JP2015527999A

JP2015527999A - 安定化された多機能酸化防止化合物およびその使用方法

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Publication number: JP2015527999A
Application number: JP2015521741A
Authority: JP
Inventors: マーク・ベイリー; スティーブン・ケイ・ダディ; ジム・ハーマン
Original assignee: Xpd Holdings LLC
Current assignee: Xpd Holdings LLC
Priority date: 2012-07-10
Filing date: 2013-07-09
Publication date: 2015-09-24
Anticipated expiration: 2033-07-09
Also published as: CA3078006C; CA3078006A1; EP2872525A2; WO2014011624A2; WO2014011624A3; US20150175552A1; US20170135986A1; JP6313758B2; US9593079B2; US10028935B2; US9382211B2; CA2876021C; EP2872525B1; EP2872525A4; CA2876021A1; US20160185718A1

Abstract

酸化防止特性を有する新規で安定な化合物、および酸化ストレスに関連する疾患または損傷を治療するためにこの化合物を用いる方法を開示する。これらの化合物および医薬的に許容され得る組成物は、限定されないが、心血管疾患、肝疾患、認知症等を含む、酸化防止剤レベルの低下および／または酸素ラジカル発生の増加に関連する種々の疾患、損傷または状態を予防するか、治療するか、またはその重篤度を下げるのに有用である。

Description

（関連する出願の相互参照）
本出願は、２０１２年７月１０日に出願された米国仮出願第６１／６６９，７５３号の優先権を主張する。米国仮出願番号第６１／６６９，７５３号の内容全体は、本明細書に参照により組み込まれる。

多くの疾患、状態および損傷は、罹患した組織または臓器における酸化防止性分子のレベルの低下および酸化防止酵素系の活性の低下、その後の酸化ストレスに対する二次的な細胞完全性の損失と関係がある。酸化ストレスによって、これらから誘導される反応性酸素種および他の酸化性分子、例えば、脂質または他の過酸化物の生成と、反応性酸素種の出現および生体系が反応性酸化分子を容易に解毒する能力または生じる損傷を修復する能力との間の不均衡が生じる。反応性酸素種は、病原体に攻撃し、これを殺傷する一様式として免疫系によって使用されるため、有益な場合がある。それに加え、ある種の反応性酸化種は、細胞内または細胞外のシグナル伝達分子として作用し、レドックスシグナル伝達と呼ばれるプロセスによる細胞応答の引き金となり得る。しかし、細胞および組織において、酸化プロセスと還元プロセスの正常なバランスが乱れると、過酸化物および遊離ラジカルが過剰に生成することによる中毒の影響が生じ、タンパク質、炭水化物、脂質およびＤＮＡを含む細胞成分を壊すことがある。還元された状態の酸化防止剤は、ある疾患または損傷に直接的または間接的に影響を与えることがある。細胞の酸化防止剤が不足すると、過剰な遊離ラジカルおよび他の反応性酸素種（ＲＯＳ）が生じることがあり、その破壊効果によって、最終的に、細胞死が引き起こされる場合がある。酸化ストレスの影響は、上述の乱れの大きさによって変わり、細胞は、小さな乱れには勝つことができ、天然の酸化防止性の防御手段（例えば、グルタチオン（ＧＳＨ））を用い、元々の状態を維持することができる。ＧＳＨは、ほとんどの細胞によって合成され、体内で適切な酸化防止状態を維持するのに関与する主な酸化防止剤の１つである。

しかし、特定の状態では、ＧＳＨおよび他の酸化防止剤の正常な生理学的供給は不十分であり、その配分は不十分であるか、または酸化の要求が高すぎて細胞の酸化を防ぐことができない。特定の細胞内または臓器内、または全身での酸化防止剤のレベルの低下は、過剰な遊離ラジカル反応および不十分な酸化防止剤に起因した結果であるか、またはこれらに起因して進行する多くの臨床的に定義される疾患および疾患状態と関係がある。

グルタチオン、例えば、Ｎ−アセチルシステインのような内因性酸化防止剤を生成するためのいずれかの基質を提供する還元されたチオール含有化合物の投与、または反応性酸化種を直接的または間接的に捕捉することができるものの投与を利用し、酸化ストレスの状態を改善するために酸化防止剤の状態を再確立する。しかし、チオール含有化合物の化学的不安定性は、正常な保存状態で、特に、厳しい保存状態で、および／または全身投与に用いられる一般的な媒剤中で、貯蔵寿命を制限する。チオール含有酸化防止剤が化学的に不安定であるというこの特性により、酸化ストレスが病態生理学の重要な要素である障害および疾患を治療するためのこの化合物の使用の拡大が制限される。さらに、多くのチオール含有酸化防止性分子および非チオール酸化防止性分子は、例えば、低い経口アベイラビリティまたは迅速なクリアランスのような良くない医薬的特性を有し、その有用性を制限する。

従って、細胞の酸化防御が失われたことに関連する疾患／損傷の都合の悪い出現の多くをなくす目的のために細胞の酸化防止剤の状態を正常化するために、安全であり、強力であり、厳しい保存状態でさえ安定な優れた医薬的特性を有する酸化防止成分が必要とされている。

本発明の化合物、およびその医薬的に許容され得る組成物は、強力であり、酸化ストレスに関連する疾患または損傷の治療に有用な安定な酸化防止剤であることがわかった。本発明の化合物は、一般式Ｉまたは式ＩＩ

で示される化合物

またはその医薬的に許容され得る塩であり、式中、Ｒ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｌ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、ｍ、ｎおよびｐは、一般的に記載され、以下の分類および副分類に記載の通りである。

これらの化合物および医薬的に許容され得る組成物は、限定されないが、心血管疾患、例えば、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、慢性心不全；慢性閉塞性肺疾患；突発性肺線維症；脳性麻痺；肝疾患、例えば、硬変および肝炎；嚢胞性繊維症；認知症、例えば、アルツハイマー病に関連する認知症；炎症性疾患、例えば、炎症性腸疾患、クローン病、関節リウマチおよび大腸炎；筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）；急性呼吸不全症候群（ＡＲＤＳ）；感染症；狼瘡；眼の障害、例えば、白内障および黄斑変性；多発性硬化症；腎疾患、例えば、ネフロパシー；ニューロパチー；脳症；糖尿病；βサラセミア；鎌状赤血球症；パーキンソン病；肺線維症；生殖器疾患；不妊；発作性障害；敗血症；卒中；壊疽；毒素ショック；外傷性損傷、例えば、リシン、炭疽菌（Bacillus anthracis）、エボラウイルス、ボツリヌス菌（Clostridium botulinum）、ニパウイルスのような生物兵器への曝露、化学熱傷または熱傷；造影剤腎症；薬物過剰摂取、例えば、アセトアミノフェンまたはモルヒネの過剰摂取；放射線被曝；たばこの煙への曝露；塩素、マスタードガスおよびサリンのような毒ガスへの曝露；爆傷；接触過敏反応；遅延型過敏反応；聴力損失；中毒症；移植拒絶；銃創；圧迫傷；トキシコデンドロン種に関連する炎症；皮膚の損傷、例えば、日焼けおよび皺；自然溶血または化学物質または他の薬剤によって誘発される溶血、例えば、グルコース−６−ホスフェートデヒドロゲナーゼ（Ｇ６ＰＤＨ）が不足した感受性個体での抗マラリア治療によって誘発される溶血性貧血；および化学療法による治療を含め、酸化防止剤レベルの低下および／または酸素ラジカル発生の増加に関連する種々の疾患、損傷または状態を予防するか、治療するか、または重篤度を下げるのに有用である。

図１は、５℃で１ヶ月または２ヶ月保存した後に不純物の含有量によって測定した場合の化合物４５およびＮＡＣＡの安定性データを示す。図２は、２５℃および６０％ＲＨで１ヶ月または２ヶ月保存した後に不純物の含有量によって測定した場合の化合物４５およびＮＡＣＡの安定性データを示す。図３は、４０℃および７５％ＲＨで１ヶ月または２ヶ月保存した後に不純物の含有量によって測定した場合の化合物４５およびＮＡＣＡの安定性データを示す。図４は、化合物４５の開始濃度が１３５μＭである場合に、ヒト全血中でＮＡＣＡを得る化合物４５の加水分解を示す。図５は、化合物４５の開始濃度が１３．５μＭである場合に、ヒト全血中でＮＡＣＡを得る化合物４５の加水分解を示す。図６は、化合物４５の開始濃度が１０．９μＭ（５μｇ／ｍＬ）である場合に、ヒト全血中でカルノシンを得る化合物４５の加水分解を示す。図７は、化合物４５の開始濃度が２．２μＭ（１μｇ／ｍＬ）である場合に、ヒト全血中でカルノシンを得る化合物４５の加水分解を示す。

１．定義
本明細書で使用する場合、他に特に記載のない限り、以下の定義を適用する。
「ＳＣ」は、皮下注射を意味する。
「ＨＯＢＴ」は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを意味する。
「ＩＶ」は、静脈注射または点滴を意味する。
「ＩＭ」は、筋肉注射を意味する。
「ＰＧ」は、保護基を意味する。
「ＤＣＭ」は、ジメチルホルムアミドを意味する。
「ＤＣＣ」は、ジシクロヘキシルカルボジイミドを意味する。
「ＥＤＣ」は、エチレンジクロリドを意味する。
「ＲＨ」は、相対湿度を意味する。
「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを意味する。
「ＴＭＳ」は、トリメチルシランを意味する。

「Ｅｔ」は、エチルを意味する。
「Ｍｅ」は、メチルを意味する。
「Ｐｒ」は、プロピルを意味する。
「Ｂｕ」は、ブチルを意味する。
「ｔ−Ｂｕ」は、ｔｅｒｔ−ブチルを意味する。
「Ｂｏｃ」は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルを意味する。
「Ｐｇ」は、保護基を意味する。
「ＮＡＣＡ」は、Ｎ−アセチルシステインアミドを意味する。

