JP2016026185A - Hsf1関連疾患を処置するための有機組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】個体におけるHSF1の発現を阻害するための医薬組成物であって、当該医薬組成物は第1の鎖および第2の鎖を含むHSF1に対するRNAi剤を含み、第1の鎖の配列は、配列番号:637、638、639、681、781、782、783または784の配列を含み、第1の鎖および/または第2の鎖は修飾されており、第1の鎖は約30以下のヌクレオチドの長さである、医薬組成物。
【選択図】なし
Description
1つの態様において、本願明細書は、アンチセンス鎖を含むRNAi剤を含む組成物であって、該アンチセンス鎖は、本明細書に記載の表(例えば、表1、表2、表3、表3A、表8、表9A、表9Bなど)において提供される任意の配列から選択されるHSF1に対するRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む、組成物に関する。別の態様において、本願明細書は、センス鎖およびアンチセンス鎖を含むRNAi剤を含む組成物であって、該アンチセンス鎖は、本明細書において提供される任意の配列から選択されるHSF1に対するRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む、組成物に関する。別の態様において、本願明細書は、センス鎖およびアンチセンス鎖を含むRNAi剤を含む組成物であって、該センス鎖は、センス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含み、そして該アンチセンス鎖は、直前に記載されているHSF1に対するRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む、組成物に関する。
1つの態様において、本願明細書は、アンチセンス鎖を含むRNAi剤を含む特定の組成物であって、該アンチセンス鎖は、表1、2、3、3A、8、9Aおよび9Bにおける任意の1つ以上の配列から選択されるHSF1に対するRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む、組成物に関する。別の態様において、本願明細書は、センス鎖およびアンチセンス鎖を含むRNAi剤を含む組成物であって、該アンチセンス鎖は、表1、2、3、3A、8、9Aおよび9Bの任意の1つ以上において記載されているHSF1に対するRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む、組成物に関する。別の態様において、本願明細書は、センス鎖およびアンチセンス鎖を含むRNAi剤を含む組成物であって、該センス鎖は、センス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含み、そして該アンチセンス鎖は、直前に記載されているHSF1に対するRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む、組成物に関する。特定の二本鎖は、上記提供されている特定の二本鎖、ならびに表1、表2、表3、表3A、表8、表9Aおよび表9Bの任意の1つ以上において記載されている特定の二本鎖を含む。上記それぞれの組成物のさらなる修飾された配列(例えば、1つ以上の修飾された塩基を含む配列)もまた、本願記載の一部として考慮される。
1つの特定の態様において、本願明細書は、アンチセンス鎖を含むRNAi剤を含む組成物であって、該アンチセンス鎖は、上記で提供されている、および表1、表2、表3、表3A、表8、表9Aおよび表9Bに記載されている特定の二本鎖におけるアンチセンス鎖から選択されるHSF1に対するRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む、組成物に関する。
1つの態様において、組成物は、HSF1に対する第2のRNAi剤をさらに含む。種々の態様において、第2のRNAi剤は、第1のRNAi剤から物理学的に分離されるか、または2つは、物理学的に連結される(例えば、共有的に連結されるか、または、さもなければ接合される)。
1つの特定の態様において、本願明細書は、センス鎖およびアンチセンス鎖を含むRNAi剤を含む組成物であって、該センス鎖およびアンチセンス鎖は、上記で提供されている、および表1、表2、表3、表3A、表8、表9Aおよび表9Bに記載されている特定の二本鎖から選択されるHSF1に対するRNAi剤のセンス鎖およびアンチセンス鎖のそれぞれと0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む、組成物に関する。
1つの態様において、組成物は、HSF1に対する第2のRNAi剤を含む。種々の態様において、第2のRNAi剤は、第1のRNAi剤から物理学的に分離されるか、または2つは、物理学的に連結される(例えば、化学的に連結されるか、または、さもなければ接合される)。
1つの特定の態様において、本願明細書は、治療有効量のアンチセンス鎖を含むRNAi剤を含む組成物を個体に投与する工程を含む個体におけるHSF1関連疾患を処置する方法であって、該アンチセンス鎖は、上記で提供されている、および表1、表2、表3、表3A、表8、表9Aおよび表9Bに記載されている特定の二本鎖から選択されるHSF1に対するRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む、方法に関する。1つの態様において、HSF1に対するRNAi剤は、センス鎖と二本鎖にされたアンチセンス鎖を含み、ここに、該センス鎖およびアンチセンス鎖は、表1、表2、表3、表3A、表8、表9Aまたは表9において提供される1つ以上の配列から選択される。
1つの態様において、HSF1関連疾患は、増殖性疾患、例えば、癌であるか、または、自己免疫疾患であるか、またはウイルス疾患である。
1つの特定の態様において、本願明細書は、治療有効量の本明細書に記載のRNAi剤を含む組成物を個体に投与する工程を含む個体におけるHSF1の発現を阻害する方法に関する。1つの態様において、RNAiは、センス鎖およびアンチセンス鎖を含み、ここに、該アンチセンス鎖は、上記で提供されている、および表1、表2、表3、表3A、表8、表9Aおよび表9Bに記載されている特定の二本鎖から選択されるHSF1に対するRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3個のヌクレオチドが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含む。
1つの態様において、個体は、HSF1関連疾患に罹患しているか、または罹患しやすい。
本明細書の種々の特定の態様は、以下に記載されている。
1つの態様において、本明細書は、個体におけるHSF1関連疾患を処置する方法における使用のための上記態様のいずれかに記載の組成物であって、該方法は、治療有効量の請求項のいずれかに記載の組成物を個体に投与する工程を含む、組成物に関する。
1つの態様において、本明細書は、個体におけるHSF1の発現を阻害する方法における使用のための上記態様のいずれかに記載の組成物であって、該方法は、治療有効量の上記態様のいずれかに記載の組成物を個体に投与する工程を含む、組成物に関する。
「HSF1」は、熱ショック因子1または熱ショック転写因子1(HSTF1)の遺伝子またはタンパク質を意味する。HSF1は、熱ショック応答のマスターレギュレーターであり、多数の遺伝子は、温度上昇および他のストレスに応答して誘導される。HSF1は、染色体8q24.3上のHGNC ID HGNC:5224で示されている。それは(相同体を含む)、また、GeneID: 3297;RefSeq IDs NM_005526;AccNo. M64673;Mouse Genome Database ID MGI:96238;Rat Genome Database ID RGD:620913;Entrez Gene ID 3297;CCDS IDs CCDS6419.1;Pubmed IDs 1871105;Ensembl ID ENSG00000185122;OMIM ID (NCBI) 140580;UCSC ID (UCSC) uc003zbt.2;および/またはUniProt ID(UniProtにより提供されるマップデータ) Q00613として同定される。
MDLPVGPGAAGPSNVPAFLTKLWTLVSDPDTDALICWSPSGNSFHVFDQGQFAKEVLPKYFKHNNMASFVRQLNMYGFRKVVHIEQGGLVKPERDDTEFQHPCFLRGQEQLLENIKRKVTSVSTLKSEDIKIRQDSVTKLLTDVQLMKGKQECMDSKLLAMKHENEALWREVASLRQKHAQQQKVVNKLIQFLISLVQSNRILGVKRKIPLMLNDSGSAHSMPKYSRQFSLEHVHGSGPYSAPSPAYSSSSLYAPDAVASSGPIISDITELAPASPMASPGGSIDERPLSSSPLVRVKEEPPSPPQSPRVEEASPGRPSSVDTLLSPTALIDSILRESEPAPASVTALTDARGHTDTEGRPPSPPPTSTPEKCLSVACLDKNELSDHLDAMDSNLDNLQTMLSSHGFSVDTSALLDLFSPSVTVPDMSLPDLDSSLASIQELLSPQEPPRPPEAENSSPDSGKQLVHYTAQPLFLLDPGSVDTGSNDLPVLFELGEGSYFSEGDGFAEDPTISLLTGSEPPKAKDPTVS (配列番号:2050)
本明細書において使用される「HSF1関連疾患」なるフレーズは、1つ以上の増殖性疾患、例えば、癌(該癌は、膀胱、骨、乳房、子宮頸、大腸、結腸直腸、子宮内膜、線維肉腫、胃腸、造血器、腸、腎臓、肝臓、肺、リンパ腫、神経外胚葉、神経芽腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、卵巣、膵臓、胸膜、前立腺、皮膚、扁平上皮、胃、および精巣癌、白血病、前骨髄球性白血病、ならびにホジキン病の1つ以上の癌から選択される);ウイルス疾患(該ウイルス疾患は、全体または一部においてアデノウイルス、単純ヘルペスウイルス、ヒト サイトメガロウイルス、HTLV−1、SV40、ポリオーマ・ウイルス、HIV、および/またはエプスタイン−バー・ウイルスが介在する1つ以上のウイルス疾患から選択される);ならびに自己免疫疾患(該自己免疫疾患は、1つ以上の狼瘡およびリウマチ性関節炎から選択される)を意味する。
ヒトHSF1遺伝子は、クローニングされている、Rabindranら 1991 Proc. Natl. Acad. Sci USA 88: 6906-6910。種々の配列が、Genbank identifier NM_005526.2を含むヒトHSF1に利用できる。マウス(ハツカネズミ)HSF1遺伝子は、例えば、Genbank id NM_008296.2である。別のマウスHSF1配列は、Acc. Number XM_128055として利用できる(Yinら 2005 J. Mol. Cell. Card. 39: 681-689において使用されるとおり)。
表A2
1つの態様において、本願明細書のHSF1 RNAi剤は、本明細書に記載されている配列を含み、それが必要である患者(例えば、癌および/またはウイルス疾患および/または自己免疫疾患および/またはHSF1関連疾患に罹患している患者)に投与される。1つの態様において、本願明細書のHSF1 RNAi剤は、疾患に適当である1つ以上のさらなる医薬と共に、それが必要である患者に投与される。例えば、癌に罹患している患者は、薬理学的に有効量の1つ以上の本明細書に記載されている任意の癌処置および/または当分野で知られている任意の他の癌処置と共に、薬理学的に有効量の1つ以上のHSF1 RNAi剤を投与され得る。
便宜上、本明細書、実施例および特許請求の範囲において使用される特定の用語および句の意味を、以下に提供する。本明細書の他の部分における用語の慣習およびこのセクションにおいて提供されるその定義間で明らかな矛盾がある場合、このセクションにおける定義を優先する。
