JP2015084058A - 顕微鏡撮像装置、顕微鏡撮像方法および顕微鏡撮像プログラム - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の一実施の形態に係る顕微鏡撮像装置について説明する。本実施の形態に係る顕微鏡撮像装置においては、測定対象物の蛍光観察を行うことが可能である。また、その顕微鏡撮像装置においては、測定対象物を透過する光を用いた明視野観察、暗視野観察、位相差観察、微分干渉観察、偏斜観察および偏光観察を行うことが可能である。以下の説明では、測定対象物を透過する光を用いた明視野観察、暗視野観察、位相差観察、微分干渉観察、偏斜観察および偏光観察を透過観察と総称する。
図4は、図1の顕微鏡撮像装置500の制御系を示すブロック図である。測定部100においては、制御基板170は、PC200から与えられる指令に応答してパターン付与部110、受光部120、透過光供給部130、ステージ駆動装置141、フィルタユニット150、レンズユニット160の動作を制御する。また、制御基板170は、上記のようにカメラ121(図3)から出力される受光信号に基づくデジタル信号をPC200に転送する。さらに、制御基板170は、PC200からの指令に応答して測定光供給部300の電源装置310および投光部320の動作を制御する。
(a)空間的パターンの付与
図6は、測定対象物Sに測定光が照射される場合に測定対象物Sから放出される蛍光を表す模式図である。図6に示すように、対物レンズ161の焦点に測定対象物Sの観察対象部分sp1が配置される場合、対物レンズ161を通過する測定光は点線で示すように測定対象物Sの観察対象部分sp1に向かって集光される。それにより、測定対象物Sの観察対象部分sp1に蛍光試薬が存在すると、その観察対象部分sp1から蛍光が放出される。蛍光の一部が太い矢印で示すように対物レンズ161を通して受光部120(図3)に入射する。
パターン付与部110の光変調素子112は、上記のように測定光に空間的なパターンを付与することに加えて、測定光に時間的なパターンを付与することができる。そのため、光変調素子112は、測定光の導光と遮光とを切り替える遮光素子として機能するとともに、表示部400に表示される画像の明るさを調整する調光素子として機能する。
図3のパターン付与部110の内部筐体10について説明する。図13は、パターン付与部110の外観斜視図である。図13では、内部筐体10の一部を切り欠いた状態が示される。
図14は、測定対象物S、対物レンズ161およびフィルタキューブ151の交換作業時の測定部100の状態を示す外観斜視図である。図14(a)に示すように、測定部100の外部筐体101には上部開口OP1が形成されている。外部筐体101の上面部101eの一部に、ヒンジ102H(図2)を介して上部開口OP1を開閉可能な上面蓋102が取り付けられている。
図2の透過光供給部130から出射された透過光が測定対象物Sを透過して受光部120により受光されることにより、測定対象物Sの画像データが生成される。以下、透過光を用いて生成される測定対象物Sの画像データを透過画像データと呼ぶ。透過画像データに基づく画像を透過画像と呼ぶ。
図15の設定表示領域420には、例えば、フィルタ選択欄430、測定条件設定欄440、撮影解析欄450および撮影種別選択欄490が表示される。また、設定表示領域420には、複数のタブが表示される。複数のタブは、焦点位置調整タブ470を含む。使用者は、図4のPC200の操作部250を用いて表示部400に表示されたGUI(Graphical User Interface)を操作することにより、図4のCPU210および制御基板170に各種指令を与えることができる。
本実施の形態に係る顕微鏡撮像装置500においては、セクショニング観察と通常観察とが切り替え可能である。セクショニング観察時には、投光部320により出射された光からパターン測定光が光変調素子112により生成され、通常観察時には、投光部320により出射された光から均一な測定光が光変調素子112により生成される。
(a)第1の変形例
内部筐体10内には、光変調素子112に加えて、他の光学部材が設けられてもよい。また、導光部品支持ケース11内には、2つのミラー113に加えてまたは2つのミラー113に代えて、他の光学部材が設けられてもよい。図20は、第1の変形例に係る顕微鏡撮像装置500の構成を示すブロック図である。
以下、請求項の各構成要素と実施の形態の各部との対応の例について説明するが、本発明は下記の例に限定されない。
10a 出射開口
10b 入射開口
11 導光部品支持ケース
12 投光レンズ
21,101a 前面部
22,101b 背面部
23,101c 一側面部
24,101d 他側面部
25,101e 上面部
