JP2015057611A - 急性脳卒中または一過性脳虚血発作を有する患者における細菌感染の診断のためのプロカルシトニン及び抗生物質治療のガイダンス - Google Patents
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Abstract
Description
我々の社会では、脳卒中の発生率は年齢の増加とともに顕著に増加する(Modan 及び Wagener, 1992. Stroke 23:1230-36)。大抵の虚血性脳卒中は年齢71〜80歳で生じ、一方大抵の出血性脳卒中は60〜70歳で見られる(Colombo 等, 1989. Rivista de Neurologia 59: 1-7)。
(i)急性脳卒中または一過性脳虚血発作に罹患した患者からのサンプルを提供すること;
(ii)0.06ng/mL未満、より好適には0.04ng/mL以下、さらに好適には0.03ng/mL以下、最も好適には0.01ng/mL以下の機能分析感度でのPCT検出アッセイを使用して、上記サンプルで、プロカルシトニン(PCT)或いは少なくとも12アミノ酸長、より好適には50以上のアミノ酸長、さらに好適には110以上のアミノ酸長であるこのフラグメントのレベルを測定すること;並びに
(iii)上記の測定されたPCTレベルを所定の閾値レベルと比較することによって、上記患者が細菌に感染しているか否かを決定すること、を含んでなる。
本発明は、急性脳卒中または一過性脳虚血発作(TIA)に罹患した患者における細菌感染を診断または同定するための方法、特にインビトロ(in vitro)での方法に関する。当該方法は、次のステップ:
(i)急性脳卒中または一過性脳虚血発作に罹患した患者からのサンプルを提供すること;
(ii)0.06ng/mL未満、好適には0.04ng/mL以下、より好適には0.03ng/mL以下、最も好適には0.01ng/mL以下の機能分析感度でのPCT検出アッセイを使用して、上記サンプルで、プロカルシトニン(PCT)或いは少なくとも12アミノ酸長、より好適には50以上のアミノ酸長、さらに好適には110以上のアミノ酸長であるこのフラグメントのレベルを測定すること;並びに
(iii)上記の測定されたPCTレベルを所定の閾値レベルと比較することによって、上記患者が細菌に感染しているか否かを決定すること、を含んでなる。
(i)急性脳卒中または一過性脳虚血発作に罹患した患者からのサンプルを提供するステップであって、当該サンプルが急性脳卒中または一過性脳虚血発作の症状の発生後72時間以内に当該患者から採取されたものであるステップ;
(ii)0.06ng/mL未満の機能分析感度でのPCT検出アッセイを使用して、上記サンプル中のプロカルシトニン(PCT)または少なくとも12アミノ酸長であるこのフラグメントのレベルを測定するステップ;並びに
(iii)上記の測定されたPCTレベルを所定の閾値レベルと比較することによって、上記患者が細菌に感染しているか否かを決定するステップ、を含んでなる方法である。
研究はバーゼルの大学病院の救急並びに神経系及び脳神経外科クリニックで実施した。本研究には、直前3日間内に症状の発生のあり、世界保健機関の基準に従って虚血性または出血性の脳卒中或いは一過性脳虚血発作(TIA)で救急科へ入院した全継続患者が含まれた。インフォームドコンセントのない患者は排除した。
a)年齢、
b)性別、
c)肥満度指数(BMI)、
d)病歴項目:入院に先行した実際の病歴;一過性脳虚血発作を有する患者でのABCDスコア(Rothwell 等. 2005. Lancet 366: 29-36);家族歴;チャールソンインデックスによってもまた評価した関連のある合併症(Goldstein 等. 2004. Stroke 35: 1941-5)(例えば高血圧、以前の脳卒中、以前のTIA、虚血性の心疾患、心房細動、糖尿病、腎臓及び肝臓機能不全、うっ血性心不全、脂質異常症;低ナトリウム血症のリスクを有する合併症(重度の甲状腺機能低下症、グルココルチコイド不全、腫瘍、HIV感染);喫煙歴(煙草の箱年数)及び状況(一日の箱数);現在の投薬;飲酒量(一日のグラス及びグラム);症状の発生から入院までの時間。
ステップ1.救急科または神経性病棟の適格な全患者を当該研究に加えた。
ステップ2.全基本データを収集した。
ステップ3.入院の間、退院までの体重、血圧、脈拍数、ボリューム状態及び体温を含む臨床項目をカルテ審査によって評価した。
・液体治療及び薬剤
・低ナトリウム血症の潜在的症状、すなわち頭痛、吐き気、嘔吐、筋けいれん及び痛み、食欲不振、意識障害、発作。
・血液サンプリングが病棟で通常行われる時点に、日常的に実施される臨床検査(ケモグラム(chemogramm)、血漿グルコース、血清浸透圧、尿浸透圧、尿中ナトリウム、ヘマトクリット)をサンプリングした。
ステップ4.全患者で、入院の5日目に、NIHSS、バーセルインデックス及びランキングスケールでの臨床検査を実施した(Collin 等. 1988. International Disability Study 10: 61-3; Bonita 及び Beaglehole. 1988. Stroke 19: 1497-1500)。
ステップ5.虚血性脳卒中患者において3月後に、(バーセルインデックス及びランキングスケールによって評価されるように)病的状態及び死亡率に関して電話により経過観察を得た。好ましくない予後がバーセルインデックス<85または3〜6の修正ランキングスケールとして確定された。