本明細書において使用される「RNAi剤」、「HSF1に対するRNAi剤」、「HSF1に対するsiRNA」、「HSF1 siRNA」などなる用語は、HSF1遺伝子に特異的に結合する、siRNA(低分子干渉RNA)、shRNA(短もしくは小ヘアピン型RNA)、iRNA(干渉RNA)剤、RNAi(RNA干渉)剤、dsRNA(二本鎖RNA)、microRNAなどを示す。本明細書において使用される「iRNA」または「RNAi」なる用語は、RNAを含み、RNA誘導型サイレンシング複合体(RISC)経路を介して別のRNA転写産物の標的化開裂を介在する薬剤を示す。1つの態様において、RNAi剤は、RISC複合体/経路を活性化するオリゴヌクレオチド組成物である。別の態様において、RNAi剤は、アンチセンス鎖配列(アンチセンスオリゴヌクレオチド)を含む。1つの態様において、RNAiは、単一の鎖を含む。この一本鎖RNAi剤のオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドは、Sioud 2005 J. Mol. Biol. 348:1079-1090および本明細書における文献により記載されているセンスまたはアンチセンス鎖を含むことができる。したがって、本明細書は、本明細書に記載されているRNAi剤のセンスまたはアンチセンス鎖のいずれかを含む単一の鎖を有するRNAi剤を包含する。
本明細書において使用される「標的配列」または「標的遺伝子」は、一次転写産物のRNAプロセッシング産物であるmRNAを含む、遺伝子、例えば、HSF1遺伝子の転写中に形成されるmRNA分子のヌクレオチド配列の連続した部分を示す。配列の標的部分は、その位置でまたはその位置付近でiRNA指向性開裂に関して基質として働くために少なくとも十分な長さである。例えば、標的配列は、一般的に約9−36ヌクレオチド(「nt」)の長さ、例えば、約15−30ヌクレオチドの長さであり、それらの間の全ての部分的な範囲を含む。非限定的な例として、標的配列は、約15−30nt、約15−26nt、約15−23nt、約15−22nt、約15−21nt、約15−20nt、約15−19nt、約15−18nt、約15−17nt、約18−30nt、約18−26nt、約18−23nt、約18−22nt、約18−21nt、約18−20nt、約19−30nt、約19−26nt、約19−23nt、約19−22nt、約19−21nt、約19−20nt、約20−30nt、約20−26nt、約20−25nt、約20−24nt、約20−23nt、約20−22nt、約20−21nt、約21−30nt、約21−26nt、約21−25nt、約21−24nt、約21−23nt、または約21−22ntであり得る。
本明細書において使用される「二本鎖RNA」または「dsRNA」なる用語は、2つの逆平行のおよび実質的に相補的な核酸鎖を含むハイブリダイズされた二本鎖領域を有するRNA分子または分子の複合体を含むiRNAを示し、標的RNAに対して「センス」および「アンチセンス」方向を有すると称される。mRNA標的に対するアンチセンス鎖はまた、「ガイド」鎖とも呼ばれ、センス鎖はまた、「パッセンジャー」鎖とも呼ばれる。パッセンジャー鎖は、少なくとも1つ以上の以下のもの:他の鎖と比較して1つ以上の余分なヌクレオチド(例えば、バルジ(bulge)または1ntのループ)、他の鎖と比較してニック、ギャップなどを含むことができる。
本明細書において使用される「下方調節する」は、HSF1の生物学的活性および/または発現におけるあらゆる統計的に有意な減少、例えば、活性(すなわち、完全阻害)および/または発現の完全な阻止を示す。例えば、「下方調節」は、HSF1活性および/または発現において少なくとも約10、20、30、40、50、60、70、80、90または100%の減少を示し得る。
1つの態様において、本明細書は、HSF1遺伝子(またはその部分)に相補的であるHSF1 RNAi剤もしくは他のアンチセンス核酸、またはアンチセンス核酸をコードする組換え発現ベクターに関する。本明細書において使用される「アンチセンス」核酸は、HSF1タンパク質をコードする「センス」核酸に相補的である(例えば、HSF1遺伝子の二本鎖DNAのコード鎖に相補的である、mRNAに相補的である、または、コード鎖に相補的である)ヌクレオチド配列を含む。
当業者は、「RNA分子」または「リボヌクレオチド分子」なる用語は、天然に発現される、または見いだせるRNA分子のみでなく、本明細書に記載されている、または当分野で知られている1つ以上のリボヌクレオチド/リボヌクレオシド類似体または誘導体を含むRNAの類似体および誘導体も包含すると認識できる。厳密に言えば、「リボヌクレオシド」は、ヌクレオシド塩基およびリボース糖を含み、「リボヌクレオチド」は、1、2または3つのリン酸部分を有するリボヌクレオシドである。しかしながら、「リボヌクレオシド」および「リボヌクレオチド」なる用語は、本明細書において使用されるとき均等であると考えることができる。RNAは、例えば、本明細書の以下に記載されている核酸塩基構造またはリボース−リン酸骨格構造において修飾され得る。しかしながら、リボヌクレオシド類似体または誘導体を含む分子は、二本鎖を形成する能力を保持しなければならない。非限定的な例として、RNA分子は、また、限定はしないが、2’−O−メチル修飾ヌクレオチド、5’ホスホロチオエート結合基を含むヌクレオシド、コレステリル誘導体またはドデカン酸ビスデシルアミド基に連結した末端ヌクレオシド、ロックヌクレオシド、脱塩基ヌクレオシド、2’−デオキシ−2’−フルオロ修飾ヌクレオシド、2’−アミノ−修飾ヌクレオシド、2’−アルキル−修飾ヌクレオシド、モルホリノヌクレオシド、非ロックリボヌクレオチド(例えば、WO2008/147824に記載されている非環状ヌクレオチドモノマー)、ヌクレオシドを含むホスホロアミダートもしくは非天然塩基、またはそれらの任意の組合せを含む、少なくとも1つ修飾されたリボヌクレオシドを含むことができる。あるいは、RNA分子は、少なくとも2つの修飾されたリボヌクレオシド、少なくとも3、少なくとも4、少なくとも5、少なくとも6、少なくとも7、少なくとも8、少なくとも9、少なくとも10、少なくとも15、少なくとも20またはそれ以上、最大全長のdsRNA分子を含むことができる。修飾は、必ずしも、RNA分子におけるこのような複数の修飾されたリボヌクレオシドのそれぞれで同じではない。1つの態様において、本明細書に記載されている方法および組成物における使用のために考慮される修飾されたRNAは、必要な二本鎖構造を形成する能力を有し、RISC経路を介して標的RNAの特異的な分解を可能にするか、または介在するペプチド核酸(PNA)である。
RNAi(RNA干渉)は、種々の系において研究されている。ショウジョウバエの胚溶解物における最近の研究は(Elbashirら 2001 EMBO J. 20: 6877およびTuschlら国際PCT公開WO01/75164)、siRNAの長さ、構造、化学的組成、および効率的なRNAi活性を介在するために重要である配列の特定の必要条件を示した。これらの研究は、21−ヌクレオチドのsiRNA二本鎖が、3’−末端ジヌクレオチドオーバーハングを含むとき、非常に活性であることを示した。2’−デオキシヌクレオチド(2’−H)での3’−末端siRNAオーバーハングヌクレオチドの置換は、許容された。加えて、siRNA二本鎖の標的相補鎖上の5’−リン酸は、通常、siRNA活性のために必要である。
本願明細書のRNAi剤は、当分野で知られている任意の方法により、(例えば、インビトロで細胞または患者に)送達または導入することができる。
本明細書において特に有用であるsiRNAは、HSF1のmRNAの領域に特異的に結合することができ、1つ以上の以下の性質:HSF1のコーディングセグメントに結合する;5’非翻訳領域の結合部およびコーディングセグメントの開始部またはその付近に結合する;mRNAの翻訳開始部位またはその付近に結合する;エキソンおよびイントロンの接合部またはその付近に結合する;他の遺伝子のmRNAにほとんど結合しない(ほとんど「的外れの効果」を示さない);二本鎖またはステム領域ではない領域またはその付近、例えば、ループまたは一本鎖部分でHSF1のmRNAに結合する;免疫原性をほとんど引き起こさない;保存された配列の存在が種々の実験動物を使用する試験を容易にするため、種々の動物種(ヒト、マウス、ラット、カニクイザルなどを含む)中で保存されているHSF1のmRNA配列のセグメントに結合する;mRNAの二本鎖領域に結合する;ATリッチ領域(例えば、少なくとも約50、51、52、53、54、55、56、57、58、59または60%ATリッチ)に結合する;ならびに、siRNA活性を減少させることが知られているか、または疑われている特定の配列、例えば、siRNAの二本鎖部分の分離を減少させ得る5’末端のGG配列の存在を欠いている性質を有するものを含む。
RNAi剤は、第1の鎖および第2の鎖を含む。1つの態様において、第1および第2の鎖は、それぞれセンス鎖およびアンチセンス鎖である。他の態様において、第1および第2の鎖は、それぞれアンチセンスおよびセンス鎖である。したがって、第1の鎖は、本明細書に記載されている任意の配列、または最大3個の不一致を有する15個の連続したヌクレオチドを含むその変異体配列のセンスまたはアンチセンス鎖を含むことができ;したがって、第2の鎖は、本明細書に記載されている任意の配列、または最大3個の不一致を有する15個の連続したヌクレオチドを含むその変異体配列の対応するアンチセンスまたはセンス鎖を含むことができる。
RNAi剤は0、1または2個のオーバーハングを有し得;0ntのオーバーハングの場合、両方の末端が平滑末端である。RNAi剤は0、1または2個の平滑末端を有し得る。「平滑末端RNAi剤」において、鎖は末端で不対ヌクレオチドを含まず;したがって、平滑末端分子は3’または5’のいずれかの一本鎖ヌクレオチドオーバーハングを欠いている。
当分野で知られている任意の方法を、siRNAにより誘導されるHSF1活性、レベルおよび/または発現の変化を測定するために使用することができる。測定をsiRNAの投与前、中および後の複数の時点で行い、siRNAの効果を測定することができる。
HSF1発現の文脈において本明細書において使用される、「処置する」、「処置」などなる用語は、HSF1発現が介在する病理学的プロセスの軽減または緩和を示す。本願明細書の文脈において、以下の本明細書に記載されている他のいずれかの状態(HSF1発現が介在する病理学的プロセス以外)に関する限りにおいて、「処置する」、「処置」などなる用語は、このような状態と関連する少なくとも1つの症状を軽減または緩和する、またはこのような状態の進行もしくは予測される進行の遅延または逆転、例えば、脂質障害、例えば、アテローム性動脈硬化症の進行の遅延を意味する。
本明細書において使用される「医薬組成物」は、薬理学的に有効量のiRNAおよび薬学的に許容される担体を含む。本明細書において使用される「薬理学的に有効量」、「治療有効量」または単に「有効量」は、意図される薬理学的、治療的または予防的結果を生じるために有効なiRNAの量を示す。例えば、与えられた臨床的処置が、疾患または障害と関連する測定可能なパラメーターにおいて少なくとも10%の減少があるとき、有効であると考慮されるとき、治療有効量の疾患または障害の処置のための薬物は、該パラメーターにおいて少なくとも10%減少をもたらすために必要な量である。例えば、治療有効量のHSF1を標的とするiRNAは、少なくとも10%のHSF1タンパク質レベルを減少させることができる。
