。別実施形態では、膵島細胞は、新生仔から2歳のトランスジェニックブタから単離される。一実施形態では、膵島細胞は、胎仔から2歳のトランスジェニックブタから単離される。特定の実施形態では、膵島細胞は、6ヶ月〜2歳のトランスジェニックブタから単離され、さらに特定の実施形態では、7ヶ月〜1歳のトランスジェニックブタから単離される。一実施形態では、膵島細胞は、2〜3歳のトランスジェニックブタから単離される。場合によっては、ドナーブタは、0歳未満(すなわち、胎仔または胚)である。新生仔膵島は、単離後、成体膵島よりも元気で安定しており、酸化ストレスにより強く、著しい増殖の可能性を有する(新生仔膵島幹細胞亜集団に由来し得る)ため、移植後の増殖および移植部位での生着の能力を有する。新生仔膵島は、十分に成熟して有意なレベルのインスリンを産生するようになるまで4〜6週間かかり得るという不都合があるが、この不都合は、新生仔膵島の成熟に十分な期間にわたって外因性インスリンで処置することによって克服される。新生仔膵島の生存および機能的な生着は、ブタ特異的C−ペプチドレベルを測定することによって決定することができ、このブタ特異的c−ペプチドは、どの潜在的な内因性c−ペプチドとも容易に区別できる。
本明細書に記載される本発明は、糖尿病または前糖尿病の処置または予防のための方法を包含する。この方法は、限定されるものではないが、本明細書に記載されるドナー動物由来の1つ以上の膵島細胞(複数可)をそれを必要とする宿主に投与するステップを含む。この方法は、移植、場合によっては異種移植であり得る。ドナー動物は、ブタとすることができる。宿主は、霊長類、例えば、限定されるものではないが、サルを含む非ヒト霊長類とすることができる。宿主は、ヒト、場合によっては糖尿病または前糖尿病のヒトとすることができる。
February、2006;van der Windtら、Cell Transplant、2008;17(9):1005−14を参照)、トランスジェニック膵島細胞はまた、セルトリ細胞と組み合わせて移植することもでき、セルトリ細胞は、膵島同種移植片に免疫抑制効果をもたらすことが示唆されている(Yinら、2009、Transplantation、2009、Aug 15;88(3):339−45)。一実施形態では、本明細書に提供される膵臓細胞を霊長類に移植する異種移植の方法であって、膵島が門脈内注入によって投与される、方法が提供される。一実施形態では、本明細書に提供される膵臓細胞を霊長類に移植する異種移植の方法であって、膵島が、腹膜内腔、腎被膜、大網を介して、または膵床注入によって投与される、方法が提供される。
Transplantation、15:89−104、2006;Roodら、Transplantation、83:202−210、2007;DufraneおよびGianello、Transplantation、86:753−760、2008;van der Windtら、2009、Am.J.Transplantation、9(12):2716−2726、2009を参照)。
実施例1:膵島特異的発現ベクターの構築
哺乳動物発現ベクターpCI−Neo(Promega)を、膵島特異的発現カセットの背景として結合した。このベクターは、ファージf1領域、SV40エンハンサーおよび初期プロモーター、SV40最小複製起点、およびネオマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子を含む1967塩基対(bp)断片のCla1切除によって改変した。加えて、CMV最初期エンハンサー/プロモーターを、インスリンIIプロモーターがこのベクター内に挿入されたときに、制限酵素BglIIおよびHind IIIを用いて切除した。
接合糸期マウス胚を、B6C3F1雄と交配したB6C3F1雌から得た(Harlan Sprague Dawley、Dublin、VA)。この雌は、44〜48時間後に7.5 IU PMSG(腹腔内投与、Calbiochem、San Diego、CA)および5.0 IU Hcg(腹腔内投与、Intervet,Millsboro、DE)を用いて過剰排卵させた。接合子を収集して、標準的な方法(Hoganら、1994)によってFHM(Specialty Media、Lavallette、NJ)で操作した。in vitro胚培養を、KSOM培地(Specialty Media)で、37℃、5.0%CO2、加湿空気中で行った。pREV790コンストラクトの前核のマイクロインジェクションを、既に記載された方法(Pageら、1995、Transgenic Res.4:12−17)を用いて行った。注入された胚をKSOMから取り出してFHMに入れ、in vitroで一晩培養した。生存可能な2細胞胚を、既知の技術(Hoganら、Manipulating the Mouse Embryo、第2版、2004)を用いて偽妊娠ICRマウス(Harlan Sprague Dawley)の卵管に導入し、仔を自然に出産させた。生後21日目に、仔を離乳させ、雌雄を鑑別し、足指に切れ目を入れて識別できるようにした。遺伝子型分析のために尾端生検を行った。
細胞系の単離:
2つの細胞系(183−6−6および227−3)を、追加の導入遺伝子を追加するためのトランスフェクションのため、および最終的に核導入によってブタを作製するための遺伝的背景として使用した。両方の細胞系は、GTKOブタ(Daiら、(2002)、Nature biotechnology 20、251−255;Phelpsら、Science、(2003)、299:411−414)を遍在的にhCD46を発現するトランスジェニックブタ系(Lovelandら、Xenotransplantation、2004、11:171:183)と交配させることによって作製した。両方の細胞系は、遺伝子型および表現型によってホモ接合性GTKOおよびhCD46トランスジェニックとして確認された。細胞系は、次の通りNTで使用するために調製した:胎仔線維芽細胞系を、妊娠36日目の胎仔183−6−6から単離した。胎仔を、湾曲した手術用鉗子を用いて、過度の熱が発生しないようにゆっくりと60メッシュ金属スクリーンに通してすりつぶした。次いで、細胞懸濁液をペレットにし、20%ウシ胎仔血清およびAntibiotic−Antimycotic(Invitrogen)を含むDMEMで再懸濁した。細胞を3日間培養し、凍結保存した。
