JP2015186582A - 組織ドレッシングキット - Google Patents
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Abstract
Description
の妨害が観察されている。
者の組織と接触して適用される組織ドレッシング材料を含むキットを提供することである。本発明はさらに、患者の組織を治療するための改良された方法を提供することを目的とする。なおさらに、本発明は、ヒトまたは動物の組織を治療する方法において使用するための新規な材料を提供することを目指している。
また別の好ましい方法では、本発明によるキットおよび方法の創傷ドレッシング材料は、到達もしくは治療するのが困難である身体の領域、例えば開口部、生殖器部、または創傷治癒が大気への限られた曝露に起因して遅延させられる可能性がある身体部分において使用される。特に好ましい方法では、創傷ドレッシング材料は、異物材料および従来型創傷ドレッシング材料の適用に感受性である領域、例えば粘膜に適用される。この材料は、創傷内または創傷上に適用することができる。本発明の文脈における患者は、ヒトまたは動物であり得る。
単独または組み合わせて適用できる本発明の好ましい特徴については、従属請求項および以下の説明において考察する。
せたガーゼ、スポンジもしくはゲルによって提供することができる。剥離溶媒はまた、スプレー装置内で提供することができる。好ましいスプレー装置は、剥離溶媒を貯蔵するための容器を含んでいる。このスプレー装置はまた、剥離溶媒を吐出するための加圧ガスを含むことができる。
所見は、例えば上記の米国特許第3,632,754号明細書に記載されたように、創傷治癒用途におけるD−グルコサミンのN−アセチル化形に起因する重要性を考えると驚くべきことである。さらに、例えば、Chitin and chitosan,Amsterdam 1989,653の中のIzume et.al.,「A novel cell culture matrix composed of chitosan and collagen complex」において、極めて低いアセチル化度のキトサンは、極度に高い細胞接着に起因して細胞増殖を阻害するので、むしろ細胞増殖抑制特性を有する可能性があることが提言されている。
ために十分な表面積を有する。好ましくは、少なくとも70重量%、より好ましくは少なくとも90重量%、より好ましくは少なくとも95重量%の固体またはゲル状組織ドレッシング材料は、キトサン、好ましくは天然キトサンである。
な蒸発という利点を有することができ、これは次により迅速な固化をもたらす。
、例えばアルコール類、エステル類、アルカン類、ハロゲン化溶媒、アミン類、アミド類を含んでいない。しかし、組織ドレッシング材料は有機酸を含有することが多い。有機酸は、本発明の文脈においては有機溶媒とは見なされない。
れによってそれに本組織ドレッシング材料が付着される組織への刺激または損傷が回避されることは、本発明のこの実施形態の達成可能な利点である。本発明のこの実施形態は、好ましくは本組織ドレッシング材料の外用に適用される。
trafluorethylene)、ポリスルホン類、ポリエーテルスルホン類、ポリエーテルエーテルケトン類、ポリカーボネート類、ポリメタクリレート類、多糖類、ポリペプチド類、ならびにこれらのポリマーをベースとする誘導体、コポリマー、およびブレンドからなり得る。
素で着色することができる。