特定の態様において、本願明細書は、1つ以上のHSF1 RNAi剤を含む組成物である。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20278、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20279、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20280、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20281、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20282、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20283、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20303、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20313、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20315、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20348、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20362、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20364、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20365、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20366、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20373、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20376、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20377、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20378、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20386、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20391、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20392、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20397、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20398、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20399、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20401、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20402、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20403、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20404、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20406、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20407、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20408、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20409、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20410、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20411、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20413、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20422、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20434、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20435、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20437.4、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20437、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20438、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20439、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20487.7、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20487、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20488、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20489.2、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20489、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20490、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20491、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20493、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20495、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20502、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20507、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20527、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20535、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20544、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20545、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20546、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20547、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20548、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20549、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20552、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20555、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20556、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20557、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20558、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20560.4、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20560、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20561、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20562、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20564、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20565、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20566、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20570、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20572、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20574、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20575、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20577、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20578、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20579、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20580、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20597、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20598、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20625、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20626、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20627、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20633、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20640、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20644、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20646、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20648、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20650、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20652、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20653、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20660、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20661、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20671、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20693、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20694、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20700、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20702、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20707、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20709、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20710、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20716、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20728、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20730、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20741、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20764、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−20783、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−30071、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−36969、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−36970、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37718、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37719、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37720、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37721、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37722、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37723、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37724、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37725、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37727、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37728、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37729、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37730、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37731、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37732、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37733、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37734、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37735、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−30071.2、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−36969.2、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−36970.2、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37718.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37719.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37720.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37721.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37722.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37724.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37725.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37726.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37727.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37728.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37729.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37730.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37731.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37732.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37733.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37734.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37735.1、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37736、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37737、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37738、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37739、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37740、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37741、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
1つの態様において、本願明細書は、AD−37742、または修飾された、もしくは修飾されていないその変異体を含むか、またはそれらからなる。
種々の態様において、本願明細書は、第1および第2の鎖を含むRNAi剤であって、該第1の鎖は第1の鎖と0、1、2または3ntが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含み、該第2の鎖は本明細書に記載されている任意の1つ以上のRNAi剤の第2の鎖と0、1、2または3ntが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含むRNAi剤を含む。
種々の態様において、本願明細書は、センスおよびアンチセンス鎖を含むRNAi剤であって、該アンチセンス鎖は、本明細書に記載されている任意のRNAi剤のアンチセンス鎖と0、1、2または3ntが異なっている少なくとも15個の連続したヌクレオチドを含むRNAi剤を含む。
種々の態様において、本願明細書は、センスおよびアンチセンス鎖を含むRNAi剤であって、該アンチセンス鎖は、本明細書に記載されている任意のRNAi剤のアンチセンス鎖を含むか、またはそれらからなるRNAi剤を含む。
HSF1に対する特定のRNAi剤は、科学文献、例えば、Rossiら 2006 Cancer Res. 66:7678-85; Dokladnyら 2008 Am. J. Pathology 72:659-70; Jacobsら 2007 J. Biol. Chem. 282: 33412-20; Pageら 2006 Mol. Biosystems 2:627-39; Zhaoら 2007 Diabetes 56: 1436-1444;およびDuら 2009 J. Cell. Phys. 218:631-637において記載されている。配列および修飾の両方において同一でない限り、本発明の組成物は、これらのRNAi剤を含まない。
種々の態様において、本明細書は、重複配列を有するRNAi剤のグループに関する。したがって、本明細書は、RNAi剤のグループを含み、ここで、グループ中のそれぞれのRNAi剤は、同じグループ中のRNAi剤と互いに少なくとも5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19個またはそれ以上のヌクレオチドで重複している。特に、1つの態様において、重複は少なくとも12ntである。重複している配列のグループは、表3Aに示されている。
実施例1.バイオインフォマティクス
転写産物
オリゴヌクレオチド設計を、ヒト由来の遺伝子「熱ショック転写因子1(HSF1)」(NCBI symbol HSF1)、アカゲザル(rhesus monkey)(アカゲザル(Macaca mulatta))、カニクイザル(cynomolgus monkey)(カニクイザル(Macaca fascicularis))およびオランウータン(orangutan)(オランウータン(Pongo pygmaeus))由来のオルソログ配列を標的とするsiRNAを同定するために実施した。設計工程は、ヒト由来のHSF1転写産物NM_005526.2(NCBI GeneId 3297)、アカゲザル由来のENSMMUT00000020648(from Ensembl)、内部でクローニングされ、配列決定されたカニクイザルHSF1配列(例えば、配列番号:2051)、およびオランウータン由来のENSPPYT00000022122(Ensembl)を使用した。設計戦略は以下のとおりである:全て完全に19−mer ヒト/カニクイザルHSF1がマッチすることで開始する。次に、全て完全に19−mer ヒト/オランウータン/アカゲザルがマッチするこのセットを拡張する。次に、設計時に利用できる部分的なカニクイザル配列と不一致を有するあらゆる19−merを排除した。最後に、7つの配列を、Novartis shRNAライブラリーで相同性に基づいて選択した。ヒトHSF1遺伝子と全て完全にマッチした512個の19−mer配列の得られたセットを、次に、さらに合成のためにサンプリングし、スクリーニングした。これらの配列は、表1に記載されている。これらの配列は修飾されていなかった。
表2.HSF1 RNAi剤(修飾された配列を有する)
修飾された配列は、表1に記載されている他の19−merについて考えた。これらの修飾された配列は、表3に記載されている。表2と同様に、表3における修飾された配列は、例であり、非限定的である;別の修飾は当業者により容易に考えられ、さらなる、および別の塩基修飾は、本明細書の他の場所に記載されている。
上記のいくつかのsiRNAは、互いに配列において重複している。以下の表は、グループのそれぞれのメンバーは、少なくとも12ntで同じグループのメンバーと互いに重複しているRNAi剤のグループの編集を示す。センス鎖の重複の12−nt部分およびアンチセンス鎖の重複の12−nt部分を示す。したがって、例えば、AD−20296およびAD−20300は、センス鎖においてCCAAGCUGUGGAの配列およびアンチセンス鎖においてUCCACAGCUUGGの配列の共通の技術的特徴を共有する。もちろん、重複の12−nt部分のみを示すことに注意すること;RNAi剤の多数のグループは、12nt以上で重複する。遺伝子内の位置も示されている。
小規模合成を、HSF1 siRNAを製造するために使用する;中および大規模合成をまた、大量にこれらのsiRNAを製造するために使用することができる。
小規模合成を使用して、siRNAを産生する。
HSF1配列を、1μmol規模でMerMade 192 シンセサイザー(BioAutomation, Plano, Tex.)にて合成する。
センス鎖中の全てのピリミジン(シトシンおよびウリジン)は、2’−O−メチル塩基(2’O−メチル Cおよび2’−O−メチル U)を含む。
アンチセンス鎖において、リボAヌクレオシドに隣接したピリミジン(5’位置方向)を、それらの対応する2−O−メチルヌクレオシドで置換する。