本発明の化合物は、ヒトおよび動物に使用することが想定されている。「対象」という用語は、本明細書で使用する場合、限定されないが、ヒト、家畜および家禽、例えば、ネコ、イヌ、ウシ、ブタ、鳥類、魚類およびウマが包含される。

「治療すること」またはこの用語の他の形態、例えば、「治療」または「治療する」は、本発明の化合物を投与すると、宿主において、ある疾患または障害を和らげ、および／または、ある障害に関連する具体的な特徴または事象を減らし、抑制し、またはなくすことを意味するために本明細書で使用される。従って、「治療」という用語は、特に、宿主がその障害を起こすとあらかじめ診断されている場合に、ある障害が宿主で起こるのを防ぐこと；その障害を抑制すること；および／またはその障害を軽減するか、または回復させることを含む。本発明の方法が障害を予防することに関する限り、「予防する」という用語は、その疾患状態を完全に阻止することを必要としないことが理解される。どちらかと言えば、本明細書で使用する場合、予防するという用語は、当業者が、障害にかかりやすい集団を特定することができる能力を意味し、その結果、本発明の化合物の投与を疾患発症前に行ってもよい。この用語は、その疾患状態を完全に避けることを暗示しない。

本明細書で使用する場合、ある化合物の「医薬的に許容され得る塩」という用語は、正当な医学的判断の範囲内で、過度な毒性、刺激、アレルギー反応などがなく、合理的なリスク対効果比にふさわしい、ヒトおよび下級動物の組織と接触させて使用するのに適した塩を指す。

本明細書で使用する場合、「治療に有効な量」または「有効な量」は、治療される状態の発生を遅らせ、その状態の進行を抑制し、その状態の症状を和らげ、またはその状態を回復させるのに必要な量を意味する。

本明細書の記載および特許請求の範囲全体で、「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」およびこの用語の他の形態、例えば、「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は、限定されていないものを含むことを意味し、例えば、他の添加剤、成分、整数または工程を除外することを意図しない。

本明細書で使用する場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、本文中で他の意味を明確に示す場合を除き、複数の参照物を含む。

「アルキル」および「アルキル基」という用語は、相互に置き換え可能に用いられ、１〜２０個の炭素原子を含む直鎖、分枝鎖、飽和または不飽和の炭素鎖を意味する。炭素原子の数は、例えば「Ｃ_１−６アルキル」と表現することができ、この表現は、アルキル基が１〜６個の炭素原子を含むことを意味する。このような基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、１，４−ジエニル、ブタ−１−エニルなどが挙げられる。

「置換アルキル基」は、ＯＨ、アルキル、シクロアルキル、ハロゲン、フェニル、ベンジル、アミド、アミン、アルデヒド、エステルまたはエーテルから独立して選択される１つ以上の基で置換されたアルキル基を意味する。

「シクロアルキル」および「シクロアルキル基」という用語は、相互に置き換え可能に使用され、環に３〜７個の原子を有する飽和単環炭素環を意味する。このような基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルが挙げられる。

「置換シクロアルキル基」は、ＯＨ、アルキル、シクロアルキル、ハロゲン、フェニル、ベンジル、アミド、アミン、アルデヒド、エステルまたはエーテルから独立しテ選択される１つ以上の基で置換されたシクロアルキル基を意味する。

「アルコキシ」という用語は、酸素原子によって接続したアルキル基、アルケニル基、アルキニル基またはシクロアルキル基を指す（例えば、−Ｏ−アルキルなど）。アルコキシ基は、置換アルキルについて上に記載したように場合により置換されていてもよい。

特許請求の範囲における「場合により置換された」との言及は、「非置換物」および「置換物」を含む。ある基が「非置換」として示されている場合、その基は置換されていない。

特に指定のない限り、本明細書に図示するか、または記載する構造は、その構造のあらゆる異性体（例えば、エナンチオマー、ジアステレオマー、幾何異性体または配座異性体）形態、例えば、それぞれの不斉中心についてＲ配置およびＳ配置を含むことも意味する。従って、本化合物の１種類の立体化学異性体、およびエナンチオマー、ジアステレオマー、幾何異性体または配座異性体の混合物が、本発明の範囲内である。

特に指定のない限り、本発明の化合物は、その医薬的に許容され得る塩、プロドラッグまたは誘導体を含む。

２．本発明の化合物
本発明の化合物は、保存中に安定であるが、体内では２種類の別個の酸化防止性分子にすばやく変換される。安定性および生体利用可能性といった特性は、この分子のチオール成分を安定化し、この成分の酸化防止性種の医薬的特性を高める化学結合に起因している。これらの酸化防止性分子の１つは、チオール含有酸化防止剤である。遊離チオール含有分子は、反応性であり、一般的に、貯蔵中に不安定であり、酸化し、酸化防止特性を失ったジスルフィドを生成する。ある態様では、この化合物は、式Ｉの化合物であり、チオール含有酸化防止剤、例えば、Ｎ−アセチルシステインおよびＮ−アセチルシステインアミドと、β−アラニル−ヒスチジン誘導体、例えば、カルノシンおよびカルノシン誘導体、例えば、Ｎ−アセチルカルノシンに変換される。チオール含有酸化防止剤は、酸化したグルタチオンと反応し、還元されたグルタチオンを生成することができる。β−アラニル−ヒスチジン誘導体は、多くの酸化防止特性を有する。例えば、カルノシンは、酸化ストレス中、細胞膜の脂肪酸の過酸化によって生成する反応性酸素種（ＲＯＳ）およびα−β不飽和アルデヒドを捕捉することが示されている。他の態様では、この化合物は、式ＩＩの化合物であり、チオール含有酸化防止剤、例えば、Ｎ−アセチルシステインまたはＮ−アセチルシステインアミドと、Ｌ−カルニチンまたはカルニチン誘導体、例えば、アセチル−Ｌ−カルニチンおよびプロピオニル−Ｌ−カルニチンに変換される。カルニチンは、かなり大きな酸化防止作用を発揮し、それによって、リン脂質膜の脂質の過酸化および心筋細胞および内皮細胞のレベルで誘発される酸化ストレスに対し、保護的な影響を与える。カルニチンは、コエンザイムＡ（ＣｏＡ）の再生において、基質として役立つ。

本発明は、式Ｉまたは式ＩＩの化合物

またはその医薬的に許容され得る塩を提供し、式中、
Ｒは、Ｈ、または場合により置換されたアルキル、または場合により置換されたアルコキシであり；
Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、場合により置換されたアルキル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり；
Ｒ^３は、場合により置換されたアルキルまたは場合により置換されたアルコキシであり；
Ｌは、−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｌ^１は、−ＣＨ（Ｒ^５）−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｌ^２は、−Ｏ−または−ＮＨ−であり；
Ｒ^４は、Ｈまたは場合により置換されたアルキルであり；
Ｒ^５は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｌ^２Ｒ^７であり；
Ｒ^６は、Ｈまたは−（ＣＨ_２）_ｎＣ（＝Ｏ）Ｒ^８であり；
Ｒ^７は、Ｈ、アルキル、または−（ＣＨ_２）_ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^８は、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、または−（ＣＨ_２）_ｗ−ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^９は、Ｈ、アルキル、または−Ｃ（＝Ｏ）アルキルであり；
ｍは、１、２、３または４であり；
ｎ、ｐおよびｗは、それぞれ独立して、０、１、２、３または４である。

別の態様では、本発明は、式Ｉまたは式ＩＩの化合物、またはその医薬的に許容され得る塩を提供し、式中、
Ｒが、ＨまたはＣ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり；
Ｒ^１およびＲ^２が、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_１−６アルキルまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり；
Ｒ^３が、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり；
Ｌが、−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｌ^１が、−ＣＨ（Ｒ^５）−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｌ^２が、−Ｏ−または−ＮＨ−であり；
Ｒ^４が、ＨまたはＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^５が、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｌ^２Ｒ^７であり；
Ｒ^６が、Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（＝Ｏ）Ｒ^８であり；
Ｒ^７が、Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、または−（ＣＨ_２）_ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^８が、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、または−（ＣＨ_２）_ｗ−ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^９は、Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ_１−６アルキルであり；
ｍが、１、２、３または４であり；
ｎ、ｐおよびｗが、それぞれ独立して、０、１、２、３または４である。

ある態様では、Ｒは、Ｈ、場合により置換されたアルキル、または場合により置換されたアルコキシである。別の態様では、Ｒは、非置換アルキルである。別の態様では、Ｒは、場合により置換されたＣ_１−６アルキルである。別の態様では、Ｒは、非置換Ｃ_１−６アルキルである。別の態様では、Ｒは、場合により置換されたＣ_１−６アルコキシである。別の態様では、Ｒは、非置換Ｃ_１−６アルコキシである。

ある態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２はＨである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、場合により置換されたアルキルである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、非置換アルキルである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、場合により置換されたＣ_１−６アルキルである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、非置換Ｃ_１−６アルキルである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、Ｒ^３は、場合により置換されたアルキルである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、Ｒ^３は、非置換アルキルである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、Ｒ^３は、場合により置換されたＣ_１−６アルキルである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、Ｒ^３は、非置換Ｃ_１−６アルキルである。

ある態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、Ｒ^３は、場合により置換されたアルコキシである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、Ｒ^３は、非置換アルコキシである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、Ｒ^３は、場合により置換されたＣ_１−６アルコキシである。別の態様では、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、Ｒ^３は、非置換Ｃ_１−６アルコキシである。

他の態様では、Ｌは、−（ＣＨ_２）_ｍ−であり、ｍは１である。別の態様では、Ｌは、−（ＣＨ_２）_ｍ−であり、ｍは２である。別の態様では、Ｌは、−（ＣＨ_２）_ｍ−であり、ｍは３である。別の態様では、Ｌは、−（ＣＨ_２）_ｍ−であり、ｍは４である。

ある態様では、Ｌ^２は、−Ｏ−である。別の態様では、Ｌ^２は、−ＮＨ−である。

さらに他の態様では、Ｒ^４はＨである。別の態様では、Ｒ^４は、場合により置換されたアルキルである。別の態様では、Ｒ^４は、非置換アルキルである。別の態様では、Ｒ^４は、場合により置換されたＣ_１−６アルキルである。別の態様では、Ｒ^４は、非置換Ｃ_１−６アルキルである。