以下の実施例において出発材料として使用したキトサンは、Cognis(独国)から微細フレークの形態で入手した。アセチル化度(DA)は、1H NMR分光法によって決定した。図1は、この市販のキトサンから入手した1H NMRスペクトルを示している。図2は、以下で詳細に説明するように、市販製品に適用されたさらなる加水分解工程後に脱アセチル化したキトサンから入手した対応する1H NMRスペクトルを示している。どちらの場合も、キトサンは、D2O中でおよそ0.5%(w/v)のキトサン濃度にある0.25% DClの混合液中で分析した。スペクトルは、Bruker AC200分光計を使用して記録した。NMR化学シフト(δ、単位ppm)をHDO(δ=4.8ppm)のシグナルと比較した。D−グルコサミンサブユニットのH2−H6と関連付けたピーク下の積分面積をメチル基のそれと比較することによって計算したDAは、購入した天然キトサンについては14.5%、および脱アセチル化天然キトサンについては
1.5%であると決定された。
さらなる加水分解のために、供給業者であるCognisから入手したキトサンフレーク50g(グラム)をガラス容器に入れ、500gの45%水酸化ナトリウム水溶液を加えた。構成成分を混合するためにガラス容器をよく振とうし、100℃のオーブン内に2時間にわたり入れた。次にこれをオーブンから取り出し、500mL(ミリリットル)の蒸留水を加えた。この混合液をガラスフリットに通して濾過した。次に、濾液のpHが6.5に達するまでキトサンを蒸留水で洗浄し、100℃で4h(時間)にわたり乾燥させた。次いでこの加水分解処理を繰り返すと、1H NMR分光法で決定した1.5%のDAを有する脱アセチル化天然キトサン42gが生じた。
ヒトHaCaTケラチン生成細胞は、0.2ng/mL(ナノグラム/ミリリットル)のrEGFおよび25μg/mL(マイクログラム/ミリリットル)のウシ下垂体抽出物を補給した無血清培地(Gibco)中で培養した。カルシウム濃度を0.02mM、およびpHを7.2〜7.4へ調整した。細胞は培地20mL当たり1×106個(細胞)の密度で播種し、10% CO2を含有する37℃の大気中でインキュベートした。細胞は週に1回継代培養し、分析には20〜25継代を使用した。
このようにして得られた1.5%のDAを有する天然キトサン7.5gを、24時間にわたり緩徐に振とうすることによって、500mLの0.5%酢酸水溶液中に溶解させた。この溶液の一部分を最初にガラス繊維フィルター(孔径:約1μm)に通して濾過し、次に滅菌のために0.22μmフィルターに通すと、全体として脱アセチル化天然キトサンから本質的になる組織ドレッシング材料の溶液が生じた。以下では、この材料を組織ドレッシング材料Aと称する。
上記のように調製した各144mLの脱アセチル化天然キトサンの非濾過溶液の2つの部分をサイズが24×24cm2(平方センチメートル)の2つの正方形の型内に注入し、室温で乾燥させるために無塵環境に放置した。生じたフィルムを第1の型から取り出し、10kGy(キログレイ)電子線を使用して滅菌した。全体として脱アセチル化天然キトサン酢酸塩から本質的になる組織ドレッシング材料の厚さおよそ80μmの透明フィルムが得られた。以下では、この材料を組織ドレッシング材料Bと称する。
第2の型からの乾燥フィルムを、メタノール/水(90/10(v/v))中の1.5%アンモニア溶液を含有する浴中に2時間にわたり入れた。次にこのフィルムを浴から取り出し、室温で保管することによって乾燥させた。このフィルムは10kGy電子線を使
用して滅菌した。全体として脱アセチル化天然キトサン塩基から本質的になる組織ドレッシング材料の厚さおよそ80μmの透明フィルムが得られた。以下では、この材料を組織ドレッシング材料Cと称する。
上記のように調製した144mLの脱アセチル化キトサンの濾過溶液を、サイズが24×24cm2の正方形の型内に注入し、室温で乾燥させるために無塵環境に放置した。3日間の貯蔵後、生じたフィルムを型から取り外し、ポリ袋内に移し、次にこれを密封し、25kGy(キログレイ)電子線を使用して滅菌した。全体として脱アセチル化キトサン酢酸塩から本質的になる組織ドレッシング材料の厚さおよそ80μmの透明フィルムが得られた。以下では、この材料を組織ドレッシング材料D1と称する。