センスおよびアンチセンス配列の両方の3’末端で、2つの塩基dTdT伸長を導入する。
配列ファイルを、MerMade 192 合成 ソフトウェアにおけるローディングに適合させるためにテキストファイルに変換する。
HSF1配列の合成は、ホスホラミダイト(phosphoramidite)化学を使用して固体支持オリゴヌクレオチド合成を使用することができる。
HSF1表題(tiled)配列を、供給源15Qカラムを使用するAKTA explorer精製系にて精製する。65Cのカラム温度を精製中、維持する。サンプル注射および回収を96ウェル(1.8mL−ディープウェル)プレートにおいて行う。全長配列に対応する単一のピークを、溶離剤中で回収する。精製された配列を、AKTA purifierを使用してSephadex G25 カラムで脱塩する。脱塩されたHSF1配列の濃度を、260nm波長での吸光度を使用して計算し、純度をイオン交換クロマトグラフィーにより測定した。
精製された脱塩されたセンスおよびアンチセンス単一の鎖を等モル量で混合し、アニーリングし、HSF1二本鎖を形成する。該二本鎖は、1×PBSバッファー中で10uM濃度で製造され、純度についてキャピラリーゲル電気泳動により試験する。
また、中規模合成を使用して、siRNAを産生することができる。
1から50μmol間の規模における一本鎖RNAを、ABI DNA/RNAシンセサイザー394(Applied Biosystems)および固体支持体としてPrime Synthesis(Aston、PA)から購入される制御された細孔ガラス(CPG、500Å、負荷80−100μmol/g)を使用する固相合成により製造する。大規模について、Glen Research Corpからの空の合成カラム(10μmol)および大型アミダイト(80mL)および試薬ボトル(450mL)を使用する。RNAおよび2’−O−メチルヌクレオチドを含むRNAを、それぞれ、対応するホスホラミダイトおよび2’−O−メチルホスホラミダイトを使用する固相合成により産生する(ChemGenes, Wilmington, MA)。これらの構成要素は、例えば、Nucleic Acid Chemistry, Beaucage, S.Lら (Edrs.), John Wiley & Sons, Inc., New York, NY, USA中のCurrent Protocolsに記載されている、標準ヌクレオシドホスホラミダイト化学を使用して、オリゴリボヌクレオチド鎖の配列内で選択された部位で組み込まれる。ホスホロチオエート結合は、ピリジン中の0.1MのDDTT(AM Chemicals, Oceanside, CA)の溶液を使用して導入される。さらなる補助的試薬は、Glen Research Corp. (Sterling, VA)から得られる。
HSF1 siRNAは、表2において提供され、実施例2に記載されているとおりに製造する。これらのRNAi剤の活性は、表4に記載されている。
表4.HSF1 RNAi剤の活性
細胞培養およびトランスフェクション
WI−38またはHeLa(ATCC, Manassas, VA)細胞を、10%のFBS、ストレプトマイシンおよびグルタミン(ATCC)を補ったRPMIまたはEMEM(ATCC)中で5%のCO2雰囲気下で37℃でほぼコンフルエンスにまで増殖させ、トリプシン処理によりプレートから単離する。逆トランスフェクションを、ウェルあたり5μlのsiRNA二本鎖に対して5μlのOpti−MEMを96−ウェルプレートに、ウェルあたり10μlのOpti−MEMプラス0.2μlのリポフェクタミン RNAiMax(Invitrogen, Carlsbad CA. cat # 13778-150)と共に加えることにより実施し、室温で15分間インキュベートする。次に、2×104個のWI−38細胞または2.0×104個のHeLa細胞を含み抗生物質を含まない80μlの完全増殖培地を加える。細胞を24時間インキュベートし、RNA精製する。それぞれのHSF1 siRNAについて、WI−38細胞に対して10nMの最終二本鎖濃度およびHeLa細胞に対して10nMおよび0.1nMの最終二本鎖濃度で実験を行う。10nMおよび0.1nMスクリーンにおいて強力なサイレンシングを示したsiRNAのサブセットを、10nMから0.00005Mの濃度範囲にわたってアッセイし、それらのIC50を決定する。
細胞を回収し、140μlの溶解/結合溶液に溶解させ、次にエッペンドルフサーモミキサー(Eppendorf Thermomixer)(混合速度はプロセスにわたって同じである)を使用して850rpmで1分間混合する。20マイクロリットルの電磁ビーズおよび溶解/結合エンハンサー混合物を細胞溶解物に加え、5分間混合する。電磁ビーズを、磁気台を使用して捕獲し、ビーズを邪魔することなく上清を除去する。上清の除去後、電磁ビーズを洗浄溶液1(イソプロパノール付加)で洗浄し、1分間混合する。ビーズを再び捕獲し、上清を除去する。次に、ビーズを150μlの洗浄溶液2(エタノール付加)で洗浄し、捕獲し、上清を除去する。次に、50ulのDNase混合物(MagMax turbo DNase Buffer and Turbo DNase)をビーズに加え、それらを10から15分間混合する。混合後、100μlのRNA Rebinding溶液を加え、3分間混合する。上清を除去し、電磁ビーズを再び150μlの洗浄溶液2で洗浄し、1分間混合し、上清を完全に除去する。電磁ビーズを2分間混合し、乾燥させ、RNAを50μlの水で溶離する。
表5において示されているとおり、101個のHSF1 RNAi剤のサブセットを示す。
101個の選択された二本鎖中の多くは、HeLaおよびWI−38細胞系の両方において10nMで>80%の遺伝子ノックダウン(KD)を有した。また、101個に含まれるものは、単一の細胞系において>80%のKDを有するが、2つの系の平均KDは>75%のKDである二本鎖である。このセットはまた、0.1nMのスクリーンでWI−38において>50%のKDを有する全ての二本鎖を含む。特定の興味のある、これらの101個のHSF1 siRNAを、表2に示す。この表はまた、10nMまたは0.1nMのsiRNAを使用したときの、HeLaおよびWI−38細胞におけるノックダウン(KD)を示す。1.000=100%の遺伝子発現、または全くない、もしくは0%の遺伝子ノックダウン;および0.000=0%の遺伝子発現、または完全な、もしくは100%の遺伝子ノックダウン。例えば、AD−20303において、「HeLa 10nM」の欄は、これらの細胞においてこの濃度で、RNAi剤が遺伝子発現を9.9%減少させる、または90.1%の遺伝子ノックダウンを示すことを意味する「0.099」を示す。10nMの濃度でのWI−38細胞において、このRNAi剤は、5.6%の残りの遺伝子活性、または94.4%の遺伝子ノックダウンを示す。
表5.HSF1 RNAi剤−ノックダウンデータ
表2における101個の二本鎖を、用量依存スクリーンにおいてHeLa細胞においてスクリーニングした。このスクリーンの目的は、EC50(遺伝子発現を50%減少させることができる最小用量のRNAi剤)を決定するためであった。
表6−EC50データ*
表4および5において報告されている決定後、特定のオリゴヌクレオチドは、オリゴヌクレオチドを含むプレートの不完全な解凍から生じると現在考えられる濃縮人工産物に付されたことを決定した。2つの大型データセット(標的と関連しない)のその後の分析は、あらゆるこのような濃縮人工産物が通常の実験の変動で説明することができるもの以上に、アッセイ結果を変化させないことを示した。さらに、これらの濃縮人工産物は、導かれる選択について我々の結論に実質的に影響する可能性がない。
上記HSF1 siRNAのさらなるスクリーニングデータは、以下の表7に示す。
HSF1 siRNAを、これらの二本鎖における単一の鎖が本来アニーリングされるときの二本鎖濃度において見られる不一致に対処するために再スクリーニングする。2つのsiRNA濃度10nMおよび0.1nMで、414個のsiRNAを再アニーリングし、スクリーニングする。全ての二本鎖を、2つの独立した実験にて両方の用量でスクリーニングする。
細胞培養およびトランスフェクション
HeLa(ATCC, Manassas, VA)細胞を、10%のFBS、ストレプトマイシンおよびグルタミン(ATCC)を補ったEMEM(ATCC)中で5%のCO2雰囲気下で37℃でほぼコンフルエンスにまで増殖させ、トリプシン処理によりプレートから単離する。逆トランスフェクションを、ウェルあたり5μlの200nMまたは2nMのsiRNA二本鎖に対して96−ウェルプレートに、ウェルあたり15μlのOpti−MEMプラス0.2μlのリポフェクタミン RNAiMax(Invitrogen, Carlsbad CA. cat # 13778-150)と共に加えることにより実施し、室温で15分間インキュベートする。次に、2×104個のHeLa細胞を含み抗生物質を含まない80μlの完全増殖培地を加え、10nMまたは0.1nMの最終二本鎖濃度とする。細胞を24時間インキュベートし、RNA精製する。
細胞を回収し、150μlの溶解バッファーに溶解させ、次にプラットホームシェーカー(platform shaker)(混合速度はプロセスにわたって同じである)を使用して850rpmで5分間混合する。70ulの溶解バッファーで以前に洗浄された10マイクロリットルの電磁ビーズを細胞溶解物に加え、5分間混合する。電磁ビーズを、磁気台を使用して捕獲し、ビーズを邪魔することなく上清を除去する。電磁ビーズ/RNAを、150ulのバッファーを加え、1分間撹拌し、磁気台上にビーズの捕獲の後に上清を捨てることにより洗浄バッファーAで2回洗浄する。次に、ビーズを150μlの洗浄バッファーBで洗浄し、1分間撹拌し、電磁ビーズ台に捕獲し、上清を除去する。次に、Dynobead/mRNA混合物を、1分間撹拌し、磁気環台に捕獲し、溶離バッファーを捨てることにより150ulの溶離バッファーで洗浄する。mRNAを、50ulの溶離バッファーを加えて、70℃で4分間撹拌することにより溶離する。混合後、ビーズを再捕獲するために、プレートを2分間、電磁ビーズ台に置き、溶離されたRNAを含む上清を新たなプレートに取り出す。
反応あたり1μlの10×バッファー、0.4μlの25×dNTP、1μlのランダムプライマー、0.5μlの逆転写酵素、0.5μlのRNase阻害剤および1.6μlのH2Oのマスター混合物を、5μlの全RNAに加える。cDNAを、以下の工程:25℃ 10分、37℃ 120分、85℃ 5秒、4℃ 維持を介してBio−Rad C−1000またはS−1000サーマルサイクラー(Hercules, CA)を使用して産生する。
表7.HSF1 siRNA(10nMおよび0.1nM)のさらなるスクリーニング
HSF1に対する選択されたRNAi剤を、PBMC(末梢血単核細胞)アッセイにおいて分析し、免疫原性を概算する;および、インビボでヌードマウスにおけるHep3B(原発性肝臓異種移植片)皮下腫瘍。RNAi剤は脂質ナノ粒子においてインビボに送達される。5mg/kgまたは3mg/kgの単回用量を送達し、動物を殺し、組織を投与から72時間後に回収した。結果を以下の表8に示す。
表8.RNAi剤のインビボでのPBMC分析
この実施例は、親と比較して活性を保持しているか、または改善されており、そして潜在的により安定であるsiRNAを同定するために、多種の化学的性質のスクリーニングを記載する。
S(センス)修飾は、以下のものを含む:
エンドライト、ここで、全てのピリミジンは、2’−OMe uu オーバーハングを有する2’−OMeで修飾されており、そして
全てのリボヌクレオチドは、2’−OMe uu オーバーハングで使用される
全てのピリミジンは、2’−OMe uu オーバーハングを有する2’−OMeで修飾されており
2’−OMe uu オーバーハングを有する5 3’−末端塩基上のエンドライト+2’−OMe
2’−OMe uu オーバーハングを有する5 3’−末端塩基のピリミジンのみでエンドライト+2’−OMe
表9A.アンチセンス修飾
特定の態様および特許請求の範囲は、本明細書に詳細に記載されているが、これは、説明の目的のためのほんの一例としてであり、特許請求の範囲、または、あらゆる対応するさらなる出願の特許請求の範囲の対象の範囲に対して限定することを意図しない。特に、種々の置換、変化および修飾が、特許請求の範囲により定義されている記載の精神および範囲から逸脱することなく、本記載から作られ得ると本発明者らは考える。核酸出発物質、興味あるクローンまたはライブラリー型の選択は、本明細書に記載されている態様の知識を有する当業者に対して日常的な事柄であると考えられる。他の局面、有利なものおよび修飾は、特許請求の範囲内であると考える。当業者は、本明細書に記載されている本発明の特定の態様における多数の均等物を認識しているか、またはわずかな日常の実験を使用して確かめることができる。このような均等は、特許請求の範囲に包含されることが意図される。後に出願された対応する出願における特許請求の範囲の補正は、種々の国の特許法による限定のためであって、特許請求の範囲の対象を放棄すると解釈されるべきではない。