pREV790プラスミド断片を、AatIIおよびAhdI(New England Biolabs)を用いた制限酵素消化によってトランスフェクション用に調製した。pREV792を、AseIおよびAatII(New England Biolabs)を用いた消化によって調製した。消化によって作製されたプラスミド断片を、1%低融点アガロースゲル(Cambrex)で分離して、プラスミド骨格を除去した。目的の導入遺伝子含有カセット断片を切除し、氷上で15分間、2倍量の1×アガラーゼ緩衝液で2回インキュベートした。緩衝液の除去後、ゲルを65℃で、10分間融解した。42℃で10分間の後、ゲル溶融液100μL当たりAgarase(New England Biolabs)1uLとし、42℃で少なくとも1時間インキュベートした。1/10倍量の3M酢酸ナトリウムをゲル溶融液に添加し、氷上で15分間インキュベートした。4℃で15分間の15000rpmでの遠心分離によって、すべての未消化アガロースを分離した。2倍量の100%エタノールを上清に添加し、遠心分離を用いてDNA断片をペレットにした。70%エタノールを使用してペレットを洗浄してから、37℃で乾燥させた。ペレットをTEで再懸濁した。
ブタ227−3由来のブタ耳線維芽細胞を、pREV790(Pdx−rInsII−hTFPI)、pREV792(Pdx−rInsII−pCTLA4−Ig)、およびpREV828(ピューロマイシン選択マーカー遺伝子ベクター)でトランスフェクトした。約500万の細胞に、それぞれの導入遺伝子ベクター3μgと選択マーカーベクター0.5μgを同時にエレクトロポレーションした。トランスフェクションの48時間後に、約25,000細胞/皿の密度の20×10cm皿に0.5mg/mlの抗生物質ピューロマイシン(InvivoGen、San Diego、CA)を添加して、トランスフェクト細胞を選択した。ピューロマイシン選択の開始から72時間後に培地を交換した。選択の開始から7日後にコロニーを回収した。70のピューロマイシン耐性コロニーを回収し、さらに3日間培養した。70のうちの45のコロニーを増殖させ、2つのサンプルに分けた:1つがPCR分析用で、もう1つが増殖用。実施例5に記載されているように、pREV790およびpREV792の両方のPCR分析を行った。37のダブルPCRポジティブコロニーをプールし、後の核導入での使用のために凍結保存した。
様々な方法を使用して、本発明のマルチ・トランスジェニック・ブタを作製することができる。以下は、使用したドナー細胞(系227−3および系183−6−6)が、ホモ接合性GTKO(あらゆる機能的αGTを欠く)の遺伝的背景であり、かつCD46(およびCD46を膵臓で発現;図7)トランスジェニックである一例である。NTに使用する前に、実施例3に記載されているように、ドナー細胞を、トランスフェクトし、選択し、pREV790、pREV792、および/またはpREV835ベクターに対して陽性についてスクリーニングした。場合によっては、導入遺伝子(複数可)に対してすべてのスクリーニングで陽性の、トランスフェクトされて選択された細胞の複数のコロニーを、NTで使用するまで一緒にプールした。
遺伝子型分析:
ゲノムDNAを、検査される各マウスまたは仔ブタ由来のトランスフェクト細胞および血液または組織サンプルから抽出した。簡単に述べると、組織サンプルを、組織175mgに付き約1mlの溶解液(50mM Tris pH8.0、0.15M NaC1、0.01M EDTA、1%SDS、25%過塩素酸ナトリウム、および1%のβ−メルカプトエタノールおよびプロテイナーゼK)を用いて振盪インキュベーター内で、60℃で一晩溶解した。DNAを、フェノール/クロロホルム抽出の後でイソプロピルアルコールで沈殿させた。可溶化DNAを、RNase(1mg/ml)+RNase T1(1000U/μl)を用いて37℃で1時間処置し、プロテイナーゼK(20mg/ml)を用いて55℃で1時間処置し、フェノール/クロロホルムで抽出し、沈殿させ、トリスエチレンジアミノテトラ酢酸(EDTA)に再懸濁した。DNAを、哺乳動物血液用のDNA単離キット(Roche Diagnostics Indianapolis、IN)を用いて全血サンプルから単離した。
組み込まれたpREV790コンストラクトの存在を、ラットインスリンIIプロモーターからTFPIコーディング配列の5’領域まで伸長した1000bpの断片を標的とするプライマー790.5Lおよび790.5Rを用いたPCRによって決定した。
組み込まれたpREV792コンストラクトの存在を、ラットインスリンIIプロモーターからCTLA4コーディング配列の5’領域まで伸長した473bpの断片を標的とするプライマー(792.sおよび792.a)を用いたPCRによって決定した。これらのプライマーの配列は次の通りである。
792s1792/a2265プローブ配列:
組み込まれたpREV835コンストラクトの存在を、CD39コーディング領域内の584bpの断片を標的とするプライマーCD39R3およびCD39L3を用いたPCRによって決定した。
CD39L3/R3プローブ配列:
pCTLA4−Ig発現についてのウエスタンブロット:
組織および細胞溶解物を、プロテアーゼインヒビター(Thermo Scientific、Rockford、IL)の存在下での均質化、続くSDS(1%最終濃度)の添加、および残った細胞デブリを除去する遠心分離によって調製した。タンパク質濃度を、ビシンコニン酸(BCA)タンパク質アッセイキット(Pierce、Rockford、IL)を用いて決定した。熱変性およびβ−メルカプトエタノール還元サンプル(10〜20gタンパク質)を、4〜12%BisTris SDS勾配ゲル(Invitrogen、Carlsbad、CA)で分画した。組換えヒトCTLA4−Ig/Fc(R&D Systems、Minneapolis、MN)を、標準的なコントロールタンパク質として使用した。電気泳動の後、タンパク質をニトロセルロース膜に移し、全タンパク質可視化のためにMemcode Protein Stain(Thermo Scientific)で染色し、カゼインブロッキング緩衝液(Sigma−Aldrich.、St.Louis、MO)でブロッキングした。ブロッキングされた膜を、pCTLA4−IgのヒトIgG1重鎖領域を認識するウサギ抗ヒトIgG1西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)(The Binding Site、San Diego、CA)でインキュベートした。免疫反応性バンドを、Super Signal West Pico化学発光基質(Thermo Scientific)および写真画像で検出した。