他のさらなる態様では、Ｒ^５はＨである。別の態様では、Ｒ^５は、−Ｃ（Ｏ）ＯＨである。別の態様では、Ｒ^５は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｌ^２Ｒ^７である。

ある態様では、Ｒ^６はＨである。別の態様では、Ｒ^６は、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（＝Ｏ）Ｒ^８である。

ある態様では、Ｒ^７はＨである。別の態様では、Ｒ^７は、場合により置換されたアルキルである。別の態様では、Ｒ^７は、非置換アルキルである。別の態様では、Ｒ^７は、場合により置換されたＣ_１−６アルキルである。別の態様では、Ｒ^７は、非置換Ｃ_１−６アルキルである。別の態様では、Ｒ^７は、（ＣＨ_２）_ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨである。

他の態様では、Ｒ^８は−ＯＨである。別の態様では、Ｒ^８は、−ＣＨ_３であり、別の態様では、Ｒ^８は、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである。別の態様では、Ｒ^８は、−（ＣＨ_２）_ｗ−ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである。

ある態様では、Ｒ^９はＨである。別の態様では、Ｒ^９は、アルキルであり、別の態様では、Ｒ^９は、Ｃ_１−６アルキルである。別の態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（＝Ｏ）アルキルである。別の態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ_１−６アルキルであり、別の態様では、Ｒ^９は、−ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−ＣＨ_２ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−（ＣＨ_２）_２ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−（ＣＨ_２）_３ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−（ＣＨ_２）_４ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−（ＣＨ_２）_５ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ_２）_２ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ_２）_３ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ_２）_４ＣＨ_３である。別の態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ_２）_５ＣＨ_３である。

さらに他の態様では、ｎは０である。別の態様では、ｎは１である。別の態様では、ｎは２である。別の態様では、ｎは３である。別の態様では、ｎは４である。

ある態様では、ｐは０である。別の態様では、ｐは１である。別の態様では、ｐは２である。別の態様では、ｐは３である。別の態様では、ｐは４である。

ある態様では、ｗは０である。別の態様では、ｗは１である。別の態様では、ｗは２である。別の態様では、ｗは３である。別の態様では、ｗは４である。

一態様では、本発明は、式Ｉの化合物を提供し、

式中、Ｒ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、ＬおよびＬ^１は、上に定義される。

ある態様では、Ｒは、Ｈ、メチル、プロピル、またはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。さらなる態様では、Ｒは、Ｈである。別のさらなる態様では、Ｒは、メチルである。さらに別のさらなる態様では、Ｒは、プロピルである。別のさらなる態様では、Ｒは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。

ある態様では、Ｒ^１はＨである。

ある態様では、Ｒ^２は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｍｅ、またはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。さらなる態様では、Ｒ^２は、Ｈである。別のさらなる態様では、Ｒ^２は、−Ｃ（Ｏ）Ｍｅである。別のさらなる態様では、Ｒ^２は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。

一態様では、ＲおよびＲ^２は、それぞれｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。

ある態様では、Ｒ^４は、Ｈまたはメチルである。さらなる態様では、Ｒ^４は、Ｈである。別のさらなる態様では、Ｒ^４は、メチルである。

一態様では、Ｌ^１は、−ＣＨＲ^５−であり、ここで、Ｒ^５は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３、または

である。あるさらなる態様では、Ｒ^５はＨである。別のさらなる態様では、Ｒ^５は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２である。別のさらなる態様では、Ｒ^５は、−Ｃ（Ｏ）ＯＨである。別のさらなる態様では、Ｒ^５は、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３である。別のさらなる態様では、Ｒ^５は、

である。さらに別の態様では、Ｌ^１は、−Ｃ（＝Ｏ）−である。

ある態様では、Ｒ^６は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｍｅ、−（ＣＨ_２）ＣＯＯＨまたは

である。あるさらなる態様では、Ｒ^６はＨである。別のさらなる態様では、Ｒ^６は、−Ｃ（Ｏ）Ｍｅである。別のさらなる態様では、Ｒ^６は、−（ＣＨ_２）ＣＯＯＨである。別のさらなる態様では、Ｒ^６は、

である。

一態様では、Ｌは、−（ＣＨ_２）_ｍ−であり、ｍは、２または３である。さらなる態様では、ｍは２である。別のさらなる態様では、ｍは３である。

別の態様では、本発明は、式Ｉａの化合物

を提供し、式中、Ｒ^１０およびＲ^１１は、それぞれ独立して、Ｈ、場合により置換されたアルキルまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、
Ｒ^３は、上に定義され；
Ｒ^１２は、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、または−（ＣＨ_２）_ｗ−ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｗは、上に定義される。

一態様では、Ｒ^１０およびＲ^１１は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_１−４アルキル、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ_１−４アルキル、または−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣ_１−４アルキルである。

別の態様では、Ｒ^１２は、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、または−（ＣＨ_２）_２−ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである。

一態様では、Ｒ^１０およびＲ^１１は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_１−４アルキル、または−Ｃ（Ｏ）Ｍｅである。

別の態様では、Ｒ^１２は−ＣＨ_３である。

別の態様では、Ｒ^１０およびＲ^１１は、それぞれ独立して、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。

別の態様では、本発明は、式Ｉｂの化合物

を提供し、式中、Ｒ^１０およびＲ^１１は、それぞれ独立して、Ｈ、場合により置換されたアルキルまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり、
Ｒ^３は、上に定義され；
Ｒ^１２は、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、または−（ＣＨ_２）_ｗ−ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｗは、上に定義され；
Ｒ^１３は、Ｈ、アルキル、または−（ＣＨ_２）_ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨである。

一態様では、Ｒ^１３は、Ｈまたはアルキルである。さらなる態様では、Ｒ^１３は、Ｈである。

別の態様では、Ｒ^１２は−ＣＨ_３である。

別の態様では、Ｒ^１３は、Ｑ_１−６アルキルである。さらなる態様では、Ｒ^１３は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、またはペンチルである。なおさらなる態様では、Ｒ^１３は、メチルである。

別の態様では、Ｒ^１０およびＲ^１１は、それぞれ独立してｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。

一態様では、本発明は、式ＩＩの化合物

を提供し、式中、Ｌ、Ｌ^１、Ｒ^９、Ｒ^４およびＲ^６は、上に定義される。

一態様では、Ｌは、ＣＨ_２である。

一態様では、Ｒ^４はＨである。

一態様では、Ｒ^６は、−Ｃ（Ｏ）Ｍｅである。

一態様では、Ｒ^９は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｍｅ、または−Ｃ（Ｏ）Ｅｔである。さらなる態様では、Ｒ^９はＨである。別のさらなる態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（Ｏ）Ｍｅである。さらなる態様では、Ｒ^９は、−Ｃ（Ｏ）Ｅｔである。

一態様では、Ｌ^１は、−ＣＨＲ^５であり、Ｒ^５は、−ＣＯＯＨまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２である。あるさらなる態様では、Ｒ^５は、−ＣＯＯＨである。別のさらなる態様では、Ｒ^５は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２である。

具体的な本発明の化合物としては、表１に記載するものが挙げられる。

本発明は、さらに、上に記載し、具体的に名称を記した１つ以上の化合物と、医薬的に許容され得る担体、アジュバントまたはビヒクルとをそれぞれ含有する医薬組成物も提供する。

特定の態様では、本発明の化合物を、他の薬物を用いた併用療法と組み合わせて使用することができる。このような治療としては、限定されないが、関与する薬物の同時投与または逐次投与が挙げられる。例えば、本発明の化合物を、特定の状態の看護の標準として一般的に用いられる薬物とともに投与することができる。従って、特定の態様では、これらの組成物は、場合により、さらに、１種類以上のさらなる治療薬剤を含む。

医薬的に許容され得る塩は、当該技術分野でよく知られている。例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅｅｔａｌ．は、本明細書に参照により組み込まれるＪ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９７７、６６：１−１９において医薬的に許容され得る塩を詳細に記載している。本発明の化合物の医薬的に許容され得る塩は、適切な無機および有機の酸および塩基から誘導されるものが挙げられる。これらの塩は、最終的な化合物の単離および精製の間に系中で調製することができる。酸付加塩は、例えば、第１に、遊離塩基形態の精製された化合物と適切な有機または無機の酸とを反応させ、次いで、このようにして生成した塩を単離することによって調製することができる。

医薬的に許容され得る非毒性の酸付加塩の例は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸を用いて作られるか、または有機酸、例えば、酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸またはマロン酸を用いて作られるか、またはイオン交換のような当該技術分野で使用される他の方法によって作られるアミノ基の塩である。他の医薬的に許容され得る塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、硫酸水素塩、ホウ酸塩、ブタン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコンサン塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パルモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、バレル酸塩などが挙げられる。適切な塩基から誘導される塩としては、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよびＮ^＋（Ｃ_１−４アルキル）_４の塩が挙げられる。本発明は、さらに、本明細書に開示する化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化も想定する。水溶性または油溶性または分散性の生成物も、このような四級化によって得られてもよい。

塩基性付加塩は、第１に、酸形態の精製された化合物と適切な有機または無機の塩基とを反応させ、次いで、このようにして生成した塩を単離することによって調製することができる。塩基付加塩としては、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩が挙げられる。代表的なアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどの塩が挙げられる。さらなる医薬的に許容され得る塩としては、適切な場合、対イオンを用いて作られる非毒性のアンモニウム、四級アンモニウムおよびアミンカチオン、例えば、ハロゲン化物、水酸化物、炭酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、低級アルキルスルホン酸塩またはアリールスルホン酸塩を用いて作られるものが挙げられる。他の酸および塩基は、それ自体が医薬的に許容され得るものではないが、本発明の化合物およびその医薬的に許容され得る酸付加塩または塩基付加塩を得る際の中間体として有用な塩の調製に使用されてもよい。

