JP2015145349A - 口腔用組成物及び酸化ストレス抑制剤 - Google Patents

Abstract

【課題】アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩の酸化ストレス抑制効果が向上し、歯肉等の生体組織が酸化ストレスによって傷害するのを抑制する効果が優れる口腔用組成物及び酸化ストレス抑制剤を提供する。
【解決手段】（Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）シクロデキストリンとを含有してなることを特徴とする口腔用組成物、及び上記（Ａ）成分と（Ｂ）成分とからなる口腔用酸化ストレス抑制剤。
【選択図】なし

Description

本発明は、アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩の酸化ストレス抑制効果が向上し、歯肉等の生体組織が酸化ストレスによって傷害するのを抑制する効果が優れる口腔用組成物及び酸化ストレス抑制剤に関する。

歯周病は、進行過程において酵素や炎症性メディエーター、活性酸素などが組織を傷害して進行していくことが知られており、歯周病予防には、前記のような細胞傷害性因子をブロックすることが重要である。

アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩は、生体内に産生された過剰な活性酸素を消去して生体組織を酸化ストレスから保護する抗酸化作用を有する化合物として知られているが、その抗酸化作用は十分ではなかった。

アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩の抗酸化作用を向上させることにより、細胞傷害性を軽減させ、歯周病抑制に効果的に働くことが期待される。
特許文献１（特開２０１３−１２９６０１号公報）には、アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩、カチオン性高分子物質、イソプロピルメチルフェノール及び／又はトリクロサン、特定の非イオン性界面活性剤を組み合わせることで酸化ストレス抑制効果が改善した歯磨剤組成物、特許文献２（特開２０１２−１８０３３０号公報）には、アスコルビン酸リン酸エステル塩にアラビトールを併用することで、歯肉繊維芽細胞の活性酸素傷害抑制効果が増強した口腔用組成物が、提案されている。

一方、口腔用組成物の配合成分としてシクロデキストリンは公知である。特許文献３（特開２０１３−１２９６４１号公報）には、シクロデキストリンとポリグルタミン酸塩とを含む口臭抑制効果が優れる口腔用組成物、特許文献４（特開２０１１−６８６０７号公報）には、多価アルコールを含有する口腔用組成物にシクロデキストリンを特定量配合すると香味を改善できることが提案されている。また、特許文献５（特開２００７−１６９２２８号公報）は、特定のシクロデキストリンが口臭抑制や歯周病組織の炎症抑制に有効であることを提案している。しかし、アスコルビン酸リン酸エステルの酸化ストレス抑制へのシクロデキストリンの関与については何ら言及されていない。

特開２０１３−１２９６０１号公報 特開２０１２−１８０３３０号公報 特開２０１３−１２９６４１号公報 特開２０１１−６８６０７号公報 特開２００７−１６９２２８号公報

このようにアスコルビン酸リン酸エステル又はその塩の抗酸化作用の改善に関する技術は種々提案されているが、新たな抗酸化作用の改善技術が望まれる。

本発明は上記事情に鑑みなされたもので、アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩の酸化ストレス抑制効果が向上し、歯肉等の生体組織が酸化ストレスによって傷害するのを抑制する効果が優れる口腔用組成物及び酸化ストレス抑制剤を提供することを目的とする。

本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討を行った結果、（Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）シクロデキストリンとを併用すると、アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩の酸化ストレス抑制効果が向上し、歯肉等の生体組織が酸化ストレスによって傷害するのを抑制する効果が優れることを知見した。

歯肉を構成する線維芽細胞が活性酸素によって傷害を受けると、コラーゲン繊維の破壊や細胞増殖機能低下を招くため、歯肉が退縮して歯周病が進行する。このような中、アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩は、生体内に産生された過剰な活性酸素を消去して生体組織を酸化ストレスから保護する作用を有する。しかし、後述の比較例に示すように、アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩単独での酸化ストレス抑制効果は十分ではないものであり、また、シクロデキストリン単独では酸化ストレスを抑制できない。これらのことから、シクロデキストリンを組み合わせてもアスコルビン酸リン酸エステル又はその塩の酸化ストレス抑制効果が改善するとは到底考えられないにもかかわらず、実施例に示すように、本発明においては、アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩にシクロデキストリンを組み合わせると、酸化ストレス抑制効果が特異的かつ顕著に増強し、酸化ストレス傷害を抑制する効果が格段に優れる。