組織学および免疫蛍光:
マウスまたはブタ膵臓を取り出し、10%ホルマリン固定するか、またはOCT(Electron Microscopy Sciences、Hatfield、PA)のブロックに凍結させた。ホルマリン固定組織を、パラフィンに固定して、ヘマトキシリンおよびエオシン(H+E)染色で染色するために5μmにカットした。HおよびE染色は、標準的な処置手順を用いて行った。凍結切片を、クリオスタット上で5μmにカットし、ウサギ抗ヒトTFPI(ポリクローナル、American Diagnostica、Stamford、CT、#4901)、ヒツジ抗ヒトIgG1(ポリクローナル、The Binding Site、Birmingham、UK、#AUOO6)、マウス抗ヒトCD46(クローンO.N.137、mIgG2a、U.S.、Biological、Swampscott、MA)、マウス抗ヒトCD39(クローンBU6I、mIgG1、Ancell、Bayport、MN)、またはマウス抗ラットインスリン/プロインスリン(クローンD3E7、mIgG1、Serotec、Oxford、UK)で染色した。アイソタイプコントロールを、ウサギIgG(Jackson ImmunoResearch、West Grove、PA)、ヒツジIgG(Jackson)、マウスIgG2a(クローンMRC OX−34、Serotec)、およびマウスIgG1(クローンMOPC−31C、BD Pharmingen、San Jose、CA)のそれぞれに曝露した。免疫蛍光(IF)染色を、3ステップ処置手順を用いて行った。凍結切片を乾燥させ、冷アセトン(Sigma、St.Louis、MO)に固定し、次いでアビジン−ビオチンブロッキング(Invitrogen、Carlsbad、CA)を行った。二次Ab宿主種血清ブロッキングステップも含んでいた(10%ロバ血清、Jackson)。一次AbをPBSで希釈し、加湿チャンバー内で、室温で1時間インキュベーションを行った。使用した二次Abは、45mmに対してはビオチン化ロバ抗(ウサギ、ヒツジ、またはマウス)IgGであり、使用した三次Abは、30mmに対してはフルオレセイン結合ストレップアビジンであった(Jackson)。スライドをステップとステップとの間にPBSで洗浄し、22×30mmカバースリップ(VWR、West Chester、PA)を用いてカバースリップし、DAPIを含むSlowfade(Invitrogen)で保存した。代表的な組織学およびIF写真を、Provis顕微鏡のOlympus DP71カメラを用いて撮影し、倍率が200倍のDPコントローラーソフトウエア(Olympus、Center Valley、PA)を用いて分析した。
pREV790(TFPI)導入遺伝子マウス:
1歳のマウスは、代表的なH+E組織学で示されているように、十分にクラスター化された膵島を有していた。これらのマウスは、膵島特異的にhTFPIを発現し、染色は、インスリンの局在と同様に局在していた(図3)。hTFPI染色は、インスリンよりも強く、現在記載されている系を用いた効率的な膵島特異的な発現を示した。
胎仔548/A3を、妊娠の73日目に組織学によって特徴付けた(図4)。仔ブタ347−3(548/A3の再クローン)を、約2.5ヶ月齢で特徴付けた(図5)。β細胞が、胎仔腎臓で分散し拡散しており、これが、代表的な写真に見られる。hTFPIおよびpCTLA4−Ig(hIgGI Ab)の染色パターンは、インスリンに類似していた。染色は、インスリンよりもhTFPIおよびpCTLA4−Igで強かった。2.5ヶ月齢の仔ブタ347−3は、より発達した膵島クラスターを有し、内部で強い染色を示した。仔ブタ347−3における膵島特異的な発現は、hTFPIで最も強く、pCTLA−4−Igでやや弱く、インスリンで弱かった。
約3.5ヶ月齢の仔ブタ320−2は、完全に発達した膵島クラスターを有し、内部でCD39の強い染色を示した。320−2でのhCD39の膵島特異的な発現は、前のマウスおよびブタの実施例で示されているようにインスリンでより強かった(図6)。
ブタおよびマウス膵島を、当技術分野で周知の研究室プロトコルを用いて単離し、クラスター化し、in vitroでの凝固(凝固時間)の検査を行うことができ、これらの例が以下に記載される。
25%フィコールストック溶液:
33.3gのFicoll400、Type400、Sigma#F−4375
100ml HBSS/Hepes
撹拌しながら混合し、フィコールが溶液になるまで低温加熱する。
フィルター滅菌する。40℃で保存する。25%溶液から勾配をつける。
50mlの場合:25%フィコール HBSS/Hepes
23%溶液= 46ml 4ml
20.5%溶液=41ml 9ml
11%溶液= 22ml 28ml
これらを完全に混合する。40℃で保存する。
カルシウムおよびマグネシウムを含む500mlのHBSS
10mlのHepes 1M
完全に混合する。40℃で保存する。
カルシウムおよびマグネシウムを含む500mlのHBSS
10mlのHepes 1M
2.5gのBSA Fraction V
BSAを添加してからフィルター滅菌する。完全に混合する。40℃で保存する。
1.95mgのCollagenase Type V Sigma#C−9263
1mlのHBSS/Hepes
穏やかに混合する。過度の撹拌は酵素作用を破壊する。40℃に維持する。溶液は、新鮮なものを使用するのが最適であるが、40℃に維持されていれば最大3日まで使用しても良い。溶液は、時間が経つにつれて弱くなるため、凍結しても良いが、解凍後に活性が低下する。
500mlのRPMI 1640
50mlのウシ胎仔血清(熱不活化)
10mlのHepes 1M5mlのペニシリン/ストレプトマイシン(10,000U/10,000mg/ml)5mlのL−グルタミン(200mM)
500μlの2−メルカプト−エタノール 50mM(ストック:55mlのPBS中に0.2ml)
フィルター滅菌し、40℃で保存する。
膵臓を摘出する直前にマウスを屠殺する。フローフード内で、滅菌条件下で摘出および単離の処置手順を行う。開腹術を行い、皮膚を引っ張り、頭部に向かって体壁を引き上げる。肝臓を、横隔膜に対して裏返す。総胆管を探し、次いで腸との接合部を探す。鉗子を十二指腸の周りおよび胆管の端部の上に配置して、胆管から腸への流れを遮断する。