３．本発明の方法
本発明の化合物は、単独で投与されるか、または他の適切な薬剤と組み合わせて投与され、酸化ストレス、遊離ラジカルによる酸化剤生成および細胞および組織での過剰産生、細胞成分、例えば、タンパク質、脂質、拡散および他の細胞生体分子の損傷を減らし、防ぐか、または弱め、還元されたグルタチオンを再生産するのに役立つように作用する。本発明は、さらに、酸化防止剤レベルの低下および／または酸素ラジカル発生の増加に関連する疾患、損傷または状態を治療するための方法を提供する。

ある態様では、酸化防止剤レベルの低下および／または酸素ラジカル発生の増加に関連する疾患、損傷または状態を治療するための方法は、治療に有効な量の本発明の化合物を、治療が必要な対象に投与することを含む。

本発明の一態様は、治療に有効な量の本発明の化合物を、治療が必要な対象に投与することを含む、心血管疾患、脳性麻痺；肝疾患、嚢胞性繊維症、認知症、炎症性疾患、筋萎縮性側索硬化症、急性呼吸不全症候群、感染症、狼瘡、眼の障害、多発性硬化症、腎疾患、ニューロパチー、脳症、糖尿病；βサラセミア、鎌状赤血球症、パーキンソン病、肺線維症、生殖器疾患、不妊；発作性障害、敗血症、卒中、壊疽、毒素ショックまたは外傷性損傷を治療する方法である。

別の態様は、治療に有効な量の本発明の化合物を、治療が必要な対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、慢性閉塞性肺疾患または慢性心不全を治療する方法である。

さらに別の態様は、自然溶血を治療する方法である。別の態様は、化学物質または他の薬剤によって誘発される溶血を治療する方法である。特定の態様では、この方法は、グルコース−６−ホスフェートデヒドロゲナーゼ（Ｇ６ＰＤＨ）が不足した感受性個体での抗マラリア治療；および化学療法による治療によって誘発される溶血性貧血を治療する方法である。

さらに別の態様は、治療に有効な量の本発明の化合物を、治療が必要な対象に投与することを含む、炎症性腸疾患、クローン病、関節リウマチまたは大腸炎を治療する方法である。

別の態様は、治療に有効な量の本発明の化合物を、治療が必要な対象に投与することを含む、硬変または肝炎を治療する方法である。

さらに別の態様は、アルツハイマー病に関連する認知症を治療する方法である。

さらに別の態様は、白内障または黄斑変性を治療する方法である。

別の態様は、外傷性損傷を治療する方法である。ある態様では、外傷性損傷は、生物兵器への曝露である。ある態様では、生物兵器は、リシンである。または生物兵器は、炭疽菌である。または生物兵器は、エボラウイルスである。または生物兵器は、ボツリヌス菌である。または生物兵器は、ニパウイルスである。

または、外傷性損傷は化学熱傷である。または外傷性損傷は、熱傷である。または外傷性損傷は造影剤腎症である。または外傷性損傷は放射線被曝である。または外傷性損傷は、たばこの煙への曝露である。または外傷性損傷は、毒ガスへの曝露である。または外傷性損傷は、爆傷である。または外傷性損傷は、接触過敏反応である。または外傷性損傷は、遅延型過敏反応である。または外傷性損傷は、聴力損失を引き起こす損傷である。または外傷性損傷は、中毒症である。ある態様では、中毒症は、ヘビのかみ傷によって引き起こされる。または中毒症は、蜘蛛の刺し傷によって引き起こされる。または中毒症は、クラゲによって引き起こされる。または中毒症は、サソリの刺し傷によって引き起こされる。または中毒症は、昆虫の刺し傷によって引き起こされる。または外傷性損傷は、日焼けである。または外傷性損傷は、移植拒絶である。または外傷性損傷は、銃創である。または外傷性損傷は、圧迫傷である。または外傷性損傷は、トキシコデンドロン種に関連する炎症である。または外傷性損傷は、皮膚の損傷である。または外傷性損傷は、化学療法による治療である。または外傷性損傷は、薬物過剰摂取である。ある態様では、薬物過剰摂取は、アセトアミノフェンの過剰摂取である。または薬物過剰摂取は、モルヒネの過剰摂取である。

４．製剤および投与
本発明の化合物は、医薬組成物として配合することができ、すなわち、経口、膣投与および直腸投与を含む局所的に、吸入および非経口によって、静脈内経路、筋肉内経路または皮下経路による、選択される投与経路に適合する種々の形態で、哺乳動物対象、例えば、ヒト対象に投与することができる。

本明細書で記載される場合、本発明の医薬的に許容され得る組成物は、さらに、医薬的に許容され得る担体、アジュバントまたはビヒクルを含み、本明細書で使用する場合、特定の望ましい投薬形態に適するような溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散物または懸濁助剤、表面活性化剤、等張化剤、増粘剤または乳化剤、防腐剤、固体バインダー、滑沢剤などのいずれかおよびすべてを含む。本開示の化合物を送達するのに適した医薬組成物およびその調製方法は、当業者には容易に明らかであろう。このような組成物その調製方法は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ、第１９版（ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ、１９９５）中に見出されるだろう。

経口投与に適した投薬形態としては、例えば、固体系、半固体系および液体系、例えば、硬質または軟質のシェルゼラチンカプセル、錠剤、液体、粉末、薬用キャンディー（液体を充填したものを含む）、チュアブル剤、ゲル、膜、卵型剤（ovules）、スプレー、エリキシル剤、懸濁物、シロップ、口腔／粘膜接着性パッチなどが挙げられる。

経口投薬形態は、例えば、バインダー、例えば、トラガカントガム、アカシア、トウモロコシデンプンまたはゼラチン；賦形剤、例えば、リン酸二カルシウム；崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルギン酸など；滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウムを含んでいてもよく、甘味剤、例えば、スクロース、フルクトース、ラクトースまたはアスパルテームまたは香味剤、例えば、ペパーミント、ウィンターグリーン油、またはチェリーフレーバーを加えてもよい。単位投薬形態がカプセルである場合、上述の種類の材料に加え、液体担体、例えば、植物油またはポリエチレングリコールを含んでいてもよい。種々の他の材料は、コーティングとして存在していてもよく、または固体単位投薬形態の物理形態を他の方法で変えるために存在していてもよい。例えば、錠剤、丸薬、またはカプセルを、ゼラチン、ワックス、シェラックまたは糖などでコーティングしてもよい。シロップまたはエリキシル剤は、活性化合物と、スクロースまたはフルクトースを甘味剤として、メチルパラベンおよびプロピルパラベンを防腐剤として、染料およびフレーバー、例えばチェリーフレーバーまたはオレンジフレーバーを含んでいてもよい。もちろん、任意の単位投薬形態を調製するときに用いられる任意の材料は、医薬的に許容され得るものであり、実質的に、使用される量で非毒性であるべきである。それに加え、活性化合物を、持続放出性調剤薬およびデバイスに組み込んで藻よい。活性化合物は、点滴または注射によって静脈投与または腹腔内投与してもよい。活性化合物またはその塩の溶液を水中で、場合により、非毒性界面活性剤と混合して調製することができる。分散物を、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、トリアセチンおよびこれらの混合物の中で、および油中で調製することもできる。通常の保存状態および使用状態で、これらの調剤薬は、微生物の成長を防ぐために、防腐剤を含んでいてもよい。

注射または点滴に適した医薬投薬形態は、場合により、リポゾームにカプセル化され、滅菌の注射可能または注入可能な溶液または分散物の即時調製に合うように調整された活性成分を含む滅菌水溶液または分散物または滅菌粉末を含んでいてもよい。あらゆる場合に、最終的な投薬形態は、滅菌液体であり、製造状態および保存状態で安定でなければならない。液体担体またはビヒクルは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、植物油、非毒性グリセリルエステルおよび適切なこれらの混合物を含む溶媒または液体分散媒体であってもよい。例えば、リポゾームの生成によって、分散物の場合には必要な粒径を維持することによって、または界面活性剤の使用によって、適切な流動性を維持することができる。微生物の作用の予防は、種々の抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによってもたらされ得る。多くの場合に、等張化剤、例えば、糖類、バッファーまたは塩化ナトリウムを含むことが好ましいだろう。注射可能な組成物の長期間にわたる吸収は、吸収を遅らせる薬剤、例えば、アルミニウムモノステアレートおよびゼラチンの組成物で使用することによってもたらされ得る。

局所投与の場合、本化合物は、純粋な形態で、すなわち液体であるとき、塗布されてもよい。しかし、一般的に、皮膚科学的に許容され得る固体または液体であってもよい担体と組み合わせて組成物または製剤として皮膚に投与することが望ましい。有用な固体担体としては、微細に分割した固体、例えば、タルク、クレイ、微結晶性セルロース、シリカ、アルミナなどが挙げられる。有用な液体担体としては、水、アルコールまたはグリコールまたは水−アルコール／グリコールブレンドが挙げられ、本化合物は、場合により、非毒性の界面活性剤の助けを借りて、有効なレベルで溶解または分散させることができる。所与の使用のための特性を最適化するために、アジュバント、例えば、香料およびさらなる抗菌剤を加えてもよい。増粘剤、例えば、合成ポリマー、脂肪酸、脂肪酸塩およびエステル、脂肪族アルコール、改質されたセルロースまたは改質された鉱物材料を、液体担体とともに使用し、使用者の皮膚に直接塗布するために広げることができるペースト、ゲル、軟膏、石鹸などを作成することもできる。本開示の化合物を皮膚に送達するために使用可能な有用な皮膚科学用組成物の例は、当該技術分野で既知であり、例えば、Ｊａｃｑｕｅｔｅｔａｌ．（米国特許第４，６０８，３９２号）、Ｇｅｒｉａ（米国特許第４，９９２，４７８号）、Ｓｍｉｔｈｅｔａｌ．（米国特許第４，５５９，１５７号）およびＷｏｒｔｚｍａｎ（米国特許第４，８２０，５０８号）を参照。