更に、本発明においては、（Ａ）成分がアスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウムであることが、より好ましい。また、（Ａ）成分と（Ｂ）成分との配合割合は、（Ａ）／（Ｂ）が質量比として０．１〜２０であることがより好ましい。

従って、本発明は下記の口腔用組成物及び酸化ストレス抑制剤を提供する。
〔１〕
（Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）シクロデキストリンとを含有してなることを特徴とする口腔用組成物。
〔２〕
（Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）シクロデキストリンとからなる口腔用酸化ストレス抑制剤。

本発明によれば、アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩の酸化ストレス抑制効果が向上し、歯肉等の生体組織が酸化ストレスによって傷害するのを抑制する効果が優れる口腔用組成物及び酸化ストレス抑制剤を提供できる。この口腔用組成物、酸化ストレス抑制剤は、歯周病の予防又は抑制に有効に利用できる。

以下、本発明につき更に詳述する。本発明は、（Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）シクロデキストリンとを併用することを特徴とする。

（Ａ）成分のアスコルビン酸リン酸エステルは、アスコルビン酸の２，３，５，６位のいずれかの水酸基の１つ又は２つ以上がリン酸、ポリリン酸等の化合物のエステルとなったものであり、特にアスコルビン酸の２位又は３位の水酸基がリン酸エステル化された誘導体が、安定性の点でより好ましい。
アスコルビン酸リン酸エステルとしては、例えばアスコルビン酸−２−リン酸エステル、アスコルビン酸−３−リン酸エステル、アスコルビン酸−６−リン酸エステル、アスコルビン酸−２−ポリリン酸エステル等が挙げられる。また、その塩類としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩が挙げられるが、特にマグネシウム塩、ナトリウム塩が好ましく、より好ましくはマグネシウム塩である。

（Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩としては、中でも、口腔用として好適なアスコルビン酸−２−リン酸エステルのマグネシウム塩又はナトリウム塩が好ましく、とりわけ安定性がよいアスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウムが好ましい。

（Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩の配合量は、組成物全体の０．１〜２％（質量％、以下同様。）が好ましく、より好ましくは０．２〜２％、さらに好ましくは０．３〜２％である。配合量が多いほど酸化ストレス抑制効果が優れ、０．１％以上配合すると酸化ストレス抑制効果が十分に発現する。２％以下であることが、製剤の変色や味の低下を抑えるには好適である。また、入手し易く経済的な面でも好ましい。

（Ｂ）シクロデキストリンとしては、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリンがあるが、水への溶解性の点で、より好ましくはα−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリンである。

（Ｂ）シクロデキストリンの配合量は、組成物全体の０．１〜１％が好ましく、より好ましくは０．２〜１％である。０．１％以上配合すると酸化ストレス抑制効果が十分に発現し、１％以下であることが、酸化ストレス抑制効果の低下を抑えるには好適である。

本発明において、（Ａ）成分と（Ｂ）成分との配合割合は、（Ａ）／（Ｂ）が質量比として０．１〜２０であることが好ましく、より好ましくは０．２〜２０、さらに好ましくは０．３〜２０である。この比率範囲内で酸化ストレス抑制効果が優れる。０．１未満であると酸化ストレス抑制効果が向上しない。２０を超えると、製剤変色が生じ使用に適さなくなる。

本発明の口腔用組成物は、液体、液状、ペースト状などの形態に調製し、練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、潤製歯磨等の歯磨剤、洗口剤などに調製できるが、特に歯磨剤、とりわけ練歯磨剤として好適である。
この場合、本発明組成物は、上記成分に加えて、本発明の効果を妨げない範囲で公知成分を適宜配合できる。具体的に、歯磨剤には、例えば研磨剤、粘結剤、粘稠剤、界面活性剤、甘味剤、防腐剤、着色剤、香料、有効成分、水等の溶媒、ｐＨ調整剤などを配合し得る。洗口剤には、湿潤剤、界面活性剤、水等の溶剤、緩衝剤、防腐剤、殺菌剤、香料、甘味剤、色素、有効成分などを配合し得る。

研磨剤としては、結晶性シリカ、非晶性シリカ、シリカゲル、アルミノシリケート等のシリカ系研磨剤、リン酸水素カルシウム系研磨剤、炭酸カルシウム、水酸化アルミニウム、アルミナ、合成樹脂系研磨剤等が挙げられる。研磨剤の配合量は、通常、歯磨剤では２〜４０％、特に５〜２０％が好ましい。なお、洗口剤には通常、研磨剤は配合されない。