26 下面部
91 ベースフレーム
92 ステージフレーム
93 アッパーフレーム
100 測定部
101 外部筐体
102 上面蓋
102H,103H ヒンジ
103 前面蓋
106 支柱
107 台座
110 パターン付与部
111,324 光コネクタ
112 光変調素子
113,134 ミラー
114,115,325 光学部材
120 受光部
121 カメラ
122 カラーフィルタ
123 結像レンズ
130 透過光供給部
130A 固定部
130B 揺動部
131 透過光源
132 絞り調整部
133 透過光学系
135 コンデンサレンズ
140 ステージ
141 ステージ駆動装置
150 フィルタユニット
151 フィルタキューブ
151a フレーム
151b 励起フィルタ
151c ダイクロイックミラー
151d 吸収フィルタ
152 フィルタターレット
153 フィルタターレット駆動部
160 レンズユニット
161 対物レンズ
162 レンズターレット
163 焦点距離調整機構
163p レンズ支持板
164 レンズターレット駆動部
165 焦点距離調整駆動部
170,350 制御基板
200 PC
210 CPU
211 画像データ生成部
212 パターン生成部
213 制御部
220 ROM
230 RAM
240 記憶装置
250 操作部
300 測定光供給部
301 筐体
309 開口
310 電源装置
320 投光部
321,321A,321B 測定光源
322 減光機構
323 遮光機構
326 ハーフミラー
330 導光部材
340 排熱装置
400 表示部
410 画像表示領域
420 設定表示領域
430 フィルタ選択欄
431〜434 フィルタ選択ボタン
440 測定条件設定欄
441 セクショニング観察ボタン
442 通常観察ボタン
450 撮影解析欄
451 シングル撮影ボタン
452 マルチ撮影ボタン
453 解析ボタン
470 焦点位置調整タブ
471 対物レンズ選択欄
471a〜471f 対物レンズ選択ボタン
472 焦点位置調整欄
472a 焦点位置調整バー
472b 初期距離ボタン
472c オートフォーカスボタン
473 ステージ位置調整欄
473a〜473d ステージ移動ボタン
473e 初期位置ボタン
490 撮影種別選択欄
491 Zスタック撮影ボタン
492 連結撮影ボタン
493 全焦点撮影ボタン
500 顕微鏡撮像装置
cp1 離間位置
DF 被写界深度
L0〜L2 矢印
np1 正規位置
OA 観察軸
OP1 上部開口
OP2 前部開口
S 測定対象物
s1 揺動部検出器
s2 前面蓋検出器
sp1 観察対象部分
sp2,sp3 部分
WR1,WR2 配線
Claims (12)
- 光を出射する第1の投光部と、
前記第1の投光部により出射された光からパターンを有する第1の測定光およびパターンを有しない第2の測定光を選択的に生成するように構成された光変調素子と、
前記光変調素子により生成された第1および第2の測定光を共通の光路を通して測定対象物に照射する第1の投光光学系と、
測定対象物からの光を受光し、受光量を示す受光信号を出力する受光部と、
前記受光部から出力される受光信号に基づいて画像データを生成する画像データ生成部と、
空間的な位相を所定量ずつ順次移動させつつ測定対象物に照射すべきパターンを生成するパターン生成部と、
第1の測定光を用いて測定対象物を観察する第1の観察モードと第2の測定光を用いて測定対象物を観察する第2の観察モードとを切り替えるための指示部と、
第1の観察モード時に、前記パターン生成部により生成されたパターンに基づいて前記光変調素子を制御し、前記パターンの複数の位相で生成される複数の画像データに基づいて測定対象物の画像を示すセクショニング画像データを生成するように前記画像データ生成部を制御し、第2の観察モード時に、測定対象物の画像を示す通常画像データを生成するように前記画像データ生成部を制御する制御部とを備える、顕微鏡撮像装置。 - 前記光変調素子は、前記第1の投光光学系へ第1または第2の測定光を導く導光状態と前記第1の投光光学系へ第1および第2の測定光を導かない遮光状態とを有し、
前記制御部は、前記光変調素子の導光状態および遮光状態を制御する、請求項1記載の顕微鏡撮像装置。 - 前記指示部は、観察領域を指示するように構成され、
前記制御部は、第1または第2の測定光が前記指示部により指示された観察領域に照射されかつ第1および第2の測定光が観察領域以外の領域に照射されないように前記光変調素子の複数の部分の各々について導光状態および遮光状態を制御する、請求項2記載の顕微鏡撮像装置。 - 前記制御部は、前記受光部の受光期間における前記光変調素子の導光状態の期間と遮光状態の期間との比を制御する、請求項2または3記載の顕微鏡撮像装置。