本発明の化合物は、好ましくは、投与を簡単にするため、および投薬の均一性のために投薬単位で配合される。「投薬単位形態」という表現は、本明細書で使用する場合、治療される対象に適した薬剤の物理的に別個の単位を指す。本開示の化合物の有用な投薬量は、ｉｎｖｉｔｒｏでの活性と動物モデルのｉｎｖｉｖｏでの活性を比較することによって決定することができる。マウスおよび他の動物における有効投薬量をヒトに外挿する方法は、当該技術分野で既知であり、例えば、米国特許第４，９３８，９４９号を参照。しかし、本発明の化合物および組成物の１日合計使用量は、正当な医学的判断の範囲内で主治医によって決定されることが理解されるだろう。治療に必要な化合物の特定の有効投薬量は、対象の種族、年齢、体重および全身の状態、治療する障害、感染の重篤度、投与態様、処理の持続時間、使用する特定の化合物と組み合わせて、または同時に使用する薬物、および医療分野でよく知られている因子に依存して対象ごとに異なるだろう。

一般的な合成
本発明の化合物は、当該技術分野で既知の方法によって簡単に調製することができる。以下に、本発明の化合物を調製するための例示的な方法を示す。以下に記載する方法は、説明の目的のためであり、本発明を限定するものとみなすべきではない。

スキーム１は、式Ｉの化合物を製造するための式Ａの中間体の酸および式Ｂのチオールのカップリングを示す。
スキーム１：中間体の酸ＡおよびチオールＢのカップリング

上のスキーム１では、当該技術分野で既知の標準的なカップリング条件を用い、中間体の酸Ａを、チオールＢとカップリングし、式Ｉの化合物を製造することができる。カップリング試薬の非限定例は、ＤＣＣ／ＨＯＢｔ、ＥＤＣ／ＨＯＢｔおよびＴＰ３（登録商標）である。カップリング反応は、溶媒と、場合により塩基が存在する状態で行うことができる。上述のカップリング反応に適した溶媒および塩基は、当業者には既知である。

式Ａの中間体の酸は、市販されているか、または当該技術分野で既知の方法によって合成することができる。例えば、式Ａの中間体は、以下のスキーム１ａに従って、式Ａ１のヒスチジン誘導体と、式Ａ２の種々のアミノ酸とをカップリングさせ、次いで、適切な場合、脱保護することによって合成することができる。

スキーム１ａ：式Ａの中間体の合成

式Ｂのチオール中間体は、市販されているか、または当該技術分野で既知の方法によって合成することができる。

Ｒ^１、Ｒ^２および／またはＲが水素である場合には、中間体の酸Ａのアミン官能基を、まず、適切なアミン保護基で保護することができる。このような保護基は、当該技術分野で既知であり、非限定例は、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、ｃｂｚおよびアシルである。以下のスキーム２は、保護基を用いた式Ｉの化合物の合成を示す。
スキーム２：中間体の酸Ａの保護、次いで、チオールＢとのカップリング

スキーム２において、中間体Ａを、まずアミン保護基試薬、例えば、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートと接触させる。例示的な合成は、ＮｅｗＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ２４（１２）、１０３７−１０４２、２０００に記載される。次いで、Ａの保護された形態を中間体Ｂとカップリングし、次いで、保護基に適した条件で、例えば、強酸無希釈または非プロトン性溶媒、例えば、ジオキサン中、脱保護する。式Ｉの化合物の中和は、有機溶媒、例えば、酢酸エチル中、中程度の塩基、例えば、トリエチルアミンを用いて達成することができる。

スキーム３は、式ＩＩの化合物を製造するための中間体の酸ＥとチオールＢのカップリングを示す。
スキーム３：中間体の酸ＥとチオールＢのカップリング

上のスキーム３において、当該技術分野で既知の標準的なカップリング条件を用い、中間体の酸ＥをチオールＢとカップリングし、式ＩＩの化合物を製造することができる。カップリング条件の非限定例は、ＤＣＣ／ＨＯＢｔ、ＥＤＣ／ＨＯＢｔおよびＴＰ３（登録商標）である。カップリング反応は、溶媒と、場合により塩基が存在する状態で行うことができる。上述のカップリング反応に適した溶媒および塩基は、当業者には既知である。式Ｅの中間体は、市販されているか、または当該技術分野で既知の方法によって合成することができる。

（具体例）

以下に記載する例は、本発明をよりよく理解することができるように提供され、本発明を限定するとみなされるべきではない。

調製例１：（Ｒ）−メチル２−アセトアミド−３−メルカプトプロパノエート（４５ａ）

（Ｒ）−２−アセトアミド−３−メルカプトプロパン酸，Ｎ−アセチル−（Ｌ）−システイン（５０ｇ、０．３０ｍｏｌ）のメタノール５００ｍＬ溶液に、０．５ｍＬの塩化アセチルを加えた。この溶液を室温で４８時間攪拌し、そのとき、別の０．５ｍＬの塩化アセチルを加えた。この溶液を一晩攪拌し、次いで、粘性液体になるまで濃縮した。ヘキサンを用いた磨砕によって、メチルエステルを白色固体として得た。この生成物を高減圧下、室温で４時間乾燥させ、５３．４ｇ（約１００％）の（Ｒ）−メチル２−アセトアミド−３−メルカプトプロパノエートを得た。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ ６．３９（ｂｓ，１Ｈ）、４．９０（ｍ，１Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．０１（ｄ，２Ｈ）、２．０６（ｓ，３Ｈ）。

調製例２：（Ｒ）−２−アセトアミド−３−メルカプトプロパンアミド（４５ｂ）

４５ａ（５３．４ｇ、０．３０ｍｏｌ）を、トルエン２５０ｍＬおよび水酸化アンモニウム２００ｍＬで希釈した。この混合物を室温で一晩攪拌し、次いで濃縮した。得られた残渣を２５０ｍＬのアセトニトリル／Ｈ_２Ｏ（９．３：１）に懸濁させ、不溶性物質から粘性ペーストが生成するまで、室温で攪拌した。溶媒をデカンテーションし、濃縮して粘性液体を得た。未精製生成物をジクロロメタン／メタノール（８．５：１）に取り、ジクロロメタン／メタノール（８．５：１）を用いて溶出し、シリカゲルカラムを通過させた。少なくとも極性のＵＶ活性成分を含有するフラクションを合わせ、濃縮し、２５ｇ（５２％）の（Ｒ）−２−アセトアミド−３−メルカプトプロパンアミドを白色固体として得た。^１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ８．０（ｄ，１Ｈ）、７．４１（ｓ，１Ｈ）、７．１３（ｓ，１Ｈ）、４．３３（ｍ，１Ｈ）、２．７６（ｍ，１Ｈ）、２．６５（ｍ、１Ｈ）、２．２２（ｍ，１Ｈ）、１．８８（ｓ，３Ｈ）。

調製例３：（Ｓ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）−２−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）プロパン酸（４５ｃ）

ＮａＯＨ（４．８６ｇ、１２１．５１ｍｍｏｌ）を含有するジオキサン２００ｍＬおよび水２００ｍＬ中の（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパン酸，Ｌ−カルノシン（２５．０ｇ、１１０．５ｍｍｏｌ）の二相混合物をＮ_２下、約０℃で攪拌し、これに、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（５３．１ｇ、２４３．３ｍｍｏｌ）のジオキサン１５０ｍＬ溶液を滴下した。溶液を室温まで一晩かけて加温した後、２００ｍＬの飽和ＫＨ_２ＰＯ_４溶液を加えてサンプルを酸性化し、濃縮し、次いで、ＥｔＯＡｃで抽出した（５００ｍＬ×２回）。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、３５．７４ｇ（７６％）の４５ｃを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ４２７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１：（Ｓ）−Ｓ−（（Ｒ）−２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピル）２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート二塩酸塩（４５）

工程１：Ｎ_２下、室温で、５００ｍＬのＴＨＦ：ＥｔＯＡｃ（１：１）中の（Ｓ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）−２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパンアミド）プロパン酸（４５ｃ、３５．７４ｇ、８３．８０ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−アセトアミド−３−メルカプトプロパンアミド（４５ｂ、１３．５９ｇ、８３．７８ｍｍｏｌ）の懸濁物を攪拌し、これにトリエチルアミン（２６ｍＬ、１８６ｍｍｏｌ）を滴下した。加えた後、懸濁物を１５分間攪拌し、次いで、ホスホン酸プロピル無水物の５０重量％ＥｔＯＡｃ溶液（５５ｍＬ、９２ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた曇った溶液を室温で２時間攪拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（約５００ｍＬ）を加えた。層を分離させ、有機抽出物を飽和ＫＨ_２ＰＯ_４で洗浄し、次いで、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。水相を、新鮮なＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×２回）で抽出し戻した（同じ順序で）。合わせた有機抽出物を、ＭｇＳＯ_４を用いて乾燥させ、濾過し、濃縮し、クロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ中の５０％ＴＨＦ）を２回行い、３５．５３ｇ（７４％）のｔｅｒｔ−ブチル５−（（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピルチオ）−２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパンアミド）−３−オキソプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−カルボキシレート（４５ｄ）を白色泡状固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ５７１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

工程２：Ｎ_２下、ｔｅｒｔ−ブチル５−（（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピルチオ）−２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパンアミド）−３−オキソプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボキシレート（４５ｄ、１０４．１ｇ、１８２．４ｍｍｏｌ）のジオキサン１２００ｍＬ溶液を室温で機械的に攪拌し、これに塩酸のジオキサン４Ｎ溶液（１０６ｍＬ、６４０ｍｍｏｌ）を滴下した。約５０ｍＬのＨＣｌ溶液を加えた後、固体が生成した。完全に加えた後、サンプルをＮ_２下、室温で３時間攪拌し、濾過し、減圧乾燥し、９７．９ｇ（＞１００％）の表題化合物を白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３７１［親＋Ｈ］^＋。