コラゲナーゼ(Liberase PIまたはCollagenase P、Roche)を用意する。1mg/コラゲナーゼ/mlを含むHBSS溶液を用意する。使用するまで氷上に置いておく。使用前に、24℃に温める。成体ブタの全膵臓の場合は、500mlの溶液を作製する。
1.氷上の滅菌バケツで、膵臓から結合組織、脂肪、血液を取り除く。
2.氷から臓器を取り出す。
3.膵管を探し(全膵臓を使用する場合)、次いでこの膵管からコラゲナーゼを注入する。別法では、部分臓器サンプルの場合、または膵管が見つからない場合は、コラゲナーゼを実質に直接注入する。
4.注入は、最大5分間続けることができる。
5.臓器を分割し(それぞれ1/2インチ(12.7mm))、予め温められたコラゲナーゼ(すべての片を覆うのに十分な量)が入ったビーカーに入れる。
6.37℃の水槽に入れ、手動で振盪を続ける。
7.数分後、組織が分解し始める。片全体は、消化されないこともある。遊離した細胞の過度の消化を回避するために、振盪の10分後に、溶液が濁ってきた場合は、遊離細胞をピペットで回収して、細胞を、血清(5%)を含む大量の冷RPMI溶液が入ったビンまたはビーカー(氷上)に移す。
8.十分な細胞を回収するまで加温消化を続けるが、組織は、30分を超えて温かいコラゲナーゼに曝露してはならない。
9.細胞を冷RPMI+血清で数回洗浄してコラゲナーゼを除去する。
10.1000rpmで3分間遠心分離する。
11.単離された膵島を得るために、フィコール勾配にかける。
12.組織ペレットが少量の場合は、50mlの円錐管を使用する。
13.密度勾配を作る:ストック1.132、層1.108、1.096、1.037
14.ストックフィコール10mlに分散されたペレット2mlを底に入れる。その上に8mlの1.108、次いで8mlの1.096、次いで8mlの1.037、次いで5mlのHBSSを積層する。
15.800gまたは2000rpmで20分間遠心分離する。
16.膵島は、第2の界面および第3の界面にあるはずであるが、念のため他の層も調べる。
17.フィコールを十分に洗浄し(RPMI+血清で、1200rpmで3分間、少なくとも3回洗浄)、次いで、必要に応じて細胞を培養または固定する。
材料
・37℃のCMRL−1066培地(Gibco/Invitrogen、Carlsbad、CA)
・37℃のインキュベーターシェーカー
・ポリスチレン未処置24ウェルプレート
・ピペット
・1mLのシリンジ
・Vacutainerセット:針、ゴムバンド
・アルコールスワブ(alcohol swap)
・バンドエイド
・ゴミ箱
・タイマー
方法
・手で摘んだ100の膵島を、各ウェルの37℃の200μLのCMRL培地にプレーティングする。
・37℃の200μLのCMRL培地を、血液のみが入ったコントロールウェルにプレーティングする。
・200μLの新たに採血されたヒト血液を各ウェルに添加する。
・プレートを振盪して穏やかに混合し、プレートをインキュベーターシェーカーに入れる。
・凝固時間について実験を観察する。
NHPにおける糖尿病および免疫抑制の誘導:
非ヒト霊長類モデルでは、糖尿病は、カニクイザルに適応された、近年開発されたストレプトゾトシンプロトコルを用いて糖尿病を化学的に誘導することができ、糖尿病状態およびドナー膵島の生存/機能を、インスリンならびに霊長類特異的およびブタ特異的C−ペプチドアッセイ(Roodら、2006、Casuら、2008、Bottinoら、2009)を用いてモニタリングすることができる。
誘導:
・1〜10mg/kgの抗胸腺細胞グロブリン(ATG)を2回(−3日目と−1日目)静脈投与して、0日目のT細胞数を<500細胞/mm3にする。
維持:
・ミコフェノール酸モフェチル(MMF)を50〜100mg/kg/日で経口投与して、全血トラフ濃度を3〜6μg/mlに12時間維持する。
・25mg/kgのCTLA4−Igを、−1日目、0日目、4日目、7日目、10日目、14日目、そして毎週、静脈投与する。
ブタ膵島の単離を、安楽死させたブタドナーから腎臓を摘出してすぐに行う。ブタ膵島は、ブタ用にデザインされた特定のコラゲナーゼブレンド、低い消化温度、酵素の穏やかな注入を用い、実質的に機械的に振盪させずに、Ricordiによって記載された半自動方法に改良を加えた方法で得る(Bottinoら、2007)。膵島の精製は、不連続勾配における細胞プロセッサー装置(COBE 29911)での遠心分離によって達成した(Bottinoら、2007、2009)。単離膵島の機能特性および生存度を、各膵島バッチについて評価する。自己免疫I型糖尿病の非ヒト霊長類モデルの非存在下で、高血糖を、ストレプトゾトシンの静脈注射(STZ、Zanosar、125〜150mg/kg)によって誘導する。サルの頸動脈および頸静脈に挿入され、繋留系に接続された血管系により、薬物送達および採血が容易になり、糖尿病誘導後の最適なインスリン静脈投与が可能となる。経静脈的グルコース負荷試験(IVGTT)およびアルギニン刺激試験(AST)を、ストレプトゾトシンの投与の前後で行って糖尿病の状態を確認し、そして移植後に分泌促進物質に対する移植片の応答を評価する。移植の日に、10%熱不活化ウシ胎仔血清、10mMニコチンアミド、2mMグルタミン、およびPen−Streptoが添加されたCMRL−1066培地で一晩培養した後に膵島をカウントし、Dextrane Sulphate 4mgを含むCMRLに再懸濁して凝固を防止し、5〜10分の時間、重力により門脈に注入する。膵島細胞破壊の指標であるブタC−ペプチドの放出を、膵島注入の1時間後および2時間後に測定し、ピークが、IBMIRによる初期の膵島細胞の消失の程度を示唆する。前の実験で得た組織学的データを使用して、導入遺伝子の初期膵島消失を防止する能力を評価することができる。血清C−ペプチド濃度は、互いに交差反応しない特異的なブタおよびヒト抗体を用いて決定し、内因性のインスリン産生と異種移植後の移植片のインスリン産生とを区別できるようにする(Casuら、2008)。
霊長類での糖尿病の処置におけるCD46発現細胞の有用性を決定するために、実施例9に記載されているようにカニクイザルに糖尿病を化学的に誘導した。
der Windtら、Am.J.Transplantation、9(12):2716−2726、2009を参照)。