手順をわずかに修正して、正方形の型内に注入する前に脱アセチル化キトサンの濾過溶液に4%(w/w)グリセロールを加えた。組織ドレッシング材料D1について上述したその後の処置により、全体として脱アセチル化キトサン酢酸塩およびグリセロールの混合液から本質的になる組織ドレッシング材料の透明フィルムが生じた。以下では、この材料を組織ドレッシング材料D2と称する。
手順をさらに修正して、脱アセチル化キトサンのグリセロール含有溶液を正方形の型内に注入し、これをポリウレタン/ポリエチレン(Platilon U073 PE、Epurex、ボムリッツ/独国)からなる2層フィルムで、ポリウレタン側を上にし、ポリエチレン側を型の底部に固定させて被覆した。組織ドレッシング材料D1について上述したその後の処置により、ポリウレタン/ポリエチレンサポートフィルムに付着している全体として脱アセチル化キトサン酢酸塩およびグリセロールの混合液から本質的になる組織ドレッシング材料の透明フィルムが生じた。以下では、この材料を組織ドレッシング材料D3と称する。使用時には、ポリエチレン層は除去する。残留しているポリウレタン層はガス透過性である。
キトサンフィルムD2の調製をわずかに修正した手順で、正方形の型内に注入する前に濾過溶液に1%(w/w)グリセロールを加えた。キトサンD1について上述したその後の処置により、全体として脱アセチル化キトサン酢酸塩およびグリセロールの混合液から本質的になる透明フィルムが生じた。以下では、この材料をキトサンD4と称する。
組織ドレッシング材料のさらに2つの実施例は、1つの場合には4%のDA(材料E1)を生じさせるために加水分解工程を短縮した、およびもう1つの場合には16%のDA(材料F1)を生じさせるために加水分解工程を完全に省略した、修飾のみを加えた材料D1を生じさせる手順によって製造した。
上記の実施例に記載したように製造した組織ドレッシング材料Cを計量し、次に蒸留水中に15分間入れた。湿潤フィルムの重量を乾燥フィルムの重量と比較し、吸水は72重量%であると決定された。
上記の実施例に記載したように製造したキトサンD4を計量し、次に蒸留水中に60分
間入れた。湿潤フィルムの重量を乾燥フィルムの重量と比較し、吸水はフィルム調製の7日後には1,217重量%、およびフィルム調製の14日後には475重量%であると決定された。
以下の表1には、組織ドレッシング材料A、BおよびCを用いた患者の治療結果を詳述する。材料Aは創傷上に直接噴霧し、その後溶媒が大気中に容易に蒸発するように被覆せずに放置した。材料BおよびCは、フィルム状材料の小さな切り傷として創傷と直接接触して適用された。材料Bの場合は、皮膚は、材料の適用前に事前に湿潤させた。全実施例で、材料は適用後は被覆せずに放置した。
組織ドレッシング材料BおよびCの制御された溶解について、蒸留水、0.9%塩化ナトリウム水溶液、および0.5%酢酸/酢酸塩緩衝液各々を用いた溶解実験において試験した。溶液のpHは、適切な量の1N塩酸または水酸化ナトリウム溶液を使用して、表2に指示した数値に調整した。材料BおよびCは、各々5mg〜10mgの乾燥重量を有する長方形のサンプルに切断した。フィルムの乾燥重量に対して体積当たり100倍過剰な各溶液を浸漬させたガーゼを各サンプルフィルムに適用し、フィルムが完全に溶解するための時間を記録した。
組織ドレッシング材料A、D1、D2、D3、およびD4各々のサンプルを室温および湿度20%〜40%の大気中に密封せずに放置した。これらの条件下で、組織ドレッシング材Aは数時間以内に固体フィルムへ乾燥した。蒸留水中の完全溶解を3、7、および14日後に分析した。結果は、表3に要約する。
組織ドレッシング材料D1、E1およびF1を、2%酢酸/酢酸塩緩衝液中での貯蔵によって溶解させた。溶液のpHは、適切な量の10%水酸化ナトリウム溶液を使用して、表4に指示した数値に調整した。様々なアセチル化度(DA)を備えるキトサンから作製されたフィルムD1、E1およびF1を、非水溶性形へ転換させるために14日間にわたり大気中に放置し、1×1cm2のサイズの矩形サンプルに切断し、およそ10mLの各溶液中に貯蔵し、完全なフィルム溶解時間を記録した。