- 前記制御部は、前記光変調素子の複数の部分の各々について導光状態の期間と遮光状態の期間との比を制御する、請求項4記載の顕微鏡撮像装置。
- 前記第1の投光部から前記光変調素子へ光を導く導光状態と前記第1の投光部から前記光変調素子へ光を導かない遮光状態とを有する遮光機構をさらに備え、
前記制御部は、前記遮光機構の導光状態および遮光状態を制御する、請求項2〜5のいずれか一項に記載の顕微鏡撮像装置。 - 前記制御部は、前記光変調素子が遮光状態である場合において、一定時間が経過したときに前記遮光機構を遮光状態に制御する、請求項6記載の顕微鏡撮像装置。
- 前記遮光機構は、メカニカルシャッタを含み、前記第1の投光部から前記光変調素子への光路上に配置される、請求項6または7記載の顕微鏡撮像装置。
- 前記遮光機構は、スイッチング機構を含み、前記第1の投光部への電力の供給を停止させる、請求項6または7記載の顕微鏡撮像装置。
- 第3の測定光を出射する第2の投光部と、
前記第2の投光部により出射された第3の測定光を測定対象物に照射する第2の投光光学系とをさらに備え、
前記指示部は、第1または第2の観察モードと第3の測定光を用いて測定対象物を観察する第3の観察モードとをさらに切り替えるために構成され、
前記制御部は、第3の観察モード時に、前記遮光機構を遮光状態に制御するとともに、測定対象物の画像を示す透過画像データを生成するように前記画像データ生成部を制御する、請求項6〜9のいずれか一項に記載の顕微鏡撮像装置。 - パターンを有する第1の測定光を用いて測定対象物を観察する第1の観察モードとパターンを有しない第2の測定光を用いて測定対象物を観察する第2の観察モードとを切り替えるための指示を受け付けるステップと、
第1の投光部により光を出射するステップと、
第1の観察モード時に、前記第1の投光部により出射された光から第1の測定光を光変調素子により生成し、第2の観察モード時に、前記第1の投光部により出射された光から第2の測定光を前記光変調素子により生成するステップと、
第1の観察モード時に、前記光変調素子により生成された第1の測定光を第1の投光光学系により測定対象物に照射し、第2の観察モード時に、前記光変調素子により生成された第2の測定光を第1の投光光学系により測定対象物に照射するステップと、
第1の観察モード時に、生成されたパターンの空間的な位相を前記光変調素子により所定量ずつ測定対象物上で順次移動させるステップと、
受光部により測定対象物からの光を受光し、受光量を示す受光信号を出力するステップと、
第1の観察モード時に、前記受光部から出力される受光信号に基づいて前記パターンの複数の位相で生成される複数の画像データに基づいて測定対象物の画像を示すセクショニング画像データを生成し、第2の観察モード時に、前記受光部から出力される受光信号に基づいて測定対象物の画像を示す通常画像データを生成するステップとを含み、
前記光変調素子により生成された第1および第2の測定光は、共通の光路を通して前記第1の投光光学系により測定対象物に照射される、顕微鏡撮像方法。 - 処理装置により実行可能な顕微鏡撮像プログラムであって、
パターンを有する第1の測定光を用いて測定対象物を観察する第1の観察モードとパターンを有しない第2の測定光を用いて測定対象物を観察する第2の観察モードとを切り替えるための指示を受け付ける処理と、
第1の投光部により光を出射する処理と、
第1の観察モード時に、前記第1の投光部により出射された光から第1の測定光を光変調素子により生成し、第2の観察モード時に、前記第1の投光部により出射された光から第2の測定光を前記光変調素子により生成する処理と、
第1の観察モード時に、前記光変調素子により生成された第1の測定光を第1の投光光学系により測定対象物に照射し、第2の観察モード時に、前記光変調素子により生成された第2の測定光を第1の投光光学系により測定対象物に照射する処理と、
第1の観察モード時に、生成されたパターンの空間的な位相を前記光変調素子により所定量ずつ測定対象物上で順次移動させる処理と、
受光部により測定対象物からの光を受光し、受光量を示す受光信号を出力する処理と、
第1の観察モード時に、前記受光部から出力される受光信号に基づいて前記パターンの複数の位相で生成される複数の画像データに基づいて測定対象物の画像を示すセクショニング画像データを生成し、第2の観察モード時に、前記受光部から出力される受光信号に基づいて測定対象物の画像を示す通常画像データを生成する処理とを、
前記処理装置に実行させ、
前記光変調素子により生成された第1および第2の測定光は、共通の光路を通して前記第1の投光光学系により測定対象物に照射される、顕微鏡撮像プログラム。
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