Claims (20)
- 個体におけるHSF1の発現を阻害するための医薬組成物であって、当該医薬組成物は第1の鎖および第2の鎖を含むHSF1に対するRNAi剤を含み、第1の鎖の配列は、配列番号:637、638、639、681、781、782、783または784の配列を含み、第1の鎖および/または第2の鎖は修飾されており、第1の鎖は約30以下のヌクレオチドの長さである、医薬組成物。
- HSF1に対する第2のRNAi剤をさらに含む、請求項1に記載の医薬組成物。
- 第1の鎖および第2の鎖が、両方とも約19から約23のヌクレオチドの長さである、請求項1に記載の医薬組成物。
- RNAi剤が、修飾された糖骨格、ホスホロチオエート結合または2’−修飾ヌクレオチドを含む、請求項1に記載の医薬組成物。
- RNAi剤が、2’−デオキシ、2’−デオキシ−2’−フルオロ、2’−O−メチル、2’−O−メトキシエチル(2’−O−MOE)、2’−O−アミノプロピル(2’−O−AP)、2’−O−ジメチルアミノエチル(2’−O−DMAOE)、2’−O−ジメチルアミノプロピル(2’−O−DMAP)、2’−O−ジメチルアミノエチルオキシエチル(2’−O−DMAEOE)および2’−O−N−メチルアセトアミド(2’−O−NMA)からなる群から選択される2’−修飾を含む、請求項1に記載の医薬組成物。
- RNAi剤が、平滑末端または1から4個の不対ヌクレオチドを有するオーバーハングを含む、請求項1に記載の医薬組成物。
- RNAi剤が、1つ以上の診断化合物、レポーター基、架橋剤、ヌクレアーゼ耐性を与える部分、天然もしくは異常核酸塩基、親油性分子、コレステロール、脂質、レクチン、ステロイド、ウバオール(uvaol)、ヘコゲニン、ジオスゲニン、テルペン、トリテルペン、サルササポゲニン、フリーデリン(Friedelin)、エピフリーデラノール誘導体化リトコール酸、ビタミン、炭水化物、デキストラン、プルラン、キチン、キトサン、合成炭水化物、オリゴ乳酸エステル 15−mer、天然ポリマー、低もしくは中間分子量ポリマー、イヌリン、シクロデキストリン、ヒアルロン酸、タンパク質、タンパク質−結合剤、インテグリン標的分子、ポリカチオン性物質、ペプチド、ポリアミン、ペプチド模倣物および/またはトランスフェリンに結合している、請求項1に記載の医薬組成物。
- 個体におけるHSF1の発現を阻害するための医薬組成物であって、当該医薬組成物は第1の鎖および第2の鎖を含むHSF1に対するRNAi剤を含み、第1の鎖の配列は、配列番号:637、638、639、681、781、782、783または784の配列である、医薬組成物。
- 医薬組成物が、HSF1に対する第2のRNAi剤をさらに含む、請求項8に記載の医薬組成物。
- 第1の鎖および第2の鎖が、両方とも19から23のヌクレオチドの長さである、請求項8に記載の医薬組成物。
- RNAi剤が、修飾された糖骨格、ホスホロチオエート結合または2’−修飾ヌクレオチドを含む、請求項8に記載の医薬組成物。
- RNAi剤が、2’−デオキシ、2’−デオキシ−2’−フルオロ、2’−O−メチル、2’−O−メトキシエチル(2’−O−MOE)、2’−O−アミノプロピル(2’−O−AP)、2’−O−ジメチルアミノエチル(2’−O−DMAOE)、2’−O−ジメチルアミノプロピル(2’−O−DMAP)、2’−O−ジメチルアミノエチルオキシエチル(2’−O−DMAEOE)、および2’−O−N−メチルアセトアミド(2’−O−NMA)からなる群から選択される2’−修飾を含む、請求項8に記載の医薬組成物。
- RNAi剤が、平滑末端または1から4個の不対ヌクレオチドを有するオーバーハングを含む、請求項8に記載の医薬組成物。
- RNAi剤が、1つ以上の診断化合物、レポーター基、架橋剤、ヌクレアーゼ耐性を与える部分、天然もしくは異常核酸塩基、親油性分子、コレステロール、脂質、レクチン、ステロイド、ウバオール、ヘコゲニン、ジオスゲニン、テルペン、トリテルペン、サルササポゲニン、フリーデリン、エピフリーデラノール誘導体化リトコール酸、ビタミン、炭水化物、デキストラン、プルラン、キチン、キトサン、合成炭水化物、オリゴ乳酸エステル 15−mer、天然ポリマー、低もしくは中間分子量ポリマー、イヌリン、シクロデキストリン、ヒアルロン酸、タンパク質、タンパク質−結合剤、インテグリン標的分子、ポリカチオン性物質、ペプチド、ポリアミン、ペプチド模倣物および/またはトランスフェリンに結合している、請求項8に記載の医薬組成物。
- 癌に罹患している個体におけるHSF1の発現を阻害するための医薬組成物であって、当該医薬組成物は薬学的に許容される担体ならびに治療有効量の第1の鎖および第2の鎖を含むHSF1に対するRNAi剤を含み、第1の鎖の配列は、配列番号:637、638、639、681、781、782、783または784の配列を含み、そして/または第2の鎖の配列は、配列番号:125、126、127、169、269、270、271または272の配列を含み、第1の鎖および/または第2の鎖は修飾されているか、または修飾されておらず、第1の鎖および/または第2の鎖は約30以下のヌクレオチドの長さであり、当該医薬組成物は所望により、HSF1に対する第2のRNAi剤をさらに含んでいてもよい、医薬組成物。
- 膀胱、骨、乳房、子宮頸、大腸、結腸直腸、子宮内膜、線維肉腫、胃腸、造血器、腸、腎臓、肝臓、肺、リンパ腫、神経外胚葉、神経芽腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、卵巣、膵臓、胸膜、前立腺、皮膚、扁平上皮、胃、および精巣癌、白血病、前骨髄球性白血病、ならびにホジキン病のリストから選択される癌である、請求項15に記載の医薬組成物。
- さらなる癌処置と組み合わせて使用される、請求項15に記載の医薬組成物。
- 第1の鎖および第2の鎖を含むHSF1に対するRNAi剤を含む組成物であって、第1の鎖の配列は、配列番号:637、638、639、681、781、782、783または784の配列であり、そして/または第2の鎖の配列は、配列番号:125、126、127、169、269、270、271または272の配列であり、第1の鎖および/または第2の鎖は修飾されている、医薬組成物。
- RNAi剤が、インビトロでHeLa細胞および/またはWI−38細胞におけるHSF1の発現を少なくとも約80%阻害することができる、請求項18に記載の医薬組成物。
- RNAi剤が、インビトロでWI−38細胞におけるHSF1の発現を少なくとも約90%阻害することができる、請求項18に記載の医薬組成物。
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BR112016020472B1 (pt) * | 2014-03-19 | 2023-03-07 | Ionis Pharmaceuticals, Inc | Oligonucleotídeo modificado de fita simples, e composição farmacêutica |
GB201505658D0 (en) | 2015-04-01 | 2015-05-13 | Cancer Rec Tech Ltd | Inhibitor compounds |
GB201617103D0 (en) | 2016-10-07 | 2016-11-23 | Cancer Research Technology Limited | Compound |
FR3082274B1 (fr) | 2018-06-06 | 2021-11-19 | Gaztransport Et Technigaz | Cuve etanche et thermiquement isolante |
EA202190299A1 (ru) | 2018-07-25 | 2021-06-11 | Ионис Фармасьютикалз, Инк. | Соединения и способы для снижения экспрессии atxn2 |
CN113862361B (zh) * | 2021-10-25 | 2023-08-15 | 中山大学孙逸仙纪念医院 | 一种诊断和治疗膀胱癌的分子标志物hsf1及其用途 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006507841A (ja) * | 2002-11-14 | 2006-03-09 | ダーマコン, インコーポレイテッド | 機能的siRNAおよび超機能的siRNA |
Family Cites Families (87)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6696561B1 (en) | 1909-07-09 | 2004-02-24 | Basf Aktiengesellschaft | Corynebacterium glutamicum genes encoding proteins involved in membrane synthesis and membrane transport |
US4475196A (en) | 1981-03-06 | 1984-10-02 | Zor Clair G | Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system |
US4447233A (en) | 1981-04-10 | 1984-05-08 | Parker-Hannifin Corporation | Medication infusion pump |
US4439196A (en) | 1982-03-18 | 1984-03-27 | Merck & Co., Inc. | Osmotic drug delivery system |
US4522811A (en) | 1982-07-08 | 1985-06-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides |
US4447224A (en) | 1982-09-20 | 1984-05-08 | Infusaid Corporation | Variable flow implantable infusion apparatus |
US4487603A (en) | 1982-11-26 | 1984-12-11 | Cordis Corporation | Implantable microinfusion pump system |
US5030453A (en) | 1983-03-24 | 1991-07-09 | The Liposome Company, Inc. | Stable plurilamellar vesicles |
US4486194A (en) | 1983-06-08 | 1984-12-04 | James Ferrara | Therapeutic device for administering medicaments through the skin |
US4596556A (en) | 1985-03-25 | 1986-06-24 | Bioject, Inc. | Hypodermic injection apparatus |
US5374548A (en) | 1986-05-02 | 1994-12-20 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for the attachment of proteins to liposomes using a glycophospholipid anchor |
MX9203291A (es) | 1985-06-26 | 1992-08-01 | Liposome Co Inc | Metodo para acoplamiento de liposomas. |
US4790824A (en) | 1987-06-19 | 1988-12-13 | Bioject, Inc. | Non-invasive hypodermic injection device |
