JP2014041139A - 赤血球中に含まれるヘモグロビンの固有色素を利用して血液試料の赤血球指数を決定するための方法及び装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】被分析試料を静止状態に保つように構成された分析チャンバに前記試料を入れる、前記チャンバが第1のパネルの内表面と第2のパネルの内表面とにより画定され、及び前記チャンバが、前記パネルの前記内表面の間に延在する既知の、又は特定可能な高さであって、前記試料中の少なくとも1個の赤血球が前記内表面の双方に接触するような高さを有し、前記内表面に接触している少なくとも1個の赤血球を撮像して画像信号を生成するステップと、前記赤血球のうち双方の内表面と接触している部分の平均光学濃度と、赤血球の全光学濃度とを、双方とも画像ユニット毎ベースで決定するステップと、前記赤血球のうち内表面と接触している部分の前記平均光学濃度と、前記全光学濃度と、前記チャンバの高さとを用いて、前記撮像された赤血球の容積を決定するステップを含む。
【選択図】図1
Description
OD=εcL
式中、ε=ヘモグロビンのモル吸収係数、c=ヘモグロビン濃度、及びL=RBC22(すなわち、細胞内にあるヘモグロビン)を通じて進んだ距離である。モル吸収係数はヘモグロビンに固有の特性であり、実験によるか、又は現在利用可能な実験データから求めることができる。許容誤差を有する光源(例えば、設計定格波長±ある大きさを有するLED)を利用する分析機器の実施形態では、正確を期すため、最初に機器を較正してヘモグロビンのモル吸収係数を決定することが有用であり、次に光源が交換され、その時点で機器が再較正され得るまで、当該の特定の機器ではこの係数を用いることができる。
OD=εcL,c=OD/εL
RBC22の平均赤血球ヘモグロビン濃度(「MCHC」)の決定は、個々のRBCのCHCを決定するための上記と同じ方法を用いて、チャンバの双方の内表面と接触しているある数のRBCについて繰り返し、その結果を用いて平均値及び許容可能な標準偏差を決定することにより行われる。
Claims (28)
- 血液試料中の赤血球の細胞容積を決定するための方法であって、
被分析試料を静止状態に保つように構成された分析チャンバに前記試料を入れるステップであって、前記チャンバが第1のパネルの内表面と第2のパネルの内表面とにより画定され、双方のパネルとも透明であり、及び前記チャンバが、前記パネルの前記内表面の間に延在する既知の、又は特定可能な高さであって、前記試料中の少なくとも1個の赤血球が前記内表面の双方に接触するような高さを有する、ステップと、
前記内表面に接触している少なくとも1個の赤血球を撮像して画像信号を生成するステップと、
前記赤血球のうち双方の内表面と接触している部分の平均光学濃度と、赤血球の全光学濃度とを、双方とも画像ユニット毎ベースで決定するステップと、
前記赤血球のうち内表面と接触している部分の前記平均光学濃度と、前記全光学濃度と、前記チャンバの高さとを用いて、前記撮像された赤血球の容積を決定するステップと、
を含む、方法。 - 前記血液試料が実質的に無希釈である、請求項1に記載の方法。
- 前記血液試料が全血である、請求項1に記載の方法。
- 前記画像ユニットが画素である、請求項1に記載の方法。
- 血液試料中の赤血球の細胞容積を決定するための方法であって、
被分析試料を静止状態に保つように構成された分析チャンバに前記血液試料を入れるステップであって、前記チャンバが第1のパネルの内表面と第2のパネルの内表面とにより画定され、双方のパネルとも透明であり、及び前記チャンバが、前記パネルの前記内表面の間に延在する既知の、又は特定可能な高さであって、前記試料中の少なくとも1個の赤血球が前記内表面の双方に接触するような高さを有する、ステップと、
赤血球のうち双方の内表面と接触している部分と、双方の内表面と接触していない部分とを含め、前記内表面に接触している前記少なくとも1個の赤血球を撮像するステップと、