pCTLA4−Igを発現する動物の開発が提案されたが、これらの動物は、重度の免疫不全である。CAGエンハンサー/プロモーターを用いて遍在的にpCTLA4−Igを発現するブタは、免疫不全表現型を有することが分かり、典型的な畜産環境では生存できなかった。
pREV835(CD39)導入遺伝子を追加するために胎仔548/A3(遺伝子改変:ホモ接合性GTKO/CD46/TFPI/CTLA4−Ig)由来の細胞のトランスフェクションを行った。実施例3に記載されている処置手順と同様の処置手順を用いて、胎仔線維芽細胞をpREV835導入遺伝子でトランスフェクトした。99のコロニーを回収し、実施例5に記載されている処置手順を用いてpREV835導入遺伝子の存在についてスクリーニングした。10の陽性コロニーの細胞をプールし、核導入での使用に備えた。プールされたpREV835陽性細胞を核ドナーとして用いて核導入を行い、続いて実施例4に記載されている処置手順にしたがった。胚を4匹のレシピエント雌ブタに移し、2匹が妊娠した。10匹の仔ブタが生まれ;これらのうちの4匹が生きて生まれた。遺伝子型分析により、4匹の生きて生まれたブタの内の3匹が、548/A3系由来の4つの遺伝子改変(GTKO/CD46/TFPI/CTLA4−Ig)に加えてpREV835(CD39)導入遺伝子を含んでいることが示された。本発明者らの知る限りでは、これは、5つ以上の遺伝子改変を有するブタが作製された最初である。
雌ブタ347−2(548/A3ドナー細胞を用いてNTによって作製されたブタ)のホモ接合性GTKO雄ブタとの自然交配により、自然妊娠して同腹仔の11匹のブタが産まれたため、このマルチトランスジェニック動物の受胎能が実証された。これらのブタの5匹が生きたまま生まれた。生きて生まれたブタの2匹は、親細胞系に固有のGTKOおよびCD46遺伝子改変はもちろん、雌親から伝達された2つの追加の膵島特異的(548/A3系)導入遺伝子(TFPIおよびCTLA4−Ig)を有していた。他の3匹の仔は、GTKOおよびCD46のみに対して陽性であった。以下の表は、347−2の仔の遺伝子型(サザン分析によって決定)のまとめである。
ブタ390−1からのブタ膵島の単離:
膵臓組織を、動物390−1、実施例12で作製された5つの遺伝子改変を有するブタから得た。膵臓から脂肪を切り取り、冷HBSS+0.5mg/mlコラゲナーゼP(Roche Applied Science、Indianapolis、IN)を注入した。膵臓を30分間、37℃に温めた。次いで、膵臓を冷HBSSの中に入れ、臓器を鉗子で切り裂いた。分散した組織を、メッシュスクリーン(30メッシュ)に通して大きい組織片を取り除いた。膵島を、Optiprep(商標)(Axis−Shield、Oslo、Norway)プロトコルを用いて精製した。組織ペレットを、RPMI 20mlおよびOptiprep希釈標準液10ml(最終濃度1.1g/ml)で再懸濁した。1.085 Optiprep(商標)8mlを積層し、次いでRPMI 10mlを積層した。管を、4℃で、500×gで5分間回転させた。最も上の界面に存在する膵島を取り出し、サンプルを染色して膵島の存在を確認した。ATPアーゼアッセイの準備として、膵島を96ウェルプレートに入れた。
CD39は、ATPおよびADPのAMPへの変換を触媒する(したがって、リン酸塩を遊離させる)細胞外酵素である。したがって、リン酸塩の遊離を測定するATPアーゼ発色アッセイ(QuantiChrom(商標)ATPase/GTPase Assay Kit、BioAssay Systems(Hayward、CA))を使用して、野生型ブタから単離した膵島と比較した、ブタ膵島におけるCD39導入遺伝子の機能性を決定した。CD39を高レベルで遍在的に発現するブタ(動物325.1)由来の胎仔線維芽細胞を陽性コントロールとして使用した。
90μlの2×サンプル希釈液
1.8μlの100mM ATP(最終1mM濃度)またはH2O
38.2μlのH2O 。
膵臓組織のサンプルを、約3ヶ月齢の仔ブタ390−1(遺伝子型:GTKO、CD46、TFPI、CTLA4−Ig、およびCD39トランスジェニック)から採取して、実施例7に記載されているようにIFによって表現型を特徴付けた。膵臓におけるすべてのトランスジェニックタンパク質に強い染色が現れ:CD46、TFPI、CTLA4−Ig、およびCD39(図9);膵島細胞成分で顕著であった。検査した組織における膵島のインスリン染色も示される。TFPI、CTLA4−Ig、およびCD39の発現は、膵島特異的であり、試験した他組織/臓器(図示しない)では見られなかった。すべてのアイソタイプコントロールは、染色が陰性であった(図示しない)。
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- 本明細書に記載の発明。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019530453A (ja) * | 2016-09-30 | 2019-10-24 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. | C9orf72座位中にヘキサヌクレオチドリピート伸長を有する非ヒト動物 |
Families Citing this family (34)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2006292827B2 (en) | 2005-08-09 | 2013-02-14 | Revivicor, Inc. | Transgenic ungulates expressing CTLA4-IG and uses thereof |
US9420770B2 (en) | 2009-12-01 | 2016-08-23 | Indiana University Research & Technology Corporation | Methods of modulating thrombocytopenia and modified transgenic pigs |
ES2691618T3 (es) * | 2011-05-16 | 2018-11-28 | The Curators Of The University Of Missouri | Animales resistentes al virus del síndrome reproductivo y respiratorio porcino |