US4941880A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-17 | Bioject, Inc. | Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly |
US5108921A (en) | 1989-04-03 | 1992-04-28 | Purdue Research Foundation | Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules |
US5032401A (en) | 1989-06-15 | 1991-07-16 | Alpha Beta Technology | Glucan drug delivery system and adjuvant |
US5312335A (en) | 1989-11-09 | 1994-05-17 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5064413A (en) | 1989-11-09 | 1991-11-12 | Bioject, Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5383851A (en) | 1992-07-24 | 1995-01-24 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US6977244B2 (en) | 1996-10-04 | 2005-12-20 | Board Of Regents, The University Of Texas Systems | Inhibition of Bcl-2 protein expression by liposomal antisense oligodeoxynucleotides |
US7053052B2 (en) * | 1997-01-21 | 2006-05-30 | Voellmy Richard W | Therapies involving mutated heat shock transcription factor |
US5891467A (en) | 1997-01-31 | 1999-04-06 | Depotech Corporation | Method for utilizing neutral lipids to modify in vivo release from multivesicular liposomes |
TW589189B (en) | 1997-08-04 | 2004-06-01 | Scras | Kit containing at least one double-stranded RNA combined with at least one anti-viral agent for therapeutic use in the treatment of a viral disease, notably of viral hepatitis |
US6506559B1 (en) | 1997-12-23 | 2003-01-14 | Carnegie Institute Of Washington | Genetic inhibition by double-stranded RNA |
BRPI9908967B1 (pt) | 1998-03-20 | 2017-05-30 | Benitec Australia Ltd | processos para reprimir, retardar ou de outro modo reduzir a expressão de um gene alvo em uma célula de planta |
AUPP249298A0 (en) * | 1998-03-20 | 1998-04-23 | Ag-Gene Australia Limited | Synthetic genes and genetic constructs comprising same I |
JP5015373B2 (ja) | 1998-04-08 | 2012-08-29 | コモンウェルス サイエンティフィック アンド インダストリアル リサーチ オーガニゼイション | 改良表現型を得るための方法及び手段 |
US6342596B1 (en) * | 1998-05-05 | 2002-01-29 | Hsf Pharmaceuticals S.A. | Molecular regulatory circuits to achieve sustained activation of genes of interest by a single stress |
GB9827152D0 (en) | 1998-07-03 | 1999-02-03 | Devgen Nv | Characterisation of gene function using double stranded rna inhibition |
WO2000044914A1 (en) | 1999-01-28 | 2000-08-03 | Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. | Composition and method for in vivo and in vitro attenuation of gene expression using double stranded rna |
DE19956568A1 (de) | 1999-01-30 | 2000-08-17 | Roland Kreutzer | Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens |
AU781598B2 (en) | 1999-04-21 | 2005-06-02 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for inhibiting the function of polynucleotide sequences |
WO2001004313A1 (en) | 1999-07-09 | 2001-01-18 | American Home Products Corporation | Methods and compositions for preventing the formation of aberrant rna during transcription of a plasmid sequence |
AU1086501A (en) | 1999-10-15 | 2001-04-30 | Carnegie Institution Of Washington | Rna interference pathway genes as tools for targeted genetic interference |
GB9927444D0 (en) | 1999-11-19 | 2000-01-19 | Cancer Res Campaign Tech | Inhibiting gene expression |
DE10100586C1 (de) | 2001-01-09 | 2002-04-11 | Ribopharma Ag | Verfahren zur Hemmung der Expression eines Ziegens |
DE10160151A1 (de) | 2001-01-09 | 2003-06-26 | Ribopharma Ag | Verfahren zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Zielgens |
WO2001038551A1 (en) | 1999-11-29 | 2001-05-31 | Cold Spring Harbor Laboratory | Regulation of polycomb group gene expression for increasing seed size in plants |
RU2164944C1 (ru) | 1999-12-09 | 2001-04-10 | Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН | Способ изменения генетических свойств организма |
WO2001049844A1 (en) | 1999-12-30 | 2001-07-12 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Compositions and methods for gene silencing |
IT1316982B1 (it) | 2000-01-17 | 2003-05-26 | Univ Roma | Isolamento e caratterizzazione di un gene per il silenziamento genicoda n.crassa e suoi usi. |
WO2001068836A2 (en) | 2000-03-16 | 2001-09-20 | Genetica, Inc. | Methods and compositions for rna interference |
PL358230A1 (en) | 2000-03-17 | 2004-08-09 | Benitec Australia Ltd | Genetic silencing |
AU2001260140A1 (en) | 2000-03-22 | 2001-10-03 | Avntis Pharma Deutschland Gmbh | Nematodes as model organisms for the investigation of neurodegenerative diseases, in particular parkinsons disease, uses and methods for the discovery of substances and genes which can be used in the treatment of the above disease states and identification of a nematode gene. |
GB0007268D0 (en) | 2000-03-24 | 2000-05-17 | Cyclacel Ltd | Cell cycle progression proteins |
JP5500750B2 (ja) | 2000-03-30 | 2014-05-21 | ホワイトヘッド インスチチュート フォアー バイオメディカル リサーチ | Rna干渉のrna配列特異的メディエータ |
CA2410947A1 (en) | 2000-05-30 | 2001-12-06 | Johnson & Johnson Research Pty Limited | Methods for mediating gene suppresion by using factors that enhance rnai |
US6680068B2 (en) | 2000-07-06 | 2004-01-20 | The General Hospital Corporation | Drug delivery formulations and targeting |
US7368248B2 (en) | 2000-11-09 | 2008-05-06 | Cenix Bioscience Gmbh | Eukaryotic cell division genes and their use in diagnosis and treatment of proliferative diseases |
US20040259247A1 (en) * | 2000-12-01 | 2004-12-23 | Thomas Tuschl | Rna interference mediating small rna molecules |
EP1399189A1 (en) | 2001-06-11 | 2004-03-24 | Universite De Montreal | Compositions and methods for enhancing nucleic acid transfer into cells |
WO2003000861A2 (en) | 2001-06-22 | 2003-01-03 | The Regents Of The University Of California | Eukaryotic genes involved in adult lifespan regulation |