次いで、生成物を水６００ｍＬに溶解し、凍結乾燥させ、９１．３ｇの（Ｓ）−Ｓ−（（Ｒ）−２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピル）２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート二塩酸塩を白色泡状固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３７１［親＋Ｈ］^＋。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_２Ｏ）δ ８．４６（ｓ，１Ｈ）、７．１４（ｓ，１Ｈ）、４．７２−４．７７（ｍ，１Ｈ）、４．６０−４．６８（ｂｓ，水のピーク）、４．３５−４．４２（ｍ，１Ｈ）、３．２６−３．３６（ｍ，１Ｈ）、３．１５−３．２２（ｍ，１Ｈ）、２．９６−３．１０（ｍ，４Ｈ）、２．５０−２．６３（ｍ，２Ｈ）および１．８２−１．９０（ｍ，３Ｈ）。分析：Ｃ_１４Ｈ_２２Ｎ_６Ｏ_４Ｓ×２．３ＨＣｌ×０．６５Ｈ_２Ｏとしての計算値（４６６．００３）：Ｃ，３６．０８；Ｈ，５，５４；Ｎ，１８．０３；Ｃｌ，１７．５０。実測値：Ｃ，３５．９３；Ｈ，５．４２；Ｎ，１７．６６；Ｃｌ，１７．２２。ＨＰＬＣ９９．８％（２４０ｎＭ）、Ｒｔ６．５４分。

実施例２：（Ｒ）−メチル２−アセトアミド−３−（（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイル）チオ）プロパノエート二塩酸塩（４６）

工程１：ビス−ＢＯＣ−Ｌ−カルノシン（４５ｃ、０．８５５ｇ、２．０ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．４０５ｇ、２．６ｍｍｏｌ）、Ｎ−アセチルシステインメチルエステル（４５ａ、０．４３４ｇ、２．４５ｍｍｏｌ）および酢酸エチル（５０ｍＬ）の混合物を氷浴で冷却し、窒素ガス雰囲気下、１０分攪拌した。次いで、ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．４３３ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を加え、冷却浴を室温までゆっくりと上げつつ、この混合物を０℃で攪拌した。約１時間後、沈殿が生成し、質量分光法分析によれば、生成物が存在した。反応混合物を室温で一晩攪拌し、次いで、セライトパッドを通して濾過した。次いで、濾過した溶液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍＬ×３回）および塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、油状物になるまで濃縮した。この油状物に対し、酢酸エチル、次いで、酢酸エチル／テトラヒドロフラン（４／１ｖ／ｖ）を溶出液として用い、次いで、シリカゲルクロマトグラフィー（２３０〜４００メッシュ、３２．５ｇ）を行った。生成物を白色泡状物０．４７５ｇとして得た。ＭＳ：（Ｍ＋１）^＋＝５８６．２（３０％）；４８６．２（１００％）；３８６．１（９６％）。

工程２：乾燥ジオキサン（２ｍＬ）中、５−［２−（２−アセチルアミノ−２−メトキシカルボニル−エチルスルファニルカルボニル）−２−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオニルアミノ）−エチル］−イミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４６ａ、０．１０２８ｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）を、４ＮＨＣｌジオキサン（５．０ｍＬ、１１４ｍｍｏｌ）に滴下し、この混合物を室温で約２時間攪拌した。反応混合物を乾燥するまで濃縮し、残った揮発物質を高減圧下で除去した。生成物を白色固体として得た。ＭＳ：（Ｍ＋ｌ）^＋＝３８６．１。^１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ９．１５（ｂｍ，１Ｈ）、９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｂｓ，１Ｈ）、８．００（ｂｍ，３Ｈ）、７．４４（ｂｓ，１Ｈ）、４．６９（ｂｍ，１Ｈ）、４．３７（ｂｍ，１Ｈ）、３．６４−３．５６（ｂｍ，５Ｈ）、３．４−３．１（ｂｍ，プロトンの数は水のピークと残留ジオキサンによって妨害される）、２．９３（ｂｓ，２Ｈ）、２．５８（ｂｍ，２Ｈ）、１．８５（ｓ，３Ｈ）。

実施例３：化合物４５対Ｎ−アセチルシステインアミド（ＮＡＣＡ）の安定性

化合物４５およびＮ−アセチルシステインアミド（ＮＡＣＡ）の安定性は、５℃、２５℃／６０％相対湿度（ＲＨ）および４０℃／７５％ＲＨで化合物を１ヶ月または２ヶ月保存した後の分解生成物（不純物）の出現を定量する逆相ＨＰＬＣを用いて決定された。

使用したクロマトグラフィーシステムは、脱気器（Ｇ１３２２Ａ型）、ポンプ（Ｇ１３１１Ａ型）、オートサンプラー（Ｇ１３２９Ａ型）、カラムコンパートメント（Ｇ１３１６Ａ型）およびダイオードアレイ検出器（Ｇ１３１５Ａ型）で構成されるＡｇｉｌｅｎｔ１１００ＨＰＬＣであった。ＡｇｉｌｅｎｔＣｈｅｍｓｔａｔｉｏｎソフトウエアＲｅｖ．Ｂ．０３．０２［３４１］を使用し、すべてのクロマトグラフィーデータを獲得し、分析した。希釈したサンプルおよび標準を、ＨＰＬＣ分析のためのシラン化した褐色バイアルに置き、ＨＰＬＣサンプルトレイおよびサンプルは、分析持続時間のための５℃に制御した温度であった。化合物４５およびＮＡＣＡのアッセイ、属性および純度および時間経過に伴って生じる不純物の定量は、ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＳｙｎｅｒｇｉＰｏｌａｒ−ＲＰ（２５０×４６ｍｍ、４ｍｍ）カラムを用い、１５℃、０．２％過塩素酸（ＰＣＡ）の水溶液およびアセトニトリル溶液を移動相として、２１０ｎｍでのＵＶ検出、および標準的なランタイム２０分で、逆相定組成法によって達成された。化合物４５およびＮＡＣＡの標準溶液を０．２過塩素酸中で調製し、化合物４５およびＮＡＣＡの定量のための標準曲線を作成した。それぞれの検体の複製サンプルを試験開始時（ベースライン）、種々の条件で１ヶ月保存した後、２ヶ月保存した後に、親物質および不純物を定量するために集めた。分析を行う前に、ＨＰＬＣカラムを、１５℃で移動相を３０〜６０分かけて、またはベースラインが安定になるまで平衡状態にした。サンプル希釈剤（ブランク）および標準溶液の希釈剤を、分析を行う前に実行し、システムの性能を確認した（安定なベースラインおよびピーク溶出／保持時間プロフィール）。

システムの適切性

システムの適切性を以下のように決定した（ＵＳＰの＜６２１＞章に対する）

標準的な応答ファクターの決定
ＲＦ＝Ａ_ｓｔｄ／Ｃ_ｓｔｄ

ここで、
Ａ_ＳＴＤ具体的な標準のピーク面積応答
Ｃ_ＳＴＤ純度について補正した標準的な濃度

分析
属性
サンプル溶液（アッセイおよび純度）および参照となる標準溶液のクロマトグラムにおける化合物４５およびＮＡＣＡのピークの一致は、保持時間について決定された。それぞれの保持時間の違いは、±２．０％を超えなかった。

アッセイ
化合物４５：サンプル溶液および標準のクロマトグラムにおける化合物４５のピーク面積を決定した。各サンプル中の化合物４５の量は、以下の式を用いて計算された。

％アッセイは、以下の式によって決定された。

ここで、
Ｃ_ｓｔｄ化合物４５ＳＴＤ溶液の濃度（ｍｇ／ｍＬでの）
Ａ_ｕサンプル調製物中の化合物４５のピーク面積
Ａ_ｓ化合物４５ＳＴＤ調製物を挟み込むための平均ピーク面積応答
Ｖ_ｓサンプル希釈体積
Ｗサンプルの重量

ＮＡＣＡ：サンプル溶液および標準のクロマトグラム中のＮＡＣＡのピーク面積を決定した。ＮＡＣＡの量を以下の式を用いて計算した。

％アッセイは、以下の式によって決定された。

純度
サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、すべての既知および未知の不純物および分解生成物のピーク面積を個々に決定し、すべての未知の不純物を、化合物４５またはＮＡＣＡとの相対的な保持時間によって特定した。溶媒に関連するすべてのピークを無視した。それぞれの不純物ピークの相対的な保持時間（ＲＲＴ）を以下の式を用いて決定した。

ここで、
ＲＴ_ｉｍｐ個々の不純物（既知または未知）の保持時間
ＲＴ_{ｐａｒｅｎｔ} 化合物４５またはＮＡＣＡ（アッセイされるサンプルによる）の保持時間

不純物および分解生成物を以下の式を用い、合計に対する％面積として定量した。

ここで、
Ａ_ｉｍｐサンプル調製物の不純物のピーク面積
Ａ_{Ｔｏｔａｌ} サンプル調製物中の希釈剤以外のすべてのピークのピーク面積応答
ＲＲＦ不純物または分解生成物（決定した場合）の相対的な応答ファクター

（結果）

化合物４５およびＮＡＣＡは両方とも、特に、高い温度および高い湿度で保存したとき（４０℃／７５％ＲＨ）、濃度依存性および時間依存性の分解を示した。ＮＡＣＡの分解の程度は、不純物のベースラインからの変化率％によって測定した場合、化合物４５の分解の程度より顕著に大きかった。

図１、２および３に示されるように、１ヶ月および２ヶ月保存した後、化合物４５について、ベースラインからの不純物の増加率％は、ＮＡＣＡの不純物の増加率より小さかった。図１は、５℃および６０％ＲＨで保存したときのデータを示す。図２は、２５℃および６０％ＲＨで保存したときのデータを示す。図３は、４０℃および７５％ＲＨで保存したときのデータを示す。これらのデータは、広範囲の保存状態で、ＮＡＣＡよりも化合物４５の分解が少ないことを示す。