粘結剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース系粘結剤、カラギーナン、キサンタンガム、アラビアガム等のガム類、アルギン酸ナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム等の有機粘結剤、ゲル化性シリカ、ゲル化性アルミニウムシリカ等の無機粘結剤が挙げられる。これら粘結剤の配合量は、通常、０．０１〜１０％である。

粘稠剤（湿潤剤）としては、例えば、ソルビトール、キシリトール等の糖アルコール、プロピレングリコール、グリセリン、ポリエチレングリコール等の多価アルコールなどが挙げられる。これらの配合量は、通常、１０〜６０％である。

界面活性剤としては、アニオン界面活性剤、ノニオン界面活性剤、両性界面活性剤等を配合できる。なお、歯磨剤には、ラウリル硫酸ナトリウム等のアニオン界面活性剤が好適に配合される。
アニオン界面活性剤としては、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩、α−オレフィンスルホン酸塩、Ｎ−アシルスルホン酸塩、グリセリン脂肪酸エステルの硫酸塩などが挙げられる。
ノニオン界面活性剤としては、例えば、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、グリセリンエステルのポリオキシエチレンエーテル、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロック共重合体、アルキロールアミドなどが挙げられる。両性界面活性剤としては、アルキルジメチルアミノ酢酸ベタイン、脂肪酸アミドプロピルジメチルアミノ酢酸ベタインなどの酢酸ベタイン型、Ｎ−脂肪酸アシル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルエチレンジアミン塩等のイミダゾリン型が挙げられる。
界面活性剤は、１種又は２種以上を使用でき、配合量は、通常、０〜１０％、特に０．０１〜５％である。

甘味剤としては、サッカリンナトリウム、ステビオサイド等が挙げられる。
防腐剤としては、安息香酸ナトリウム、メチルパラベン、エチルパラベン、ブチルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル等が挙げられる。
着色剤としては、赤色２号、３号、青色１号、酸化チタン等が挙げられる。

香料としては、ペパーミント油、スペアミント油、アニス油、ユーカリ油、ウィンターグリーン油、カシア油、クローブ油、タイム油、セージ油、レモン油、オレンジ油、ハッカ油、カルダモン油、コリアンダー油、マンダリン油、ライム油、ラベンダー油、ローズマリー油、ローレル油、カモミル油、キャラウェイ油、マジョラム油、ベイ油、レモングラス油、オリガナム油、パインニードル油、ネロリ油、ローズ油、ジャスミン油、グレープフルーツ油、スウィーティー油、柚油、イリスコンクリート、アブソリュートペパーミント、アブソリュートローズ、オレンジフラワー等の天然香料、及び、これら天然香料の加工処理（前溜部カット、後溜部カット、分留、液液抽出、エッセンス化、粉末香料化等）した香料、及び、ｌ−メントール、カルボン、アネトール、シネオール、サリチル酸メチル、シンナミックアルデヒド、オイゲノール、３−ｌ−メントキシプロパン−１，２−ジオール、チモール、リナロール、リナリールアセテート、リモネン、メントン、メンチルアセテート、Ｎ−置換−パラメンタン−３−カルボキサミド、ピネン、オクチルアルデヒド、シトラール、プレゴン、カルビールアセテート、アニスアルデヒド、エチルアセテート、エチルブチレート、アリルシクロヘキサンプロピオネート、メチルアンスラニレート、エチルメチルフェニルグリシデート、バニリン、ウンデカラクトン、ヘキサナール、ブタノール、イソアミルアルコール、ヘキセノール、ジメチルサルファイド、シクロテン、フルフラール、トリメチルピラジン、エチルラクテート、エチルチオアセテート等の単品香料、更に、ストロベリーフレーバー、アップルフレーバー、バナナフレーバー、パイナップルフレーバー、グレープフレーバー、マンゴーフレーバー、バターフレーバー、ミルクフレーバー、フルーツミックスフレーバー、トロピカルフルーツフレーバー等の調合香料等、口腔用組成物に用いられる公知の香料素材を組み合わせて使用できる。
香料の配合量は特に限定されないが、上記の香料素材は、組成物中に０．０００００１〜１％使用するのが好ましい。また、上記香料素材を使用した口腔用組成物用香料としては、組成物中に０．１〜２．０％使用するのが好ましい。