WO2013063076A1 (en) * | 2011-10-25 | 2013-05-02 | Indiana University Research & Technology Corporation | Compositions for and methods of modulating complications, risks and issues with xenotransplantation |
US20140112958A1 (en) * | 2012-10-24 | 2014-04-24 | Mwm Biomodels Gmbh | Pancreatic islets of transgenic LEA29Y animals for treating diabetes |
US20140115728A1 (en) | 2012-10-24 | 2014-04-24 | A. Joseph Tector | Double knockout (gt/cmah-ko) pigs, organs and tissues |
US20150139994A1 (en) * | 2013-11-12 | 2015-05-21 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for preventing allogeneic immune rejection |
CN103675291A (zh) * | 2013-11-25 | 2014-03-26 | 南昌大学 | 一种基于t细胞表位筛查低乳糜泻毒性小麦品种的方法 |
JP6621420B2 (ja) * | 2014-04-11 | 2019-12-18 | ウニベルシテ カソリーク デ ルーベン | 糖尿病を治療するためのトランスジェニックブタ膵島およびその使用 |
KR102656470B1 (ko) * | 2014-12-10 | 2024-04-09 | 리전츠 오브 더 유니버스티 오브 미네소타 | 질환을 치료하기 위한 유전적으로 변형된 세포, 조직 및 장기 |
WO2016168212A1 (en) * | 2015-04-13 | 2016-10-20 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Humanized sirpa-il15 knockin mice and methods of use thereof |
RU2020115485A (ru) | 2015-05-29 | 2020-06-11 | Регенерон Фармасьютикалс, Инк. | Животные, отличные от человека, с нарушением в локусе c9orf72 |
WO2017023570A1 (en) | 2015-08-06 | 2017-02-09 | The Curators Of The University Of Missouri | Pathogen-resistant animals having modified cd163 genes |
JP6617495B2 (ja) * | 2015-09-18 | 2019-12-11 | 東ソー株式会社 | 腫瘍細胞の検出方法 |
US11214789B2 (en) | 2016-05-03 | 2022-01-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Concentration and washing of particles with acoustics |
CN109640645B (zh) * | 2016-06-14 | 2021-10-15 | 明尼苏达大学董事会 | 用于治疗疾病的遗传修饰的细胞、组织和器官 |
CA3039068A1 (en) * | 2016-10-07 | 2018-04-12 | Secarna Pharmaceuticals Gmbh & Co. Kg | Immunosuppression-reverting oligonucleotides inhibiting the expression of cd39 |
KR101960414B1 (ko) * | 2016-11-11 | 2019-03-27 | 대한민국 | 사람 유래 dpp-4 유전자를 이용한 당뇨 질환 모델용 형질전환돼지 및 이의 용도 |
US11172657B2 (en) | 2017-09-19 | 2021-11-16 | Pormedtec Co., Ltd. | Method for developing organ that lacks specific functional cell |
KR101833225B1 (ko) | 2017-09-26 | 2018-03-02 | 주식회사 엠젠플러스 | 인간 프로인슐린을 발현하는 형질전환 돼지 및 이의 제조방법 |
US11160260B2 (en) | 2018-04-17 | 2021-11-02 | The Curators Of The University Of Missouri | Methods for protecting porcine fetuses from infection with porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) |
US10883084B2 (en) | 2018-10-05 | 2021-01-05 | Xenotherapeutics, Inc. | Personalized cells, tissues, and organs for transplantation from a humanized, bespoke, designated-pathogen free, (non-human) donor and methods and products relating to same |
CN116889649A (zh) | 2018-10-05 | 2023-10-17 | 药物治疗股份有限公司 | 生物制品在制造用于人接受者的移植物中的应用 |
SG11202105189RA (en) | 2018-12-20 | 2021-06-29 | Regeneron Pharma | Nuclease-mediated repeat expansion |