実施例４：化合物４５対カルノシンの溶解度の差
生理学的バッファー（リン酸緩衝化食塩水、ｐＨ７．４；ＰＢＳ）中の化合物４５およびカルノシンの溶解度を、Ｇａｌａｘｙ分析ソフトウエア、バージョン４．３２Ｒ２を用いたＢＭＧＬａｂｔｅｃｈＮＥＰＨＥＬＯｓｔａｒ比濁計（Ｏｆｆｅｎｂｕｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて決定した。それぞれの化合物のストック溶液を最初にジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で調製し、化合物４５は、ＤＭＳＯに濃度５０ｍＭで可溶性であり、一方、カルノシンはそうではなかった。その後、比濁計を用いた溶解度の評価のために、両化合物の段階的な希釈を、直接的にＰＢＳ（ｐＨ７．４）で調製し、それぞれの化合物について、最高濃度５００ｍｇ／ｍＬ、段階的に１：２希釈した。ヒートマップを用いて濃度−溶解度の関係を定量的に示すために、ポジティブコントロール化合物を含めた。化合物４５は、５００ｍｇ／ｍＬの濃度で生理学的バッファーに可溶性であったが、カルノシンは、２５０ｍｇ／ｍＬ未満の濃度でしか可溶性ではなかった。

実施例５：異なる作用機序で２種類の酸化防止剤を放出する、全血中の多機能酸化防止剤分子の加水分解
化合物４５は、固有の多機能酸化防止剤分子であり、コアのチオエステル結合の酵素による加水分解によって代謝され、内因性のペプチド酸化防止剤分子であるカルノシンと、チオール含有合成酸化防止剤であるＮ−アセチルシステインアミド（ＮＡＣＡ）とを得た。カルノシンは、遊離ラジカルおよび脂質の過酸化物を捕捉し、α，β−不飽和アルデヒドをクエンチし、酵素によらないグリコシル化を防ぎ、進んだタンパク質糖化最終産物の生成を防ぐことが示されている。ＮＡＣＡは、強力なチオール還元剤であり、システイン／グルタチオンプロドラッグおよび遊離ラジカル捕捉剤である。薬理学的に活性な多機能酸化防止剤生成物を得るためにチオエステル結合を安定化する代謝機構を実証するために、一連の実験を行い、ヒトの血中での化合物４５の加水分解を評価し、化合物４５の消失およびこの分子の多機能酸化防止剤成分の出現を測定した。

血中での化合物４５の加水分解およびＮＡＣＡおよびカルノシンの出現を決定するために、健康な供与者から得て、ナトリウムヘパリンで抗凝固処理したヒト全血のサンプルを、水浴中、３７℃で熱的に平衡状態にして、３７℃に維持した。次いで、化合物４５を、１種類の新しく調製したストック溶液から小分けした血液に加え、化合物４５の開始濃度（１３５μＭ、１３．５μＭ、１０．９μＭ［５μｇ／ｍＬ］および２．２μＭ［１μｇ／ｍＬ］）を変えた別個のサンプルを作成した。加えた直後、管を手動で非常に穏やかに５分間揺らして混合し、均一性を確保し、すべての時間点を集めるまで、３７℃の水浴に保持した。種々の時間点で、サンプル濃度あたり、浴から管を取り出し、手動で穏やかに揺らすことによって混合し、体積１ｍＬの化合物４５を強化した全血を各サンプルから取り出し、新しい管にいれ、５℃で１５分間遠心分離処理し、血漿を作成した。血漿の上澄みをすぐに収穫し、すべての時間点を集めるまで−８０℃で凍結させた。以下に記載するように、化合物４５の消失（加水分解）およびＮＡＣＡおよびカルノシンの出現の定量化のために血漿サンプルを処理した。

サンプルの調製：
ストック溶液：ＮＡＣＡ（５００ｎｇ／ｍＬ）を、０．０５％ギ酸を含有する１ｍＭアスコルビン酸の溶液として調製した。化合物４５（５００μｇ／ｍＬ）を１５ｍＭ過塩素酸の溶液として調製した。カルノシン（５００μｇ／ｍＬ）を１５ｍＭ過塩素酸の溶液として調製した。マレイミド試薬（Ｎ−［２−アミノエチル］マレイミド）１３ｍｇ／ｍＬ（約５１ｍＭ）を０．１％ギ酸溶液として調製した。サンプルバッファーは、ｐＨ５の１Ｍ酢酸アンモニウムであった。

サンプルの調製：特定の時間点で、全血サンプルから約３０００ｒｐｍで１５分間遠心分離し、血漿を分離した。血漿層を分離し、抽出するまで、凍結状態（−２０℃以下）で保存した。サンプルの処理および抽出を、解凍した血漿の７５μＬの小分けを含む９６ウェルプレート中で行い、これに１５０μＬの１Ｍ酢酸バッファーおよび７５μＬの１３ｍｇ／ｍＬマレイミド試薬を加え、ＮＡＣＡを誘導体化し、ＮＡＣＡ−チオ−エーテル生成物を作成した。プレートに蓋をし、振り混ぜ、ボルテックス処理によって十分に混合し、次いで、遠心分離処理し、２〜８℃で５分間かけて再び冷蔵した。誘導体化したサンプルを５０μＬに小分けしたものを新しい９６ウェルプレートに移し、誘導体化したサンプルのそれぞれの小分け分にアセトニトリル−ギ酸（１００：０．１）５００μＬを加えた。プレートに蓋をし、振り混ぜ／ボルテックス処理し、サンプルを混合／抽出し、次いで、遠心分離し、上澄みを分離した。得られた上澄み４００μＬを新しい９６ウェルプレートに移し、穏やかに窒素を流しつつ、抽出溶媒を室温で蒸発させた。ＨＰＬＣ−ＭＳによる分析のために抽出サンプルを０．１％ギ酸のアセトニトリル溶液４００μＬで再構築し、注入のためにプレートを密封した。

単離および検出
ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＴＳＱＶａｎｔａｇｅ三連四重極質量分析計を取りつけ、陽イオンモードでのエレクトロスプレーイオン化を用い、ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＴＭ液体クロマトグラフで９６ウェルプレート中のサンプルを分析した。それぞれの抽出されたサンプルを、７０℃で平衡状態にしたＢＥＨアミドカラム（２．１×５０ｍｍ；１．７μｍ）に注入した（１０μＬ）。移動相Ａは、０．２％（ｖ／ｖ）ギ酸を含有する水であった。移動相Ｂは、０．２％（ｖ／ｖ）ギ酸を含有するメタノールであった。

以下の勾配スキームを用い、ＨＰＬＣ分離を達成した。

化合物４５、カルノシンおよびＮＡＣＡ−チオ−エーテル誘導体生成物は、約１．３分で溶出した。化合物４５は、質量電荷比（ｍ／ｚ）が３７１から１１０に遷移する選択した反応の監視によって検出した。カルノシンは、ｍ／ｚが２２７から１１０に遷移する選択した反応の監視によって検出した。ＮＡＣＡ誘導体生成物は、ｍ／ｚが３０３から１９９に遷移する選択した反応の監視によって検出した。質量分析計から生データを獲得し、ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＷａｔｓｏｎＬａｂｏｒａｔｏｒｙＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＭａｎａｇｅｍｅｎｔＳｙｓｔｅｍ（ＬＩＭＳ）またはＬＣｑｕａｎで処理した。別個の実験を分析し、化合物４５の加水分解からのＮＡＣＡおよびカルノシンの出現を定量した。

ヒト全血中でインキュベーションする場合、化合物４５は、加水分解し、ＮＡＣＡ（図４および５）およびカルノシン（図６および７）を得た。従って、固有のチオエステル化学結合は、ｅｘ−ｖｉｖｏで多機能酸化防止剤分子を安定化するが、血中で迅速に代謝され、２成分の多機能酸化防止剤を得た。

化合物、組成物および方法の態様を説明の目的のために提示するが、本開示の化合物、組成物および方法の範囲の限定と考えるべきではない。本発明の範囲は、具体的に記載された態様および実施例によってではなく、特許請求の範囲によって定義されるべきである。

Claims

式Ｉまたは式ＩＩの化合物

〔式中、Ｒは、Ｈ、場合により置換されたアルキル、または場合により置換されたアルコキシであり；
Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、アルキル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり；
Ｒ^３は、場合により置換されたアルキルまたは場合により置換されたアルコキシであり；
Ｌは、−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｌ^１は、−ＣＨ（Ｒ^５）−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｌ^２は、−Ｏ−または−ＮＨ−であり；
Ｒ^４は、Ｈまたは場合により置換されたアルキルであり；
Ｒ^５は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｌ^２Ｒ^７であり；
Ｒ^６は、Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（＝Ｏ）Ｒ^８であり；
Ｒ^７は、Ｈ、アルキル、または−（ＣＨ_２）_ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^８は、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、または−（ＣＨ_２）_ｗ−ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^９は、Ｈ、アルキル、または−Ｃ（＝Ｏ）アルキルであり；
ｍは、１、２、３または４であり；
ｎ、ｐおよびｗは、それぞれ独立して、０、１、２、３または４である。〕
またはその医薬的に許容され得る塩。
前記化合物が式Ｉの化合物である、請求項１に記載の化合物。
Ｒが、Ｈ、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり；
Ｒ^１およびＲ^２が、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_１−６アルキルまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３であり；
Ｒ^３が、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり；
Ｌが、−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｌ^１が、−ＣＨ（Ｒ^５）−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｌ^２が、−Ｏ−または−ＮＨ−であり；
Ｒ^４が、ＨまたはＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^５が、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｌ^２Ｒ^７であり；
Ｒ^６が、Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（＝Ｏ）Ｒ^８であり；
Ｒ^７が、Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、または−（ＣＨ_２）_ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^８が、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、または−（ＣＨ_２）_ｗ−ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり；
ｍが、１、２、３または４であり；
ｎ、ｐおよびｗが、それぞれ独立して、０、１、２、３または４である、請求項２に記載の化合物。
ＲがＨである、請求項２または請求項３に記載の化合物。
Ｒがメチルまたはプロピルである、請求項２または請求項３に記載の化合物。
Ｒがｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである、請求項２または請求項３に記載の化合物。
Ｒ^１がＨであり、Ｒ^２が−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^３である、請求項２〜６のいずれか１項に記載の化合物。
Ｒ^３が、Ｈ、メチルまたはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである、請求項２〜７のいずれか１項に記載の化合物。
Ｒ^１およびＲ^２がＨである、請求項２〜６のいずれか１項に記載の化合物。
Ｒ^１がＨであり、Ｒ^２がＣ_１−６アルキルである、請求項２〜６のいずれか１項に記載の化合物。
ｍが２または３である、請求項２〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
Ｒ^４がＨまたはメチルである、請求項２〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
Ｒ^６が、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｍｅ、−（ＣＨ_２）ＣＯＯＨ、または