前記赤血球のうち双方の内表面と接触している部分の光学濃度と、前記双方の内表面と接触していない部分の光学濃度とを、画像ユニット毎ベースで決定するステップと、
前記撮像された赤血球のうち双方の内表面に接触している部分の容積を、当該の部分について決定された画像ユニット毎の前記光学濃度を用いて決定するステップと、
前記撮像された赤血球のうち双方の内表面と接触していない部分の容積を、当該の部分について決定された画像ユニット毎の前記光学濃度と、前記双方の表面と接触している部分について決定された画像ユニット毎の前記光学濃度とを用いて決定するステップと、
前記撮像された赤血球のうち双方の内表面に接触している部分について決定された前記容積と、前記撮像された赤血球のうち双方の内表面と接触していない部分について決定された前記容積とを用いて、前記少なくとも1個の赤血球の細胞容積を決定するステップと、
を含む、方法。 - 双方の内表面と接触している複数の赤血球の細胞容積を決定するステップと、
前記複数の赤血球の各々について決定された前記細胞容積を用いて、平均赤血球容積を決定するステップと、
を含む、請求項5に記載の方法。 - 前記試料全体が撮像される、請求項5に記載の方法。
- 等積球形化剤を前記試料の少なくとも一部分と混和するステップをさらに含む、請求項5に記載の方法。
- 前記等積球形化剤が両性イオン界面活性剤である、請求項8に記載の方法。
- 前記パネルの前記内表面が実質的に平行であり、前記チャンバ高さが、ヘモグロビン濃度の決定前に既知である、請求項5に記載の方法。
- 前記チャンバ高さが約2μm〜6μmの範囲内である、請求項10に記載の方法。
- 前記試料中の複数の赤血球であって、各々が双方の内表面と接触している部分を有する赤血球を撮像するステップと、
各赤血球について、当該の赤血球のうち双方の内表面と接触している部分の光学濃度を画像ユニット毎ベースで決定するステップと、
前記複数の赤血球の各々のうち双方の内表面と接触している部分について決定された前記光学濃度を用いて、平均最大光学濃度を決定するステップと、
をさらに含む、請求項5に記載の方法。 - 双方の内表面と接触していない1つ又は複数の赤血球を撮像するステップと、
前記双方の内表面と接触していない赤血球の光学濃度を決定するステップと、
前記双方の内表面と接触していない1つ又は複数の赤血球について、当該の赤血球の前記光学濃度と、前記決定された平均最大光学濃度と、前記チャンバの高さとを用いて細胞容積を決定するステップと、
をさらに含む、請求項12に記載の方法。 - 前記試料が、等積球形化剤と混和された第1の部分と、前記等積球形化剤を含まない第2の部分とを有する、請求項13に記載の方法。
- 前記双方の内表面と接触していない1つ又は複数の赤血球の少なくとも一部が、前記試料の前記第2の部分内に存在し、前記第2の部分内にある前記双方の内表面と接触していない1つ又は複数の赤血球の少なくとも1つについての不変の形態を決定するステップをさらに含む、請求項14に記載の方法。
- 双方の内表面と接触していない少なくとも1個の赤血球を撮像するステップと、
前記双方の内表面と接触していない赤血球の光学濃度を決定するステップと、
前記双方の内表面と接触している赤血球について決定された前記平均光学濃度を用いて、前記双方の内表面と接触していない赤血球のヘモグロビン濃度を決定するステップと、
をさらに含む、請求項12に記載の方法。 - 超生体染色色素を前記試料と混和するステップをさらに含み、前記色素は、1つ又は複数の所定波長の光で励起すると、前記試料中の網赤血球内のレチクリンに蛍光を発生させるように機能する、請求項5に記載の方法。
- 1つ又は複数の蛍光を発する網赤血球中のレチクリンの相対量を決定するステップをさらに含む、請求項17に記載の方法。
- 複数の赤血球であって、少なくとも一部分が前記内表面に接触しているかかる赤血球の各々を撮像するステップであって、前記撮像が、赤血球中に含まれるヘモグロビンによって吸収される光を用いて実施される、ステップと、
試料中の網赤血球内に含まれるレチクリンに蛍光を発生させるように機能する所定波長で前記複数の赤血球を撮像するステップと、