有効成分（薬用成分）としては、イソプロピルメチルフェノール、トリクロサン、塩化セチルピリジニウム等の非イオン性やカチオン性の殺菌剤や抗菌剤、トラネキサム酸、グリチルリチン２カリウム塩等の抗炎症剤、デキストラナーゼ、ムタナーゼ等の酵素剤、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム等のフッ素含有化合物、アスコルビン酸、乳酸アルミニウム、硝酸カリウム等の知覚過敏抑制剤、縮合リン酸塩、歯石予防剤、グリチルリチン酸及びその塩類、塩化ナトリウムなどを、薬剤学的に許容できる範囲で使用することができる。

ｐＨ調整剤としては、クエン酸、リン酸、リンゴ酸やこれらの塩類、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム等の酸やアルカリ、緩衝剤を適量配合し得る。
なお、これら任意成分は本発明の効果を損なわない範囲で通常量で配合できる。

また、本発明は、（Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）シクロデキストリンとからなる酸化ストレス抑制剤を提供する。この酸化ストレス抑制剤は、口腔用として好適に使用し得る。
なお、配合成分やその配合量、比率等の詳細はいずれも上記と同様である。

以下、実施例及び比較例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。なお、下記の例において％は特に断らない限りいずれも質量％を示す。

［実施例、比較例］
表１、２に示す組成の歯磨剤組成物を常法により調製し、下記方法で評価した。結果を表に併記する。

酸化ストレス抑制効果の評価方法
調製した歯磨剤組成物１０ｇを量り取り、人口唾液（３０ｍＬ）を加え撹拌した後、遠心（１０，０００ｒｐｍ、２０ｍｉｎ．）し、得られた上清を試料溶液とした。
次に、市販の歯肉線維芽細胞Ｇｉｎ−１（ＤＳファーマバイオメディカル社製）を１０％牛胎児血清（ＦＢＳ）含有Ｄｕｌｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ（Ｄ−ＭＥＭ）中で、３７℃、５％ＣＯ₂の条件下で前培養した。５×１０⁴ｃｅｌｌｓ／ｍＬに調製したＧｉｎ−１を４８ウェルプレートに４００μＬ播種し、更に２４時間培養した。培養液を除去後、調製した試料溶液をそれぞれ４００μＬ添加（１０％ＦＢＳ含有Ｄ−ＭＥＭで５０倍希釈）して１２時間、薬剤処置した。処置終了後、試料溶液を除去し、１ｍＭの過酸化水素を含む溶液（１０％ＦＢＳ含有Ｄ−ＭＥＭ）を４００μＬ添加し、６０分間処置した。溶液を除去後、細胞活性試薬（Ｃａｌｃｅｉｎ ＡＭ；インビトロジェン社製）を２００μＬ添加し、３７℃、５％ＣＯ₂条件下で３０分間インキュベートした。
その後、プレートリーダー（Ｆｌｕｏｒｏｓｋａｎ Ａｓｃｅｎｔ；Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ社製）を用いて、Ｅｘ／Ｅｍ＝４８５ｎｍ／５３８ｎｍの条件下で蛍光強度を測定した。下記式から算出した結果を酸化ストレス抑制率とした。

酸化ストレス抑制評価はｎ＝１０で実施し、平均値を算出し、下記の評点で評価した。
評点；
酸化ストレス抑制率
◎：７０％以上
○：５０％以上７０％未満
△：３０％以上５０％未満
×：３０％未満

下記に処方例を示す。
［処方例］ 洗口液
（Ａ）アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム ０．３％
（Ｂ）α−シクロデキストリン ０．３
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０） ０．５
プロピレングリコール ３
グリセリン ４．５
キシリトール ３
エタノール ２
クエン酸 ０．０７
クエン酸ナトリウム ０．２５
サッカリンナトリウム ０．００４
香料 ０．２
精製水 バランス
合計 １００．０％
（Ａ）／（Ｂ） 質量比 １

Claims (6)

1. （Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）シクロデキストリンとを含有してなることを特徴とする口腔用組成物。
2. （Ａ）成分のアスコルビン酸リン酸エステル又はその塩が、アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウムである請求項１記載の口腔用組成物。
3. （Ａ）成分を０．１〜２質量％、（Ｂ）成分を０．１〜１質量％含有する請求項１又は２記載の口腔用組成物。
4. （Ａ）／（Ｂ）が、質量比として０．１〜２０である請求項１、２又は３記載の口腔用組成物。
5. （Ａ）アスコルビン酸リン酸エステル又はその塩と、（Ｂ）シクロデキストリンとからなる口腔用酸化ストレス抑制剤。
6. （Ａ）／（Ｂ）が、質量比として０．１〜２０である請求項５記載の口腔用酸化ストレス抑制剤。