WO2020228043A1 (en) * | 2019-05-16 | 2020-11-19 | Egenesis, Inc. | Cells, tissues, organs, and/or animals having one or more modified genes for enhanced xenograft survival and/or tolerance |
WO2021072777A1 (en) * | 2019-10-18 | 2021-04-22 | Egenesis, Inc. | Cells, tissues, organs, and/or animals having one or more modified genes for enhanced xenograft survival and/or tolerance |
EP3969596A4 (en) * | 2019-05-16 | 2023-10-18 | Egenesis, Inc. | CELLS, TISSUES, ORGANS AND/OR ANIMALS WITH ONE OR MORE MODIFIED GENES FOR IMPROVED XENOTRANSPLANT SURVIVAL AND/OR TOLERANCE |
WO2021072778A1 (en) * | 2019-10-18 | 2021-04-22 | Egenesis, Inc. | Cells, tissues, organs, and/or animals having one or more modified genes for enhanced xenograft survival and/or tolerance |
WO2020228039A1 (en) * | 2019-05-16 | 2020-11-19 | Egenesis, Inc. | Cells, tissues, organs, and/or animals having one or more modified genes for enhanced xenograft survival and/or tolerance |
JP2023509072A (ja) * | 2020-01-07 | 2023-03-06 | イージェネシス,インコーポレイテッド | 異種膵島細胞の産生のための方法及び組成物並びにそれを用いたインスリン抵抗性又は欠乏状態の処置 |
CN113429475A (zh) * | 2020-03-23 | 2021-09-24 | 成都中科奥格生物科技有限公司 | 一种胶原材料及其制备方法和用途 |
AU2021292671A1 (en) * | 2020-06-17 | 2022-12-22 | Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc. | Encapsulated pancreatic islet |
CN111955422A (zh) * | 2020-08-21 | 2020-11-20 | 五邑大学 | 一种可用于异种器官移植的供体猪的构建方法 |
CN113016721A (zh) * | 2021-03-29 | 2021-06-25 | 何冬凌 | 中华眼镜蛇咬伤猪模型的制备及用途 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007523631A (ja) * | 2003-11-26 | 2007-08-23 | デイナ−ファーバー キャンサー インスティチュート,インコーポレイテッド | 膵臓腺癌の動物モデルおよびその使用 |
JP2007529278A (ja) * | 2004-03-17 | 2007-10-25 | レビビコア, インコーポレイテッド | 機能的α1,3ガラクトシルトランスフェラーゼを欠く動物に由来する組織生成物 |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NZ235657A (en) | 1989-10-12 | 1994-05-26 | Imutran Ltd | Graftable animal cells or tissue and transgenic animals capable of expressing homologous complement restriction factors active in discordant recipient species and their use |
US6482404B1 (en) | 1989-10-12 | 2002-11-19 | David James White | Transplantation of tissue comprising a DNA sequence encoding a homologous complement restriction factor |
US5859307A (en) | 1992-02-04 | 1999-01-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Mutant RAG-1 deficient animals having no mature B and T lymphocytes |
US5578314A (en) | 1992-05-29 | 1996-11-26 | The Regents Of The University Of California | Multiple layer alginate coatings of biological tissue for transplantation |
US5821117A (en) | 1993-03-16 | 1998-10-13 | The Austin Research Institute | Xenotransplantation therapies |
JPH09508277A (ja) | 1994-01-27 | 1997-08-26 | ブレサゲン リミテッド | ヒト異種移植における超急性拒絶の管理のための物質及び方法 |
WO1995028412A1 (en) | 1994-04-13 | 1995-10-26 | Biotransplant, Inc. | α(1,3) GALACTOSYLTRANSFERASE NEGATIVE SWINE |