前記複数の赤血球の各々の細胞容積を決定するステップと、
前記複数の赤血球の各々の前記細胞容積を用いて、平均赤血球容積を決定するステップであって、蛍光を発する各赤血球の細胞容積が前記平均赤血球容積から除かれる、ステップと、
をさらに含む、請求項17に記載の方法。 - 前記撮像するステップが1つ又は複数の所定波長で実施され、前記ヘモグロビン濃度を決定するステップが、前記1つ又は複数の所定波長に対するヘモグロビンのモル吸収係数を利用する、請求項5に記載の方法。
- 前記赤血球のうち双方の内表面と接触している部分について決定された前記光学濃度を用いて、前記赤血球のヘモグロビン濃度を決定するステップと、
前記ヘモグロビン濃度と前記細胞容積とを用いて、前記赤血球中のヘモグロビン含有量を決定するステップと、
をさらに含む、請求項5に記載の方法。 - 複数の赤血球であって、各々が双方の内表面と接触している部分を有する赤血球中のヘモグロビン含有量を決定するステップと、
前記複数の赤血球の各々について決定された前記ヘモグロビン含有量を用いて、平均ヘモグロビン含有量を決定するステップと、
をさらに含む、請求項21に記載の方法。 - 前記血液試料が実質的に無希釈である、請求項5に記載の方法。
- 前記血液試料が全血である、請求項5に記載の方法。
- 前記画像ユニットが画素である、請求項5に記載の方法。
- 実質的に無希釈の血液試料中の少なくとも1個の赤血球の細胞容積を決定するための装置であって、
被分析試料を静止状態に保つように構成された分析チャンバであって、前記チャンバが第1のパネルの内表面と第2のパネルの内表面とにより画定され、双方のパネルとも透明であり、及び前記チャンバが、前記パネルの前記内表面の間に延在する既知の、又は特定可能な高さであって、少なくとも1個の赤血球が前記内表面の双方に接触するような高さを有する、チャンバと、
照明器と解像装置とを含む撮像ユニットであって、前記内表面に接触している少なくとも1個の赤血球を撮像し、かかる撮像された赤血球のそれぞれの画像信号を生成するように機能するユニットと、
前記画像信号を用いて、前記双方の内表面に接触している赤血球の平均光学濃度と前記赤血球の全光学濃度とを決定し、前記平均光学濃度と、前記全光学濃度と、前記チャンバの高さとを用いて、前記撮像された赤血球の容積を決定するように構成されたプログラム可能分析器と、
を含む、装置。 - 血液試料中の赤血球の細胞容積を決定するための方法であって、
被分析試料を静止状態に保つように構成された分析チャンバに前記試料を入れるステップであって、前記チャンバが第1のパネルの内表面と第2のパネルの内表面とにより画定され、及び前記チャンバが、前記パネルの前記内表面の間に延在する既知の、又は特定可能な高さを有する、ステップと、
前記内表面に接触している少なくとも1個の赤血球又は少なくとも1つの赤血球集団を撮像して画像信号を生成するステップと、
前記赤血球又は赤血球集団のうち双方の内表面と接触している部分の光学濃度を決定するステップと、
目標の赤血球の全光学濃度を画像ユニット毎ベースで決定するステップと、
前記決定された光学濃度と、前記全光学濃度と、前記チャンバの高さとを用いて、前記目標の赤血球の容積を決定するステップと、
を含む、方法。 - 血液試料中の赤血球の細胞容積を決定するための方法であって、
前記試料中の少なくとも1個の赤血球又は少なくとも1つの赤血球集団を撮像するステップであって、前記試料が分析チャンバ内に配置され、前記チャンバが、内表面の間に延在する既知の、又は特定可能な高さであって、前記試料中の少なくとも1個の赤血球又は少なくとも1つの赤血球集団が前記内表面の双方に接触するような高さを有する、ステップと、
前記撮像された赤血球又は赤血球集団の少なくとも一部分の光学濃度を決定するステップと、
前記決定された光学濃度と前記チャンバの高さとを用いて、前記赤血球の容積を決定するステップと、
を含む、方法。
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