1,000mLの組織ドレッシング材料Aは、1,000mLの無菌蒸留水の添加によって希釈すると、0.75%のキトサン、0.25%の酢酸および99%の水からなる液体型組織ドレッシング材料が生じた。機械的ディスペンサーを使用して、20mLの溶液を各々ガラス瓶に満たし、次にこれらにポンプヘッドを取り付けると、ガス無含有のキトサンをベースとする創傷スプレーが生じた。同様に、液体型ドレッシング材料は、加圧ガスを含有するスプレー装置に入れた。
を容易にするためにのみ導入されているもので、決して限定することを意図していない。
Claims (15)
- キットであって、前記キットの部品として、
患者の組織と接触して適用されるための組織ドレッシング材料と、
前記組織ドレッシング材料を前記組織から除去するための剥離溶媒と
を含むキット。 - 前記組織から前記組織ドレッシング材料を除去するための前記剥離溶媒は、水性剥離溶媒であることを特徴とする、請求項1に記載のキット。
- 前記組織から前記組織ドレッシング材料を除去するための前記剥離溶媒は、酸性であることを特徴とする、請求項2に記載のキット。
- 前記患者の前記組織と接触して適用されるための前記組織ドレッシング材料は、固体またはゲル状であることを特徴とする、請求項1〜請求項3のいずれかに記載のキット。
- 前記患者の前記組織と接触して適用されるための前記組織ドレッシング材料は、水溶性であることを特徴とする、請求項4に記載のキット。
- 前記患者の前記組織と接触して適用されるための前記組織ドレッシング材料の主要成分は、ポリマー塩であることを特徴とする、請求項4または請求項5に記載のキット。
- 前記患者の前記組織と接触して適用されるための前記組織ドレッシング材料は、液体であることを特徴とする、請求項1〜請求項3のいずれかに記載のキット。
- 前記キットは、前記固体またはゲル状組織ドレッシング材料および前記剥離溶媒に加えて液体組織ドレッシング材料を含むことを特徴とする、請求項4〜請求項7のいずれかに記載のキット。
- 前記液体組織ドレッシング材料は、水溶液であることを特徴とする、請求項7または請求項8に記載のキット。
- 前記患者の前記組織上に前記液体組織ドレッシング材料を噴霧するためのスプレー装置をさらに含むことを特徴とする、請求項7〜請求項9のいずれかに記載のキット。
- 前記組織ドレッシング材料は、前記組織ドレッシング材が適用される前記組織の部位でのpHを視覚的に示すpH感受性色素を含むことを特徴とする、請求項1〜請求項10のいずれかに記載のキット。
- 前記組織ドレッシング材料は、前記組織に適用される時点で透明であることを特徴とする、請求項1〜請求項11のいずれかに記載のキット。
- 患者の組織を治療する方法であって、
液体組織ドレッシング材料または水溶性固体もしくは水溶性ゲル状組織ドレッシング材料を前記患者の組織と接触して適用する工程と、
前記組織ドレッシング材料を前記組織から除去するために前記組織ドレッシング材料へ酸性剥離溶媒を適用する工程と
を含む方法。 - 前記組織ドレッシング材料は、前記剥離溶媒の適用前には水溶性組織ドレッシング材料
を含み、前記水溶性組織ドレッシング材料は中性pHでは水に不溶性である形態へ転換させられることを特徴とする、請求項13に記載の方法。 - 患者の組織を治療する方法であって、
水溶性固体もしくは水溶性ゲル状組織ドレッシング材料を前記患者の組織と接触して適用する工程と、
前記水溶性組織ドレッシング材料を中性pHでは非水溶性である形態に転換させる工程と
を含む方法。
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