US6235969B1 (en) * | 1997-01-10 | 2001-05-22 | University Of Massachusetts | Cloning pigs using donor nuclei from non-quiescent differentiated cells |
ATE318316T1 (de) | 1997-03-26 | 2006-03-15 | Imp College Innovations Ltd | In der zellmembran verankertes antikoagulant- fusionsprotein |
GB9809280D0 (en) | 1998-04-30 | 1998-07-01 | Rpms Technology Ltd | Immunosupression |
US20020012660A1 (en) | 1999-03-04 | 2002-01-31 | Alan Colman | Method of preparing a somatic cells for nuclear transfer |
US6303355B1 (en) | 1999-03-22 | 2001-10-16 | Duke University | Method of culturing, cryopreserving and encapsulating pancreatic islet cells |
AU1340101A (en) | 1999-10-22 | 2001-05-08 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | An engineered recombinant molecule that regulates humoral and cellular effector functions of the immune system |
EP1248640B1 (en) | 2000-01-20 | 2006-10-04 | Diabcell Pty Limited | Preparation and xenotransplantation of porcine islets |
PL204899B1 (pl) | 2001-05-23 | 2010-02-26 | Bristol Myers Squibb Co | Zastosowanie rozpuszczalnej zmutowanej cząsteczki CTLA4 |
EP1465481A4 (en) | 2001-12-21 | 2007-09-12 | Univ Missouri | KNOCK-OUT PORK AND METHODS OF MAKING THE SAME |
CA2507486A1 (en) | 2002-08-14 | 2004-02-26 | Immerge Biotherapeutics, Inc. | .alpha.(1,3)-galactosyltransferase null cells, methods of selecting and .alpha.(1,3)-galactosyltransferase null swine produced therefrom |
WO2004028243A2 (en) * | 2002-08-21 | 2004-04-08 | Revivicor, Inc. | Porcine animals lacking any expression of functional alpha 1,3 galactosyltransferase |
CN1953657A (zh) * | 2004-03-17 | 2007-04-25 | 雷维维科公司 | 来源于缺乏任何功能性α1,3半乳糖基转移酶表达的动物的组织产品 |
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007523631A (ja) * | 2003-11-26 | 2007-08-23 | デイナ−ファーバー キャンサー インスティチュート,インコーポレイテッド | 膵臓腺癌の動物モデルおよびその使用 |
JP2007529278A (ja) * | 2004-03-17 | 2007-10-25 | レビビコア, インコーポレイテッド | 機能的α1,3ガラクトシルトランスフェラーゼを欠く動物に由来する組織生成物 |
Non-Patent Citations (8)
Title |
---|
CELL, vol. Vol. 18, JPN6014049063, 1979, pages pp. 545-558 * |
COMPARATIVE IMMUNOLOGY, MICROBIOLOGY & INFECTIOUS DISEASES, vol. Vol. 32, JPN6014049059, March 2009 (2009-03-01), pages pp. 91-105 * |
IMMUNOLOGY TODAY, vol. Vol. 21, No. 1, JPN7014003302, 2000, pages pp. 42-48 * |
SCIENCE, vol. Vol. 230, JPN6014049065, 1985, pages pp. 912-916 * |
TRANSPLANT IMMUNOLOGY, vol. Vol. 21, JPN6014049061, June 2009 (2009-06-01), pages pp. 57-59 * |
TRANSPLANT INTERNATIONAL, vol. Vol. 20, JPN7014003300, 2007, pages pp. 107-117 * |
XENOTRANSPLANTATION, vol. Vol. 10, JPN6017043768, 2003, pages pp. 615-621 * |
XENOTRANSPLANTATION, vol. Vol. 15, JPN7014003301, 2008, pages pp. 87-90 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019530453A (ja) * | 2016-09-30 | 2019-10-24 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. | C9orf72座位中にヘキサヌクレオチドリピート伸長を有する非ヒト動物 |
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