である、請求項２〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
Ｌ^１が−Ｃ（＝Ｏ）−である、請求項２〜１３のいずれか１項に記載の化合物。
Ｌ^１が−ＣＨ（Ｒ^５）−である、請求項２〜１３のいずれか１項に記載の化合物。
Ｒ^５が−Ｃ（＝Ｏ）Ｌ^２Ｒ^７である、請求項１５に記載の化合物。
Ｌ^２が−Ｏ−であり、Ｒ^７が、ＨまたはＣ_１−６アルキルである、請求項１６に記載の化合物。
Ｌ^２が−Ｏ−であり、Ｒ^７がメチルである、請求項１７に記載の化合物。
Ｌ^２が−ＮＨ−であり、Ｒ^７が、Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、または−（ＣＨ_２）_ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨである、請求項１６に記載の化合物。
Ｒ^５が、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３または

である、請求項１５に記載の化合物。
前記化合物が式ＩＩの化合物である、請求項１に記載の化合物。
Ｌが−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｌ^１が、−ＣＨ（Ｒ^５）−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｌ^２が、−Ｏ−または−ＮＨ−であり；
Ｒ^４が、ＨまたはＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^５が、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｌ^２Ｒ^７であり；
Ｒ^６が、Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（＝Ｏ）Ｒ^８であり；
Ｒ^７が、Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、または−（ＣＨ_２）_ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^８が、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、または−（ＣＨ_２）_ｗ−ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^９が、Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ_１−６アルキルであり；
ｍは、１、２、３または４であり；
ｎ、ｐおよびｗは、それぞれ独立して、０、１、２、３または４である、請求項２１に記載の化合物。
ＬがＣＨ_２であり；
Ｒ^４がＨであり；
Ｒ^６が−Ｃ（Ｏ）Ｍｅであり；
Ｒ^９が、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｍｅ、または−Ｃ（Ｏ）Ｅｔであり；
Ｌ^１が、−ＣＨＲ^５であり；
Ｒ^５が、−ＣＯＯＨまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２である、請求項２２に記載の化合物。
前記化合物が、
（２Ｓ）−Ｓ−２，３−ジアミノ−３−オキソプロピル２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
２−アミノ−３−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパン酸；
２−アセトアミド−３−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパン酸；
（２Ｓ）−Ｓ−２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピル２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
メチル２−アセトアミド−３−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパノエート；
２−（２−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパンアミド）酢酸；
（Ｓ）−Ｓ−２−アミノエチル２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート（７）；
２−アミノ−５−（２−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）−１−カルボキシエチルアミノ）−５−オキソペンタン酸；
２−アミノ−５−（３−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）−１−（カルボキシメチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イルアミノ）−５−オキソペンタン酸；
（２Ｓ）−Ｓ−２，３−ジアミノ−３−オキソプロピル２−（３−アセトアミドプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
３−（（Ｓ）−２−（３−アセトアミドプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）−２−アミノプロパン酸；
（８Ｓ）−８−（（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル）−２，７，１０，１４−テトラオキソ−６−チア−３，９，１３−トリアザペンタデカン−４−カルボン酸；
（２Ｓ）−Ｓ−２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピル２−（３−アセトアミドプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
（８Ｓ）−メチル８−（（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル）−２，７，１０，１４−テトラオキソ−６−チア−３，９，１３−トリアザペンタデカン−４−カルボキシレート；
２−（２−｛［（２Ｓ）−２−（３−アセトアミドプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイル］スルファニル｝プロパンアミド）酢酸；
（Ｓ）−Ｓ−２−アミノエチル２−（３−アセトアミドプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
２−アミノ−４−［（１−カルボキシ−２−｛［（２Ｓ）−２−（３−アセトアミドプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイル］スルファニル｝エチル）カルバモイル］ブタン酸；
２−アミノ−４−（｛１−［（カルボキシメチル）カルバモイル］−２−｛［（２Ｓ）−２−（３−アセトアミドプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイル］スルファニル｝エチル｝カルバモイル）ブタン酸；
（２Ｓ）−Ｓ−２，３−ジアミノ−３−オキソプロピル２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
２−アミノ−３−（（Ｓ）−２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパン酸；
２−アセトアミド−３−（（Ｓ）−２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパン酸；
（２Ｓ）−Ｓ−２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピル２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
メチル２−アセトアミド−３−（（Ｓ）−２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパノエート；
２−（２−（（Ｓ）−２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパンアミド）酢酸；
（Ｓ）−Ｓ−２−アミノエチル２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
２−アミノ−５−（２−（（Ｓ）−２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）−１−カルボキシエチルアミノ）−５−オキソペンタン酸；
２−アミノ−５−（３−（（Ｓ）−２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）−１−（カルボキシメチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イルアミノ）−５−オキソペンタン酸；
（２Ｓ）−Ｓ−２，３−ジアミノ−３−オキソプロピル２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンエチオエート；
２−アミノ−３−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパン酸；
２−アセトアミド−３−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパン酸；
（２Ｓ）−Ｓ−２−アセタミド−３−アミノ−３−オキソプロピル２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
メチル２−アセトアミド−３−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパノエート；
２−（２−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）プロパンアミド）酢酸；
（Ｓ）−Ｓ−２−アミノエチル２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；
２−アミノ−５−（２−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）−１−カルボキシエチルアミノ）−５−オキソペンタン酸；
２−アミノ−５−（３−（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）−１−（カルボキシメチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イルアミノ）−５−オキソペンタン酸；
２−アミノ−４−（｛１−［（カルボキシメチル）カルバモイル］−２−｛［（２Ｓ）−２−（３−アセトアミドプロパンアミド）−３−（１−ブチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイル］スルファニル｝エチル｝カルバモイル）ブタン酸；
２−アミノ−５−（３−（（Ｓ）−２−（４−アミノブタンアミド）−３−（１−プロピル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイルチオ）−１−（カルボキシメチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イルアミノ）−５−オキソペンタン酸；
（２Ｒ）−４−（２−アセトアミド−２−カルボキシエチルチオ）−２−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソブタン−１−アミニウム；
（２Ｒ）−４−（２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピルチオ）−２−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソブタン−１−アミニウム；
（２Ｒ）−４−（２−アセトアミド−２−カルボキシエチルチオ）−２−アセトキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソブタン−１−アミニウム；
（２Ｒ）−４−（２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピルチオ）−２−アセトキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソブタン−１−アミニウム；
（２Ｒ）−４−（２−アセトアミド−２−カルボキシエチルチオ）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソ−２−（プロピオニルオキシ）ブタン−１−アミニウム；
（２Ｒ）−４−（２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピルチオ）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソ−２−（プロピオニルオキシ）ブタン−１−アミニウム；
（Ｓ）−Ｓ−（（Ｒ）−２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピル）２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；および
（Ｒ）−メチル２−アセトアミド−３−（（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイル）チオ）プロパノエートから選択される、請求項１に記載の化合物。
前記化合物が、
（Ｓ）−Ｓ−（（Ｒ）−２−アセトアミド−３−アミノ−３−オキソプロピル）２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンチオエート；および
（Ｒ）−メチル２−アセトアミド−３−（（（Ｓ）−２−（３−アミノプロパンアミド）−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパノイル）チオ）プロパノエートから選択される、請求項２４に記載の化合物。
治療に有効な量の請求項１〜２５のいずれか１項に記載の化合物を、治療を必要とする対象に投与することを含む、酸化防止剤レベルの低下および／または酸素ラジカル発生の増加に関連する疾患、損傷または状態を治療する方法。
前記疾患、損傷または状態が、心血管疾患、脳性麻痺；肝疾患、嚢胞性繊維症、認知症、炎症性疾患、筋萎縮性側索硬化症、急性呼吸不全症候群、感染症、狼瘡、眼の障害、多発性硬化症、腎疾患、ニューロパチー；脳症；糖尿病、βサラセミア、鎌状赤血球症、パーキンソン病、肺線維症、生殖器疾患、不妊、発作性障害、敗血症、卒中、壊疽、毒素ショックまたは外傷性損傷である、請求項２６に記載の方法。
心血管疾患が、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、慢性閉塞性肺疾患または慢性心不全である、請求項２７に記載の方法。
炎症性疾患が、炎症性腸疾患、クローン病、関節リウマチまたは大腸炎である、請求項２７に記載の方法。
肝疾患が、肝硬変または肝炎である、請求項２７に記載の方法。
認知症が、アルツハイマー病に関連する認知症である、請求項２７に記載の方法。
眼の障害が、白内障または黄斑変性である、請求項２７に記載の方法。
外傷性損傷が、生物兵器への曝露、化学熱傷、熱傷、造影剤腎症、薬物過剰摂取、放射線被曝、たばこの煙への曝露、毒ガスへの曝露、爆傷、接触過敏反応、遅延型過敏反応、聴力損失を引き起こす損傷、中毒症、日焼け、移植拒絶、銃創、圧迫傷、トキシコデンドロン種に関連する炎症、皮膚の損傷または化学療法による治療である、請求項２７に記載の方法。
生物兵器が、リシン、炭疽菌（Bacillus anthracis）、エボラウイルス、ボツリヌス菌（Clostridium botulinum）、またはニパウイルスである、請求項２７に記載の方法。
外傷性損傷が爆傷である、請求項２７に記載の方法。
薬物過剰摂取が、アセトアミノフェンまたはモルヒネの過剰摂取である、請求項２７に記載の方法。