EP1424998B1 (en) | 2001-08-16 | 2010-05-26 | The Trustees of The University of Pennsylvania | Synthesis and use of reagents for improved dna lipofection and/or slow release prodrug and drug therapies |
EP1470148B1 (en) | 2002-02-01 | 2012-07-18 | Life Technologies Corporation | Double-stranded oligonucleotides |
EP2823809B1 (en) | 2002-06-28 | 2016-11-02 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Method and apparatus for producing liposomes |
KR20050084607A (ko) | 2002-09-28 | 2005-08-26 | 매사추세츠 인스티튜트 오브 테크놀로지 | 인플루엔자 치료제 |
US7250496B2 (en) * | 2002-11-14 | 2007-07-31 | Rosetta Genomics Ltd. | Bioinformatically detectable group of novel regulatory genes and uses thereof |
CA3001404C (en) | 2002-11-25 | 2020-07-28 | Masafumi Matsuo | Ena nucleic acid pharmaceuticals capable of modifying splicing of mrna precursors |
CA2506714A1 (en) | 2002-11-26 | 2004-06-10 | University Of Massachusetts | Delivery of sirnas |
WO2004064731A2 (en) | 2003-01-14 | 2004-08-05 | University Of Washington | Lipid-drug formulations and methods for targeted delivery of lipid-drug complexes to lymlplhoid tissues |
AU2003225410A1 (en) | 2003-03-21 | 2004-10-11 | Academisch Ziekenhuis Leiden | Modulation of exon recognition in pre-mrna by interfering with the secondary rna structure |
JP4951338B2 (ja) | 2003-07-16 | 2012-06-13 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 脂質に封入された干渉rna |
MXPA06002216A (es) | 2003-08-28 | 2006-04-27 | Novartis Ag | Interferencia de arn doble que tiene extremos romos y modificaciones 3'. |
WO2005032486A2 (en) * | 2003-10-02 | 2005-04-14 | Duke University | A NOVEL SIRNA-BASED APPROACH TO TARGET THE HIF-α FACTOR FOR GENE THERAPY |
WO2005116204A1 (ja) * | 2004-05-11 | 2005-12-08 | Rnai Co., Ltd. | Rna干渉を生じさせるポリヌクレオチド、および、これを用いた遺伝子発現抑制方法 |
US7795419B2 (en) * | 2004-05-26 | 2010-09-14 | Rosetta Genomics Ltd. | Viral and viral associated miRNAs and uses thereof |
US7740861B2 (en) | 2004-06-16 | 2010-06-22 | University Of Massachusetts | Drug delivery product and methods |
EP3808845A1 (en) | 2004-06-28 | 2021-04-21 | The University Of Western Australia | Antisense oligonucleotides for inducing exon skipping and methods of use thereof |
EP1874802A2 (en) * | 2005-04-08 | 2008-01-09 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Rnai therapeutic for respiratory virus infection |
US8354384B2 (en) | 2005-06-23 | 2013-01-15 | Yale University | Anti-aging micrornas |
WO2007041294A2 (en) | 2005-09-29 | 2007-04-12 | The Trustees Of Boston University | Methods for sensitizing cancer cells to inhibitors |
CA2628300C (en) | 2005-11-02 | 2018-04-17 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Modified sirna molecules and uses thereof |
US7919603B2 (en) | 2005-12-19 | 2011-04-05 | New York University | Heat shock RNA |
US20090011004A1 (en) | 2005-12-30 | 2009-01-08 | Philadelphia Health & Education Corp., D/B/A/ Drexel University Of College Of Medicine | Improved carriers for delivery of nucleic acid agents to cells and tissues |
GB0608838D0 (en) | 2006-05-04 | 2006-06-14 | Novartis Ag | Organic compounds |
WO2008022035A2 (en) | 2006-08-10 | 2008-02-21 | The Scripps Research Institute | Methods for identifying cellular modulators of disaggregation activity or aggregation activity in an animal |
CN101200721B (zh) * | 2006-09-18 | 2011-06-08 | 复旦大学附属中山医院 | 人心肌保护基因及其用途 |
WO2008097840A2 (en) | 2007-02-02 | 2008-08-14 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Methods and compositions relating to the regulation of muc1 by hsf1 and stat3 |
US7858592B2 (en) * | 2007-02-26 | 2010-12-28 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Interfering RNAs against the promoter region of P53 |
WO2008141074A1 (en) | 2007-05-10 | 2008-11-20 | Salk Institute For Biological Studies | Identification of compounds that protect against amyloid diseases |
CA2687850C (en) | 2007-05-22 | 2017-11-21 | Mdrna, Inc. | Oligomers for therapeutics |
AR066984A1 (es) | 2007-06-15 | 2009-09-23 | Novartis Ag | Inhibicion de la expresion de la subunidad alfa del canal epitelial de sodio (enac) por medio de arni (arn de interferencia) |
EP2185702A4 (en) * | 2007-08-21 | 2011-05-04 | Scott And White Memorial Hospital And Scott Sherwood And Brindley Foundation | METHOD AND COMPOSITIONS POST-TRANSLUCTIVE SWITCH-OFF |
WO2009082817A1 (en) | 2007-12-27 | 2009-07-09 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Silencing of polo-like kinase expression using interfering rna |
WO2009103067A2 (en) * | 2008-02-14 | 2009-08-20 | The Children's Hospital Of Philadelphia | Compositions and methods to treat asthma |
EP2451823A4 (en) * | 2009-07-06 | 2013-07-03 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR ENHANCING THE PRODUCTION OF A BIOLOGICAL PRODUCT |
MX348526B (es) * | 2009-12-18 | 2017-06-16 | Novartis Ag | Composiciones orgánicas para tratar las enfermedades relacionadas con hsf1. |
-
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Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006507841A (ja) * | 2002-11-14 | 2006-03-09 | ダーマコン, インコーポレイテッド | 機能的siRNAおよび超機能的siRNA |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
CANCER RES, vol. 66, JPN6014046060, 2006, pages 7678 - 7685, ISSN: 0003345584 * |
MOLECULAR BIOSYSTEMS, vol. 2, JPN6014046055, 2006, pages 627 - 639, ISSN: 0003345582 * |
THE AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY, vol. Volume 172, Issue 3, JPN6014046053, 2008, pages 659 - 670, ISSN: 0003345581 * |
THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol. 282, JPN6014046058, 2007, pages 33412 - 33420, ISSN: 0003345583 * |
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