モーゲンターラー等によって記載されるように機能分析感度0.007ng/mLを有する超高感度市販の試験システムを使用してPCTを測定した(Morgenthaler 等. 2002. Clin Chem 48:788-790)。簡潔に言えば、ヒツジ抗体をPCTのカルシトニンモイエティに対して産生させ、そしてマウスモノクローナル抗体をPCTのカタカルシンモイエティに対して産生させた。チューブを抗カタカルシン抗体でコーティングした。抗カルシトニン抗体をMACN アクリジニウムエステル(InVent GmbH, Hennigsdorf, Germany)で標識し、トレーサーとして供給した。標準的なウマ血清中での組み換え型PCTの希釈物を標準物質として使用した。100μLのサンプルまたは標準物質をコーティングしたチューブで30分間培養し、200μLのトレーサーを添加した。さらなる2時間の培養後、チューブを1mLのLIA洗浄液で4回洗浄し(BRAHMS AG, Hennigsdorf, Germany)、そしてLB952T ルミノメーターを使用して結合された化学発光を測定した(Berthold, Wildbad, Germany)。
(虚血性または出血性の)脳卒中或いは一過性脳虚血発作に罹患していると診断された患者の血液サンプル中で、プロカルシトニンのレベルを測定した。最初のアプローチでは、急性脳卒中またはTIAの症状の発生後最初の12時間以内に病院に入院した時に患者を分析に加えた(n=376)。入院後1日目(24〜36時)、3日目(72〜84時)及び5日目(120〜132時)に、(病院への入院時の)ベースラインでプロカルシトニンの濃度を測定した。この376人の患者のうち24人は脳卒中/TIA発生後に細菌感染症(例えば、肺炎、尿路感染)に感染した。細菌に感染している及びしていない(急性脳卒中及びTIA症状の発生後12時間以内に病院へ入院した)患者の経時的なPCT濃度を図1に示す。ロジスティック回帰分析により、PCT濃度の増加及び細菌感染の有無の間の相関が明らかとなった(入院時 (0-12h) p=0.12;1日目(24-36h) p=0.067 ; 3日目(72-84h) p=0.0042 及び5日目(120-132h) p=0.011 )。対応する感度及び特異度を測定するために、異なるカットオフ値(cut-off value)を使用した(表1)。PCTのカットオフ値の0.06ng/mLにおける、急性脳卒中/TIA症状の発生後12時間以内に入院した患者の入院時の感度及び特異度は、それぞれ9.1及び94.1%であった。このカットオフ値を2分の1の0.03ng/mLとすると、感度は2倍以上(22.7%)となり、特異度では中程度の減少(85.7%)となった。症状発生後24〜36時間内にPCTを測定した時、感度及び特異度はPCTのカットオフ値が0.06ng/mLの場合には各々28.2及び94.6%であり、一方PCTのカットオフ値が0.03ng/mLの場合には感度は33.3%まで上昇し、特異度は82.9%であった。
配列番号1(PCTのアミノ酸配列):
Claims (14)
- 急性脳卒中または一過性脳虚血発作に罹患した患者における細菌感染を診断するための方法であって、
(i)急性脳卒中または一過性脳虚血発作に罹患した患者から得られたサンプルを提供するステップであって、当該サンプルが急性脳卒中または一過性脳虚血発作の症状の発生後72時間以内に当該患者から採取されたものであるステップ;
(ii)0.06ng/mL未満の機能分析感度でのPCT検出アッセイを使用して、上記サンプル中のプロカルシトニン(PCT)または少なくとも12アミノ酸長であるこのフラグメントのレベルを測定するステップ;並びに
(iii)上記の測定されたPCTレベルを所定の閾値レベルと比較することによって、上記患者が細菌に感染しているか否かを決定するステップ、
を含んでなる、方法。 - 前記サンプルが、急性脳卒中または一過性脳虚血発作の症状の発生後48時間以内に、より好適には24時間以内に、最も好適には12時間以内に、前記患者から採取された、請求項1記載の方法。
- 前記サンプルが、体液、特に血液、血清、血漿、脳脊髄液、尿、唾液または胸水である、請求項1または2記載の方法。
- 前記急性脳卒中が、虚血性または出血性脳卒中である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- PCTの前駆物質のフラグメントのPCTのフラグメントが、少なくとも12アミノ酸残基長を有する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 前記所定の閾値レベルが、0.02ng/mL〜0.5ng/mL、より好適には0.02ng/mL〜0.25ng/mL、さらに好適には0.02ng/mL〜0.1ng/mL、さらに好適には0.02ng/mL〜0.06ng/mL、最も好適には0.02ng/mL〜0.05ng/mL(未満)である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
- 前記測定されたPCTレベルが前記所定の閾値レベル以上である場合に、前記患者は細菌に感染している、請求項1〜6のいずれか1項に記載の方法。
- 前記細菌感染が抗生物質で治療可能である、請求項1〜7のいずれか1項に記載の方法。
- 前記細菌感染が肺炎である、請求項1〜8のいずれか1項に記載の方法。
- 前記細菌感染が(細菌感染の臨床症状がない)無症候性である、請求項1〜9のいずれか1項に記載の方法。
- (iv)抗生物質を患者へ投与するステップをさらに含んでなる、請求項1〜10のいずれか1項に記載の方法。
- 少なくとも1または複数のマーカー、例えばC−反応性タンパク質(CRP)、ネオプテリン、白血球(WBC)の数、体温、好中球、赤血球沈降速度(ESR)等のレベルを測定するステップをさらに含んでなる、請求項1〜10のいずれか1項に記載の方法。
- 急性脳卒中または一過性脳虚血発作に罹患した患者への抗生物質の投与のための治療ガイダンスを提供するための、請求項1〜12のいずれか1項に記載の方法の使用。
- 急性脳卒中または一過性脳虚血発作に罹患した患者を抗生物質で治療するための、請求項1〜12のいずれか1項に記載の方法の使用。
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